Name: İmalat işlemleri ve Birefringence ölçümler manyetik olarak duyarlı Lanthanide iyon şelat Fosfolipid Derlemeler tasarlama (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-01-03T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 38 s
Description: Keşfedin lantanit iyon şelatlayan polimoleküler yapıların imalatını ve çift kırınım ölçümleriyle manyetik yanıtın izlenmesini. Bu yöntem, düşük alan şiddetlerinde ayarlanabilir manyetik yanıt sunan sistemlerin tasarımına olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar SMhardBi (proje numarası 200021_150088/1) finansmanı için İsviçre Ulusal Bilim Vakfı kabul etmiş oluyorsunuz. İsviçre spallation nötron kaynağı Hoşlandığımı, Paul Scherrer Instute, Villigen, İsviçre SANS deneyler yapıldı. Yazarlar sıcak Dr. Joachim Kohlbrecher SANS deneyleri ile onun rehberlik için teşekkür ederiz. Birefringence ölçüm Kur yüksek manyetik alanlar'ın altında yüksek-alan manyetik Laboratuvarı HFML, Nijmegen, Hollanda varolan kurulumundan ilham kaynağı oldu. Bruno Pfister birefringence Kur elektronik gelişmekte olan onun yardım için Jan Corsano ve Daniel iyi ve facile hizalama lazer izin çerçeveler oluşturmak için Kiechl ve Dr. Bernhard Koller devam eden teknik destek için teşekkür ederiz.

