Name: Inferior Vena kava stenozu: Derin Ven Trombozu fare modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 37 s
Description: Keşfedin, farelerde inferior vena kava stenozu oluşturarak derin ven trombozu mekanizmalarını incelemeyi. Bu cerrahi yöntem, kan akışı bozukluğunu taklit ederek insanlardaki venöz tromboz süreçlerini araştırmaya olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser İngiliz kalp Vakfı (PG/13/60/30406) ve Birmingham Üniversitesi tarafından desteklenmiştir.

Tüm hayvan yordamları hayvan refah etik inceleme vücuda ve İngiltere'de Home Office (İngiltere, proje lisans 40/3745) tarafından kabul edildi. Fareler C57BL/6 arka plan, 8-12 hafta yaşlı, her iki cinsiyette 19-25 g vücut ağırlığını üzerinde kullanılır.
1. hayvan anestezi
<ol>
	<li>Bir fare bir indüksiyon odasına yerleştirin ve anestezi %5 isoflurane % 100 oksijen ile karışımı tarafından ikna etmek. Bir Debi 0,5 L/dk. bekleyin fare tamamen hareket etmeyi durdurana kadar kullanım ve nefes almak, sıklığını nadir olur.</li>
	<li>Fare odasından kaldırın ve karın bir elektrik kesme makinesi ile tıraş. Karın boşluğu kirlenmesini önlemek için mümkün olduğunca iyice karından tüylerden.</li>
	<li>Sırtüstü pozisyonda fareyi getirin ve fare burun anestezi sisteme bağlı bir koni içine yerleştirin. (Tam yüzde biraz hayvan hayvan farklı olabilir) % 2-3 isoflurane yüzde azaltın. Hayvan her zamanki ama kaçınarak soluyarak daha düşük olmak onun solunum ile uyuyor emin olun. Nefes nefese ortaya çıkarsa, isoflurane yüzde 0.5 oranında azaltmak.
	<ol>
		<li>Uygun anesthetization onaylamak ve olumsuz olursa ameliyat başlatmak için pedal refleks denetleyin. Veteriner merhem göze kuruluğu önlemek için geçerlidir.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Anti-bakteri yok edici bir çözüm uygulamak (%1 Hibitane) fare karın ve temizleme işlemi steril bir pamuk kullanarak alan bud bir şekilde (örneğin, içeride bir dairesel biçimde dışarı) cerrahi sitesinin potansiyel yeniden bulaşma hariç. 3 kez tekrarlayın.</li>
</ol>
2. uygulama IVC stenoz ve fare kurtarma
Not: Tüm aletleri de malzeme (pamuk tomurcukları, gazlı bez, serum vb) cerrahi alan temas geliyor steril olmalıdır. Işleç ameliyat öncesi fırçalayın ve işlem sırasında steril eldiven ve önlük giymek gerekir. Mikroskop kolları steril bir folyo alınmış.
<ol>
	<li>Fareler bir anti-ağrı tedavisi ameliyat öncesi ve sırasında bütün deneysel süre ver. Örneğin, buprenorfin 0.1 mg/kg subkutan 30 dk önce cerrahi ve ardından 12 hayvan euthanized kadar saatte kullanın. Bu yöntemde tromboz için steril iltihap benzer şekilde geliştikçe, anti-inflamatuar ilaçlar bir premedication kullanmaktan kaçının.</li>
	<li>Fare bir steril örtü ile kapak ve cerrahi sitesi ortaya çıkarmak için örtüsü içinde bir delik açın. Makas kullanarak, bir kesi karın orta hat, göğüs kemiğinin aşağı 1,5 cm boyunca olun. Pamuk tomurcukları kullanarak fare sol tarafına bağırsak exteriorize ve onları kurumasını önlemek için sıcak (37 ° C) Serum batırılmış steril gazlı bez ile kaplayın.</li>
	<li>IVC ve (0, 1 veya olabilir 2-in onları) yan dalları IVC sol renal ven ile füzyonu sitesinden Kaudal yönünde tanımlar. Tüm görünür yan dalları ile 7-0 etkisiz Prolene sütür IVC mümkün olduğunca yakın ligate.
	<ol>
		<li>Yan dalları Forseps ile doğrudan daha ziyade bir elinde Forseps ile onları çevreleyen yağ dokusu dayanabiliyor çek ve öte yandan Forseps ile şube altında bir tünel yapmak değil tutmak deneyin. Arka dalları yakın değil.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Çevre dokular Forseps ile tutarak, IVC yukarı ve gerginlik IVC ve aort tam olarak IVC ve sol renal ven arasında açıyla arasında küçük alanda üreten sola çekin. Aort IVC bile aşağıda 2-3 mm (Kaudal yönde) ayırmak neredeyse imkansız olduğunu dikkate almak.</li>
	<li>Sağ olun aorta ve IVC arasında bir delik ipuçlarında Forseps ile çeşitlenen hareketleri kullanarak. Unutmayın daha fazla hareketleri yaptı, gemi zarar yüksek şans. İdeal olarak, 3-5 için hareketleri sayısını en aza indirmek deneyin.</li>
	<li>7-0 etkisiz Prolene sütür 2 cm uzun bir parçası hazırlamak. Fare peritoneal kavite çevresinde IVC için işleç'ın sol tarafında yerleştirin.</li>
	<li>IVC kaldırın ve sol tekrar çekin. İpuçları IVC diğer tarafında görünecek şekilde değil forseps ipuçları arasında aorta ve IVC deliğe yerleştirin. Dikiş ve geri çekme delikten (şekil 3A) alın.</li>
	<li>Dikişi ile geçici bir düğüm yapın ama yakın değil. Bir kanca düğüm bükülmüş 30 G iğne ("ayırıcı") yerleştirin ve şimdi (şekil 3B) kapatın.</li>
	<li>Rondela (şekil 3C) kaldırın.</li>
	<li>Bağırsakların periton boşluğuna bir pamuk ile başa bud ve onları aynı derecede içinde dağıtmak döndürür.</li>
	<li>Karın zarını sürekli döngüler kullanarak 6-0 vicryl sütür ile kapatın. İlk ve son döngüler bir düğüm kapatın.</li>
	<li>Yakın deri metal zımba kullanarak.</li>
	<li>Fare ile 0.5 mL sıcak (37 ° C) enjekte subkutan organizmanın sıvı dengeyi yeniden glikoz salin.</li>
	<li>Bireysel bir kafes içinde bir sıcak (25 ° C) odası veya Oda fare yerleştirin ve yemek koymak ve kafes içinde su jel. Fare (genellikle, 1 s) tamamen iyileşti kadar gözlemlemek.</li>
</ol>

