Name: Akut Anestezi Uygulanan Sıçanlarda Hiperdirect Pathwayden Lokal Alan Potansiyellerinin Elektrofizyolojik Kayıtları ve Çoklu Ünite Aktivitesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-06-22T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 46 s
Description: Öğrenin, anestezili sıçanlarda kortiko-bazal gangliya halkasından lokal alan potansiyelleri ve çoklu ünite aktivitesi kaydetme yöntemini. Bu teknik, nöropsikiyatrik hastalıkların patofizyolojisini anlamak ve kapalı döngü stimülasyonu gibi tedaviler için biyobelirteç geliştirmek amacıyla kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Çalışmamızı finanse etmek için Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG), KFO 247&#39;ye teşekkür ediyoruz.

Deneysel prosedürler, Alman Hayvan Refahı Yasası&#39;na (son olarak 2014&#39;de revize edilmiştir) ve Avrupa yönetmeliklerine (2010/63 / AB) uygun olarak yürütülmüştür. Deneyler, yerel hayvan refahı otoritesi (LaGeSo, Berlin) tarafından onaylandı ve yerel departmanlara ve uluslararası kurallara uyuyordu. NOT: Sunulan yöntemde primer motor korteksi (M1) subtalamik çekirdeği (STN) ve substantia nigra pars reticulate (SNr) ile bağlayan hiperdirect kortiko-bazal gangliyon yolundan kayıt yapmak için iki elektrot modeli kullanılır. Epidural elektrokortikogram (ECoG) kayıtları için M1 ısmarlama düşük empedanslı Ag / AgCl elektrodları kullanılmıştır. STN ve SNr&#39;den alınan kayıtlar piyasada bulunan yüksek empedanslı tungsten elektrotlarla gerçekleştirilir. 1. Epidural Ag / AgCl Epidural Elektrodların Yapımı <ol><li> Yaklaşık bir şeyler al. Diameterli,% 99,99 saf gümüş telin 5 cm uzunluğunda şeridiR, 200 μm olmalıdır ve gerekirse herhangi bir kaplamayı çıkarın. </li><li> Tel ucu ucunu ufak bir ışına veya mum alevine doğru ucu eriyene kadar aşağı doğru tutun. İpucu top şeklinde olacak ve yaklaşık 1 mm çapa gelene kadar bekleyin. Önceden şekillendirilmiş elektrodu, top şekilli ucun başlangıcından tel ucuna kadar toplam 15 mm uzunluğa kadar kesin. </li><li> Kullanılmış elektrofizyolojik kayıt sistemine uyan tel uca lehimlenmiş bir konektör. Lehimleme noktasını tel ucundan konnektöre iletken gümüş vernik ile örtün. Bu, iletkenliğe yardımcı olur ve daha iyi bir sinyal kalitesi sağlar. </li><li> İletken vernik kurutulduktan sonra lehimleme noktasını 3 mm ila 1 mm&#39;lik ısı büzüşmeli tüplerle örtün. Top şeklindeki ucu kalınlığın yarısına kadar düzleştirmek için dikkatle saatçi çekiç kullanın. </li><li> Muayene eldivenleri koyun ve herhangi bir kir ve gres temizlemek için% 100 etanol içeren hav bırakmayan bir temizlik bezi kullanın. </li><li> Elektrotları15 mL&#39;lik bir santrifüj tüpü veya hücre kültürü tüpü ve top şeklinde ucu tamamen kaplanıncaya kadar, ev tipi klorlu ağartıcı (DİKKAT: 100 g&#39;lık bir solventte 2.8 g sodyum hipoklorür içeren) doldurun. DİKKAT: Klorlu ağartıcı aşındırıcıdır; Her zaman üreticinin güvenlik talimatlarını izleyin. </li><li> 23 dakika sonra elektrotları çıkarın ve bunları damıtılmış suyla cömertçe yıkayın. Bir gümüş klorid tabakasının başarılı bir şekilde uygulanması renkte homojen bir mor değişim olarak gözükmektedir. </li><li> Kuru havada. Tam kurutulduktan sonra, elektrotları ince cımbızlarla alın. İnce bir fırça ile sıvı elektrik yalıtımı uygulayın. Doğrudan elektrot ucu arkasında tel üzerinde başlayın ve ısı çeken tüp kadar her şeyi kapağı. İzolasyonu en az 2 saat boyunca kurumaya bırakın. </li><li> Kalite kontrolü için, bir multimetre ile elektrik iletkenliğini kontrol edin. Varsa, uygun bir empedans ölçeri kullanarak 1 kHz&#39;de empedans testi yapın, elektrot ve testProb birbirine dokunmadan% 0.9 NaCl içeren H2O çözeltisi içinde bir araya getirilir. 1 kHz&#39;de empedans değerleri yaklaşık 8 kΩ olmalıdır. </li></ol> 2. Elektrotları bir Stereotaksik Tutucuya Yapıştırma NOT: MUA ve LFP&#39;leri aynı anda kaydetmek için, 1.5 MΩ empedanslı tungsten mikrowire elektrotları kullanın. Kayıtların odağı tek bir ünitenin yüksek kalitede kayıtlarına dayanıyorsa, daha yüksek empedansa (&gt; 5 MΩ) sahip mikrowire elektrotları seçin. Çalışmanın amacı yalnızca LFP&#39;lere yönelikse, daha düşük empedanslı elektrotlar kabul edilebilir. Dorsoventral stereotaksik ayarlamalar çoğunlukla gerekli olan küçük yapılar için, uygun bir dorsoventral uç ayrımı olan (bu durumda 250 μm) elektrot çifti kullanın. Ayrıca, gerekirse, daha yerel bir referans elektrotu avantaj sağlar. Stereotaksik koordinatlar her zaman en alttaki elektrottan ölçülür veBregma&#39;ya referansla hesaplanmıştır. <ol><li> Akrilik blok ve kelepçe ile standart bir stereotaksik elektrot tutacağı alın ve cerrahi bir mikroskop alanındaki düz bir yüzeye güvenli bir şekilde yerleştirin. </li><li> İlk çifti, ince cımbız kullanarak yapışkan bant parçaları (3 mm x 8 mm) ile tutucunun akrilik bloğuna gevşek şekilde sabitleyin. Elektrotlar akrilik bloğu yaklaşık olarak çıkıntı yapmalıdır. 12 mm. </li><li> İkinci bipolar elektrotu birinci elektrodun yanına dikkatlice sabitleyin. Hiperdirect yolağının yapılarını hedeflemek için mesafe 2 mm olmalıdır ( Şekil 1 ). Çoğu standart stereotaksik elektrot tutucu için, bu bitişik girintidir. Doğrulamak için kaliper ölçer kullanın. Farklı ağlara aynı şekilde yaklaşılabilir. Bunun için akrilik blok belirli bir dereceye kadar döndürülebilir. </li><li> İkinci elektrot çifti, en ventral ucu yaklaşık 200 olan bir konuma dikkatlice kaydırarak ayarlayınΜm elektrodlara kıyasla gömülmüştür ( Şekil 1 ). Bunu mikroskopik görüş altında yapın. Bunun için mesafeyi daha iyi tahmin etmek için 30 G kanül (300 mm dış çap) kullanın. </li><li> Yapışkan banda bastırın ve ardından tutacağın metal kelepçesi ile sabitleyin. </li></ol> 3. Cerrahi <ol><li> Elektrofizyolojik kayıtlar için, anestezi için üretan (DİKKAT) kullanın. Dikkat: Üretan toksiktir ve kanserojentir, bu nedenle daima madde üreticisi tarafından verilen güvenlik yönetmeliklerine ve bilgi belgelerine uyun. </li><li> % 0.9 NaCl tıbbi solüsyonda 200 mg / mL üretan solüsyonu hazırlayın. </li><li> Toplam 1,3 g / kg vücut ağırlığı üretanını intraperitoneal (IP) uygulayın. Sıçan gerginliğine bağlı olarak, anestezinin güvenliğini arttırmak için, enjeksiyonların arasında 15 dakikalık bir aralıkla dozun iki dozuna bölünmesi mantıklı olabilir. </li><li> Anestezi derinliğini p kullanarak kontrol edinEdal çekilme refleksi ve diğer uygun refleksler. Anestezi ameliyatı gerçekleştirmek için yeterince derin değilse, 0.15 g / kg vücut ağırlığı stearant IP verin ve 15 dakika daha bekleyin. </li><li> Korneal dehidrasyonu önlemek için göz merhemi uygulayın. </li><li> Anestezi sırasında respiratuar hızı ve pedal çekme refleksini sürekli izleyin. Ameliyat boyunca fizyolojik bir vücut ısısının korunmasını sağlamak için sıcaklık kontrollü küçük bir hayvan ısıtma pedi kullanın. Elektrofizyolojik kayda başlamadan önce elektriksiz olmayan bir alternatife geçin ( örn. Sodyum asetat kafa yastığı). </li><li> Temiz bir cerrahi alan elde etmek için kürkün başın dorsal yanının yanına tıraş edin. Uygun cerrahi dezenfektanla kesi bölgesini etrafında dezenfekte edin. Hayvanı stereotaktik çerçevede düzeltin. </li><li> Saçlı deri ile sagital yönde 2 cm uzunluğunda kafa derisi kesiği yapın. Kafatası aponörozu hafifçe kazıyıp kafatasını dezenfekte etmek için bir neşter kullanın. Birlikte kullanınKalan tüm dokuları çıkarmak için% 3 H 2 O 2 içinde ıslatılmış tomurcuklar. </li><li> Gerekirse, kanamayı kontrol etmek için bir elektrokotter veya termokoter kullanın. Kanama 1-2 dakika sonra kendiliğinden durmaz ve kafatasına bakış açısını engelleyecek olursa, kafatası kemiklerinden ve hipodermden kanamaları durdurun. </li><li> Baş kafası düz kafatası pozisyonuna getirilinceye kadar kesici çubuğu ayarlayın, yani stereotaksik referans noktaları olan bregma ve lambda aynı düzlemdedir. Yüksek