Bir Fare Modelinde Seyrek Sistometri Uygulamasının Değerlendirilmesi

Bu mikrocerrahi prosedürün genel amacı, idrar kesesine intravezikal bir tüp implante etmek ve uyanık bir farede alt idrar yolu fonksiyonunu kaydetmektir. Bu yöntem, uyanık sistometriden tekrarlanabilir deneysel verilerin elde edilmesine ve sağlıklı ve hastalıklı fare modellerinde mesane fonksiyonunun test edilmesine yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel amacı, bir fare modelinde dolgu sistometrisi yapmak için deneysel verilere dayalı standart bir yöntem sağlamaktır.

Tüpü implantasyona hazırlamak için, önce yedi santimetrelik bir pe10 boru parçasını kesin ve bir parlama oluşturmak için bir ucunu yavaşça açık bir aleve doğru ilerletin, parlama gelişir gelişmez tüpü hızla geri çekin. Ardından, tüpün genişletilmiş ucundan 4,5, 5 ve 5,5 santimetre uzakta üç damla çok amaçlı sıcak tutkal uygulamak için bir tutkal tabancasındaki düşük ısı ayarını kullanın. Tutkal kabarcıklarındaki düzensizlikleri düzeltmek için makas kullanın.

İmplante edildikten sonra pe10 borusunu tıkamak için kullanılacak olan 30 gauge iğnenin bir ucuna sıcak tutkal uygulayın. Ardından, ayak parmağını çimdiklemeye yanıt verilmediğini onaylayın ve hayvanın gözlerine merhem sürün. Üst sırt ve alt karın bölgesini alkol ve betadin ile sterilize ettikten sonra, kafa derisi arasında 1,5 santimetrelik bir kesi yapın ve hayvanı, diseksiyon mikroskobu altında steril örtülerle kaplı 37 santigrat derecelik bir ısıtma yastığının üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin.

Şimdi 1,5 santimetre daha düşük orta hat karın derisi kesisi yapın. Ardından, idrar kesesinin kubbesini ve üst yarısını ortaya çıkarmak için linea alba ve kas boyunca fasya boyunca eşleşen bir kesi yapılır. Karın iç organlarını ılık fizyolojik tuzlu su ile nemli tutarak, ense kısmındaki kesiğe erişmek için hayvanı yan yatırın.

Sırtta deri altı bir kanal başlatmak ve hayvanın yan tarafı boyunca devam etmek için dar bir hemostatı insizyondan deri altından itin. Aletin ucu göğüs kafesinin dibine ulaştığında, ucu karnın iç kısmındaki orta hatta doğru çevirin ve kas tabakasının altındaki karın kesisinde uç ortaya çıkana kadar kanama durdurucuyu ilerletmeye devam edin. Hemostat ucu insizyonun içine girdikten sonra, cildi omzun üzerine sıkıştırın ve alet ucu karın insizyonunda görülene kadar hayvanı stabilize etmeye yardımcı olmak için çekiş uygulayın.

Şimdi kanama durdurucuyu tüpün alevlenmemiş ucunu kavramak için kullanın ve kanama durdurucuyu yavaşça geri çekin, tüpün ucunu boynun arkasındaki kesikten dışarı çekin ve borunun genişlemiş ucunu doğrudan mesanenin kubbesinin üzerinde olacak şekilde ayarlayın. Mesaneyi küçük bir tüy bırakmayan doku rulosu ile stabilize edin. Mesane kubbesinin üzerine gevşek bağlanmış, emilmeyen 6-O monofilament sütür yerleştirin.

Baskın olmayan eli ve Dumont yedi numaralı kavisli mikro forsepsleri kullanarak, mesanenin kubbesini kavrayın ve kubbe tepesinde bir sistotomi yapmak için baskın elde 21 gauge iğne kullanın. Kateterin delikten kolayca geçebildiğinden emin olmak için sistotomiyi kapalı bir çift beş numara kavisli mikro forseps ile nazikçe inceleyin ve pe10 kateterinin genişlemiş ucunu mesaneye yerleştirin, böylece parlamayı mesane boynuna doğru itin, böylece sabitlenirken kaymaz. Monofilament bağ borunun önüne yerleştirildiğinde, mesane kapasitesinin yapay olarak azaltılmasını önlemek için 6-O sütürü mesanenin kubbesi ve hortumu mesane üzerinde mümkün olduğunca yükseğe sıkın.

Alternatif olarak, mesanenin kubbesine gevşek bir çanta ipi sütürü yerleştirin, az önce gösterildiği gibi bir sistotomi yapın ve kateterin genişlemiş ucunu deliğe yerleştirin. Daha sonra dikişi, düz sütür için gösterildiği gibi kubbenin ve borunun etrafına bağlayın. Her iki durumda da, mesane duvarında büyük bir yaralanmaya neden olmadan hortumu sabitlemeye özen gösterin.