<ol><li>Heit, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+venous+thromboembolism+in+the+community%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of venous thromboembolism in the community.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28 (3), 370-372 (2008).</li>
<li>Huang, W., Goldberg, R. J., Anderson, F. A., Kiefe, C. I., Spencer, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secular+trends+in+occurrence+of+acute+venous+thromboembolism%3A+the+Worcester+VTE+study+%281985-2009%29%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Med%22%5BJournal%5D)">Secular trends in occurrence of acute venous thromboembolism: the Worcester VTE study (1985-2009).</a> Am J Med. 127 (9), 829-839 (2014).</li>
<li>House of Commons Health Care Committee. <a target="_blank" href="https://publications.parliament.uk/pa/cm200405/cmselect/cmhealth/99/99.pdf">The Prevention of Venous Thromboembolism in Hospitalised patients.</a> The House of Commons. , (2005).</li>
<li>Kuipers, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Travel+and+venous+thrombosis%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Travel and venous thrombosis: a systematic review.</a> J Intern Med. 262 (6), 615-634 (2007).</li>
<li>Lopez, J. A., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of venous thrombosis.</a> Thromb Res. 123, Suppl 4 30-34 (2009).</li>
<li>Brill, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((von+Willebrand+factor-mediated+platelet+adhesion+is+critical+for+deep+vein+thrombosis+in+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">von Willebrand factor-mediated platelet adhesion is critical for deep vein thrombosis in mouse models.</a> Blood. 117 (4), 1400-1407 (2011).</li>
<li>Payne, H., Ponomaryov, T., Watson, S. P., Brill, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+with+a+deficiency+in+CLEC-2+are+protected+against+deep+vein+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Mice with a deficiency in CLEC-2 are protected against deep vein thrombosis.</a> Blood. 129 (14), 2013-2020 (2017).</li>
<li>Brill, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+extracellular+traps+promote+deep+vein+thrombosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Neutrophil extracellular traps promote deep vein thrombosis in mice.</a> J Thromb Haemost. 10 (1), 136-144 (2012).</li>
<li>von Bruhl, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monocytes%2C+neutrophils%2C+and+platelets+cooperate+to+initiate+and+propagate+venous+thrombosis+in+mice+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Monocytes, neutrophils, and platelets cooperate to initiate and propagate venous thrombosis in mice in vivo.</a> J Exp Med. 209 (4), 819-835 (2012).</li>
<li>Sevitt, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+and+growth+of+valve-pocket+thrombi+in+femoral+veins%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Pathol%22%5BJournal%5D)">The structure and growth of valve-pocket thrombi in femoral veins.</a> J Clin Pathol. 27 (7), 517-528 (1974).</li>
<li>Witsch, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+hollow+and+perforated+flexible+wire+allows+the+safe+and+effective+local+application+of+thrombolytic+therapy+in+a+mouse+model+of+deep+vein+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Thrombolysis%22%5BJournal%5D)">A novel hollow and perforated flexible wire allows the safe and effective local application of thrombolytic therapy in a mouse model of deep vein thrombosis.</a> J Thromb Thrombolysis. 37 (4), 450-454 (2014).</li>
<li>Shaya, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+effect+of+dabigatran+and+dalteparin+on+thrombus+stability+in+a+murine+model+of+venous+thromboembolism%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Comparison of the effect of dabigatran and dalteparin on thrombus stability in a murine model of venous thromboembolism.</a> J Thromb Haemost. 14 (1), 143-152 (2016).</li>
<li>Ni, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistence+of+platelet+thrombus+formation+in+arterioles+of+mice+lacking+both+von+Willebrand+factor+and+fibrinogen%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Persistence of platelet thrombus formation in arterioles of mice lacking both von Willebrand factor and fibrinogen.</a> J Clin Invest. 106 (3), 385-392 (2000).</li>
<li>Wrobleski, S. K., Farris, D. M., Diaz, J. A., Myers, D. D., Wakefield, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+complete+stasis+model+of+inferior+vena+cava+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Mouse complete stasis model of inferior vena cava thrombosis.</a> J Vis Exp. (52), (2011).</li>
<li>Diaz, J. A., Farris, D. M., Wrobleski, S. K., Myers, D. D., Wakefield, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inferior+vena+cava+branch+variations+in+C57BL%2F6+mice+have+an+impact+on+thrombus+size+in+an+IVC+ligation+%28stasis%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Inferior vena cava branch variations in C57BL/6 mice have an impact on thrombus size in an IVC ligation (stasis) model.</a> J Thromb Haemost. 13 (4), 660-664 (2015).</li>
<li>Siefert, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+venous+thrombus+resolution+in+plasminogen+activator+inhibitor+type-2+deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Enhanced venous thrombus resolution in plasminogen activator inhibitor type-2 deficient mice.</a> J Thromb Haemost. 12 (10), 1706-1716 (2014).</li>
<li>Schulz, C., Engelmann, B., Massberg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crossroads+of+coagulation+and+innate+immunity%3A+the+case+of+deep+vein+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Crossroads of coagulation and innate immunity: the case of deep vein thrombosis.</a> J Thromb Haemost. 11, Suppl 1 233-241 (2013).</li>
<li>Day, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrovascular+thrombosis+is+driven+by+tissue+factor+derived+primarily+from+the+blood+vessel+wall%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Macrovascular thrombosis is driven by tissue factor derived primarily from the blood vessel wall.</a> Blood. 105 (1), 192-198 (2005).</li>
<li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+fibrinolytic+system+in+ApoE+gene-deleted+mice+with+hyperlipidemia+augments+deep+vein+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Impaired fibrinolytic system in ApoE gene-deleted mice with hyperlipidemia augments deep vein thrombosis.</a> J Vasc Surg. 55 (3), 815-822 (2012).</li>
<li>Zhou, J., May, L., Liao, P., Gross, P. L., Weitz, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inferior+vena+cava+ligation+rapidly+induces+tissue+factor+expression+and+venous+thrombosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Inferior vena cava ligation rapidly induces tissue factor expression and venous thrombosis in rats.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 29 (6), 863-869 (2009).</li>
