Name: Kardiyopulmoner baypas gerektirmeyen bir fare modeli: yeni bir yaklaşım (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-09-22T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 8 s
Description: Keşfedin, farelerde kardiyopulmoner baypasız yeni bir modelle kalp hasarının moleküler mekanizmalarını incelemeyi. Bu yöntem, uzatılmış kardiyopleji sürelerinin etkilerini araştırmak için değerli bir araç sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar hiçbir katkıda bulunanlar var.

tüm hayvan deneyleri Alman hayvan koruma kanunu (TierSchG) uygun olarak gerçekleştirilen ve yerel hayvan refahı Komitesi (alt Saksonya eyalet ofis için tüketicinin korunması ve gıda güvenliği, iletişim kuralı tarafından kabul edildi TSA 14/1556). Fare bu model için uygun en az kilo 25 yaşında g.
 1. Preoperatif hazırlıklar Not: tüm yordamları temiz, steril olmayan koşullar altında autoclaved araçlarıyla yapılmaktadır.
<ol><li>Yer 50-60 8 cm uzun propilen liflerin paralel bir tüp oyuk ve her iki tarafta bir T-adaptör ile bağlayın. Yapıştırıcı ile içi boş elyaf ve T-adaptör dış dalı arasındaki boşluğu doldurmak.
	<ol><li>İzin ver en az 24 tutkal sertleşmesine s. Dışarı uzanan T-standart bir microtome kullanarak bağdaştırıcısından boş lifler kesme ve bağlantı yerleri silikon tüp kenara.</li>
	</ol></li> <li>Bir 27 G metal iğneden (26 G branule) 2 Fr poliüretan kanül yerleştirin. Cerrahi bir bıçak kullanın ve mikro-makas (8-12 X büyütme) 3-4 fenestrations yaklaşık 0.15 cm her sağlamak için kanül distal üçüncü içinde en uygun Venöz yapmak için mikroskop altında geri akışı.
	<ol><li>Kaldır tamamlandığında tel. Pamuk temizleme bezi künt disseksiyon ve retraksiyon yapıları için kullanın. Doku su kaybı önlemek için aşırı sıvı emmek için gazlı bez temizleme bezi (5 x 5 cm 2) kullanın.</li>
	</ol></li> <li>Astar birim hazırlamak. Tamamlamak için heparin çözüm ve % 2.5 v/v % 8.4 çözümünün tamponlama için NaHCO 3 priming mL başına 30 IU ekleyin. Bu çözüm kullanana kadar 4 ° C'de depolayın.</li>
	<li>Doldurmak KPB devre (yani, pompa, hava avcı, boru ve her iki Kanüller) 850 µL astar eriyik yolu ile Venöz kanül ile. Hayvan cannulation için hazır olması ne kadar KPB dolaşan dolu bir kez tutmak.</li>
</ol> 2. Hayvan anestezi anestezi yönetmek, hayvan indüksiyon odasında altında %2.5 yer için <ol><li>v/v isoflurane/oksijen karışımı. Uygun anestezi tarafından değerlendirilmesi pedal çekilme refleks, kuyruk tutam refleks ve göz kırpma refleksi onaylayın. Göz kuruluğu önlemek için veteriner göz merhem uygulamak.</li>
	<li>Sıcaklık düzenleyen fonksiyonu ile ısınma bir yastık üzerinde hayvan yer. Rektal eklenen ve veri toplama sistemine bağlı bir sonda ile vücut ısısını ölçmek.</li>
	Tam anestezi elde sonra <li>bir 20 G plastik braunule kullanarak, sözlü olarak ekleme ve görsel kontrol altında nefes borusu içine iterek hayvan orotracheally Tüp takacağım. Mekanik havalandırma bir fare vantilatöre bağlı bir isoflurane Buharlaştırıcı kullanarak başlatın. 250-350 µL gelgit hacmi elde havalandırma hayvan ağırlık bağlı olarak ayarlayın.</li>
	Tam analjezi sağlamak için <li>5 mg/kg vücut ağırlığı hayvan carprofen subkutan enjekte et. Bu isoflurane konsantrasyonu % oksijen 1.3-2.5 arasında tutulması önerilir. Isoflurane konsantrasyon el ile ayarlanabilir prosedür Sahne bağlı olarak.</li>
</ol> 3. Cerrahi <ol><li>sonra tam anestezi ve entübasyon, Ensizyon deri boyun için keskin iyi makas ile gerçekleştirmek, ayrı bir künt moda kaslarda ve Sağ juguler ven ve sol Karotis arter açığa. Hazırlık sırasında küçük gemiler en az kan kaybı emin olmak için iki kutuplu forseps için bağlı bir veteriner coagulator kullanarak koagüle.</li>
	<li>Şah damarları hazırlanması sonra cranially sol ortak Karotid arter ile 8-0 ipek sütür kullanma, çatallanma distal segment ligate.</li>
	<li>Kullanarak bir silikon konektörü (0,5 mm kimliği, 1 mm OD), yer 8-0 ipek sütür kayma Arteryel girişi boru için 27 G kanül distal sonu knot, arter ve INSERT Karotid arter içine kanül ucu proksimal segmentin bağlan.</li>
	<li>3-4 mm proksimale aort bırakır böylece kanül ucu kanül ucu doğru yerleşimini sonra ilerlemek. 8-0 ipek deniz mili ile güvenli hale getirme kanül ucu düzeltmek.</li>
