Kardiyopulmoner baypas gerektirmeyen bir fare modeli: yeni bir yaklaşım

Bu prosedürün genel amacı, kalp hasarının altında yatan moleküler mekanizmalara ilişkin araştırmaları iyileştirmek için bir farede kardiyopulmoner baypasa yeni bir yaklaşım sağlamaktır. Bu yöntem, kalp cerrahisinde, özellikle uzamış kardiyopulmoner baypas ve uzamış kardiyopleji süresi ile ilgili temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu yeni non-survival akut modelin en büyük avantajı, kalp cerrahisinde moleküler mekanizmaların ve diğer komorbiditelerle ilişkisinin incelenmesini kolaylaştırmasıdır.

İlk olarak, ameliyat için iki numaralı Fransız poliüretan kanülünü hazırlayın. Kanülün içine 27 gauge metal bir iğne yerleştirin ve mikroskop altında, kanülün distal üçte birlik kısmında üç veya dört fenestrasyon yapmak için cerrahi bir bıçak ve mikro makas kullanın. Bu, optimal venöz dönüş akışını sağlayacaktır.

CPB devresi için hazırlama çözeltisini hazırlayın. Önce tüpe Sterofundin ve ardından Tetraspan ekleyin. Tamamlamak için Heparin ekleyin ve sodyum bikarbonatı tamponlamak için.

Çözeltiyi kullanılana kadar dört santigrat derecede saklayın. CPB devresini doldurmak için, venöz kanül yoluyla 850 mikrolitre hazırlama solüsyonu ekleyin. Astarlandıktan sonra, hayvan kanülasyon için hazır olana kadar çözeltiyi dolaşımda tutun.

Kan analizi için sol femoral arteri kanül edin. Önce kasık bölgesini açığa çıkarın ve ardından ortak femoral arteri femoral ven ve femoral sinirden nazikçe ayırın. Tam anestezi ve entübasyon sağlandıktan sonra, keskin ince makas kullanarak boynuna orta hat cilt kesisi yapın.

Daha sonra sağ juguler ven ve sol karotis arteri ortaya çıkarmak için kasları künt bir şekilde ayırın. Gerektiğinde, bipolar forsepslere bağlı bir veteriner pıhtılaştırıcı kullanarak küçük damarları pıhtılaştırın. Juguler damarları hazırladıktan sonra, sol ana karotid arterin distal segmentini 8-0 kullanarak bifurkasyonuna kraniyal olarak bağlayın ipek dikişler.

Daha sonra, mikro cerrahi forseps ve makas kullanarak, klavikulaya yakın sağ juguler veni ortaya çıkarmak için sternokleidomastoid kasının lateralinde künt bir doku hazırlığı yapın. Daha sonra juguler venin distal ve proksimal uçlarını 8-0 kullanarak bağlayın ipek. Ligasyonun ardından, venöz kanülün ucunu sağ juguler içine yerleştirin ve sağ atriyuma ilerletin, ardından kanülü sabitlemek için dikişi düğümleyin.

Sırada, 8-0'lık yer İpek sütür, atardamarın proksimal segmentinde düğümlenir ve kanülün ucunu karotis atardamara sokar. Optimal venöz dönüş için, venöz ucu sağ ventriküle ilerletmek gerekebilir. Doğru kanül pozisyonu elde edildikten sonra, juguler ven içine doğrudan intravenöz enjeksiyon yoluyla hayvan vücut ağırlığının gramı başına 2.5 ünite Heparin ekleyerek sistemik bir heparinizasyon gerçekleştirin.

Daha sonra, femoral venin distal kısmını bağlayın ve proksimal kısmı geçici olarak bir kayma düğümü ile tıkayın. Daha sonra kanülü sığdırmak için mikro forseps kullanarak ön duvarda küçük bir kesi yapın. Şimdi, bir numaralı Fransız poliüretan kanülü yerleştirin ve ipek 10-0 sütürle sabitleyin.