<li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrolytic+inferior+vena+cava+model+%28EIM%29+of+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Electrolytic inferior vena cava model (EIM) of venous thrombosis.</a> J Vis Exp. (53), e2737(2011).</li>
<li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+electrolytic+inferior+vena+cava+model+%28EIM%29+to+study+thrombogenesis+and+thrombus+resolution+with+continuous+blood+flow+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">The electrolytic inferior vena cava model (EIM) to study thrombogenesis and thrombus resolution with continuous blood flow in the mouse.</a> Thromb Haemost. 109 (6), 1158-1169 (2013).</li>
<li>Brill, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extrahepatic+high-density+lipoprotein+receptor+SR-BI+and+apoA-I+protect+against+deep+vein+thrombosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Extrahepatic high-density lipoprotein receptor SR-BI and apoA-I protect against deep vein thrombosis in mice.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 32 (8), 1841-1847 (2012).</li>
<li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+review+of+mouse+models+of+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Critical review of mouse models of venous thrombosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 32 (3), 556-562 (2012).</li>
<li>Brandt, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+vein+thrombus+formation+induced+by+flow+reduction+in+mice+is+determined+by+venous+side+branches%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Hemorheol+Microcirc%22%5BJournal%5D)">Deep vein thrombus formation induced by flow reduction in mice is determined by venous side branches.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 56 (2), 145-152 (2014).</li>
<li>Geddings, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strengths+and+weaknesses+of+a+new+mouse+model+of+thrombosis+induced+by+inferior+vena+cava+stenosis%3A+communication+from+the+SSC+of+the+ISTH%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Strengths and weaknesses of a new mouse model of thrombosis induced by inferior vena cava stenosis: communication from the SSC of the ISTH.</a> J Thromb Haemost. 12 (4), 571-573 (2014).</li>
<li>Alvarado, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+mice+have+increased+thrombotic+potential%3A+sex+differences+in+a+mouse+model+of+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Male mice have increased thrombotic potential: sex differences in a mouse model of venous thrombosis.</a> Thromb Res. 127 (5), 478-486 (2011).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Burada, bir protokol kan akışı bozulma, DVT için önemli bir tetikleyici faktör taklit eden IVC Darlığının sunulur. IVC stenoz olu_umu 65-%100 48 saat içinde C57BL/6 farelerin ve 25-%50 2-6 h6,8,23 içinde farelerin gelişimine neden olmaktadır (Brill A, yayınlanmamış veriler, 2016). Bir büyük yönteminin kısa vadeli (6 h) ve uzun vadeli (48 saat) IVC stenoz sonra gözlenen trombüsü boyutu24 (şekil 4), değişkenlik kısıtlamasıdır. Böyle değişkenlik nedenlerle (aynı spacer gibi koşullar göz önüne alındığında bu anestezi vb kullanılır) karanlık kalır, ancak bir o anatomik spekülasyon (örneğin, genişlik IVC, numarası ve yan ve arka konumunu fareler arasında farklılıklar dalları) altında yatan bu olay. Değişkenlik trombüsü boyutunda ana sonucu tromboz yaygınlık (fareler bir trombüsü ile yüzde) yapar. Tromboz yaygınlık acil durum tablo ve Fisher'ın tam testi kullanılarak karşılaştırılabilir. Enjeksiyon podoplanin inhibe antikorların 7gözlenmiştir sonra aynı trombozu yaygınlık ile azaltılmış trombüsü boyutunu ayarlarken bir deney bir istisnaydı.
Bu yöntem özellikle yararlı olduğunda Venöz tromboz başlatma okudu. Damar duvarındaki hücrelerin, eninde sonunda tromboz için önde gelen işe alım gibi erken olayları soruşturma için izin verir. İlaçların Pro veya anti thrombotic etkileri trombozu yaygınlık birincil bir okuma olmak bu model kullanılarak değerlendirilebilir. Prothrombotic fenotip beklenen 6 h stenoz kullanılabilir stenoz 48 saat için bir anti-trombotik fenotip ortaya çıkarmak için geçerlidir. Histolojik analiz trombüsü ve çevresindeki IVC duvar da gerçekleştirilebilir.
Bakmaksızın olup yan dalları veya patent yaptı soru açık kalır. Bir grup ligasyonu yan dalı trombüsü boyutu artmaz ve yan dal IVC ligasyonu sitesine 1.5 mm daha yakın konumunu önemli ölçüde trombüsü geliştirme25bozar göstermiştir. Yan dallar kapatılması endotel hasarı onları ikna etmek ve ayrıca cerrahi26zaman artırmak. Bizim ellerde yan dal kapatma eksikliği önemli ölçüde tromboz yaygınlık (aşağı 10-%30 48 h stenoz sonra; azalır Brill, yayınlanmamış) ve bu nedenle tüm görünür yan dalları ligate.
İdeal olarak, fare, aynı arka plan üzerinde bile ama farklı kaynaklardan biraz farklı trombozu yaygınlık olabilir gibi littermate denetimleri kullanılmalıdır. DVT kendisi herhangi bir parametre üzerinde etkisi (örneğin, biyokimyasal) okudu, sham işletilen hayvan kullanılmalıdır. Sham çalışan fareler aynı yordamı tabi ama IVC etrafında bağ gevşek kapalı ve orada stenoz üretmeden yaptı.
Bu iletişim kuralı en sık hata (kritik adım) aorta ve genellikle kanama sonuçları IVC değil tam olarak, ama biraz daha düşük, gemiler arasındaki açı ayırmak için bir çabadır. Büyük bir kanama meydana geldiğinde, fare iyi kurtarma olası hale gelir ve bu denemeyi durdurup hayvan ötenazi önerilir. Normalde, fareler de kurtarmak, kafesin içinde hareket ve önemli ölçüde ağırlık kaybetmek değil. Biz kadın ve erkek için 20 g yukarıda fareler kullanmanızı öneririz ve hayvanlar (özellikle erkekler) bireysel kafeslerde ameliyattan sonra mücadele ve yaralanma önlemek için deneme sonuna kadar tutmak. Bu başka bir (elektrolitik) DVT modelinde erkek fareler kadın27daha büyük olu_umu üretmek bildirilmiştir. Bizim veri analizi önemli trombozu yaygınlık erkek ve dişi fareler (Brill, yayınlanmamış) arasındaki farkı ortaya değil. Bu nedenle, araştırmacılar IVC stenoz modelini kullanarak her iki cinsiyette fareler üzerinde deneyler yapmak için teşvik edilir.
Dikiş ve/veya zımba unravelling değil karar verdi özellikle uzun deneyler (bir hafta ve daha uzun). Böylece, fareler günde en az iki kez dikiş bütünlüğü için özel olarak denetlenmesi ve özel bir dikkat kafes yatak üzerinde kan lekesi görünümünü verilmesi gerekir.
Bu başka bir hayvan model gibi IVC stenoz sınırlamaları insanlar içine çeviri açısından sahip olması gerekmektedir. Örneğin, insan DVT Venöz vanalar içinde geliştirir, ancak fare IVCs Subaplar, yok. Ayrıca, insanlar bir önemli mekanizma hızlanan kan akımını damarları olmak kas pompası ile dikey spinal yönlendirme sahip. Buna ek olarak, fareler hiçbir rol yatay spinal yönlendirmeyle kan kalbe dönüş destekleyen kas pompa var. Bu sınırlamalar ne zaman fare veri insan hastalık için çeviri düşünülmelidir.