<ol><li>Sanders, C. R., Hare, B. J., Howard, K. P., Prestegard, J. H. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/007965659480012X">Magnetically-oriented phospholipid micelles as a tool for the study of membrane-associated molecules.</a> Prog. Nucl. Magn. Reson. Spectrosc. 26, 421-444 (1994).</li>
<li>Glover, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+evaluation+of+phospholipid+bicelles+for+solution-state+studies+of+membrane-associated+biomolecules%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Structural evaluation of phospholipid bicelles for solution-state studies of membrane-associated biomolecules.</a> Biophys. J. 81 (4), 2163-2171 (2001).</li>
<li>Katsaras, J. H. T. A., Pencer, J., Nieh, M. -P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22Bicellar%22+lipid+mixtures+as+used+in+biochemical+and+biophysical+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Naturwissenschaften%22%5BJournal%5D)">"Bicellar" lipid mixtures as used in biochemical and biophysical studies.</a> Naturwissenschaften. 92 (8), 355-366 (2005).</li>
<li>Sanders, C. R., Prosser, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bicelles%3A+a+model+membrane+system+for+all+seasons%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Structure%22%5BJournal%5D)">Bicelles: a model membrane system for all seasons?</a> Structure. 6 (10), 1227-1234 (1998).</li>
<li>Dürr, U. H. N., Soong, R., Ramamoorthy, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((When+detergent+meets+bilayer%3A+birth+and+coming+of+age+of+lipid+bicelles%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Nucl.+Magn.+Reson.+Spectrosc%22%5BJournal%5D)">When detergent meets bilayer: birth and coming of age of lipid bicelles.</a> Prog. Nucl. Magn. Reson. Spectrosc. 69, 1-22 (2013).</li>
<li>Dürr, U. H. N., Gildenberg, M., Ramamoorthy, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+magic+of+bicelles+lights+up+membrane+protein+structure%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Rev%22%5BJournal%5D)">The magic of bicelles lights up membrane protein structure.</a> Chem. Rev. 112, 6054-6074 (2012).</li>
<li>Ujwal, R., Abramson, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22257923">High-throughput crystallization of membrane proteins using the lepidic bicelle method.</a> J. Vis. Exp. (59), (2012).</li>
<li>Barbosa-Barros, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bicelles%3A+lipid+nanostructured+platforms+with+potential+dermal+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Bicelles: lipid nanostructured platforms with potential dermal applications.</a> Small. 6, 807-818 (2012).</li>
<li>Lin, L., et al. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/is/content/articlelanding/2016/ra/c6ra18112k">Hybrid bicelles as a pH-sensitive nanocarrier for hydrophobic drug delivery.</a> RSC Adv. 6, 79811-79821 (2016).</li>
<li>Beck, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+type+of+bicellar+disks+from+a+mixture+of+DMPC+and+DMPE-DTPA+with+complexed+lanthanides%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Novel type of bicellar disks from a mixture of DMPC and DMPE-DTPA with complexed lanthanides.</a> Langmuir. 26 (8), 5382-5387 (2010).</li>
<li>Liebi, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Tailored+phospholipid+bicelles+to+generate+magnetically+switchable+material%22">Tailored phospholipid bicelles to generate magnetically switchable material</a>. , ETH Zürich. Switzerland. PhD Thesis n° 21048, ISBN 978-3-905609-55-4 (2013).</li>
<li>Liebi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetically+enhanced+bicelles+delivering+switchable+anisotropy+in+optical+gels%5BTitle%5D)+AND+%22ACS.+Appl.+Mater.+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Magnetically enhanced bicelles delivering switchable anisotropy in optical gels.</a> ACS. Appl. Mater. Interfaces. 6 (2), 1100-1105 (2014).</li>
<li>Liebi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alignment+of+bicelles+studied+with+high-field+magnetic+birefringence+and+small-angle+neutron+scattering+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Alignment of bicelles studied with high-field magnetic birefringence and small-angle neutron scattering measurements.</a> Langmuir. 29, 3467-3473 (2013).</li>
<li>Prosser, R. S., Hwang, J. S., Vold, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetically+aligned+phospholipid+bilayers+with+positive+ordering%3A+a+new+model+membrane+system%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Magnetically aligned phospholipid bilayers with positive ordering: a new model membrane system.</a> Biophys J. 74, 2405-2418 (1998).</li>
<li>Prosser, R. S., Bryant, H., Bryant, R. G., Vold, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lanthanide+chelates+as+bilayer+alignment+tools+in+NMR+studies+of+membrane-associated+peptides%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Magn.+Reson%22%5BJournal%5D)">Lanthanide chelates as bilayer alignment tools in NMR studies of membrane-associated peptides.</a> J. Magn. Reson. 141, 256-260 (1999).</li>
<li>Liebi, M., Kohlbrecher, J., Ishikawa, T., Fischer, P., Walde, P., Windhab, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol+increases+the+magnetic+aligning+of+bicellar+disks+from+an+aqueous+mixture+of+DMPC+and+DMPE-DTPA+with+complexed+thulium+ions%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Cholesterol increases the magnetic aligning of bicellar disks from an aqueous mixture of DMPC and DMPE-DTPA with complexed thulium ions.</a> Langmuir. 28 (29), 10905-10915 (2012).</li>
<li>Liebi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol-diethylenetriaminepentaacetate+complexed+with+thulium+ions+integrated+into+bicelles+to+increase+their+magnetic+alignability%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+B%22%5BJournal%5D)">Cholesterol-diethylenetriaminepentaacetate complexed with thulium ions integrated into bicelles to increase their magnetic alignability.</a> J. Phys. Chem. B. 117 (47), 14743-14748 (2013).</li>
<li>Isabettini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tailoring+bicelle+morphology+and+thermal+stability+with+lanthanide-chelating+cholesterol+conjugates%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Tailoring bicelle morphology and thermal stability with lanthanide-chelating cholesterol conjugates.</a> Langmuir. 32, 9005-9014 (2016).</li>
<li>Isabettini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mastering+the+magnetic+susceptibility+of+magnetically+responsive+bicelles+with+3%CE%B2-Amino-5-Cholestene+and+complexed+lanthanide+ions%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Chem.+Chem.+Phys%22%5BJournal%5D)">Mastering the magnetic susceptibility of magnetically responsive bicelles with 3β-Amino-5-Cholestene and complexed lanthanide ions.</a> Phys. Chem. Chem. Phys. 19, 10820-10824 (2017).</li>
<li>De Angelis, A. A., Opella, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bicelle+samples+for+solid-state+NMR+of+membrane+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Bicelle samples for solid-state NMR of membrane proteins.</a> Nat. Protoc. 2 (10), 2332-2338 (2007).</li>
