Metodoloji geliştirme yaşam tabloları alanını kullanarak Whitefly, Bemisia tabaci, pamuk gibi bir Model sistemi içinde sesil böcekler için için

Bu kohort tabanlı yaşam tablosu yaklaşımının genel amacı, tarladaki bir böcek popülasyonunun ölüm oranını doğrudan ölçmek ve ölüm kaynağını belirlemektir. Bu yöntem, popülasyonlardaki ölüm oranlarına katkıda bulunan faktörleri ve nihayetinde popülasyonların büyüme ve azalma oranını anlamak gibi popülasyon dinamiklerindeki temel soruları yanıtlamamıza yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, sahadaki gerçekçi koşullar altında birden fazla nedenden kaynaklanan ölüm kaynaklarını ve oranlarını doğrudan ölçmesidir.

Bu yöntem için ilk olarak, böceğin olgunlaşmamış aşamalarında hareketsiz olduğunu öğrendiğimizde aklımıza geldi. Bu, bireysel böceklerin kaderini doğrudan takip etmemizi sağlar. Prosedürü göstermek, bir yüksek lisans öğrencisi olan Isadora Bordini ve bir laboratuvar teknisyeni olan Francisco Bojorquez'dir.

Böcekler mevcut olduğunda, mahsulün büyümesi sırasında herhangi bir zamanda yaşam tabloları hazırlayın. Çalışmaların ne zaman başlatılacağının seçimi, araştırmanın amaç ve hedeflerine bağlı olacaktır. Çevredeki arazilerden veya ekilmemiş alanlardan gelen kenar etkilerini en aza indirmek için grafiğin merkezine yakın iki sıra kırpma seçin.

Her sıranın başını bir tel bayrak veya tahta bir kazık ile işaretleyin. Sıranın üç ila dört metre içine bir örnekleme alanı seçin. Daha sonraki gözlemleri basitleştirmek için, yumurta kohortları oluşturmak için bir satır ve nimf kohortları oluşturmak için ikincisini seçin.

Bir yumurta kohortu en az 50 yumurta içermelidir. Davranış ve bitki büyümesinin bir sonucu olarak, Bemisia tabaci'nin yaşam evreleri genellikle gölgelik içinde dikey olarak dağıtılır ve yumurtalar tepeye yakın ve giderek daha yaşlı nimf aşamaları aşağıda olacak şekilde dağıtılır. Yaprakların alt tarafında yeni bırakılan yumurtaları aramak için 8x el merceği kullanın.

İdeal olarak, el merceğinin yan tarafında kalemin sığabileceği bir delik olmalıdır. Çalışmadaki her bitki için yumurtalı bir yaprak bulun. Ardından, daha dikkatli bir inceleme yapmak için 15x lens kullanın.

Yumurtalar olgunlaştıkça bronzlaşır, böylece taze yumurtalar parlak beyaz bir renge sahip olur ve eski yumurtalardan sıyrılır. Bu protokolün en kritik yönü, yeni bırakılan yumurtaların ve yeni yerleşen ilk instar nimflerin doğru bir şekilde tanımlanmasıdır. Doğru sonuçlar için yaşam tablosu gözlemlerinin her yaşam evresinin en başından başlaması hayati önem taşır.

Bir yumurta bulduktan sonra, yumurtanın etrafına küçük bir daire çizmek için toksik olmayan ultra ince noktalı siyah kalıcı bir işaretleyici kullanın. Daireyi küçük tutun, böylece içine başka yumurta bırakılmaz. Aynı yaprakta, dört farklı sektörde en fazla dört yumurtayı işaretleyin.

Bir pamuk yaprağında, ana yaprak damarları ile bölünmüş dört sektör vardır. Yaprak sektörü başına sadece bir yumurta seçin. Deneysel tasarıma bağlı olarak arsa veya tedavi numarası için notasyon ile yaprağın yaprak sapının etrafına küçük, hafif bir karton etiket kullanarak işaretli yaprağı tanımlayın.

Ardından, bitkinin tepesine yakın bir yere oldukça görünür bir bayrak ekleyin. Şimdi, sıra boyunca bir sonraki bitkide yumurta bulmaya geçin. Kohortu tek bir günde oluşturun.

Normal Arizona yaz koşullarında, yumurtalar beş ila yedi gün içinde çatladığı için yapraklar sekiz ila 10 gün içinde toplanmaya hazır olacaktır. Tüm sağlıklı yumurtaların yumurtadan çıktığından emin olmak için toplama zamanını ayarlayın. Tarlada, yumurtalar mortaliteyi ve ölüm nedenlerini yerinde net bir şekilde değerlendirmek için çok küçüktür.

Bu nedenle, dislokasyon, predasyon veya cansızlık gibi mortalite nedenleri laboratuvarda diseksiyon mikroskobu altında belirlenir. Yumurta veya nimf ölüm nedenini doğru bir şekilde belirlemek çok önemlidir, çünkü bu, nüfus artışını ve düzenlemeyi etkileyen faktörler hakkında çıkarılabilecek ekolojik çıkarımları etkiler. Yumurta, hava koşulları veya çiğneme predasyonu nedeniyle eksikse, o zaman yerinden çıkmıştır.