Derin Ven Trombozu (DVT) olduğunu olu_umu derin damarlarınızdaki gelişimi genellikle (ama sadece) bacaklarda. İçinde bağlaç ile pulmoner emboli (PE; birlikte Venöz tromboemboli, VTE olarak belirlenmiş) yaklaşık 900.000 Amerikalılar her yıl geliştirir ve ciddi sağlık sorunu ve ekonomik sorun1,2temsil eder. PE, DVT, bir komplikasyonu bir trombüsü başlangıç konumundan müstakil alır ve solunum yetmezliği ve ölüme neden olabilir akciğerlere ulaşır oluşur. Death toll gelen VTE mortalite AIDS, meme kanseri ve trafik kazaları, kombine3aşıyor.
DVT yanı sıra neden olan en büyük etken nedenleri, bilinen kanser veya travma gibi hareket eden 4,5olmaması. Bu ameliyatı (özellikle ortopedik), felç, uzun menzilli uçuşlar ya da başka nedenlerle neden olabilir. Damarlarında kan akımı kas pompa üzerinde bağlıdır ve bu nedenle uzuv immobilizasyon durgun kan sonuçlarında Venöz Subaplar, tromboz için bu da neden-akış. Böyle kan akışı bozulma6,7özetlemek için burada açıklanan yöntemi amacı budur. İnferior vena kava (IVC) kısmi akış kısıtlama oluşturulan insan Venöz vanalar ve sonuçları bir trombüsü oluşumunda insan olu_umu6' yapısında benzer koşullar taklit eder. Bir trombüsü büyük kısmı kırmızı ve kırmızı kan hücreleri, fibrin ve trombosit birleşmesiyle oluşur. Olu_umu küçük bir "beyaz kısmı"insan Venöz olu_umu açıklanan satırları Zahn"benzer (şekil 1), trombosit zenginleştirilmiş" si. Trombüsü her iki kesiminde de gelecekteki trombüsü6,9sitesinde işe ilk hücreleri arasında olan nötrofil8, içerir. Beyaz kısmı nötrofil ağları8yoksun olmak gibi görünüyor, ancak kırmızı bölümünde nötrofil nötrofil hücre dışı tuzakları (ağlar), sınırdışı. Aynı şekilde insan DVT için trombozu farelerde yüksek plazma D-dimer düzeyleri (Şekil 2) tarafından eşlik ediyor. Hastalarda, DVT profilaksi için kullanılan düşük molekül ağırlıklı heparin (enoxaparin), ayrıca tromboz farelerde engeller. Bu yöntemin önemli bir avantajı endotel denudation9, hangi insan DVT10özelliğidir bulunmamasıdır. Bu özellik IVC stenoz DVT daha klinik bir model daha, örneğin, tromboz indüksiyon sağlar ferrik klorid tarafından hangi ikna endotel denudation ve hangi olu_umu oluşur ağırlıklı olarak trombosit11, , 12,13. Tam koma halinde IVC modeli birkaç takım14,15,16tarafından tercih edilmektedir. Artık akış gemi içinde korunur stenoz, aksine Staz uygulanması tamamen akışı durur ve böylece trombozu sitesi sistemik yönetilen maddelere erişilebilirliğini sınırlar. Ayrıca, görünüşe göre stenoz ve Staz tarafından uyarılan trombozuna yatan mekanizmaları farklıdır: stenoz sonuçları yerel iltihap gelişiminde (endotel, serbest bırakmak-in Weibel Palade vücut içerik, işe alım bağışıklık hücrelerinin aktivasyonu ve trombosit gemi duvara) durağanlık yerine trombozu ikna etmek gibi görünüyor, ancak "immunothrombosis"6,9,17, neden bağlı olarak, özellikle, doku faktörü ve diğer koagülasyon ve Fibrinolitik ile ilgili mekanizmalar18,19,20. Böylece, her ne kadar onların mekanizmalarını kesinlikle çakışabilir stenoz ve Staz modelleri Venöz trombüsü geliştirme, biraz farklı yönlerini yansıtır. Elektrolitik IVC modeli (EIM) DVT21,22 trombüsü yalnızca kısmen gemi duvar occluding neden olmaktadır. Bu nedenle, farklı ilaçların sistemik yönetim trombüsü büyüme üzerindeki etkilerini test etmek için uygundur. Bu model, ancak, bu mekanizma patofizyolojik alaka en az tartışılır hale elektrik akımı tarafından IVC duvar bütünlüğü (iğne ekleme) bozulma ve tromboz indüksiyon varsayar.

