Name: Hepatositlerin intrasplenic nakli düğümde kısmi Hepatectomy sonra. SCID fareler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 24 s
Description: Öğrenin NOD.SCID farelerde kısmi hepatotektomi ve hepatositlerin intrasplenik nakli yöntemini. Bu teknik akut karaciğer yetmezliği tedavisinde hücre bazlı terapilerin geliştirilmesine katkı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser Bölümü Biyoteknoloji, Hindistan hükümeti Ulusal Enstitüsü İmmünoloji, Yeni Delhi için alınan çekirdek grant tarafından desteklenmiştir. Dr. Bhattacharjee'nın şu anki adresim mı bölümü Gastroenteroloji, Hepatoloji ve beslenme, Çocuk Hastanesi Los Angeles.

Bu protokol için sunulan yordamları kurumsal hayvan etik komite tarafından Ulusal Enstitüsü İmmünoloji, Yeni Delhi onaylanmış olması. IAEC #319/13. onayı seri referans numarasıdır
Not: Genel cerrahi prosedürler20 ve kemirgen cerrahi21belirli iletişim kuralları üzerinde mükemmel kaynakları vardır. O hayvan ameliyatı: ilk kez, bu kapsamlı bir şekilde pratik cerrahi mankenleri üzerinde hayvanlar üzerinde çalıştırmadan önce tavsiye edilir.
1. hazırlık
<ol><li>Deney öncesinde, steril fosfat tamponlu tuz (PBS) veya serum fizyolojik hazır tutun.</li>
	<li>Makas, tırtıklı forseps, doku forseps, pamuk, pamuk tomurcukları, naylon konuları ve farklı mikro iğne tutucular içeren bir cerrahi seti bir araya getirin. Otoklav cerrahi seti. Özel bir bağışıklık şaibeli NOD Eğer özen gösterilmelidir. SCID fare iletişim kuralında dahildir.</li>
	<li>Deneysel yordamın tamamı, ameliyat sonu için hazırlık gerçekleştirmek, biyo güvenlik sınıf ı kabine.</li>
	<li>Bir NOD tartın. 6-8 hafta ameliyat öncesi eski SCID fare. Fareler arasında 14-18 g ağırlığındaki bu çalışmada kullanılır.</li>
	<li>Fare üst orta ve hastalık karın bölgesi ile saç düzeltici tıraş. Saç kremi bölgenin tümünde eşit bir spatula ile tamamen kesilmiş kıllar kaldırmak için kaldırma uygulanır. 2-5 dakika sonra bir parça steril ıslak pamuk yardımıyla hafifçe tüyleri.</li>
	<li>Fareyi isoflurane odasında getirin ve oksijen silindir kapak kilidini. Oksijen akışı 4 L/dk hızında ve anestezi ikna etmek için % 4 isoflurane buharlaşma korumak.<ol>
<li>Fare düzgün nazik parmak pinching tarafından anestezi ki emin olun.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bir ameliyat kartını bir biyogüvenlik içinde kabine yerleştirin. Hayvan cerrahi gemide, öyle ki fare ventral kısmı yukarı gelecek şekilde ve fare ön kısmını isoflurane ve oksijen kaynağına bağlı burun konisi içinde yerleştirilir yerleştirin.</li>
	<li>% 2 isoflurane buharlaşma azaltmak ve cerrahi işlem sürdürmek.</li>
	<li>Fare cilt dezenfekte ve steril % 70 etanol batırılmış pamuk ile silerek sterilize.</li>
</ol>2. cerrahi müdahale
<ol><li>
Kısmi Hepatectomy
	<ol>
<li>Xiphoid süreci ve göğüs kafesi, paralel düz işletim makas yardımıyla yaklaşık 1 cm enine bir kesi derinin hemen altında göğüs kemiği, dik olun.</li>
		<li>Yavaşça forseps veya cilt ve karın kas katmanı birbirinden ayırmak için steril ıslatılmış pamuk ipuçları ile kazıma alanı çevresinde karın kas tabaka ile bağlı cilt ayırın. İntradermal bölge kuruma kaçınmak için steril pamuklu ipuçları kullanma PBS ile ıslatın.</li>
		<li>Sol lob alan sorunsuz hemen altındaki xiphoid Periton katmanı yoluyla enine bir kesi yaparak ortaya çıkarmak. İki ıslatılmış pamuk ipuçları ortaya çıkarmak ve karaciğer sol lob kaldırmak için kullanın.</li>
		<li>Kesme karın tarafında pamuk uçlarından birini yerleştirin ve başka pamuk uç diyafram tarafında yer. Yavaşça doğru diyafram yerleştirilen bastırın ve karaciğer sol lob kaldırmak için sürgülü diğer ucunu tarafından ayır.</li>
		<li>Naylon iplik kaldırdı sol lob bir döngü ile kayma ve döngü hilus yakın sol lob Bankası mikro-forseps veya pamuk ipuçları yardımıyla doğru kaydırın. Yavaşça sol lob tabanına naylon iplik döngü itin.</li>
		<li>Mikrocerrahi iğne bağı ve mikro forseps kullanarak sol lob üst üzerinde naylon iplik iki ucu kravat. İki ek knot diğer tarafında yapmak.</li>
		<li>Bir makas yardımı ile bağlı LOB incelemek. Çok yakın iplik kesmeye çalışmayın. Yordamı daha fazla 5 dakika sürer, Periton boşluğu ve organları ile kuruma sıvı kaybı nedeniyle önlemek için steril PBS nemli tutun.</li>
		<li>Karın zarını tarafından sürekli dikiş kullanarak 4-0 akorduna dikiş dikmek. Daha sonra cilt tarafından sürekli dikiş kısa zamanda kapatın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Hücre transplantasyonu Not: GFP ifade tetkikine transgenik GFP fareler izole edildi (C57BL/6-Tg (UBC-GFP) 30 Scha/J), Lee ve arktarafından açıklanan yordamı göre. 22 ve Shen ve ark. 23 Hepatosit benzeri hücreler (NeoHep) insan kaynaklı monosit24 ayrıştırılan Ayrıca ekimi için kullanılmıştır. Ancak, herhangi bir diğer kaynaklardan elde hücreleri de protokol kullanılabilir.<ol>
<li>0,2 milyon hücrelerin yaklaşık 50 µL Iscove'nın modifiye Dulbecco'nın orta (IMDM) içinde askıya alma ve 1 mL insülin şırınga 30 G iğne ile şapkalı içinde Aspire edin. Şırınga buza koyarak soğuk tutmak.</li>
		<li>Fare sol yanal bölümü ameliyatı gerçekleştiren kişi doğru yukarı dönük bir şekilde yerleştirin. Dalak alanını belirlemek ve kemiği cilt sadece dalak ortaya çıkarmak için Periton katmanı üzerinden kısa bir kesi ardından evhamlı bölge yakınındaki incelemek.</li>
		<li>Yavaşça dalak kaldırın ve dışarı kavite iki PBS yardımı ile ıslatılmış pamuk ipuçları tutun.</li>
		<li>Dalak dikkatle iki pamuk ipuçları ile bir elinde tutmak ve şırınga iğne tam olarak dalak için dikey yerleştirin. Yavaşça dalak işlemek ve iğne itmek çok yavaş içinde; İğneyi 2 mm'den daha derin almak gerekir.</li>
		<li>Şırınga piston yavaş yavaş hücreleri dalak enjekte için itin. Ekimi sonra iğne şırınga sabit tutmak ve yavaş yavaş kanama önlemek için dalak veya hücrelerinin kaybı kaldırma.</li>
		<li>Dalak pamuk ipuçları ile Periton boşluğu içine geri koyduktan sonra Periton tabakası sürekli ile 4-0 akorduna Dikiş dikiş tarafından kapatın. Cilt aralıklı ile aynı dikiş dikmek. Cilt kapanış için yara klip kullanmaktan kaçının; Bunun yerine, 4-0 dikiş tarafından kapatın. Yara klip fare doğal hareket kısıtlayabilir ve kez klipleri gevşek olmak ve hızlı bir şekilde ortaya çıkıyor.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. ameliyat sonrası bakım
<ol><li>Cilt kapattıktan sonra her iki dikiş site steril pamuklu ipucu kullanarak iyot solüsyonu (betadin) çevresi silin.</li>
	<li>600 mg/kg vücut ağırlığına (genellikle 100 µL serum/fare içinde 12 mg sefotaksim) intraperitoneally gibi bir doz antibiyotik sefotaksim enjekte 1 mL şırınga kullanarak.</li>
	<li>Analjezik Meloksikam günlük doz 1 mg/kg hayvanın vücut ağırlığı (genellikle 12 µg Meloksikam 100 µL serum/fare içinde) intraperitoneally, ameliyattan sonra üç güne kadar ver.</li>
	<li>Ameliyat tamamlanması sonra isoflurane gaz akışını durdurmak ve tek tek havalandırılmış kafesine döndü fareyi getirin.</li>
</ol>4. euthanization ve karakterizasyonu
<ol><li>Deneysel endpoints sonra (1 gün ve 10 gün sonrası cerrahi), kurumsal hayvan etik kurallarına göre fareler ötenazi.</li>
	<li>Kan ölümcül oküler terminal pleksus delinme hayvanlar, kanama tarafından toplamak.</li>
	<li>Serum kandan yalıtmak.</li>
</ol>

