Optik Koherens tomografi: Fare retina Ganglion hücreleri Vivo içinde görüntüleme

Bu el yazması ile yüksek çözünürlüklü spektral etki alanı optik Koherens tomografi (SD-Ekim) fare retinanın vivo içinde görüntüleme için bir protokol açıklar. Retina ganglion hücrelerinin (RGC) peripapillary bölgede çeşitli tarama ve açıklanan yaklaşımlar miktarının üzerinde duruluyor.

Bu deneyin genel amacı, retina kalınlığının doğru bir değerlendirmesini hızlı bir şekilde elde etmek için optik koherens tomografi veya OCT kullanmaktır. OCT, optik nöropati gibi oftalmoloji alanındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, fare retinal ganglion hücrelerindeki yapısal değişiklikleri tespit etmek için non-invaziv bir yöntem olmasıdır.

Bu teknik gerçekten ilginçtir, çünkü optik nöropatide tedavinin etkisini test etmek için non-invaziv, güvenli ve saygın bir yöntemdir. Başlamak için önce lense uygun referans kolu ayarlarını yapın. Ardından, güç kaynağını ve bilgisayarı açın.

Bilgisayar hazır olduğunda, görüntüleme programını başlatın. Yeni bir klinik çalışma oluşturun ve istenen protokolleri ekleyin. Hasta muayenesi bölümüne gidin ve muayene varsayılanlarını ayarlayın.

Yeni hasta eklemek için hasta muayenesi bölümünde hasta ekle'ye tıklayın ve ilgili hasta bilgilerini girin. Ardından tıklayın, sınav ekleyin, sınavı başlatın ve ilk olarak ölçülecek gözden başlayarak istenen protokolü seçmek için listeden önceden ayarlanmış taramalar ekleyin. Veri toplamadan en az 15 dakika önce, test edilecek tüm farelerin her bir gözüne oda sıcaklığında% 10 fenilefrin damlatın.

Daha sonra fazla reaktifi çıkarın ve oda sıcaklığında% 0.5 tropikalamid damlatın. Edinimden yaklaşık beş dakika önce genel anestezi uygulayın. Hemen ardından, her bir göze% 0.4 oksibuprokain hidroklorür uygulayın ve gözleri uyuşturmak ve hareketsiz hale getirmek için solüsyonu üç saniye yerinde bırakın.

Ardından, damlaları çıkarın ve% 10 fenilefrin ve% 0.5 tropikamid kurulumunu tekrarlayın. Gözler görüntüleme için yeterince genişlediğinde, kornea hidrasyonu sağlamak için gözleri viskoz glikol bazlı göz damlası ile yağlayın ve fareyi sıcak tutmak için bir cerrahi gazlı bezle sarın. Bir sünger veya pamuk fitil kullanarak, her bir göze %0.3 hipromelloz ile takviye edilmiş ince bir tabaka oftalmik jel uygulayın.

Bunu yaparken kirpikleri ve bıyıkları bir kenara koyun. Fareyi, başı düz ve ileriye bakacak şekilde kasete yerleştirin ve ısırma çubuğunu dikkatlice ağzına yerleştirin. İncelenmekte olan göz için hayvanın yan tarafının altına pamuklu bir rulo yerleştirin.

Ardından, klipsi fareye özel lensin nişan alma ucunda tutarak, lensi göze doğru getirmek için z çevirmen vidasını saat yönünün tersine çevirin. Kaseti döndürerek ve döndürerek ve ısırma çubuğunu ve x-çevirmen vidalarını, deney gözü doğrudan lense bakacak şekilde konumlandırılana kadar çevirerek farenin konumunu önceden ayarlayın. Gözlerin ve lensin optik ekseni hizalandığında, sınavdaki ilk taramayı seçin.

Hedeflemeye başla'ya tıklayın ve retinayı sol panelde dikey ve sağ panelde yatay olarak hareket ettirmek için z-çevirmen vidasını kullanın. Kaseti döndürerek, optik sinir başını sağ panelin ortasına getirmek için yukarı veya aşağı hareket ettirin. Sağ paneldeki retinayı düzleştirmek için ısırma çubuğu vidasını kullanın ve optik sinir başını sol panelin ortasına yerleştirmek için kaseti döndürün.

Ardından, retinayı sol panelde düzleştirmek için x-tercüman vidasını kullanın ve her modülatörün ana işlevini göz önünde bulundurarak, optik sinir kafasında mükemmel merkezileşme için retinanın konumunu daha da ayarlayın. Retina konumdayken, spektral alan optik koherens tomografi taramasını başlatmak için anlık görüntüyü başlat'a tıklayın. Taramayı ve raporu kaydetmeyi unutmayın.

Gerekirse merkezileştirmeyi ayarlayın. Tarama tamamlandığında, lensi geri çekin ve ikinci gözü az önce gösterildiği gibi konumlandırın. İkinci göz tarandıktan sonra, fareyi kasetten çıkarın, her bir göze %0.3 hipromelloz içeren oftalmik jel uygulayın ve fareyi tam iyileşme sağlanana kadar izlemeli bir ısıtma plakasına yerleştirin.

Retina ganglion hücrelerine odaklanmak için, görüntü J için oluşturulan MRI retina aracı makrosunu kullanın. MRI retina aracını açın ve poligon seçim aracını değiştirin ve ilgilenilen görüntüyü yükleyin. Ölçümü başlatmak için M'ye tıklayın, ardından yatay konumu ayarlamak için E'ye tıklayın. Yeni açılan ilgi alanı yöneticisi penceresindeki ilk kaseti seçin.

Mavi çokgene tıklayın ve ilk kasetin konumunu ayarlamak için resimde ölçülen katmanın kenarlıklarına tıklayın. İlgilenilen bölge yöneticisi penceresinde ikinci kaseti seçin ve ikinci kaseti ayarlayın. Ardından retinayı yeniden ölçmek ve sonuçları ölçümler penceresinde görüntülemek için R'ye tıklayın.

Bir spektral alan OCT taramasının kalitesi, bir retina kesitinin görüntüsününki kadar iyi olmasa da, OCT daha fazla katmanın görselleştirilmesine izin verir. Retina katmanları bir OCT taramasında kolayca ölçülür ve ganglion hücre katmanları, iç nükleer katman, dış pleksiform katman, dış nükleer katman, iç ve dış segment katmanları, retina pigment epiteli ve koroiddeki retina sinir lifini kapsar ve tüm retinanın karmaşık bir çalışmasına izin verir. Retina kalınlığının OCT ölçümü yeni gösterilmiştir, görme bozukluğu olan genetik olarak mutant OPA1 dişi farelerin ganglion hücre kompleksi ve peripapiller retina sinir lifi tabakalarında ilerleyici bir kalınlaşma gösterdiğini gösterir.

Standart ve ev yapımı kaliperler kullanılarak ganglion hücre tabakası kalınlığındaki retina sinir lifinin karşılaştırılması, standart kaliperlerin ev yapımı kaliperlere göre önemli ölçüde daha düşük bir kalınlık ölçtüğünü göstermektedir, çünkü standart kaliperler çok daha kalın ve ince bir tabaka sınırına yerleştirilmesi daha zordur. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik doğru yapılırsa 15 dakika içinde yapılabilir. Geliştirildikten sonra OCT, oftalmoloji alanındaki araştırmacıların fare retinasındaki yapısal değişiklikleri analiz etmelerinin yolunu açtı.

Bu videoyu izledikten sonra, farelerde retina ganglion hücreleri için OCT görüntülemenin nasıl gerçekleştirileceğini ve analiz edileceğini iyi anlamış olmalısınız.