<table><tbody><tr><td>C57BL/6 fareler</td><td>Charles River</td><td></td><td>8 - 10 haftalık, cinsiyetleri</td></tr><tr><td>Makas</td><td>WPI</td><td>15922</td><td></td></tr><tr><td>Makas</td><td>WPI</td><td>14003</td><td></td></tr><tr><td>Dumont 5/45 forseps</td><td>FST</td><td>11251-35</td><td></td></tr><tr><td>7-0 Prolene sütür</td><td>Ethicon</td><td>W8725</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Vicryl sütür</td><td>Ethicon</td><td>W9981</td><td></td></tr><tr><td>Pamuk tomurcukları</td><td>Spar</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Millswabs steril ve nbsp;</td><td>Millpledge veteriner hekimi&nbsp;</td><td>611950</td><td></td></tr><tr><td>Perdeler</td><td>Kruuse</td><td>141765</td><td></td></tr><tr><td>Glikoz Salin-Aqupharm3</td><td>Hayvan Bakımı</td><td>XVD589</td><td></td></tr><tr><td>Clear H20 HydroGel %98 steril su&nbsp; </td><td>Clearh2o</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td>Ulusal Veteriner Malzemeleri</td><td></td><td></td></tr><tr><td>İzofluran buharlaştırıcı</td><td>Genel Anestezik Hizmetler</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IsoFlo %100 W/W inhalasyon buharı, sıvı</td><td>Ulusal Veteriner Malzemeleri</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sterilizatörü Steri350</td><td>Inotech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop Olympus SZX10</td><td>Olympus</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

