Keratin hidrolizat tavuk tüyleri ve kozmetik kendi uygulamasında hazırlanması

Bu prosedürün genel amacı, tavuk tüylerinden alkali enzimatik hidroliz yoluyla keratin hidrolizatı hazırlamak ve kozmetik bir pomad bazına keratin hidrolizatı eklemenin cilt bariyer fonksiyonunu iyileştirip iyileştirmediğini test etmektir. Bu yöntem, kozmetik formülasyonlarda kullanılabilecek keratin hidrolizatının hazırlanması için tavuk kanatlı tüylerinin değerlendirilmesi gibi mezbaha keratin yan ürünleri alanındaki soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, keratin hidrolizatının yüksek kaliteli olması ve kozmetik formülasyonlarda çok iyi bir oklüzif ve humektan olarak görev yapmasıdır.

Dört kol kenarının her bir noktasına test edilen formülasyonların uygulanma prosedürünü, bu yayının ortak yazarlarından Jana Pavlackova gösterecektir. Başlamak için, 50 gram kurutulmuş tüyü bir kesme değirmeninde 1,0 milimetre nihai inceliğe kadar öğütün. Ardından, tüyleri sıcaklık kontrollü, paslanmaz çelik 27 litrelik bir kazan kabı içerisinde yağdan arındırın.

Tüyleri, 40 ± 2 °C'ye önceden ısıtılmış su ile 1:75 ağırlık oranında karıştırın. %1,5 ila %2,0 dozunda lipolitik bir enzim ekleyin ve içeriği bir üstten karıştırıcı ile beş dakika boyunca nazikçe karıştırın. %1'lik sodyum hidroksit veya %1'lik fosforik asit çözeltisi ekleyerek karışımın pH değerini 9,0 ± 0,2'ye ayarlayın.

Bu, lipolitik enzimin maksimum aktivitesine karşılık gelen pH değeridir. Karışım, bir üstten karıştırıcı ile beş dakika boyunca karıştırıldıktan sonra, laboratuvar tipi bir pH/mV metre kullanılarak pH seviyesi kontrol edilir ve pH seviyesi yeniden ayarlanır. Ardından, karışım bir üstten karıştırıcı ile 40 ± 0,5 °C'de 24 saat boyunca nazikçe karıştırılır.

Karışımı ince bir süzgeçten süzün ve yağdan arındırılmış tüyleri taze akan soğuk su altında yıkayın. Ardından, tüyleri bir kurutma kabininde, düz bir plaka üzerinde 50 degrees celsius sıcaklıkta gece boyunca kurutun. Ertesi gün, tavuk tüyü hidrolizinin ilk aşamasını gerçekleştirin.

Tüyleri, bir ila 50 ağırlık oranında %0.3 potasyum hidroksit sulu çözeltisi ile karıştırın ve 60 ± 0.5 °C'de 24 saat boyunca bir üstten karıştırıcı ile nazikçe karıştırın. Hidrolizin ilk aşamasını tamamladıktan sonra, karışımın pH değerini %10 fosforik asit ile proteolitik enzimin maksimum aktivitesine karşılık gelen seviyeye, ki bu durumda 9.0 ± 0.2'dir, ayarlayın. Tavuk tüyü hidrolizinin ikinci aşamasını gerçekleştirin.

Proteolitik enzimi %5,0 dozunda karışıma ekleyin. Karışımı, bir üstten karıştırıcı ile 60 ± 0,5 °C'de sekiz saat boyunca yavaşça karıştırın. Ardından, enzimi inaktive etmek için karışımı aynı paslanmaz çelik 27 litrelik kazan kabında kaynama noktasına kadar ısıtın ve 10 dakika boyunca kaynatın. KH çözeltisini, hafif vakum basıncı altında bir Buchner hunisindeki düşük yoğunluklu filtre kağıdından süzerek çözünmemiş kalıntılardan ayırın.

Küçük peptitleri ve tuzları uzaklaştırmak için 400 mililitre KH çözeltisini 12K moleküler ağırlık kesimli diyaliz tüpüne dökün. Çözeltileri, plastik bir kova içerisinde, oda sıcaklığında 80 saat boyunca dört litre distile suya karşı diyalize edin. Distile suyu 18, 36 ve 60 saat sonra değiştirin.

