Name: Sinir iletim için ultrasonik bir araç diyabetik sıçan modellerinde engelleme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 27 s
Description: Öğrenin diyabetik nöropati ağrı yönetimi için yüksek yoğunluklu odaklı ultrason kullanarak sinir iletimini geçici olarak bloke etme yöntemini. Bu teknik güvenli ve tekrarlanabilir analjezi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Çalışma Bakanlığı bilim ve Teknoloji (proje en 105-2221-E-400-001) ve Ulusal Sağlık Araştırma kurumları (proje BN-105-s-10), Tayvan tarafından desteklenmiştir.

Kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi Tayvan Ulusal Sağlık Araştırma enstitüleri onaylanmıştır tüm hayvan iletişim kuralları.
 1. indüksiyon, diyabetik modelinde erkek yetişkin Sprague - Dawley (SD) fareler <ol><li>kaldırmak sıçan gıda granül kafes hızlı erkek SD (300-350 g) sıçanlara STZ indüksiyon öncesinde 6 h için.</li>
	<li>Hazırlama sodyum sitrat arabellek (0.1 M, pH 4.5).
	<ol><li>Erimesi 1,05 g sitrik asit monohidrat (C 6 H 8 O 7 · H 2 O; mol. WT 210.14) 50 mL 0.1 M sitrik asit çözüm yapmak için su distile.</li>
		<li>Erimesi 1,47 g TRISODYUM sitrat dihydrate (C 8 H 5 O 7 Na 3 · 2 H 2 O; mol. WT 294.12) 50 mL 0.1 M sodyum sitrat çözüm yapmak için su distile.</li>
		<li>Ekle 25 mL sitrik asit çözüm için 25 mL sodyum sitrat çözüm. Sodyum sitrat tampon pH (pH 4.5) monitör pH metre kullanarak. 
		Not: İzotonik arabellek buna ek olarak 0.1 M sodyum sitrat çözüm uygun bir birimi tarafından yapılır.</li>
	</ol></li> <li>Erimesi 50 mg/mL STZ çözüm getirebilecek STZ 0.1 M sodyum sitrat arabellekte. 
	Not: STZ çözüm ışığa duyarlı olduğunu, bu nedenle, STZ çözüm alüminyum folyo ile kapak ve 15-20 dk. içinde kullanın</li>
	<li>50 mg/kg STZ çözüm ile 26 - 28 gauge iğne. temiz enjeksiyon yeri bir etanol pad ile 1 mL insülin veya tüberkülin şırınga çekmek ve intraperitoneally zarar görmesini önlemek için karın sağ alt çeyreğine STZ çözüm enjekte Karın organları. </li> <li>% 10 Sükroz su ile rats 48 h için tek su kaynağı olarak STZ enjeksiyon sonra hipoglisemi önlemek için tedarik.</li></ol>
 2. onay diyabet STZ kaynaklı Sıçanlarda <ol><li>monitör tüm açlık plazma glukoz konsantrasyonu fareler tarafından STZ enjekte sonrası 72 h ile bir glikoz metre.
	<ol><li>Hızlı STZ-indüklenen diyabetik sıçan oruç ölçme önce 15 h için kan glikoz düzeyi.</li>
		<li>Bir kısıtlama çantasında sıçan dizginlemek ve kan toplama sırasında kan şekeri ölçümleri için kuyruk bulaşmasına neden.</li>
		<li>Küçük bir damla kan almak için kuyruk ucu prick kan lanset kullanın. Damla kan glikoz test şeridi üzerinde bir yer. Açlık plazma glukoz düzeyleri rekor. 
		Not: Glikoz metre algılar ve mg/dL birimlerinde kan şekeri düzeyini görüntüler. Açlık kan şekeri düzeyleri 150 mg/dL altında farelerle STZ-indüksiyon 2 hafta sonra dışlamak.</li>
	</ol></li></ol> 3. Diyabetik periferik nöropati diyabetik Sıçanlarda değerlendirilmesi <ol><li>Elektronik von Frey ile mekanik allodynia değerlendirin.
	<ol><li>Alıştırmak STZ indüklenen diyabetik sıçan 30 dk önce hind değerlendirmek için bir 1 cm çapında metal kafes katta bir kafeste pençe çekilme yanıt.</li>
		<li>El ile fareler arka pençe plantar yüzeye baskı uygulamak için katı ipucu (0.8 mm çapında) ile bir elektronik von Frey sonda kullanın ve bir pençe çekilme yanıt görülür kadar basınç yavaş yavaş artırın.</li>
		<li>Bu sistemdeki gösterir ve ölçüm fareyle her ölçüm arasındaki 30 s aralığı başına 5 kez tekrarlayın basınç kaydetmek.</li>
	</ol></li> <li>Isı hyperalgesia elektrikli Ocak ile değerlendirmek.
	<ol><li>Ağrı yanıt değerlendirmeden önce 10 dakikadır (24 ± 0,5 ° C) sıcak tabakta STZ-indüklenen diyabetik sıçan alıştırmak.</li>
		<li>Kaldırmak ve fareler habituation sonra onların kafes yerleştirin, sıcak plaka ısı ve sıcak plaka korumak &#39; s 55 ± 0,5 ° c sıcaklıkta</li>
		<li>Fare aynı anda zamanlayıcıyı başlatılırken ısıtmalı sıcak tabağa yerleştirin.</li>
		Fareyi farklı davranışlar sergiler, hind yalama gibi pençe veya anormal derecede flicking hind pençe, sayacý durdurmak ve para çekme gecikmesi kaydetmek <li>. 
		Not: Eğer bir fare sonra 20 farklı davranışları ifade değil s (20 s kesme süresi), sıcak plaka test sonlandırmak ve fare sıcak plaka kaldır.</li>
	</ol></li></ol> 4. Vivo Sinir iletim blokajı HIFU dönüştürücü ile Not: vivo içinde deneme hafta 5 50 mg/kg STZ enjeksiyon sonra başlar.
<ol><li>CMAPs HIFU sonication ile engelleme önce hayvan yordamları gerçekleştirin.
	<ol><li>Cerrahi araçlarda (neşter, makas, pens ve cam kanca) bir otoklav ameliyattan önce sterilize.</li>
		<li>Tiletamine/zolazepam karışımı (40 mg/kg) ve xylazine (10 mg/kg) mayi enjeksiyon veya inhalasyon yolu ile isoflurane isoflurane Buharlaştırıcı üzerinden %1.75 farelerle anestezi. Vücut ısısını korumak için bir Isıtma yastığı fareler yer.</li>
		<li>Cerrahi sıçanlara ventral recumbency getirin. Göz merhem uygulamak. Fareyi bacak uzatmak ve anestezi derinliği tespit için tırnakları ayak plantar yüzeyine çimdik. Fareler çekilme yanıtları göstermek, ek anestezi uygulanır.</li>
		<li>Bacağından çıkardığınızı tüylerden ve arkasında bir elektrik kesme makinesi ile fareler daha düşük. Cerrahi alanında temiz gazlı bez ile sıvı iyot uygulamak ve dairesel yayın gazlı bez cerrahi sitesi dışa doğru hareket ettirin. Bir alkol takımını aynı dairesel hareketi ile sıvı iyot silmek için kullanın. Bu deney sol ve sağ cerrahi sitesinde gerçekleştirilir. Diğer cerrahi sitesinde yordamı yineleyin ne zaman yordam sonraki adımında gerçekleştirmek.</li>
		<li>Steril Cerrahi makas veya neşter deri kesik dorsal uyluk olun Dikkatle doku cilt altında ayrı ve cilt ile cilt kanca. uyluk kas içinde görülebilir güvenli künt Cerrahi makas kullanın.</li>
		<li>Makas kasları gömülü orta uyluk siyatik sinir lifleri görünür hale gelene kadar dikkatle femur paralel kasları ayırmak için kullanın. Dikkatle çevreleyen bağ doku ve kasları orta uyluk siyatik sinir ayırmak için bir cam kanca kullanın.</li>
	</ol></li> <li>Siyatik sinir bir ısmarlama sinir fiksatör ( Resim 1 ve şekil 3) kullanarak HIFU odak bölgesi içinde konumlandırın. 
