Name: Fare bağırsak Ileectomy kaynaklı safra Overaccumulation (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-21T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 55 s
Description: Öğrenin fare ileektomi modeliyle safra asidi malabsorpsiyonu ve toksisitesini incelemeyi. Bu yöntem Crohn hastalığı ve safra asidi ishalinin tedavisine yönelik önemli biyolojik içgörüler sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu araştırma Tom Peterson Vakfı tarafından desteklenmektedir ve NIH R01-HL119780 (Jain, MK) verin.

hayvan iletişim kuralı gözden ve kurumsal hayvan bakım ve kullanım komite toplantısında Case Western Reserve Üniversitesi Tıp Fakültesi tarafından onaylanmış ve ulusal kurumları Sağlık (NIH) Kılavuzu için uygun olarak yapılmıştır Care and Use of Laboratory Animals (8 Edition, 2011). Fareler euthanized yöntemlerle Amerikalı hayvan hastalıklarıyla ilgili tıbbi Derneği (travma) yönergeleri ile uyumlu ötenazi hayvanlar için (2013 Edition). C57BL/6J, erkek, 8-16 hafta yaşlı fareler bu protokol için kullanılmıştır. Fareler bir 12 h karanlık/ışık siklet ortamında muhafaza.
 1. ameliyat öncesi hazırlık <ol><li>Transfer fareler temiz kafes yordamı önce 24 h için. Hayvanlar su ücretsiz erişim sağlar. Yumuşak gıda (jel diyet ek) ile yemek yemek yerine 4-6 h ince bağırsak ameliyatı için içeriğini azaltmak için ameliyattan önce.</li>
	<li>Tüm cerrahi aletler sterilize ve tek kullanımlık steril cerrahi malzemeleri hazırlayın. Temiz cerrahi alan ve % 70 etanol ile anestezik burun konisi.</li>
	<li>Diseksiyon mikroskop, isoflurane anestezik Buharlaştırıcı, aletleri ve ısı kontrollü küçük bir hayvan cerrahi tablo vücut sıcaklığı bakım için ayarlayın. Aletleri, dikiş ve ücretsiz erişim için bir konum şırıngalarda ameliyat sırasında düzenlemek.</li>
	<li>Cerrahi alan için yeterli ışık sağlamak için bir ışık kaynağını ayarlayın.</li>
	<li>Bağırsak ve karın temizlik için 5 mL şırınga steril % 0,9 salin hazırlayın.</li>
</ol> 2. Ileectomy ve anastomoz <ol><li>Anesthetize fareler küçük hayvan kuluçka odasında isoflurane (2-%3) ile. Yeterli anesthetization hayvan isoflurane üzerinde ise ayak çimdik tekniği kullanarak belirlemek.</li>
	<li>Karın saç saç kaldırma ürün uygulamak çıkarın ve uzak anestezi koruyarak cerrahi sünger kullanarak saç silin. Fareyi bir masada ısı kontrollü küçük hayvan cerrahi (vücut ısısını korumak için şekil 1 A) 37 ° C. koru anestezi isoflurane (% 1-2) bir sağlamlılık aracılığıyla ile yerleştirin. Oküler merhem fare gözlerle tedavisi.</li>
	<li>Deri povidone-iyot ve % 70 alkol kullanarak temiz ve steril cerrahi gazlı bez ( şekil 1 B) ile karın cerrahi alanı kapsayacak.</li>
	<li>Anestezi etkin olduğunda cerrahi neşter kullanarak bir karın Ensizyon olun. Bağırsak ve çekme fare karın kas tam açın ve karın boşluğu ( şekil 1 C) maruz traktör ile korumak için pamuk uçlu aplikatör kullanın.</li>
	<li>Çekum bulun. Çekum başlayarak dikkatlice hareket bağlı ileum ve değişir parçası karın boşluğu ( şekil 1 D) dışında. 