<li>Son, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22Q-Titration%22+of+long-chain+and+short-chain+lipids+differentiates+between+structured+and+mobile+residues+of+membrane+proteins+studied+in+bicelles+by+solution+NMR+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Magn.+Reson%22%5BJournal%5D)">"Q-Titration" of long-chain and short-chain lipids differentiates between structured and mobile residues of membrane proteins studied in bicelles by solution NMR spectroscopy.</a> J. Magn. Reson. 214, 111-118 (2012).</li>
<li>Avanti Polar Lipids Inc. Bicelle Preparation. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation/bicelle-preparation">https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation/bicelle-preparation</a> (2017).</li>
<li>Isabettini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+Generating+Highly+Magnetically+Responsive+Lanthanide-Chelating+Phospholipid+Polymolecular+Assemblies%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Methods for Generating Highly Magnetically Responsive Lanthanide-Chelating Phospholipid Polymolecular Assemblies.</a> Langmuir. 33, 6363-6371 (2017).</li>
<li>Nieh, M. -P., Glinka, C. J., Krueger, S., Prosser, R. S., Katsaras, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SANS+study+on+the+effect+of+lanthanide+ions+and+charged+lipids+on+the+morphology+of+phospholipid+mixtures%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">SANS study on the effect of lanthanide ions and charged lipids on the morphology of phospholipid mixtures.</a> Biophysical Journal. 82 (5), 2487-2498 (2002).</li>
<li>Watts, A., Spooner, P. J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phospholipid+phase+transitions+as+revealed+by+NMR%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Phys.+Lip%22%5BJournal%5D)">Phospholipid phase transitions as revealed by NMR.</a> Chem. Phys. Lip. 57, 195-211 (1991).</li>
<li>Bleaney, B. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0022236472900273">Nuclear magnetic-resonance shifts in solution due to lanthanide ions.</a> J. Magn. Reson. 8, 91-100 (1972).</li>
<li>Prosser, R. S., Volkov, V. B., Shiyanovskaya, I. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Solid-state+NMR+studies+of+magnetically+aligned+phospholipid+membranes%3A+taming+lanthanides+for+membrane+protein+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Solid-state NMR studies of magnetically aligned phospholipid membranes: taming lanthanides for membrane protein studies.</a> Biochem. Cell Biol. 76, 443-451 (1998).</li>
<li>Prosser, R. S., Volkov, V. B., Shiyanovskaya, I. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+chelate-induced+magnetic+alignment+of+biological+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Novel chelate-induced magnetic alignment of biological membranes.</a> Biophys. J. 75, 2163-2169 (1998).</li>
<li>Shklyarevskiy, I. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+alignment+of+self-assembled+anthracene+organogel+fibers%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Magnetic alignment of self-assembled anthracene organogel fibers.</a> Langmuir. 21, 2108-2112 (2005).</li>
<li>Christianen, P. C. M., Shklyarevskiy, I. O., Boamfa, M. I., Maan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0921452604000766">Alignment of molecular materials in high magnetic fields.</a> Physica B: Condens. Matter. 346, 255-261 (2004).</li>
<li>Maret, G., Dransfeld, K. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/chapter/10.1007%2F3-540-13504-9_10">Biomolecules and polymers in high steady magnetic fields.</a> Top. App. Phys. 57, 143-204 (1985).</li>
<li>Gielen, J. C., Shklyarevskiy, I. O., Schenning, A. P. H. J., Christianen, P. C. M., Maan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+magnetic+birefringence+to+determine+the+molecular+arrangement+of+supramolecular+nanostructures%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Tech.+Adv.+Mater%22%5BJournal%5D)">Using magnetic birefringence to determine the molecular arrangement of supramolecular nanostructures.</a> Sci. Tech. Adv. Mater. 10 (1), 014601(2009).</li>
<li>Shklyarevskiy, I. O. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Deformation+and+ordering+of+molecular+assemblies+in+high+magnetic+fields%22">Deformation and ordering of molecular assemblies in high magnetic fields</a>. , Nijmegen University. The Netherlands. PhD Thesis, ISBN 90-9018956-4 (2005).</li>
<li>Fuller, G. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFuller%2C+GG+%22Optical+rheometry+of+complex+fluids%22">Optical rheometry of complex fluids</a>. , Oxford University Press. NY. (1995).</li>
<li>Walde, P., Cosentino, K., Engel, H., Stano, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Giant+vesicles%3A+preparations+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22ChemBioChem%22%5BJournal%5D)">Giant vesicles: preparations and applications.</a> ChemBioChem. 11, 848-865 (2010).</li>
<li>Avanti Polar Lipids Inc. Liposome Preparation. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation">https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation</a> (2017).</li>
<li>Avanti Polar Lipids Inc. Preparing Large, Unilamellar Vesicles by Extrusion (LUVET). , Available from:
 <a target="_blank" href="https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation/luvet">https://avantilipids.com/tech-support/liposome-preparation/luvet</a> (2017).</li>
<li>Isabettini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+engineering+of+lanthanide+ion+chelating+phospholipids+generating+assemblies+with+a+switched+magnetic+susceptibility%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Chem.+Chem.+Phys%22%5BJournal%5D)">Molecular engineering of lanthanide ion chelating phospholipids generating assemblies with a switched magnetic susceptibility.</a> Phys. Chem. Chem. Phys. 19, 20991-21002 (2017).</li>
<li>Battaglia, M. R., Ritchie, G. L. D. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/1977/f2/f29777300209">Molecular magnetic anisotropies from the Cotton-Mouton effect.</a> J. Chem. Soc., Faraday Trans. 2. 73 (2), 209-221 (1977).</li>
<li>Sprunt, S., Nounesis, G., Litster, J. D., Ratna, B., Shashidhar, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-field+magnetic+birefringence+study+of+the+phase+behavior+of+concentrated+solutions+of+phospholipid+tubules%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+E%22%5BJournal%5D)">High-field magnetic birefringence study of the phase behavior of concentrated solutions of phospholipid tubules.</a> Phys. Rev. E. 48 (1), 328-339 (1993).</li>
<li>Zhao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+paranematic+ordering+of+rigid+and+semiflexible+amyloid-Fe3O4+hybrid+fibrils+in+an+external+magnetic+field%5BTitle%5D)+AND+%22Biomacromolecules%22%5BJournal%5D)">Continuous paranematic ordering of rigid and semiflexible amyloid-Fe3O4 hybrid fibrils in an external magnetic field.</a> Biomacromolecules. 17 (8), 2555-2561 (2016).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Derlemeler olduğunu Isabettini vd. fosfolipitler şelat manyetik olarak son derece duyarlı Ln3 + oluşturmak için yöntemleri değerlendirmek için nasıl birefringence ölçümleri SANS ile birlikte kullanılan ayrıntılı hesabını deneyler 23 önerilen imalat protokolleri de daha uzun DPPC ve DPPE-DTPA fosfolipitler oluşan derlemeler için veya onların bilayer kimyasal mühendislik steroid türevleri içerenler için geçerlidir. 11 , 12</sup...