<ol><li>Nussler, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Present+status+and+perspectives+of+cell-based+therapies+for+liver+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Present status and perspectives of cell-based therapies for liver diseases.</a> J. Hepatol. 45 (1), 144-159 (2006).</li>
<li>Ponder, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+hepatocytes+migrate+to+liver+parenchyma+and+function+indefinitely+after+intrasplenic+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Mouse hepatocytes migrate to liver parenchyma and function indefinitely after intrasplenic transplantation.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 88 (4), 1217-1221 (1991).</li>
<li>Kokudo, N., Horimoto, H., Ishida, K., Takahashi, S., Nozawa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allogeneic+hepatocyte+and+fetal+liver+transplantation+and+xenogeneic+hepatocyte+transplantation+for+Nagase%27s+analbuminemic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Allogeneic hepatocyte and fetal liver transplantation and xenogeneic hepatocyte transplantation for Nagase's analbuminemic rats.</a> Cell Transplant. 5 (5 Suppl 1), S21-S22 (1996).</li>
<li>Christ, B., Bruckner, S., Stock, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatic+transplantation+of+mesenchymal+stem+cells+in+rodent+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Hepatic transplantation of mesenchymal stem cells in rodent animal models.</a> Methods Mol. Biol. 698, 315-330 (2011).</li>
<li>Fox, I. J., Roy-Chowdhury, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15158325">Hepatocyte transplantation.</a> J. Hepatol. 40 (6), 878-886 (2004).</li>
<li>Glanemann, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+monocyte-derived+hepatocyte-like+cells+%28NeoHeps%29+improves+survival+in+a+model+of+acute+liver+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Surg%22%5BJournal%5D)">Transplantation of monocyte-derived hepatocyte-like cells (NeoHeps) improves survival in a model of acute liver failure.</a> Ann. Surg. 249 (1), 149-154 (2009).</li>
<li>Rahman, T. M., Hodgson, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+acute+hepatic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Exp.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Animal models of acute hepatic failure.</a> Int. J. Exp. Pathol. 81 (2), 145-157 (2000).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Granulocyte+colony-stimulating+factor+treatment+ameliorates+liver+injury+and+improves+survival+in+rats+with+D-galactosamine-induced+acute+liver+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Lett%22%5BJournal%5D)">Granulocyte colony-stimulating factor treatment ameliorates liver injury and improves survival in rats with D-galactosamine-induced acute liver failure.</a> Toxicol. Lett. 204 (1), 92-99 (2011).</li>
<li>Gardner, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+nitric+oxide+in+acetaminophen-induced+hepatotoxicity+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Role of nitric oxide in acetaminophen-induced hepatotoxicity in the rat.</a> Hepatology. 27 (3), 748-754 (1998).</li>
<li>Nardo, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+treatment+of+CCL4-induced+acute+liver+failure+with+portal+vein+arterialization+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Successful treatment of CCL4-induced acute liver failure with portal vein arterialization in the rat.</a> Transplant Proc. 38 (4), 1187-1189 (2006).</li>
<li>Sathyasaikumar, K. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fulminant+hepatic+failure+in+rats+induces+oxidative+stress+differentially+in+cerebral+cortex%2C+cerebellum+and+pons+medulla%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochem.+Res%22%5BJournal%5D)">Fulminant hepatic failure in rats induces oxidative stress differentially in cerebral cortex, cerebellum and pons medulla.</a> Neurochem. Res. 32 (3), 517-524 (2007).</li>
<li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laennec+protects+murine+from+concanavalin+A-induced+liver+injury+through+inhibition+of+inflammatory+reactions+and+hepatocyte+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Pharm.+Bull%22%5BJournal%5D)">Laennec protects murine from concanavalin A-induced liver injury through inhibition of inflammatory reactions and hepatocyte apoptosis.</a> Biol. Pharm. Bull. 31 (11), 2040-2044 (2008).</li>
<li>Kaur, G., Tirkey, N., Chopra, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beneficial+effect+of+hesperidin+on+lipopolysaccharide-induced+hepatotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology%22%5BJournal%5D)">Beneficial effect of hesperidin on lipopolysaccharide-induced hepatotoxicity.</a> Toxicology. 226 (2-3), 152-160 (2006).</li>
<li>Rupertus, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Major+but+not+minor+hepatectomy+accelerates+engraftment+of+extrahepatic+tumor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Major but not minor hepatectomy accelerates engraftment of extrahepatic tumor cells.</a> Clin. Exp. Metastasis. 24 (1), 39-48 (2007).</li>
<li>Selden, C., Casbard, A., Themis, M., Hodgson, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+long-term+survival+of+syngeneic+hepatocytes+in+rat+peritoneum%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Characterization of long-term survival of syngeneic hepatocytes in rat peritoneum.</a> Cell Transplant. 12 (6), 569-578 (2003).</li>
<li>Tang, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+donor+hepatocytes+and%2For+splenocytes+pre-injection+in+reducing+islet+xenotransplantation+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatobiliary.+Pancreat.+Dis.+Int%22%5BJournal%5D)">The role of donor hepatocytes and/or splenocytes pre-injection in reducing islet xenotransplantation rejection.</a> Hepatobiliary. Pancreat. Dis. Int. 2 (3), 344-350 (2003).</li>
<li>Goto, Y., Ohashi, K., Utoh, R., Yamamoto, M., Okano, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatocyte+transplantation+through+the+hepatic+vein%3A+a+new+route+of+cell+transplantation+to+the+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Hepatocyte transplantation through the hepatic vein: a new route of cell transplantation to the liver.</a> Cell Transplant. 20 (8), 1259-1270 (2011).</li>
<li>Gabelein, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrasplenic+or+subperitoneal+hepatocyte+transplantation+to+increase+survival+after+surgically+induced+hepatic+failure%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">Intrasplenic or subperitoneal hepatocyte transplantation to increase survival after surgically induced hepatic failure?</a> Eur. Surg. Res. 41 (3), 253-259 (2008).</li>
<li>Bhattacharjee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+NeoHep+Derived+From+Chronic+Hepatitis+B+Virus+Patients%27+Blood+Monocytes+by+Upregulation+of+cMET+Signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl.+Med%22%5BJournal%5D)">Autologous NeoHep Derived From Chronic Hepatitis B Virus Patients' Blood Monocytes by Upregulation of cMET Signaling.</a> Stem Cells Transl. Med. , (2016).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.who.int/surgery/publications/s16383e.pdf">Basic surgical skills. Emergency and Essential Surgical Care (EESC) programme</a>. , http://www.who.int/surgery/publications/s16383e.pdf (2017).</li>
<li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> J. Vis. Exp. (47), (2011).</li>
<li>Lee, S. M., Schelcher, C., Demmel, M., Hauner, M., Thasler, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+human+hepatocytes+by+a+two-step+collagenase+perfusion+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation of human hepatocytes by a two-step collagenase perfusion procedure.</a> J. Vis. Exp. (79), (2013).</li>
<li>Shen, L., Hillebrand, A., Wang, D. Q., Liu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+primary+culture+of+rat+hepatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation and primary culture of rat hepatic cells.</a> J. Vis. Exp. (64), (2012).</li>
<li>Bhattacharjee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+NeoHep+Derived+from+Chronic+Hepatitis+B+Virus+Patients%27+Blood+Monocytes+by+Upregulation+of+c-MET+Signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl.+Med%22%5BJournal%5D)">Autologous NeoHep Derived from Chronic Hepatitis B Virus Patients' Blood Monocytes by Upregulation of c-MET Signaling.</a> Stem Cells Transl. Med. 6 (1), 174-186 (2017).</li>
<li>Hori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simple+and+sure+methodology+for+massive+hepatectomy+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Simple and sure methodology for massive hepatectomy in the mouse.</a> Ann. Gastroenterol. 24 (4), 307-318 (2011).</li>
<li>Hori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simple+and+reproducible+hepatectomy+in+the+mouse+using+the+clip+technique%5BTitle%5D)+AND+%22World+J.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Simple and reproducible hepatectomy in the mouse using the clip technique.</a> World J. Gastroenterol. 18 (22), 2767-2774 (2012).</li>
<li>Vidal, I., Richert, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nude+mouse+as+model+for+liver+deficiency+study+and+treatment+xenotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Hepatol%22%5BJournal%5D)">The nude mouse as model for liver deficiency study and treatment xenotransplantation.</a> Int. J. Hepatol. , 1400147(2012).</li>
<li>Mitchell, C., Willenbring, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reproducible+and+well-tolerated+method+for+2%2F3+partial+hepatectomy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">A reproducible and well-tolerated method for 2/3 partial hepatectomy in mice.</a> Nat. Protoc. 3 (7), 1167-1170 (2008).</li>
<li>Ahmed, S. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+subcutaneous+and+intrahepatic+human+hepatocellular+carcinoma+xenografts+in+immunodeficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Generation of subcutaneous and intrahepatic human hepatocellular carcinoma xenografts in immunodeficient mice.</a> J. Vis. Exp. (79), e50544(2013).</li>
<li>Krikri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laparoscopic+vs.+open+abdominal+surgery+in+male+pigs%3A+marked+differences+in+cortisol+and+catecholamine+response+depending+on+the+size+of+surgical+incision%5BTitle%5D)+AND+%22Hormones+%28Athens%29%22%5BJournal%5D)">Laparoscopic vs. open abdominal surgery in male pigs: marked differences in cortisol and catecholamine response depending on the size of surgical incision.</a> Hormones (Athens). 12 (2), 283-291 (2013).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Kısmi hepatectomy soruşturma karaciğer rejenerasyonu için kurulan bir tekniktir ve aşırı hepatectomy AHF modeli taklit etmek için bildirilir. Hayvan AHF arasında kemirgenler, özellikle fareler, en araştırılmış modeli modellerdir. % 70 hepatectomy kadar farelerde karaciğer yaralanma modeli elde etmek için bir iyi hayatta kalma oranı25,26' bildirilmiştir. Ancak çıplak ve diğer immünyetmezligi fare, % 70 hepatectomy ölümcül olarak bildirilmiş ve hayvanlar 24 saat<su...