	Not: Çekum kolayca büyük onun büyüklüğü nedeniyle bile oruç sonra belirlenebilir.</li>
	<li>Superior Mezenterik arter eksize için ileal bölümünü sağlama kanı doldurmak için bir 7-0 ipek sütür ile üst dalı ligate. İleal rengi pembe koyu mor ligasyonu sonra değişir. ( şekil 1 E - F).</li>
	<li>Makas kullanarak deney, amacına bağlı olarak tüketim ve % 50 veya ileum % 90'ı kaldırın. 
	Not: Sahte ameliyata superior Mezenterik arter ligasyonu gerçekleştirmez ve ileum çıkarmak değil.</li>
	<li>Sifonu % 0,9 serum fizyolojik ile ileal her iki uçtan Lümen. 
	Kalan sağlam ileum hala bir normal kan akımı alma gibi Not: superior Mezenterik arterin kan küçük bir miktar işlemi sırasında boşaltılır. Bu da ileal uçları için kan akımı normal ve anastomoz işlem ( şekil 1 G) sırasında iskemi yok sağlar gösterir.</li>
	<li>Mesenteries ileal iki uç tarafında bulun. Mesenteries hizalayın ve birlikte 8-0 dikiş ( şekil 1 G - H) kullanarak ileal biter dikiş.</li>
	<li>Dikiş ileum tutmak için ileum kontralateral tarafında anastomosed bir doğal şekilde ( şekil 1 ı).</li>
	<li>İki özgün dikiş iyice birleştirmek iki ileal uçlarına birlikte ( şekil 1 J) arasında üst ve alt kenarları dikiş.</li>
	<li>Onaylamak üç adımlı dikiş işlemi bittikten sonra anastomoz sitesinden hiçbir sızıntı olduğunu ( şekil 1 G-Ben). Çekum ve bağırsağın karın boşluğuna özgün anatomik konumuna geri döndürmek. Cerrahi alan künt bir iğne kullanarak sıcak % 0,9 serum fizyolojik ile yıkayın. ( şekil 1 K).</li>
	<li>6-0 sütür ile karın kas tabakasının kesi kapatın. Forseps kullanarak karın cilt kesi hizalayın ve optimum yara iyileşmesi ( şekil 1 L) kolaylaştırmak için karın deri dikiş.</li>
</ol> 3. Ameliyat sonrası bakım <ol><li>Transfer ameliyat sonrası fareler için bir yoğun bakım ünitesi kurtarma için. Onları ameliyat sonrası kurtarma gecede devam etmek için bir ısı kontrollü Isıtma yastığını bir kağıt-yatak kafeste ev. Fareler düzenli gıda ve su yanı sıra yumuşak gıda ile tedarik.</li>
	<li>Yönetmek buprenorfin (0,05 - 0,1 mg/kg) Subkutan Enjeksiyon ile analjezi için her 8-12 h. 
	Not: Eğer ciddi hasta fareler tarafından CO 2 ötenazi.</li>
	<li>Fareler (Bölüm 4) gerektiği gibi çağır isoflurane ve hasat örnekleri kullanarak son nokta, kurban.</li>
</ol> 4. Ileectomy kaynaklı safra Overaccumulation değerlendirilmesi <ol><li>tartmak ve fareler bir gün %0 (sahte), % 50 veya % ileum 90 rezeksiyonundan sonra incelemek.</li>
	<li>GI yolu kaldırın ve tartmak. GI ağırlık şiddeti safra tuzu malabsorbsiyonuna ve overaccumulation değerlendirmek için vücut ağırlık oranı hesaplamak.</li>
	<li>GI yolları 15 mL konik tüpler içine aktarmak ve makas kullanarak kısa segmentleri kesin. Kesme sonra 10 dakika süreyle santrifüj 3000 x g de Transfer süpernatant (safra tuzları içeren GI sıvı) için temiz bir tüp.</li>
	<li>Toplam hacim ve ağırlık GI sıvı ölçmek ve GI yolu ağırlık oranı daha da safra overaccumulation GI sistem değerlendirmek için sıvı kilo hesaplamak.</li>
	<li>Başvuru 8 ' de açıklandığı gibi safra asidi tahlil tarafından toplam safra tutarı süpernatant belirlemek.</li>
</ol>