cerrahi hassasiyet elde etmek için bu çok önemlidir. Standart bir stereotaksik sıçan hizalama aracı kullanın, mikroskobik görüş altında bregma için belirlenen ucu kalibre ve bregma ve lambda belirlenen noktaları aynı anda kafatasına dokunma kadar dişli çubuğu ayarlayın. NOT: Bir taraftan odaklanmış ışık bulunan bir görünüm bu durumu belirlemenize yardımcı olabilir. Alternatif olarak, ince kanülle stereotaksik bir tutucu alın ve Bregma&#39;nın dorsoventral koordinatlarını aNd lambda mikroskopik görüş altında. Bregma ve lambda&#39;nın dorsoventral koordinatları aynı olana kadar kesici çubuğu ayarlayın. </li><li> Kanüle sahip bir stereotaksik tutucu kullanın, bregma&#39;ya kalibre edin ve kafatasındaki tüm deliklerin yerlerini hesaplayın. Stereotaksik tutacağı kullanarak delilecek deliklerin yerlerini kafatasına dikkatle çizerek veya bir cerrahi renk işaretleyicisi ile işaretleyin. Bunun koordinatları hedeflere bağlıdır, serebellar referans elektrotları için önerilen koordinatlar da dahil olmak üzere, bregma&#39;ya referansla koordinatlar Tablo 1&#39;deki hiperdirect yolağı için verilmiştir. </li><li> Mikrodalga kullanarak tüm delikleri dikkatli bir şekilde delin. STN ve SNr için ortak bir delik açın (yaklaşık 2 mm x 3 mm boyutunda). Diğer tüm sondaj delikleri yaklaşık 1 mm çapında olmalıdır. </li><li> İki ince kanülü alın (en az 27 G) ve sert bir yüzeyi veya cımbızı kullanarak uçları kanca şeklinde oluşturmak için bükün. Herhangi bir debriyoyu kaldırmak için bunları kullanınS ile delin ve dikkatli bir şekilde kesip, ortak STN / SNr deliğindeki durayı çıkarın. </li><li> Matkap deliklerini fizyolojik salinle yıkayın. Beyni ve durayı kurumasını önlemek için matkap deliklerine her 15 dakikada bir damla fizyolojik salin uygulayın. </li><li> Referans epidural elektrotların beyincik üzerindeki matkap delikleri arasına bir mikro delme ve eşleşen paslanmaz çelik mikro vidalar ( örn . M 1.2 mm x 2 mm vida), delik açma ve mikro vidayı vidalayın, aynı işlemi, M1 epidural elektrotlar. </li><li> Kendi yapımı Ag / AgCl epidural elektrotları, referans elektrodları ve M1 elektrotları için delik deliğine kaydırın. Elektrot ucunu ince cımbızla yöneltin ve kafatası kemiğinin hemen altındaki matkap deliğine kaydırın. </li><li> Tüm epidural elektrotları iki bileşenli diş akrili ile sabitleyin. Bregma noktasını kaplamayın ve ortak STN / SNr deliğini etkilemediğinden emin olun. </li><li> Hazırlanmış tutacağı tungsten mikrowire electrod ile takınStereotaksik çerçeveye sokar. </li><li> STN&#39;yi hedefleyen en ventral elektrodu kalibre edin. Bilinen STN / SNr deliğinin üzerindeki hesaplanan konuma ayarlayın ve elektronları mikroskopik görüş altında beyne indirin. Tungsten mikrowire elektrotların beyne sorunsuz girdiğinden emin olun. </li></ol> 4. Elektrofizyolojik Haritalama ve Kayıtlar NOT: Bu adım için, bir Faraday kafesi ve çevrimiçi filtreleme ve online sivri sıralama yapabilen kayıt yazılımı olan çok kanallı bir elektrofizyolojik kayıt sistemi gereklidir. Elektrik gürültüsünü ve eserlerini mutlak bir minimum seviyede tutmak için tercihen hayvanların başına yakın bir preamplifikatörle çalışan bir sistem kullanın. Tungsten mikro elyaf elektrotlarının yanı sıra, hiperdirekt yolağının kayıtlarını yapmak için en az bir epidural ve bir referans elektrot gereklidir. Epidural ve referencin eklenmesi önerilirElektrotları birbirlerine dokunmadan ikili olarak tutmak, bu arızalardan dolayı yardımcı olur ve veri analizinde farklı referans türlerine izin verir. <ol><li> Stereotaksik çerçevenin üstünde bir mobil Faraday kafesi koyun. Sadece durağan bir Faraday kafesi mevcutsa, stereotaksik çerçeve son konuma gelinceye kadar derin beyin elektrotlarının beynin içine indirilmediğinden emin olarak stereotaksik çerçeveyi Faraday kafesine dikkatlice hareket ettirin. </li><li> Elektrotları elektrofizyolojik kurulumun başlama yerine bağlayın. Referans elektrotlarının uygun referans kanallarına bağlı olduğundan emin olun. </li><li> Kayıt yazılımını kurun: Bandpass filtre (0.05-8.000 Hz) ve ham veri sinyalini yükseltin (1,500-2,000x kazanın). Doğru ayarları (LFP&#39;ler için bant genişliği filtresi 0.05-250 Hz, MUA için bant geçiren filtre 300-8000 Hz) olan çevrimiçi bir LFP ve kuyruk filtresi kullanın. Tüm filtreler için tereyağı tipi filtre kullanın. </li><li> Uygunsa, onlin için bir eşik eşiği ayarlayınBaşak çarpması. Çoğu kayıt yazılımı, üzerinde bir sinyalin bir başak olarak işaretlendiği bir amplitüd değeri olan bir başak eşiğinin ayarlanmasına izin verir. Bu eşik, ya filtrelenmiş diken sinyallerinin ortalama amplitüdünün bir faktörü ya da standart sapması olarak matematiksel olarak belirlenebilir ya da tercihen &lt;500 ms&#39;lik veri kesimlerinin görsel denetimi ile belirlenebilir ve bir grafikte sinyal gürültünün üstünde bir çizgi olarak ayarlanabilir kullanıcı arayüzü. NOT: Bir eşik eşiğini ayarlamanın amacı, kaç tane nöronun kaydedildiği ve bunların sivri uçlarının nasıl şekillendirildiğine ilişkin bilgi sağlamak için sivri uçları saymak ve birimleri sıralamaktır. </li><li> Hiperdirect yolağı için STN olan hedefin 1 mm dorsaline yavaşça tungsten mikrowire elektrotları indirin. Gerekirse sinyalin dengelenmesini bekleyin. </li><li> Elektrofizyolojik haritalama için, elektrotları 100 μm&#39;lik adımlarla ventral olarak ilerletin. Her adımda, ateşleme modelini değerlendirin, ateşleyin.Sivri yedi ve şekli. Bunları Şekil 2&#39;de verilen tipik örneklerle karşılaştırın. Çoğunlukla, yoğun çekirdekler çeşitli dorsoventral adımlar üzerinde hızlı ve sürekli bir şekilde sarmal gösterirken, elyafdan zengin yapılar daha düşük atış hızları gösterir ve sonraki ventral basamaklarda daha az homojen spike aktivitesi gösterir. </li><li> Hiperdirect yolağı için, en çok ventral elektrotun STN içerisine girdiğinden emin olun. NOT: MNA&#39;da belirgin bir artış Zona incertanın ventrali tespit edildiğinde STN&#39;e ulaşılır. Ventral STN&#39;ye yayılma, neredeyse tamamen durur, çünkü elektrot dahili kapsüle ulaşmıştır. En ventral elektrot STN&#39;de olduğunda, tungsten mikroelektrodların konfigürasyonu posterior, ikinci elektrodun SNr&#39;de olmasını sağlar. Tipik MUA&#39;yı STN ve SNr&#39;ye aynı anda kaydetmek için küçük artışlarla dorsoventral ince ayar yapılması gerekebilir. MUA sıklığının aslında kaydedilen nöron sayısına ve seviyedeki beyin sayısına bağlı olduğunu unutmayın.aktivasyonu. </li><li> Elektrotlar istenen yapıdaysa, çevrimiçi süzme ve sivri uçlu sıralama ( Şekil 4&#39;e bakın) ayarlayın ve ardından verilerin kaydını başlatın. LFP kayıtlarında tanımlanabilen farklı kortikal senkronizasyon durumları için tipik örnekler Şekil 3&#39;te gösterilmektedir. </li></ol> 5. Deneyin Sonu <ol><li> Kayıtlar yapılırken, elektronları beyinden yavaşça kaldırın ve anında fizyolojik tuzlu su ile yıkayın. Elektrodlar, yıkama ve gözle muayene işlemlerinden sonra tekrar kullanılabilir. Bükme elektrotlarını boşaltın. </li><li> Hayvanları aşırı dozda bir üretan (2.5 gr / kg vücut ağırlığı) IP enjeksiyonuyla euthanize edin. NOT: Üretan sadece nihai prosedürler için kullanılmalıdır. </li><li> Elektrot konumunun histolojik olarak doğrulanması veya diğer histolojik boyama prosedürleri gerekiyorsa, kafatasından beyini çıkarın veDoku uygun bir şekilde. NOT: İstenen boyama yöntemlerine bağlı olarak, transkardiyal perfüzyon gerekli olabilir. Elektrot pozisyonunun post-mortem doğrulaması için, standart bir Nissl boyama çoğu durumda koronal beyin bölümleri gibi elektrot rotasını görselleştirmek için yeterlidir. Histolojik hedef doğrulamayı kolaylaştırmaya yönelik daha başka yaklaşımlar, kayıt elektrodları yoluyla elektrik akımı uygulayarak veya elektrot ilavesi öncesinde biyouyumlu olan boya uygulamasıyla beyin dokusuna elektrikle uyarılmış lezyonların kullanılmasını içerir 16,17. </li></ol>

