Name: Yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarı, fare modeli neurobehavioral değerlendirmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-11-24T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 32 s
Description: Öğrenin, fare modelinde unilateral karotid arter oklüzyonu ile yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarı oluşturma ve nörob davranışsal değerlendirme yöntemlerini. Bu teknik, serebral palsi ve neonatal inme için preklinik bir model sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışmada hibe Ulusal Araştırma Vakfı (NMK-2014R1A2A1A11052042; 2015M3A9B4067068), Bilim Bakanlığı ve teknoloji, Kore, Kore sağlık teknoloji R & D Projesi (HI16C1012), Sağlık Bakanlığı tarafından desteklenen & Refah, Kore ve "Dongwha" fakülte araştırma yardım programı Yonsei Üniversitesi College of Medicine (6-2016-0126).

Bütün hayvanlar standart bir kafeste (27 x 22,5 × 14 cm3) değerlendirme ve Akreditasyon, laboratuvar hayvan bakım (AAALAC) Derneği tarafından akredite edilmiş ve yiyecek verilen bir tesiste yer alan ve 12-h açık/koyu alternatif altında ad libitum su geçiş yapar. Yazarlar hayvan koruma hükümlerine takip ve deneysel prosedürler kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi Yonsei Üniversitesi Üniversite Tıp tarafından kabul edildi (IACUC No 2010-0252; 2013-0220).
1. fare modeli yenidoğan HI beyin hasarı
<ol><li>Belgili tanımlık pups isoflurane ile anestezi.<ol>
<li>Belgili tanımlık pups (daha az 5) anesthetizing bir kutuya yerleştirin ve kapağını kapatın.</li>
		<li>Yaklaşık 15 dakika anesthetizing sistem açın; gaz ve tablo üst anestezi makinasıyla isoflurane ayarlayın. 1, 5 L/dak ayarlama isoflurane Buharlaştırıcı anestezi indüksiyon için 3-%5 için oksijen Flowmetre ayarlayın.</li>
		<li>15 dk sonra isoflurane Buharlaştırıcı anestezi bakımı için 1-%2 için ayarlayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Tam imzalat bir yavru bir diseksiyon mikroskop (araştırmacı karşı karşıya karin) altında yatıyordu ve bant ile sabitleyin.</li>
	<li>Bir ~0.7-mm kesi sterilize makas kullanarak boynundan olun.</li>
	<li>Dikkatle sterilize forseps kullanarak yağ dokusu kaldırmak ve tek taraflı şu Şah damarı açığa.</li>
	<li>5-0 absorbe dikiş ile tek taraflı sağ Karotis arter ligate.</li>
	<li>Kesik boyun ile 5-0 Dikiş dikiş.</li>
	<li>Her yavru için kurtarma için 1 h 37 ° C sıcak hipoksik odası yerleştirin. Odası kapağını kapatmayın.</li>
	<li>Ameliyattan sonra 1 h ne zaman belgili tanımlık pups tamamen uyanık, hipoksi odası kapağını kapatın ve hipoksik koşullarını (%8 O2 , %92 N2) oluşturmak için gaz seviyesi azaltın.</li>
	<li>Hipoksi, 90 dakika sonra yavrular için onların kafes dönmek.</li>
	<li>Bir hafta sonra HI beyin hasarı, 1. adımı yineleyin.<ol>
<li>Anestezi sonra bir kesi ile sterilize makas ve forseps beyin lezyon sağ hemisfer posterolateral alanında tanımlamak için kafa derisi içinde olun. Not: Bu tedavi hipoksi pups içinde neden olmaktadır. Varlığı ve tüm farelerde beyin hasarının ölçüde görsel olarak değerlendirildi yarı saydam kafatası ile çıplak gözle. Boyut veya renk değişikliği (yani, beyin lezyon) hacmi tarafından belirlenen pups gruplar halinde sınıflandırılır. Hiçbir görünür kortikal yaralanma varsa, fare "hiçbir kortikal yaralanma" grup olarak sınıflandırılır. Görünür bir kortikal yaralanma (yani, bir lezyon sağ hemisfer) ise, fare "kortikal yaralanma" grup olarak sınıflandırılır. Fareler sınıflandırılması gruplar halinde ameliyat sonrası bir hafta beri beyin örnekleri türleri Morfoloji açıkça kurban1,2,3sırada tanımlanır gruplandırmalar değiştirilebilir, 4.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55838/55838fig1v3.jpg"> Resim 1: farelerde neonatal HI beyin hasarı modelleme. (A) bir yedi günlük eski fare yavru ameliyat oldu ve tek taraflı şu Karotid arter bakmaksızın. (B) pups hipoksik Odası %8 O2 ve % 92 N290 dk için yerleştirildi. (C, D ve E) Yenidoğan HI yaralanma ile beyin hasar çeşitli önem gösterdi ve hasarı derecesine göre kategorize edildi. Haftası 14, beyin elde edilmiştir ve bu lezyonlar görüntülenir. (C) bir "hiçbir kortikal yaralanma" gizli bir beyin görüntüsünü. Her iki (D) ve (E) "kortikal yaralanma" grup olarak sınıflandırıldı. (F, G ve H) Temsilcisi MRI (c), (D) ve (E) fareler, anılan sıraya göre. (F) hasar oluşur içinde sarı bir ok ile gösterilir ve sağ hemisfer lezyonlarının da sarı oklarla (G ve H) gösterilir. Ölçek çubukları = 1 mm <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55838/55838fig1v3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
2. yenidoğan davranış testleri
Not: Burada, 6 haftalık davranış testleri yapıldı.
<ol><li>
Pasif kaçınma görev. Not: bellek işlevi öğrenme ve caydırıcı bir uyarıcı kaçınma dayalı değerlendirmek için adım aracılığıyla bir iki bölmeli PAT yapılan13,14,15,16olması gerekir.<ol>
<li>Bir fare bir PAT aparatı pleksiglas Servisi kutusunu (41,5 × 21 × 35 cm3) parlak bölmesine yerleştirin.</li>
		<li>Sonra 30 s, giyotin kapı açık ve koyu bölmesine taşımak fare gecikme süresi saatlerini kaydetmek (300 s).</li>
		<li>Fare tüm dört bacaklarda tam içinde karanlık bölme olduğunda Giyotin kapıyı kapat.</li>
		<li>Elektrikli ayak şok yönetmek (0,5 mA) 2 s ve onun kafes fare dönmek için.</li>
		<li>Fareyi parlak yerde 24 saat elektrik ayak şoktan sonra değiştirin.</li>
		<li>Fare tamamen parlak kompartımanda yerleştirildikten sonra Giyotin kapı 10 s açın ve karanlık bölmesine taşımak fare gecikme süresi saatlerini kaydetmek (300 s).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Merdiven yürüme testi. Not: Merdiven basamak yürüyen görev ince bozuklukları motor işlevleri birleştirerek nitel ve nicel analizler yetenekli yürüyen17,18arasında ayrımcılık için izin verir.<ol>