<ol><li>McLeod, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgery+for+inflammatory+bowel+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Dig+Dis%22%5BJournal%5D)">Surgery for inflammatory bowel diseases.</a> Dig Dis. 21, 168-179 (2003).</li>
<li>Hancock, L., Windsor, A. C., Mortensen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+bowel+disease%3A+the+view+of+the+surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Colorectal+Dis%22%5BJournal%5D)">Inflammatory bowel disease: the view of the surgeon.</a> Colorectal Dis. 8, 10-14 (2006).</li>
<li>Polle, S. W., Bemelman, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgery+insight%3A+minimally+invasive+surgery+for+IBD%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Clin+Pract+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Surgery insight: minimally invasive surgery for IBD.</a> Nat Clin Pract Gastroenterol Hepatol. 4, 324-335 (2007).</li>
<li>Fon Tacer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+resource%3A+Comprehensive+expression+atlas+of+the+fibroblast+growth+factor+system+in+adult+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Research resource: Comprehensive expression atlas of the fibroblast growth factor system in adult mouse.</a> Mol Endocrinol. 24, 2050-2064 (2010).</li>
<li>Pournaras, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+bile+after+Roux-en-Y+gastric+bypass+in+promoting+weight+loss+and+improving+glycaemic+control%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">The role of bile after Roux-en-Y gastric bypass in promoting weight loss and improving glycaemic control.</a> Endocrinology. 153, 3613-3619 (2012).</li>
<li>Spreckley, E., Murphy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+L-Cell+in+Nutritional+Sensing+and+the+Regulation+of+Appetite%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Nutr%22%5BJournal%5D)">The L-Cell in Nutritional Sensing and the Regulation of Appetite.</a> Front Nutr. 2, 23(2015).</li>
<li>Inagaki, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast+growth+factor+15+functions+as+an+enterohepatic+signal+to+regulate+bile+acid+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">Fibroblast growth factor 15 functions as an enterohepatic signal to regulate bile acid homeostasis.</a> Cell Metab. 2, 217-225 (2005).</li>
<li>Han, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+control+of+bile+acid+synthesis+by+a+KLF15-Fgf15+axis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Circadian control of bile acid synthesis by a KLF15-Fgf15 axis.</a> Nat Commun. 6, 7231(2015).</li>
<li>Christl, S. U., Scheppach, W. <a target="_blank" href="http://www.tandfonline.com/doi/abs/10.1080/00365521.1997.11720712?journalCode=igas20">Metabolic consequences of total colectomy.</a> Scand J Gastroenterol Suppl. 222, 20-24 (1997).</li>
<li>Helmrath, M. A., VanderKolk, W. E., Can, G., Erwin, C. R., Warner, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+adaptation+following+massive+small+bowel+resection+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Surg%22%5BJournal%5D)">Intestinal adaptation following massive small bowel resection in the mouse.</a> J Am Coll Surg. 183, 441-449 (1996).</li>
<li>Tappenden, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+short+bowel+syndrome%3A+considerations+of+resected+and+residual+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Parenter+Enteral+Nutr%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of short bowel syndrome: considerations of resected and residual anatomy.</a> J Parenter Enteral Nutr. 38, 14-22 (2014).</li>
<li>Camilleri, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bile+Acid+diarrhea%3A+prevalence%2C+pathogenesis%2C+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Gut+Liver%22%5BJournal%5D)">Bile Acid diarrhea: prevalence, pathogenesis, and therapy.</a> Gut Liver. 9, 332-339 (2015).</li>
<li>Camilleri, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+understanding+of+bile+acid+diarrhea%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Advances in understanding of bile acid diarrhea.</a> Expert Rev Gastroenterol Hepatol. 8, 49-61 (2014).</li>
<li>Mottacki, N., Simren, M., Bajor, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+article%3A+bile+acid+diarrhoea+-+pathogenesis%2C+diagnosis+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Aliment+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Review article: bile acid diarrhoea - pathogenesis, diagnosis and management.</a> Aliment Pharmacol Ther. 43, 884-898 (2016).</li>
<li>Rao, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+organic+solute+transporter+alpha-beta%2C+Ostalpha-Ostbeta%2C+is+essential+for+intestinal+bile+acid+transport+and+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">The organic solute transporter alpha-beta, Ostalpha-Ostbeta, is essential for intestinal bile acid transport and homeostasis.</a> Proc Natl Acad Sci. 105, 3891-3896 (2008).</li>
<li>Hofmann, A. F., Poley, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholestyramine+treatment+of+diarrhea+associated+with+ileal+resection%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Cholestyramine treatment of diarrhea associated with ileal resection.</a> N Engl J Med. 281, 397-402 (1969).</li>
<li>Kir, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FGF19+as+a+postprandial%2C+insulin-independent+activator+of+hepatic+protein+and+glycogen+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">FGF19 as a postprandial, insulin-independent activator of hepatic protein and glycogen synthesis.</a> Science. 331, 1621-1624 (2011).</li>
<li>Kuipers, F., Bloks, V. W., Groen, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+intestinal+soap--bile+acids+in+metabolic+control%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Beyond intestinal soap--bile acids in metabolic control.</a> Nat Rev Endocrinol. 10, 488-498 (2014).</li>
<li>Buchman, A. L., Scolapio, J., Fryer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AGA+technical+review+on+short+bowel+syndrome+and+intestinal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">AGA technical review on short bowel syndrome and intestinal transplantation.</a> Gastroenterology. 124, 1111-1134 (2003).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Başarılı bir ileectomy gerçekleştirmek için önceden resecting kesimi için kan akımı engellemek için superior Mezenterik arter bakmaksızın gerekir. İskemik ileal segment koyu mor ligasyonu sonra dönecek. İleal segment sonra tamamen rezeke gerekir. Bir normal kan akımı tutulan amaçları için sağlanmış olur. Bu hangi iskemik nekroz nedeniyle cerrahi hatasına yol açabilir dikiş sonra kolayca kaldırma, kanama ve uygunsuz önlemek için önemlidir. Anastomoz sırasında ileal biter birlikte onların doğal anatomik pozisyonda katılmak...