<ol><li>Lozano, A. M., Lipsman, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probing+and+regulating+dysfunctional+circuits+using+deep+brain+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Probing and regulating dysfunctional circuits using deep brain stimulation.</a> Neuron. 77 (3), 406-424 (2013).</li>
<li>Mathalon, D. H., Sohal, V. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+Oscillations+and+Synchrony+in+Brain+Dysfunction+and+Neuropsychiatric+Disorders%3A+It%27s+About+Time%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Neural Oscillations and Synchrony in Brain Dysfunction and Neuropsychiatric Disorders: It's About Time.</a> JAMA Psychiatry. 72 (8), 840-844 (2015).</li>
<li>Uhlhaas, P. J., Singer, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+dynamics+and+neuropsychiatric+disorders%3A+toward+a+translational+paradigm+for+dysfunctional+large-scale+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Neuronal dynamics and neuropsychiatric disorders: toward a translational paradigm for dysfunctional large-scale networks.</a> Neuron. 75 (6), 963-980 (2012).</li>
<li>Buzsaki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+recording+of+neuronal+ensembles%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Large-scale recording of neuronal ensembles.</a> Nat Neurosci. 7 (5), 446-451 (2004).</li>
<li>Buzsaki, G., Anastassiou, C. A., Koch, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+of+extracellular+fields+and+currents--EEG%2C+ECoG%2C+LFP+and+spikes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The origin of extracellular fields and currents--EEG, ECoG, LFP and spikes.</a> Nat Rev Neurosci. 13 (6), 407-420 (2012).</li>
<li>Brazhnik, E., Novikov, N., McCoy, A. J., Cruz, A. V., Walters, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+correlates+of+exaggerated+oscillatory+activity+in+basal+ganglia+output+in+hemiparkinsonian+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Functional correlates of exaggerated oscillatory activity in basal ganglia output in hemiparkinsonian rats.</a> Exp Neurol. 261, 563-577 (2014).</li>
<li>Avila, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta+frequency+synchronization+in+basal+ganglia+output+during+rest+and+walk+in+a+hemiparkinsonian+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Beta frequency synchronization in basal ganglia output during rest and walk in a hemiparkinsonian rat.</a> Exp Neurol. 221 (2), 307-319 (2010).</li>
<li>Javor-Duray, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early-onset+cortico-cortical+synchronization+in+the+hemiparkinsonian+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Early-onset cortico-cortical synchronization in the hemiparkinsonian rat model.</a> J Neurophysiol. 113 (3), 925-936 (2015).</li>
<li>Beck, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-+and+long-term+dopamine+depletion+causes+enhanced+beta+oscillations+in+the+cortico-basal+ganglia+loop+of+parkinsonian+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Short- and long-term dopamine depletion causes enhanced beta oscillations in the cortico-basal ganglia loop of parkinsonian rats.</a> Exp Neurol. 286, 124-136 (2016).</li>
<li>Magill, P. J., Bolam, J. P., Bevan, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+of+activity+in+the+subthalamic+nucleus-globus+pallidus+network+to+cortical+electroencephalogram%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Relationship of activity in the subthalamic nucleus-globus pallidus network to cortical electroencephalogram.</a> J Neurosci. 20 (2), 820-833 (2000).</li>
<li>Magill, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+functional+connectivity+within+the+rat+striatopallidal+axis+during+global+brain+activation+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Changes in functional connectivity within the rat striatopallidal axis during global brain activation in vivo.</a> J Neurosci. 26 (23), 6318-6329 (2006).</li>
<li>Brown, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormal+oscillatory+synchronisation+in+the+motor+system+leads+to+impaired+movement%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Abnormal oscillatory synchronisation in the motor system leads to impaired movement.</a> Curr Opin Neurobiol. 17 (6), 656-664 (2007).</li>
<li>Stein, E., Bar-Gad, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((beta+oscillations+in+the+cortico-basal+ganglia+loop+during+parkinsonism%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">beta oscillations in the cortico-basal ganglia loop during parkinsonism.</a> Exp Neurol. 245, 52-59 (2013).</li>
<li>Little, S., Brown, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+brain+signals+are+suitable+for+feedback+control+of+deep+brain+stimulation+in+Parkinson%27s+disease%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">What brain signals are suitable for feedback control of deep brain stimulation in Parkinson's disease?</a> Ann N Y Acad Sci. 1265, 9-24 (2012).</li>
<li>Priori, A., Foffani, G., Rossi, L., Marceglia, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptive+deep+brain+stimulation+%28aDBS%29+controlled+by+local+field+potential+oscillations%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Adaptive deep brain stimulation (aDBS) controlled by local field potential oscillations.</a> Exp Neurol. , 77-86 (2013).</li>
<li>Brozoski, T. J., Caspary, D. M., Bauer, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marking+multi-channel+silicon-substrate+electrode+recording+sites+using+radiofrequency+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Marking multi-channel silicon-substrate electrode recording sites using radiofrequency lesions.</a> J Neurosci Methods. 150 (2), 185-191 (2006).</li>
<li>Schjetnan, A. G., Luczak, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recording+large-scale+neuronal+ensembles+with+silicon+probes+in+the+anesthetized+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Recording large-scale neuronal ensembles with silicon probes in the anesthetized rat.</a> J Vis Exp. (56), (2011).</li>
<li>Mallet, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disrupted+dopamine+transmission+and+the+emergence+of+exaggerated+beta+oscillations+in+subthalamic+nucleus+and+cerebral+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Disrupted dopamine transmission and the emergence of exaggerated beta oscillations in subthalamic nucleus and cerebral cortex.</a> J Neurosci. 28 (18), 4795-4806 (2008).</li>
<li>Steriade, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corticothalamic+resonance%2C+states+of+vigilance+and+mentation%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Corticothalamic resonance, states of vigilance and mentation.</a> Neuroscience. 101 (2), 243-276 (2000).</li>
<li>Maesawa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+stimulation+of+the+subthalamic+nucleus+in+hemiparkinsonian+rats%3A+neuroprotection+of+dopaminergic+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Long-term stimulation of the subthalamic nucleus in hemiparkinsonian rats: neuroprotection of dopaminergic neurons.</a> J Neurosurg. 100 (4), 679-687 (2004).</li>
<li>Paxinos, G., Watson, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPaxinos%2C+G+%22The+Rat+Brain+in+Stereotaxic+Coordinates%22">The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates</a>. , Academic Press. (1998).</li>
<li>Oliveira, L. M. O., Dimitrov, D. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK1985/">Methods for Neural Ensemble Recordings Frontiers in Neuroscience</a>. Nicolelis, M. A. L. , (2008).</li>
<li>Torres, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+efficacy+of+the+6-hydroxydopamine+lesion+of+the+median+forebrain+bundle+in+small+rats%2C+by+modification+of+the+stereotaxic+coordinates%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Increased efficacy of the 6-hydroxydopamine lesion of the median forebrain bundle in small rats, by modification of the stereotaxic coordinates.</a> J Neurosci Methods. 200 (1), 29-35 (2011).</li>
<li>Hadar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rats+overexpressing+the+dopamine+transporter+display+behavioral+and+neurobiological+abnormalities+with+relevance+to+repetitive+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Rats overexpressing the dopamine transporter display behavioral and neurobiological abnormalities with relevance to repetitive disorders.</a> Sci Rep. 6, 39145(2016).</li>
<li>Parr-Brownlie, L. C., Poloskey, S. L., Bergstrom, D. A., Walters, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parafascicular+thalamic+nucleus+activity+in+a+rat+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Parafascicular thalamic nucleus activity in a rat model of Parkinson's disease.</a> Exp Neurol. 217 (2), 269-281 (2009).</li>
<li>Steriade, M., Nunez, A., Amzica, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+slow+%28%3C+1+Hz%29+oscillation+of+neocortical+neurons+in+vivo%3A+depolarizing+and+hyperpolarizing+components%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A novel slow (< 1 Hz) oscillation of neocortical neurons in vivo: depolarizing and hyperpolarizing components.</a> J Neurosci. 13 (8), 3252-3265 (1993).</li>
<li>Maggi, C. A., Meli, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suitability+of+urethane+anesthesia+for+physiopharmacological+investigations+in+various+systems.+Part+1%3A+General+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Experientia%22%5BJournal%5D)">Suitability of urethane anesthesia for physiopharmacological investigations in various systems. Part 1: General considerations.</a> Experientia. 42 (2), 109-114 (1986).</li>
<li>Goldberg, J. A., Kats, S. S., Jaeger, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Globus+pallidus+discharge+is+coincident+with+striatal+activity+during+global+slow+wave+activity+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Globus pallidus discharge is coincident with striatal activity during global slow wave activity in the rat.</a> J Neurosci. 23 (31), 10058-10063 (2003).</li>
<li>Karain, B., Xu, D., Bellone, J. A., Hartman, R. E., Shi, W. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+globus+pallidus+neurons%3A+functional+classification+and+effects+of+dopamine+depletion%5BTitle%5D)+AND+%22Synapse%22%5BJournal%5D)">Rat globus pallidus neurons: functional classification and effects of dopamine depletion.</a> Synapse. 69 (1), 41-51 (2015).</li>
<li>Paasonen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+seven+different+anesthesia+protocols+for+nicotine+pharmacologic+magnetic+resonance+imaging+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Neuropsychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Comparison of seven different anesthesia protocols for nicotine pharmacologic magnetic resonance imaging in rat.</a> Eur Neuropsychopharmacol. 26 (3), 518-531 (2016).</li>
<li>Mahmud, M., Vassanelli, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Processing+and+Analysis+of+Multichannel+Extracellular+Neuronal+Signals%3A+State-of-the-Art+and+Challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Processing and Analysis of Multichannel Extracellular Neuronal Signals: State-of-the-Art and Challenges.</a> Front Neurosci. 10, 248(2016).</li>
<li>Hadar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+neural+oscillations+and+elevated+dopamine+levels+in+the+reward+pathway+during+alcohol+relapse%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Altered neural oscillations and elevated dopamine levels in the reward pathway during alcohol relapse.</a> Behav Brain Res. 316, 131-135 (2017).</li>
<li>Voget, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+local+field+potential+activity+and+serotonergic+neurotransmission+are+further+characteristics+of+the+Flinders+sensitive+line+rat+model+of+depression%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Altered local field potential activity and serotonergic neurotransmission are further characteristics of the Flinders sensitive line rat model of depression.</a> Behav Brain Res. 291, 299-305 (2015).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Mevcut çalışmada, yöntem, kemirgenlerde M1&#39;i STN ve SNr&#39;ye bağlayan hiperdirect kortiko-bazal gangliyon yolunun örneğini kullanarak, belirli bir ağın birden fazla bölgesinden eşzamanlı olarak hücre dışı elektrofizyolojik sinyallerin nasıl kaydedileceği gösterilmiştir. STN gibi küçük subkortikal yapıların kayıt altına alınmasında kritik bir adım, kayıt elektrotlarının hedefe tam olarak rehberlik ettirilmesidir. Sunulan yöntemde, iki önemli adıma dikkat ederek hedeflemenin yüksek doğru...

