Name: Bitkisel Tıbbın Hazırlanması: Er-Xian Kaynatma ve Er-Xian içeren Serum In vitro Deneyler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-31T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 7 s
Description: Keşfedin Er-Xian kaynatma hazırlama protokolünü kemik biyolojisi ve osteogenez araştırmaları için. Bu standart yöntem, geleneksel Çin bitkisel ilacının in vivo ve in vitro uygulamalarında tutarlı sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81573992) tarafından desteklenmiştir. Dil düzenleme yardımı için Emily K. Lo ve Kathleen DiNapoli&#39;ye teşekkür ediyoruz.

Protokol, Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı&#39;nın hayvan bakım rehberlerini takip eder ve hayvan deneyleri Şanghay Hayvan Etik Komitesi tarafından onaylanır. 1. Protokol I: EXD&#39;nin hazırlanması <ol><li> Hesaplama <ol><li> EXD&#39;yi 10 altı aylık bayan Baskı Kontrol Bölgesi (ICR) farelerine (0.02 kg / fare), haftada 5 gün 12 hafta süreyle uygulayan bir tedavi grubuna uygulayın. NOT: Toplam 1.702 EXD&#39;ye ihtiyaç vardır. EXD&#39;ler ayrı artışlarla ölçülür, çünkü gerçek uygulamada 2 EXD uygulayın. </li><li> Fare başına uygulanan EXD hacmini hesaplayın ( yani, V = (0.1418 EXD / kg • gün) * (0.02 kg / fare) * 50 mL / EXD = 0.14 mL / fare • gün. </li></ol></li><li> Islatma <ol><li> İki EXD&#39;nin ( örneğin Curculigo orchioides Gaertn (18 g), Herbaa Epimedi (18 g), Radix Morindae Officinalis&#39;in (18 g), RAdix Angelicae Sinensis (18 g), Cortex Phellodendri (12 g) ve Rhizoma Anemarrhenae (12 g), toplam 96 g) bir kapaklı bir kaba koydu. NOT: Seramik bir kap tavsiye edilir. </li><li> Çiğ otları 500 mL damıtılmış su ile 1 saat süreyle macerante edin; Su otları bir inç kadar kaplamalıdır. Tüm otları iyice ıslatın. </li></ol></li><li> İlk suda kaynatma <ol><li> Otlar, su kaynarcaya kadar yüksek sıcaklıkta bir gaz ocağı veya bir indüksiyon ocağı kullanarak ısıtın (yaklaşık 5 - 10 dakika, süre, ısıtma gücüne, kaba ve otların miktarı ve suya bağlıdır). Gücü 2 saat daha düşük bir kaynatma değere çevirin. </li></ol></li><li> İlk filtrasyon <ol><li> Normal filtre kağıdıyla veya gazlı bezle ve pamuklu, 500 mL&#39;lik cam bir behere koyun. Dikkatli bir şekilde, kaynatmayı filtre vasıtasıyla behergöre dökün. Şifalı bitkiler kabın içinde bırakın. </li><li> Geri kalan bitki kalıntılarını geri getirin oFiltre kağıdını kaba koyun. </li></ol></li><li> İkinci suda kaynatma <ol><li> Otlarla birlikte kaba damıtılmış su ekleyin; Otları bir inç kadar kapağı olsun. </li><li> Adım 1.3&#39;ü tekrarlayın. </li></ol></li><li> İkinci filtrasyon <ol><li> 1.4.1 ve 1.4.2 adımlarını tekrarlayın. </li><li> İkinci kaynatmayı aynı behere dökün. Birinci ve ikinci dekatikleri birlikte karıştırın. </li></ol></li><li> konsantrasyon <ol><li> Beferleri asbest içermeyen tel gazlı bezli bir gaz ocağının üzerine koyun, kaynatıp düşük bir kaynatmayla ısıtın ve yavaşça ve bir cam çubukla karıştırın. </li><li> Yoğuşma 200 mL&#39;ye düştüğünde, 500 mL&#39;lik bir behere aktarın. </li><li> Yıkama 100 mL&#39;ye düşene kadar adım 1.7.1&#39;i tekrarlayın. </li></ol></li><li> Depolama ve yönetim <ol><li> Konsantre kaynatmayı steril bir cam şişeye aktarın. Oda sıcaklığına kadar soğutunYeniden (RT). Bir hafta içinde kullanıyorsanız 4 ° C&#39;de veya uzun süre depolamada -70 ° C&#39;de saklayın. </li><li> Bir tenteli iğne kullanarak, ovarektomize (OVX) farelere günde bir kez, 12 hafta boyunca haftanın 5 günü, 0.14 mL / fare eksiltme uygulayın. </li></ol></li></ol> 2. Protokol II: EXD-içeren Serumun Hazırlanması <ol><li> Hesaplama <ol><li> Her sıçanın vücut ağırlığı (1 aylık) olarak 0.15 kg kullanarak sıçan eşdeğer dozunu (RED) hesaplayın: dB = (1/60) * (90/100) * (60 / 0.15) 1/3 = 0.111 EXD / kg / gün. NOT: 100 mL kültür ortamı (% 10 EXD içeren serum) hazırlamak için toplam 10 mL EXD içeren serum gereklidir. Her sıçandan 2 mL serum sağlaması bekleniyor. Böylece, 6 sıçan (% 20&#39;lik bir kayıp dikkate alınır), 3 gün boyunca günde bir kez EXD uygulaması için gereklidir. EXD sayısı: (0.111 EXD / kg • gün) * (0.15 kg / sıçan) * (6 sıçan) * (3 gün) = 0.300 EXD. Yine, EXD&#39;ler ayrı artışlarla ölçülür,1 EXD kullanın. </li><li> Sıçan başına uygulanan EXD hacmini hesaplayın ( yani, V = (0.111 EXD / kg • gün) * (0.15 kg / sıçan) * (50 mL / EXD) = 0.83 mL / sıçan • gün. </li></ol></li><li> Islatma <ol><li> 1 EXD&#39;ye ait hammaddeleri kapaklı bir kaba koyun. Çiğ otları damıtılmış suda 1 saat maceratlayın; Su otları bir inç kadar kaplamalıdır. Tüm otları iyice ıslatın. </li></ol></li><li> İlk suda kaynatma <ol><li> Otlar, yüksek kaynaklarda kaynar su gelene kadar indüksiyon ocağı kullanarak ısıtın (yaklaşık 5 - 10 dakika; süre, ısı gücüne, konteynere ve otlar ile suyun miktarına bağlıdır). Gücü 2 saat daha düşük bir kaynatma noktasına getirin. </li></ol></li><li> İlk filtrasyon <ol><li> Normal filtre kağıdıyla veya gazlı bezle ve pamuklu, 500 mL&#39;lik cam bir behere koyun. Dikkatli bir şekilde, kaynatmayı filtre vasıtasıyla behergöre dökün. Şifalı bitkiler kabın içinde bırakın. </li><li&gt; Filtre kağıdındaki bitki kalıntılarını kaba geri koyun. </li></ol></li><li> İkinci suda kaynatma <ol><li> Otlarla birlikte kaba damıtılmış su ekleyin; Otları bir inç kadar kapağı olsun. </li><li> Adım 2.4&#39;ü tekrarlayın. </li></ol></li><li> İkinci filtrasyon <ol><li> 2.5.1 ve 2.5.2 adımlarını tekrarlayın. </li><li> İkinci sıkma işlemini, adım 2.4.1&#39;deki gibi aynı behça boşaltın ve birinci ve ikinci dekatikleri birlikte karıştırın. </li></ol></li><li> konsantrasyon <ol><li> Asfalt içermeyen tel gazlı bezli bir gaz ocağı üzerine beheri koyun, kaynatmayı düşük bir kaynatmayla ısıtın ve yavaşça ve bir cam çubukla karıştırın. </li><li> Yoğuşma 100 mL&#39;ye düştüğünde, 100 mL&#39;lik bir behere aktarın. </li><li> Yıkama 50 mL&#39;ye düşene kadar adım 2.7.1&#39;i tekrarlayın. </li></ol></li><li> Depolama