	Not: Özel yapım sinir fiksatör oluşmak-in 3 parça ( şekil 3). Tüm bileşenleri şeffaf Polimetilmetaakrilat (PMMA) yapılır. Dış iş parçacığı bileşen üst yapısını ben aynıdır 2,5 mm boyunda ve M10XP0.7 ( şekil 4A). Merkezi iyi 4.0 mm çaplı delik bileşeni aracılığıyla ben var. Kuyu alt açıklıklı teyp tabakasıyla kaplı kalır. Yuvası çapı 1.2 mm olduğunu ve ben yuvasının Merkezi uçak ve bileşenin üst yüzeyi arasındaki mesafedir 3.1 mm. bileşen II ana gövdesi, dört bacağı ve alt yapı ( şekil 4B) oluşur. 2.5 mm boyunda ve bileşen dış iplik sığacak şekilde M10XP0.7 alt yapısının iç iş parçacığı olduğunu ben. Merkez delik çapi bileşen Merkezi kuyusu aynıdır ben. Ana gövde 32 mm çapında ve 5.4 mm kalınlıkta boyutlardır. Dört bacaklı simetrik olarak dağıtılır. İki özdeş kısa bacakları hizalama için tasarlanmıştır ve iki özdeş uzun bacaklı bileşen III çengel için iş. Dış çap ve bileşenin III yüksekliğini 41 mm ve 9,2 mm dir. İç iş parçacığı M36XP1.0 ve ile delik 27,5 mm çapında (< güçlü sınıfı "xfig" => Şekil 4 c). Koni 84 mm çapında üst açıklıklı ve 27,5 mm alt açıklıklı çapı ile içi boş bir konik olduğunu. Yüksekliği 57,5 ( şekil 5A) mm'dir.
	<ol><li>30-60 dk steril suda ıslatarak takip için çamaşır suyu çözümünde özel akrilik sinir fiksatör deneme önce emmek.</li>
		<li>Bir cam kanca kullanarak sinir çýkýntýdan ve bileşen ı. yuvası koymak</li>
		<li>Vida bileşen II bileşenine ı. dolgu Merkez iyi bileşeni I zil ile &#39; ultrasonik yayılması ve sinir korunması için s çözüm.</li>
		HIFU konut koni <li>vida bileşenine III. Dock bileşeniyle bileşeni bileşen II dört bacağı II III. 
		Not: Üç bileşenden geometrik merkezi ve dönüştürücü hizalanır. Sinir ve dönüştürücü arasındaki mesafe sinir HIFU odak bölge içinde olmasını sağlar odak uzaklığı eşittir.</li>
	</ol></li> <li>Siyatik sinir ve diğer çift gastroknemius kas içine kökeni akupunktur iğneleri bir çift yerleştirin. Her çift iğne Elektrofizyoloji koordinat belirleme sistemi bir elektrik koaksiyel kablo ( şekil 1) aracılığıyla bağlanmak. 
	Not: kablosunun bir ucunu iki iğne küçük ayrı ayrı ve kablosunun diğer ucundaki iki timsah klipleri sistem bağlamak için BNC Bağlayıcısı vardır. Akupunktur iğneleri çiftlerini siyatik sinir, uyarıcı elektrotlar ve kayıt elektrotları gastroknemius kas olarak çalışıyorum.
	<ol><li>Örnekleme hızı ve bant genişliği Elektrofizyoloji koordinat belirleme sistemi 50 kHz ve 70 Hz - 3 kHz ila, anılan sıraya göre ayarlayın. Siyatik sinir kökeni, uyarıcı elektrotlar supra-azami uyarıcı bir darbe genişliği 0.1 MS ile uygulamak.</li>
		<li>Üzerinden kayıt elektrotları CMAPs kaydetmek ve insert ile dahili amplifikatör Elektrofizyoloji koordinat belirleme sistemi yükseltmek. 
		Not: dahili amplifikatör Elektrofizyoloji Koordinat Belirleme Sistemi sinir sinyalleri yükseltmek ve Elektrofizyoloji koordinat belirleme sistemi ile kayıt elektrotları üzerinden CMAPs kaydetmek için kullanabilirsiniz.</li>
	</ol></li> <li>Diyabetik nöropatik Sıçanlarda CMAPs bastırmak için bir ticari 2.68 MHz HIFU çevirici kullanın. 
	Not: Dönüştürücü teknik özellikleri aşağıda açıklanan: tek öğeli bir küresel kase diyafram çapı 6 cm ve 5 cm odak uzaklığı ve 4 mm derinlik ve genişliği ücretsiz alanındaki 0.8 mm elips bir odak bölgesi.
	<ol><li>Küresel koni, HIFU dönüştürücü ve koni içinde belgili tanımlık tank kapak bırakın degassed su. HIFU dönüştürücü küresel koni koymak ve koni kapak küresel konik üst açılması için 6 baş vidalar tarafından ( 5B rakam) düzeltin. Küresel koni kabarcıkları doğal olarak baloncuklar su ile karşılaştırıldığında düşük yoğunluk nedeniyle okuldan sonra ön uç açılış koni şeffaf 0,03 mm kalın bant tarafından mühür. Üzerine küresel konik vida bileşen III.</li>
		<li>Degassed su tankından HIFU dönüştürücü ile küresel koni ve bileşen III çıkar. 
		Not: çalışmada kullanılan Ters Ozmos Ters Ozmos işlem tarafından arıtılmış su sudur. Ters Ozmos su gaz çıkarmak için kaynatılır. Soğutma sonra degassed su içinde bireysel bir kapalı tank elde edilir.</li>
	</ol></li> <li>Bileşen koymak ben sinir ve kas arasındaki boşluğa dikkatle ve sinir bileşen ı. gerçekleştirme adımları 4.2.3 ve sinir HIFU odak bölge içinde olduğundan emin olmak için 4.2.4 boşluk yerleştirin ( şekil 3A < / güçlü >).</li>
	<li>Bir işlev üreteci ve Radyofrekans amplifikatör bağlantı. Güç amplifikatörü HIFU dönüştürücü HIFU kiriş üretimi için bağlayın. El ile güç amplifikatörü HIFU dönüştürücü üzerinden için işlev üreteci gerilim çıkışını ayarlayın. HIFU maruz kalma süresi doldu sonra el ile işlev üreteci kapatmak. Bir zamanlayıcı kullanarak zaman gözlemlemek. 
	Not: Yoğunluk ve enerji bu çalışmada kullanılan HIFU demetinin 2,810 W/cm 2 ve 84 J/mm 2, sırasıyla vardır.</li>
	<li>Aynı anda, uyarıcı Elektrofizyoloji Koordinat Belirleme Sistemi (Adım 4.3) üzerinden ve HIFU ışın HIFU sistemi (Adım 4.6) üzerinden siyatik sinir CMAPs kaydederken teslim. Yavaş yavaş HIFU siyatik sinir üzerindeki 3 artırmak s, 5 s 8 azalması veya insert genliği inhibisyonu görülmektedir kadar s.
	<ol><li>Kayıt HIFU teslimi sırasında saniyede bir kez CMAPs ışın. İnsert genliği değişikliği gözlemleyerek sonra HIFU etmeyi kapat ve el ile Elektrofizyoloji edinme yazılım kayda CMAPs erken 10 min, her 5 dakika içinde arka arkaya 30 dk içinde her 2 dk kayıt simgesini tıklayın ve her 10 min Son aşama kayıt süresi 2 h. ulaşana kadar</li>
	</ol></li> <li>Ayrı bileşen II ve III. sinir fiksatör ( şekil 3) HIFU dönüştürücü kesi siteden kaldırmak için. Ayrı bileşen II ve ben güvenli siyatik sinir serbest bırakmak için. Diyabetik sıçan cerrahi sitesi 4-0 fotokromik akorduna dikiş tarafından CMAPs kaydettikten sonra dikiş. Sıvı iyot enfeksiyonu önlemek için cerrahi sitesi uygulamak.
	<ol><li>Kafesleri Isıtma yastığını yerleştirin ve onların kafes hayvan tesisine dönmeden önce kurtarmak fareler sağlar. Fareler 3 gün veya buprenorfin (0,05 - 0,1 mg/kg) mayi enjeksiyon için ibuprofen içme suyu sağlamak.</li>
	</ol></li> <li>Kayıt ve uyarıcı elektrotlar siyatik sinir ve imzalat diyabetik nöropatik sıçan gastroknemius kas kökenli adımları 4.1.2 ve 4.3 7, 14 ve 28 gün sonra ilk HIFU sonication açıklandığı gibi ekleyin. 4.3.1-4.3.2 adımları yineleyin.
	<ol><li>Kafesleri Isıtma yastığını yerleştirin ve onların kafes kafes hayvan tesisine taşımadan önce kurtarmak fareler sağlar.</li>
	</ol></li> <li>Fareler deneyden sonra ötenazi. Fareyi bir karbon dioksit odaya koyun. 5 dakika farelerin nefes durdurmak için bekleyin. Kalp yenerek durdurdu emin olmak.</li>
</ol>