<li>Bir video kamerayı açın.</li>
		<li>Bir fare merdiven başlangıç paneli üzerindeki yeri ve hemen kayıt başlar.</li>
		<li>Fare bacaklarda üzerinde odaklanan video kaydetmek.</li>
		<li>Fare merdivenin son paneli dokunduğunda kaydı durdur. İleri geri seyahat dört kere tekrar edin.</li>
		<li>Video kaydı analiz ve el ile her forelimb notları aşağıdaki gibi sayma:<ol>
<li>Bir bilgisayar yavaş hızda video kaydı Çal (0.1 x) ve adımları el ile saymak.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Kavrama gücü test. Not: Kavrama gücü test bir itme-çekme ağırlık ölçme esneklik detektörler içerir bir kavrama gücü ölçer kullanılarak gerçekleştirilir.<ol>
<li>Kavrama gücü aparatı akrilik bir panel üzerine düzeltmek.</li>
		<li>Akrilik panelde yer bir fare ve onun kuyruk tutun.<ol>
<li>Fare erişebilmesi kuyruğunu tutan el ve kavrama cihazları metal tel taşıyın.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Fareyi bir üçgen parça metal tel (2 mm çapında); kulpları kadar birden fazla deneme izin tepe Kuvvetleri gram cihaz tarafından otomatik olarak kaydedilir. Not: ortalama en yüksek güç üç denemeler analiz19,20,21için kullan.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Yager, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+hypoxic-ischemic+brain+damage+in+the+newborn%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Pediatr+Neurol%22%5BJournal%5D)">Animal models of hypoxic-ischemic brain damage in the newborn.</a> Semin Pediatr Neurol. 11 (1), 31-46 (2004).</li>
<li>Vannucci, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+of+perinatal+hypoxic-ischemic+brain+damage%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Rat model of perinatal hypoxic-ischemic brain damage.</a> J Neurosci Res. 55 (2), 158-163 (1999).</li>
<li>Im, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+striatal+neurogenesis+enhances+functional+recovery+in+an+adult+animal+model+of+neonatal+hypoxic-ischemic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Induction of striatal neurogenesis enhances functional recovery in an adult animal model of neonatal hypoxic-ischemic brain injury.</a> Neuroscience. 169 (1), 259-268 (2010).</li>
<li>Clowry, G. J., Basuodan, R., Chan, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+are+the+Best+Animal+Models+for+Testing+Early+Intervention+in+Cerebral+Palsy%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">What are the Best Animal Models for Testing Early Intervention in Cerebral Palsy?</a> Front Neurol. 5 (258), 1-17 (2014).</li>
<li>Colver, A., Fairhurst, C., Pharoah, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+palsy%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Cerebral palsy.</a> Lancet. 383 (9924), 1240-1249 (2014).</li>
<li>Levine, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anoxic-ischemic+encephalopathy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Anoxic-ischemic encephalopathy in rats.</a> Am J Pathol. 36, 1-17 (1960).</li>
<li>Rice 3rd, J. E., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+immaturity+on+hypoxic-ischemic+brain+damage+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat.</a> Ann Neurol. 9 (2), 131-141 (1981).</li>
<li>Lafemina, M. J., Sheldon, R. A., Ferriero, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+hypoxia-ischemia+results+in+hydrogen+peroxide+accumulation+in+neonatal+but+not+adult+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Res%22%5BJournal%5D)">Acute hypoxia-ischemia results in hydrogen peroxide accumulation in neonatal but not adult mouse brain.</a> Pediatr Res. 59 (5), 680-683 (2006).</li>
<li>Brazel, C. Y., Rosti 3rd, R. T., Boyce, S., Rothstein, R. P., Levison, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perinatal+hypoxia%2Fischemia+damages+and+depletes+progenitors+from+the+mouse+subventricular+zone%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Perinatal hypoxia/ischemia damages and depletes progenitors from the mouse subventricular zone.</a> Dev Neurosci. 26 (2-4), 266-274 (2004).</li>
<li>Buono, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+mouse+neural+precursor+expansion+after+neonatal+hypoxia-ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of mouse neural precursor expansion after neonatal hypoxia-ischemia.</a> J Neurosci. 35 (23), 8855-8865 (2015).</li>
<li>Rumajogee, P., Bregman, T., Miller, S. P., Yager, J. Y., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+Hypoxia-Ischemia+Models+for+Cerebral+Palsy+Research%3A+A+Systematic+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Rodent Hypoxia-Ischemia Models for Cerebral Palsy Research: A Systematic Review.</a> Front Neurol. 7 (57), 1-20 (2016).</li>
<li>Hagberg, H., Peebles, D., Mallard, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+white+matter+injury%3A+comparison+of+infectious%2C+hypoxic-ischemic%2C+and+excitotoxic+insults%5BTitle%5D)+AND+%22Ment+Retard+Dev+Disabil+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Models of white matter injury: comparison of infectious, hypoxic-ischemic, and excitotoxic insults.</a> Ment Retard Dev Disabil Res Rev. 8 (1), 30-38 (2002).</li>
<li>Wi, S., Yu, J. H., Kim, M., Cho, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+Vivo+Expression+of+Reprogramming+Factors+Increases+Hippocampal+Neurogenesis+and+Synaptic+Plasticity+in+Chronic+Hypoxic-Ischemic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plast%22%5BJournal%5D)">In Vivo Expression of Reprogramming Factors Increases Hippocampal Neurogenesis and Synaptic Plasticity in Chronic Hypoxic-Ischemic Brain Injury.</a> Neural Plast. 2016 (2580837), 1-11 (2016).</li>
