Trombosit transfüzyonları Microparticles için yöntem eleme rutin

Bu yöntemin genel amacı, trombosit transfüzyonlarını, bu kan ürünlerinin kanama veya kan kanseri hastaları için kullanımını optimize etmek için donör merkezlerinde veya hastane kan bankalarında gerçekleştirilebilecek rutin testlerle karakterize etmektir. Bu yöntem, bir trombosit transfüzyonunun aktive edilmiş veya aktive edilmemiş trombositler içerip içermediği gibi transfüzyon tıbbındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin ana avantajı, trombosit aktivasyonunun kanıtlanmış bir göstergesi olarak mikropartikül içeriği için hızlı ve doğru bir ekran sağlamasıdır.

Bu yönteme yeni olan kişilerin, torbaların boru segmentlerinden nasıl numune alınacağını öğrenmeleri gerekecektir, çünkü bu şu anda rutin olarak yapılmamaktadır. Bu yöntem için ilk olarak, farklı donörlerden gelen trombositlerin aktivasyon durumunda yüksek değişkenliğe sahip olduğunu gördüğümüzde aklımıza geldi ve bunun hasta üzerinde bir etkisi olduğu görülüyordu. Bir trombosit konsantresinden numune elde etmek için üç yöntem vardır.

Bir poşetten numune almak için, trombosit torbasının içeriğini beş saniye boyunca hafif yatay hareketlerle, uçtan uca beş kez eğilerek iyice karıştırın. Kelepçeyi poşete açın, poşet boşaltılır ve kendi kendine dolar. Dinamik Işık Saçılımı veya DLS testi için sadece 100 mikrolitrelik bir numune gerekeceğinden poşetin tamamen doldurulması gerekli değildir.

Bağlantı borusunu bir boru kapatıcı ile ısıyla kapatarak poşeti torbadan ayırın. Boş tüpten numune alırken, trombosit torbası hortumunun boş olarak saklandığını ve tüp bloğunun hala yerinde olduğunu doğrulayın. Tüpte trombosit konsantresi olmadığını doğrulamak için tüpü görsel olarak inceleyin.

Sıyırıcıyı kapalı tutarken boruyu silindirler arasında sıkıştırmak için kolları sıkıştırarak boru bloğuna mümkün olduğunca yakın olacak şekilde boru üzerindeki boru sıyırıcıyı kapatın, boru bloğunu serbest bırakın. Sıyırıcıyı boş borudan yavaşça aşağı çekin ve borunun sıyırıcının arkasını yavaşça doldurmasına izin verin. Sıyırıcının altındaki bölüm tamamen şişene kadar veya sıyırıcı borunun ucunun bir inç yakınına gelene kadar devam edin.

Tüp sıyırıcının kollarını sıkıca sıkıştırmak ve sıyırıcıyı borudan yavaşça aşağı çekmek çok önemlidir. Sıyırıcı ile durma noktasına ulaşıldığında, boruyu sıyırıcının bir inç üzerinde ısıyla kapatmak için boru kapatıcıyı kullanın. Şimdi, manuel tüp sıyırıcının kollarını serbest bırakın.

Test segmentini oluşturmak için önceki contanın bir ila iki inç üzerinde tekrar ısı yalıtımı yapın. Ardından, test segmentini trombosit ünitesinden kesin. Bu segment, DLS testi için kullanılacaktır.

Boş olmayan borudan numune alırken, torbayı dikey olarak asın ve yerindeyse boru bloğunu serbest bırakın. Herhangi bir önemli katı küme olup olmadığını belirlemek için boruyu görsel olarak inceleyin. Katı kümeler varsa, torbaya sıyrılamayacak şekilde üzerlerini kapatın.

Ardından, boru üzerindeki boru sıyırıcıyı, borunun sızdırmaz ucuna mümkün olduğunca yakın bir şekilde kapatın. Boruyu silindirler arasında sıkıştırmak için kolları sıkıştırarak borunun içindekileri torbaya soyun. Sıkıştırma kuvvetini korurken, boru sıyırıcıyı boru boyunca torbaya doğru hareket ettirin.

Trombosit torbasını asılı kancadan çıkarın ve sıyırıcıyı kapalı tutarken torbayı beş kez uçtan uca eğerek beş saniye boyunca hafifçe karıştırın. Sıyırıcıyı kapalı tutarken torbayı dikey olarak asın. Sıyırıcıyı boş borudan yavaşça aşağı çekin ve borunun sıyırıcının arkasını yavaşça doldurmasına izin verin.

Sıyırıcının altındaki bölüm tamamen şişene kadar veya sıyırıcı borunun ucunun bir inç yakınına gelene kadar devam edin. Sıyırıcı ile durma noktasına ulaşıldığında, sıyırıcının bir inç yukarısındaki boruyu ısıyla kapatmak için boru kapatıcıyı kullanın. Sıyırıcıyı serbest bıraktıktan sonra, test segmentini oluşturmak için önceki contanın bir ila iki inç yukarısına tekrar ısıyla yapıştırın.