	<li>Kullanma mikrocerrahi forseps ve makas, künt ve keskin diseksiyon gerçekleştirmek, Sağ juguler ven yanal için köprücük, yakın boyun kas dokusunun künt hazırlık tarafından ortaya çıkarmak ve distal uç ve bir 8-0 8-0 ipek düğüm yerleştirin döngü proksimal ucunda.</li>
	<li>Sonra ligasyonu juguler ven distal ucunun Sağ juguler ven ve sağ Kulakçık doğru ilerleme Venöz kanül ucu yeri ve ipek düğüm kullanarak güvenli. En uygun Venöz dönüş için Venöz uç sağ ventrikül ilerlemek gerekli olabilir.</li>
	<li>Doğru kanül pozisyonu elde sonra sistemik heparinization heparin juguler ven içine direkt intravenöz enjeksiyon yolu ile hayvan vücut ağırlığı gram başına 2.5 IU ekleyerek devam.</li>
	<li>Gerçek zamanlı invaziv basınç kontrolü için sol femoral arter cannulate. Kasık bölgesinde ortaya çıkarmak ve yavaşça femoral ven ve 25 X büyütme altında femoral sinir ortak femoral arter ayırın.
	<ol><li>Ligate distal femoral arter parçası. Geçici olarak bir kayma-düğüm ile proksimal bölümü doldurmak ve mikro-forseps kullanarak anterior duvarda küçük bir insizyon attım olun.</li>
		<li>Daha sonra 1 Fr poliüretan kanül femoral arter yerleştirin ve 10-0 sütür ipek ile sabitleyin. Bu kanül kan gaz analiz için kan örnekleri ayıklamak için kullanılır.</li>
	</ol></li> <li>Sonra başarılı yerleşim Arteryel ve venöz Kanüller, Kardiyopulmoner bypass pompayı çevirerek başlatmak. KPB ile başlayan entübasyon üzerinden yaklaşık 45 dk. Pompa hızı artırarak bir akış hızı 0.5 mL/dk, sistemik basınç ölçümleri ve artış kan akımı tam akış (4-6 mL/dak) için 2 dk içinde bağlı olarak kullanarak başlangıç zamanıdır.</li>
	<li>Tam kontrolü altında gerçekleştirmek ağız sapı başlayan ve 5 mm Kaudal yönde gidiyor keskin makas kullanarak üst bir yöntemdir. Hemen kanama önlemek için göğüs kenarları koagüle. Aort kranial yönde şu Şah damarı çekerek ortaya çıkarmak.</li>
	<li>İçin en uygun denetimi, çepeçevre aort timus ve çevresindeki doku sıkma kolaylaştırmak için ücretsiz. Artan aort çevresine bir 8-0 ipek daire yerleştirin. Minikardiyopleji yöntemi için çapraz klemp yerleştirmek için daha iyi maruz için kranial yönde ipek döngü artan aort çekin.</li>
</ol> 4. Kardiyopulmoner baypas gerektirmeyen ve kan gazı analizi <ol><li>kan gaz analizi (BGA) için cam kılcal tüpler femoral arter kateter yolu ile 60-90 µL arteryel kan toplamak için kullanın.
	<ol><li>Silikon tüp üzerinde küçük bir mengene kullanın ve sonda gelen boru ayır. Serbest yavaş yavaş kelepçe Kılcal Boru kontrollü dolum izin vermek için baskıyı.</li>
		<li>Kateter silikon tüp takın. Kan gazı analyzer aşağıdaki zaman noktalarda ölçümler için kılcal tüpler yerleştirin: 10 dakika sonra KPB inisiyasyon havalandırma (BGA1) ile 25 min CPB ve solunum durması (BGA2) 15 dk sonra 40 dk CPB ve solunum durması (BGA3) 30 dk sonra KPB 55 dk., 45 dk solunum ve kalp durması (BGA4) 20 dk sonra</li></ol></li> <li>istikrarlı KPB akışı, baş altında Havalandırma durdurma tarafından te solunum tutuklama.</li>
	<li>Havalandırma sona ermesi sonra ısınma yastık için 28 ºC ayarlayın ve topikal hayvan 28 ºC vücut ısısı solunum durması soğuk salin batırılmış gazlı bez kullanarak ilk 20 dk içinde için soğutma başlatın.</li>
	<li>Kez bir vücut sıcaklığı 28 ºC elde ve toplam solunum tutuklama 30 dak sonra 0.3 mL %7,45 KCl çözeltisi Minikardiyopleji yöntemi başlatmak için KPB devre yönetmek.</li>
	<li>İçin aort damarı sıkma çapraz, daha önce yerleştirilmiş ipek döngü (Adım 3.10) daha iyi maruz kranial yönde çekin ve bir mikro-serrefine kelepçe aort artan parçası yerleştirin.</li>
	<li>Toplam 60 dk solunum ve kalp durması 30 dk gerçekleştirin. Mikro-serrefine kelepçe reperfüzyon kalp başlatmak için artan aort kaldırın. Aynı anda, yeniden havalandırın ve hayvan 37 sıcak ° C.</li>
	<li>Reperfüzyon tamamladıktan ve hayvan normothermia, ulaştı sonra KPB pompası kapatarak sonlandırmak ve fizyolojik ölçümleri (örneğin vücut ısısı, EKG ve invaziv kan basıncı) 20 dakika süreyle izlemeye devam edin</li>
	<li>Deneme sonunda hayvan tam anestezi (%5 isoflurane) altında exsanguinate ve toplamak kan ve organları daha fazla analiz 14.</li>
</ol>