Parkinson hastalığı (PD) ve şizofreni gibi farklı nöropsikiyatrik bozukluklarla ilgili yeni kümülatif bulgular, patofizyolojisinin, genellikle kortikal ve subkortikal yapıları içeren 1 , 2 , 3 nolu geniş nöronal devrelerin kritik bir işlev bozukluğuna dayandığını ileri sürmektedir. Bu teoriye göre, hastalıkların klinik bulguları, tek hücre veya belirli nöronal elemanlar yerine 1 , 2 , 3 nolu hücrelerin bilgi işlem kapasitesinin bozulmasının bir sonucu olarak ortaya çıkmaktadır. Nepropsikiyatrik hastalıkların bu karmaşık grubunun anlaşılmasını arttırmak ve yeni tedavi seçenekleri bulmak için, insan hastalarında ve hayvan modellerinde bu bozuk ağların nöronal dinamiklerini ayrıntılı bir şekilde karakterize etmek zorunludur. Mükemmel bir mükemmellikEntelektüel potansiyellerin çok bölgedeki elektrofizyolojik kayıtları 4&#39;tür . Bu yöntemi kullanarak, esasen, presinaptik potansiyeller tarafından üretilen, uyarıcı ve inhibe edici postsinaptik akımların ve çok birim aktivitenin (MUA) geçici olarak toplamını temsil eden yerel alan potansiyellerini (LFP&#39;ler) aynı anda değerlendirmek mümkündür. Hücre dışı potansiyellerin kaydı, ağları incelemek için alternatif yöntemlere kıyasla birkaç avantaja sahiptir, örneğin işlevsel manyetik rezonans görüntüleme ve kalsiyum görüntüleme, çünkü daha yüksek zamansal ve mekansal çözünürlük sağlar ve genetik olarak düzenlenmiş organizmalara bağımlı değildir 5 . Bununla birlikte, hücre dışı in vivo kayıtların kullanımı, evrensel olarak uygulanamayan invaziv bir teknik olduğu için sınırlıdır. In vivo elektrofizyolojik kayıtAnestezi altındaki hayvanlarda olduğu kadar uyanık halde de yapılabilir 6 . Her iki yöntem de belirli artı ve eksileri beraberinde getirir. Uyanık hayvanlar üzerindeki çalışmalar, tanımlanmış davranışsal görevlerin gerçekleştirilmesi sırasında beyin sinyallerinin kaydedilmesine izin verir, ancak hareketle ilgili ve diğer eserlere 7 , 8 eğilimlidir. Anestezi uygulanmış hayvanlardaki kayıtlar, LFP&#39;leri ve MUA&#39;yı, yüksek tanımlı kortikal senkronizasyon durumlarında asgari düzeyde eser ile değerlendirme fırsatı sunar; ancak sonuçlar, bir dereceye kadar uyanık olan 9 , 10 ve 11&#39;de bulunanlara göre de farklılık gösterir. Son yıllarda, LFP örneklemesinin ağ etkinliğinin patolojik değişimlerini tanımlamak için özellikle yararlı olduğu gösterilmiştir. Bunun önemli bir örneği, insan hastada PD&#39;nin patofizyolojisi üzerine bir araştırmadırS ve hayvan modellerinde, kortiko-bazal gangliyon halkasında gelişmiş beta salınımlarının parkinson motor belirtileri 12 , 13 ile bağlantılı olduğu gösterilebilir. Bu araştırmanın bir sonucu olarak, beta salınımlarının kapalı döngü derin beyin stimülasyonu için çevrimiçi geribildirim biomarkeri olarak kullanılabilmesi şu anda araştırılmaktadır 14,15. Bu çalışmada, üretandan anestezi uygulanan sıçanlarda LFP&#39;lerin ve MUA&#39;nın in vivo elektrofizyolojik kayıtlarının akut çoklu bölgesinin ayrıntılı bir tarifi verilmiştir. Hiperdirect kortiko-bazal gangliyon yolu gibi komple bir ağın standart ve özelleştirilmiş elektrotları kullanarak elektrofizyolojik olarak karakterize edilebileceği ve bu elektrotların nasıl oluşturulabileceği gösterilmiştir. Özellikle, bazal gangliyon çekirdeğinin kesin bir şekilde hedeflenmesinin co tarafından nasıl başarılabileceği vurgulanmaktadır.Stereotaktik ameliyatı MUA&#39;ların çevrimiçi kaydı ile birlikte birleştirdik.