ve yönetim <ol><li> Konsantre kaynatmayı sterilizeIle cam şişe. Oda sıcaklığına soğumasını bekleyin. Bir hafta içinde kullanıyorsanız 4 ° C&#39;de veya uzun süre depolamada -70 ° C&#39;de saklayın. </li><li> Intragastional olarak 0.83 mL / sıçan günde bir kez 3 gün boyunca uygulayın. </li></ol></li><li> EXD içeren serum preparatı <ol><li> Farelerin son uygulanmasından 1 saat sonra intraperitonal olarak 300 mL / 100 g 80 mg / kg ketamin ve 10 mg / kg xylazin enjekte ederek anestezi uygulayın. Çimdikleme ile doğru anestezi doğrulayın. </li><li> Sıçanın cildi ve peritonunu, karın bölgesinden göğüs dibine bir bistül (veya düz ameliyat makası) kullanarak incise edin. Sırasıyla yaklaşık 5 cm ve 0.5 cm&#39;lik bir uzunluk ve derinlik kesiği oluşturun. Doku kağıdı kullanarak karın iç organını sola doğru hareket ettirin. </li><li> Doku kağıdı kullanarak, damarı açıkça ortaya çıkarmak için karın aortunun bağ dokusunu çıkarın. </li><li> Karbon aortundan, 10 mL&#39;lik, 22 ölçüslü bir şırınga kullanarak kanı yavaşça çekin. Şuraya aktar:İğneyi çıkardıktan sonra 15 mL&#39;lik steril bir tüp; Bir fare 8-10 mL kan üretebilir. NOT: Kan çizimine başlanırken ve çizim tamamlandıktan sonra ölü olan sıçan canlı olmalıdır ( yani, abdominal aort titreşirken). </li><li> Oda RT&#39;da 30 - 60 dakika boyunca dik bir konumda kan pıhtılaştırın. 500-600 xg&#39;de 20 dakika boyunca santrifüjleyin. Tüm süpernatanı (serum) dikkatli bir şekilde bir 50 mL steril tüp içine yerleştirin ve tüm serumu (farklı hayvanlardan) karıştırın. </li><li> Serumu 56 ° C&#39;lik bir su banyosunda 30 dakika inkübe ederek ısı inaktivasyonu yapın. Serumu, 0.22 um gözenek boyutlu bir hidrofil polietersülfon membranlı bir şırınga filtresi kullanarak filtreleyin. Serumu taze veya -20 ° C&#39;de saklayın. </li></ol></li><li> Kontrollü ilaç içeren serum preparatı (kontrol grubunda kullanılır) <ol><li> Her bir fare günde bir kez aynı miktarda tuzlu su (0.83 mL) ile 3 gün süre ile idare edilir. Diğer adımlar adım 2.9&#39;daki ile aynıdır.</li></ol></li><li> Uygulama <ol><li> Her 100 ml&#39;lik orta ve artı% 1 penisilin-streptomisin (PS) 23&#39;e 10 mL EXD içeren serum veya ilaç içeren serum ekleyin. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Zhang, L. G., Ouyang, X. W., Wu, T. T., Ni, L. J., Shi, W. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+evaluation+of+in+vitro+effects+and+interactions+of+active+fractions+in+a+Chinese+medicinal+formula+%28Yaotongning+Capsule%29+on+rat+chondrocytes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ethnopharmacol%22%5BJournal%5D)">Quantitative evaluation of in vitro effects and interactions of active fractions in a Chinese medicinal formula (Yaotongning Capsule) on rat chondrocytes.</a> J Ethnopharmacol. 155 (3), 1424-1432 (2014).</li>
<li>Ogawa, Y., Fujii, Y., Sugiyama, R., Konishi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+seven+crude+drug+components+in+the+sleep-promoting+effect+of+Yokukansan%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ethnopharmacol%22%5BJournal%5D)">The role of the seven crude drug components in the sleep-promoting effect of Yokukansan.</a> J Ethnopharmacol. 177, 19-27 (2016).</li>
<li>Kim, J. H., Doh, E. J., Lee, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+Medicinal+Categorization+of+Atractylodes+japonica+Koidz.+by+Using+Internal+Transcribed+Spacer+Sequencing+Analysis+and+HPLC+Fingerprinting+Combined+with+Statistical+Tools%5BTitle%5D)+AND+%22Evid+Based+Complement+Alternat+Med%22%5BJournal%5D)">Evaluation of Medicinal Categorization of Atractylodes japonica Koidz. by Using Internal Transcribed Spacer Sequencing Analysis and HPLC Fingerprinting Combined with Statistical Tools.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2016, 2926819(2016).</li>
<li>Sheridan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+of+metabolic+fingerprinting+as+a+tool+for+the+modernisation+of+TCM+preparations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ethnopharmacol%22%5BJournal%5D)">The potential of metabolic fingerprinting as a tool for the modernisation of TCM preparations.</a> J Ethnopharmacol. 140 (3), 482-491 (2012).</li>
<li>Planas, G. M., Kucacute, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17744732">Contraceptive Properties of Stevia rebaudiana.</a> Science. 162 (3857), 1007(1968).</li>
<li>Tashino, S. "Serum pharmacology" and "serum pharmaceutical chemistry": from pharmacology of Chinese traditional medicines to start a new measurement of drug concentration in blood. Ther Drug Monit Res. 5, 54-64 (1988).</li>
<li>Cao, Y., Liu, F., Huang, Z., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+Guanxin+Shutong+capsule+drug-containing+serum+on+tumor+necrosis+factor-alpha-induced+endothelial+dysfunction+through+nicotinamide+adenine+dinucleotide+phosphate+oxidase+and+the+nitric+oxide+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Ther+Med%22%5BJournal%5D)">Protective effects of Guanxin Shutong capsule drug-containing serum on tumor necrosis factor-alpha-induced endothelial dysfunction through nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase and the nitric oxide pathway.</a> Exp Ther Med. 8 (3), 998-1004 (2014).</li>
<li>Fu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+Vivo+Stromal+Cell-Derived+Factor+1-Mediated+Differentiation+of+Mouse+Bone+Marrow+Mesenchymal+Stem+Cells+into+Hepatocytes+Is+Enhanced+by+Chinese+Medicine+Yiguanjian+Drug-Containing+Serum%5BTitle%5D)+AND+%22Evid+Based+Complement+Alternat+Med%22%5BJournal%5D)">Ex Vivo Stromal Cell-Derived Factor 1-Mediated Differentiation of Mouse Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells into Hepatocytes Is Enhanced by Chinese Medicine Yiguanjian Drug-Containing Serum.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2016, 7380439(2016).</li>