<ol><li>Abuaisha, B. B., Costanzi, J. B., Boulton, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acupuncture+for+the+treatment+of+chronic+painful+peripheral+diabetic+neuropathy%3A+A+long-term+study%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Res+Clin+Pract%22%5BJournal%5D)">Acupuncture for the treatment of chronic painful peripheral diabetic neuropathy: A long-term study.</a> Diabetes Res Clin Pract. 39 (2), 115-121 (1998).</li>
<li>Hamza, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percutaneous+electrical+nerve+stimulation%3A+A+novel+analgesic+therapy+for+diabetic+neuropathic+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Percutaneous electrical nerve stimulation: A novel analgesic therapy for diabetic neuropathic pain.</a> Diabetes Care. 23 (3), 365-370 (2000).</li>
<li>Ballantine, H. T. Jr, Bell, E., Manlapaz, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/13686380">Progress and problems in the neurologic applications of focused ultrasound.</a> J Neurosurg. 17, 858-876 (1960).</li>
<li>Foley, J. L., Little, J. W., Vaezy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image-guided+high-intensity+focused+ultrasound+for+conduction+block+of+peripheral+nerves%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Image-guided high-intensity focused ultrasound for conduction block of peripheral nerves.</a> Ann Biomed Eng. 35 (1), 109-119 (2007).</li>
<li>Lee, Y. F., Lin, C. C., Cheng, J. S., Chen, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-intensity+focused+ultrasound+attenuates+neural+responses+of+sciatic+nerves+isolated+from+normal+or+neuropathic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">High-intensity focused ultrasound attenuates neural responses of sciatic nerves isolated from normal or neuropathic rats.</a> Ultrasound Med Biol. 41 (1), 132-142 (2015).</li>
<li>Young, R. R., Henneman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+block+of+nerve+conduction+by+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Neurol%22%5BJournal%5D)">Reversible block of nerve conduction by ultrasound.</a> Arch Neurol. 4, 83-89 (1961).</li>
<li>Lele, P. P. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0014488663900086">Effects of focused ultrasonic radiation on peripheral nerve, with observations on local heating.</a> Exp Neurol. 8 (1), 47-83 (1963).</li>
<li>Hong, C. Z. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1846738">Reversible nerve conduction block in patients with poly- neuropathy after ultrasound thermotherapy at therapeutic dosage.</a> Arch Phys Med Rehabil. 72 (2), 132-137 (1991).</li>
<li>Okada, A., Morita, Y., Fukunishi, H., Takeichi, K., Murakami, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+magnetic+resonance-guided+focused+ultrasound+treatment+of+uterine+fibroids+in+a+large+Japanese+population%3A+impact+of+the+learning+curve+on+patient+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Non-invasive magnetic resonance-guided focused ultrasound treatment of uterine fibroids in a large Japanese population: impact of the learning curve on patient outcome.</a> Ultrasound Obstet Gynecol. 34 (5), 579-583 (2009).</li>
<li>Huisman, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((International+consensus+on+use+of+focused+ultrasound+for+painful+bone+metastases%3A+current+status+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">International consensus on use of focused ultrasound for painful bone metastases: current status and future directions.</a> Int J Hyperthermia. 31 (3), 251-259 (2015).</li>
<li>Dickinson, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medium-term+Outcomes+after+Whole-gland+High-intensity+Focused+Ultrasound+for+the+Treatment+of+Nonmetastatic+Prostate+Cancer+from+a+Multicentre+Registry+Cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Urol%22%5BJournal%5D)">Medium-term Outcomes after Whole-gland High-intensity Focused Ultrasound for the Treatment of Nonmetastatic Prostate Cancer from a Multicentre Registry Cohort.</a> Eur Urol. 70 (4), 668-674 (2016).</li>
<li>Foley, J. L., Little, J. W., Vaezy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+high-intensity+focused+ultrasound+on+nerve+conduction%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Effects of high-intensity focused ultrasound on nerve conduction.</a> Muscle Nerve. 37 (2), 241-250 (2008).</li>
<li>Lee, Y. F., Lin, C. C., Cheng, J. S., Chen, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nerve+conduction+block+in+diabetic+rats+using+high-intensity+focused+ultrasound+for+analgesic+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Anaesth%22%5BJournal%5D)">Nerve conduction block in diabetic rats using high-intensity focused ultrasound for analgesic applications.</a> Br J Anaesth. 114 (5), 840-846 (2015).</li>
<li>Donoff, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nerve+regeneration%3A+basic+and+applied+aspects%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Rev+Oral+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Nerve regeneration: basic and applied aspects.</a> Crit Rev Oral Biol Med. 6 (1), 18-24 (1995).</li>
<li>Fawcett, J. W., Keynes, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+nerve+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Peripheral nerve regeneration.</a> Annu Rev Neurosci. 13, 43-60 (1990).</li>
<li>Nightingale, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neuropathic+pain+market%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">The neuropathic pain market.</a> Nat Rev Drug Discov. 11 (2), 101-102 (2012).</li>
<li>Lipton, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-pulse+transcranial+magnetic+stimulation+for+acute+treatment+of+migraine+with+aura%3A+a+randomised%2C+double-blind%2C+parallel-group%2C+sham-controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurol%22%5BJournal%5D)">Single-pulse transcranial magnetic stimulation for acute treatment of migraine with aura: a randomised, double-blind, parallel-group, sham-controlled trial.</a> Lancet Neurol. 9 (4), 373-380 (2010).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Action potentials diyabetik sıçan vivo içinde gelen nöropatik sinir ve anlık oluşumunu engelleyici etkisi HIFU tedavisi hem gözlenmiştir sonra kısmi ve geçici bastırma. 28 günlük takip çalışması insert üzerinde güvenli bir abluka sinir iletim, uygun HIFU riziko taşınan dışarı gösterdi. Sonuç olarak, yukarıdaki Protokolü HIFU tedavisi siyatik sinirleri diyabetik Sıçanlarda tersinir iletim bloğu için alternatif bir çözüm sağlayabilir.
Bu yöntemde, işte yok sinir dejenerasyonu ve duyusal...