<table><tbody><tr><td>Ag/AgCl özel epidural elektrotlar</td><td>Goodfellow GmbH D-61213 Bad Nauheim, Almanya info@goodfellow.com</td><td>%99,99 gümüş telli</td><td>Ag/AgCl elektrotları için Ürün Kimliği AG005127 daha iyi sinyal kalitesi sağlar, ancak yalnızca akut deneylerde kullanılabilir. Olası değiştirme: Paslanmaz çelik elektrotlar</td></tr><tr><td>Akrilik bloklu stereotaksik tutucu</td><td>David Kopf Instruments, 7324 Elmo Street, Tujunga, CA 91042, ABD</td><td>Ürün Kodu Model 1770 Standart Elektrot Tutucu</td><td>Akrilik bloğun, istenen hedef için elektrot kurulumuna uygun girintilere sahip olduğundan emin olun. Akrilik bloklar, istenen konfigürasyonu elde etmek için bir dosya ile kolayca değiştirilebilir. Olası değiştirme: Kendi kendine inşa edilen elektrot tutucular</td></tr><tr><td>Tungsten mikro tel elektrotlar 1.5 M & Omega; empedans</td><td>Microprobes.com 18247-D Flower Hill Way&nbsp; Gaithersburg, Maryland, 20879 ABD</td><td>Ürün Kimliği WE3ST31.5A5-250um</td><td>1.5 M&Omega; MUA ve LFP'yi aynı anda kaydetmek için gereklidir. Olası değiştirme: Farklı malzemelerden mikroelektrotlar kullanılabilir. Elektrotlar düz, sağlam ve mümkün olduğunca ince olmalıdır.</td></tr><tr><td>Sıçan hizalama aleti</td><td>David Kopf Instruments, 7324 Elmo Street, Tujunga, CA 91042, ABD</td><td>Ürün Kimliği Model 944 Sıçan Hizalama Aracı</td><td>Beynin tam oryantasyonunun stereotaksik atlaslarla eşleşmesini sağlar. Olası değiştirme: Kanüllü stereotaksik tutucu</td></tr><tr><td>İki bileşenli dental akrilik</td><td>Associated Dental Products Ltd. Kemdent Works, Purton, Swindon Wiltshire, SN5 4HT, Birleşik Krallık</td><td>Simplex Rapid Powder Clear 225g, Ürün kodu: ACR803; Simplex Rapid Liquid 150ml, Ürün kodu: ACR920</td><td>Kullanılan elektrotlara bağlı olarak, elektrotlar küçük ve hafifse, süper yapıştırıcı kolay bir alternatif olabilir. Olası değiştirme: Süper yapıştırıcı (Siyanakrilat bazlı)</td></tr> <tr><td>Faraday kafesi</td><td>Kendi kendine yapılanma</td><td></td><td>Uygun bir Faraday kafesi, elektromanyetik artefaktlardan en iyi koruma olacaktır, ancak bir kutu şeklinde oluşturulabilen veya bir çerçeveye uygulanabilen ve iletken malzemeden yapılmış her şey yardımcı olabilir. Olası değiştirme: Alüminyum folyo veya bakır ağ</td></tr><tr><td>Kayıt yazılımı ve çevrimiçi ani sıralama yetenekleri ile elektrofizyolojik kurulum</td><td>OmniPlex&reg; Sinirsel Veri Toplama Sistemi Plexon Inc 6500 Greenville Avenue, Suite 700 Dallas, Teksas 75206 ABD</td><td></td><td>Çevrimdışı sıralama yazılımı potansiyel bir alternatiftir, açık kaynak topluluğunda birden fazla komut dosyası ve yazılım ücretsiz olarak bulunabilir.</td></tr></tbody></table>