<li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+serum+pharmacology+in+evaluating+the+antitumor+effect+of+Fuzheng+Yiliu+Decoction+from+Chinese+Medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Chin+J+Integr+Med%22%5BJournal%5D)">Application of serum pharmacology in evaluating the antitumor effect of Fuzheng Yiliu Decoction from Chinese Medicine.</a> Chin J Integr Med. 20 (6), 450-455 (2014).</li>
<li>Sze, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mechanism%3A+Erxian+Decoction%2C+a+Chinese+medicine+formula%2C+for+relieving+menopausal+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ethnopharmacol%22%5BJournal%5D)">A novel mechanism: Erxian Decoction, a Chinese medicine formula, for relieving menopausal syndrome.</a> J Ethnopharmacol. 123 (1), 27-33 (2009).</li>
<li>Sze, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Erxian+decoction%2C+a+Chinese+medicinal+formulation%2C+on+serum+lipid+profile+in+a+rat+model+of+menopause%5BTitle%5D)+AND+%22Chin+Med%22%5BJournal%5D)">Effects of Erxian decoction, a Chinese medicinal formulation, on serum lipid profile in a rat model of menopause.</a> Chin Med. 6, 40(2011).</li>
<li>Zhong, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+randomized%2C+double-blind%2C+controlled+trial+of+a+Chinese+herbal+formula+%28Er-Xian+decoction%29+for+menopausal+symptoms+in+Hong+Kong+perimenopausal+women%5BTitle%5D)+AND+%22Menopause%22%5BJournal%5D)">A randomized, double-blind, controlled trial of a Chinese herbal formula (Er-Xian decoction) for menopausal symptoms in Hong Kong perimenopausal women.</a> Menopause. 20 (7), 767-776 (2013).</li>
<li>Wang, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Steroidogenic+effect+of+Erxian+decoction+for+relieving+menopause+via+the+p-Akt%2FPKB+pathway+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ethnopharmacol%22%5BJournal%5D)">Steroidogenic effect of Erxian decoction for relieving menopause via the p-Akt/PKB pathway in vitro and in vivo.</a> J Ethnopharmacol. , (2016).</li>
<li>Lin, L., Wu, S., Tang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%5BClinical+observation+and+experimental+study+of+the+treatment+of+aplastic+anemia+by+warming+and+tonifying+the+spleen+and+kidney%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Zhong+Xi+Yi+Jie+He+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">[Clinical observation and experimental study of the treatment of aplastic anemia by warming and tonifying the spleen and kidney].</a> Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 10 (5), 272-274 (1990).</li>
<li>Nian, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiosteoporotic+activity+of+Er-Xian+Decoction%2C+a+traditional+Chinese+herbal+formula%2C+in+ovariectomized+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ethnopharmacol%22%5BJournal%5D)">Antiosteoporotic activity of Er-Xian Decoction, a traditional Chinese herbal formula, in ovariectomized rats.</a> J Ethnopharmacol. 108 (1), 96-102 (2006).</li>
<li>Qin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiosteoporotic+chemical+constituents+from+Er-Xian+Decoction%2C+a+traditional+Chinese+herbal+formula%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ethnopharmacol%22%5BJournal%5D)">Antiosteoporotic chemical constituents from Er-Xian Decoction, a traditional Chinese herbal formula.</a> J Ethnopharmacol. 118 (2), 271-279 (2008).</li>
<li>Xue, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+HNMR-based+metabonomics+study+of+postmenopausal+osteoporosis+and+intervention+effects+of+Er-Xian+Decoction+in+ovariectomized+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">A HNMR-based metabonomics study of postmenopausal osteoporosis and intervention effects of Er-Xian Decoction in ovariectomized rats.</a> Int J Mol Sci. 12 (11), 7635-7651 (2011).</li>
<li>Lu, X. N., Xu, X. R., Lin, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%5BClinical+observation+of+bushen+er%27xian+decoction+in+treating+premature+ovarian+failure%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Zhongguo+Zhong+Xi+Yi+Jie+He+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">[Clinical observation of bushen er'xian decoction in treating premature ovarian failure].</a> Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 28 (7), 594-596 (2008).</li>
<li>Yu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-angiogenic+activity+of+Erxian+Decoction%2C+a+traditional+Chinese+herbal+formula%2C+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Pharm+Bull%22%5BJournal%5D)">Anti-angiogenic activity of Erxian Decoction, a traditional Chinese herbal formula, in zebrafish.</a> Biol Pharm Bull. 35 (12), 2119-2127 (2012).</li>
<li>Chu, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+in+vitro+and+in+vivo+investigation+of+the+antimetastatic+effects+of+a+Chinese+medicinal+decoction%2C+erxian+decoction%2C+on+human+ovarian+cancer+models%5BTitle%5D)+AND+%22Integr+Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">An in vitro and in vivo investigation of the antimetastatic effects of a Chinese medicinal decoction, erxian decoction, on human ovarian cancer models.</a> Integr Cancer Ther. 12 (4), 336-346 (2013).</li>
<li>Zhu, Z., Li, L., Jin, X., Fang, J., Zhang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Er-Xian+Decoction%2C+a+traditional+Chinese+herbal+formula%2C+intervening+early+in+hypothalamic-pituitary+axis+of+male+rats+with+delayed+puberty%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogn+Mag%22%5BJournal%5D)">Er-Xian Decoction, a traditional Chinese herbal formula, intervening early in hypothalamic-pituitary axis of male rats with delayed puberty.</a> Pharmacogn Mag. 10 (40), 517-521 (2014).</li>
<li>Miao, M. S. Experimental animals and technology. 1997, Chinese Modical Publisher. Beijing. 145(1997).</li>