Şu anda, Hepatosit bütün organ nakli şiddetli karaciğer bozukluğu olan hastaları tedavi için bir alternatif olarak teklif edilir. Bu hastaların tüm organ nakli1köprü olabilir inanılıyor. Ek olarak allojenik tetkikine2, xenogenic tetkikine3 ve kök hücre4 ' ten türetilmiş tetkikine hayvan modellerinde da soruşturuluyor. Bu bağlamda, posta ve engraftment potansiyel alıcı transplante hücrelerinin temel hücre tedavisi için önemli bir kriter akut hepatik yetmezliği (AHF) var.
Hepatositlerin veya Hepatosit benzeri hücreler5nakli soruşturma için AHF hayvan modelinde cerrahi6 veya farmakolojik7 yordamlar, hücre nakli tarafından takip tarafından oluşturulur. Bir AHF hayvan modeli farmakolojik reaktifler, d-galactozamin8, asetaminofen9, karbon tetraklorür10, thioacetamide11, Concanavalin A12, lipopolysaccharide13 gibi birçok hepatotoxins tarafından yapmak için , vs., kullanılmıştır. Bu listeden her reaktif AHF için benzersiz bir özellik kümesi oluşturur, ancak ne yazık ki yok tek reaktif insan AHF taklit eder. Ayrıca, hepatotoxins tarafından indüklenen AHF hayvanlar kronik stres altında koyar, uzun bir zaman alır ve tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek zordur.
Öte yandan, kısmi hepatectomy (PHx) cerrahi işlem beceri bağımlı ve tekrarlanabilir sonuçlar gerekli becerileri geliştirme sonra elde etmek kolaydır. Cerrahi müdahale yalnız AHF ikna etmek için daha--dan %70 karaciğer rezeksiyonu gereklidir; Ancak, bir % 70 hepatectomy hala engraftment ve yaygın eğitim için yararlı olabilir daha az tedavi kapasitelerini karaciğer hasarı14sırasında analiz etmek için karaciğer hücrelerinde nakledilmektedir. Hepatositlerin nakli karın zarını15, kuyruk damar16, hepatik ven17veya18dalak aracılığıyla gerçekleştirilen yazı hepatectomy olmuştur. Yeniden oluşturmak daha kolay olduğu gibi şu anda, hepatik ven infüzyon ve tetkikine intrasplenic nakli tercih edilen, işlemlerdir.
Bu yazıda, bir yordam için % 30 kısmi hepatectomy düğümde anlatmıştık. SCID (BAŞINI SALLAMAK. CB17-Prkdcscid/J) içinde karaciğer sol lob eksize fareler. Bu nakli 0,2 milyon GFP ifade fare (C57BL/6-Tg (UBC-GFP) 30Scha/J) tetkikine hem de insan kaynaklı NeoHep19 dalak içinde izler. Bu yordamı karaciğer nakledilen hücrelerinin engraftment yol açar. Bu yordam az invaziv ve en az acı veren bir teknik olacaktır.

