Abdominal aort anevrizması Adventitial Vasa Vasorum perfüzyon engelleyerek kemirgen bir Model oluşturulması

Bu prosedürün genel amacı, sıçanlarda ilerleyici aort dilatasyonu ile abdominal aort anevrizması veya AAA'nın başlatılması için aort dokusu hipoksisini indüklemektir. Bu yöntem, aort anevrizmaları araştırma döneminde abdominal aort anevrizmalarının gelişimi ve yırtılmasından sorumlu mekanizmalar hakkındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, sıçan modeli arasındaki morfolojik ve patolojik özelliklerin insan abdominal aort anevrizmalarında görülenlere benzer olmasıdır.

Bu yöntem için ilk olarak, bir insan AAA'sının başka bir olasılığını araştırırken aklımıza geldi. Hipoksi indüksiyon cerrahisinin tek başına metin destekli talimat yoluyla öğrenilmesi zor olduğundan, bu yöntemin görsel gösterimi kritik öneme sahiptir. Prosedürü göstermek, her ikisi de laboratuvarımızdan geçmiş doktorlar olan vasküler cerrahımız Tatsuro Yata ve Hirona Kugo olacak.

Ayak parmağınızı sıkıştırarak uygun sedasyon seviyesini onayladıktan sonra, 300 ila 400 miligramlık bir farenin karın kıllarını tıraş etmek için elektrikli bir tıraş bıçağı kullanın, ardından maruz kalan cildin sıralı alkol ve povidon-iyot solüsyonu dezenfeksiyonu uygulayın. Fareyi ameliyat masasına sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve hayvanın gözlerine merhem sürün. Daha sonra, ventral orta hat abdominal insizyonu yapmak için bir makas kullanın ve abdominal içeriği karın boşluğu içinde paketlemek için steril gazlı bez ve bir yara ekartörü kullanın.

Aortu perivasküler dokudan ayırmak için, aort duvarını açığa çıkararak retroperitonu nazikçe almak ve yırtmak için cımbız kullanın. Daha sonra, sol renal venden perivasküler dokudan bifurkasyona kadar retroperitoneal boşluk içinde infrarenal aortu pul pul dökün. Aort lümenini daraltmayan aorttan uzak bir noktada kanlanmayı engellemek için abdominal aorttan dallanan damarları bağlamak için 5-0 ipek sütür kullanın.

Aort kan akışını engellemek için, renal arterin hemen altına ve aortun çatallanmasının hemen üzerine vasküler klipsler yerleştirin. Aort duvarının yüzeyinde bir nokta kanaması oluşturmaya benzer şekilde, ön aort duvarını kesmek için mikro makası renal arter dallarına bitişik aort klipsinden 5 mm distal olarak yerleştirin ve bir poliüretan kateteri sığ bir şekilde yerleştirmek için 24 gauge kalıcı bir iğne kullanın. Poliüretana suyla dolu 1 mL'lik bir şırınga takın ve kalan kanı aorttan yıkayın.

Daha sonra, 10 mm uzunluğunda yeni bir poliüretan kateter kesin ve bu kateteri aort lümen insizyonuna tamamen yerleştirin. Kateterin orta noktasını insizyonun konumuna uyacak şekilde yeniden konumlandırın ve 8-0 Kesintili bir dikişle kesiyi kapatmak için monofilament sütür. Abdominal aortu 5-0 ipek sütür ve poliüretan kateter kullanarak bir cerrah düğümü ile bağlayın.

Kateter güvenli olduğunda, antegrad kan akışını eski haline getirmek ve brüt aort nabzının varlığını doğrulamak için aort bifurkasyonundaki ve renal arterin altındaki vasküler klipsleri çıkarın. Gazlı bezi çıkardıktan sonra, çıkıntılı bir organı önlemek için karın kesisini iki kat halinde sıkıca kapatmak için 4-0 polipropilen sütür kullanın. Daha sonra, abdominal insizyona topikal lidokain uygulayın ve fareyi tam tazminat elde edene kadar izlemeli bir ısıtma yastığına yerleştirin.

Ameliyat sonrası, standart protokollere göre abdominal aortun iç kenarından dış kenarına kadar maksimum çapı ölçerek ultrason ekogramında genişlemiş aortun zaman seyri gelişimini gözlemleyin. Ameliyattan 28 gün sonra, yeni bir ventral kesi ile karnı açmak için bir neşter kullanın ve anevrizmayı çıkarmak için makas kullanın. Hasat edilen aortları 24 ila 48 saat boyunca% 10 nötr tamponlu formalin içine yerleştirin.

Aortları parafine gömdükten ve aort dokusunun bölümlerini elde ettikten sonra, standart protokollere göre, sabit parafin bölümlerini damıtılmış suda 10 dakika boyunca nemlendirin, ardından Verhoeff hematoksilininde inkübe edin. Paslanma ve korozyon, Verhoeff'in hematoksilen ve van Gieson'un çözelti laboratuvarı aktivitesi ile tanımlanabilir. Bu nedenle bu doku boyalarının tazelik ve kuluçka süreleri arşivleme ve isteğe bağlı boyama için önemlidir.

25 dakika sonra, bölümleri 1 dakikalık üç kez suyla durulayın, ardından farklılaştırıcı solüsyonda 10 ila 30 daldırma yapın. Bölümleri tekrar üç kez suyla durulayın ve numuneleri bir dakika boyunca% 5 sodyum tiyosülfat içine yerleştirin. Başka bir suyla yıkandıktan sonra, numuneleri beş dakika boyunca van Gieson solüsyonuna batırın.

Daha sonra, dokuları 30 saniyelik artan etanol daldırmalarında kurutun, ardından iki adet 5 dakikalık Ksilen inkübasyonu ile temizleyin. Ardından, bölümleri uygun boyutta lamel ile kaplamak için rezonans montaj ortamı kullanın. Bu görüntülerde, kateter yerleştirilmesinden 28 gün sonra temsili bir abdominal aort anevrizması gösterilmektedir.

Transabdominal ultrasonografi ile aortun üst ve alt uçlarının ölçümü, kateter yerleştirildikten hemen sonra dilatasyon olmaksızın normal bir çap ortaya çıkarır, bu da yerleştirmeden yaklaşık 14 gün sonra maksimum boyuta çıkar ve deneysel sürenin sonuna kadar değişmeden kalır veya hafifçe artar. 28. gündeki anevrizmanın histopatolojik analizi, sıfırıncı günde gözlemlenene kıyasla elastik liflerde belirgin bir bozulma olduğunu ortaya koymaktadır. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa yaklaşık bir saat içinde tamamlanabilir.

Bu prosedürü takiben, bireysel seri fonksiyonlar hakkında ek soruları yanıtlamak için in vitro analiz gibi diğer yöntemler gerçekleştirilebilir. Geliştirilmesinden sonra, bu teknik, abdominal aort anevrizması alanındaki araştırmacıların hastalığı belirli hasta demografilerinde keşfetmelerinin yolunu açtı. Bu videoyu izledikten sonra, sıçanlarda ilerleyici aort dilatasyonu ile abdominal aort anevrizmalarının başlatılması için aort dokusu hipoksisinin nasıl indükleneceğini iyi anlamış olmalısınız.

Cerrahi aletlerle çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve bu işlemi gerçekleştirirken her zaman yaralanma ve enfeksiyona karşı önlem alınması gerektiğini unutmayın.