<ol><li>Edmunds, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiopulmonary+Bypass+after+50+Years%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiopulmonary Bypass after 50 Years.</a> N. Engl. J. Med. 351 (16), 1601-1603 (2004).</li>
<li>Goto, T., Maekawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+dysfunction+after+coronary+artery+bypass+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Anesth%22%5BJournal%5D)">Cerebral dysfunction after coronary artery bypass surgery.</a> J. Anesth. 28 (2), 242-248 (2014).</li>
<li>Uysal, S., Reich, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurocognitive+outcomes+of+cardiac+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cardiothorac.+Vasc.+Anesth%22%5BJournal%5D)">Neurocognitive outcomes of cardiac surgery.</a> J. Cardiothorac. Vasc. Anesth. 27 (5), 958-971 (2013).</li>
<li>Ballaux, P. K., Gourlay, T., Ratnatunga, C. P., Taylor, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+literature+review+of+cardiopulmonary+bypass+models+for+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Perfusion%22%5BJournal%5D)">A literature review of cardiopulmonary bypass models for rats.</a> Perfusion. 14 (6), 411-417 (1999).</li>
<li>Jungwirth, B., de Lange, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+cardiopulmonary+bypass%3A+development%2C+applications%2C+and+impact%5BTitle%5D)+AND+%22Semin.+Cardiothorac.+Vasc.+Anesth%22%5BJournal%5D)">Animal models of cardiopulmonary bypass: development, applications, and impact.</a> Semin. Cardiothorac. Vasc. Anesth. 14 (2), 136-140 (2010).</li>
<li>Günzinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+model+of+cardiopulmonary+bypass+with+cardioplegic+arrest+and+hemodynamic+assessment+by+conductance+catheter+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Res+Cardiol%22%5BJournal%5D)">A rat model of cardiopulmonary bypass with cardioplegic arrest and hemodynamic assessment by conductance catheter technique.</a> Basic Res Cardiol. 102 (6), 508-517 (2007).</li>
<li>Waterbury, T., Clark, T. J., Niles, S., Farivar, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+of+cardiopulmonary+bypass+for+deep+hypothermic+circulatory+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Thorac.+Cardiovasc.+Surg%22%5BJournal%5D)">Rat model of cardiopulmonary bypass for deep hypothermic circulatory arrest.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 141 (6), 1549-1551 (2011).</li>
<li>Schnoering, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+newly+developed+miniaturized+heart-lung+machine-expression+of+inflammation+in+a+small+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22Artif.+Organs%22%5BJournal%5D)">A newly developed miniaturized heart-lung machine-expression of inflammation in a small animal model.</a> Artif. Organs. 34 (11), 911-917 (2010).</li>
<li>Kim, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+responses+of+tissues+from+the+brain%2C+heart%2C+kidney%2C+and+liver+to+resuscitation+following+prolonged+cardiac+arrest+by+examining+mitochondrial+respiration+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Oxid.+Med.+Cell.+Longev%22%5BJournal%5D)">The responses of tissues from the brain, heart, kidney, and liver to resuscitation following prolonged cardiac arrest by examining mitochondrial respiration in rats.</a> Oxid. Med. Cell. Longev. 2016, (2016).</li>
<li>Shappell, S. B., Gurpinar, T., Lechago, J., Suki, W. N., Truong, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+obstructive+uropathy+in+severe+combined+immunodeficient+%28SCID%29+mice%3A+lymphocyte+infiltration+is+not+required+for+progressive+tubulointerstitial+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Chronic obstructive uropathy in severe combined immunodeficient (SCID) mice: lymphocyte infiltration is not required for progressive tubulointerstitial injury.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 9 (6), 1008-1017 (1998).</li>
<li>Majzoub, J. A., Muglia, L. J. <a target="_blank" href="http://web.mit.edu/hst.160/www/Knockout.pdf">Knockout mice.</a> N. Engl. J. Med. , 904-907 (1996).</li>
<li>Houser, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+Heart+Failure+A+Scientific+Statement+From+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Animal Models of Heart Failure A Scientific Statement From the American Heart Association.</a> Circ. Res. 111 (1), 131-150 (2012).</li>
<li>Russell, J. C., Proctor, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+cardiovascular+disease%3A+tools+for+the+study+of+the+roles+of+metabolic+syndrome%2C+dyslipidemia%2C+and+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Small animal models of cardiovascular disease: tools for the study of the roles of metabolic syndrome, dyslipidemia, and atherosclerosis.</a> Cardiovasc. Pathol. 15 (6), 318-330 (2006).</li>
<li>Iurascu-Gagea, M., Craig, S. Euthanasia and necropsy. <a target="_blank" href="https://books.google.com/books?id=HhEs-xsYp6IC&lpg=PP1&ots=kQsV14dfx9&dq=%22The%20laboratory%20rabbit%2C%20guinea%20pig%2C%20hamster%2C%20and%20other%20rodents%22&lr&pg=PP1#v=onepage&q=%22The%20laboratory%20rabbit,%20guinea%20pig,%20hamster,%20and%20other%20rodents%22&f=false">The laboratory rabbit, guinea pig, hamster, and other rodents</a>. Suckow, M. A., Stevens, K. A., Wilson, R. P. , Academic Press (Elsevier). 117-141 (2012).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Bir tam işlev gören klinik olarak ilgili model KPB bir fare geliştirdik. Kalp-damar hastalıkları olan fareler otuzdan fazla suşları ile bizim model geliştirme için KPB ile ilgili yeni potansiyel iletişim kuralları için bir başlangıç noktası olabilir. Ayrıca, fare özgü reaktifler ve nakavt-out fareler bolluk, nedeniyle bu model sadece KPB geçerli fare modelinin yerini alamaz ama moleküler mekanizmaları KPB ile ilgili organ hasarı dahil diseksiyon kolaylaştıracaktır. Bugüne kadar KPB mikrocerrahi zorluklar cannulation tekn...