Oral ilaçlar, akupunktur1ve elektriksel sinir stimülasyonu2 ağrılı diyabetik polinöropati tedavisi için kullanılır. Ancak, oral ilaçlar, akupunktur ve elektriksel sinir stimülasyonu invaziv işlem yan etkileri terapötik etkinlik ve hastanın bağlılık engel. Hayvan modellerinde periferik sinirler bloğunu ultrason için onlarca yıl3,4,5araştırmış. Büyük yeşil kurbağa vitro siyatik sinir iletim geri dönülebilir olarak 0.4 için-ultrason pozlama 10-20 darbeleri tedaviden sonra inhibe 1.0 s6. Sinir iletim engellemek için bir ultrason7tarafından indüklenen sıcaklık artışı faktördür. Polinöropati olan hastalar için bileşik kas aksiyon potansiyelleri (insert) bastırılması düşük yoğunluktaki ultrason için 2 dk8maruz peroneal sinir içinde gerçekleştirildi. 5 dk içinde tam kurtarma zamandı.
Son zamanlarda, gıda ve İlaç İdaresi Amerika Birleşik Devletleri'nin HIFU uterin fibroid tümörler9, ağrı palliations kemik metastaz10ve prostat kanseri11için non-invaziv tedavi olarak onaylanmış. Bir HIFU dönüştürücü vücut dışında akustik ışınları yayar ve kirişler çeşitli doku ortamlar içinde iletmek ve odağı hedef tümöre üzerinde birleşirler. Odak bölge hemen hedef tümörler üzerinde lokalize etkileri çevre dokulara zarar vermeden üretmek için kuruldu. HIFU Ayrıca sinir iletim inhibe veya sinir denervation normal Sprague-Dawley (SD) fareler12 in vivo deneyler neden uygulandı. Buna ek olarak, HIFU kısa ve uzun vadeli etkileri nöropatik sinir incelenen13olmuştur. Önceki sonuçlar duyusal sinir iletim tersine çevrilebilir veya kalıcı blok uygun parametrelerle HIFU tarafından elde edilebilir gösterdi. Analjezik uygulamaların yanı sıra HIFU bir araç olarak sinir iletim abluka Nöroloji temel araştırma ve geliştirme ağrı kesici için periferik ve merkezi bileşenleri göreli katkısını araştırmak için kullanılabilir olur. Bu nedenle, bir HIFU engelleme teknoloji platformu belirli hayvan modellerinde periferik sinirler için gereklidir. Bu makalenin amacı, kısmen veya tamamen HIFU tarafından diyabetik nöropatik Sıçanlarda periferik sinir aksiyon potansiyelleri engelleme yordamlarına göstermektir. Diyabetik fare modelleri ve değerlendirme periferik nöropatik semptomların kurulmuştur. Bir HIFU platformu ve deneysel süreçler sıçan siyatik sinirleri tedavisi için belirli sunulmaktadır.