Bicelles çok sayıda lipid karışımlar elde edilen disk benzeri polymolecular derlemeler vardır. 1 , 2 , 3 , 4 , 5 onlar membran biomolecules yapısal karakterizasyonu için NMR spektroskopisi tarafından yaygın olarak kullanılmaktadır. 6 , 7 ancak, son çabaları olası uygulama alanın genişletin hedefliyoruz. 5 , 8 , 9 en çok çalışılan bicelle sistem 1,2 karışımından oluşmaktadır-dimyristoyl -sn- glycero-3-derleme ve 1,2 düzlemsel kısmını phosphocholine (DMPC),-dihexanoyl -sn- glycero-3-phosphocholine (DHPC) Fosfolipid kenarına kapsayan. 1 , 2 , 3 bilayer dikte kendi kendine monte polymolecular yapısı mimari beste fosfolipitler moleküler geometri. 4 , 5 yerine DHPC DMPE-DTPA ile manyetik olarak son derece duyarlı ve ayarlanabilir bicelle sistemleri oluşturur. 10 , 11 DMPC/DMPE-DTPA/Ln3 + (molar oranı 4:1:1) bicelles ilişkilendirmek çoğu ile daha fazla paramagnetic lanthanide iyonları (Ln3 +) bilayer'ın yüzeyinde, gelişmiş bir manyetik tepkisine yol. 10 Ayrıca, suda çözünen DHPC molekülleri DMPE-DTPA/Ln3 + sağlar ile seyreltme dayanıklı bicelles oluşumunu değiştirme. 11
Düzlemsel polymolecular derlemeler manyetik alignability genel olarak manyetik enerji tarafından dikte edilir,
<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq1v2.jpg">(1)
B manyetik alan şiddeti, olduğu yerde <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq2.jpg"> manyetik sabit, n toplama numarası ve <img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq3.jpg"> bilayer beste lipidler moleküler diamagnetic duyarlılık anizotropi. Bu nedenle, DMPC/DMPE-DTPA/Ln3 + bicelles yanıt manyetik alanlar için onların boyutu (Toplam sayı n) ve moleküler diamagnetic duyarlılık anizotropi Δχ tarafından hazırlanmıştır. İkinci kolayca Şelatatlı Ln3 +doğası değiştirerek elde edilir. 12 , 13 , 14 , 15 Introducing kolesterol (CHOI-OH) veya bilayer steroid diğer türevleri toplama n sayısına ve manyetik duyarlılık Δχ kurulumları ayarlama imkanı sunuyor. 11 , 16 , 17 , 18 , 19 verilen lipid kompozisyon için daha alignable türler kaynaklanan daha fazla lipidler Emag için (daha büyük toplama n sayısına), katkıda bulunmak ve yetenekli büyük derlemeler içerir. DMPC/DHPC bicelles, boyutunu örneğin, geleneksel çıktısından lipid oranı veya toplam konsantrasyonu optimizasyon ile kontrol edilir. 20 , 21 , 22 bu DMPC/DMPE-DTPA/Ln3 + bicelles mümkün olsa da, bicelle veziküller Teklifler Isıtma üzerine onların termo-tersinir dönüşüm terzilik seçenekleri eklendi. Veziküller şekillendirme membran filtreleri ile ekstrüzyon sağlar gibi mekanik anlamına gelir. Manyetik olarak alignable bicelles 5 ° C-soğutma üzerine yeniden oluşturulur ve boyutlarıyla vezikül öncüleri dikte. 11 işbu, mekanik imalat işlemleri ile DMPC/DMPE-DTPA/Tm3 + potansiyelini ele (molar oranı 4:1:1) veya DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm3 + (molar oranı 16:4:5:5) referans sistemleri olarak. Süreç siparişlerimiz ile diğer Ln3 + daha Tm3 +çalışırken işler. Bu teknikler tarafından sunulan olanaklar geniş şekil 1 ' de vurgulanır ve kapsamlı bir şekilde başka bir yerde tartışıldı. 23
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56812/56812fig1.jpg"> 
Şekil 1: olası üretim prosedürleri şematik bakış. Okudu manyetik alignable Ln3 + şelat polymolecular derlemeler her iki DMPC/DMPE-DTPA/Tm-3 + in oluşmaktadır (molar oranı 4:1:1) veya DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm3 + (molar oranı 16:4:5:5). Kuru lipit filmin 7,4 pH değeri, bir 50 mM fosfat tampon ile sulu ve toplam lipid konsantrasyon 15 mM. Etkili bir nemlendirme lipit filmin de donma çözülme döngüsü (FT) veya Isıtma ve soğutma çevrimleri gerektirir (H &amp; C). H &amp; C döngüleri örnekleri son donma adım çözdürme sonra yeniden veya eğer onlar daha fazla ekstrüzyon kullanılmak üzere uzun bir süre içinde donmuş muhafaza örnekleri yeniden oluşturmak için gerekli. Aşağıdaki adımları Isabettini ve arktarafından kapsamlı bir şekilde ele alınmıştır. 23 sonuna kadar alignable polymolecular derlemeler, lipid kompozisyona göre farklı derleme mimarileri teslim elde edilir. Bicelle boyutu ve manyetik alignability nanopore membran filtreleri ile ekstrüzyon (Ext) tarafından ayarlanabilir. Sunulan hizalama etkenler Af 2D küçük açı nötron saçılma (San) desenleri 800, 400, 200 veya 100 kalıptan çekilmiş DMPC/Choi-OH/DMPE-DTPA/Tm3 + (molar oranı 16:4:5:5) örneği üzerinden hesaplanan nm gözenekleri. Ölçümler daha ayrıntılı olarak burada kapsamında olmayan bicelle hizalama miktarının, tamamlayıcı bir anlamı vardır. 11 , 16 izotropik saçılma için 0 -1 (paralel nötron saçılma veya manyetik alan yönü ile ilgili olarak bicelles dikey hizalamasını) arasında Af değişen.<a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56812/56812fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Bicelles yapısını karakterizasyonu teknikleri geniş bir dizi tarafından kapsamlı bir şekilde okudu. 13 bicelles bir manyetik alana maruz hizalamasını NMR spektroskopisi veya küçük açı nötron saçılma (San) deneyler kullanarak sayısal. 5 , 10 , 11 , 12 , 13 , 16 , 17 , 18 , 19 , 24 , 25 ancak, shift ve Ln3 + varlığında meydana gelen NMR doruklarına genişletmektedir yöntemine ciddi sınırlamalar vardır. 15 , 26 , 27 , 28 rağmen SANS deneyler bu sınırlama, alternatif ve olmaz daha erişilebilir teknikleri çözüm derlemelerde manyetik olarak indüklenen hizalamasını rutin miktar için arzu edilir. Birefringence ölçümleri uygun ve nispeten basit bir alternatiftir. Mahsum NMR deneyleri için birefringence ölçümleri lipid düzenlemeler ve lipid aşamaları bilayer içinde meydana gelen değerli bilgileri ortaya koyuyor. Ayrıca, geometrik dönüştürmeleri sıcaklık gibi çevre koşulları değişen polymolecular derleme içinde meydana gelen izlenir. 11 , 12 , 13 , 16 manyetik olarak indüklenen birefringence Δn′ Fosfolipid sistemleri çeşitli çalışma kullanılmaya başlanmıştır. 13 , 29 , 30 birefringence ölçümleri bir manyetik alan içinde faz modülasyon tekniği dayalı bicelles yönünü bulmak için uygun bir yöntem var. 12 , 16 , 18 , 29 , 31 , 32 bicelles birefringence yüksek manyetik alanlarda en fazla 35 T ile soruşturma imkanı da M. Liebi vd tarafından sunuldu 13
Bir Anizotropik malzeme polarize ışığın girdiği zaman, olağan ve olağanüstü bir dalga kırılan. 11 iki dalgalar farklı hızları var ve aşamasında retardasyon δ tarafından kaydırılır. Geriliği δ derecesini ölçülen ve bir birefringence sinyale dönüştürülür <img alt="Equation 5" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq5.jpg"> malzeme kullanarak anizotropi derecesini ölçmek için
<img alt="Equation 6" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq6.jpg">(2)
Burada λ dalga boyu lazer ve d numune kalınlığı olmasıdır. Fosfolipitler optik Anizotropik ve onların optik eksen hidrokarbon kuyrukları paralel onların uzun moleküler eksenli denk geliyor. 11 , 12 fosfolipitler rastgele çözüm odaklı Eğer hiçbir retardasyon ölçülür. Fosfolipitler birbirine paralel hizalandığında retardasyon ölçülür. Manyetik olarak indüklenen birefringence <img alt="Equation 5" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq5.jpg"> bir pozitif veya negatif işaret molekülleri yönünü bağlı olarak manyetik alanına; olabilir bkz: Şekil 2. Paralel x ekseni için hizalı fosfolipitler olumsuz bir neden olacaktır <img alt="Equation 5" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq5.jpg"> , bu hizalanmış z ekseni boyunca olumlu bir sonuç ise <img alt="Equation 5" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq5.jpg"> . Hiçbir birefringence Fosfolipid paralel y ekseni olarak hizalar gibi optik eksen ışık yayma yönü ile ne zaman denk görülmektedir.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56812/56812fig2.jpg"> 
Resim 2: Uyum fosfolipitler ve karşılık gelen manyetik olarak indüklenen birefringence iz <img alt="Equation 12" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq12.jpg"> . Ölçülen iz <img alt="Equation 12" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq12.jpg"> manyetik alandaki Fosfolipid yönünü bağlıdır. Optik eksen molekülün kesik çizgilerle gösterilir. Işık 45 ° polarize ve y yönde yayar. Manyetik alan B z yönünde olur. Bu rakam M. Liebi değiştirildi. 11 <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56812/56812fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Bir izotropik kolloidal süspansiyon bicelles söz konusu olduğunda, bilayer fosfolipitler düzenlenmesi tarafından indüklenen yönlendirme, retardasyon δ sıfırlanması kaybolacaktır. Bicelles aynı zamanda bir zeka özrü δ polarize ışığın neden onların bilayers optik etkin fosfolipitler yönlendirmek amacıyla hizalamanız gerekir. Sonuç olarak, birefringence polymolecular derlemeler manyetik alignability ölçmek için önemli bir araçtır. Bicelles hizalanmış dikey manyetik alan olarak olumlu bir verecek <img alt="Equation 5" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq5.jpg"> , bu paralel uyumlu bir negatif verecektir iken <img alt="Equation 5" src="/files/ftp_upload/56812/56812eq5.jpg"> . İşareti belgili tanımlık tertibat Hizalama'bağlıdır ve örneği ile kontrol edilebilir.