Klinik içine Kardiyopulmoner bypass (KPB) giriş beri kalp cerrahisi1' de önemli bir rol oynamıştır. Modern kardiyak cerrahi, uzamış CPB süresi geniş aort rekonstrüksiyonu ve kombine yordamları gerçekleştirmek için önemlidir. Teknolojik gelişmeler çok büyük olmasına rağmen extracorporal kan dolaşımı ile içi - ve ameliyat sonrası sistemik ilişkili ve yerel organ zarar2,3.
Büyük hayvan modeller fizyolojik süreçleri4,5KPB rolünü araştırmak için geliştirilmiştir. Her ne kadar bu modeller KPB bazıları içgörü komplikasyonlar ilgili sağlamış, onlar son derece pahalı ve moleküler araçları (örneğin, antikorlar) çok sınırlıdır. Daha maliyet etkin bir alternatif küçük hayvanlarda geliştirmiştir. Gelişimleri beri fare ve tavşan5,6,7,8,9KPB modelinde en iyi duruma getirmek için birden fazla çalışmalar yapılmıştır. Bu modeller patofizyolojik hastalığı süreçleri ölçümleri için iyi bir temel sağlamak; Ancak, onlar hala hücresel ve humoral İmmünoloji ilgili antikorlar ve Kimyasalları eksikliği nedeniyle araştırmak yetersizdir. Bu araştırma Bu alan içindeki rollerine bozar.
Biz son zamanlarda KPB bir fare modeli geliştirdik. Genetik olarak değiştirilmiş fare ve fare özgü reaktifler çok çeşitli nedeniyle, fare modelleri genel olarak tercih ettiği fizyolojik, moleküler ve immünolojik araştırma10,11modeli vardır. Bu nedenle, birçok fare suşların klinik olarak ilgili hastalıklar12,13ile kullanılabilir olduğundan modelimiz KPB çalışma ile ilgili olarak çeşitli comorbidities kolaylaştıracaktır. Buna göre bu kağıt, ayrıntılı olarak KPB fareler nasıl gerçekleştirileceği açıklanır. Oksijen ve hemodinamik parametreler derin solunum ve dolaşım tutuklandıktan sonra yakından izlenir.