<li>Soleimani, M., Nadri, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+protocol+for+isolation+and+culture+of+mesenchymal+stem+cells+from+mouse+bone+marrow%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">A protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse bone marrow.</a> Nat Protoc. 4 (1), 102-106 (2009).</li>
<li>Lu, S., Huang, J., Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Er-Xian+Decoction+Stimulates+Osteoblastic+Differentiation+of+Bone+Mesenchymal+Stem+Cells+in+Ovariectomized+Mice+and+Its+Gene+Profile+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+International%22%5BJournal%5D)">Er-Xian Decoction Stimulates Osteoblastic Differentiation of Bone Mesenchymal Stem Cells in Ovariectomized Mice and Its Gene Profile Analysis.</a> Stem Cells International. 2016, 4079210(2016).</li>
<li>Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Administration+of+substances+to+laboratory+animals%3A+routes+of+administration+and+factors+to+consider%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (5), 600-613 (2011).</li>
<li>Wu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+seven+flavonoids+in+dog+plasma+by+ultra-performance+liquid+chromatography-tandem+mass+spectrometry+and+its+application+to+a+bioequivalence+study+of+bioactive+components+in+Herba+Epimedii+and+Er-Xian+Decoction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Biomed+Anal%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of seven flavonoids in dog plasma by ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry and its application to a bioequivalence study of bioactive components in Herba Epimedii and Er-Xian Decoction.</a> J Pharm Biomed Anal. 54 (1), 186-191 (2011).</li>
<li>Hu, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+the+major+chemical+constituents+and+their+metabolites+in+rat+plasma+and+various+organs+after+oral+administration+of+effective+Erxian+Decoction+%28EXD%29+fraction+by+liquid+chromatography-mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Chromatogr%22%5BJournal%5D)">Identification of the major chemical constituents and their metabolites in rat plasma and various organs after oral administration of effective Erxian Decoction (EXD) fraction by liquid chromatography-mass spectrometry.</a> Biomed Chromatogr. 24 (5), 479-489 (2010).</li>
<li>Xue, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+and+interaction+of+icariin%2C+curculigoside%2C+and+berberine+in+er-xian+decoction%2C+a+traditional+chinese+medicinal+formula%2C+on+osteoclastic+bone+resorption%5BTitle%5D)+AND+%22Evid+Based+Complement+Alternat+Med%22%5BJournal%5D)">Effects and interaction of icariin, curculigoside, and berberine in er-xian decoction, a traditional chinese medicinal formula, on osteoclastic bone resorption.</a> Evid Based Complement Alternat Med. , (2012).</li>
<li>Nair, A. B., Jacob, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+practice+guide+for+dose+conversion+between+animals+and+human%5BTitle%5D)+AND+%22J+Basic+Clin+Pharm%22%5BJournal%5D)">A simple practice guide for dose conversion between animals and human.</a> J Basic Clin Pharm. 7 (2), 27-31 (2016).</li>
<li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+the+traditional+Chinese+medicine+xuesaitong+on+intestinal+ischemia-reperfusion+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Clin+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Protective effect of the traditional Chinese medicine xuesaitong on intestinal ischemia-reperfusion injury in rats.</a> Int J Clin Exp Med. 8 (2), 1768-1779 (2015).</li>
<li>Li, Z., Wang, J. On the methods for Chinese herbs serum pharmcology. Zhong Guo Zhong Yi Yao Xing Xi Za Zhi. 9 (2), 5-6 (2002).</li>
<li>Jiang, Y. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+chinese+herbal+drug-containing+serum+for+activating-blood+and+dispelling-toxin+on+ox-LDL-induced+inflammatory+factors%27+expression+in+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Chin+J+Integr+Med%22%5BJournal%5D)">Effect of chinese herbal drug-containing serum for activating-blood and dispelling-toxin on ox-LDL-induced inflammatory factors' expression in endothelial cells.</a> Chin J Integr Med. 18 (1), 30-33 (2012).</li>
<li>Guo, C. Y., Ma, X. J., Liu, Q., Yin, H. J., Shi, D. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%5BEffect+of+Chinese+herbal+drug-containing+serum+for+activating+blood%2C+activating+blood+and+dispelling+toxin+on+TNF-alpha-induced+adherence+between+endothelial+cells+and+neutrophils+and+the+expression+of+MAPK+pathway%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Zhongguo+Zhong+Xi+Yi+Jie+He+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">[Effect of Chinese herbal drug-containing serum for activating blood, activating blood and dispelling toxin on TNF-alpha-induced adherence between endothelial cells and neutrophils and the expression of MAPK pathway].</a> Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 35 (2), 204-209 (2015).</li>
<li>Li, Y., Xia, J. Y., Chen, W., Deng, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Ling+Qi+Juan+Gan+capsule+drug-containing+serum+on+PDGF-induced+proliferation+and+JAK%2FSTAT+signaling+of+HSC-T6+cells%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Zhonghua+Gan+Zang+Bing+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">Effects of Ling Qi Juan Gan capsule drug-containing serum on PDGF-induced proliferation and JAK/STAT signaling of HSC-T6 cells].</a> Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 21 (9), 663-667 (2013).</li>
<li>Li, Y. K. [Some issues in methology of Chinese herbs serum pharmcology]. Zhong Yao Xin Yao Yu Lin Chuang Yao Li. 10 (5), 263(1999).</li>
<li>Zhang, L., et al. [A review of Chinese herbs serum pharmcology methodological study]. Nan Jing Zhong Yi Yao Da Xue Xue Bao. 18 (4), 254(2002).</li>
<li>Zhang, D. [Issues and strategies for study of serum pharmcology in oncology]. Zhong Yi Yan Jiu. 17 (5), 13-14 (2004).</li>
</ol>