Borunun son kısmını kesin ve atın. Ardından, test segmentini trombosit ünitesinden kesin. Bu segment, DLS testi için kullanılacaktır.

Bir sıçrama kalkanı ve temiz, kuru makas kullanarak torba hortumunun veya test segmentinin bir ucunu kesin. Numuneyi doğrudan açılan poşetten veya boru segmentinden kılcal damara çekmek için numune alma aracını kullanarak kılcal damarı hemen doldurun. Doldurulmuş kılcal damarın alt kısmını, kılcal boru sızdırmazlık maddesine hafifçe iterek kapatın, aynı zamanda tepsiye hafif bir büküm ve biraz baskı uygulayın.

Ardından, 100 mikrolitrelik sabit hacimli pipeti ve ucu kılcal damardan ayırın ve kılcal damarın kıl boru sızdırmazlık maddesine sıkıca gömülü kalmasını sağlayın. Kılcal boruyu sızdırmazlık tepsisinden kılcal boru sızdırmazlık tepsisinden çıkarın ve izopropil bir alkol pedi ile silin. Kılcal damarın altını hafifçe vurarak hava kabarcıklarının sıkışmadığından emin olun.

Son olarak, kılcal damarı DLS sistemine yerleştirin. Başlamak için konsolu başlatın, oturum açmak için dokunmatik ekrandaki talimatları izleyin ve bir trombosit örneğinin mikropartikül içeriğini ölçmek için yeni bir DLS testi başlatmak için mikropartiküller veya MP test seçeneğini seçin. Örnek bilgileri bir barkod tarayıcı kullanarak girin veya manuel olarak girin.

Talimat verildiğinde kılcal damarı DLS sistemine yerleştirin ve testi başlatın. Test tamamlandığında, numuneyi kılcal tutucudan çıkarın ve sarf malzemelerini tesis yönergesine göre uygun şekilde atın. Trombosit torbasını sonuca karşılık gelen renkle etiketleyin.

Örneğin, etkinleştirilmemiş için turuncu ve etkinleştirilmiş için pembe. Dinamik Işık Saçılımı, Brown hareketi ile süspansiyon halinde hareket eden parçacıkların hızını ölçer. Farklı hızlara bağlı olarak, küçük parçacıklar hızlı hareket eder ve büyük parçacıklar yavaş hareket eder.

Bu teknoloji, bir numunenin boyut dağılımını belirler. DLS, bu transfüzyonun %15'ten daha az mikropartikül içeriğine dayalı olarak aktive edilmemiş trombositler içerdiğini belirler. Doğrusu. Çoğunlukla çok az mikropartikül içeren diskoid trombositler mikroskopi ile görülebildi.

Bununla birlikte, çıplak gözle tam olarak aynı görünen farklı bir trombosit transfüzyonu,% 15'ten fazla mikropartikül içeriğine dayanan aktive edilmiş trombositler içeren ilk torba ile aynıdır. Bu örnekte, çeşitli trombosit morfolojileri, küçük agregalar ve birçok mikropartikül mikroskopi ile görülebildi. Bu videoyu izledikten sonra, bir trombosit envanterinin kullanımını optimize etmek için bir trombosit torbasından noninvaziv olarak nasıl numune aldığınızı, kılcal damarı nasıl doldurduğunuzu ve numuneyi mikropartikül içeriği açısından nasıl test ettiğinizi iyi anlamış olmalısınız.

Bu prosedürü denerken, iyi ve temsili bir numune elde etmek için torbayı iyice karıştırmak önemlidir. Ve bu prosedürü takiben, mikropartiküllerin hücresel kökeni ile ilgili soruları cevaplamak için akış sitometrisi gibi başka yöntemler de yapabilirsiniz. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik yaklaşık iki buçuk dakika içinde gerçekleştirilebilir.

Beş dakikalık testle birlikte, trombosit transfüzyonları sekiz dakikadan daha kısa sürede karakterize edilebilir. Geliştirildikten sonra, bu teknik hastane kan bankalarının trombosit envanterlerini taramasına, hematoloji / onkoloji hastalarını sadece aktive edilmemiş trombositlerle tedavi etmesine ve kullanılan trombosit transfüzyonlarında bir azalma gözlemlemesine izin verdi. Dediğimiz gibi, en güvenli transfüzyon verilmeyen transfüzyondur.

Bu yöntem, transfüzyondan önce trombositlerin karakterizasyonu hakkında bilgi sağlasa da, trombositten zengin plazmayı doğrudan donörlerden test etmek için de kullanılabilir. Bu tekniğin etkileri, kan kanseri hastalarının tedavisine yöneliktir, çünkü refrakter olma riskini azaltan aktive edilmemiş trombosit transfüzyonlarından yararlanırlar.