Diyalize edilmiş KH çözeltisini, 1.000 cm²'lik plaka alanı için 500 mL olacak şekilde yapışmaz bir plaka üzerine dökün. Çözeltiyi gece boyunca 40 ± 0,5 °C'de vakum altında ince bir film tabakası haline gelene kadar kurutun. Kurutulmuş filmi kazıdıktan sonra ince bir toz oluşturacak şekilde öğütün ve bir desikatör içerisindeki kapalı bir kapta saklayın.

Ardından, pomadın baz ağırlığına uygun olarak %2, %4 ve %6 KH içeren kozmetik formülasyonlar hazırlayın. Bunun için, gerekli miktardaki KH tozunu polietilen bir kaba tartın. Daha sonra, formülasyonun toplam ağırlığının 50 gram olmasını sağlayacak miktarda pomad bazı ekleyin.

Karışımı, mekanik bir üstten karıştırıcı ile karıştırmadan önce, 134,16 g ağırlığında üç bıçaklı bir laboratuvar blenderı ile 10 dakika boyunca homojenleştirin. Hazırlanan formülasyonları beş artı veya eksi bir derece santigrat sıcaklıkta muhafaza edin ve kullanmadan önce iki saat boyunca oda sıcaklığında ısıtın. Beş adet filtre kağıdı şeridini %0,90 sodyum klorür içeren fizyolojik bir çözeltiye yerleştirin ve yaklaşık bir dakika boyunca çözeltide bekletin.

Sağ ön kolun iç kısmına iki şerit, sol ön kolun iç kısmına ise üç şerit uygulayın ve bunları yapışkan bantlarla dört saat boyunca sabitleyin. Dört saat sonra şeritleri çıkarın ve alanları kalıcı bir kalemle işaretleyin. Yağdan arındırılmış ön kol bölgelerindeki her bir noktaya, test edilen formülasyonlardan 0.1 milliliters uygulama yapmak için hazırlık yapın.

Sol ön kola, kontrol alanı olduğu için birinci bölgeye hiçbir şey eklemeyin. Ardından, sadece ikinci bölgeye pomad bazını uygulayın. Şırıngalar kullanarak bazın işaretli yüzeyin tamamına yayılmasını sağlayın.

Benzer şekilde, üçüncü bölgeye %2 KH içeren pomad bazını sürün. Son olarak, sağ kola %4 KH içeren pomad bazını ve %6 KH içeren pomad bazını uygulayın. Her bölgedeki her bir örneği her aralıkta ölçün.

Cilt hidrasyonu için cilt hidrasyon ölçer probuyla beş, cildin transepidermal su kaybı için araç ölçer probuyla 15 ve cilt pH'ı için cilt pH metre probuyla bir okuma yapın. Elde edilen okumaları metin protokolünde açıklandığı şekilde işleyin. Burada, sarı rengini gösteren keratin hidrolizatının temsili bir fotoğrafı yer almaktadır.

Keratin hidrolizatı suda kolayca çözünür, yüksek protein içeriğine sahiptir ve kozmetik sınıfı hidrolizatlar için gereken gereksinimleri karşılar. Düşük molekül ağırlıklı protein standardı, yüksek molekül ağırlıklı protein standardı ve keratin hidrolizatının elektroforetik profilleri, keratin hidrolizatının geniş bir moleküler ağırlık heterojenliğine sahip olduğunu göstermektedir. Bu teknik bir kez kavrandıktan sonra, uygun şekilde uygulandığı takdirde 150 saatte tamamlanabilir.

Bu videoyu izledikten sonra, keratin hidrolizatının nasıl hazırlanacağı ve kozmetik formülasyonlarda nasıl uygulanacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. Geliştirilmesinin ardından bu teknik, protein yan ürün işlemleri alanındaki araştırmacıların, tavuk tüylerinin kozmetik endüstrisinde kullanımını keşfetmelerinin yolunu açmıştır.