<table><tbody><tr><td>Gaz Anestezi Sistemi</td><td>Ugo Basile; İtalya</td><td>211000</td><td></td></tr><tr><td>Tartı makinesi</td><td>Goldtech ; Hindistan</td><td></td><td>Yerel Satın</td></tr><tr><td>Alma Biyolojik güvenlik kabini (Sınıf I)</td><td>Kartos uluslararası; &nbsp; Hindistan</td><td></td><td>Yerel Tedarik</td></tr><tr><td>Saç Düzeltici Panasonic</td><td>; &nbsp; Japonya&nbsp;</td><td>ER-GY10&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Keskin / keskin bıçaklı düz çalışma makası</td><td>Büyük Cerrahiler; Hindistan</td><td></td><td>Yerel Tedarik</td></tr><tr><td>Forsepsleri ile Tırtıklı</td><td>Majör Cerrahiler; Hindistan</td><td></td><td>Yerel Tedarik</td></tr><tr><td>Mikro iğne tutucular&nbsp; düz & kavisli&nbsp;</td><td>Mersiyalı ; &nbsp; İngiltere&nbsp;</td><td>BS-13-8</td><td></td></tr><tr><td>30G *5/16 iğneli 1 ml insülin şırıngası&nbsp;</td><td>Dispo Minibüsü; Hindistan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>26 G * 1/2 iğne BD ile 1 ml şırınga</td><td>; BİZ&nbsp;</td><td>REF 303060</td><td></td></tr><tr><td>Naylon İplikler&nbsp; &nbsp;</td><td>Güçlü; Hindistan</td><td></td><td>(1-0) Yerel Satın Alma</td></tr><tr><td>MERSUTURES 4-0 Sterilize Cerrahi İğneli Sütür</td><td>Ethicon, Johnson & Johnson, Hindistan</td><td>NW 5047</td><td></td></tr><tr><td>TRUGUT 76 cm 4-0 emilebilir cerrahi sütür</td><td>Sütürler Hindistan Pvt. Ltd; Hindistan</td><td>SN 5048</td><td>Sterilize Cerrahi İğneli Sütür Katgüt Kromik</td></tr><tr><td>Pamuk Tomurcukları</td><td>Saf Swablar Pvt Ltd; &nbsp; Hindistan</td><td></td><td>Yerel Tedarik</td></tr><tr><td>Cerrahi Bant</td><td>3M Hindistan; Hindistan</td><td>1530-1</td><td>Mikro Gözenekli Cerrahi Bant</td></tr><tr><td>Mikrotom</td><td>Histo-Line Laboratuvarları, İtalya</td><td>MRS3500</td><td></td></tr><tr><td>Shandon Cryotome E Cryostat</td><td>Thermo Electron Corporation; ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Konfokal lazer tarama mikroskobu</td><td>Carl Zeiss; Almanya&nbsp;</td><td>LSM 510 META</td><td></td></tr><tr><td>Parlak Alan Mikroskobu</td><td>Olympus, Japonya</td><td>LX51</td><td></td></tr><tr><td>Otomatik analizör</td><td>Lale, Alto Santracruz, Hindistan</td><td>Screen Maaster 3000</td><td>Karaciğer fonksiyonel testi için biyokimyasal analizör</td></tr><tr><td>Akış Sitometresi</td><td>BD ; BİZ&nbsp;</td><td>BD FACSverse</td><td>Transplantasyon sonrası hücre varlığının değerlendirilmesi</td></tr><tr><td>Veet epilasyon kremi&nbsp;</td><td>Reckitt Benckiser, Hindistan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>FORANE</td><td>Abbott ; ABD</td><td></td><td>izofluran USP% 99.9 & nbsp;</td></tr><tr><td>Taxim</td><td>AlKem ; Hindistan</td><td></td><td>sefotaksim sodyum enjeksiyonu</td></tr><tr><td>Povidon-İyot çözeltisi&nbsp;</td><td>Win-Medicare; &nbsp; Hindistan</td><td></td><td>Betadin</td></tr><tr><td>Paraformaldehit</td><td>Himedia; Hindistan</td><td>GRM 3660</td><td></td></tr><tr><td>Iscove'un Modifiye Dulbecco'nun Orta (IMDM)</td><td>Yaşam teknolojileri, Thermo Fisher scientific ; ABD</td><td>12200-036</td><td></td></tr><tr><td>Sükroz</td><td>Sigma ; US</td><td>S0389</td><td></td></tr><tr><td>Doku-Tek</td><td>Sakura; US</td><td>25608-930</td><td>OCT bileşiği</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Himedia; Hindistan</td><td>MB 097</td><td></td></tr><tr><td>anti-Albümin keçi Poliklonal</td><td>Thermo Scientific, Pierce, ABD</td><td>PA126081</td><td></td></tr><tr><td>anti-connexin 32 / GJB1 Poliklonal</td><td>abcam, İngiltere</td><td>ab64609-500</td><td></td></tr><tr><td>antiGFP tavşan poliklonal ve nbsp;</td><td>Santa Cruz biyoteknolojisi; US</td><td>SC 8334</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 eşek anti-keçi</td> <td>ve nbsp; Moleküler Problar, Thermo Fisher Scientific ; &nbsp; ABD</td><td>A11058</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 eşek anti-koyun</td><td>&nbsp; Moleküler Problar, Thermo Fisher Scientific ; &nbsp; ABD</td><td>A11015</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 tavuk anti tavşan</td> <td>ve nbsp; Moleküler Problar, Thermo Fisher Scientific ; &nbsp; ABD</td><td>A21442</td><td></td></tr><tr><td>Keçi anti tavşan IgG HRP</td><td>Invitrogen, Thermo Fisher Scientific; BİZ&nbsp;</td><td>65-6120</td><td></td></tr><tr><td>anti-Ki67 antikoru</td><td>abcam, İngiltere</td><td>ab15580</td><td></td></tr><tr><td>Antijen Maskeleme Solüsyonu, Sitrik asit baz</td><td>Vektör laboratuvarları, US</td><td>H-3300</td><td></td></tr><tr><td>ProLong Diamond antifade mountant</td><td>Life teknolojileri, Thermo Fisher bilimsel; ABD</td><td>P36966</td><td></td></tr><tr><td>SGOT (ASAT) KITI</td><td>Mercan Klinik Sistemi, Hindistan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SGPT (ALAT) KITI</td><td>Mercan Klinik Sistemi, Hindistan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alkalin Fosfataz Kiti (DEA)</td> <td>Mercan Klinik Sistemi, Hindistan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hematoksilen Çözeltisi, Mayer's</td><td>Sigma; US</td><td>MHS16</td><td></td></tr><tr><td>Eozin Y çözeltisi, alkolik</td><td>Sigma; ABD</td><td>HT110132</td><td></td></tr><tr><td>DPX Mountant&nbsp;</td><td>Sigma; US</td><td>6522</td><td></td></tr><tr><td>Melonex (Ağrı Kesici)</td><td>İntaş İlaç Ltd; Hindistan</td><td></td><td>Meloksikam enjeksiyonu&nbsp;</td></tr><tr><td>DAB geliştirilmiş sıvı substrat sistemi tetrahidroklorür</td><td>Sigma; ABD</td><td>D3939</td><td></td></tr></tbody></table>