Çok fazla doku alınırsa mesane kapasitesi azalacaktır. Çok az alınırsa, bağlantı sızacaktır. Tüpün mesanedeki sızdırmazlığını ve konumunu test etmek için, tüpün distal ucuna 30 gauge iğne ile donatılmış 0,5 mililitrelik bir insülin şırıngası takın ve mesaneyi 0,1 ila 0,2 mililitre% 0,9 sodyum klorür ile yavaşça doldurun

Conta eksikse, mesanenin etrafına dikiş kuyrukları sürün ve geri dönün. Sonra mesaneyi aspirasyon ile boşaltın. Kubbede herhangi bir sızıntı olmazsa, mesaneyi bir çift kavisli mikro forseps ile destekleyin ve parlama mesane kubbesinin içine dayanana kadar boruyu yavaşça çekin.

Daha önce açıklanan yöntemi kullanarak contayı yeniden test edin. Sütürün kuyruklarını kesin, doku rulosunu çıkarın ve mesaneyi normal konumuna getirin. Daha sonra karın duvarını iki kat halinde kapatmak için çalışan bir 6-O sütür kullanın.

Ve hayvanı nazikçe karnına doğru döndürün. Metal ankrajın deri altı kısmını intraskopüler insizyona yerleştirin ve tüpü ve ankrajı dikey bir şilte sütürü ile sabitlemek için 6-O monofilament kullanın. Tüpün dışarı çekilmesini önlemek için cildin üstünde ve altında bir tutkal kabarcığı kaldığını onaylayın ve tüpü cildin yaklaşık iki santimetre yukarısından kesin.

Ardından, idrarın dışarı sızmasını önlemek için tüpün ucuna yavaşça 30 gauge bir tapa sokun. Okumayı gerçekleştirmeden önce, infüzyon pompasını, basınç dönüştürücüsünü ve 50 gauge fırdöndüyü bağlamak için pe22 hortumunu kullanın. Daha sonra anestezi uygulanmış deney hayvanını yüzüstü pozisyona getirin ve 30 gauge fişi çıkarın.

Ipi ankraja bağlayın, mesane kateterini pe50'nin ucuna kaydırın ve su geçirmez bir sızdırmazlık oluşturmak için sıcak tutkal kullanın. Fareyi tel zemine yerleştirin. Ve kayda başlayın.

Daha sonra hayvan anesteziden kurtulduğunda ve mesane basıncı stabilize olduğunda, saatte 0,6 mililitre oranında% 0,9 sodyum klorür infüze etmeye başlayın. Tipik olarak, kateter yerleştirilmesinden sonraki ikinci günde, mesanenin enine kesitinin yarısını kaplayan ve lümenin tıkanmasına yol açan ciddi submukozal şişlik gelişir. Beşinci günde, ödem tamamen çözülür ve submukozal alanları, muskularisi kısmen istila eden enflamatuar hücrelerle sızmış halde bırakır.

İkinci ve üçüncü günlerde gözlenen doku şişmesinin en büyük boyutu, bu zaman noktalarında önemli ölçüde bozulmuş bir mesane fonksiyonu gösteren hayvanlarla karşılık gelen davranışsal işeme ile ilişkilidir. Histolojik verilerden beklendiği gibi, işeme sıklığı ameliyat sonrası beşinci günde normale döner. Minimum hareket artefaktları olan uyanık, serbestçe hareket eden bir hayvanda intravezikal basınç, değişmeden kalabilen veya doldurma döngüsü sırasında 10 santimetreden fazla su ile kademeli olarak artamayan 10 ila 15 santimetrelik bir temel basınç ile karakterize edilir.

Bunu işeme sırasında ani bir darbe tarzı basınç artışı ve düşüşü izler. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa 30 dakika içinde tamamlanabilir. Bu prosedürü denerken, dokunun fizyolojisini korumak için mesaneye verilen hasarı en aza indirmeyi unutmamak önemlidir.

Bu prosedürü takiben, fonksiyonel mesane kapasitesi ile ilgili ek soruları yanıtlamak için tek döngü dolgu sistometrisi gibi diğer yöntemler uygulanabilir. Bu videoyu izledikten sonra, idrar kesesine mikrocerrahi olarak bir tüpün nasıl implante edileceğini ve farelerde alt üriner sistem fonksiyonunu değerlendirmek için uyanık dolgu sistometinin nasıl kullanılacağını iyi anlamış olmalısınız.