<li>Lu, Y., Christian, K., Lu, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BDNF%3A+a+key+regulator+for+protein+synthesis-dependent+LTP+and+long-term+memory%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">BDNF: a key regulator for protein synthesis-dependent LTP and long-term memory?</a> Neurobiol Learn Mem. 89 (3), 312-323 (2008).</li>
<li>Manabe, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facilitation+of+long-term+potentiation+and+memory+in+mice+lacking+nociceptin+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Facilitation of long-term potentiation and memory in mice lacking nociceptin receptors.</a> Nature. 394 (6693), 577-581 (1998).</li>
<li>Alonso, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BDNF-triggered+events+in+the+rat+hippocampus+are+required+for+both+short-+and+long-term+memory+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">BDNF-triggered events in the rat hippocampus are required for both short- and long-term memory formation.</a> Hippocampus. 12 (4), 551-560 (2002).</li>
<li>Seo, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+Situ+Pluripotency+Factor+Expression+Promotes+Functional+Recovery+From+Cerebral+Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">In Situ Pluripotency Factor Expression Promotes Functional Recovery From Cerebral Ischemia.</a> Mol Ther. 24 (9), 1538-1549 (2016).</li>
<li>Kim, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+enrichment+enhances+synaptic+plasticity+by+internalization+of+striatal+dopamine+transporters%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Environmental enrichment enhances synaptic plasticity by internalization of striatal dopamine transporters.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 36 (12), 2122-2133 (2015).</li>
<li>Lee, M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alteration+of+synaptic+activity-regulating+genes+underlying+functional+improvement+by+long-term+exposure+to+an+enriched+environment+in+the+adult+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Neurorehabil+Neural+Repair%22%5BJournal%5D)">Alteration of synaptic activity-regulating genes underlying functional improvement by long-term exposure to an enriched environment in the adult brain.</a> Neurorehabil Neural Repair. 27 (6), 561-574 (2013).</li>
<li>Rha, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+constraint-induced+movement+therapy+on+neurogenesis+and+functional+recovery+after+early+hypoxic-ischemic+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Med+Child+Neurol%22%5BJournal%5D)">Effects of constraint-induced movement therapy on neurogenesis and functional recovery after early hypoxic-ischemic injury in mice.</a> Dev Med Child Neurol. 53 (4), 327-333 (2011).</li>
<li>Chong, H. J., Cho, S. R., Jeong, E., Kim, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Finger+exercise+with+keyboard+playing+in+adults+with+cerebral+palsy%3A+A+preliminary+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exerc+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Finger exercise with keyboard playing in adults with cerebral palsy: A preliminary study.</a> J Exerc Rehabil. 9 (4), 420-425 (2013).</li>
<li>Chong, H. J., Cho, S. R., Kim, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hand+rehabilitation+using+MIDI+keyboard+playing+in+adolescents+with+brain+damage%3A+a+preliminary+study%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroRehabilitation%22%5BJournal%5D)">Hand rehabilitation using MIDI keyboard playing in adolescents with brain damage: a preliminary study.</a> NeuroRehabilitation. 34 (1), 147-155 (2014).</li>
<li>Seo, J. H., Yu, J. H., Suh, H., Kim, M. S., Cho, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast+growth+factor-2+induced+by+enriched+environment+enhances+angiogenesis+and+motor+function+in+chronic+hypoxic-ischemic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Fibroblast growth factor-2 induced by enriched environment enhances angiogenesis and motor function in chronic hypoxic-ischemic brain injury.</a> PLoS One. 8 (9), e74405(2013).</li>
<li>Washington, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+injury+severity+on+behavior%3A+a+phenotypic+study+of+cognitive+and+emotional+deficits+after+mild%2C+moderate%2C+and+severe+controlled+cortical+impact+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">The effect of injury severity on behavior: a phenotypic study of cognitive and emotional deficits after mild, moderate, and severe controlled cortical impact injury in mice.</a> J Neurotrauma. 29 (13), 2283-2296 (2012).</li>
<li>Cho, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astroglial+Activation+by+an+Enriched+Environment+after+Transplantation+of+Mesenchymal+Stem+Cells+Enhances+Angiogenesis+after+Hypoxic-Ischemic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Astroglial Activation by an Enriched Environment after Transplantation of Mesenchymal Stem Cells Enhances Angiogenesis after Hypoxic-Ischemic Brain Injury.</a> Int J Mol Sci. 17 (9), 1-15 (2016).</li>
<li>Tsuji, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+reproducible+model+of+neonatal+stroke+in+mice%3A+comparison+with+a+hypoxia-ischemia+model%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">A novel reproducible model of neonatal stroke in mice: comparison with a hypoxia-ischemia model.</a> Exp Neurol. 247, 218-225 (2013).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir rakip ilgi alanlarına sahip.