Yazarlar, rekabet eden mali çıkarlarının olmadığını beyan ettiler.

Son yıllarda binlerce yıldır Doğu dünyasında klinik ortamda uygulanan alternatif tıp türlerinden biri olan bitkisel ilaçlara daha fazla önem verilmektedir. Modern tıbbın &quot;tezgahdan tezgah&quot; deseninden farklı olarak, geleneksel bitkisel tıbbın ilk önce kendi mekanizmalarını açıklamak için &quot;tezgah yatağı&quot; örneğini gerektirir. Bunu, tezgah aşamasında yapılan doğrulama ve yeni optimize edilmiş ilaçların geliştirilmesi için işleme takip edilebilir. Şu ana kadar, bütün formüllerden veya otlardan aktif bileş...

Çalışmaya ve geleneksel bitkisel tıbbın uygulanmasına olan ilgi günümüzde artmaktadır. Kimyasal maddelerin kesin olduğu modern ilaçların aksine bitkisel formüllerin bilinmeyen bazı bileşenleri vardır ve aktif bileşiklerinin verilmesini sağlamak için ekstraksiyon işlemleri gerektirir. Çoğu araştırma, bütün ot veya bitkisel formülün temsilcisi olarak iyi bilinen bir yapıya sahip küçük bir bileşik seçmeye çalışsa da, ne farmakolojik etkinlikler ne de mekanizmalar eşdeğer 1 , 2 olarak kabul edilemez. Parmak izi kompleks bitkisel formüllerin bileşenlerini analiz etmeyi sağlarken, bazı bileşenler hala net bir şekilde analiz edilmediğinden, çalışma 3 için tüm özütleri birleştirirken bir meydan okumaya neden olur. Çok sayıda bileşenin / ekstraktların etkileşimleri, bitkisel ilaçların terapötik etkilerine aracılık eder. Bu avantajı korumak için, geleneksel ekstrakt form-dekoctİyon hala klinikte yaygın olarak kullanılmaktadır. Ekstrakt prosedürü, terapötik etkinlik üzerinde büyük bir etkiye sahip olduğu için, özellikle in vivo çalışmalar için 4 , 5 için geleneksel su sıkılmasının standart bir protokolü gereklidir. Öte yandan, farmakolojik mekanizmaları araştırırken, in vitro veya ex vivo çalışmalar sırasında bitkisel açma maddelerinin uygulanması da bir mücadeledir. İlaç içeren serumun konsepti ilk kez Tashino tarafından 1988&#39;de 6 önerildi. O zamandan beri, artan sayıda araştırmacı onu bitkisel ilaç 7 , 8 , 9&#39;a uyguladı. İlaç içeren serumun metodu, serumun belli bileşenlerinin etkisi gibi bazı kısıtlamalara sahip olmakla birlikte, fizyolojik koşulları yakından taklit eden bir yöntem olarak kabul edilmektedir. 14 , menopoz osteoporozu 15 , 16 , 17 , prematür over yetmezliği 18 , meme kanseri 19 , yumurtalık kanseri 20 ve ertelenmiş ergenlik 21&#39;in tedavisinde de uygulanmıştır. Burada, er-xian ekstraksiyonunun (EXD) ve ilacı içeren serumun hazırlanması için ayrıntılı protokoller sunuyoruz. Buna ek olarak, fare menopoz osteoporotik modellerine EXD ve EXD içeren serumun uygulanmasını açıklıyoruz. Bir EXD, 9 gr Curculigo orchioides Gaertn , Herbaa Epimedii&#39;den oluşur </eM&gt;, Radix Morindae Officinalis ve Radix Angelicae Sinensis ve her biri yetişkin hasta başına günde 6 g Cortex Phellodendri ve Rhizoma Anemarrhenae . Bir fare için eşdeğer doz, aşağıdaki denklem 22&#39;ye dayanılarak 0.1418 EXD / kg / gün&#39;dür: dB = dA * RB / RA * (WA / WB) 1/3 . DA ve dB, sırasıyla insan ve fare vücut ağırlığı başına doz (mg / kg) anlamına gelir. Dozun mg / kg olarak, EXD / kg sayısı ile değiştirilir. RA ve RB sırasıyla vücut yüzey alanı (m 2 ) / vücut ağırlığı (kg) ile orantılı insan vücut faktörünü ve fare gövde faktörünü temsil eder) 2/3 (Bkz. Tablo 1 ). WA ve WB sırasıyla insan ve fare vücut ağırlığını (kg) gösterir.