<table><tbody><tr><td>Sterofundin</td><td>B.Braun Petzold GmbH</td><td>PZN: 8609189</td><td>astar hacmi, Tetraspan Tetraspan ile 1: 1</td></tr> %<tr><td>6 HES Çözeltisi</td><td>B. Braun Melsungen AG</td><td>PZN: 05565416</td><td>astarlama hacmi, 1: 1 Sterofundin</td></tr><tr><td>ile Heparin Natrium 25.000</td><td>Ratiopharm GmbH</td><td>PZN: 3029843</td><td>ml astarlama çözeltisi başına 2.5 IU</td></tr><tr><td>NaHCO3 %8,4 Çözelti</td><td>B. Braun Melsungen AG</td><td>PZN: Hazırlama</td><td>çözeltisinde %1579775 3</td></tr><tr><td>KCL %7.45 Çözelti</td><td>B. Braun Melsungen AG</td><td>PZN:</td><td>Kardiyopleji için 2418577 0.1 mL</td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Zoetis Inc., ABD</td><td>PZN:00289615 08859153</td><td>5 mg/kg/BW</td></tr><tr><td>1 Fr PU Kateter</td><td>Instechlabs INC., ABD</td><td>C10PU-MCA1301</td><td>karotis arter</td></tr><tr><td>2 Fr PU Kateter</td><td>Instechlabs INC., ABD</td><td>C20PU-MJV1302</td><td>juguler ven</td></tr><tr><td>Vasofix Güvenlik kateteri 20G</td><td>B.Braun Medical</td><td>4268113S-01</td><td>orotrakeal entübasyon</td></tr><tr><td>8-0 İpek sütür örgülü</td><td>Ashaway Line & Sicim Mfg. Co., ABD</td><td>75290</td><td>ligatür</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Piramal Yoğun Bakım Deutschland GmbH</td><td>PZN:9714675</td><td>narkoz</td></tr><tr><td>CLINITUBES kan kılcal damarları</td><td>Radiomed GmbH</td><td>51750132</td><td>kan örneklemesi 60 - 95 mikrolitre</td></tr><tr><td>Yaylı Makas - 6mm Bıçaklar</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>15020-15</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Yaylı Makas - 2mm Bıçaklar</td><td>Güzel Bilim Araçları GmbH</td><td>15000-03</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Halsted-Mosquito Hemostat</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>13009-12</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Dumont #55 Foreps</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>11295-51</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Castroviejo Mikro İğne Tutucu - 9cm</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>12060-02</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Micro Serrefines</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>18555-01</td><td>Alet -leri</td></tr><tr><td>Bulldog Serrefine</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>18050-28</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Fareler için MiniVent Vantilatör (Model 845)</td><td>Harvard Aparatı</td><td>73-0044</td><td>mekanik ventilasyon</td></tr><tr><td>İzofluran Buharlaştırıcı Dräger 19.1</td><td>Dr&auml; gerwerk AG & Co. KGaA</td><td></td><td>anestezi 1.3 - 2.5</td></tr>% <tr><td>PowerLab veri toplama cihazı 4/35</td><td>ADInstruments Ltd, Yeni Zelanda</td><td>PL3504</td><td>invaziv basınç, EKG, sıcaklık</td></tr><tr><td>ABL 800 Flex</td><td>Radiometer GmbH</td><td></td><td>kan gazı analizi</td></tr><tr><td>NMRI fareleri</td><td>Charles River Laboratories</td><td>Crl:NMRI(Han)</td><td>erkek, 30 - 35 g, 12 haftalık, deneyden en az 1 hafta önce barındırılıyor</td></tr></tbody></table>

kardiyopulmoner baypas gerektirmeyen bir fare modeli: yeni bir yaklaşım

Cardiopulmonary Bypass in a Mouse Model: A Novel Approach

Uzun süreli Kardiyopulmoner bypass sırasında kalp müdahaleler daha gerekli hale geldikçe, artan bir klinik talep yordam en iyi duruma getirme ve uzun süreli extracorporal dolaşımdan kaynaklanan organ hasarı en aza indirmek için ortaya çıkar. Bu kağıt amacı tamamen fonksiyonel ve klinik manken Kardiyopulmoner baypas gerektirmeyen bir Mouse göstermekti. Biz cihaz tasarımı, perfüzyon devre optimizasyonu ve mikrocerrahi teknikleri raporu. Bu model birden çok kan çizimi için ihtiyaç nedeniyle hayatta kalma ile uyumlu değildir akut bir modeldir. Fareler için (örneğin, işaretçileri, altını gizleme vb.)araçları yelpazesi nedeniyle, bu modeli moleküler mekanizmaları üzerindeki araştırmasını organ hasarı ve Kardiyopulmoner bypass ile ilgili olarak diğer etkisini kolaylaştıracak comorbidities.