Bu çalışmada biz HI beyin hasarı yenidoğan P7-10 CD-1 Mouse indüklenen ve beyin lezyon ile ilgili motor ve Bilişsel açıkları tespit. Bu işlem sırasında tek taraflı şu Karotid arter tıkanıklığı son derece önemliydi. Bu adımda, arter zarar görmüş ve yırtılmış. Çoğu yavru bir arter gözyaşı deneyimli öldü. Tersine, araştırmacılar tek taraflı şu Karotid arter yerine başka bir kan damarı bakmaksızın, yavru fok beyin sadece hafif hasar gördü ve hiçbir önemli fenotip24gözlenen.
<p class="jove_content"...

Yenidoğan HI beyin hasarı erken çocukluk (yaklaşık 1000 çocuk başına iki hasta)1,2,3,4,5sırasında oluşur. Yenidoğan HI beyin hasarı ile ilgili çalışmalar, ve önemli bir kurulan yenidoğan HI beyin yaralanması fare modeli kullanarak HI beyin hasarı in vivo preklinik araştırma kolaylaştırabilir.
Geleneksel HI modelleri üzerinde yetişkin fareler6kullanılır. Kardiyolojik modeli için pirinç-Vannucci yöntemi P7 fareler7,8yaygın olarak kullanılır. Sıçanlar ve fareler her iki kemirgen olsa bile biraz farklı9,10, olduğundan Ancak, biz bir değiştirilmiş pirinç-Vannucci yöntemi üzerinde CD-1 pups P7-10, tabanlı P7-10 dönemi olduğunu gösterdi önceki çalışmaları üzerinde gerçekleştirilen featuring olgunlaşmamış oligodendrocytes, insan terim P011,12karşılık gelen. Yenidoğan HI fare modeli P7-10 pups içinde tek taraflı Karotid arter her iki tüp ligasyonu ve fareler maruz hipoksi %8 oksijen ile kurulur.
Fareyi sağ hemisfer posterolateral alanında değişik derecelerde beyin lezyonları gösterdi yordamı tabi. Bilişsel ve motor açıkları, neurobehavioral değerlendirmeler üzerinde PAT dayalı tanımlamak için test ve kavrama gücü testi yürüyen merdiven yapıldı. Sigara işletilen (Yani, normal) ve HI fareler arasındaki farkları analiz edildi. Bu eser HI fare modeli hakkında temel bilgi sunar. MRI görüntüleri beyin hasar motor ve Bilişsel testleri kullanarak şiddetine göre ayrılmış farklı fenotipleri göstermektedir.