<table><tbody><tr><td>Curculigo orchioides Gaertn (9&thinsp; g), Herbaa Epimedii (9&thinsp; g), Radix Morindae Officinalis (9&ince; g), Radix Angelicae Sinensis (9&thinsp; g), Cortex Phellodendri (6&thinsp; g) ve Rhizoma Anemarrhenae (6&thinsp; g)</td> <td>Kang-qiao Çin Tıbbı Yinpian Co. Ltd (Şangay, CN)</td><td>160922</td><td>EXD bileşenleri</td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>GElifesciences</td><td>99-103-952</td><td>Konsantrasyondan önce EXD kaynatma</td></tr><tr><td>filtresini İzinleme Kontrol Bölgesi (ICR) fareleri</td><td>Şangay Laboratuvar Hayvanları Merkezi</td><td>SCXK 2007-0005</td><td>İn vivo çalışma</td></tr><tr><td>Sprague Dawley sıçanları</td><td>Şangay Laboratuvar Hayvanları Merkezi</td><td>SCXK 2007-0005</td><td>EXD içeren serum hazırlığı</td></tr><tr>:<td>Şırınga filtresi</td>, <td>Millipore SLGP033RB</td><td></td><td>0.22 & m</td></tr><tr><td>gavaj iğneleri (10 ml)</td><td>Şangay BO Ge ticaret satış departmanı</td><td>59104274</td><td>EXD</td></tr><tr><td>Ketamin (80 mg / kg) &nbsp;</td><td>Fujian Gutian Pharma Co., Ltd</td><td>H35020148</td><td>Anestezi</td></tr><tr><td>Ksilazin (10 mg / kg)</td><td>Sunway Pharma Co., Ltd</td><td>CB07591</td><td>Anestezi</td></tr><tr><td>Dulbecco' Eagle'ın modifikasyonu s orta Dulbecco (DMEM) kültür ortamı</td><td>Gibco</td><td>12800-116</td><td>DMEM, 2 mM L-glutamin ve ribonükleozitler ve ribonükleotidler olmadan</td></tr><tr>,<td>Streptomisin</td><td>Sigma</td><td>1277</td><td>100 ve mikro; g / ml</td></tr><tr><td>Penisilin</td><td>Sigma</td><td>4687</td><td>100 ve mikro; g / ml</td></tr></tbody></table>