Bu iletişim kuralı perfüzyon devre, cerrahi işlemler açıklanır ve fizyolojik parametrelerinin bir fare CPB sırasında izleme. Yeterince yetenekli bir microsurgeon tarafından gerçekleştirilen, sonuçları sürekli ve tekrarlanarak alınır.
Ortalama arter basıncı yeterli doku perfüzyon korumak için her zaman KPB kan akışını ayarlama ve ilave hacmi ekleyerek 40 ve 60 mmHg arasında tutulur. Hayvan, birim durumu ve vücut ısısı ağırlığına ...

Bu kağıt, Kardiyopulmoner bypass farelerde gerçekleştirmek açıklar. Bu yeni modeli moleküler mekanizmaları organ hasarı dahil incelenmesi kolaylaştıracaktır.

Kardiyopulmoner baypas gerektirmeyen bir fare modeli: yeni bir yaklaşım

As prolonged cardiopulmonary bypass becomes more essential during cardiac interventions, an increasing clinical demand arises for procedure optimization ...

Bu prosedürün genel amacı, kalp hasarının altında yatan moleküler mekanizmalarla ilgili araştırmaları geliştirmek için farelerde kardiyopulmoner baypasa yönelik yeni bir yaklaşım sunmaktır. Bu yöntem, özellikle uzatılmış kardiyopulmoner baypas ve uzamış kardiyopleji süresiyle ilgili olanlar başta olmak üzere, kalp cerrahisindeki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu yeni non-survival akut modelin temel avantajı, kalp cerrahisindeki moleküler mekanizmaların ve bunların diğer komorbiditelerle olan ilişkisinin incelenmesini kolaylaştırmasıdır.İlk olarak, cerrahi işlem için 2 French poliüretan kanül hazırlayın. Kanülün içine 27 gauge metal bir iğne yerleştirin ve bir mikroskop altında, cerrahi bistüri ve mikro makas kullanarak kanülün distal üçte birlik kısmına üç veya dört adet fenestrasyon yapın. Bu işlem, optimal venöz dönüş akışını sağlayacaktır.CPB devresi için hazırlama solüsyonunu hazırlayın. Önce tüpe Sterofundin, ardından Tetraspan ekleyin. Tamamlamak için Heparin ve tamponlama için sodyum bikarbonat ekleyin.Çözeltiyi kullanılana kadar dört °C'de saklayın. CPB devresini doldurmak için venöz kanül aracılığıyla 850 µL doldurma çözeltisi ekleyin. Doldurma işlemi tamamlandıktan sonra, hayvan kanülasyona hazır olana kadar çözeltiyi sirkülasyonda tutun.Kan analizi için sol femoral arteri kanüle edin. Öncelikle kasık bölgesini açığa çıkarın ve ardından common femoral arteri, femoral ven ve femoral sinirden nazikçe ayırın. Tam anestezi ve entübasyon sağlandıktan sonra, keskin ince makaslar kullanarak boyun bölgesinde midline cilt insizyonu gerçekleştirin.Ardından, sağ juguler veni ve sol karotis arteri açığa çıkarmak için kasları küt bir yöntemle ayırın. Gerektiğinde, bipolar forsepslere bağlı bir veteriner koagülatörü kullanarak küçük damarları koagüle edin. Juguler damarları hazırladıktan sonra, sol ortak karotis arterin distal segmentini bifurkasyonuna kadar 8-0 ipek sütürler kullanarak kranial olarak ligatize edin.Ardından, mikro cerrahi pens ve makas kullanarak, klavikula yakınındaki sağ juguler veni açığa çıkarmak için sternokleidomastoid kasın lateralindeki dokuda künt bir preparasyon yapın. Daha sonra, juguler venin distal ve proksimal uçlarını 8-0 ipek ile ligatize edin. Ligasyonun ardından, venöz kanülün ucunu sağ juguler vene yerleştirin ve sağ atriyuma kadar ilerletin; ardından kanülü sabitlemek için süturu düğümleyin.Ardından, arterin proksimal segmentine 8-0 ipek sütür kayar düğümler yerleştirin ve kanülün ucunu karotis arterine yerleştirin. Optimal venöz dönüş için, venöz ucun sağ ventriküle kadar ilerletilmesi gerekebilir. Doğru kanül pozisyonu sağlandığında, juguler vene yapılan doğrudan intravenöz enjeksiyon yoluyla hayvan vücut ağırlığının gramı başına 2.5 ünite Heparin ekleyerek sistemik heparinizasyon gerçekleştirin.Ardından, femoral venin distal kısmını ligatleyin ve proksimal kısmını bir kayıcı düğümle geçici olarak oklüde edin. Daha