inferior vena kava stenozu: derin ven trombozu fare modeli

Stenosis of the Inferior Vena Cava: A Murine Model of Deep Vein Thrombosis

Derin Ven Trombozu (DVT) ve onun yıkıcı komplikasyon, pulmoner emboli, yüksek ölüm oranı ciddi sağlık problem. Venlerin trombüsü oluşumunda mekanizmalarının anlaşılması güç kalır. Hareketlilik (örneğin, cerrahi veya uzun menzilli uçuşlar sonra) eksikliği DVT için önde gelen ana faktörlerden biridir. Patofizyolojik hareketlilik eksikliği, kan akışı durgunluk içinde Venöz vanalar sonucudur. Burada, bir modeli böyle akışı rahatsızlık trombozu sürüş bir faktör olarak taklit eden açıklanmıştır. Bu modelde, kısmi akışını sınırlama (stenoz) inferior vena kava (IVC) içinde oluşturulur. 48 h IVC Lümen yaklaşık yüzde 90'ını kapatılması olu_umu insanlar ile yapısal olarak benzer gelişimi sonuçlanır. Benzerlikler: i) çoğu trombüsü cilt kırmızıdır, yani, kırmızı kan hücreleri ve fibrin, II) varlığı beyaz kısmı (Zahn hattı), endotel monolayer III) sigara-yalanlarım, IV) yükseltilmiş plazma D-Dimer düzeyleri ve önlemek için olasılık v) oluşur tarafından düşük molekül ağırlıklı heparin kan pıhtılaşması. Sınırlamaları içerir değişken boyutu olu_umu ve aslında bu farelerde vahşi-tip belli bir yüzdesi (0 - % 35) bir trombüsü üretmeyebilir. Görsel gözlem ve ölçüm ek olarak, olu_umu trombüsü gelişme dinamikleri izlenmesi için izin verir ultrasonografi gibi non-invaziv teknolojileri tarafından görüntülenmiştir. Daha kısa zaman noktalarda (1-6 h), intravital mikroskobu doğrudan olayları (örneğin, gemi duvar hücrelere alımı) gözlemlemek için uygulanabilir trombüsü oluşumu önceki. Dünyanın dört bir yanından birkaç takım tarafından bu yöntemin kullanılması DVT inisiyasyon temel mekanizmaları ortaya çıkarmak ve onun önlenmesi için yararlı olabilir potansiyel hedefleri belirlemek mümkün kıldı.

Burada, DVT IVC akışı bozulma tarafından indüklenen bir model açıklanmıştır. İndüksiyon Darlığının IVC içinde bozulma başlatır ve durgunluk kan akımı ve (Bu durumda, 48 s) bir süre sonra bir trombüsü, yapısal olarak benzer insan DVT gelişiminde olu_umu (şekil 1A) sonuçlanır. Bir trombüsü IVC içinde görsel olarak kolayca detectable varlığıdır (şekil 1B). İnsan DVT ve model arasında önemli bir benzerlik yüksek plazma D-dimer düzeyleri (Şekil 2) için. D-dimer fibrin bozulması, ürünü ve etkin bir trombotik işlem oluyor varlığını kan öneriyor.
Model şekil 3A-Colarak adım adım sunulmaktadır. IVC dikkatle maruz, IVC ve aort damarı arasında bir delik açtık ve dikiş (7-0 Prolene) IVC altındaki delikten çekilir. O zaman IVC dikiş tarafından ayırıcı (30 G iğne, şekil 3D), üzerinde spacer kaldırılır sonra bakmaksızın. Bu yordam için % 90'ı verir kalan patent bırakarak IVC Lümen kapatılması. Bu kan akışı durgunluk sonunda tromboz için önde gelen sağlar.
Şekil 4 model, değişken trombüsü boyutu büyük dezavantajı gösterir. Tüm bu olu_umu aynı deneyde elde edildi vahşi erkek farelerde tip aynı kökenli, yaş ve benzer vücut ağırlığı üzerinde gerçekleştirilen. Tüm fareler olu_umu (tromboz yaygınlığı % 100) üretilen rağmen büyüklükleri açıkça geniş bir aralıkta değişir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56697/56697fig1.jpg"> 
Şekil 1: Sonra 48 saat kısıtlama/stenoz temsilcisi trombüsü. (A) 48 h IVC sonra tipik bir trombüsü stenoz. Not kırmızı (kırmızı kan hücresi zenginleştirilmiş) ve beyaz (trombosit zenginleştirilmiş) parçalar. (B) IVC (sol) veya (sağ) bir trombüsü olmadan. Ölçek çubukları 2 mm. = <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56697/56697fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56697/56697fig2.jpg"> 
Resim 2 : Yüksek plazma D-dimer düzeyleri IVC stenoz uygulamadan sonra. Fareler IVC stenoz için tabi tutuldu. Kan belirtilen süre zamanlarda alınan, stabilize 1:9 % 3.8 sodyum sitrat, plazma ile Santrifüjü (2300 x g, 5 min) tarafından hazırlanan ve D-dimer düzeyleri bir ELISA kiti üreticinin yönergelerine uygun olarak belirlenmiş kullanılıyordu. Daireler sham çalışan fareler belirlemek, haçlar IVC stenoz belirlemek. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56697/56697fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56697/56697fig3.jpg"> 
Şekil 3: Akış kısıtlama/stenoz DVT, Inferior Vena kava (IVC) modeli farelerde. Model ardışık aşamalarında sunulmaktadır. (A)bir delik IVC ve aort damarı arasında yapılır ve dikiş içinden IVC çekilir. (B) bir düğüm üzerinde bir spacer (30 G iğne) kapalıdır. (C) spacer kaldırılır: cerrah fare kapatmadan önce gördüğü son görünümü. Kesikli Sarı çizgi IVC demarcates. Irv sol renal ven için duruyor. Ölçek çubukları 0.2 mm. (D) Rondela (30 G iğne) =. Ölçek çubukları 2 mm. = <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56697/56697fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56697/56697fig4.jpg"> 
Şekil 4 . Değişkenlik trombüsü boyutu. Fareler 48 h IVC stenoz için tabi tutuldu. Sunulan olu_umu aynı deneyde elde edilir. Ölçek barlar 2 mm. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56697/56697fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Burada Derin Ven Trombozu fare modeli olarak stenoz inferior vena kava içinde açıklayın. Bu model kan akışını kısıtlama, bir Venöz tromboz insanlarda büyük tetikler beyannamedir.

