Name: Boğaza aşılama, Fischer 344 farelerle FRANCISELLA tularensis (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-09-30T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 9 s
Description: Keşfedin, Fischer 344 farelerde Francisella tularensis ile akciğer tuleremi aşı etkinliğini değerlendirmek için intratrakeal aşılama yöntemini. Bu teknik, biyoterör ajanlarına karşı aşı geliştirme çalışmalarında güvenilir sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışmada sözleşmeli HDTRA1-14-C-0116 savunma tehdit azaltma Ajansı (DTRA) ve enfeksiyon genomik (DOD #W911NF-11-1-0136) mükemmellik merkezi tarafından desteklenmiştir.

Bu iş için bakım ve kullanım laboratuvar hayvanları Ulusal Sağlık Enstitüleri Kılavuzu'nda bulunan öneriler ile sıkı uygun olarak gerçekleştirildi. Kemirgenler içeren hayvan iletişim kuralları onayladı tarafından University of Texas San Antonio kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) iletişim kuralı'nı MU009(RA).
 1. kateter hazırlamak, Trakea göstergesi ve F. tularensis Inoculum <ol><li>Hazırlamak kateter (20 G x 2 inç) <ol><li>20 G x 2 iğne ve künt ve düz iğne ucu bitirmek ile eziyet kesilmiş bir döner aracı. 
		Not: Körelmenin iğne uzunluğu yaklaşık 3 mm zaman tamamen körelmenin iğne oturmuş kateter kol içine iptal edin metal uç izin vermelisiniz. Körelmenin iğne kateter yapısal sertlik Trakea kateter yerleştirme olanak verir ve kateter kol çıkıntılı körelmenin iğne ucu yokluğu nefes borusu yaralanma engeller.</li>
		<li>Körelmenin iğneler ve % 70 etanol kullanarak Kateterler temiz ve 15 dakika süreyle UV ışık altında sterilize</li>
	</ol></li> <li>Hazırlamak Trakea göstergesi <ol><li>bir kateter açılış içine oturup bir hava geçirmez mühür formu ipucu izin vermek için 1.000 µL pipet ucu Trim.</li>
		<li>'İ 200 µL aerosol bariyer pipet ucu ve önceden kesilmiş 1.000 µL pipet ucu yerde bir filtreyi kaldırmak.</li>
		<li>Filtre taşıyabilirsiniz serbestçe 1.000 µL pipet ucu içinde belgili tanımlık uç uç aşağı işaretlendiğinde olun.</li>
	</ol></li> <li>F. tularensis Inoculum <ol><li>Grow F. tularensis yük gecede uygun agar plaka 37 ° C. Scrape yaklaşık 100 µL agar plaka ile steril bir bakteriyel çim aşı döngü ve 500 mL Erlenmeyer uygun sıvı büyüme ortamının 250 mL içeren flask aşılamak için kullanın (için Fn: %0,1 L-sistein hidroklorür monohidrat ile desteklenmiş tryptic soya suyu (TSB)) ve gecede 37, sallayarak kuluçkaya ° C. 
		Not: video kullanılan F. novicida %0,1 L-sistein hidroklorür monohidrat ile desteklenmiş bir tryptic soya agar (TSA) plaka üzerinde büyüdü.</li>
		<li>4,221 x g, oda sıcaklığında 10 dakika için de gecede yetişkin sıvı kültür santrifüj kapasitesi ve süpernatant bakteri Pelet aksatmadan kaldırın. 
		Uyarı: Lütfen kurum izleyin &#39; süpernatant atmak için s Biyogüvenlik önerileri.</li>
		<li>Yavaşça bakteriyel Pelet uygun sıvı orta 25 mL ile yeniden askıya alma (Fn: %0,1 L-sistein hidroklorür monohidrat ile desteklenmiş TSB) % 10 gliserol, 25 mL pipet kullanarak içeren.</li>
		<li>1 mL pipet, aliquot tüpleri, 500 µL aliquots içine resuspended bakteri kültürü kullanarak bir kuru buz/etanol banyosunda donma ve depolamak-80 ° C.</li>
		Donmuş kültür tüpleri titresi belirlemek için <li>-80 ° C'de depolanan iki donmuş şişeleri Kaldır, çözülme buzda ve seri dilutions içinde fosfat tamponlu tuz (kaplama tarafından uygun büyüme medyada takip PBS) gerçekleştirmek (Fn: %0,1 içeren TSA L-sistein hidroklorid). 37 ° C'de inkübe 24-48 h tabaklar ve koloni oluşturan birimler (CFU) bakteri hücreleri içinde donmuş kültür tüpleri (iki şişe ortalaması) sayısını hesaplamak için numaralandırılır.</li>