sonra, kanülün yerleşebilmesi için mikro pens kullanarak anterior duvarda küçük bir insizyon yapın. Şimdi, 1 French poliüretan bir kanül yerleştirin ve bunu ipek 10-0 sütür ile sabitleyin.CPB'yi başlatmak için pompayı dakikada yaklaşık 0,5 mililitre hızında çalıştırın. İki dakika içinde akışı dakikada 46 mililitreye çıkarın. Ardından, tam monitörizasyon altında üst sternotomi gerçekleştirin.Keskin bir makas kullanarak manubrium'dan başlayın ve kaudal yönde beş milimetre ilerleyin. Sternum kenarlarını hemen koagüle edin ve sağ karotis arterini kranial yöne çekerek aortik arkı açığa çıkarın. Optimal kontrol için, klemplemeyi kolaylaştırmak amacıyla aortik arkı timus ve çevre dokulardan çevresel olarak serbestleştirin.Ardından, asendan aorta etrafına 8-0 ipek bir loop yerleştirin ve ipek loopu kranial yöne doğru çekin. Kardiyopleji için çapraz klembin yerleştirilebilmesi amacıyla asendan aortanın yeterince açığa çıkarılmış olması gerekir. BGA örnekleri için, femoral arter kateteri aracılığıyla 60 ila 90 µL arteriyel kan toplamak için cam bir kapiler tüp kullanın.Bir tüpü doldurmak için, silikon hortum üzerindeki klempi yavaşça serbest bırakın ve ardından kanı şırıngadan kapitlere aktarın. Stabil bir CPB akışı altında, ventilasyonu durdurarak solunum arrestini başlatın. Solunum arrestinin ilk 20 dakikası içinde, soğuk salinle ıslatılmış gazlı bez kullanarak hayvanı topikal olarak soğutun.Vücut sıcaklığı 28 °C'ye ulaştığında ve 30 dakikalık solunum durmasının ardından, kardiyoplejiyi başlatmak için CPB devresine 0,3 mL %7,45 potasyum klorür uygulayın. Aortu çapraz klemplemek için, önceden yerleştirilmiş olan halkayı kranial yönde çekin ve aortun çıkan kısmına bir mikro-serrefine klempleme yapın. Toplamda 60 dakikalık solunum durması ve 30 dakikalık kalp durması gerçekleştirin.Kalbin re-perfüzyonunu başlatmak için klempi çıkarın ve eş zamanlı olarak hayvanı yeniden ventile ederek 37 °C'ye ısıtın. Re-perfüzyon tamamlandıktan ve hayvan normotermiye ulaştıktan sonra, pompayı kapatarak CPB'yi sonlandırın. Tarif edilen protokol kullanılarak, tutarlı ve tekrarlanabilir sonuçlar elde edilebilmiştir.Fizyolojik parametreler, başarılı bir prosedür sırasında dört farklı zaman noktasında KAG kullanılarak değerlendirildi. Hematokrit ölçümleri, devreye priming hacmi eklenmesine bağlı olarak hemodilüsyon olduğunu gösterdi. Bununla birlikte, hemoglobin seviyeleri deney boyunca yeterli seviyelerde tutulduğu için kan transfüzyonuna gerek duyulmadı.KAG da hayvanların metabolik durumuna dair bilgi sağlamıştır. Ventülasyonla birlikte KPB başlatıldıktan sonra arteriyel pH yükselmiştir. Beklendiği üzere, solunum durması sırasında arteriyel pH'da kademeli bir azalma gözlemlenmiştir.Karmaşıklığına rağmen, bu yöntem bir kez kavrandıktan sonra tüm adımları üç ila dört saat içinde tamamlanabilir. Bu prosedür gerçekleştirilirken, kanülasyon tekniğini uygulamak ve deney sırasında hemodinamik ile oksijenasyon parametrelerini izlemek oldukça önemlidir. Nihayetinde, bu yeni model, kardiyopulmoner baypas sırasında meydana gelen akut organ hasarının moleküler mekanizmalarının araştırılmasına yardımcı olabilir.Bir sonraki adımımız, murin modellerinde yeni bir mikrocerrahi tekniğin geliştirilmesine olanak sağlayabilecek, farelerde klinik olarak sağkalımlı bir kardiyopulmoner baypas modeli oluşturmaktır.

cardiopulmonary-bypass-in-a-mouse-model-a-novel-approach

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Sıçangil modeli servikal kalp nakli immünolojik hem de iskemi reperfüzyon yaralanması çalışmasından için uygundur. Biz olmayan bir dikiş manşet tekniği kullanılarak prosedür değiştirilmiş ve bu yaklaşım ile 1.000 'den fazla başarılı nakli gerçekleştirildi.  Burada, videoyu tamamlamak için bu tekniğin ek ayrıntıları.