akut<emin vivo</em&gt; anestezi uygulanan sıçanlarda hiperdirect pathway&#39;den lokal alan potansiyellerinin elektrofizyolojik kayıtları ve Çoklu Ünite aktivitesi

Acute In Vivo Electrophysiological Recordings of Local Field Potentials and Multi-unit Activity from the Hyperdirect Pathway in Anesthetized Rats

Yakın geçmişteki kanıtlar birçok nöropsikiyatrik hastalığın geniş ölçekli nöronal ağların bozuklukları olarak anlaşılması gerektiğini göstermektedir. Bu hastalıkların patofizyolojik temelini daha iyi anlamak için, hangi işleme yönteminin devrenin farklı nöronal kısımları arasında bozulduğunu kesin olarak belirtmek gerekir. Ekstraselüler in vivo elektrofizyolojik kayıtları kullanarak, bir nöronal ağ içindeki nöronal aktiviteyi doğru bir şekilde çizmek mümkündür. Bu yöntemin uygulanması, benzersiz bir zamansal ve mekansal çözünürlüğe izin verdiği ve genetiği değiştirilmiş organizmalara dayanmadığı için, fonksiyonel manyetik rezonans görüntüleme ve kalsiyum görüntüleme gibi alternatif teknikler üzerinde birçok avantaja sahiptir. Bununla birlikte, hücre dışı in vivo kayıtların kullanımı, evrensel olarak uygulanamayan invaziv bir teknik olduğu için sınırlıdır. Bu yazıda basit ve kullanımı kolay bir yöntem sunulmaktadır.Yerel alan potansiyelleri ve multi-unit aktivite gibi hücre dışı potansiyellerin bir ağın birden çok yerinde aynı anda kaydedilmesi mümkündür. Sterotaktik cerrahi ile çok üniteli kayıtların online analizinin bir kombinasyonu kullanılarak subkortikal çekirdeklerin kesin bir hedeflemesinin nasıl başarılabileceği detaylandırılmıştır. Böylece, hiperdirect kortiko-bazal ganglia döngüsü gibi eksiksiz bir ağın in vivo anestezi altındaki hayvanlarda nasıl çalışılacağı gösterilmektedir.

Burada kullanılan kayıt elektrotları ile birincil motor korteks, subtalamik çekirdek ve substantia nigra pars reticulata ve MUA&#39;dan gelen LFP&#39;leri STN ve SNr&#39;den örneklemek mümkündür. Başlangıçta, LFP&#39;ler ve çok üniteli etkinlik geniş bant sinyaliyle birlikte kaydedilir. Bundan sonra, LFP&#39;ler ve MUA&#39;lar bant geçiren filtrelerle ayrılır (LFP&#39;ler için 0,05-250 Hz ve MUA için 300-4,000 Hz). Subkortikal...

Bu çalışmada, üretan anestezi altında hiperdirect yolaktan çoklu saha in vivo elektrofizyolojik kayıtların nasıl gerçekleştirileceği üzerine metodoloji sunulmuştur.

Akut<emIn vivo</em&gt; Anestezi Uygulanan Sıçanlarda Hiperdirect Pathway&#39;den Lokal Alan Potansiyellerinin Elektrofizyolojik Kayıtları ve Çoklu Ünite Aktivitesi

Converging evidence shows that many neuropsychiatric diseases should be understood as disorders of large-scale neuronal networks. To better understand the ...

