Vivo Fare uyluk için bir MRI uyumlu Osteosentez aygıtı kullanma farelerde kemik iyileşme sırasında kırık Kallus gelişimi değerlendirme

Bu tekniğin genel amacı, kemik iyileşmesi sırasında murin kırığı kallus gelişiminin uzunlamasına değerlendirilmesi için manyetik rezonans görüntüleme veya MRG kullanmaktır. Bu yöntem, farklı fare modellerinde kırık nasırlarının zaman içinde nasıl geliştiği gibi kemik iyileşme alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin başlıca avantajları, kırık kallus gelişiminin gerçek zamanlı olarak in vivo olarak izlenebilmesi ve uygulanan eksternal fiksatörün oldukça standardize edilmiş bir kırık iyileşme modeli sağlamasıdır.

MRI prosedürünü göstermek, Küçük Hayvan Görüntüleme Çekirdeği tesisinden bir teknisyen olan Anne Subgang olacak. Prosedüre başlamadan önce, ayak parmağının sıkıştırılmasına yanıt verilmeyerek uygun sedasyon seviyesini onaylayın ve fareye iki kez 250 mikrolitre% 0.9 sodyum klorür içeren bir sıvı deposunda tek bir doz antibiyotik ile deri altına enjekte edin. Hayvanın gözlerine merhem sürün ve fareyi 37 santigrat derecelik bir ısıtma yastığına yerleştirin.

Sağ arka bacaktan kürkü çıkarın ve cerrahi bölgeyi alkol bazlı bir dezenfektanla ovalayın. Cerrahi alanı açıkta bırakarak hayvanın üzerine steril bir örtü yerleştirin ve sağ arka pençeyi steril bir eldivenden küçük bir parça ile örtün. Ameliyat bölgesini dezenfektan ile üç kez daha ovalayın.

Daha sonra, otoklavla sterilize edilmiş bir neşter kullanarak, sağ uyluk kemiğinin iç tarafı boyunca yaklaşık bir santimetre uzunlamasına bir cilt kesisi yapın ve pazı femoris ve vastus lateralis kaslarını künt bir şekilde ayırmak için mikro makas ve forseps kullanın. Siyatik sinirin korunmasına dikkat ederek kemiğin anterolateral kısmına serbest erişim sağlamak için femur trokanterindeki tendon girişini kesin ve dış fiksatörü femura paralel olarak konumlandırın. 0,45 milimetrelik bir matkap ucu kullanarak, kortekste manuel olarak delikler açın.

Ve en proksimal ve distal uçlardan başlayarak, seramik montaj pimlerini deliklere yerleştirin. Tüm pimler yerleştirildiğinde, kemiği küçük bir hacimde steril salin ile nemlendirin ve iki iç pim arasındaki delik kemiğinden 0,4 milimetrelik bir osteotomi oluşturmak için 0,4 milimetrelik bir Gigli tel testere kullanın. İki kırık korteks arasındaki kemik parçacıklarını çıkarmak için osteotomi boşluğunu iki mililitre steril salin ile dikkatlice yıkayın ve kasları uyarlamak için sürekli emilebilir bir sütür kullanın, ardından cildin kesintili emilemeyen dikişlerle adaptasyonunu izleyin.

Ardından, cerrahi bölgeyi dezenfektan ile temizleyin ve fareyi tamamen iyileşene kadar izleme ile kafesine geri koyun. Ameliyattan üç gün kadar kısa bir süre sonra, eksternal fiksatörü dikkatlice özel yapım bir montaj cihazına yerleştirin ve anestezi uygulanmış fareyi MRI cihazına girmek için sıcaklık kontrollü bir kızağa yerleştirin. Harici fiksatörü dört elemanlı kafa bobini üzerindeki montaj cihazına sağlam bir şekilde takın ve kırığa proton yoğunluklu yağ bastırılmış çok dilimli turbo spin yankı dizisi uygulamak için 11.7 tesla'da çalışan özel bir yüksek alanlı küçük hayvan MRI sistemi kullanın.

Tüm görüntüler elde edildiğinde, verileri uygun görüntü analiz yazılımında açın ve voksel boyutunu 0,05 x 0,05 x 0,35 milimetre küp olarak girin. Kırık kallustaki farklı dokuları yoğunluklarına göre yarı otomatik eşikleme ile segmentlere ayırmak için önce yeni etiketi düzenle alanına tıklayın ve Malzeme ekle'ye tıklayın. Malzemeyi kallus olarak yeniden adlandırın ve periosteumdan gelen hipointens sinyale dayalı olarak kallus bölgesini çevre dokulardan ayırt etmek için kement aracını kullanın.

Malzemeye ekle'ye tıklayın, ardından Malzeme ekle'ye tıklayın ve malzemeyi kıkırdak olarak yeniden adlandırın. Eşik aracını kullanarak kıkırdağı segmentlere ayırın ve nasırdan yalnızca mevcut materyali seçin. Ardından, kıkırdak ve Malzemeye ekle'ye tıklayın.

Tüm dokular bölümlere ayrıldığında, Yüzey oluştur'a tıklayın, düzleştirme türü için Yok'u uygulayın ve doku segmentasyon verilerine dayalı olarak kırık femurların 3B rekonstrüksiyonlarını oluşturmak için Yüzey Görünümü'ne tıklayın. Başarılı bir cerrahi prosedür, femur şaftının ortasındaki dört pimi de 0,3 ila 0,5 milimetre arasında bir osteotomi boşluğu ile gösteren kırığın MRI taraması ile doğrulanabilir. Ameliyattan sonraki 10. günde, kırık iyileşme süreci sırasında yapılan uzunlamasına taramaların değerlendirilmesi, kırığın ortasındaki kıkırdaklı dokuyu, kallusu ve kırığın çevresindeki kemik dokusunu ortaya çıkarır.

Hem kıkırdak hem de kemik dokuları 14. güne kadar artar. Kıkırdak dokusu daha sonra 21. güne kadar azalır ve bu noktada kemik köprülenmesi gözlenebilir. Az önce gösterildiği gibi kırık nasırdaki farklı dokuların segmentasyonundan sonra, olgun korteks gri renkte, seramik pimler sarı renkte, kallus yumuşak dokusu yeşil renkte, kıkırdak dokusu kırmızı renkte ve kallus kemik dokusu mor renkte görünecek şekilde tam bir 3D femur taraması oluşturulabilir.

Bu videoyu izledikten sonra, femur osteotomisini oluşturmak için fare uyluk kemiğine eksternal bir fiksatörün nasıl uygulanacağını ve standart bir tarama pozisyonu sağlamak için bir MRI cihazına bir farenin nasıl yerleştirileceğini iyi anlamış olmalısınız. Bir kez ustalaştıktan sonra, eksternal fiksatör uygulaması ve osteotomi tekniği, uygun şekilde yapılırsa 20 ila 30 dakika içinde tamamlanabilir.