Modern Biyomedikal Araştırma, genetik olarak işlenmiş hayvan modelleri insan hastalıkları anlayışlar seçip ayırmak için yaygın olarak kullanılmaktadır. Özellikle, doku veya hücre özgü kazanç ve kayıp işlevleri genlerin moleküler düzenleme gibi indüklenen biyolojik etkileri eğitim için kullanılmıştır. Hedef genlerin vivo içindeişleme içinde gelişmeler rağmen kalan sınırlamalar vardır. İlk, birçok hücre veya doku belirli silme birden çok organları etkiler. Örneğin, epitel gen silme epiteli ifadede birden çok dokuların ortadan kaldırır. Ayrıca, silme işlemini belirli bir dokusu ile sınırlı olsa bile, kayma kontrol nadiren mümkün olabilir. Örneğin, gibi bağırsak dokusu, farklı kesimleri ile hassas vivomanipüle çok belirli işlevleri gerçekleştirmek. Bu durumlarda, gen içeren dokuların rezeksiyonu doku iletişim mekanik ve fonksiyonel önemini belirlemek için daha verimli bir eğitim yaklaşımı olarak kabul edilir.
Ileectomy olan Crohn çoğunlukla kullanılan hastalarda ve inflamatuar hastalıklar distal ileum 1,2,3içeren. İleum genellikle üreten birkaç fibroblast büyüme faktörü 15/19 gibi enerji depolama hormonlar (FGF15/19), peptid YY (PYY) ve glukagon benzeri peptid 1/2 (GLP1/2); Bu hormonlar birçok biyolojik fonksiyonları4,5,6' önemli yerel ve endokrin rol oynarlar. Bu hormonlar arasında FGF15 karaciğerde safra asidi sentezi sağlam bir endokrin inhibitörü olarak belirlenmiştir. Bir kez ileal enterositler emilir, safra asitlerinin için geribildirim inhibisyonu hepatik safra asidi sentez 7daha sonra açan nükleer reseptör farnesoid X reseptör (FXR) Fgf15 ifade, uyarmak için aktif hale getirin. Bir son çalışmada, biz ileal kruppel benzeri faktörü 15 (KLF15) eğitim için fare ileectomy modeli tanıttı - karaciğer 8üretimde sirkadiyen safra asidi düzenleyen eksen sinyalFgf15 . En önemlisi, bir roman ailesi, kruppel gibi faktörler, özellikle KLF15, safra asidi Biyoloji tanıttı. İleectomy cerrahi fonksiyonel çalışmaları üzerinde bağlı olarak, biz bu KLF15 upregulates safra asidi sentez yolu ile dolaylı bir sigara hepatik mekanizması belirledi. Son olarak, ileal KLF15 da ilk endojen negatif düzenleyici Fgf15tanımlanır.
Distal bölgelere proksimal üzerinden azalan bağırsak segmentleri farklı besinlerin emilimini için sorumludur. İleum safra asidi ve vitamin B12 (VB12) emme 9için sorumlu büyük kesimdir. Bir önceki çalışma kısa barsak sendromu çalışmaya proksimal bağırsak rezeksiyonu bir fare modeli istihdam; çeşitli rezeksiyon uzunlukları, diyetler ve dikiş türleri en uygun ameliyat sonrası sağkalım oranı 10sürdürmek için önerilmiştir. Ayrıca, daha yeni bir inceleme o ileal rezeksiyon genellikle diğer gastrointestinal (GI) kesimi rezeksiyonu daha daha şiddetli hastalığında kalan yolu 11azalma adaptif kapasitesi nedeniyle sonuçlar gösterir. Kurtarma ve etkili tedavi yaklaşımları anlayışı hala sınırlı ise bu konuda temel ve klinik araştırma gruplarının yoğun ilgi kazanmıştır.
Safra asidi ishal enterohepatic dolaşım 12,13homeostazı safra asidi dengesizlikler kaynaklanır. İleal rezeksiyon, gastrointestinal hastalık veya idiyopatik safra asidi malabsorbsiyonuna sonucu bir sonucu olabilir. Hastaların % 80'den fazla ileal rezeksiyon 14geçiyor sonra ishal ile mevcut tespit edilmiştir. Ileectomy safra asidi ishal incelenmesi için bir önemli ameliyat model olma potansiyeline sahiptir. Bu çalışmada, ileal kısaltma bir dizi FGF15 eksikliği gibi bağırsak safra tuzu malabsorbsiyonuna, overaccumulation ve toksik hasar degrade bir değerlendirmesini sağlar.