hepatositlerin intrasplenic nakli düğümde kısmi hepatectomy sonra. scid fareler

Intrasplenic Transplantation of Hepatocytes After Partial Hepatectomy in NOD.SCID Mice

Kısmi hepatectomy karaciğer rejenerasyonu ve değişik patolojik koşullarda hücre dayalı tedavi etkisini incelemek için çok yönlü ve tekrarlanabilir bir yöntemdir. Kısmi hepatectomy da artan engraftment ve Transplante hücrelerin çoğalması hızlanan neovaskülarizasyon ve hücre göç doğru karaciğer tarafından kolaylaştırır. Burada, bir obez olmayan şeker hastası/şiddetli, dalak performans % 30 hepatectomy ve hücre nakli kombine immünyetmezligi başını SALLAMAK için basit bir protokol açıklayın. SCID (BAŞINI SALLAMAK. CB17-Prkdcscid/J) fare.
Bu yordam, iki küçük insizyon yapılır. Belgili tanımlık ilk kesme ortaya çıkarmak ve karaciğer sol lob çıkarabileceğim etmektir ve başka bir küçük kesi dalak hücre intrasplenic nakli için ortaya çıkarmak için yapılır. Bu yordam herhangi bir özel cerrahi beceri gerektirmez ve daha az stres ve ağrı, hızlı iyileşme ve daha iyi hayatta kalma ile 5-7 dakika içinde tamamlanabilir. Fare (transgenik C57BL/6-Tg (UBC-GFP) 30Scha/J) yanı sıra Hepatosit hücreler kısmen hepatectomized başını SALLAMAK içinde insan kaynaklı (NeoHep) gibi ifade bir floresan yeşil protein (GFP) dan izole tetkikine nakli göstermiştir. SCID fareler.

% 30 kısmi hepatectomy sonra Hepatosit nükleer silahların yayılmasına karşı: Yayılması içinde kalan hepatositlerin % 30 hepatectomy sonra karaciğer Hücre proliferasyonu avans, Ki-67 boyama immunohistokimyasal (IHC) tarafından incelenmiştir. Bir gün sonrası hepatectomy, fareler ötenazi, kalan karaciğer lobları eksize ve parafin kesitler elde. Bölümleri ile Ki-67 antikor, horseradish peroksidaz (HRP) konjuge ikincil antikor ile etiketleme tarafından takip lekeli. Di-Amino Benzidine (DAB) substrat HRP için ...

Kısmi hepatectomy (PHx) ve hücre transplantasyonu dalak ile NOD gerçekleştirmek için bir protokol anlatmıştık. SCID (BAŞINI SALLAMAK. CB17-Prkdcscid/J) fareler. Bu protokol için ortaya çıkarmak ve hücre intrasplenic nakli için başka bir kesi ardından karaciğer sol lob çıkarabileceğim için bir kesi yapılır.

Hepatositlerin intrasplenic nakli düğümde kısmi Hepatectomy sonra. SCID fareler

Partial hepatectomy is a versatile and reproducible method to study liver regeneration and the effect of cell based therapeutics in various pathological ...

