19 Temmuz 2018
Bu makalede farelerde hayvan arka tarafında konumlandırılmış bir erişim bağlantı noktasına bağlı bir mayi kateter, cerrahi yerleşim için yöntem gösterilmektedir. Ayrıca, PD hastalar üremik durumunu benzemeye 5/6 nefrektomi için yordamı açıklar.
Bu yöntem, Periton Diyalizi alanında, üremik veya üremik olmayan koşullar altında sıvı maruziyetine yanıt olarak Peritoneal veya Sistemik değişiklikler hakkında temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajları, uzun bir tedavi süresi boyunca intraperitoneal olarak büyük miktarlarda sıvı enjekte edilebilmesi ve genetiği değiştirilmiş hayvanların kullanımına izin vermesidir. Bu tekniğin anlamı, potansiyel, terapötik stratejik testler ve biyobelirteç değerlendirmesini kolaylaştırdığı için yapısal ve fonksiyonel peritoneal bozulmanın tedavisi ve teşhisine kadar uzanır.
Bu yöntem için ilk olarak, periton hasarında yer alan moleküler ipuçlarını başlatmak için genetik olarak değiştirilmiş fareler kullanma ihtiyacını öngördüğümüzde aklımıza geldi. Kateter yerleştirme için, her hayvanın sağ yanlarını ve sırtlarını tıraş ettikten sonra, ayak parmağının sıkışmasına yanıt verilmediğini onaylayın ve hayvanın gözlerine merhem sürün. Daha sonra, ilk hayvanı ameliyat masasının sol tarafına yerleştirin ve maruz kalan cildi% 1 klorheksidin glukonat çözeltisi ile dezenfekte edin.
Vücudun sağ tarafında 0,5 santimetrelik bir kesi yapmak için künt makas kullanın. Daha sonra, hayvanın tüm sırtını kaplayan deri iyice ayrılana kadar cildi bitişik kas tabakasından dikkatlice ayırın. Deri kesisinden kas tabakasında bir milimetre çapında bir kesi yapın ve kateterin ucunu ve ilk plastik halkayı kas kesisine yerleştirin.
5-0 veya 6-0 emilmeyen sütür ile periton duvarını, bir plastik halka periton boşluğunun içinde ve diğeri kas ile cilt arasında olacak şekilde kateterin etrafına sıkıca dikin. Kesi yapılmadan önce dikişler hazırlanmalı ve kateter yerleştirilene kadar kas serbest bırakılmamalıdır. Aksi takdirde kesi çok küçük olduğu için tekrar bulunması zor olabilir.
Erişim portunu farenin kuyruğuna doğru deri altı boşluğa yerleştirin ve yarayı ikinci bir dikişle kapatın. Ardından, tam sternal yaslanma işleminden sonra hayvanı kafesine geri koyun. Dört ila yedi gün sonra, periton diyalizi tedavisine başlamak için, önce iki mililitre periton diyaliz sıvısı içeren bir şırınga yükleyin ve portu çevreleyen cildi% 1 klorheksidin glukonat çözeltisi ile dezenfekte edin.
Daha sonra hayvanı kuyruğundan ve erişim portundan tutmak için bir elinizi kullanın ve eğimli bir iğne kullanarak sıvıyı diğer elinizle porta enjekte edin. 5/6 Nefrektomi ve kateter yerleştirme için, hayvanları ameliyata hazırladıktan sonra, gösterildiği gibi, hayvanın sol tarafında kaburgaların dibine yakın 0,5 santimetrelik bir cilt kesisi yapın. Sol böbreği peritondan çıkarmak için kasta küçük bir kesi açın ve kapsülü ve adrenal bezi çıkarın.
Böbreğin ekstremitelerini yakmak ve kesmek ve böbreği periton boşluğuna geri döndürmek için bir koterizatör kullanın. Daha sonra kas ve deri yaralarını çözünmeyen 5-0 veya 6-0 dikişlerle kapatın ve tamamen iyileştiğinde hayvanı kafesine geri koyun. Ertesi gün, hayvanın sağ tarafında 0,5 santimetrelik bir deri kesisi yapın ve gösterildiği gibi hayvanın arkasındaki deriyi kastan ayırın.
Kasta 0,3 ila 0,4 santimetrelik bir kesi yapın ve sağ böbreği periton boşluğundan çıkarın. Kapsülü ve böbreküstü bezini çıkarın ve böbrek damarını, arteri ve üreteri bağlamak için emilmeyen bir 5-0 veya 6-0 sütür kullanın. Şimdi böbreği tamamen çıkarın ve kateteri, kas yarasını kapatmadan önce gösterildiği gibi kasın iki plastik halka arasında tutulacağı şekilde yerleştirin.
Erişim portunu deri altı boşluğa sokun ve gösterildiği gibi cildi kapatın. Daha sonra hayvanı tamamen iyileşene kadar izleme ile kafesine geri koyun ve gösterildiği gibi hiperozmotik sıvıyı uygulamadan önce hayvanın en az 10 gün iyileşmesine izin verin. Kateterin en uzak bölgesinden elde edilen fare perial peritoneal dokuları, diyaliz sırasında nefrektomize hayvanlarda daha da kötüleşen artan bir kalınlık ve hücre alımı gösterir.
Timus epitel hücreleri ayrıca periton diyalizinin neden olduğu hücreler arası birleşme bozulmasına bağlı olarak değişmiş bir morfoloji sergiler. Nefrektomize farelerden alınan serum örnekleri, 5/6 Nefrektominin üremik bir durumu indüklediğini ve deney süresince Üreik Azot seviyelerini taban çizgisine kıyasla artırdığını göstermektedir. Dahası, böbrekler tamamen işlevsel olduğunda, Üreik Azot seviyeleri, periton diyaliz sıvısına maruz kalan farelerde bile bazal duruma benzer kalır.
Bu teknikler beş ila yedi dakika içinde tamamlanabilir. Nefrektomi olmadan, 15 ila 20 dakika. Sol böbrek koterizasyonu için 20 ila 25 dakika.
Doğru böbrek çıkarılması ve kateter yerleştirilmesi için, eğer metodolojisi uygun şekilde yapılırsa. Geliştirilmesinden sonra, bu teknik, periton diyalizi alanındaki araştırmacıların, periton diyalizi tedavisine tabi tutulan böbrek hastalarında periton koruması için terapötik seçenekleri keşfetmelerinin yolunu açmıştır.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, peritoneal diyaliz çalışmalarının yürütülmesi için temel teşkil eden, farelerde intraperitoneal kateter yerleştirilmesine yönelik cerrahi bir yöntemi göstermektedir. Ayrıca, hastalardaki üremik durumu taklit etmek için uygulanan 5/6 nefrektomi prosedürünü detaylandırmaktadır.
Bu cerrahi model, uzun süreli sıvıya maruz kalma ve üremik durum modellemesi için tekrarlanabilir bir sistem sağlayarak periton diyalizi müdahalelerinin preklinik değerlendirmesine olanak tanır. Genetiği değiştirilmiş fareler kullanılarak periton fibrozisi ve inflamasyon yollarındaki hedef doğrulamayı ve mekanistik risk azaltmayı destekler. Bu teknik, renal replasman tedavisi geliştirme ile ilgili biyobelirteç değerlendirmesini ve terapötik strateji testlerini kolaylaştırır.
Bu yöntem; hipotez test edilmesini, yolakların netleştirilmesini ve terapötik müdahalelere verilen periton yanıtlarının kantitatif değerlendirmesini mümkün kılarak, keşif biyolojisi ve preklinik iş akışlarına entegre olur.