		<li>Bakteriyel inoculum donmuş bir şişe buz çözdürme tarafından hazırlamak ve PBS ile Kültür 10 7 CFU/100 µL son konsantrasyonu oranında seyreltin. İnoculum 100 µL istenen CFU ortaya çıkarır bir konsantrasyon olmalıdır (gliserol inoculum içinde son konsantrasyonu fazla % 3, farenin boğulma önlemek için olamaz). Donmuş kültür tüpleri-80 ° C'de depolanan-ebilmek var olmak kullanılmış için altı ay sonra hazırlık.</li>
	</ol></li></ol> 2. Sıçan anestezi <ol><li>anestezi odası bir anestezi makinesi uygun şekilde çalışan isoflurane vaporizatör için bağlanmak.</li>
	<li>Tüp gaz sistemi atma anestezi odasına atma gaz bağlayın.</li>
	<li>Oksijen akışı 4 L/dak için anestezi makinede açın</li>
	<li>% 5 isoflurane Buharlaştırıcı ayarla.</li>
	<li>Anestezi odasında fare yerleştirin. 
	Not: Biz genellikle kullanmak fareler arasında 8-10 hafta eski (130-180 g); Genç sıçanlar ağız boşluğuna küçük boyutu nedeniyle bu tekniği ile aşılamak zor.</li>
	Anestezi indüksiyon, gerçekleştiğinde <li>korumak %5 isoflurane, sıçan, 2 L/dak oksijen etkisi. Bu yaklaşık 3-10 dakika sürer</li>
	<li>Kalite ve solunum ve kalp atışı ve refleks uyarım ayak çimdik testi olduğu gibi tepki oranı ile anestezi derinliği belirler. İdeal anestezi derinliği 1-1.5 s sayım her nefes arasında belirttiği.</li>
</ol> 3. Boğaza aşılama <ol><li>fare anestezi odasından çıkarın ve sıçan dorsally kemirgen entübasyon kürsüye yerleştirin. Sıçan tutmak için tutucu sıçan ön dişleri iliştirin. 
	Not: sıçan işlem sırasında uyandırmak başlarsa, kateter-ebilmek var olmak çıkarmak ve fare anestezi daha derin bir uçak ulaşmak için anestezi odasına döndü.</li>
	<li>Dil desteği el olarak aynı tarafında geniş nokta soyunma başparmak Forseps ile hareket için dominant el kullanın.</li>
	<li>Kullanım desteklemek el ve dil laringoskop karşı fare ile güvenli &#39; s alt çene ve trakea ve yemek borusu hayvan görselleştirin. Nefes borusu açık ve fare nefes alır gibi yakın.</li>
	Bir 20'lik blunted-iğne, içeren kateter <li>Ekle hazırlanan adım 1.1, nefes borusu içine. Hafif direnç olabilir ve nefes borusu içine ekleme olabilir &#34; inişli çıkışlı &#34; trakeal kıkırdak sürtünme kateter nedeniyle. Nem veya sığ solunum nedeniyle, Trakea Trakea görselleştirme önleyen gırtlak kapağını tarafından karşılanabilir. Yavaşça gırtlak kapağını kıkırdak kenarına dokunmak kıkırdak kapağı açın ve nefes borusu ortaya çıkarmak neden olur.</li>
	<li>Kör iğne kateter sağlanması sırasında kateter üzerinden kalır borusunda kaldır.</li>
	<li>İzin için nefes borusu eklenen kateter çevresinde edebilmek iri fare geçmek için birkaç saniye.</li>
	<li>Sıkıca Trakea göstergesi üzerine açılış kateter koltuk. Aerosol bariyer hareket belirtmek kateter borusu eklenen doğru.</li>
	<li>Öyle ki hayvanın göğüs uçak entübasyon stand dik bakan sıçan entübasyon kürsüye yatıyor emin olmak.</li>
	<li>Nefes borusu gösterge kaldırmak ve 100 µL teslim (10 7 CFU) F. tularensis 200 µL pipet ucu kullanarak içeren inoculum sıkıca uç kateter açılış karşı oturma.</li>
	<li>Hava ile dolu bir 1 mL kayma ipucu tüberkülin şırınga ve hava inoculum sıçan akciğerlere ulaşır emin olmak için 300 µL gönderin.</li>
	<li>Kateter sıçan cerrahi perondan sökün trakea ve.</li>
	<li>Uyandırmak ve kafes dönmek fareyi izin. Solunum normale döndü emin olun.</li>
	<li>F. tularensis CFU belirlemek 1.3.5 CFU onaylamak için adımda anlatıldığı gibi inoculum teslim borusunda.</li>
	<li>3.1-3,9 unvaccinated (saf) hayvanlar ile inoculum yerine 100 µL PBS üzerinde adımlarını yineleyin.</li>
</ol>