Akut hepatik yetmezliği olan hastaların tedavisi için hepatosit transplantasyonu, tüm organ transplantasyonuna bir alternatiftir. Parsiyel hepatektomi, AHF oluşturmak için bir teknik olarak kullanılır. Bunun yanı sıra, hücre tabanlı terapi sırasında hücre tutunmasını ve proliferasyonunu incelemek için de kullanılır.Fare, bu tür amaçlar için hepatektomi gerçekleştirilen en çok araştırılan modellerden biridir. Bu videoda, parsiyel hepatektomi prosedürünü ve ardından bir NOD. SCID faresinin dalağına hepatosit transplantasyonunu göstereceğiz.Başlamadan önce, deneyi gerçekleştirmek için uygun hayvan etik kurulundan gerekli onayı aldığınızdan emin olun. Bu prosedürde iki küçük insizyon yapacağız. İlk insizyon, karaciğeri açığa çıkarmak için ksifoid sürecin hemen altına yapılan, yaklaşık bir santimetre uzunluğunda olan parsiyel karaciğer hepatektomisi içindir.Hücre nakli için, hayvanın dalağını açığa çıkarmak amacıyla sol lateral bölgeye daha küçük bir insizyon daha yapılır. Bu yöntemin avantajları, hayvan için daha az travma ve ağrıya yol açması, daha hızlı iyileşme sağlaması ve yaklaşık yüzde yüz oranında sağkalım sunmasıdır. Ayrıca, bu prosedür herhangi bir özel cerrahi beceri gerektirmez ve beş ila yedi dakika içinde hızlıca tamamlanabilir.Bu videoda, NeoHep olarak adlandırılan hepatosit benzeri hücrelerin ve transgenik GFP faresinden izole edilen hepatositlerin, kısmi hepatektomi uygulanmış bir NOD. SCID faresine transplantasyonunu göstereceğiz. Bu prosedür, transplantasyon için kullanılacak hücre tipini kısıtlamaz.Tüm cerrahi aletler ve PBS uygun şekilde otoklavlanmış ve cerrahi işlem öncesinde hazır bulundurulmuştur. Fareyi tartın. Bu prosedürde, on dört ila on sekiz gram ağırlığında, altı ila sekiz haftalık NOD.SCID fareler kullanılır.Fare karnının orta, üst ve sol kısmını tıraş edin. Kısaltılmış kılları temizlemek için, tıraş edilen bölgeye tüy dökücü krem uygulayın. Dört ila beş dakika bekleyin ve kılları nazikçe temizleyin.Oksijen tüpü valfini açın. Fareyi İzofluran haznesine yerleştirin. Oksijen akışını dakikada dört litreye ayarlayın.Anestezi indüksiyonu için izofluran buharlaştırmasını yüzde dört olarak ayarlayın. Fareyi nazikçe ayak parmaklarını sıkarak uygun şekilde anestezi altındaki olduğundan emin olun. Bir biyogüvenlik kabini içerisine cerrahi tahtası yerleştirin.Hayvanı, farenin ventral kısmı yukarıya bakacak ve anterior kısmı İzofluran ve oksijen kaynağına bağlı burun konisinin içine gelecek şekilde cerrahi tahtasına yerleştirin. Anestezinin sürdürülmesi için İzofluran buharlaştırmasını yüzde ikiye düşürün. Cildi, yüzde yetmiş etanolle ıslatılmış steril pamukla silerek dezenfekte edin.Sternumun hemen altına, xiphoid'e dik ve göğüs kafesine paralel olacak şekilde, ciltte yaklaşık bir santimetre uzunluğunda transvers bir insizyon yapın. İnsizyon bölgesine yakın cilt ve peritonu nazikçe ayırın. Karaciğerin sol lobunu açığa çıkarmak için xiphoid'in hemen altındaki periton tabakasından transvers bir insizyon yapın.İki adet nemlendirilmiş pamuklu çubuk kullanılacaktır. Pamuklu çubuklardan birini kesi bölgesinin abdominal tarafına, diğerini ise diyafram tarafına yerleştirin. Ardından, diyaframa doğru yerleştirilen ucu nazikçe bastırın ve karaciğerin sol lobunu kaldırmak için diğer uçla kaydırarak itme uygulayın.Mikro-diseksiyon pensini kullanarak, karaciğer hilumuna yakın sol lateral lobun tabanına bir ipek iplik halkası yerleştirin. Düğümü hafifçe sıktıktan sonra, ipek ipliği karaciğer lobunun tabanına mümkün olduğunca kaydırın. Düğümü sıkın ve diğer tarafa iki ek düğüm atın.Bağlanan lobu mikrocerrahi makası kullanarak kesin. Bu görüntü, rezeksiyon sonrası sol lobun kalan kısmını göstermektedir. Peritonyumu, 4/0 Catgut emilebilir sütür ile sürekli dikiş tekniği kullanarak dikin.Aynı 4-0 Catgut emilebilir sütür kullanılarak kesintisiz veya ayrı dikişlerle cildi kapatın. Sütürlerin çevresine Betadine uygulayın. Hepatositleri veya NeoHep'i, 29 gauge iğneli 1 mL'lik bir insülin şırıngasında 50 µL IMDM içinde süspansiyon