Bitkisel Tıbbın Hazırlanması: Er-Xian Kaynatma ve Er-Xian içeren Serum In vitro Deneyler

Bu prosedürün genel amacı, in vivo ve in vitro uygulaması için geleneksel bir Çin bitkisel ilacı olan bir er-xian kaynatma hazırlamaktır. Bu yöntem, geleneksel bir Çin tıbbının hazırlanması ve uygulanması ile ilgili bitkisel tıp alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, su ekstraksiyon adımlarının klinik ortamda kullanılanlara benzer olmasıdır.

Tek bir er-xian kaynatma için hammaddeleri kapaklı bir kaba koyun ve bitkilerin yaklaşık bir inç kaplayacak kadar damıtılmış su ekleyin. Kapağı kabın üzerine koyun ve çiğ otları bir saat boyunca yumuşatın. Ardından, su kaynayana kadar otları ısıtmak için yüksek güçte bir gazlı ocak kullanın.

Gücü kısık ateşte pişirin ve otları iki saat boyunca kaynatın. İlk su kaynatma işleminin sonunda, 500 mililitrelik bir cam kabı gazlı bez ve pamukla örtün ve kaynatma sıvısını sadece filtreden behere dikkatlice dökün. Filtre kağıdındaki herhangi bir bitkisel kalıntıyı kabın üzerine geri koyun ve bitkileri bir inç daha suyla kaplayacak kadar taze damıtılmış su ekleyin.

Az önce gösterildiği gibi ikinci bir su kaynatma işleminden sonra, kaynatma işlemini 1.000 mililitrelik behere süzün ve kabı asbestsiz tel gazlı bez gazı ile kaplı bir gazlı pişiriciye yerleştirin. Çözeltiyi yavaşça ve sürekli olarak karıştırmak için bir cam çubuk kullanarak kaynatma işlemini düşük bir kaynama ile ısıtın. Kaynatma 200 mililitreye düştüğünde, çözeltiyi 500 mililitrelik bir behere aktarın ve hacmi gösterildiği gibi 100 mililitreye düşürün.

Ayak parmağınızı çimdikleyerek uygun sedasyon seviyesini onayladıktan sonra, son kaynatma işleminden bir saat sonra er-xian kaynatma ile tedavi edilmiş bir hayvanın derisinde ve peritonunda beş santimetre uzunluğunda, 0,5 santimetre derinliğinde bir kesi yapmak için düz çalıştırma makası kullanın. Karın iç organlarını hareket ettirmek için kağıt mendil kullanın ve damarı ortaya çıkarmak için abdominal aortun bağ dokusunu çıkarın. Daha sonra, abdominal aorttan sekiz ila 10 mililitre kanı yavaşça çekmek için 22 gauge iğne ile donatılmış 10 mililitrelik bir şırınga kullanın ve kanı 15 mililitrelik steril bir tüpe aktarın.

Kanı oda sıcaklığında 30 ila 60 dakika pıhtılaştırın, ardından hücreleri santrifüjleme ile toplayın. Her hayvandan alınan serumu dikkatlice 50 mililitrelik tek bir steril tüpe koyun ve serumu 56 santigrat derece su banyosunda 30 dakika boyunca ısıtın ve etkinleştirin. Son olarak, serumu hemen kullanım için 50 mililitrelik konik bir tüpe filtrelemek için 0.22 mikrometre gözenek boyutuna sahip bir şırınga filtresi ve hidrofilik polietersülfon zarı kullanın.

Yumurtalıklı veya OVX bir farenin lomber vertebral bölümünün hematoksilen ve eozin boyaması, in vivo er-xian kaynatma tedavisinden sonra kemik trabeküllerinde bir artış olduğunu ortaya koymaktadır. OVX hayvanlarını kontrol etmek için karşılaştırın. Bir kontrol OVX faresinin dördüncü belinin ve iki hafta boyunca er-xian kaynatma ile tedavi edilen bir OVX faresinin temsili mikro-BT görüntüleri, er-xian kaynatma ile tedavi edilen hayvanların bel omurunun iç kısmında daha fazla trabeküler kemik gözlendiğini ortaya koymaktadır.

Gerçekten de, bu mikro-BT verilerinin kantitatif analizi, er-xian kaynatma ile muamele edilen hayvanların kemik-doku hacminde, trabeküler sayı ve kalınlıkta bir artış ve dördüncü bel kısmının trabeküler aralığında bir azalma olduğunu göstermektedir. OVX farelerinden alınan kemik mezenkimal kök hücreleri yedi gün boyunca kültürlendiğinde yağ damlacıkları otomatik olarak oluşur. Er-xian kaynatma ile muamele edilmiş hayvanlardan elde edilen kültürlerde, bunun yerine kemik nodülleri oluşur.

Ayrıca, er-xian kaynatma ile muamele edilmiş kemik mezenkimal kök hücrelerinde, kontrol OVX hayvanlarından alınan kök hücrelere göre daha fazla alkalin fosfataz pozitif hücre tespit edilebilir. Ek olarak, hiyerarşik kümeleme, mikrodiziden ortaya çıkan kemik mezenkimal hücrelerindeki 389 genin ekspresyonunun, in vivo olarak OVX ve er-xian kaynatma ile tedavi edilen fareler arasında 1.5 kattan daha büyük tam bir değişim olduğunu göstermektedir. Bir kez ustalaştıktan sonra, er-xian kaynatma sekiz saat içinde hazırlanabilir ve içerdiği bitki serumu iki saat içinde hazırlanabilir.

Dahili mide gösterimi için, önce IG tüpünün yemek borusu içinde düzgün bir şekilde yerleştirildiğini onaylayın, ardından kaynatma işlemini hayvana nazikçe iletin. Geleneğe göre, bir Çin bitkisel ilacının hazırlanma yöntemi, ilaç veya malzemeler dışarıdan değil, su ile ekstrakte edilmelidir. Döner buharlaştırıcılar, kaynatma işlemini konsantre etmek için yaygın olarak kullanılır, ancak gerektiğinde gaz da kullanılabilir.

Geleneksel Çin tıbbı, standartlaştırılmış hazırlama prosedürünü ve genel tıbbi malzemeleri gerektirir, çünkü bu prosedürde tutarlı kalite kontrol edilecektir. Bu videoyu izledikten sonra, tıbbi madde ekstraksiyonunun nasıl standartlaştırılacağını ve içerdiği bitkisel serumun nasıl hazırlanacağını iyi anlamış olmalısınız. Kaynayan kaynatma işleminin çok sıcak olduğunu lütfen unutmayın.

Gerektiği gibi su geçirmez ısıya dayanıklı eldivenler giyin.