<ol><li>Ellis, J., Oyston, P. C. F., Green, M., Titball, R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12364373">Tularemia.</a> Clin Microbiol Rev. 15 (4), 631-646 (2002).</li>
<li>Lyons, C. R., Wu, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+Francisella+tularensis+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Animal models of Francisella tularensis infection.</a> Ann N Y Acad Sci. 1105, (2007).</li>
<li>Hutt, J. A., Lovchik, J. A., Dekonenko, A., Hahn, A. C., Wu, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Natural+History+of+Pneumonic+Tularemia+in+Female+Fischer+344+Rats+after+Inhalational+Exposure+to+Aerosolized+Francisella+tularensis+subspecies+tularensis+Strain+Schu+S4%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">The Natural History of Pneumonic Tularemia in Female Fischer 344 Rats after Inhalational Exposure to Aerosolized Francisella tularensis subspecies tularensis Strain Schu S4.</a> Am J Pathol. 187 (2), 252-267 (2017).</li>
<li>Ray, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Fischer+344+rat+reflects+human+susceptibility+to+Francisella+pulmonary+challenge+and+provides+a+new+platform+for+virulence+and+protection+studies%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">The Fischer 344 rat reflects human susceptibility to Francisella pulmonary challenge and provides a new platform for virulence and protection studies.</a> PloS one. 5, e9952(2010).</li>
<li>Jemski, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+tularemia%3A+comparison+of+selected+routes+of+vaccination+in+Fischer+344+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Respiratory tularemia: comparison of selected routes of vaccination in Fischer 344 rats.</a> Infect Immun. 34 (3), 766-772 (1981).</li>
<li>Wu, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vaccination+of+Fischer+344+rats+against+pulmonary+infections+by+Francisella+tularensis+type+A+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Vaccination of Fischer 344 rats against pulmonary infections by Francisella tularensis type A strains.</a> Vaccine. 27 (34), 4684-4693 (2009).</li>
<li>Mara-Koosham, G., Hutt, J. A., Lyons, C. R., Wu, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibodies+contribute+to+effective+vaccination+against+respiratory+infection+by+type+A+Francisella+tularensis+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Antibodies contribute to effective vaccination against respiratory infection by type A Francisella tularensis strains.</a> Infect Immun. 79 (4), 1770-1778 (2011).</li>
<li>Oyston, P. C., Sjostedt, A., Titball, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tularaemia%3A+bioterrorism+defence+renews+interest+in+Francisella+tularensis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Tularaemia: bioterrorism defence renews interest in Francisella tularensis.</a> Nat Rev Microbiol. 2 (12), 967-978 (2004).</li>
<li>Kingry, L. C., Petersen, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+review+of+Francisella+tularensis+and+Francisella+novicida%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Comparative review of Francisella tularensis and Francisella novicida.</a> Front Cell Infect Microbiol. 4, 35(2014).</li>
<li>Rohmer, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Francisella+tularensis+genomes+reveals+evolutionary+events+associated+with+the+emergence+of+human+pathogenic+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">Comparison of Francisella tularensis genomes reveals evolutionary events associated with the emergence of human pathogenic strains.</a> Genome Biol. 8 (6), R102(2007).</li>
<li>Chu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+attenuated+Francisella+novicida+vaccine+protects+against+Francisella+tularensis+pulmonary+challenge+in+rats+and+non-human+primates%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Live attenuated Francisella novicida vaccine protects against Francisella tularensis pulmonary challenge in rats and non-human primates.</a> PLoS Pathog. 10 (10), e1004439(2014).</li>
<li>Signarovitz, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0047639">Mucosal Immunization with Live Attenuated Francisella novicida U112ΔiglB Protects against Pulmonary F. tularensis SCHU S4 in the Fischer 344 Rat Model.</a> PloS one. 7 (10), e47639(2012).</li>
<li>Cunningham, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancement+of+vaccine+efficacy+by+expression+of+a+TLR5+ligand+in+the+defined+live+attenuated+Francisella+tularensis+subsp.+novicida+strain+U112DiglB%3A%3AfljB%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Enhancement of vaccine efficacy by expression of a TLR5 ligand in the defined live attenuated Francisella tularensis subsp. novicida strain U112DiglB::fljB.</a> Vaccine. 32 (40), 5234-5240 (2014).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa yoktur