<table><tbody><tr><td>1,2-dimiristoil-sn-glisero-3-fosfokolin (DMPC)</td><td>Avanti Polar Lipidler</td><td>850345P</td><td>>99%</td></tr> <tr><td>1,2-dimyristoyl-sn-glisero-3-fosfo-etanolamin-dietilen triaminpentaasetat asit heksamonyum tuzu (DMPE-DTPA)</td><td>Avanti Polar Lipidler</td><td>790535P</td><td>>99%</td></tr> <tr><td>Thulium(III) klorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>439649</td><td>susuz, toz, %99,9 eser metal bazlı</td></tr><tr><td>Disprosyum(III) klorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>325546</td><td>susuz, toz, %99,9 eser metal bazlı</td></tr><tr><td>İterbiyum(III) klorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>439614</td><td>susuz, toz, %99,9 eser metal bazlı</td></tr><tr><td>Kloroform</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>319988</td><td>stabilizatör, ACS reaktifi vb. olarak etanol içerir; % 99.8</td></tr> <tr><td>Metanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>34860</td> <td>& ge; %99,9</td></tr> <tr><td>Kolesterol</td><td>Amresco</td><td>433</td><td>Ultra saf sınıf</td></tr><tr><td>D2O</td><td>ARMAR kimyasalları</td><td>1410</td><td>99,8 atom %D</td></tr><tr><td>Ultra saf su</td><td>Millipore</td><td></td><td>Synergy pak2 (SYPK0SIX2), Millipack GP (MPGP02001)</td></tr> <tr><td>elektronik pH metre</td><td>Metrohm</td><td>17440010</td><td></td></tr><tr><td>Whatmann Nuclepore 25 mm 100nm membran filtre</td><td>VWR</td><td>515-2028</td><td></td></tr><tr><td>Whatmann Nuclepore 25 mm 200nm membran filtre</td><td>VWR</td><td>515-2029</td><td></td></tr><tr><td>Whatmann Nuclepore 25 mm 400nm membran filtre</td><td>VWR</td><td>515-2030</td><td></td></tr><tr><td>Whatmann Nuclepore 25 mm 800nm membran filtre</td><td>VWR</td><td>515-2032</td><td></td></tr><tr><td>Whatmann Filtre kağıdı</td><td>VWR</td><td>230600</td><td></td></tr><tr><td>25 ml yuvarlak tabanlı şişe</td><td>VWR</td><td>201-1352</td><td>14/23 NS</td></tr><tr><td>3 ml cam çıtçıtlı bardak</td><td>VWR</td><td>548-0554</td><td>ND18, 18x30mm</td></tr><tr><td>2.5 ml cam şırınga</td><td>Hamilton</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sodyum dihidrojen fosfat dihidrat</td><td>Merk</td><td>1.06342</td><td>Fosfat tamponu yapmak için kullanılan tuz</td></tr><tr><td>di-Sodyum hidrojen fosfat</td><td>Merk</td><td>1.06586</td><td>Fosfat tamponu yapmak için kullanılan tuz</td></tr><tr><td>Sıvı Azot</td><td>Karbagas-</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Basınçlı Azot gazı</td><td>Carbagas-200</td><td></td> <td>bar şişe</td></tr><tr><td>Lipid Ekstruder 10 ml</td><td>Lipex-Termovaril</td><td></td> <td>ile tam donanımlı</td></tr><tr><td>Yüksek basınçlı PVC tüp</td><td>GR NETUM-4</td><td></td> <td>MPa'dan fazla</td></tr><tr><td>dayanmalıdır Serto adaptörleri</td><td>Sertot-Nitril</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>eldivenler</td><td>VWR-2</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>ml cam pipetler</td><td>VWR</td><td>612-1702</td><td>230 mm uzunluğunda</td></tr><tr><td>Diyot Lazer</td><td>Newport</td><td>LPM635-25C</td><td></td></tr><tr><td>DSP Çift Fazlı Kilitli Amplifikatör</td><td>SRS</td><td>SR830</td><td></td></tr><tr><td>Fotodiyot Dedektörü</td><td>Silonex Inc.</td><td>SLSD-71N5</td><td>5mm2, Silikon, foto iletken</td></tr><tr><td>5,5 T Kriyojenik Manyetik</td><td>Kriyojenik/Oerlikon</td><td></td> <td>AG-12 bar O soğutmalı. RW4000/6000 kompresör, RGD 5/100 TA kriyo kafası</td></tr><tr><td>İkinci dereceden alçak geçiren filtre</td><td>ev</td> <td>yapımı-Doğrusal</td> <td>güç kaynağı 24V DC, ikinci sıra, Sallen Anahtarı, kesme frekansı 360 Hz, +/- 12V, maksimum 10 mA</td></tr><tr><td>Fotoelastik modülatör</td><td>Hinds aletleri</td><td>PEM-90</td><td></td></tr><tr><td>Glan-Thompson Kalsit Polarizör</td><td>Newport</td><td>10GT04</td><td>25,4 mm çap</td></tr><tr><td>Kuvars numune küveti</td><td>Hellma</td><td>165-10-40</td><td>sıcaklık kontrollü hücre, 0,8 ml, 10 mm yol uzunluğu</td></tr><tr><td>Sıcaklık probu</td><td>Termokontrol Tipi</td><td></td> <td>K, 0,5 mm çap, Thermocoax</td></tr><tr><td>Polarize olmayan aynalar</td><td>Newport</td><td>50326-1002</td><td>25,4 mm</td></tr><tr><td>RS 232 kablolar</td><td>Ulusal Aletler</td><td>189284-02</td><td>Kompakt FieldPoint Kontrolörleri BNC 50 & Omega'nın önündeki RS-232 Bağlantı Noktasına Bağlantı için</td></tr><tr><td>; Kablo ve konektörler</td><td>Ulusal Aletler</td><td>763389-01</td><td></td></tr><tr><td>cFP-AI-110</td><td>Ulusal Aletler</td><td>777318-110</td> Kompakt FieldPoint cFP-CB-1 <td>için 8 Kanallı Analog Voltaj ve Akım</td></tr><tr><td></td><td>Giriş Modülü Ulusal Aletler</td><td>778618-01</td><td>Kompakt FieldPoint G/Ç</td></tr><tr><td>cFP-CB-3</td><td>Ulusal Cihazlara</td> Kablolama için Entegre Konnektör Bloğu <td>778618-03</td><td>Termokuplları cFP-TC-120 Modülüne Bağlamak için Entegre İzotermal Konnektör Bloğu</td></tr><tr><td>cFP-TC-120</td><td>Ulusal Aletler</td><td>777318-120</td><td>Kompakt FieldPoint için 8 Kanallı Termokupl Giriş Modülü</td></tr><tr><td>cFP-1804</td><td>Ulusal Aletler</td><td>779490-01</td><td>NI Compact FieldPoint</td></tr><tr><td>LabView 2010</td> için Ethernet/Seri <td>Arabirim Ulusal</td> <td>Aletler-Endüstriyel</td><td></td></tr> <tr><td>güç tedarik</td><td>Traco Power</td><td>TCL 060-124</td><td>100-240V AC</td></tr><tr><td>Su banyosu</td><td>Julabo</td><td>FP40-HE</td><td>soğutmalı/Isıtmalı Sirkülatör</td></tr></tbody></table>