CPB'yi başlatmak için pompayı dakikada yaklaşık 0,5 mililitre ile çalıştırın. İki dakika içinde akışı dakikada 46 mililitreye çıkarın. Ardından, tam izleme altında bir üst sternotomi gerçekleştirin.

Manubriumdan başlayarak keskin bir makas kullanın ve kuyruk yönünde beş milimetre gidin. Sternal kenarları hemen pıhtılaştırın ve sağ karotis arteri kraniyal yönde çekerek aort arkını ortaya çıkarın. Optimal kontrol için, klemplemeyi kolaylaştırmak için aort arkını timus ve çevresindeki dokudan çevresel olarak serbest bırakın.

Sonra 8-0 Çıkan aortun etrafına ipek halka ve ipek halkayı kraniyal yönde çekin. Kardiyopleji için çapraz klemp yerleştirmek için çıkan aortun yeterli pozu olmalıdır. BGA örnekleri için, femoral arter kateteri yoluyla 60 ila 90 mikrolitre arteriyel kan toplamak için bir cam kılcal tüp kullanın.

Bir tüpü doldurmak için, silikon boru üzerindeki kelepçeyi yavaşça serbest bırakın ve ardından şırıngadaki kanı kılcal damara aktarın. Stabil bir CPB akışı altında, ventilasyonu durdurarak solunum durmasını başlatın. Solunum durmasından sonraki ilk 20 dakika içinde, soğuk tuzlu suya batırılmış gazlı bez kullanarak hayvanı topikal olarak soğutun.

Vücut ısısı 28 santigrat dereceye ulaştığında ve 30 dakikalık solunum durmasından sonra, kardiyoplejiyi başlatmak için CPB devresine 0.3 mililitre% 7.45 potasyum klorür uygulayın. Aortu çapraz klemplemek için, önceden yerleştirilmiş halkayı kraniyal yönde çekin ve aortun yükselen kısmına bir mikro serrefin klemp yerleştirin. Toplam 60 dakika solunum durması ve 30 dakika kalp durması gerçekleştirin.

Kalbin yeniden perfüzyonunu başlatmak için, kelepçeyi çıkarın ve aynı anda hayvanı yeniden havalandırın ve 37 santigrat dereceye ısıtın. Yeniden perfüzyon tamamlandıktan ve hayvan normotermiye ulaştıktan sonra, pompayı kapatarak CPB'yi sonlandırın. Açıklanan protokol kullanılarak, tekrarlanabilir sonuçlar tutarlı bir şekilde elde edilebilir.

Fizyolojik parametreler, başarılı bir prosedür sırasında dört farklı zaman noktasında BGA kullanılarak değerlendirildi. Hematokrit ölçümleri, devreye hazırlama hacminin eklenmesine bağlı olarak hemodilüsyon gösterdi. Bununla birlikte, deney süresince hemoglobin seviyeleri yeterli seviyelerde tutulduğu için kan transfüzyonuna gerek yoktu.

BGA ayrıca hayvanların metabolik durumu hakkında da bilgi verdi. CPB'nin ventilasyon ile başlatılmasından sonra, arteriyel pH yükseldi. Beklendiği gibi, solunum durması sırasında arteriyel pH'da kademeli bir azalma gözlendi.

Karmaşıklığına rağmen, bir kez ustalaştıktan sonra, bu yöntem tüm adımlarla üç ila dört saat içinde yapılabilir. Bu işlemi gerçekleştirirken kanülasyon tekniğini uygulamak çok önemlidir ve deney sırasında hemodinamik ve oksijenasyon parametrelerinin izlenmesi çok önemlidir. Sonuç olarak, bu yeni model, kardiyopulmoner baypas sırasında akut organ hasarının moleküler mekanizmalarının araştırılmasına yardımcı olabilir.

Bir sonraki adımımız, fare modellerinde yeni bir mikrocerrahi tekniği teşvik edebilecek bir farede hayatta kalan klinik bir kardiyopulmoner baypas modeli oluşturmaktır.