bitkisel tıbbın hazırlanması: er-xian kaynatma ve er-xian içeren serum<emin vivo</emve<em&gt; in vitro</em&gt; deneyler

Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In Vivo and In Vitro Experiments

Klinik ortamda alternatif bir ilaç olan geleneksel bitki tıbbı, son yıllarda artan bir ilgi görmüştür. Vücutta teslim edilmeden önce, aktif çiğneme maddelerini çiğ otlardan ayırmak için ek bir ekstraksiyon prosedürü yaygın olarak gereklidir. Su dekompozisyonu, klinik ortamda halen yaygın olarak kullanılan klasik bir ekstraksiyon prosedürüdür. Burada, deneysel araştırmalara bitki özütleri uygulamak için er-xian kaynatma işlemi (EXD) için ayrıntılı bir protokol önermekteyiz. Hayvana uygun doz hesaplamanın yanı sıra EXD&#39;nin dört ana aşamasını açıklar: ıslatma, su dekompozisyonu, filtrasyon ve konsantrasyon. Buna ek olarak, serum içeren EXD, in vitro doğrulama aracı olarak farelere verilir. Burada sıçanlar oral yoldan üç gün süreyle EXD ile tedavi edildi. Daha sonra kan numuneleri toplandı, inaktive edildi, santrifüj edildi ve filtrelendi. Kültür ortamı ile seyreltilmiş serum, v&#39;de hücreleri veya dokuları tedavi etmek için kullanılabilirItro. Örneğin, EXD, hem in vivo hem de in vitro çalışmalarda uygulanmış ve EXD&#39;nin osteojenezi arttırdığını göstermiştir. Bu protokol bitkisel ilaçların hazırlanması ve uygulanması için referans olarak kullanılabilir.

EXD&#39;nin OVX farelerinin kemik yoğunluğuna etkisi Omurga vertebrası bölümündeki hematoksilin ve eozin boyama, OVX grubundaki kişilerle ( Şekil 1A , sol panel) karşılaştırıldığında in vivo EXD tedavisinden sonra artmış kemik trabekülleri gösterir ( Şekil 1A , sağ panel). Şekil 1B , 12 haftalık EXD tedavisine sahip OVX farelerindeki ( Şekil 1B , sol pan...

Burada, erüe, ekstraksiyon, filtrasyon ve konsantrasyon olmak üzere dört basamakta bir er-xian ekstraksiyonunun (EXD) hazırlanması ve hazırlanmış bir EXD içeren serumun sıçanlara uygulanmasını gösteriyoruz. Bu yöntemler, geleneksel Çin ilaçları gibi bitkisel dekompozisyonların in vivo ve in vitro çalışması için geçerlidir.

Bitkisel Tıbbın Hazırlanması: Er-Xian Kaynatma ve Er-Xian içeren Serum<emIn vivo</emVe<em&gt; In vitro</em&gt; Deneyler

Traditional herbal medicine, an alternative medicine in the clinical setting, has received increased attention in recent years. Before delivery to the ...

Bu prosedürün genel amacı, in vivo ve in vitro uygulamaları için geleneksel bir Çin bitkisel ilacı olan er-xian dekoksiyonu hazırlamaktır. Bu yöntem, geleneksel bir Çin ilacının hazırlanması ve uygulanmasıyla ilgili bitkisel tıp alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, suyla ekstraksiyon adımlarının klinik ortamda kullanılanlara benzer olmasıdır.Tek bir er-xian dekoksiyonu için gerekli ham maddeleri kapaklı bir kaba yerleştirin ve bitkilerin üzerini yaklaşık bir inç geçecek kadar distile su ekleyin. Kabın kapağını kapatın ve ham bitkileri bir saat boyunca masere edin. Ardından, su kaynayana kadar bitkileri yüksek güçte bir gaz ocak kullanarak ısıtın.Gücü düşük bir kaynama seviyesine getirin ve bitkileri iki saat boyunca kaynatın. İlk su ekstraksiyonunun sonunda, 500 mililitrelik cam bir beheri gazlı bez ve pamukla kapatın ve sadece ekstraksiyon sıvısını filtre üzerinden dikkatlice behere dökün. Filtre kağıdındaki her türlü bitkisel kalıntıyı tekrar kaba aktarın ve bitkilerin üzerini yaklaşık 2,5 cm daha geçecek kadar taze distile su ekleyin.Az önce gösterildiği gibi ikinci bir su dekoksiyonundan sonra, dekoksiyonu 1.000 mililitrelik b

preparation-herbal-medicine-er-xian-decoction-er-xian-containing

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu makalede, hayvan çalışmaları için Gushukang granül ve in vitro deneyler için serum içeren GSK granül bir çalışma çözümü hazırlamak için ayrıntılı bir protokol sağlar. Bu protokol, bitkisel ilaçların farmakolojik araştırmalarına ve hem in vivo hem de in vitro deneyler için reçete olarak uygulanabilir.

