Pentylenetetrazole kaynaklı çıra fare modeli

Bu yöntem epilepsinin derin analizine yardımcı olabilir. Nöbet, beyinde nöropsikiyatrik gelişimsel bozukluklarda rol oynayabilecek histolojik değişikliklere neden olacaktır. Bu tekniğin ana avantajı, kendi kendine konuşan PTZ dozunun, kontrol edilebilir nöbetleri diğer mevcut yöntemlerden daha iyi indükleyebilmesidir.

Mililitre PTZ'de 2 miligram PTZ'yi steril yüzde 0.9 sodyum klorür içinde çözerek enjeksiyonu hazırlamaya başlayın. Hayvanı tartın, ardından 3 dakikalık bir alışma süresi boyunca bir gözlem odasına koyun. Daha sonra, PTZ'yi 27 gauge iğneye bağlı 1 mililitrelik bir şırınga ile interperitoneal olarak hayvanın karnının sol veya sağ çeyreğine enjekte edin.

Son olarak, PTZ enjeksiyonundan sonra hayvanı anormal davranış açısından gözlemleyin. Yabancı fare olmak için denek farelerle aynı cinsiyetten olan en az iki ila altı aylık 129 SV fare edinin. Her yabancı fare ayrı tutulmalıdır.

Her eğitim seansı için, fareyi 15 dakika boyunca alışması için kafeste bırakın. Yüzeyi %70 etanol ile silerek her iki kafesteki tüm aparatı temizleyiniz. Ardından, boş kafesleri üç odacıklı aparatın iki yan bölmesine yerleştirin ve bölmeler arasındaki kapıları açın.

Denek fareyi alıştırmak için, denek fareyi orta bölmeye yerleştirin ve fare her iki kafesi de inceleyene ve ayrıca beş dakika daha inceleyene kadar farenin cihaz boyunca serbestçe hareket etmesine izin verin. Hayvan orta odaya girdikten sonra, kapıları kapatın ve farenin orta odada beş dakika boyunca serbestçe hareket etmesine izin verin. Bu süre zarfında, 129 SV fareden birini kafese alışması için bir kafese koyun.

Söz konusu farenin alışma döneminden hemen sonra, Stranger One kafesi olarak adlandırılan 129 SV farenin bulunduğu kafesi yan odacıklardan birine, Nesne kafesi olarak adlandırılan boş kafesi ise diğer yan bölmeye yerleştirin. Kapıyı açın ve söz konusu farenin davranışını izleyin. Konu faresinin 10 dakika boyunca serbestçe hareket etmesine izin verin ve dört davranış parametresi kaydedin.

Birincisi, her odada, Yabancı Bir odada, Nesne odasında ve merkez odada geçirilen zaman. İkincisi, her bir kafesi, Stranger One kafesini ve Object kafesini araştırmak için harcanan zaman. Üç numara, her odaya giriş sayısı ve dört numara, kat edilen toplam mesafe.

Fare orta odaya girdikten sonra kapıları kapatın. Kafesleri sildikten sonra, Stranger Two kafesi olarak adlandırılan kafeslerden birine başka bir 129 SV faresi yerleştirerek sosyal yenilik analizine başlayın ve Stranger Two kafesini odalardan birine yerleştirin. Stranger One faresini Stranger One kafesi olarak adlandırılan diğer kafese yerleştirin ve Stranger One kafesini diğer odaya yerleştirin.

Son olarak, kapıyı açın ve söz konusu farenin davranışını izleyin. Denek farenin 10 dakika boyunca serbestçe hareket etmesine izin verin ve sosyallik analizi için açıklanan aynı davranışsal parametreleri ölçün. Bir fareyi belirli koşullara sahip bir koşullandırma aparatına yerleştirerek başlayın.

Örneğin, şeffaf pleksiglas duvarlı, metal ızgaralı zeminli, etanol kokulu, 100 lux parlaklığa ve 65 desibel arka plan beyaz gürültüsüne sahip kare bir aparat. Fareyi, beş dakika boyunca üç kez iki saniye boyunca 0,1 miliamperlik bir elektrik şokunun sözde rastgele zamanlamasıyla ayak şokuna maruz bırakın. Ardından, koşullandırmadan sonra fareyi ev kafesine geri koyun.

Koşullandırmadan sonraki gün, fareyi şok durumuyla aynı cihaza yerleştirerek ve beş dakika boyunca donma süresini ölçerek bir hafıza değerlendirmesi yapın. Aynı günün ilerleyen saatlerinde, fareyi yeni bir aparata yerleştirin ve beş dakikalık bir değerlendirme sırasında donma süresini ölçün. Son olarak, aynı durum ile yeni durum arasındaki donma süresini karşılaştırın.

Sonuçlar, PTZ enjeksiyonları ile nöbet skorunun kademeli olarak arttığını, salin enjeksiyonları ile herhangi bir nöbet veya anormal davranış uyandırılmadığını gösterdi. Ayrıca, tekrarlayan nöbet, anormal aksonal dal oluşumunu veya yosunlu lif filizlenmesini ve hipokampustaki granül hücrelerinin anormal göçünü teşvik etti. PTZ ile tedavi edilen fareler normal sosyallik gösterdi.

Fareler, Yabancı Bir odasında, Nesne odasından daha fazla zaman harcadılar ve Yabancı Bir kafesini, Nesne kafesini araştırdıklarından daha fazla araştırdılar. PTZ ile tedavi edilen fareler, bozulmuş sosyal hafızanın göstergesi olan anormal sosyal yenilik gösterdi. PTZ ile tedavi edilen fareler ayrıca bağlamsal korku testinde hafıza bozukluğu gösterdi.

Bu prosedürü takiben, epileptik nöbetten etkilenen bozulmuş hafıza yeteneği ile ilgili ek soruları yanıtlamak için Morris su labirenti veya diğer hafıza testleri gibi diğer yöntemler gerçekleştirilebilir. Bu teknik, geliştirildikten sonra epilepsi alanındaki araştırmacıların nöbet ile indüklenen nöropsikiyatrik gelişimsel bozuklukları model hayvanlar kullanarak bir mekanizma olarak araştırmalarının önünü açmaktadır.