<table><tbody><tr><td>streptozotosin</td><td>Sigma</td><td>85882</td><td></td></tr><tr><td>sitrik asit monohidrat&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>C1909</td><td></td></tr><tr><td>trisodyum sitrat dihidrat</td><td>Sigma</td><td>W302600</td><td></td></tr><tr><td>glikoz ölçüm cihazları</td><td>Roche Accu-Check Active</td><td>GC</td><td></td></tr><tr><td>elektronik von Frey cihazı</td><td>IITC Life Science</td><td>2390</td><td></td></tr><tr><td>sıcak plaka</td><td>IITC Life Science</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Biopac MP36 edinim sistemi</td><td>Biopac Systems, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HIFU dönüştürücü</td><td>Sonic Concepts</td><td>H108</td><td></td></tr><tr><td>fonksiyon jeneratörü</td><td>Agilent</td><td>33250A</td><td></td></tr><tr><td>güç amplifikatörü</td><td>Elektronik & İnovasyon</td><td>1040L</td><td></td></tr><tr><td>Sıçanlar&nbsp;</td><td>Biolasco tayvan</td><td>Sprague-Dawley</td><td></td></tr><tr><td>Puralube veteriner merhem</td><td>Dechra</td><td></td><td></td></tr><tr><td>izofluran buharlaştırıcı</td><td>Parkland Scientific</td><td>V3000PS</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurance</td><td>Attane</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kısıtlama çantası (Decapicones)</td><td>Braintree Scientific</td><td>DC 200</td><td></td></tr></tbody></table>

sinir iletim için ultrasonik bir araç diyabetik sıçan modellerinde engelleme

An Ultrasonic Tool for Nerve Conduction Block in Diabetic Rat Models

Sinir iletim bloğu bir yüksek yoğunluk odaklı ultrason (HIFU) çevirici ile normal ve diyabetik hayvan modellerinde son zamanlarda yapıldı. HIFU geri dönülebilir olarak uygun bir ultrasonik parametresini kullanırken sinirler zarar vermeden periferik sinir iletim engelleyebilir. Sinir aksiyon potansiyelleri geçici ve kısmi bloğunu HIFU ağrı yardım için yararlı bir klinik tedavi olma potansiyeline sahip olduğunu gösterir. Bu eser bir HIFU dönüştürücü kullanarak diyabetik sıçan vivo içinde nöropatik sinirler aksiyon potansiyelleri bastırmak için işlemleri gösterir. İlk adım streptozotocin (STZ) enjeksiyonu ile yetişkin erkek diyabetik nöropatik rats üretmektir. İkinci adım STZ-indüklenen diyabetik Sıçanlarda diyabetik periferik nöropati bir elektronik von Frey sonda ve sıcak bir tabak tarafından değerlendirmek etmektir. Kayıt içinde vivo hücre dışı aksiyon potansiyelleri HIFU sonication için maruz sinir son adım etmektir. Burada ortaya yöntem ultrason analjezik uygulamaları çalışma yararlanabilir.