İmalat işlemleri ve birefringence ölçümler manyetik olarak duyarlı lanthanide iyon şelat fosfolipid derlemeler tasarlama

Fabrication Procedures and Birefringence Measurements for Designing Magnetically Responsive Lanthanide Ion Chelating Phospholipid Assemblies

Bicelles lipid karışımları çok sayıda oluşmuş akort disk benzeri polymolecular derlemeler vardır. Uygulamalar nanoteknolojik gelişmeler optik aktif ve manyetik olarak değiştirilebilir jelleri oluşumu da dahil olmak üzere membran proteini yapısal çalışmalar Nükleer manyetik rezonans (NMR) arasında değişir. Bu tür teknolojiler derleme boyutu, manyetik yanıt ve termal direnci yüksek kontrol gerektirir. Karışımları 1,2-dimyristoyl -sn- glycero-3-phosphocholine (DMPC) ve onun lanthanide iyon Fosfolipid eşlenik, 1,2 şelat (Ln3 +)-dimyristoyl -sn- glycero-3-fosfo-etanolamin-diethylene triaminepentaacetate () DMPE-DTPA), manyetik olarak son derece duyarlı derlemeler gibi DMPC/DMPE-DTPA/Ln3 + içine monte (molar oranı 4:1:1) bicelles. Kolesterol (CHOI-OH) ve başka bir küme benzersiz FİZİKO-kimyasal özellikleri sunan birleştirmeler bilayer sonuçlarında steroid türevleri giriş. Verilen lipid kompozisyon için manyetik alignability bicelle boyutuyla orantılıdır. Ln3 + complexation büyüklüğü ve hizalama yönü açısından görülmemiş manyetik yanıt sonuçlanır. Disk benzeri yapıları termo-tersinir çöküşü içine veziküller Isıtma üzerine derlemeler boyutları ekstrüzyon tarafından tanımlanmış gözenek boyutları ile membran filtreleri ile terzilik sağlar. Manyetik olarak alignable bicelles 5 ° C, vezikül öncüleri tarafından tanımlanan derleme boyutları sonuçlanan soğutma tarafından yeniden oluşturulur. Burada, bu üretim yordamı açıkladı ve tüm derlemeler manyetik alignability birefringence ölçümleri 5,5 T manyetik alan altında tarafından sayılabilir. Fosfolipid bilayer kaynaklanan birefringence sinyal daha da bilayer içinde meydana gelen polymolecular değişiklikleri izleme sağlar. Bu basit tekniği yaygın olarak bicelles karakterize etmek için istihdam edilmektedir NMR deneyler için tamamlayıcı.

Bir sigara kalıptan çekilmiş DMPC/DMPE-DTPA/Tm3 + birefringence sinyal (molar oranı 4:1:1) örnek bir Isıtma ve soğutma döngüsü 5 ila 40 ° C ve 1 ° C/dk (şekil 6) oranında geri sırasında 5,5 T manyetik alan altında izlenir. Birefringence sonuçları 5 ° c değeri yüksek manyetik hizalamaları 1.5 x 10-5, iki kat daha güçlü bildirilen ekstrüzyon sistemleri gelince doğruladı. 6 , 7 <sup...

İmalat işlemleri polymolecular derlemeler şelat manyetik olarak son derece duyarlı lanthanide iyon için sunulmaktadır. Manyetik yanıt ekstrüzyon nanopore membranlar yoluyla tarafından hazırlanmıştır derleme boyutu tarafından belirlenir. Derlemeler manyetik alignability ve yapısal değişiklikler sıcaklık kaynaklı birefringence ölçümleri, Nükleer manyetik rezonans ve küçük açı nötron saçılma için ücretsiz bir teknik tarafından izlenir.

İmalat işlemleri ve Birefringence ölçümler manyetik olarak duyarlı Lanthanide iyon şelat Fosfolipid Derlemeler tasarlama

Bicelles are tunable disk-like polymolecular assemblies formed from a large variety of lipid mixtures. Applications range from membrane protein structural ...