<table><tbody><tr><td>Hipoksik oda</td><td>Jeung Do Bio & Plant Co</td><td>Deneysel Oluşturucu</td><td></td></tr><tr><td>PAT cihazı</td><td>Jeung Do Bio & Plant Co</td><td>Experimental Builder</td><td></td></tr><tr><td>Merdiven basamağı yürüyen</td><td>Jeung Do Bio & Plant Co</td><td>Deneysel Oluşturucu</td><td></td></tr><tr><td>SDI Kavrama Gücü Sistemi</td><td>San Diego Instruments Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kavrama Gücü Ölçer</td><td>Ugo Basile</td><td>47200</td><td></td></tr><tr><td>Harvard Aparatı Fluovac anestezi sistemi&nbsp;</td><td>Harvard Aparatı Anestezi</td><td></td><td></td></tr><tr><td>kutusu</td><td></td><td></td><td>akrilik kutu</td></tr><tr><td>I-Fran Sıvı (İzofloran)</td><td>Hana Pharm. Co., Ltd.</td><td></td><td>Genel Anestezikler (izofluran 100ml)</td></tr><tr><td>CD-1 fareler</td><td>Orient Co., Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mavi Naylon Mono Emilmeyen sütür 5-0 50cm</td><td>Ailee Co., Ltd.</td><td>NB 521</td><td></td></tr><tr><td>IBM SPSS İstatistikleri</td><td>IBM</td><td>Ver. 23</td><td></td></tr></tbody></table>

yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarı, fare modeli neurobehavioral değerlendirmesi

Neurobehavioral Assessments in a Mouse Model of Neonatal Hypoxic-ischemic Brain Injury

Biz tek taraflı Karotis arter tıkanıklığı bir yenidoğan hipoksik-iskemik (hı) model oluşturmak için CD-1 fareler üzerinde gerçekleştirilen ve neurobehavioral işlevleri olmayan işletilen (Yani, için karşılaştırıldığında bu farelerde inceleyerek yenidoğan HI beyin hasarı etkileri araştırıldı Normal) fareler. Çalışma sırasında pirinç-Vannucci'nın yöntemi postnatal gün 7-10 (P7-10) farelerde neonatal HI beyin hasar ikna etmek için kullanıldı. HI işlem üzerinde belgili tanımlık pups tek taraflı Karotis arter ligasyonu ve hipoksi (%8 O2 ve %92 N2 90 dk) maruz tarafından gerçekleştirildi. Bir hafta sonra ameliyat, hasarlı beyin yarı saydam kafatası ile çıplak gözle değerlendirildi ve devamsızlık ("hiçbir kortikal yaralanma" grubu) veya kortikal yaralanma ("kortikal yaralanma" grubu) varlığı göre alt gruplar halinde kategorize, sağ hemisfer bir lezyon gibi. 6 haftasında bilişsel ve motor işlevlerinin değerlendirmek için aşağıdaki neurobehavioral testler gerçekleştirilmiştir: pasif kaçınma görev (PAT), merdiven test ve kavrama gücü testi yürüme. Bu davranış testleri yenidoğan HI beyin hasarının etkilerini belirlemede yararlı ve nörodejeneratif hastalıklar diğer fare modellerinde kullanılır. Bu çalışmada yenidoğan HI beyin yaralanması fare Sağ Yarımküre hasar denk motor açıkları gösterdi. Davranışsal test sonuçlarını beyin felci veya neonatal inme hastalarında gibi insan yenidoğan HI hastalarda gözlenen açıkları alakalı. Bu çalışmada yenidoğan HI beyin hasarı bir fare modeli kurulan ve motor açıkları ve kognitif bozukluk sigara çalışan fareler için karşılaştırıldığında farklı derecelerde gösterdi. Bu eser HI fare modeli üzerinde temel bilgileri sağlar. MRI görüntüleri beyin hasarı şiddetine göre motor ve Bilişsel testleri tarafından ayrılmış farklı fenotipleri göstermektedir.

Tüm veriler ortalama ± standart hata ortalamaya (SEM) ifade edilir. Değişkenleri iki grup arasında karşılaştırma bağımsız veya eşleştirilmiş tkullanılarak yapılmıştır-testi SPSS istatistik yazılımı. Bir p-değeri < 0,05 olarak istatistiksel olarak anlamlı kabul.
Yenidoğan HI yaralanma ile beyin hasar farklı önem gösterdi ve buna göre kategorize edildi (şekil 1 c- E). Beyin Haftası 1...