3 s sonication bir yoğunluk itibariyle 2,810 W/cm2bir HIFU doz, insert temellerin % 20 oranında bastırılır, ancak tamamen (şekil 2A, elmas) 30 dk sonra ele geçirildi ve neredeyse giriyordu, in vivo çalışmada gösterilmiştir 28 gün (şekil 2B, elmas) döneminde sürekli. 5 s HIFU maruz kalma, aynı yoğunlukta CMAPs 65,4 temel 4 dk (%9,5) oranında azalmış ve %73,7 (%12,6) satır taban çizgisiyle 120 dk (<strong class=...

Bu çalışma yüksek yoğunluk odaklı ultrason diyabetik nöropatik sinir aksiyon potansiyelleri engellemek için uygulanan metodoloji sunar.

Sinir iletim için ultrasonik bir araç diyabetik sıçan modellerinde engelleme

Nerve conduction block with a high intensity-focused ultrasound (HIFU) transducer has been performed in normal and diabetic animal models recently. HIFU ...

Bu ultrason tekniğinin genel amacı, bir ultrason termal etkisi kullanarak periferik sinir iletiminin geçici olarak bloke edilmesini sağlamaktır. Bu yöntem, diyabetik periferik nöropatinin analjezisi gibi ağrı yönetimi alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, hedef sinir üzerindeki ultrason maruziyetinin lokalize ve tekrarlanabilir olmasıdır.Ultrason tedavisi uzun ve oldukça güvenli bir süreç olduğu için, bu tekniğin etkileri insan nöropatik ağrısının analjezisine yöneliktir. Prosedür; Cheng Jung-Sung, Tan Joo-Shin ve laboratuvardan araştırma asistanları tarafından gerçekleştirilecektir. Aç bırakılmış erkek Sprague-Dawley veya SD sıçanların ardından, metin protokolüne uygun olarak STZ solüsyonu hazırlandıktan sonra, 50 mg/kg STZ solüsyonunu bir mililitrelik insülin veya tüberkülin şırıngasına çekmek için 26 veya 28 gauge iğne kullanın.Sıçanlardaki enjeksiyon bölgesini temizlemek için bir etanol pedle silin ve STZ solüsyonunu hayvanın abdomenine enjekte edin. Enjeksiyondan 72 saat sonra, kuyruk ucunu bir kan lanseti ile delip küçük bir damla kan elde ederek, enjekte edilen tüm sıçanların açlık plazma glukoz konsantrasyonunu ölçün. Kan damlasını bir glukoz test şeridinin üzerine yerleştirin ve açlık plazma glukoz seviyelerini kaydetmeden önce şeridi bir glukozmetreye yerleştirin.STZ ile indüklenmiş diyabetik bir sıçanı alıştırmak için, hayvanı bir santimetre çapında metal tel örgü zeminli bir kafese 30 dakika boyunca yerleştirin. Ardından, arka pençe çekilme yanıtını değerlendirmek için, sert uçlu elektronik bir Von Frey Probu kullanarak sıçanların arka pençesinin plantar yüzeyine manuel olarak basınç uygulayın ve pençe çekilme yanıtı görülene kadar basıncı kademeli olarak artırın. Basıncı kaydedin ve ölçümü tekrarlamadan önce 30 saniye bekleyin.STZ enjeksiyonundan beş hafta sonra, sıçanlar anesteziye alındıktan ve metin protokolüne uygun olarak ayağın plantar yüzeyine çimdik testi uygulandıktan sonra, uyluk ve alt sırt bölgesindeki tüyleri temizlemek için elektrikli tüy alma makinesi kullanın. Cerrahi bölgedeki cilde sıvı iyot uygulayın. Ardından, sıvı iyodu silmek için bir alkollü ped kullanın.Steril bir bistüri ile dorsal uyluk bölgesindeki deride bir insizyon yapın. Deri altındaki dokuyu genişletmek için cerrahi makas kullanın ve deriyi sabitlemek için deri kancaları kullanın. Makas yardımıyla, kaslar içinde gömülü olan orta uyluk siyatik sinir lifleri görünene kadar kasları femur'a paralel olacak şekilde dikkatlice ayırın.Mid-uyluk siyatik sinirini çevreleyen bağ dokusundan ve kaslardan ayırmak için bir cam kancayı dikkatlice kullanın. Ardından, siyatik siniri yüksek yoğunluklu odaklanmış ultrason (HIFU) odak bölgesine yerleştirmek için, özel yapım bir sinir sabitleyicisi kullanarak, siniri bir cam kanca ile dikkatlice kaldırın ve cihazın birinci bileşenindeki yuvaya yerleştirin. Sonrasında, ikinci bileşeni birinci bileşene vidalayın.Ardından, ultrasonik yayılım ve sinir koruması için birinci bileşenin merkezi kuyusunu Ringer Çözeltisi ile doldurun. Üçüncü bileşeni HIFU gövde konisine vidalayın. Daha sonra, ikinci bileşenin dört ayağı aracılığıyla, üçüncü bileşeni ikinci bileşenle kenetleyin.Bir çift akupunktur iğnesini siyatik sinirin başlangıcına, diğer çifti ise gastroknemius kasına yerleştirdikten sonra, her bir iğne çiftini bir koaksiyel elektrik kablosu aracılığıyla elektrofizyolojik veri toplama sistemine bağlayın. Elektrofizyolojik veri toplama sisteminin örnekleme hızını 50 kilohertz ve bant genişliğini sırasıyla 70 hertz ile 3 kilohertz olarak ayarlayın. Ardından, siyatik sinirin başlangıcındaki uyarıcı elektrotlara 0,1 milisaniye darbe genişliğinde supramaksimal bir uyarı uygulayın.Elektrofizyoloji toplama sisteminde, kayıt elektrotlarından bileşik kas aksiyon potansiyellerini veya CMAP'leri kaydedin ve CMAP'leri