Bu deneyin genel amacı, anestezi altındaki sıçanların kortiko-bazal ganglion döngüsünden lokal alan potansiyellerinin ve çoklu birim aktivitesinin akut in vivo elektrofizyolojik kayıtlarının nasıl yapılacağını göstermektir. Bu yöntem, nöropsikiyatrik hastalıklardaki karmaşık patofizyolojiye patolojik osilasyonların nasıl katkıda bulunduğu gibi nörobilim alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, beynin çeşitli kortikal ve subkortikal hedeflerinden eş zamanlı olarak hücre dışı potansiyellerin kaydedilmesine olanak tanımasıdır.Lokal alan potansiyelleri, kapalı döngü stimülasyon gibi tedaviler için potansiyel bir biyobelirteç olarak kullanılabileceğinden, bu tekniğin etkileri farklı nöropsikiyatrik hastalıkların tedavisine kadar uzanmaktadır. Bu yöntem bazal ganglionların patofizyolojisine dair içgörü sağlayabilse de, diğer beyin bölgelerine de uygulanabilir. Bu prosedüre başlamak için, 200 mikrometre çapında, beş santimetre uzunluğunda bir gümüş tel hazırlayın ve gerekirse üzerindeki kaplamayı çıkarın.Ardından, tel ucunu, uç erimeye başlayıp bir milimetre çapında bir küre oluşturana kadar alevde aşağıya doğru tutun. Daha sonra elektrodu, küre şeklindeki ucun başlangıcından telin sonuna kadar toplam 15 milimetre uzunluğunda olacak şekilde kesin. Telin ucuna, elektrofizyolojik kayıt sistemine uygun bir hassas konnektör lehimleyin.Ardından, iletkenliği artırmak için lehim noktasını tel ucundan konnektöre kadar iletken gümüş vernik ile kaplayın. İletken vernik kuruduktan sonra, lehim noktasını bir ila üç milimetrelik bir ısı ile daralan makaron ile kapatın. Küre şeklindeki ucu, bir saatçi çekici kullanarak dikkatlice kalınlığının yarısına kadar düzleştirin.Ardından, muayene eldivenlerini giyin ve her türlü kir ile yağı temizlemek için %100 ethanol ile birlikte tüy bırakmayan bir temizleme bezi kullanın. Daha sonra elektrotları 15 mililitrelik bir santrifüj tüpüne veya hücre kültürü tüpüne yerleştirin ve küre şeklindeki uç tamamen kapanana kadar ev tipi klorlu çamaşır suyu ile doldurun. 23 dakika sonra elektrotları çıkarın ve bol miktarda distile su ile durulayın.Gümüş klorür uygulamasının başarılı olması durumunda, elektrot yüzeyi homojen bir şekilde koyu mor görünmelidir. Bunun ardından, elektrotların havada kurumasına izin verin. Elektrotlar tamamen kuruduktan sonra, onları ince bir cımbızla alın.Ardından, elektrotların üzerine sıvı elektrik yalıtkanı uygulamak için ince uçlu bir boya fırçası kullanın. Elektrotta uç kısmının hemen arkasındaki telden başlayarak ısı ile daralan makarona kadar olan tüm bölgeyi kaplayın. Sonrasında, yalıtkanın kuruması için en az iki saat bekleyin.Bu adımda, ilk elektrot çiftini yapışkan bant parçalarıyla tutucunun akrilik bloğuna gevşekçe sabitleyin. Elektrotlar akrilik bloktan yaklaşık 12 milimetre dışarı çıkmalıdır. Ardından, ikinci bipolar elektrodu ilk elektrodun yanına dikkatlice sabitleyin.Hiper direkt yol yapılarını hedeflemek için, elektrot çiftleri arasındaki mesafe iki milimetre olmalıdır. Mikroskop altında, ikinci bipolar elektrodu, en ventral ucun birinci elektroda kıyasla yaklaşık 200 micrometers içeride kalacağı bir konuma dikkatlice kaydırarak ayarlayın. Yapışkan bant üzerine bastırın ve ardından elektrotları tutucunun metal kelepçesiyle sabitleyin.Hayvanı anestezi altına aldıktan sonra, temiz bir cerrahi alan elde etmek için baş kısmını tıraş edin. Hayvanı stereotaksik çerçeveye sabitleyin ve ardından insizyon bölgesini ve çevre alanı uygun bir cerrahi dezenfektan ile dezenfekte edin. Sonrasında, bir skalpel kullanarak saçlı deride sagital yönde iki santimetre uzunluğunda bir insizyon gerçekleştirin.Kafatası aponevrozunu hafifçe kazımak için bistüri kullanın ve kafatasını %3 hidrojen peroksit ile dezenfekte edin. Ardından, kalan dokuları temizlemek için %3 hidrojen peroksite batırılmış pamuklu çubuklar kullanın. Sonrasında, kafatasının üst kısmı düzleşene kadar, yani stereotaksik referans noktaları olan bregma ve lambda aynı düzleme gelene kadar kesici diş barını ayarlayın.Mikroskop altında, belirlenen ucu bregma ile kalibre etmek için standart bir stereotaksik sıçan hizalama aracı kullanın ve araç üzerindeki bregma ve lambda için belirlenen noktalar kafatasına aynı anda değene kadar kesici diş barını ayarlayın. Kanül içeren bir stereotaksik tutucu kullanarak, bunu bregmaya göre kalibre edin ve ardından kafatasındaki tüm delme deliklerinin konumunu hesaplayın. Daha sonra, delinecek deliklerin konumlarını ya kafatasını dikkatlice çizerek ya da cerrahi bir renkli işaretleyici kullanarak işaretleyin.Ardından, bir mikro matkap kullanarak yaklaşık bir milimetre çapındaki tüm delikleri dikkatlice delin. STN ve SNr için yaklaşık iki milimetre çarpı üç milimetre boyutlarında ortak bir delik açın. Bir adet ince kanül alın ve uç kısmını iki kanca oluşturacak şekilde bükün.Ardından, kancaları kullanarak matkap deliklerindeki tüm kalıntıları temizleyin ve ortak STN/SNr deliğindeki dura mater'i dikkatlice keserek çıkarın. Bundan sonra, matkap deliklerini fizyolojik salin ile yıkayın. Beynin ve duranın kurumasını önlemek için her 15 dakikada bir matkap deliklerine bir damla fizyolojik salin uygulayın.Ardından bir mikro matkap ve uygun paslanmaz çelik mikro vida kullanarak, serebellum üzerindeki referans epidural elektrotların matkap delikleri arasına bir delik açın ve bir mikro vida vidalayın. Sonra, elektrot uçlarını ince cımbızlarla yönlendirin ve onları doğrudan kafatası kemiğinin altına, matkap deliklerine doğru kaydırın. Tüm epidural elektrotları iki bileşenli şablon akrilik ile sabitleyin.Bregma noktasının kapanmadığından ve ortak STN/SNr deliğinin etkilenmediğinden emin olun. Ardından, tungsten mikro tel elektrotların bulunduğu hazırlanmış tutucuyu stereotaksik çerçeveye yerleştirin. STN'yi hedeflemesi amaçlanan en ventral elektrodu bregmaya göre kalibre edin.Ortak STN/SNr deliğinin üzerinde hesaplanan konuma ayarlayın ve elektrotları beyne doğru indirin. Tungsten mikro tel elektrotların beyne sorunsuz bir şekilde girdiğinden emin olun. Bu işlem sırasında, bant geçiren filtre gibi kayıt yazılımını ayarlayın ve ham veri sinyalini yükseltin.Ardından uygun ayarlara sahip bir çevrimiçi LFP ve spike filtresi kullanın. Tüm filtreler için Butterworth tipi bir filtre kullanın. Çevrimiçi spike sıralaması için bir spike eşiği belirleyin.Çoğu kayıt yazılımı, bir sinyalin yazılım tarafından spike (diken) olarak işaretlenmesi için gereken eşik değerinden yüksek bir genlik değeri olan spike eşiğinin belirlenmesine olanak tanır. Ardından, tungsten mikro tel elektrotları yavaşça STN'nin bir milimetre üzerine indirin ve gerekirse sinyalin stabilize olmasını bekleyin. Elektrofyizyolojik haritalama için elektrotları 100 mikrometrelik adımlarla ventral yönde ilerletin.Her adımda, ateşleme paternini, ateşleme hızını ve spike şekillerini, ekteki makalenin ikinci şeklinde verilen tipik örneklerle karşılaştırarak değerlendirin. Elektrotlar istenen yapılara yerleştiğinde, çevrimiçi filtreleme ve spike sıralamasını ayarlayın ve ardından veri kaydını başlatın. Burada, primer motor kortekse ait temsili 600 saniyelik bir LFP kaydı yer almaktadır.Aktif duruma karşılık gelen yüksek frekanslı düşük genlikli aktivitenin olduğu zaman dilimleri ile yavaş dalga aktivitesi durumuna karşılık gelen daha yavaş ritimli ve daha yüksek genlikli zaman dilimleri birbirinden ayırt edilebilir. Ve bu, LFP'lerin 0 ila 20 Hertz arasındaki bağıl gücünü gösteren 600 saniyelik bir aralığa ait karşılık gelen zaman-frekans grafiğidir. Uzmanlaşıldığında, bu teknik düzgün bir şekilde uygulandığında iki saat içinde tamamlanabilir.Bu videoyu izledikten sonra, anestezize edilmiş sıçanların kortiko-bazal gangliyon döngüsünden hücre dışı in vivo elektrofizyolojik kayıtların nasıl gerçekleştirileceğine dair iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

acute-vivo-electrophysiological-recordings-local-field-potentials

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu video, anestezi uygulanmış bir sıçanın birden fazla bölgeden beyin aktivitesinin elektrofizyolojik kayıtları için hazırlanmasına yönelik ayrıntılı prosedürü göstermektedir. Kafatasına erişmek için kafa derisi kesilir ve elektrotları yerleştirmek ve sabitlemek için kesin yerlerde delikler açılır. Tungsten mikrotel elektrotlar daha sonra verileri kaydetmek için hedeflenen konuma yerleştirilir.