Tek taraflı Karotis arter tıkanıklığı postnatal gününde gerçekleştirilen 7-10 CD-1 fare pups yenidoğan hipoksik-iskemik (hı) model oluşturmak ve HI beyin hasarı etkileri araştırıldı. Neurobehavioral işlevleri olmayan çalışan normal farelere göre bu farelerde görmüştük.

Yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarı, fare modeli neurobehavioral değerlendirmesi

We performed unilateral carotid artery occlusion on CD-1 mice to create a neonatal hypoxic-ischemic (HI) model and investigated the effects of neonatal HI ...

Kognitif ve motor testlerin ardından uygulanan hipoksik-iskemik neonatal beyin hasarı cerrahisinin genel amacı, bu tür yaralanmaları ve ilgili beyin hasarını incelemek için bir fare modeli oluşturmaktır. Bu yöntem, bu tür yaralanmaların motor ve kognitif fonksiyonları nasıl etkilediği gibi neonatal hipoksik-iskemik beyin hasarına ilişkin temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, iyi bilinmesi ve yaygın olarak kullanılmasıdır.Aynı zamanda serebral palsi ve neonatal inmeler için de bir preklinik modeldir. Genellikle, bu yöntemde yeni olan kişiler, sağ tek taraflı karotis arterini belirlemek zor olduğu için güçlük çekeceklerdir. Prosedürü benimle birlikte laboratuvarımızdan lisansüstü öğrencisi Yoon-Kyum Shin uygulamalı olarak gösterecektir.En az beş adet P-yedi fare yavrusu anesteziye alındıktan sonra, bir yavruyu karnı yukarı bakacak şekilde diseksiyon mikroskobu altına yerleştirin. Ardından, boyun bölgesini alkol ile temizleyin. Cerrahi işleme başlamak için, makas kullanarak boyun bölgesinde 0,7 mm'lik bir insizyon yapın.Ardından, tek taraflı sağ karotis arteri açığa çıkana kadar adipoz dokuyu pens yardımıyla dikkatlice uzaklaştırın. Sonra, 5-0 sütür kullanarak tek taraflı sağ karotis arterini bağlayın. Şimdi, boyundaki insizyonu 5-0 naylon ile dikin ve insizyon bölgesini sterilize edin.Ardından, yavrunun kapağı açık bir 37 °C hipoksik oda içerisinde yaklaşık bir saat boyunca iyileşmesini bekleyin. İyileşmesi için cerrahi işlem uygulanmış başka bir fareyi hipoksik odaya yerleştirin. Yavruların tamamı tamamen uyandığında, oda kapağını kapatın ve hipoksik koşulları oluşturmak için gaz seviyelerini düşürün.90 dakikalık hipoksiden sonra, beyin hasarı oluşmuş yavruları kafeslerine geri koyun. Bir hafta sonra, hasarın kanıtlarını incelemek için yavruları daha önce olduğu gibi cerrahiye hazırlayın. Sağ hemisferin posterolateral bölgesindeki beyin lezyonunu belirlemek için saçlı deride bir insizyon yapın.Kortikal yaralanma ve hipokampal yaralanma kanıtları için yarı saydam kafatası üzerinden inceleme yapın. Buna göre, yavruları yaralanmış veya yaralanmamış kontrol grupları olarak kategorize edin. Kontrol işleminin ardından, kafa derisini sütür ile kapatın ve insizyon bölgesini sterilize edin.Fareler altı haftalık olduğunda, belleklerini bir uyaranın öğrenilmesi ve ondan kaçınma durumuna göre değerlendirin. Bu görev için ticari, iki bölmeli, geçişli pasif kaçınma düzeneği kullanın. Başlamak için, bir fareyi kutunun aydınlık bölmesine 30 saniye boyunca yerleştirin.Ardından, bölmeler arasındaki kapıyı açın ve hayvanın karanlık bölmeye girme süresini kaydedin. Görevin gerçekleştirilmesi için 300 saniyeye kadar süre tanıyın. Farenin dört uzvunun tamamı karanlık bölmeye girdiğinde kapıyı kapatın.Ardından, iki saniye boyunca 1/2 mA elektrikli ayak şoku uygulayın ve fareyi kafesine geri koyun. 