<table><tbody><tr><td>Diseksiyon mikroskobu</td><td>Olympus</td><td>SZ61</td><td>Ameliyat için&nbsp;</td></tr><tr><td>Hayvan sıcaklık kontrolörü</td><td>Physitemp Instruments, Inc.</td><td>TCAT-2LV</td><td>Vücut ısısı kontrolü için</td></tr><tr><td>İzofluran anestezik buharlaştırıcı</td><td>VetEquip</td><td>&nbsp; 911104</td><td>Anestezi için</td></tr><tr><td>Diseksiyon forseps</td><td>&nbsp; Güzel Bilim Araçları A.Ş.</td><td>11274-20</td><td>Ameliyat için&nbsp;</td></tr><tr><td>Makas</td><td>&nbsp; Güzel Bilim Araçları A.Ş.</td><td>14084-08</td><td>Ameliyat için&nbsp;</td></tr><tr><td>İğne tutucu</td><td>&nbsp; Roboz Cerrahi Alet A.Ş.</td><td>RS-7882</td><td>Ameliyat için&nbsp;</td></tr><tr><td>Mikro bıçaklar-iğne bıçağı</td><td>Fisher Scientific</td><td>10318-14</td><td>Ameliyat için&nbsp;</td></tr><tr><td>6-0 monofilament sütür</td><td>Ethicon</td><td>1698G</td><td>Karın derisinin kapatılması için</td></tr><tr><td>7-0 ipek sütür</td><td>Ethicon</td><td>766G</td><td>Ligasyon için</td></tr><tr><td>8-0 monofilament sütür</td><td>Ethicon</td><td>1714G</td><td>Anastomoz için</td></tr><tr><td>Cerrahi süngerler</td><td>Dynarex Corp.</td><td>3333</td><td>Ameliyat için&nbsp;</td></tr><tr><td>Küçük pamuk uçlu aplikatörler&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>23-400-118</td><td>Ameliyat için&nbsp;</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal Healthcare Limited</td><td>66794-013-25</td><td>Anestezi için</td></tr><tr><td>Buprenorfin hidroklorür</td><td>Reckitt-Benckiser Pharmaceuticals</td><td>12496-0757-1</td><td>Analjezi için</td></tr><tr><td>% 0.9 sodyum klorür Enjeksiyonu</td><td>B. Braun Medical Inc.</td><td>0264-7800-10</td><td>Yıkama/enjeksiyon için</td></tr><tr><td>Povidone iyot hazırlama çözeltisi</td><td>Dynarex Corp.</td><td>1413</td><td>Cilt hazırlığı için</td></tr><tr><td>Puralube veteriner merhem</td><td>Dechra Veteriner Ürünleri</td><td>17033-211-38</td><td>Göz koruması için</td></tr><tr><td>Saç çıkarıcı losyon</td><td>Kilise & Dwight Co., Inc.</td><td></td><td>Cilt hazırlığı için</td></tr><tr><td>Yoğun bakım ünitesi</td><td>ThermoCare</td><td>FW-1</td><td>Ameliyat sonrası iyileşme için</td></tr><tr><td>DietGel kurtarma</td><td>ClearH2O</td><td>72-06-5022</td><td>Ameliyat sonrası iyileşme için</td></tr><tr><td>Aurum toplam RNA yağ ve fibröz doku kiti</td><td>Bio-Rad</td><td>7326830</td><td>RNA izolasyonu için</td></tr><tr><td>RT-qPCR için iScript ters transkripsiyon süper karışımı</td><td>Bio-Rad</td><td>1708841</td><td>İçin ters transkripsiyon testi</td></tr><tr><td>TaqMan hızlı gelişmiş ana karışım</td><td>Uygulamalı Biyosistemler/Yaşam</td><td>Teknolojileri</td><td>4444965 QPCR analizi için</td></tr><tr><td>Toplam safra asidi test kiti</td><td>Genzyme Teşhis</td><td>DZ042A-K01</td><td>Safra asidi testi için</td></tr><tr><td>C57BL / 6J & nbsp;</td><td>Jackson Laboratuvarı</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

