Minimal invaziv transvers aort daralma farelerde sol ventrikül hipertrofisi indüksiyon için tekniği

Bu protokolün genel amacı, farelerde minimal invaziv transvers aort daralması sağlamaktır. Bu yöntem, farelerde transvers aort daralmasının uygulanmasıyla ilgili temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir, örneğin aort kemerinin altında bir geçit nasıl oluşturulacağı gibi. Bu tekniğin temel avantajları, basit, kullanıcı dostu olması ve farelerin entübe edilmesi ve havalandırılması ihtiyacını ortadan kaldırmasıdır.

Cerrahi öncesi hayvan hazırlığı ve ameliyat sonrası gözetim adımlarını gerçekleştirecek olan postdoc Simona Nemska ile prosedürü göstereceğim. İşlem gününde, anestezi uygulanmış bir farenin boynunu ve göğsünü tıraş edin ve maruz kalan cildi% 70 etanol ile dezenfekte edin. Ayak parmağınızı sıkıştırarak uygun sedasyon seviyesini onayladıktan sonra, hayvanı sırtüstü pozisyonda temiz bir mantar çalışma pedine sabitleyin.

Daha sonra, sternumu ortaya çıkarmak için suprasternal çentikten göğsün ortasına 10 milimetre uzunlamasına orta hat servikal kesi yapmak için 11 numaralı bir bıçak bıçağı kullanın. Crile-Wood iğne tutucu kullanarak, tiroidi geri çekmek için 4-0 monofilament polipropilen kalış sütürü geçirin. Ve dikişi çalışma pedine bantlayın.

Daha sonra çalışma pedini cerrahi mikroskop altında hareket ettirin ve trakeayı ortaya çıkarmak için pretrakeal kasları kör bir şekilde ayırmak için mikrocerrahi forseps kullanın. Bir çift kavisli mikrocerrahi forsepsin kapalı uçlarını trakea üzerinde ve sternumun arkasında nazikçe kaydırın ve plevrayı künt bir şekilde incelemek için kavisli forsepsleri dikkatlice açıp kapatın. Sağ supraklaviküler kasları kavramak için düz mikrocerrahi forsepsleri kullanın ve yavaşça göğsü yukarı çekin.

Kemik kıskacının alt ucunu sternumun altına kaydırarak, mini sternotominin alt kısmını hafifçe sola doğru yönlendirerek üç ila dört milimetrelik bir üst kısmi sternotomi yapın. Mikrocerrahi iğne tutucu kullanarak, mini sternotominin her iki yanındaki ikinci interkostal boşluğun içinden dışına 7-0 monofilament polipropilen askı sütürü geçirin. Sternal kenarları her iki tarafa yaymak için 7-0 monofilament polipropilen askı sütürleri kullanın.

Ve düşük güçte büyütme altında aort arkını görselleştirmek için pretrakeal kasları, mediastinal yağı ve timusu nazikçe hareket ettirmek için kavisli forsepsleri kullanın. Aort arkının altındaki yumuşak dokuyu ortaya çıkarmak için, uçları kapalı olarak kemerin altına bağlama forsepsleri yerleştirin ve forsepsleri yavaşça açın. Yumuşak dokudaki forsepsleri nazikçe açıp kapatarak aort arkının altındaki yumuşak dokuda bir tünel oluşturmak için ikinci bir bağlama forseps kullanın.

Daha sonra, sağ innominat ve sol ana karotis arterlerin orijini arasından sütürü almak için bir bağlama forseps kullanarak, aort arkının altındaki bir ligasyon yardımcısının gözünden geçirilen 6-0 ipek ligatür parçasını geçirin. İşlemin en zor adımı, dikişin aort arkının altına yerleştirilmesidir. Kemer altındaki tüneli oluştururken yeterli özenin gösterilmesi sonraki dikiş atılmasını kolaylaştıracaktır.

Şimdi körelmiş 27 gauge bir iğneyi aort arkının yanına yerleştirmek için düz forsepsleri kullanın ve iki bağlama forsepsini kullanarak dikişi iğnenin etrafına ve aortu sağ innominat ve sol ortak karotis arterler arasına sıkıca bağlayın. Sütür sabitlendiğinde, 0,4 milimetre çapında bir daralma ve tekrarlanabilir enine %65 ila %70 aort daralması elde etmek için iğneyi hızlı ama nazikçe çıkarın. Hemostazı doğruladıktan sonra, sternal kenarları yaymak için kullanılan 7-0 monofilament polipropilen kalıp sütürlerini çıkarın.

Basit bir 6-0 monofilament polipropilen sütürü sol ikinci interkostal boşluğun dışından içine ve sağ ikinci interkostal boşluğun içinden dışına geçirmek için bir mikrocerrahi iğne tutucu kullanın. Sternal kenarları 6-0 monofilament polipropilen sütür ile bir araya getirmek için Crile-Wood iğne tutucuyu kullanın. Ve cildi 5-0 monofilament polipropilen koşu sütürü ile Crile-Wood iğne tutucu ile tek kat halinde kapatın.

Daha sonra hayvanı, tam iyileşme olana kadar izleme ile ısınma altında yüzüstü pozisyonda kafesine geri koyun. Sol ventrikül hipertrofisi indüksiyonunun etkinliği, sahte hayvanların kalp ağırlığının vücut ağırlığına oranlarının ameliyat sonrası üç, yedi, 14 ve 28. günlerde deney hayvanlarınınkiyle karşılaştırılmasıyla doğrulanabilir. Bantlı hayvanlarda oran, ameliyat sonrası yedinci günden itibaren sahte gruplara kıyasla önemli ölçüde artar ve daralmış hayvanlarda ameliyat sonrası 28. güne kadar önemli ölçüde daha yüksek kalır.

Kalp-vücut ağırlığı oranlarında gözlenen artış, yalnızca sol ventrikül vücut ağırlığı oranındaki bir artıştan kaynaklanmaktadır, çünkü sağ ventrikül vücut ağırlığı oranı, tüm gözlem süresi boyunca transvers aort daralması ile sahte ameliyat edilen hayvanlar arasında karşılaştırılabilir kalır. Ek olarak, sol ventriküllerde kardiyak hipertrofi için pozitif bir kontrol olan beyin natriüretik peptidinin mRNA ekspresyonu, aort bantlı hayvanlarda, 14. günde kontrol sahte olarak çalıştırılan hayvanlara kıyasla önemli ölçüde daha yüksektir ve tekniğin etkinliğini daha da doğrular. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde uygulanırsa 20 dakika içinde tamamlanabilir.

Bu işlemi denerken, protokolümüzde kullanılanlara benzer bir ligasyon yardımcısı ve bağlama forsepsleri kullanmak önemlidir. Geliştirilmesinden sonra, bu teknik, aşırı basınç yüküne bağlı sol ventrikül hipertrofisinin oluşumunda rol oynayan mekanizmaları araştırmak için güvenilir ve basitleştirilmiş bir model sağlamıştır. Bu videoyu izledikten sonra, farelerde minimal invaziv transvers aort daralmasının nasıl gerçekleştirileceğini iyi anlamış olmalısınız.

Unutmayın ki aort arkının altından pasaj oluşturmak işlemin en kritik adımıdır ve bir ligasyon yardımcısı kullanmak ve forseps bağlamak arkın yaralanma riskini önemli ölçüde azaltır.