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

Farelerde kalplerin heterotopik nakli için mikrocerrahi prosedür için, donör toplama ve alıcı damar anastomozu için basitleştirilmiş yöntemler de dahil olmak üzere bir teknik gösterilmiştir.

Heterotopik Fare Kalp NAKLİ için Modifiye Yöntem

Kombine katı organ ve vaskülarize kompozit allotransplantasyonu incelemek için, servikal dikişsiz manşet tekniği kullanarak farelerde yeni bir heterotopik en blok göğüs duvarı, timus ve kalp nakli modelini açıklıyoruz.

Farelerde A Novel Mikrocerrahi Heterotopik Modeli, En Bloku Göğüs Duvarı, Thymus ve Kalp Nakli

Burada, kan nakli ya da bir fare inotropic ajanlar olmadan basit kurtarma Kardiyopulmoner bypass modeli tanımlamak için bir iletişim kuralı mevcut. Bu model birden fazla organ sekel Kardiyopulmoner baypas uzun vadeli bir çalışma sağlar.

Kan nakli veya Sıçanlarda Inotropic ajanlar olmadan kurtarma Kardiyopulmoner Bypass modeli

Burada bir protokolü açıklayan veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu (ECMO) entübe sigara içinde tekniği, kendiliğinden nefes fare mevcut. Bu fare modeli ECMO, etkili akut deneysel çalışmalar ve son aşama akciğer hastalıkları uygulanabilir.

Veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu bir mouse

Heterotopik abdominal fare kalp nakli modelinde kan devresi rekonstrüksiyonu için yeni bir teknik gösterilmiştir.

Abdominal Fare Kalp Nakli Modelinde Kan Devresi Rekonstrüksiyonu

Burada, farelerdeki içsel kardiyak fonksiyonu ve β-adrenerjik rezervi belirlemek için artan intravenöz aşılanmış izoproterenol dozları altında bir kardiyak basınç hacmi döngü analizi açıklıyoruz. Basınç hacmi döngüsü ölçümleri için, pozitif uç-ekspiratör basınçlı havalandırmayı dahil ettiğimiz modifiye edilmiş bir açık göğüs yaklaşımı kullanıyoruz.

Basınç-Hacim Döngüsü Analizi ile Belirlenen β-Adrenerjik Stimülasyona Kardiyak Yanıt

Bu protokolde, kardiyak allogreft rejeksiyon mekanizmasını araştırmak için bir fare kalp nakli modeli kullanılmıştır. Bu heterotopik kalp nakli modelinde, modifiye Manşet tekniği kullanılarak kalp implantasyonunun servikal uçtan uca anastomozu ile operasyon etkinliği artırılır ve kalp greftlerinin sağkalımı sağlanır.

Fare Servikal Heterotopik Kalp Transplantasyon Modeli için Modifiye Manşet Tekniği

Fare kardiyak transplantasyon modelleri, transplantasyon immünolojisini incelemek için değerli araştırma araçlarını temsil etmektedir. Mevcut protokol, laminer kan akışına izin vermek için alıcının ortak karotis arterine ve donörün pulmoner arter gövdesine manşetlerin yerleştirilmesini içeren fare heterotopik servikal kardiyak transplantasyonunu detaylandırmaktadır.

Vasküler Manşetler Kullanılarak Fare Heterotopik Servikal Kardiyak Transplantasyonu

Bu protokol, ciddi beyin hasarı ve CPB'ye ikincil diğer komplikasyonları incelemek için bir araç olarak dolaşım ve kalp durması ile bir yenidoğan domuz kardiyopulmoner baypas (CPB) modelini tanımlar.

Uzun Süreli Dolaşım Durması Sonrası Ekstrakorporeal Kardiyopulmoner Resüsitasyonun Pediatrik Hayvan Modeli

Keşfedin, farelerde kardiyopulmoner baypasız yeni bir modelle kalp hasarının moleküler mekanizmalarını incelemeyi. Bu yöntem, uzatılmış kardiyopleji sürelerinin etkilerini araştırmak için değerli bir araç sunar.

Kardiyopulmoner baypas gerektirmeyen bir fare modeli: yeni bir yaklaşım

Daha fazla video keşfet