Inferior Vena kava stenozu: Derin Ven Trombozu fare modeli

Deep vein thrombosis (DVT) and its devastating complication, pulmonary embolism, are a severe health problem with high mortality. Mechanisms of thrombus ...

Bu cerrahi prosedürün genel amacı, derin ven trombozunun başlatılması için kan akımı distorsiyonunu taklit etmek için inferior vena kavada bir darlık oluşturmaktır. Bu yöntem, venöz tromboz alanındaki derin ven trombozu başlatma mekanizmaları hakkındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, damarlarda tromboz başlatmanın önemli bir mekanizması olan kan akışı bozukluğunu simüle etmesidir.İnferior vena kava'yı aorttan ayırmak ve bu dokular arasındaki deliği açmak sözel olarak açıklanması zor olduğu için bu yöntemin görsel olarak gösterilmesi çok önemlidir. Sekiz ila 12 haftalık anestezi uygulanmış 19 ila 25 gramlık bir farenin karnını tıraş ederek başlayın ve fareyi bir ısıtma yastığı üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Maruz kalan cildi antibakteriyel solüsyonla üç kez dezenfekte etmek için steril bir pamuklu çubuk kullanın.Ayak parmağını sıkıştırmaya yanıt vermeyerek uygun sedasyon seviyesini onaylayın ve fareyi cerrahi bölge üzerinde bir delik bulunan steril bir örtü ile örtün. Diseksiyon mikroskobu altında, sternumun 1,5 santimetre altından başlayarak karın orta hattı boyunca bir kesi yapın ve bağırsakları hayvanın sol tarafına çıkarmak için pamuk tomurcukları kullanın. Bağırsak dokusunu 37 santigrat derece tuzlu suya batırılmış steril gazlı bezle örtün.Kesiyi genişletmek ve inferior vena kava veya IVC'yi ve yan dalları kaudal olarak sol renal ven'e yerleştirmek için doku ekartörleri yerleştirin. Forseps kullanarak, yan dalları çevreleyen yağ dokusunu yukarı çekin, ardından dalın altına tünel açmak için ikinci bir forseps kullanın. Ve tüm yan dalları 7-0 inert prolen sütürlerle IVC'ye mümkün olduğunca yakın bir şekilde bağlayın.Çevredeki dokuları forseps ile tutarak, IVC ile aort arasındaki küçük alanda, tam olarak IVC ile sol böbrek damarı arasında gerilim oluşturmak için IVC'yi yukarı ve sola çekin. Aort ve IVC arasına ikinci bir forseps çifti yerleştirin ve bir delik açmak için forsepsleri en fazla üç ila beş kez açıp kapatın. Deliğin tam olarak IVC'nin sol böbrek damarı ile birleştiği noktada yapılması çok önemlidir.Sol elinizi kullanarak, periton boşluğunun sol tarafına, IVC'ye yakın bir yere iki santimetrelik bir 7-0 inert prolen sütür parçası yerleştirin ve IVC'yi tekrar yukarı ve sola çekin. İkinci forsepsleri aort ile IVC arasındaki deliğe yerleştirin, böylece uçlar IVC'nin diğer tarafında görünür ve dikişi delikten geri çekin. Gevşek bir geçici düğüm yapın ve düğümün içine bir kanca şeklinde bükülmüş 30 gauge bir iğne ara parçası yerleştirin.Düğümü sıktıktan sonra, ara parçayı çıkarın ve bağırsakları periton boşluğuna geri döndürmek için bir pamuklu çubuk kullanın. Sürekli halkalar kullanarak, peritonu 6-0 VICRYL sütür ile kapatın ve cildi metal zımbalarla kapatın. Deri altından fareye 0.5 mililitre 37 santigrat derece glukozalin enjekte edin.Ardından, fareyi 25 santigrat derece sıcaklıkta yiyecek ve jel su içeren bir odaya yerleştirin ve tam iyileşme sağlanana kadar izleyin. IVC'de stenozun indüksiyonu, kan akışında bir bozulma ve durgunluk başlatır ve bu da yapısal olarak insanlarda gözlenen derin ven trombüsüne benzer ve makroskopik olarak kolayca görüntülenebilen bir trombüs gelişimi ile sonuçlanır. Ek olarak, bu IVC darlık modelinde plazmada fibrin bozunmasının bir ürünü olan yüksek D-dimer gözlenir ve bu da insanlarda görülene benzer aktif bir trombotik sürecin varlığını gösterir.Deney hayvanlarının çoğu bu modelde trombüs üretmiş olsa da, önemli bir dezavantaj, hayvanlar arasında gözlenen trombüsün boyutundaki değişkenliktir. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa 15 dakika içinde tamamlanabilir. Geliştirilmesinden sonra, bu teknik, venöz tromboz alanındaki araştırmacıların bir fare modelinde DVT mekanizmalarını keşfetmelerinin yolunu açtı.