Sıçanlarda Birden Fazla Bölgeden Beyin Aktivitelerinin İn Vivo Elektrofizyolojik Kayıtları

Bu video, anestezi uygulanmış bir sıçanda birlikte lokalize elektroensefalografi (EEG) ve lokal alan potansiyellerinin (LFP'ler) eşzamanlı kayıtları için prosedürü göstermektedir. İşlem, sıçanın hazırlanmasını ve uyarıcı elektrotların bıyık pedlerine takılmasını içerir. Yüzey EEG ölçümleri için farenin kafatasına bir EEG örümcek elektrodu yerleştirilir. Aynı zamanda, çok kanallı bir mikroelektrot, lokalize bir beyin bölgesinden nöral aktiviteyi kaydetmek için kafatasındaki bir çapak deliğinden...

Anestezi Uygulanmış Bir Sıçanda Eş Zamanlı Elektroensefalografik ve Lokal Alan Potansiyeli Kayıtları

Bu prosedür bir izoelektrik beyin devlet sonuçlanan fizyolojik ilgili beyin durumlarında ve devam eden elektrik faaliyetlerinin tam kaldırılmasından sonra tek nöronların uzun ömürlü in vivo hücre içi kayıtları gerçekleştirir. hayvanın fizyolojik sabitleri dikkatle yapay komada durumuna geçiş sırasında izlenir.

Bir izoelektrik Beyin Devlet indüksiyon Nöronal Eksitabilite üzerinde Endojen Sinaptik Faaliyet etkisini araştırmak için<em&gt; İn Vivo</em

Bu protokol, anestezi uygulanmış sıçanlarda elektroretinogram ve görsel uyarılmış potansiyellerin eş zamanlı ölçümünü tanımlar.

Elektroretinografi Eşzamanlı Kayıt ve Anestezi Sıçanlar Görsel Uyarılmış Potansiyeller

Biz kayıtları anestezi karıştırıcıların olmadan yapılan insan durumuna daha benzerdir gözün (Elektroretinogram) ve bilinçli sıçanlarda beyin (görsel uyarılmış potansiyel), görsel elektrofizyolojik sinyaller ölçmek için cerrahi implantasyon ve Kayıt işlemleri göstermektedir.

Bilinçli Sıçanlarda implantasyon ve Kablosuz Elektroretinogram Recording ve Görsel Uyarılmış Potansiyel

Bu iletişim kuralı ortak yerelleştirilmiş elektroansefalografi (EEG) ve multi-Laminer yerel alan bir imzalat köstebeğiyle potansiyel eşzamanlı kayıt için basit bir yöntem açıklanır. Bir elektrot yerleştirilmesi için kafatası delinen burr deliği EEG sinyal önemsiz bozulma üretmek için gösterilir.

Co yerelleştirilmiş elektroansefalografi ve yerel alan potansiyel kemirgen eşzamanlı kayıt

Bu çalışmada yerel alan potansiyelleri beyin, Elektrokardiyogram, electromyograms aynı anda kayıt ve sinyalleri serbestçe hareket sıçan nefes bir yöntem sağlar. Deneysel maliyetlerini azaltır ve veri analizi kolaylaştırır, bu tekniği, beyin ve periferik organlarda arasındaki etkileşimler anlayış katkıda bulunacaktır.

Kortikal yerel alan potansiyelleri, Elektrokardiyogram, Electromyogram ve ritim serbestçe hareket bir sıçan gelen nefes eşzamanlı kayıt

4 aminopyridine uyarılan epileptiform aktivite kayıt ve elektrik modülasyon elektrot dizileri kullanma kemirgen beyin dilimler halinde gerçekleştirme göstermektedir. Özel kayıt odası doku canlılığı uzun süreli deneysel oturumları boyunca korur. Elektrot eşleme yaşamak ve uyarıcı çiftlerinin seçimi özel bir grafik kullanıcı arabirimi tarafından yapılmaktadır.

Kayıt ve modülasyon Epileptiform aktivite elektrot dizilerin birleştiğinde kemirgen beyin dilimleri içinde

Biz aynı anda hem electrocorticography hem de yerel alan potansiyelleri fareler serbestçe hareket nosiseptif lazer uyaranlara yanıt kaydeder bir teknik geliştirmiştir. Bu teknik araştırma nosiseptif bilgi beyinde işleme kolaylaştırır electrocortical sinyalleri mezoskopik ve makroskopik düzeyde, doğrudan bir ilişki kurmak yardımcı olur.

Kortikal yerel alan potansiyelleri ve Electrocorticograms fareler serbestçe hareket nosiseptif lazer uyaranlara yanıt olarak eşzamanlı kayıt

Bu protokol, kafasına sabitlenmiş farelerin beyin sapından in vivo, yüksek yoğunluklu tek nöron kayıtları elde etmek için bir yöntemi açıklar. Bu yaklaşım, genel anestezi öncesinde ve sırasında Hızlı Göz Hareketi (REM) uykusu sırasında aktif olmayan bir beyin sapı bölgesi olan ventrolateral periakuaduktal grideki nöronların aksiyon potansiyel ateşlemesini ölçmek için kullanılır.

Kafası Sabit Farelerin Beyin Sapından Akut Tek Üniteli Çoklu Elektrot Kayıtları

Burada, sinir lifi alt tiplerinin aktivitesini ayırt edebilen iki tür omurga elektrofizyolojik ölçümü kullanarak periferik sinirlerdeki çevresel sinirlerdeki duyusal aksonların aktivasyonu ve bloklanmasını değerlendirmek için bir yöntem sunuyoruz: Yerel Alan Potansiyelleri ve Geniş Dinamik Aralıklı tek nöron kayıtları.

Anestezi Edilmiş Bir Farede Çevresel Ağrı Blokunu Değerlendirmek İçin Elektrofizyolojik Yöntemler

Öğrenin, anestezili sıçanlarda kortiko-bazal gangliya halkasından lokal alan potansiyelleri ve çoklu ünite aktivitesi kaydetme yöntemini. Bu teknik, nöropsikiyatrik hastalıkların patofizyolojisini anlamak ve kapalı döngü stimülasyonu gibi tedaviler için biyobelirteç geliştirmek amacıyla kullanılır.

Akut Anestezi Uygulanan Sıçanlarda Hiperdirect Pathwayden Lokal Alan Potansiyellerinin Elektrofizyolojik Kayıtları ve Çoklu Ünite Aktivitesi (Video) | JoVE Journal

Akut

Daha fazla video keşfet