Bu prosedürün genel amacı, manyetik olarak yüksek derecede duyarlı lantanit iyon şelatlama polimoleküler düzenekleri üretmek ve çift kırılma ölçümleri ile manyetik yanıtı kolayca izlemektir. Çift kırılma ölçümleri, hizalamayı izlemek için alternatif ve nispeten kolay bir yol sağlayarak, çift seller gibi manyetik olarak duyarlı polimoleküler düzeneklerin tasarımındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu polimoleküler düzeneklerin ana avantajı, manyetik lantanit iyonları başına sayılarla ilişkilendirerek bir veya iki tesla kadar düşük alan kuvvetinde rafine edilmemiş ve ayarlanabilir bir manyetik tepki verme yeteneğidir.Çift kırılma arayıcısının izlenmesi, bisel tasarımı için önemli bilgiler sağlasa da, aslında nörokristalin sedololar veya demir oksit nanopartikülleri ile katkılı amiloid lifleri gibi diğer manyetik olarak duyarlı sistemlerin çalışmasına da uygulanabilir. Prosedüre başlamak için, gerekli miktarlarda DMPC, DMPE-DTPA, Kolesterol ve Tulyum (III) klorür stok çözeltilerini ölçmek için 2,5 mililitrelik bir cam şırınga ve üç mililitrelik geçmeli kapaklı şişeler kullanın. Stok çözeltilerini 25 mililitrelik yuvarlak tabanlı bir şişede birleştirin.Her bir şişeyi, ilgili stok çözeltisinde kullanılan 2,5 mililitre çözücü ile şişeye durulayın. Şişeyi döner bir buharlaştırıcıya sıkıştırın. Çözücüyü karışımdan 30.000 Pascal'ın altında 40 santigrat derecede, sadece viskoz şeffaf bir film kalana kadar çıkarın.Basıncı 100 Pascal'a düşürün ve kuru bir lipit filmi elde etmek için numuneyi en az iki saat çizmeye devam edin. Ardından, şişeyi bir dakika boyunca argonla yıkayın. Şişeyi parafin film ile kapatın ve numuneyi 18 santigrat derecede saklayın.Lipiti yeniden sulandırmaya hazır olduğunda, şişeye üç mililitre 15 milimolar pH 7.4 fosfat tamponu ekleyin. Şişeyi, sıvı nitrojenin artık kaynamaması ile gösterildiği gibi, numune tamamen donana kadar sıvı nitrojen banyosunda döndürün. Ardından, şişeyi 60 santigrat dereceye ayarlanmış bir su banyosunda 5 dakika döndürün.Numune tamamen sıvı hale geldiğinde, numuneyi 30 saniye boyunca vorteksleyin. Son dondurma adımından sonra, numuneyi iki ısıtma-soğutma döngüsü ile stabilize edin. İlk olarak, ekstrüzyon için istenen gözenek boyutuna sahip rayla oyulmuş polikarbonat membran filtreler elde edin.10 mililitrelik bir lipid ekstrüderi, silikon uçlu cımbız yardımıyla ceketli bir numune kabı ile birleştirmeye başlayın. Membran filtrenin en iyi şekilde yerleştirilmesi için destek ağını ve polyester tahliye diskini ıslatmak için birkaç damla fosfat tamponu kullanın. O-ringi dikkatlice membran filtrenin üzerine yerleştirin.Membran üzerinde kıvrım veya kırışıklık olmadığından emin olun. Lipid ekstrüderinin montajını tamamlayın ve ceketli numune kabını sıcaklık kontrollü bir su sirkülatörüne bağlayın. Sirkülatör su banyosunu 60 santigrat dereceye ısıtın ve sirkülasyonu başlatın.Ekstrüderi, yüksek basınçlı PVC boru ve hızlı bağlantı parçaları kullanarak basınçlı bir nitrojen gazı şişesine bağlayın. Ekstrüzyon basıncını membran gözenek boyutu için uygun değere ayarlayın. Numuneyi ceketli kaba eklemek için iki mililitrelik bir cam pipet kullanın.Kabı kapatın ve numunenin 30 ila 60 saniye dengelenmesine izin verin. Numune çıkış tüpünün ucunu numune şişesine yerleştirin. Ardından, numune çıkış tüpünü sabit tutarken ekstrüdere nitrojen akışını açın.Numune ekstrüzyonu bittiğinde, ekstrüderi havalandırın ve ekstrüde edilmiş numuneyi ceketli kaba aktarmak için aynı iki mililitrelik cam pipeti kullanın. Bu şekilde 10 ekstrüzyon döngüsü gerçekleştirin. Membran filtreyi tıkanmaya başladığında değiştirin.Ekstrüzyonu istediğiniz gibi daha küçük gözenek boyutlarında tekrarlayın. Çift kırılma ölçüm cihazını açın ve kurun. Ardından, numuneyi 10 milimetre yol uzunluğuna sahip sıcaklık kontrollü bir kuvars küvete yerleştirin.Küveti beş santigrat dereceye ayarlanmış harici bir su banyosuna bağlayın. Kapaktaki bir açıklıktan numuneye 0,5 milimetre kalınlığında k tipi bir termokupl yerleştirin. Numune beş santigrat dereceye ulaşana kadar termokupl okumasına göre su banyosu sıcaklığını ayarlayın.Küveti mıknatısın deliğine yerleştirin. Küvetin ötesindeki lazer yolunda bir kağıt yaprağı tutarak ve termokuplun oluşturduğu gölgeleri arayarak termokuplun lazer yolunda olmadığını doğrulayın. Numunenin sıcaklığını doğrudan izlemek önemlidir, ancak prob lazer ışığının önünde olmamalıdır.Bu, küvetten sonra lazer yoluna yerleştirilen ve gölge arayan beyaz kağıt ile kolayca kontrol edilir. Yoğuşma oluşumunu önlemek için küvete 10.000 Pascal'da oda sıcaklığında kuru basınçlı hava akışı uygulayın. Amplifikatörün aşırı yüklenmediğinden ve ekranda dörtten fazla kırmızı çubuk görünmediğinden emin olarak amplifikatör hassasiyet çarpanlarını seçin.Ardından, her iki kilitli amplifikatörü de otomatik hale getirin. Numunenin bulanıklığı, polimoleküler yeniden düzenlemeler nedeniyle bir sıcaklık döngüsü sırasında önemli ölçüde değişebilir. En yüksek bulanıklık genellikle düşük sıcaklıklarda meydana gelir ve ısıtma sırasında sinyalin aşırı yüklenmesini önlemek için hassasiyet beş santigrat dereceye çok yüksek ayarlanmamalıdır.Örnek adını ve kilitli amplifikatör hassasiyetlerini doldurun. Ölçüm için bir dosya adı girin ve verileri günlüğe kaydetmeye başlayın. Ardından, ölçüm programını kullanarak manyetik alanı 5.5 Tesla'ya yükseltin.İstenildiği gibi çeşitli numune sıcaklıklarında ve manyetik alan kuvvetlerinde çift kırılma sinyali verilerini elde edin. 800 nanometre gözenekli zarlardan ekstrüde edilen kolesterol katkılı bisellerin çift kırılma sinyali, artan manyetik alan kuvveti ile artmış ve 5.5 Tesla'da en yüksek çift kırılma elde edilmiştir. Gözenek boyutları azalan membranlardan 60 santigrat derecede ardışık ekstrüzyonlar, beş santigrat derecede çift kırılma değerlerinin azalmasına neden oldu.Mutlak hizalama faktöründe de bir azalma gözlendi. Bu sonuçlar, manyetik hizalamanın, vezikül öncülerinin ekstrüzyonu ile bisel boyutlarının ayarlanmasıyla ayarlanabileceğini gösterdi. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik, birçok numuneyi etkili bir şekilde taramak ve en umut verici adayları belirlemek için günlük olarak yapılabilir ve gerekli sıcaklık aralığında optimum bir manyetik reaz bağları sağlar.Bu prosedürle en umut verici numunenin başarılı bir şekilde tanımlanmasının ardından, düzeneklerin fiziksel kimyasal özelliklerinin yapısı hakkında ek soruları yanıtlamak için küçük açılı nötron saçılımı veya kriyo transmisyon elektron mikroskobu gibi yöntemler gerçekleştirilebilir. Burada sunulan biseller gibi lipid düzenekleriyle çalışırken, sakin bir ortamda temiz cam eşyalarla çalışmak önemlidir. Bu iş için cam eşyalar ayırmanızı ve kloroform ile yıkamanızı öneririz.

fabrication-procedures-birefringence-measurements-for-designing

Research

JoVE Journal

Engineering

Mühendislik

MACS ve Annexin V-konjuge manyetik boncuk ve hedef lipid ve Annexin V-bağlayıcı fosfatidilserin sentezlenen lipid veziküller hedef lipid protein etkileşim test etmek için. Ortak hedef lipid bağlı Proteinler saflaştırılmış ve boncuk elüsyon sonra analiz edilir.