halinde hazır bulundurun.Fareyi, sol yan kısmı yukarı bakacak şekilde yerleştirin. Dalak bölgesini belirleyin ve cildi transvers olarak diseke edin. Dalağı açığa çıkarmak için periton tabakasında iki ila üç milimetrelik bir kesi yapın.Dalağı iki nemli pamuklu çubuk arasına yerleştirin ve nazikçe kaldırın. İğneyi dal korteksine yavaşça batırın ve hücre süspansiyonunu dalağa boşaltın. Peritonyumu 4-0 sütür ile sürekli dikişle, cildi ise ayrı dikişlerle kapatın.Dikişlerin üzerine Betadine uygulayın. İçerisinde 12 mg Cefotaxime antibiyotiği bulunan 100 µL salini intraperitoneal olarak enjekte edin. İçerisinde 12 µg Meloxicam analjeziği bulunan 100 µL salini intraperitoneal olarak enjekte edin.Bu, ameliyat sonrası üç gün boyunca günlük olarak verilmelidir. İzofluran vaporizer'ını kapatın ve fareyi kafese yerleştirin. Hayvan saniyeler içinde bilincini kazanacaktır.%30 hepatektomi sonrası yirmi dört saatte karaciğerdeki hepatosit proliferasyonu, bir hücre proliferasyon markörü olan Ki-67 ile karaciğer kesitlerinin immünohistokimyasal boyamasıyla incelendi. Bu kesitlerin boyanmasının ardından, saptama için anti-Ki-67 yaban turpu peroksidaz konjuge ikincil antikor kullanıldı ve kahverengi renk oluşumu için substrat olarak Di-Amino Benzadin kullanıldı. Çekirdek hematoksilin ile karşı boyandı.Bu görüntüde kahverengi renkli hücreler, Ki-67 pozitif proliferasyon gösteren hepatositlerdir. Transplantasyondan on gün sonra fare ötanize edilmiş ve karaciğer incelenmiştir. Burada temsilci bir görüntü gösterilmektedir.Rejenere olan karaciğerden sağ lateral lob, sağ medial lob ve sol medial loblar eksize edildi ve beş mikronluk kesitler alındı. Bu kesitler, primer tavşan poliklonal anti-GFP ve sekonder anti-tavşan Alexa Fluor 594 antikorları ile boyandı. Çekirdek DAPI ile karşı boyandı.Bu görüntü, kırmızı olarak görülen yeşil floresan protein eksprese eden hepatositlerin yönelimini göstermektedir. NeoHep olarak adlandırılan insan kaynaklı hepatosit benzeri hücreler nakledildiğinde, reseptör hepatektomize farenin karaciğer kesitlerinde insan Albumin ve insan Connexin 32 ekspresyonu gözlemlenmiştir. Ameliyattan on gün sonra, serumdaki karaciğer kaynaklı enzimlerin biyokimyasal analizi, aspartat aminotransferaz, alanin aminotransferaz ve alkalen fosfataz seviyelerinin normale döndüğünü doğrulamıştır.Benzer şekilde, karaciğer kesitlerinin hematoksilin ve eozin boyama ile yapılan histolojik incelemesi, cerrahiden on gün sonra herhangi bir anormallik göstermemiş ve bu durum karaciğerin uygun şekilde iyileştiğini belirtmiştir. Birkaç önleme dikkat etmek önemlidir. Naylon ipin düğümünü karaciğer lobunun tabanına yerleştirmeye çalışın.Karşı tarafa iki ek sıkı düğüm atmayı unutmayın ve ipliğe çok yakın kesme işlemi yapmaya çalışmayın. Hücrelerin dala nakli için iğneyi tam dikey olarak batırın ve iğne iki milimetreden daha derine gitmemelidir. Cildi kapatmak için yara klipsleri kullanmaktan kaçının.Bunun yerine, yarayı 4-0 sütür ile kapatın. Yara klipsleri farenin doğal hareketlerini kısıtlar ve genellikle klipsler kısa süre içinde gevşeyerek yerinden çıkar. Hayvanı tekrar kafesine yerleştirdikten sonra, kafese birkaç parça steril mısır gevreği koyabilir ve yüzde 5 glukoz içeren steril su sağlayabilirsiniz.Daha önce hayvan cerrahisi konusunda deneyiminiz yoksa, kısmi karaciğer hepatektomisi ve transplantasyon işlemlerini normal immünokompetan farelerde ayrı ayrı uygulayarak pratik yapın ve ardından her iki prosedürü tek bir hayvanda gerçekleştirin. İmmünodefisyanlı NOD. SCID farelerdeki prosedürleri, yalnızca immünokompetan farelerde yüzde yüz hayatta kalma oranına ulaştıktan sonra gerçekleştirin.

intrasplenic-transplantation-hepatocytes-after-partial-hepatectomy

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Kurulan demiyelinizasyon ile farelerin omurilik içine fare sinir kök hücrelerinin (NSC'lerde) nakli ayrıntılı. NSC'lerde hazırlanması, torasik vertebra 9 (T9) ve NSC'lerde nakli laminektomi farelerde pre-ve post-operatif bakım birlikte özetlenmiştir.