Bir yumurta çökmüş bir koryona dönüştürülmüşse, bu predasyon olarak sınıflandırılır. Yumurtadan çıkan yumurtalar da çökmüş görünür, ancak koryonda küçük bir pim kullanılarak bulunabilen dikey bir yarık vardır. Bir yumurta çatlamadıysa, onu kaçınılmaz olarak sınıflandırın.

Yaprakların alt tarafında yeni yerleşmiş ilk instar nimflerini aramak için 8x el merceği kullanın. Bu tür yapraklar, bir pamuk bitkisinin tepesinden yaklaşık üç ila beş düğüm aşağıda olacaktır. Herhangi bir nimf bulunduğunda, 15x lens kullanarak evrelerini doğrulayın.

Her çalışma için en az 50 nimf bulun. Sıra boyunca iyi dağılmış bitkileri seçin ve tek bir günde kohortu oluşturun. Daha önce olduğu gibi, tanımlanan perinin etrafına küçük bir daire çizin.

Her biri farklı bir sektörde yaprak başına en fazla dört nimf işaretleyin ve ardından bir sonraki bitkiye geçin. Yumurtadan yeni çıkmış ilk instar nimflerinin yerleşmeden önce birkaç santimetre hareket edebileceğini ve bunun birkaç saat sürebileceğini unutmayın. Yerleşik nimfler, hareketsiz oldukları, yaprağa daha sıkı bastırıldıkları ve daha yarı saydam kehribar rengine sahip oldukları için sürünen nimflerden ayırt edilebilir.

Daha yaşlı ilk instar nimfler, tüy dökmeye yakın olduklarında şiş ve şişkin görünürler. Çizim veya tedavi numarası için notasyonlu bir etiket işaretleyin ve yaprağın yaprak sapına sabitleyin. Ardından, bitkinin tepesine yakın bir yere oldukça görünür bir bayrak ekleyin.

Yaprak sektörü bilgileri de dahil olmak üzere su perisinin konumu hakkında ayrıntılı notlar alın. Nimfleri tanımladıktan bir veya iki saat sonra, sürünen nimflerin daire içine alınmadığından emin olmak için onları iki kez kontrol edin. Yerleşmiş perileri gerektiği gibi not edin.

Kohort kurulduktan bir ila iki gün sonra, nimflerin gelişimini değerlendirmek ve ölülerse bir mortalite nedeni atamak için 15x lens kullanın. Haftada en az üç kez veya yaklaşık her gün gözlem yapın. Ölüm, instara bağlı olarak yerinden çıkma, parazitlik, yırtıcılık veya bilinmezlik olarak karakterize edilir.

Bir kohortun tipik bir yaşam tablosu, her bir yaşam evresindeki her faktör için marjinal mortalite oranlarını sağlar. Bu oranları K değerlerine dönüştürerek, tüm faktörler üzerinde evreye özgü mortalite ve tüm aşamalarda faktöre özgü mortalite ve toplam kuşak mortalitesi gibi kolayca tahmin edilebilir. Üç yıllık bir çalışmada bu teknikler kullanılarak, geniş spektrumlu böcek öldürücüler uygulandığında, yırtıcı hayvanları emerek marjinal avlanma oranlarının önemli ölçüde azaldığı bulundu.

Yeri doldurulamaz ölüm oranları benzerdi. Normalde, avlanma en yüksek yeri doldurulamaz ölüm oranını sağladı, ancak bu böcek ilacı kullanımıyla önemli ölçüde azaldı. Parazitizm aynı zamanda düşük seviyelerde yeri doldurulamaz ölüm oranı sağladı.

Dört tekrarlanan parseldeki verilerden yapılan anahtar faktör analizi, üç yıllık çalışma boyunca toplam dokuz kohortta birleştirildi. Sonuçta, avlanma en çok kuşak ölümlerindeki değişikliklerle yakından ilişkiliydi. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik arsa başına yaklaşık 30 dakika içinde yapılabilir, ancak bu, böcek yoğunluğuna bağlı olarak büyük ölçüde değişebilir.

Bu prosedürü denerken, bitki kalitesinin değişmemesi için manipüle edilen yaprak üzerindeki stresi en aza indirmeyi unutmamak önemlidir. Ayrıca, gözlemci etkilerini engellemek için her kopya için tek bir gözlemci kullanılmalı ve gözlem kriterlerinin tekdüzeliğini artırmak için tüm gözlemciler sık sık toplanmalıdır. Bu videoyu izledikten sonra, ölüm nedenlerini belirlemek için böcekleri bulmak, işaretlemek ve gözlemlemek de dahil olmak üzere, tarlada hareketsiz bir böcek için bir yaşam masasının nasıl kurulacağını iyi anlamış olmalısınız.

Özellikle yaz aylarında tarlada uzun süre çalışmanın zor olabileceğini ve işin güvenli bir şekilde yapılması için uygun kıyafet ve sıvı alımının gerekli olduğunu unutmayın.