Fischer 344 sıçan Tularemi aşısı geliştirme3için önemli bir model haline geliyor. Bunlar aerosoller teslim edildiğinden F. tularensis maruz pulmoner rota üzerinden weaponized F. tularensis, türlü karşı etkinlik gösteren için önemlidir. Farenin boğaza aşılama maruz sıçan akciğerlerinin F. tularensis ekipmanları üreten büyük, pahalı ve karmaşık aerosol gerek kalmadan kolaylaştırır. F. tularensis seçin Aracısı formları Ayrıca kullanan tüm deneylerin genellikle cidd...

F. tularensis (Ft) insan hastalık nedenleri Tularemi. Bakteriler akciğer yönlendirme yolu iktisap zaman, bu yüksek morbidite ve mortalite1öğretilenbir Tularemi için yol açar. F. tularensis aerosolize formlarla ilişkili tehlike nedeniyle bir biothreat ajan olarak kabul edilir ve şu anda ABD'de insan kullanımı için onaylanan aşı Yoğun bir çaba aşı ve bu bakteriyel biothreat insan nüfusu ve yasadışı kullanıma karşı korumak için öğretilenbir Tularemi karşı tedavi edici önlemler geliştirmek için şu sıralar başlatıldı.
Tularemi araştırma çoğunu fareler F. tularensis enfeksiyon için aşırı duyarlılık ve reaktifler yaygınlığı nedeniyle fare modeli üzerinde odaklanmıştır. Ancak, fareler için bu model2aşı etkinlik gösteren zorluğu nedeniyle aşı geliştirme zor bir model olduğu kanıtlanmıştır. Son zamanlarda, Fischer 344 sıçan Tularemi aşısı geliştirme3için bir model olarak geliştirilmiştir. Çeşitli F. tularensis alttür Fischer 344 fare duyarlılığını insan duyarlılığı4taklit eder ve fareler F. tularensis pulmoner meydan karşı korumak için bilinen bir canlı aşı suşu ile aşı tarafından korunabilir insanlar5,6,7. F. tularensis enfeksiyon insanların bazı özellikleri Fischer 344 fare modelleri, pulmoner F. tularensis karşı koruyan bir aşı geliştirilmesi için son derece faydalı bir model olması olabilir maruz kalma.
Etkili bir aşı insanlara F. tularensispulmoner maruz karşı korumak gerekir. Büyük olasılıkla pulmoner maruz kalma weaponized F. tularensis aerosolize bakteriler akciğer8içine inhale olurdu. Bununla birlikte, F. tularensis nesil aerosol tehlikeli ve hantal ve özel ekipman ve koruma gerekir. Alternatif bir yol içinde belki de daha fazla olduğunu sıçan pulmoner maruz kalma uyarlanabilir birden fazla laboratuarlar için özel ekipman eksik boğaza aşı6yolu ile konuşuyor. Laringoskop bir kateter imzalat bir sıçan Trakea içinde doğru yerleşimini için bu tekniği kullanır. Nefes borusu, yemek borusu yerine içinde bulma dan akciğerlere hava akımı görüntüler basit bir aygıt tarafından doğrulanır. F. tularensis daha sonra kateter aracılığıyla ciğerlerine yönetim tarafından bakteri pulmoner teslim edilmesini sağlamak için kateter hava giriş tarafından takip bir şırınga ile teslim edilir. Buna ek olarak, Sıçanlarda etkilerinin bu aşı belirten Jemski,5 içine Fischer 344 fareler burunici rota yolu ile aşılanmış F. tularensis akciğerlerden 3 gün sonrası aşılama kadar kültürlü değil ki daha önce rapor mu değil doğrudan teslim sonuç ciğerlerine bakterilerin.
F. tularensis (F. tularensis subsp. tularensis, F. tularensis subsp. holarctica) SELECT Ajan formları videografisi önleyecek Biyogüvenlik seviye 3 (BSL3) kapsama yordamlar gerektirir. Ancak, F. novicida (Fn) seçin Aracısı durumu nedeniyle onun avirulence sağlıklı insanlarda muaf ve seviye 2 (BSL2) koşulları9,10altında güvenle kullanılabilir. Ayrıca, Fn via boğaza aşılama11,12,13teslim F. tularensis pulmoner pozlama karşı koruyabilirsiniz canlı zayıflatılmış aşılar için temel olarak hizmet vermektedir. Burada sunulan tekniği fareler insanlar için bir model olarak kullanan pulmoner rota üzerinden oluşan enfeksiyonlar incelenmesi için izin verir. Bu teknik özel aerosol üreten ekipman için gerek kalmadan gerçekleştirilebilir. FN burada filme teknikleri için kullanıldı.