fare bağırsak ileectomy kaynaklı safra overaccumulation

Ileectomy-induced Bile Overaccumulation in Mouse Intestine

Bağırsak rezeksiyonu obezite gibi insan hastalıkları, inflamatuvar barsak hastalığı, Crohn hastalığı ve genellikle safra asidi ishal de dahil olmak üzere ağır kısa barsak sendromu gibi yan etkileri içinde sonuç kolon kanseri için ortak bir terapötik yaklaşımdır, dehidratasyon, elektrolit bozuklukları ve besin malabsorbsiyonuna. Burada ileectomy, doku iletişim ve sistemik homeostazı bakımından değerlendirmek için olarak adlandırdığı bir fare ileal rezeksiyon modeli tanıtmak. İleal rezeksiyonundan sonra kan dolaşan kalıcı olarak endokrin, karaciğerde safra asidi sentez inhibisyonu bültenleri ileum özgü endokrin hormon fibroblast büyüme faktörü 15 (FGF15), yoksun olduğunu. Artan üretim ve emiliminin safra asitlerinin kaldırıldı ileum çıkardıktan sonra birlikte safra tuzu overaccumulation bağırsak ve ilişkili ishal, morbidite ve mortalite ameliyat edildi fareler muzdarip. Bu çalışmada tanıttı cerrahi modelinin roman kullanım fizyolojisi ve hastalık sistemik metabolik regülasyon ileal kontrolünü mekanik ve fonksiyonel anlayışlar sağlayabilir.

İleectomy yordamları şekil 1' de gösterilmiştir. İlk adım fare karın deri hazırlama, karın bir kesi yapmak ve tam olarak bağırsak (şekil 1A-C) ortaya çıkarmak için ekartör kullanarak içerir. Ardından, fare çekum bulunduğu (şekil 1D); verilen boyutu ve şekli kolayca tanımlanabilen bir dönüm noktası yapmak. Çekum, ileum ve distal değişir parçası maruz ve Karın boşluğun...

İnce bağırsak bağlı safra asidi emiliminden ve hepatik safra asidi sentez inhibisyonu geribildirim sistemik homeostazı ve sağlık için önemli. Bu çalışmada, ileal rezeksiyon ileectomy kaynaklı safra malabsorbsiyonuna, overaccumulation ve toksisite fare bağırsak değerlendirmek için bir fare modeli açıklar.

Fare bağırsak Ileectomy kaynaklı safra Overaccumulation

Intestinal resection is a common therapeutic approach for human diseases such as obesity, inflammatory bowel disease, Crohn's disease, and colon cancer ...