Manyetik Aktif Hücre Ayırma (LIMACS) kullanarak Lipid veziküllü aracılı Afinite Kromatografisi: Protein-lipit Etkileşim Analiz Roman Yöntemi

Biz metalation, arıtma, ve lantanide komplekslerin karakterizasyonu göstermektedir. Burada açıklanan komplekslerinin manyetik rezonans görüntüleme kullanarak bu moleküllerin izlemeyi etkinleştirmek için makromoleküllerin konjuge olabilir.

Manyetik Rezonans Görüntüleme için hazırlanması, Saflaştırılması ve lantanide Kompleksleri Kontrast Ajanlar Kullanım Karakterizasyonu

Desteklenen ikili lipid tabakalarıdır ve doğal zar parçacıkları hücre zarlarının özelliklerini yaklaşık ve analitik çeşitli stratejiler dahil edilmesi uygun sistemlerdir. Burada destekli lipid iki katmanlı kaplı SiO 2 boncuklar, fosfolipid vezikülleri ya da doğal zar parçacıklarının oluşan mikrodizileri hazırlanması için bir yöntemi göstermektedir.

Bir Çekçek tabanlı Meclisi Yöntemi ile Biomembrane Mikroarray&#39;ler oluşumu

Biz lipid veziküller kullanmadan katı yüzeyler üzerinde desteklenen lipid çift oluşturmak için deneysel bir protokol mevcut. Çeşitli biyolojik uygulamalarda, kolesterol açısından zengin bir etki ile, bir lipid, silikon dioksit ve altın iki tabakalı olarak desteklenen zarları meydana getirmek üzere, bir aşamalı bir yöntemi göstermektedir.

Solvent destekli çift katlı lipid (SALB) Yöntemi ile biyomembran Fabrikasyon

Bu makale, Elektron Paramanyetik Rezonans çalışmaları için pentamerik ligand kapılı kanalların bölgeye yönelik spin etiketleme ve yeniden yapılandırma yöntemlerini açıklar. Bu protokol herhangi bir zar proteini için uyarlanabilir. Burada açıklanan sulandırma yöntemi, tanımlanmış bir lipit sistemindeki makroskopik ve tek kanallı akımların yama-kelepçe ölçümleri için de kullanılabilir.

Site Yönetmen Spin Etiketleme ve pentameric ligand-kapılı iyon Kanallarının EPR Spektroskopik Çalışmaları

Bir depolanabilir, taşınabilir lipit iki katmanlı oluşum sistemi göstermektedir. Dondurulmuş bir membran ön-madde çevre sıcaklığına getirildiğinde bir lipid iki-tabakalı zar üzerinden% 80 başarı oranı ile 1 saat içinde oluşturulabilmektedir. Bu sistem iyon kanalları ile ilişkili zahmetli süreçler ve uzmanlık azaltacaktır.

Bir polidimetilsiloksan İnce Film Kullanarak Otomatik çift katlı lipid Membran Oluşumu

Biz bir sıvı lipid iki katmanının çevrili nanometrik protein yamaları ile cam fonksiyonel hale getirilmesi için bir protokol mevcut. Bu alt tabakalar gelişmiş optik mikroskop ile uyumludur ve hücre yapışması ve göç çalışmaları için platform olarak hizmet etmesi beklenmektedir.

Bir Desteklenen lipit iki tabakalı içinde Ligand Nano küme Diziler

Burada, bir protokol fucoxanthin klorofil a/c proteinler (FCP) Diyatomlarla dan ayırmak ve onları uyarma enerji transferi iyon kompozisyon değişiklikleri üzerine çalışmaya doğal lipit kompozisyonları ile lipozomlar içine dahil mevcut.

İzole ve ışık-hasat antenler Diatom Cyclotella Meneghiniana lipozomlar Thylakoid lipidler ile gelen ekleme

Yumuşak, düşük güçte, benzer kompozisyon, yapısı ve biyo-sinapslarda mekanizmaları geçiş biyomoleküler memristors kaldıraç. Burada sunulan bir araya getiren ve biyomoleküler memristors karakterize için bir protokol lipid bilayers Su damlacıkları yağı arasında oluşan yalıtım elde edilir. Gerilim-harekete geçirmek alamethicin peptidler sonuçlarında memristive iyonik gürültülerinden membran arasında birleşme.

Derleme ve biyomoleküler iyon kanal katkılı Lipid membranlar oluşan Memristors karakterizasyonu

Burada, bir proteinin fosfatidiylserine veya fosfatidiliinositol 4-fosfat in vitro'yuayıklayıp taşımadığını belirlemek için floresan lipid sensörleri ve lipozomlar kullanarak protokolleri açıklıyoruz.

Membranlar Arasında Fosfataylserine/Fosfatidiylinositol 4-Fosfat Değişiminin Floresan Bazlı Ölçümleri

Burada, in vitro eğrilik algılama yeteneğine sahip proteinlerin karakterizasyonunu sağlayan tanımlanmış bir eğriliğe sahip sentetik bir membran sağlamak için nanobar destekli bir lipit çift katmanlı sistem geliştirilmiştir.

İn vitro Membran Eğriliği Algılama Proteinlerinin Çalışması için Nanobar Destekli Bir Lipid Çift Katmanlı Sistem

Keşfedin lantanit iyon şelatlayan polimoleküler yapıların imalatını ve çift kırınım ölçümleriyle manyetik yanıtın izlenmesini. Bu yöntem, düşük alan şiddetlerinde ayarlanabilir manyetik yanıt sunan sistemlerin tasarımına olanak tanır.

İmalat işlemleri ve Birefringence ölçümler manyetik olarak duyarlı Lanthanide iyon şelat Fosfolipid Derlemeler tasarlama

Daha fazla video keşfet