Spinal Kordonlar nörotropik Mouse Hepatit Virüs ile Etkilenmiş Fare Fare Nöral Kök Hücre Transplantasyon Cerrahi

Bu video, insan bağışıklık sistemi ve karaciğer hücreleri ile ikili insanlaştırılmış bir fare modeli oluşturmak için bir yöntemi göstermektedir. İnsan karaciğer hücrelerinin ve hematopoietik kök ve progenitör hücrelerin intrasplenik enjeksiyon yoluyla transgenik immün yetmezliği olan bir fareye nakledilmesini içerir, bu da karaciğer hücrelerinin aşılanmasına ve insan bağışıklık hücrelerinin gelişmesine yol açar.

İnsan Karaciğer Hücreleri ve Bağışıklık Hücreleri ile İnsanlaştırılmış Bir Fare Modeli Geliştirme

Immünyetmezligi farelerde insan tümör ksenogratflardır kanser biyolojisi okumak için değerli araçlardır. Insan hepatoselüler karsinoma hücreleri ya da tümör fragmanlarından deri altı ve intrahepatik ksenograftları oluşturmak için özel protokolleri açıklanmıştır. Alıcı farede hepatektomiden tarafından uyarılan karaciğer rejenerasyon intrahepatik naklini kolaylaştırmak için bir strateji olarak sunulmuştur.

Bağışıklık yetersizliği olan farelere subkutan olarak ve intrahepatik insan hepatoselüler karsinoma ksenograftlarının Üretimi

Burada, olgunlaşmamış ve genişletilebilir insan hepatik kök hücrelerinin transplantasyonunu takiben Alb-toksin reseptörü aracılı hücre nakavt (TRECK)/SCID farelerinde üretilen yeni bir insanlaştırılmış fare karaciğeri modeli sunuyoruz.

İnsan Karaciğer Kök Hücreler kullanma Insanlaşmış Fare Karaciğer Üretimi

Burada, yenidoğan (0 gün) farelerde karaciğer sol lob kısmi rezeksiyon için yeni bir yöntem mevcut. Bu yeni iletişim kuralı akut karaciğer hasarı ve yaralanma yanıt yenidoğan ortamda çalışmak için uygundur.

Kısmi Lobular Hepatectomy: Morfolojik karaciğer rejenerasyonu için cerrahi bir Model

Burada, ailesel hiperkolesterolemi insan indüklenmiş pluripotent kök hücre kaynaklı tetkikine kullanarak bir insan karaciğer chimeric fare modeli oluşturmak için bir protokol mevcut. Bu yeni tedaviler hiperkolesterolemi için test etmek için değerli bir modeldir.

İndüklenmiş Pluripotent kök hücre kaynaklı tetkikine kullanarak ailesel hiperkolesterolemi insan karaciğer Chimeric fare modeli

Bu protokol, hem insan bağışıklık sistemi hem de karaciğer hücreleri ile insanlaşmış fareler kurmak için güvenilir bir yöntem sağlar. İnsan hepatositlerinin intrasplenik enjeksiyonu ve CD34+ hematopoetik kök hücrelerin insplektik enjeksiyonu ile elde edilen çift immünoeksik fareler insan immün yetmezlik virüsü-1 enfeksiyonuna yatkındır ve gözlendiği gibi karaciğer hasarına recapitulate HIV bulaşmış hastalar.

HIV ile ilişkili Karaciğer Patogenezi için Çift İnsanize TK-NOG Fare Modelinin Oluşturulması

Burada, hepatosellüler kanserin (HCC) tipik bağışıklık özelliklerini özetlemek için karaciğer kanserinin klinik olarak ilgili bir murine modelinin gelişimini açıklıyoruz.

Hepatik İnflamasyon ve Fibrozis Ortamında Ortaya Çıkan Hepatosellüler Kanserin Onkojenik Hepatositkaynaklı Ortotopik Fare Modeli

Lipid yüklü hepatositler karaciğer rejenerasyonuna özgüdür, ancak genellikle yoğunluk gradyan santrifüjleme ile kaybolurlar. Burada, steatotik hepatositleri tutan ve farelerde parsiyel hepatektomi sonrası rejenere hepatositlerin temsili popülasyonlarını veren optimize edilmiş bir hücre izolasyon protokolü sunuyoruz.

Farelerde Parsiyel Hepatektomi Sonrası Rejenere Hepatositlerin İzolasyonu

Bu protokolde, farelerde başarılı bir ortotopik karaciğer transplantasyonu (OLT) modelinin uygulanmasını tartışıyoruz. Ek olarak, bir farede başarılı OLT'den sonra allogreft açıklığını daha fazla analiz etmek için adjuvanlar, özellikle mikrobilgisayarlı tomografi (mikroBT) taramaları kullanılarak tartışılmaktadır.

Mikrobilgisayarlı Tomografi Anjiyografi Kullanan Farelerde Başarılı Ortotopik Karaciğer Nakli

Parsiyel 2/3 (%66) hepatektominin fare modeli literatürde iyi tanımlanmıştır, ancak karaciğer transplantasyonundan sonra boyuta göre küçük sendromu taklit eden daha geniş hepatektomiler nadiren kullanılmıştır. Sağlıklı farelerde yaklaşık %50 postoperatif ölümcüllük ile sonuçlanan bir fare modelinde genişletilmiş %78'lik bir hepatektomi prosedürünü tanımladık.

Bir Fare Cerrahi Modelinde Genişletilmiş %78 Hepatektomi

Öğrenin NOD.SCID farelerde kısmi hepatotektomi ve hepatositlerin intrasplenik nakli yöntemini. Bu teknik akut karaciğer yetmezliği tedavisinde hücre bazlı terapilerin geliştirilmesine katkı sağlar.

Hepatositlerin intrasplenic nakli düğümde kısmi Hepatectomy sonra. SCID fareler

Daha fazla video keşfet