<table><tbody><tr><td>GreenLine fiber optik bıçak boyutu 0</td><td>Carefusion</td><td>5-5231-00</td><td>Macintosh Amerikan profili</td></tr><tr><td>GreenLight sistemi laringoskop kolu</td><td>Carefusion</td><td>4559GSP</td><td></td></tr><tr><td>Exel International Safelet I.V. Kateter</td><td>EXEL INTERNATIONAL</td><td>26743</td><td></td></tr><tr><td>Kayma Uçlu Steril Şırıngalar 1mL</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>Geniş Nokta Pansuman Başparmak Forseps</td><td>Termo Bilimsel</td><td>76-302</td><td></td></tr><tr><td>200 &mu; L bariyer ucu</td><td>GeneseeScientific</td><td>24-142</td><td></td></tr><tr><td>1.000 &mu; L pipet ucu</td><td>Olympus Plastics</td><td>24-173</td><td></td></tr><tr><td>Dremel 3000-2/28 Döner alet kiti</td><td>Dremel</td><td>3000228</td><td></td></tr><tr><td>Kemirgen Entübasyon Standı</td><td>Braintree Scientific</td><td>RIS 200</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Butler Schein</td><td>NDC 11695-6776-2</td><td></td></tr><tr><td>Kemirgen anestezi makinesi</td><td>Surgivet</td><td>VTC302 Klasik T3</td><td></td></tr><tr><td>Kemirgen Anestezi odası</td><td>Braintree Bilimsel</td><td>AB 1</td><td></td></tr></tbody></table>

boğaza aşılama, fischer 344 farelerle francisella tularensis

Intratracheal Inoculation of Fischer 344 Rats with Francisella tularensis

Pulmoner enfeksiyon bakteri FRANCISELLA tularensis ile ciddi ve ölümcül hastalık, Tularemi, insanlarda yol açabilir. Bir onaylanmış Tularemi aşısı insanlar için geçerli olmaması nedeniyle araştırma uygun hayvan modelleri kullanan aşı geliştirme üzerine odaklanmıştır. Fischer 344 sıçan F. tularensis enfeksiyon insan duyarlılık yansıtır ve bu nedenle Tularemi aşısı geliştirme için çekici bir model bir model olarak ortaya çıkmıştır. F. tularensis Fischer 344 fareyle boğaza aşı insanlarda akciğer pozlama taklit eder. Sıçan nefes borusu içine başarılı teslimat Akciğer teslimat için önemlidir. Laringoskop aydınlatma ile düzgün imzalat sıçan tracheae entübasyon için kullanılır; Nefes borusu içinde doğru bulma nefes algılamak için basit bir aygıt tarafından belirlenir. Entübasyon, F. tularensis kültürü şırınga ile ölçülen bir doz teslim edilir. Bu teknik aşısı etkinliğini değerlendirmek için fare nefes borusu içinde F. tularensis pulmoner teslim standartlaştıran.