24 saat sonra testi tekrarlayın. Bu kez, fareye karanlık bölmeye geçmesi için tam 300 saniye süre tanıyın ve fareye şok uygulamayın.Motor fonksiyonlardaki hafif bozulmaları ayırt etmek için altı haftalık farelere, hem kalitatif hem de kantitatif analizler kullanarak merdiven yürüyüş testi uygulayın. Öncelikle merdiven düzeneğini kurun ve ardından farenin düzenek üzerindeki ekstremite hareketlerini kaydetmek için bir video kamera yerleştirin. Sonrasında, bir fareyi başlangıç paneline yerleştirin ve video kamera ile kayda başlayın.Videonun bacakları net bir şekilde gösterdiğinden emin olun. Fare, merdiven düzeneğinin son paneline dokunduğunda kaydı durdurun. Ardından, fareyi başlangıç paneline geri götürün ve farenin düzeneği tekrar geçişini kaydedin.Her deneme tarihinde, fare başına bu işlemi toplam dört kez tekrarlayın. Daha sonra, videoyu analiz ederken, videoyu 1/10 hızında oynatarak her bir ekstremitenin yaptığı kayma sayısını manuel olarak sayın. Bir ekstremitenin çubuklar arasından kayması, bir kayma olarak kabul edilir.Fareler altı haftalık olduğunda, kavrama güçlerini değerlendirin. Tamamı bir panele sabitlenmiş, iki milimetre çapında üçgen bir tele monte edilmiş bir itme/çekme gerinim ölçer (strain gauge) kullanın. Fareyi kuyruğundan tutarak panel üzerine yerleştirin.Ardından, farenin ön bacaklarıyla metal tele sadece ulaşmasına izin verin. Fareler teli kavrar kavramaz, tutuşlarını bırakana kadar kuyruğunu nazikçe çekin. Aparat, tel üzerindeki peak force değerini gram cinsinden kaydedecektir.Fareye dinlenme süresi vermeden önce bu testi beş kez tekrarlayın. Kavrama gücü testi sırasında, doğru performansların belirgin hareketleri gözlemlenir. Fareyi kas yorgunluğunu azaltmak için en az bir dakika dinlendirmeden önce, beş deneme boyunca bu hareketleri tespit etmeye çalışın.Fare en az bir dakika dinlendikten sonra, beş denemelik seriyi tekrarlayın. Ardından, fareye bir dinlenme süresi daha verin ve o test günü için seriyi son bir kez daha gerçekleştirin. Analiz için, veriler arasından tek bir ön bacak veya her iki ön bacak için elde edilen en yüksek üç skorun ortalamasını kullanın.14 haftalık hipoksi-iskemi hasarlı hayvanların beyinleri hasat edildikten sonra, beyinler morfolojik olarak kortikal hasarın olmadığı, hafif hasarlı veya şiddetli hasarlı şeklinde değerlendirildi. Aynı hayvanlar bir hafta önce MRI ile taranmıştı ve bu sonuçlar da oldukça açıklayıcıydı. Morfolojik olarak normal görünen beyinde bile hippokampusta hafif hasar izlendi.Altı haftalık olduklarında, yani yaralanmadan beş hafta sonra, fareler çeşitli davranışsal görevlerle değerlendirildi. Hipoksi-iskemi yaralanmalı fareler, 24 saatlik pasif kaçınma görevinde bilişsel bozukluk gösterdiler. Sadece sağ hemisfer hasar gördüğü için, fareler hemiplejik motor fonksiyonlar sergilediler.Bu durum, her bir ön bacak için merdivenin enine basamaklarındaki kayma yüzdesindeki farkla ortaya konmuştur. Ayrıca, kavrama gücü beyindeki motor korteksi içerdiğinden, normal ve kortikal yaralanma grupları kavrama gücünde farklılıklar göstermiştir. Normal kontroller ile kategorik olarak yaralanmamış fareler arasında herhangi bir fark gözlemlenmemiş, ancak yaralı farelerin belirgin şekilde yetersiz olduğu görülmüştür.Bu videoyu izledikten sonra, neonatal hipoksik-iskemik fareler oluşturmak için tek taraflı sağ karotis arterinin nasıl ligat edileceği ve takip davranış analizlerinin nasıl gerçekleştirileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. Yaralanmadan yedi gün sonra kortikal beyinde görünür bir hasar olmasa bile, bir MRI'ın hipokampal hasarı ortaya çıkarabileceğini belirtmek önemlidir. Ayrıca, yavrulara nazik davranmayı ve cerrahi işlemi mümkün olduğunca hızlı tamamlamayı hatırlamak önemlidir.Yavruların derileri çok zayıf ve incedir, bu nedenle çok dikkatli olun.

neurobehavioral-assessments-mouse-model-neonatal-hypoxic-ischemic

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Hipoksik-iskemik beyin hasarı için postnatal sıçan modelinde, insan yenidoğan hipoksik iskemik ensefalopati (HIE) köklü bir model. Bu makalede, doğum sonrası sıçan Yavrularda HIE modeli açıklanmaktadır.

Perinatal İskemi Hipoksik İskemik Ensefalopati Modeli

Biz periventriküler lökomalazi (PVL), prematüre bebeklerde periventriküler beyaz cevher lezyonları ile karakterize baskın beyin hasarı fare modelleri kurdu. Hipoksi / iskemi / sistemik enfeksiyon olmadan PVL birincil nedenleri. Tek taraflı karotis ligasyonu ve / lipopolisakkarid enjeksiyon olmadan hipoksi maruz P6 fareler PVL benzeri lezyonlar oluşturur.