yerleşik amplifikatör ile yükseltin. Diyabetik nöropatik sıçanlarda CMAP'leri baskılamak için ticari bir 2.68 millihertz HIFU transduseri kullanmak üzere; küresel koniyi, HIFU transduserini ve koni kapağını gazı alınmış suyla doldurulmuş tanka daldırın. HIFU transduserini küresel koninin içine yerleştirin ve altı adet baş vidayı kullanarak koni kapağını küresel koninin üst açıklığına sabitleyin.Kabarcıkların, suya kıyasla düşük yoğunlukları nedeniyle küresel koniden doğal olarak çıkmasının ardından, koninin ön uç açıklığını kapatmak için 0,03 milimetre kalınlığında şeffaf bant kullanın. Ardından, üçüncü bileşeni küresel koniye vidalayın ve küresel koni ile üçüncü bileşenin takılı olduğu HIFU transdüserini gazdan arındırılmış su tankından çıkarın. Birinci bileşeni sinir ile kas arasındaki boşluğa dikkatlice yerleştirin ve siniri birinci bileşenin boşluğuna konumlandırın.Sinirin, daha önce gösterildiği gibi HIFU odağının içinde olduğundan emin olmak için, ikinci bileşeni birinci bileşene vidalayın. Üçüncü bileşeni, ikinci bileşenin dört ayağı aracılığıyla HIFU gövde konisine vidaladıktan sonra, üçüncü bileşeni ikinci bileşenle kenetleyin ve ultrasonik yayılım ile sinir koruması için birinci bileşenin merkezi kuyucuğunu Ringer Solüsyonu ile doldurun. Bir Fonksiyon Jeneratörü ve bir radyo frekanslı güç yükselticiyi bağlayın.HIFU demetinin oluşturulması için güç amplifikatörünü HIFU transdüserine bağlayın. Ardından, fonksiyon jeneratörünün voltaj çıkışını güç amplifikatörü aracılığıyla HIFU transdüserine manuel olarak ayarlayın ve HIFU uygulama süresini ölçmek için bir zamanlayıcı kurun. HIFU uygulama süresi dolduğunda fonksiyon jeneratörünü manuel olarak kapatın.CMAP'lar kaydedilirken, elektrofizyoloji veri toplama sistemi aracılığıyla stimülasyonu ve HIFU sistemi aracılığıyla HIFU demetini eş zamanlı olarak siyatik sinire uygulayın. Siyatik sinir üzerindeki HIFU maruziyetini; CMAP amplitüdünde bir azalma veya inhibisyon gözlemlenene kadar kademeli olarak üç saniye, beş saniye ve ardından sekiz saniyeye çıkarın. HIFU demeti uygulaması sırasında CMAP'ları saniyede bir kez kaydedin.CMAP amplitüdündeki değişimi gözlemledikten sonra HIFU sistemini kapatın ve CMAP'leri iki saat boyunca kaydetmek için elektrofizyoloji veri toplama yazılımındaki Kaydet simgesine manuel olarak tıklayın. Sinir sabitleyici bileşenleri çıkardıktan, diyabetik sıçanın cerrahi bölgesini diktikten ve sıçanların iyileşmesine izin verdikten sonra, ilk HIFU sonikasyonundan sonraki yedinci, 14. ve 28. günlerde, anestezi altındaki diyabetik nöropatik sıçanlara uyarıcı ve kayıt elektrotlarını daha önce olduğu gibi yerleştirin ve bu videonun başında gösterildiği gibi ek CMAP'leri kaydedin. Bu videoda gösterilen in vivo çalışma, 2810 watt/cm² şiddetinde üç saniyelik sonikasyon şeklinde uygulanan yüksek yoğunluklu odaklanmış ultrason (HIFU) dozu ile CMAP'lerin bazal değerin yüzde 20'si kadar baskılandığını, ancak 30 dakika sonra tamamen geri döndüğünü göstermiştir.Aynı yoğunluktaki beş saniyelik HIFU maruziyetinde, CMAP'ler dört dakikada bazal değerin %65,4'üne düşmüş ve 120 dakikaya kadar bazal değerin %73,7'sine geri dönmüştür. CMAP'ler 14. güne kadar bazal seviyelere geri dönmemiştir. Aynı yoğunluk altında HIFU sonikasyon süresi 8 saniyeye çıkarıldığında, CMAP'ler dört dakikada bazal değerin %26'sına azalmış, ancak 120 dakikada bazal değerin %38'ine yükselmiş ve 28. güne kadar kademeli olarak bazal değerin %74'üne çıkmıştır.Bu teknik uzmanlaşıldığında, uygun şekilde uygulandığında bir saat içinde tamamlanabilir. Bu prosedür gerçekleştirilirken, sinire çok dikkatli davranılması gerektiğini unutmamak önemlidir. Bu prosedürün ardından, periferik sensör etkileşimi gibi ek soruları yanıtlamak amacıyla marka kolay tespit gibi diğer yöntemler uygulanabilir.Bu teknik geliştirildikten sonra, ağrı yönetimi alanındaki araştırmacıların periferik nöropatide accupain için yeni bir enerjetik modaliteyi keşfetmelerinin yolunu açmıştır. Bu videoyu izledikten sonra, bir sıçan modelinde diyabetik nöropatik sinirlerin iletimini ultrason ile nasıl grafiğe dökeceğiniz konusunda kapsamlı bir bilgiye sahip olmalısınız. Güç amplifikatörü ile çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve bu prosedür gerçekleştirilirken yalıtkan iş eldivenleri giymek gibi önlemlerin her zaman alınması gerektiğini unutmayın.

an-ultrasonic-tool-for-nerve-conduction-block-in-diabetic-rat-models

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Burada, biz, sıçan ya da fare nocifensive davranışı göstermek olduğu en düşük sıcaklık belirlemek için hızlı, güvenilir ve basit bir prosedür...