F. tularensis boğaza aşı içinde fare humoral yanıt enzim bağlı immunosorbent assay (ELISA) bakteri, UV-inaktive karşı tarafından belirlenen11daha önce açıklandığı gibi. Toplam immünoglobulin G (IgG) Fischer 344 sıçan Inaktif tüm cep telefonu bakteri öldürülmesinin biçilen post-boğaza aşılama ile Fn bir zayıflatılmış strain (107 CFU inoculum) 14 gün ve gün 28 (şekil 1). Sahte aşı fareler PBS intratracheally aldı. Ser...

Bu iletişim kuralı boğaza aşılamalar Fischer 344 sıçan ile açıklar FRANCISELLA tularensis. Bu yordamı insanlar pulmoner maruz kalma bu potansiyel biothreat Ajan taklit eder ve aşı ve tedavi edici etkinliği pulmoner Tularemi karşı test etmek için kullanılabilir.

Boğaza aşılama, Fischer 344 farelerle FRANCISELLA tularensis

Pulmonary infection with the bacterium Francisella tularensis can lead to the serious and potentially fatal disease, tularemia, in humans. Due to the ...

Fischer 344 sıçanlarına intratrakeal yolla Francisella tularensis inokülasyonunun genel amacı, pulmoner tularemiye karşı aşı etkinliğini belirlemektir. Bu yöntem, organizmanın pulmoner yol ile uygulanmasına ve dolayısıyla biyotehdit ajanı olan bir etkene karşı aşı etkinliğinin test edilmesine olanak tanıdığı için, tularemi aşısı geliştirme sürecindeki temel sorulara yanıt vermemizi sağlar. Dolayısıyla, bu tekniğin temel avantajı, aerosol üreten bir ekipman kullanmadan Francisella tularensis'in sıçan akciğerine tutarlı bir şekilde iletilebilmesidir.Fischer 344 sıçanının, bu hastalığa karşı aşı geliştirme için uygun bir model olarak kabul edilmesi nedeniyle, bu tekniğin doğurduğu sonuçlar pulmoner tulareminin tedavisine ve önlenmesine kadar uzanmaktadır. Bu yöntem, tularemiye karşı aşılar ve tedaviler hakkında bilgiler sağlayabilse de, veba gibi sıçanların kullanıldığı diğer pulmoner enfeksiyöz hastalık modellerine de uygulanabilir. Genel olarak, bu yöntemde yeni olan kişiler, kateterin özofagus yerine trakeaya doğru yerleştirilmesi konusunda zorluk yaşayacaklardır.Kateteri hazırlamak için, öncelikle 20 gauge iki inçlik bir iğneyi kesin ve bir döner alet kullanarak iğnenin ucunu küt

intratracheal-inoculation-fischer-344-rats-with-francisella

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Yalıtım için Yöntem Francisella tularensis Dış Membranlar

Kaynak: Venuprasad, K., ve diğerleri. Hava Yolu Enflamasyonunu İncelemek İçin Fare Modellerinde Haemophilus influenzae'nin Trakeal İçi Uygulaması. J. Vis. Uzm. (2016)Bu video, alt solunum yolu enfeksiyonunu modellemek için akciğer patojenik bir bakteri inokulumunun anestezi uygulanmış bir fareye intratrakeal olarak verilmesini göstermektedir.

Bir Fare Modelinde İntratrakeal Bakteri Dağıtımının Gerçekleştirilmesi

Source: Nguyen, J. Q., et. al. Intratracheal Inoculation of Fischer 344 Rats with Francisella tularensis. J. Vis. Exp. (2017)This video demonstrates the procedure of intratracheal inoculation in an anesthetized rat, involving catheter placement, bacterial delivery into the trachea, and subsequent lung infection establishment for studying host-pathogen interactions.

Development of a Rat Lung Infection Model Using Intratracheal Bacterial Inoculation

Source: Wang, M., et al, Evaluation of T Follicular Helper Cells and Germinal Center Response During Influenza A Virus Infection in Mice. J. Vis. Exp. (2020).This video demonstrates intranasal infection of a mouse with a pathogenic influenza virus to establish a respiratory tract infection. The procedure outlines the administration of the virus into the nasal cavity. The virus enters host cells, replicates, and activates the immune system.