Periventriküler lökomalazi Fare Modelleri

Video, yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarını incelemek için bir fare modeli oluşturma prosedürünü göstermektedir. Cerrahi olarak iskemiyi indükleme ve beyin hasarını şiddetlendirmek için hayvanı hipoksiye maruz bırakma adımlarını ana hatlarıyla belirtir. Son olarak, ortaya çıkan beyin lezyonlarının nasıl değerlendirileceğini gösterir ve fare modelinin daha fazla bilimsel araştırma için hazırlanmasını sağlar.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Beyin Hasarının Fare Modelinin Oluşturulması

Kaynak: Ouyang, Y., et al. Fare Serebral Hipoksi-iskemisi Sırasında Eş Zamanlı PET/MRG Görüntüleme. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, eşzamanlı pozitron emisyon tomografisi (PET) ve manyetik rezonans görüntüleme (MRI) yoluyla serebral hipoksi hasarını değerlendirmek için bir teknik göstermektedir. Anestezi uygulanmış bir fare, ortak karotis arter (CCA) ligasyonuna tabi tutulur, bu da bir beyin yarım küresine kan akışını azaltır ve onu hipoksiye bağlı yaralanmaya yatkın hale getirir. PET ve MRG...

Bir fare modelinde serebral hipoksi-iskeminin neden olduğu beyin hasarının görüntülenmesi

Perinatal asfiksiyi takiben hipoksik-iskemik ensefalopati hayvan modelleri kullanılarak incelenebilir. Yenidoğan hipoksik-iskemik ensefalopatisinin bir domuz yavrusu modeli oluşturmak için gerekli prosedürleri gösteriyoruz.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

Sunulan, fare yenidoğan motor testlerinin kısa bir bataryasıdır. Bu testler kullanılarak, çeşitli neonatal motor bozukluklarda neonatal motor defisitler gösterilebilir. Standartlaştırılmış bir test setine sahip olarak, farklı çalışmalardan elde edilen sonuçlar karşılaştırılabilir ve bu da gruplar arasında daha iyi ve doğru raporlamaya olanak tanır.

Cerebral Palsy bir Yenidoğan Fare Modeli Motor Testleri A Pil

Silikon kaplı bir sütür kullanılarak orta serebral arterin tıkanmasıyla inen bir fare inme modelini tarif ediyoruz. Protokol, kalıcı oklüzyon veya geçici bir iskemiyi indüklemek için uygulanabilir ve ardından reperfüzyon uygulanabilir.

Enfarktüs Bölgesi Orta Arter Tıkanıklığı Tekniği ve Görselleştirme kullanma Fare İskemik İnme ve İskemi-reperfüzyon indüksiyon

Bu makalede hipoksi-iskemi geçiren yenidoğan farelerde birden fazla derinlik elektrodu kullanılarak sürekli video EEG kayıtları için bir yöntem açıklanmaktadır.

Yenidoğan Farelerde Hipoksi-İskemi Sırasında Sürekli Video Elektroensefalogram

Pediatrik sarsıntılar, fizyolojik ve psikolojik bozulmalarla birlikte uzun süreli sekellere neden olabilir. Bu pediatrik beyin sarsıntısı fare modeli, uzun süreli nöroinflamasyon, beyaz cevher değişiklikleri ve davranışsal işlev bozukluğu ile nöronal modifikasyonlar ile sonuçlanır. Model, yaşam süresi değişikliklerini değerlendirmek için diferansiyel çarpma konumlarına veya tekrarlanan sarsıntılara uyarlanabilir.

Farelerde Pediatrik Beyin Sarsıntısı Modeli: Uzun Süreli Bozukluklarla Kapalı Kafa Travması (ÇOCUK) 

Burada, yenidoğan farelerde hipoksiyi indüklemek için değişen oksijen konsantrasyonlarına sahip kontrollü ortamlarda vererek bir protokol sunuyoruz. Doğumda oksijen varyasyonlarına maruz kalan fare modelleri, otizm gibi davranışsal fenotipik değişikliklerin indüksiyonunda yer alan miRNA'ların ekspresyonunu kalıcı olarak değiştirmiştir.

Hipoksi, farelerde otizm spektrum bozukluğunun mendel dışı kalıtımında yer alan miRNA seviyelerini değiştirir

Öğrenin, fare modelinde unilateral karotid arter oklüzyonu ile yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarı oluşturma ve nörob davranışsal değerlendirme yöntemlerini. Bu teknik, serebral palsi ve neonatal inme için preklinik bir model sunar.

Yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarı, fare modeli neurobehavioral değerlendirmesi

Daha fazla video keşfet