Bu cerrahi işlemin genel amacı, fare bağırsağında ileektomi kaynaklı safra malabsorpsiyonunu, aşırı birikimi ve toksisiteyi değerlendirmektir. Crohn hastalığı, kanser, otoimmün bozukluklar veya enfeksiyon gibi durumlarla kendini gösteren ileum hastalıkları, morbidite ve mortalitenin önemli kaynaklarıdır. İleumun segmental olarak çıkarılmasını içeren bu modelin geliştirilmesinin, hem biyolojiye dair içgörüler hem de terapi çalışmaları için faydalı olabileceğine inanıyoruz.İleektominin karaciğer tarafından safra asidi aşırı üretimine, bağırsak tarafından ise malabsorpsiyona ve aşırı birikime yol açabilme potansiyeli nedeniyle, bu tekniğin etkileri safra asidi diyaresi tedavisine kadar uzanmaktadır. Genel olarak, bu yöntemde yeni olan kişiler, bu cerrahinin en kritik ve zor bölümü olan intestinal anastomozda zorluk yaşayacaklardır. Ayak parmağı sıkıştırma yöntemiyle uygun sedasyon düzeyini doğrulayarak ve farenin karnına depilatuar krem uygulayarak başlayın.Tüyleri cerrahi süngerlerle temizleyin ve hayvanı 37 °C'ye ayarlanmış, sıcaklık kontrollü küçük hayvan cerrahi masasına yerleştirin. Hayvanın gözlerine merhem uygulayın ve açığa çıkan cildi sırasıyla povidon-iyot ve %70 etanol ile ovalayarak dezenfekte edin. Karın bölgesindeki cerrahi alanı steril cerrahi gazlı bezle örtün ve bir skalpel kullanarak karın bölgesinde orta hat kesisi yapıp kas tabakasını kesin.Bağırsakları korumak için pamuklu bir aplikatör kullanarak, abdominal boşluğu açığa çıkarmak amacıyla fare karın kaslarını ekartörlerle tamamen açın. Sekumdan başlayarak, bağlı olan ileum ve jejunumun bir kısmını dikkatlice abdominal boşluğun dışına çıkarın ve süperior mezenterik arterin üst dalını bağlamak için 7-0 ipek sütür kullanın. Doku rengi pembeden koyu renge dönerek tam bir oklüzyonu işaret ettiğinde, deneyin parametrelerine bağlı olarak ileumun %50 veya %90'ını eksize etmek için makas kullanın.Her iki ileal ucun lümenini %0.9'luk sodyum klorür çözeltisi ile yıkayın. Her iki ileal ucun yan tarafındaki mezenteri belirledikten sonra, eksize edilen dokunun her iki ucundaki mezenterleri hizalayın ve uçları birbirine bağlamak için 8-0 sütür kullanın. İleumun doğal bir şekilde anastomozlanmış kalmasını sağlamak için ileumun kontralateral tarafını dikin ve iki ileal ucu tamamen birleştirmek için orijinal iki sütür arasındaki üst ve alt yanları dikin.Anastomoz bölgesinde sızıntı olmadığı onaylandıktan sonra, sekum ve ince bağırsağı orijinal anatomik konumlarına geri getirin ve cerrahi alanı ılık %0.9 saline ile yıkamak için küt uçlu bir iğne kullanın. Karın kas tabakasını 6-0 sütür ile kapatın ve optimal yara iyileşmesini kolaylaştırmak ve cildi kapatmak için karın derisi insizyonunu hizalayın. Ardından, fareyi gece boyunca iyileşmesi için normal yiyecek ve suya ek olarak yumuşak gıdanın bulunduğu, sıcaklık kontrollü bir ısıtıcı ped üzerindeki kağıt altlıklı bir kafesle yoğun bakım ünitesine transfer edin.Ameliyattan bir gün sonra, hayvanın toplam ağırlığını ölçün. Ardından, gastrointestinal veya Gİ kanalı çıkarın ve intestinal dokunun ağırlığını ölçün. Gİ dokusunu 15 mililitrelik konik bir tüpe aktarın ve dokuyu kısa segmentler halinde kesmek için makas kullanın.Ardından, doku parçalarını santrifüj ile çöktürün ve safra tuzu içeren süpernatanı yeni bir tüpe aktarın. Kantitatif gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu analizi, ileumda fibroblast büyüme faktörü 15, apikal sodyum-safra asidi taşıyıcısı, ileal safra asidi bağlayan protein ve organik çözünen taşıyıcısı beta mRNA'larının bol miktarda eksprese olduğunu, jejunum ve bağırsağın geri kalanında ise ekspresyonun daha az veya son derece düşük olduğunu ortaya koymaktadır. Negatif kontrol olarak ölçülen Adenomatous polyposis coli mRNA seviyeleri tüm bağırsak boyunca benzer kalmaktadır.24 saat sonra, yalancı (sham) cerrahi sonrası bağırsak, cerrahi uygulanmayan hayvanlarla karşılaştırıldığında benzer bir boyut ve morfoloji sergileyerek normal görünmektedir. Sıvı hacimleri, %0'dan %90 ileektomiye kadar gradyan bir artış göstermektedir; bu durum, %90 rezeksiyon sonrası gözlemlenen, vücut ağırlığına oranla anlamlı düzeyde artmış Gİ oranına karşılık gelmektedir. Cerrahi sonrası Gİ kanallarından toplanan Gİ sıvısı ve Gİ sıvısı ağırlığının Gİ kanalı ağırlığına oranı da rezeksiyon sonrası gradyan bir artış sergilemektedir.Ayrıca, safra asidi analizi, süpernatantta tespit edilen safra asidi miktarının ileal rezeksiyon boyutunun artmasıyla birlikte arttığını doğrulamaktadır; bu durum, nispeten daha hafif yan etkileri nedeniyle %50 ileum rezeksiyonunun daha uygulanabilir bir fare ileektomi modeli olduğunu göstermektedir. Uzmanlaşıldığında, bu teknik düzgün şekilde uygulandığı takdirde 30 dakika içinde tamamlanabilir. Geliştirilmesinin ardından bu teknik, mikrocerrahi alanındaki araştırmacıların küçük hayvanlarda ileum biyolojisini ve ayrıca safra sendromunu incelemelerinin önünü açmıştır.Bu videoyu izledikten sonra, ileal segmentin nasıl doğru şekilde tanımlanıp çıkarılacağı ve intestinal anastomozun nasıl gerçekleştirileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

ileectomy-induced-bile-overaccumulation-in-mouse-intestine

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu videoda, bir fare modelinde bağırsak rezeksiyonu için ayrıntılı protokol açıklanmaktadır. Bu teknik, fare bağırsağında ileektominin neden olduğu safra emilim bozukluğu, aşırı birikim ve toksisite hakkında bilgi sağlar.