Diyabetik Sıçanlarda Termal Nosiseptif Eşik Hızlı Belirlenmesinde

Kaynak: Lee, YF, et al. Diyabetik sıçan modellerinde sinir iletim bloğu için ultrasonik bir alet. J. Vis. Uzm. (2017)Bu video, diyabetik bir sıçan modelinde siyatik sinirden gastroknemius kasına giden aksiyon potansiyellerini bloke etmek için yüksek yoğunluklu odaklanmış ultrason (HIFU) kullanımını göstermektedir. HIFU ışını sinire iletildikten sonra, kas sinyalindeki bir azalma, HIFU'nun diyabetik nöropatik ağrının giderilmesi için invaziv olmayan bir tedavi olarak potansiyelini doğrular.

Diyabetik sıçan modelinde sinir aksiyon potansiyellerini bloke etmek için yüksek yoğunluklu odaklanmış ultrason 

In vivo sinir iletim özelliklerinin ölçümleri nöromüsküler hastalıkların çeşitli hayvan modelleri karakterize etmek için güçlü bir araç örneklemektedir. Burada, biz anestezi farelerin siyatik sinirlerin elektrofizyolojik analizi yapılabilir hangi ile kolay ve güvenilir bir protokol mevcut.

Fare Siyatik Sinir Vivo elektrofizyolojik ölçümlerde

Aksonal uyarılabilirlik teknikleri patofizyolojisi ve geri dönüşü olmayan dejeneratif olayları öncesinde biyofiziksel değişiklikleri incelemek için güçlü bir araç sağlar. Bu el yazması imzalat sıçan ulnar sinir üzerinde bu tekniklerin kullanımı gösterilmiştir.

Vivo Aksonal uyarılabilirlik test ile sıçan Ulnar sinirin Elektrofizyolojik ölçüm

Bu çalışmada deneysel bir model saf küçük fiber nöropati ile resiniferatoxin (RTX) kurar. RTX benzersiz bir doz (50 µg/kg) hasta özellikleri taklit eden bir küçük fiber nöropati modeli geliştirmek için en uygun ve nöropatik ağrı altında yatan nosiseptif moleküler önemini araştırmak yardımcı olabilir.

Saf küçük Fiber nöropati bir fare modeli ile geçici reseptör potansiyel Vanilloid tip 1 Ultrapotent Agonist kurulması

Tek lifli kayıt, merkezi ve periferik sinir sistemleri için geçerli olan etkili bir elektrofizyolojik tekniktir. Bağlı siyatik sinir ile bozulmamış DRG hazırlanması ile birlikte, iletim yetmezliği mekanizması incelenir. Her iki protokol de periferik sinir sisteminin ağrı ile ilişkisini geliştirmek.

İletim Yetmezliği Mekanizmasını İncelemek Için Bağlı Siyatik Sinir ile In Vivo Tek Lifli Kayıt ve Bozulmamış Dorsal Kök Ganglion Kullanımı

Bu protokol, sıçan tüm siyatik sinir dokusunun ex vivo elektrofizyolojik stimülasyon için hazırlanmasını ve çevresel olarak düzenlenmiş, iki bölmeli, perfüze edilmiş bir salin banyosunda kaydedilmesini açıklar.

Ex Vivo Nörofizyoloji için Sıçan Siyatik Sinirinin Hazırlanması

Sıçanlarda siyatik sinir ağrısını indüklemek için kronik bir daralma yaralanması modelinde Fu'nun deri altı iğnelemesini kullanmak için bir protokol sunuyoruz.

Fu'nun Deri Altı İğnelemesinin Siyatik Sinir Ağrısı Üzerindeki Etkinliği: Kronik Konstriksiyon Yaralanmalı Sıçan Modelinde Davranışsal ve Elektrofizyolojik Değişiklikler

Burada, sinir lifi alt tiplerinin aktivitesini ayırt edebilen iki tür omurga elektrofizyolojik ölçümü kullanarak periferik sinirlerdeki çevresel sinirlerdeki duyusal aksonların aktivasyonu ve bloklanmasını değerlendirmek için bir yöntem sunuyoruz: Yerel Alan Potansiyelleri ve Geniş Dinamik Aralıklı tek nöron kayıtları.

Anestezi Edilmiş Bir Farede Çevresel Ağrı Blokunu Değerlendirmek İçin Elektrofizyolojik Yöntemler

Bu protokol, insan nöroma ağrısını taklit etmek ve cerrahi tedavileri değerlendirmek için duyu sinirlerini kullanan tekrarlanabilir bir sıçan modeli sunar ve translasyonel nöroma araştırmaları için değerli bir araç sunar.

Safen Sinir Yoluyla Hedeflenen Kas Reinnervasyonunu Kullanarak Nöroma Ağrısı Tedavi Seçeneklerini İncelemek için Yeni Cerrahi Kemirgen Modeli

Öğrenin diyabetik nöropati ağrı yönetimi için yüksek yoğunluklu odaklı ultrason kullanarak sinir iletimini geçici olarak bloke etme yöntemini. Bu teknik güvenli ve tekrarlanabilir analjezi sağlar.

Sinir iletim için ultrasonik bir araç diyabetik sıçan modellerinde engelleme

Daha fazla video keşfet