stenosis-inferior-vena-cava-murine-model-deep-vein

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Venöz endotel aktivasyonu ve kısmi kan staz, Virchow triadı iki bileşeni nedeniyle tipi trombüs oluşumu inferior vena kava sonuçlarının iç yüzeyi endotel aktivasyon elektrolitik indüksiyon.

Ven Trombozu Elektrolitik inferior vena kava Modeli (EIM)

Inferior vena kava trombozu fare tam durağanlık modeli ven duvar dokusu ve trombüs ölçülebilir miktarda verir. Bu damar duvar ve oklüzif trombüs arasındaki etkileşimleri ve akut ve kronik inflamasyon ilerlemesini değerlendirmek değerlendirmek için yararlı olduğu kanıtlanmıştır.

İnferior Vena Kava Trombozu Fare Komple Durağanlık Model

Hücresel ve moleküler neotissue oluşumu hakkındaki bilgi geliştirmek için, TEVG bir fare modeli yakın zamanda geliştirilmiştir. Greftler C57BL / 6 farelerinde Infrarenal vena kava araya girme greft olarak implante edildi. Bu model bizim klinik araştırmada elde edilenlere benzer sonuçlar elde, ama çok kısaltılmış zaman zarfında.

Fare Modeli Inferior Vena Cava İnterpozisyon Greft İmplantasyonu

Mevcut Protokolü Venöz tromboz Staz modelini kullanarak elde etmek için gereken adımları açıklar. Buna ek olarak, biz trombüsü oluşumu ve çözünürlük zamanla ölçmek için non-invaziv bir yöntem kullanarak.

Derin Ven Trombozu Staz farelerde yüksek frekans Ultrasonografi tarafından izlenen tarafından indüklenen

Bir aokaval fistül, her iki duvar üzerinden Vena Cava inferior içine murine infra-renal aort delip tarafından oluşturuldu ve inferior vena cava kısmi ligasyon yoluyla onun çıkış bir stenoz oluşturulması izledi. Bu tekrarlanabilir model, Merkezi venöz stenozu incelemek için kullanılabilir.

Bir outflow stenozu ile Aokaval fistül kullanarak Merkezi venöz stenozis murine modeli

Bu makale, venöz ligasyon elde etmek için vasküler klipsler kullanarak bir fare kanseri modelinde venöz trombozu değerlendirmek için optimize edilmiş bir yöntem sunmayı amaçlamaktadır. Optimizasyon, trombozla ilişkili ölçümlerdeki değişkenliği en aza indirir ve insan kanseriyle ilişkili venöz trombozla alaka düzeyini artırır.

Bir Fare Kanser Modelinde Venöz Tromboz Testi

Protokol, trombotik olmayan, trombotik ve trombotik sonrası derin venlerde venoplasti balonu (VB) müdahalelerini test etmek için bir sağkalım kemirgen modeli sunar.

Kemirgen İnferior Vena Cava Venoplasti Balon Modeli

Bu video, CD40 aktivasyonu ve dokunulmazlık indüksiyonu eğitim için bir model antijen sunan hücre (APC) olarak da kullanılabilir C57BL / 6 farelerin dalak, fare B hücreleri genişleme prosedürü göstermektedir.

Murin Model B hücreleri CD40 aktivasyonu

Mürin kemik iliği nakli insanlarda graft-versus-host hastalığı yöneten immünolojik mekanizmalarla çalışmak için yaygın olarak kullanılan bir tekniktir. T hücre trafiğini modellerini izlemek için...

Graft-versus-host hastalığı indüksiyonu ve<em&gt; In Vivo</emBir MHC-eşlemeli murin Model Kullanma&gt; T Hücre İzleme

Alerjik astım Deneysel fare modelleri hastalığı patogenezinde okuyan ve yeni ilaçlar geliştirmek için yeni olanaklar sunar. Bu modeller de alerjik immün yanıt, hava yolu inflamasyonu ve pulmoner patofizyolojisi yöneten ölçüm faktörleri için uygundur.

Alerjen Bağlı Astım murin Modeli

Keşfedin, farelerde inferior vena kava stenozu oluşturarak derin ven trombozu mekanizmalarını incelemeyi. Bu cerrahi yöntem, kan akışı bozukluğunu taklit ederek insanlardaki venöz tromboz süreçlerini araştırmaya olanak tanır.

Inferior Vena kava stenozu: Derin Ven Trombozu fare modeli

Daha fazla video keşfet