Intranasal Infection of a Mouse with a Pathogenic Influenza Virus

Bu video, entübasyon ve bakteri süspansiyonlarının akciğer loblarına yerleştirilmesi yoluyla immünokompetan bir kemirgen modelinde akciğer enfeksiyonunun oluşumunu göstermektedir. Bu model, bağışıklığı yeterli hayvanlarda antibakteriyel etkinlik çalışmalarına olanak tanır.

İmmünkompetan Kemirgen Modellerinde Streptococcus pneumoniae'nin İntrabronşiyal Damlatılması

Bu çalışma, farelerde akut pnömokok pnömonisine karşı koruma sağlamak için akciğerlerde doğuştan gelen bağışıklık tepkisini artırmak için dil altı immünoterapisinin kullanılmasının rahatlığını göstermektedir.

Alternatifi olarak dilaltı immünoterapi Akut Solunum Enfeksiyonları Karşı Koruma tetikleyebilecek

Reaktiflerin Entübasyon aracılı intratrakeal (IMIT) instilasyon solunum yolu hastalıkları, hem de akciğer içine doğrudan tedavi reaktifler aşılamak için bir yöntem incelenmesi için mükemmel, invazif olmayan bir yöntemdir. Bu klinik öncesi test için uygun bir hızlı ve yüksek oranda çoğaltılabilir bir yöntemdir.

Entübasyon-aracılı intratrakeal (IMIT) damlatma: A Noninvaziv, Lung-özel Dağıtım Sistemi

Haemophilus influenzae'nin farelerin alt solunum yollarına intra-trakeal inokülasyon prosedürünü gösteriyoruz. Bu, fare modellerinde hava yolu iltihabını düzenleyen sinyal yollarını incelemek için çok kullanışlı bir araçtır.

intra-trakeal İdaresi<em&gt; Haemophilus influenza</em&gt; Fare Modelleri Havayolu inflamasyonu Eğitim için

İmmün yetmezliği olan kemirgenlerde akciğer enfeksiyonları oluşturmak için bir yöntem tarif edilmiştir. Yeterlilikle, bu yöntem S. pneumoniae, H. influenzae, P. aeruginosa, K. pneumoniae ve A. baumannii birçok izolatı ile stabil enfeksiyonu indüklemek için hızlı ve kolay bir şekilde gerçekleştirilebilir.

Immünkompetan Kemirgenler bir Sağlam Pnömoni Modeli karşı antibakteriyel etkinliğini değerlendirmektir<i&gt; S. pneumoniae</i&gt;<i&gt; H. influenza</i&gt;<i&gt; K. pneumoniae</i&gt;<em&gt; P. aeruginosa</em&gt; ya da<em&gt; A. baumannii</em

Bu rapor, sıçan lakrimal bez özütü, ovalbümin ve komple Freund adjuvantının bir emülsiyonu ile bağışıklaştırma yoluyla Lewis sıçanlarında kronik deneysel otoimmün göz kurumasına neden olan bir yöntem ve bunu takiben göz kapağı yumrusu ekstraktı ve ovalbümin forniceal subkonjonktiva ve lakrimal bezlere enjekte edilir. Altı hafta sonra.

Eyeball Dokusunda Efektif Hafıza T Hücrelerini Artıran Kronik Otoimmün Kuru Göz Fare Modeli

Bu çalışmada, biz iki fotonlu intravital görüntüleme ve hücre etkileşim fare trakeal mukoza grip virüsü ile enfeksiyon sonra çözümlemesi için bir protokol mevcut. Bu iletişim kuralı bağışıklık hücre dynamics sırasında solunum yolu enfeksiyonları eğitim araştırmacılar için ilgili olacaktır.

İki fotonlu Intravital mikroskobu kullanılarak grip virüsü enfeksiyonu sırasında trakeal mukozasında görüntüleme hücre etkileşimi

Keşfedin, Fischer 344 farelerde Francisella tularensis ile akciğer tuleremi aşı etkinliğini değerlendirmek için intratrakeal aşılama yöntemini. Bu teknik, biyoterör ajanlarına karşı aşı geliştirme çalışmalarında güvenilir sonuçlar sağlar.

Boğaza aşılama, Fischer 344 farelerle FRANCISELLA tularensis

Daha fazla video keşfet