-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

TR

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

tr_TR

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Neuroscience
Primer Astrosit Kültürlerinde Proteinlerin Hücre-Yüzey İfadesi ve Endosit Oranının Biyotinleme Yö...
Primer Astrosit Kültürlerinde Proteinlerin Hücre-Yüzey İfadesi ve Endosit Oranının Biyotinleme Yö...
JoVE Journal
Neuroscience
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Neuroscience
Determining Cell-surface Expression and Endocytic Rate of Proteins in Primary Astrocyte Cultures Using Biotinylation

Primer Astrosit Kültürlerinde Proteinlerin Hücre-Yüzey İfadesi ve Endosit Oranının Biyotinleme Yöntemiyle Belirlenmesi

Full Text
10,134 Views
10:42 min
July 3, 2017

DOI: 10.3791/55974-v

Daniel Kai Long Tham1, Hakima Moukhles1

1Department of Cellular and Physiological Sciences,University of British Columbia

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This report presents two biotinylation-based methods for assessing cell-surface expression and endocytic rates of proteins at the plasma membrane. The techniques are demonstrated using astrocytes and focus on the protein Aquaporin-4.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Cell Biology
  • Biochemistry

Background

  • Aquaporin-4 is a water channel protein expressed in astrocytes.
  • Astrocytes are the most abundant glial cells in the brain.
  • Biotinylation techniques allow for the study of transmembrane proteins.
  • Understanding protein expression and internalization is crucial for neuroscience research.

Purpose of Study

  • To determine the effects of laminin on Aquaporin-4 expression.
  • To provide methods applicable to various cell types.
  • To enhance understanding of protein dynamics at the plasma membrane.

Methods Used

  • Cell-surface biotinylation
  • Pulse-chase biotinylation
  • Use of astrocytes for demonstration
  • Assessment of protein expression and internalization

Main Results

  • Demonstrated methods can be applied to different cell types.
  • Showed the impact of laminin on Aquaporin-4 at the plasma membrane.
  • Provided insights into the internalization rates of transmembrane proteins.
  • Validated techniques for studying protein dynamics in neuroscience.

Conclusions

  • The biotinylation methods are effective for studying protein expression.
  • These techniques can be adapted for various research applications.
  • Understanding Aquaporin-4 dynamics can inform neurological research.

Frequently Asked Questions

What is biotinylation?
Biotinylation is a method used to label proteins with biotin, allowing for their detection and analysis.
Why are astrocytes used in this study?
Astrocytes are used because they are abundant in the brain and express the protein of interest, Aquaporin-4.
What is the significance of Aquaporin-4?
Aquaporin-4 is important for water transport in the brain and plays a role in maintaining brain homeostasis.
Can these methods be applied to other cell types?
Yes, the methods can be adapted for various cell types, including both adherent and suspended cells.
What is the role of laminin in this study?
Laminin is investigated for its effects on the expression of Aquaporin-4 at the plasma membrane.
How do these methods contribute to neuroscience research?
These methods provide insights into protein dynamics, which are crucial for understanding cellular functions in the brain.

Bu raporda, plazma membranında eksprese edilen proteinlerin hücre yüzeyi ekspresyonunu ve endositik hızını belirlemek için tasarlanan iki biyotinilasyona dayalı yöntemler sunulmuştur.

Bu videoda, hücre yüzeyi biyotinilasyonu ve nabız takibi biyotinilasyonu olmak üzere iki yöntem sunulacaktır. Aşağıdaki gösteride astrositleri kullanacağız. Bunlar beyinde en bol bulunan glial hücre tipleridir ve ilgilendiğimiz protein olan Aquaporin-4'ü ifade ederler.

Bu yazıda kullandığımız yöntemler birçok farklı hücre tipine uygulanabilir ve bunlar süspansiyondaki hücreleri veya yapışık hücreleri içerebilir. Bu teknikler, biotin için erişilebilir bir hücre dışı alana sahip olduğu sürece, hemen hemen her transmembran proteinin hücre yüzeyi ekspresyonunu ve içselleştirilmesini incelemek için kullanılabilir. Bu hücre yüzeyi biyotinilasyon testinin genel amacı, lamininin astrositlerin plazma zarındaki su geçirgen kanal Aquaporin-4'ün ekspresyonu üzerindeki etkilerini belirlemektir.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Nörobilim Sayı 125 Hücre yüzeyinde ifade endositoz biyotinilasyon astrositler aquaporin-4 plazma membranı

Related Videos

Tersinir biyotinilasyon Plazma Membran Protein endositik Oranları Ölçüm

11:32

Tersinir biyotinilasyon Plazma Membran Protein endositik Oranları Ölçüm

Related Videos

17.6K Views

Bir Astrosit Kültüründen Hücre Yüzeyi ve Hücre İçi Proteinlerin İzolasyonu

04:58

Bir Astrosit Kültüründen Hücre Yüzeyi ve Hücre İçi Proteinlerin İzolasyonu

Related Videos

566 Views

Bir Biyotin Türevi Kullanılarak Hedef Yüzey Proteinlerinin İçselleştirilmesinin Değerlendirilmesi

05:16

Bir Biyotin Türevi Kullanılarak Hedef Yüzey Proteinlerinin İçselleştirilmesinin Değerlendirilmesi

Related Videos

727 Views

Kültürlü Astrositlerde Yükün Hücre İçi Taşınımının Görselleştirilmesi

02:35

Kültürlü Astrositlerde Yükün Hücre İçi Taşınımının Görselleştirilmesi

Related Videos

406 Views

Plazma Zarı Proteinlerinin Endositozu ve Geri Dönüşümünü İncelemek için Hücre Bazlı L-Glutatyon Koruma Testleri

09:22

Plazma Zarı Proteinlerinin Endositozu ve Geri Dönüşümünü İncelemek için Hücre Bazlı L-Glutatyon Koruma Testleri

Related Videos

11K Views

Beyin Dilim Biyotinilasyonu: An Ex Vivo Yaklaşım

06:18

Beyin Dilim Biyotinilasyonu: An Ex Vivo Yaklaşım

Related Videos

13.6K Views

Akım Sitometri Kullanımı rekombinant İyon Kanallarının göreli Hücre Yüzey ve toplam İfade tayini

11:32

Akım Sitometri Kullanımı rekombinant İyon Kanallarının göreli Hücre Yüzey ve toplam İfade tayini

Related Videos

14K Views

Primer Nöral Kök ve Progenitor Hücrelerinin Hücre Yüzey Belirteçlerinin Sialoglycan'ın Metabolik Etiketlemesi ile Belirlenmesi

11:39

Primer Nöral Kök ve Progenitor Hücrelerinin Hücre Yüzey Belirteçlerinin Sialoglycan'ın Metabolik Etiketlemesi ile Belirlenmesi

Related Videos

5.8K Views

Disanated primer hipokampal kültürlerde glutamat reseptör kaçakçılığı çalışması için antikor beslenme yaklaşımı

08:13

Disanated primer hipokampal kültürlerde glutamat reseptör kaçakçılığı çalışması için antikor beslenme yaklaşımı

Related Videos

6.2K Views

Astrositlerde Organeller ve Diğer Kargoların Hücre İçi Taşınmasının Görselleştirilmesi ve Analizi

07:19

Astrositlerde Organeller ve Diğer Kargoların Hücre İçi Taşınmasının Görselleştirilmesi ve Analizi

Related Videos

8.4K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code