Murin İleal Rezeksiyon Modeli: Murin Modelinde İleektomi ile İndüklenen Safra Metabolizmasının İncelenmesi

ileokolik rezeksiyon birçok insan hastalığında yaygın olarak uygulanmaktadır; Bununla birlikte, bağırsak rezeksiyonunun cerrahi hastalıklar üzerindeki etkisi hakkında çok az şey bilinmektedir. Bu makale, farelerde prosedürün yüksek başarı ile yürütülmesi hakkında talimat vermekte ve hastalık modellerinde ileokolik rezeksiyonun etkilerini incelemek için bir araç sağlamaktadır.

İlköğretim Anastomoza sahip fare ileokolonik Bağırsak Rezeksiyon

Safra akışının bozulması, karakteristik zamana bağlı morfolojik değişiklikler dizisi ile ciddi inflamatuar kolestatik karaciğer hasarına neden olur. Burada, farelerde ortak safra kanalının cerrahi ligasyonu için 21 ila 28 gün sonra güçlü bir fibrotik yanıt indüklemeye izin veren bir protokol sunuyoruz.

Farelerde Safra Kanalı ligasyonu: Obstrüktif Kolestaz tarafından İnflamatuar Karaciğer Hasarı ve Fibrozis indüksiyonu

Burada, karaciğer hasarı ve rejenerasyon Rodents cerrahi bir model olarak kısmi safra kanalı ligasyonu mevcut.

Kısmi safra kanalı ligasyonu fare: kontrollü manken yerelleştirilmiş obstrüktif Histiositoz olgusu

Bir kısmi veya tam tıkanma Şiddetli karın ağrısı, bulantı, kusma ve dışkı geçiş engelleme neden olabilir bağırsak bağırsak engelleri vardır. Bağırsak kısmi obsructions farelerde oluşturmak için bu yordamı patolojik hücre büyümesi ve ölüm bağırsak temel mekanizmaları eğitim güvenilirdir.

Bağırsak kısmi tıkanıklık bir fare modeli

Sunulan protokol, inflamatuar barsak hastalığı ile ilişkili kolorektal kanserin indüksiyonu takip eden bir farede apandisin (kaekal yama) kolay bir cerrahi olarak çıkarılmasını açıklar. Bu murine apendektomi modeli insan gastrointestinal hastalığın patogenezinde apandisin biyolojik rolünün araştırılmasını sağlar.

Kaekal Patch Kesin Lokalizasyonu ile Kronik Kolit İlişkili Kolorektal Kanser Murine Apendektomi Modeli

Tek anastomoz duodeno-ileal bypass (SADI-S), önemli metabolik etkileri olan yeni ortaya çıkan bir bariatrik prosedürdür. Bu yazıda, farelerde SADI-S'nin güvenilir ve tekrarlanabilir bir modelini sunuyoruz.

Farelerde Sleeve Gastrektomi Modeli ile Tek Anastomoz Duodeno-İleal Bypass

Bu çalışmada, intestinal manipülasyon ile oluşturulan postoperatif ileusun bir murin modeli tanımlanmıştır. Gastrointestinal geçiş fonksiyonu, patolojik değişiklikler ve immün hücre aktivasyonu ameliyattan 24 saat sonra değerlendirildi.

Ameliyat Sonrası İleus Murin Modeli

Hiperinsülinemik öglisemik kelepçe, ya da insülin kelepçe, insülin etkisini değerlendirmek için altın...

Bilinçli Mesnetlenmemiş Fare hiperinsülinemik öglisemik Kelepçeleri

Görselleştirilmesi ve fare hepatik ven veya intrahepatik safra kanalı 3-boyutlu yapısının nicel bir yöntem tarif edilmektedir. Bu reçine döküm yöntemiyle aynı zamanda diğer duktal ya da damar sistemlerine uygulanabilir ve olanak...

3-Boyutlu Reçine Döküm ve Fare Portal Ven veya intrahepatik safra Sisteminin Görüntüleme

Öğrenin fare ileektomi modeliyle safra asidi malabsorpsiyonu ve toksisitesini incelemeyi. Bu yöntem Crohn hastalığı ve safra asidi ishalinin tedavisine yönelik önemli biyolojik içgörüler sunar.

Fare bağırsak Ileectomy kaynaklı safra Overaccumulation

Daha fazla video keşfet