In vivo ve In vitro deneyler için Gushukang (GSK) granül hazırlanması

Bu protokol, yaralı PC12 hücrelerini tedavi etmek için iki bitkinin bir kombinasyon stratejisini sağlar. Protokol, geleneksel Çin tıbbının (TCM) en iyi uygulama modunu optimize etmek için bir referans sağlar.

Yaralı PC12 Hücrelerini Tedavi Etmek için İki Bitki Kombinasyonu Stratejisini Keşfetmek

Bu protokolde, Epimedii folium'un (EF) koyun eti yağı işleme teknolojisi, bir Box-Behnken deneysel tasarım-tepki yüzey metodolojisi uygulanarak optimize edildi ve ham ve optimize edilmiş su ekstrakte edilen EF'nin zebra balığı embriyonik gelişimi üzerindeki etkisi önceden araştırıldı.

Epimedii Folyum koyun eti yağı işleme teknolojisinin optimizasyonu ve zebra balığı embriyonik gelişimi üzerindeki etkisinin test edilmesi

Ex vivo olarak etiketlenmiş hücreler ile bir fare modelinde, MRI kullanılarak in vivo hücre takibi için genel bir protokol açıklar. Hücre etiketleme, görüntü alma ve işleme ölçümü için tipik bir protokol dahildir.

Hücre Takip için vivo 19 F MRG

Bu yöntem, fare modellerinde yeni ilaçların farmakokinetiğini değerlendirmek için, karotid arter yoluyla sabit bir ilaç çözeltisi sunmak amacı ile geliştirilmiştir.

Farelerde Taksanlar Farmakokinetik ve Farmakodinamik Analiz Karotis Arter İnfüzyonlar

Burada, tümör hücresi metabolizmasının gerçek zamanlı izlenmesi, in vivo tavuk embriyosu koryo-allantoik membran (CAM) metastaz modeli ile birleştirildiğinde, tümör hücrelerini DNA'ya zarar veren kemoterapötiklere duyarlı hale getirme yetenekleri açısından yeni anti-kanser hedeflerini/ajanlarını değerlendirmek için kullanılır.

Kanser İlaç Duyarlılık Etkinliğinin Değerlendirilmesi<em&gt; İn Vitro</em&gt; Ve<em&gt; İn Vivo</em

Bu protokol, florofor etiketli nanokorlar ve geleneksel antikorlar kullanan farelerde in vivo yakın kızılötesi floresan ksenogreft görüntüleme deneylerinin ex vivo doğrulamasını gerçekleştirmek için gereken adımları ana hatlarıyla belirtir.

Nanobody ve Antikor Temelli Doğrulama<em&gt; İn Vivo</emFarelerde&gt; Tümör Xenograftlarında NIRF-görüntüleme Deneyler kullanma<em&gt; Ex vivo</em&gt; Sitometrisi ve Mikroskopi

Insan tümör ksenograftlarının vaskülarize ve in vivo olarak büyüme aşamasında, fare kökenli hücreleri tarafından filtre edilemeyen bulunmaktadır. aşağı analizi sırasında bu kirletici hücrelerinin neden olduğu önyargı aşmak için, biz manyetik hücre sıralama tarafından tüm fare hücrelerinin kapsamlı tükenmesi için izin veren bir yöntem geliştirdi.

İnsan Tümör ksenogratflarının gelen Fare Hücrelerinin tükenmesi Anlamlı Hedef Hücre Alt Analizi geliştirir

Burada, hepatik steatozun in vivo ve in vitro modellerini oluşturmak ve steatotik fenotipleri ve ilgili fizyolojik parametreleri analiz etmek için optimize edilmiş yöntemler açıklanmaktadır.

Optimize Analizi<em&gt; İn Vivo</em&gt; ve<em&gt; İn Vitro</em&gt; Karaciğer Steatoz

Bu yazıda bir PEI / MNP vektörü ve mıknatıslanarak endotel hücrelerine miR verimli, viral olmayan iletimi açıklanır. Bu nedenle, genetik modifikasyon ek olarak, bu yaklaşım, manyetik hücre rehberlik ve MR taranabilirlik sağlar. teknik terapötik hücre ürünleri özelliklerini geliştirmek için de kullanılabilir.

Hazırlık ve<em&gt; İn Vitro</em&gt; Mıknatıslanmış karakterizasyonu Endotel Hücreleri miR-modifiye

Keşfedin Er-Xian kaynatma hazırlama protokolünü kemik biyolojisi ve osteogenez araştırmaları için. Bu standart yöntem, geleneksel Çin bitkisel ilacının in vivo ve in vitro uygulamalarında tutarlı sonuçlar sağlar.

Bitkisel Tıbbın Hazırlanması: Er-Xian Kaynatma ve Er-Xian içeren Serum

Daha fazla video keşfet