Name: Evreleme pupa dönemi ve ölçüm kanat pigmentasyon Drosophila guttifera yöntemleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-01-24T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 3 s
Description: Öğrenin Drosophila guttifera pupa evreleme ve kanat pigmentasyonu ölçme yöntemlerini. Bu teknik evrimsel gelişim biyolojisinde yetişkin özelliklerin gelişim mekanizmalarını incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz Sean B. Carroll ve Thomas Werner sinek hisse senetleri, Naoyuki sigorta donanımları için Byung Seok Jin filme, Kiyokazu rehberlik için Agata ve Elizabeth İngilizce düzenleme Nakajima'onun yardım sağlamak için teşekkür ederiz. Bu eser KAKENHI tarafından desteklenen 17K 19427 ve Takeda Bilim Vakfı.

<ol><li>Carson, H. L., Hardy, D. E., Spieth, H. T., Stone, W. S. The evolutionary biology of the Hawaiian Drosophilidae. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCarson%2C+HL+%22Essays+in+evolution+and+genetics+in+honor+of+Theodosius+Dobzhansky%22">Essays in evolution and genetics in honor of Theodosius Dobzhansky</a>. Hecht, M. K., Steere, W. C. , Springer (Meredith Corporation). New York. 437-543 (1970).</li>
<li>Markow, T. A., O'Grady, P. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMarkow%2C+TA+%22Drosophila%3A+a+guide+to+species+identification+and+use%22">Drosophila: a guide to species identification and use</a>. , Academic Press. New York. (2006).</li>
<li>Patterson, J. T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPatterson%2C+JT+%22The+Drosophilidae+of+the+southwest%22">The Drosophilidae of the southwest</a>. 4313, University of Texas Publication. 7-216 (1943).</li>
<li>Setoguchi, S., Takamori, H., Aotsuka, T., Sese, J., Ishikawa, Y., Matsuo, T. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s10164-014-0399-z">Sexual dimorphism and courtship behavior in Drosophila prolongata.</a> J Ethol. 32 (2), 91-102 (2014).</li>
<li>Werner, T., Jaenike, J. <a target="_blank" href="http://humanities.lib.rochester.edu/drosophilaguide/">Drosophilids of the Midwest and Northeast</a>. , River Campus Libraries, University of Rochester. Rochester. (2017).</li>
<li>Arnoult, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emergence+and+diversification+of+fly+pigmentation+through+evolution+of+a+gene+regulatory+module%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Emergence and diversification of fly pigmentation through evolution of a gene regulatory module.</a> Science. 339 (6126), 1423-1426 (2013).</li>
<li>Camino, E. M., Butts, J. C., Ordway, A., Vellky, J. E., Rebeiz, M., Williams, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evolutionary+origination+and+diversification+of+a+dimorphic+gene+regulatory+network+through+parallel+innovations+in+cis+and+trans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">The evolutionary origination and diversification of a dimorphic gene regulatory network through parallel innovations in cis and trans.</a> PLoS Genet. 11 (4), e1005136(2015).</li>
<li>Gompel, N., Prud'homme, B., Wittkopp, P. J., Kassner, V. A., Carroll, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chance+caught+on+the+wing%3A+cis-regulatory+evolution+and+the+origin+of+pigment+patterns+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Chance caught on the wing: cis-regulatory evolution and the origin of pigment patterns in Drosophila.</a> Nature. 433 (7025), 481-487 (2005).</li>
<li>Glassford, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Co-option+of+an+ancestral+Hox-regulated+network+underlies+a+recently+evolved+morphological+novelty%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Cell%22%5BJournal%5D)">Co-option of an ancestral Hox-regulated network underlies a recently evolved morphological novelty.</a> Dev. Cell. 34 (5), 520-531 (2015).</li>
<li>Koshikawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancer+modularity+and+the+evolution+of+new+traits%5BTitle%5D)+AND+%22Fly%22%5BJournal%5D)">Enhancer modularity and the evolution of new traits.</a> Fly. 9 (4), 155-159 (2015).</li>
<li>Koshikawa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gain+of+cis-regulatory+activities+underlies+novel+domains+of+wingless+gene+expression+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Gain of cis-regulatory activities underlies novel domains of wingless gene expression in Drosophila.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 112 (24), 7524-7529 (2015).</li>
<li>McGregor, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphological+evolution+through+multiple+cis-regulatory+mutations+at+a+single+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Morphological evolution through multiple cis-regulatory mutations at a single gene.</a> Nature. 448 (7153), 587-590 (2007).</li>
<li>Tanaka, K., Barmina, O., Kopp, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+developmental+mechanisms+underlie+the+evolutionary+diversification+of+Drosophila+sex+combs%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Distinct developmental mechanisms underlie the evolutionary diversification of Drosophila sex combs.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (12), 4764-4769 (2009).</li>
<li>Werner, T., Koshikawa, S., Williams, T. M., Carroll, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+a+novel+wing+colour+pattern+by+the+Wingless+morphogen%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Generation of a novel wing colour pattern by the Wingless morphogen.</a> Nature. 464 (7292), 1143-1148 (2010).</li>
<li>Wittkopp, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraspecific+polymorphism+to+interspecific+divergence%3A+genetics+of+pigmentation+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Intraspecific polymorphism to interspecific divergence: genetics of pigmentation in Drosophila.</a> Science. 326 (5952), 540-544 (2009).</li>
<li>Lawrence, P. A., Morata, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compartments+in+the+wing+of+Drosophila%3A+a+study+of+the+engrailed+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Compartments in the wing of Drosophila: a study of the engrailed gene.</a> Dev Biol. 50 (2), 321-337 (1976).</li>
<li>Bainbridge, S. P., Bownes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staging+the+metamorphosis+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Embryol.+Exp.+Morphol%22%5BJournal%5D)">Staging the metamorphosis of Drosophila melanogaster.</a> J. Embryol. Exp. Morphol. 66, 57-80 (1981).</li>
<li>Ashburner, M., Golic, K. G., Hawley, R. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAshburner%2C+M+%22Drosophila%3A+A+Laboratory+Handbook%22">Drosophila: A Laboratory Handbook</a>. , 2nd ed, Cold Spring Harbor Laboratory Press. New York. (2005).</li>
<li>Fukutomi, Y., Matsumoto, K., Agata, K., Funayama, N., Koshikawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pupal+development+and+pigmentation+process+of+a+polka-dotted+fruit+fly%2C+Drosophila+guttifera+%28Insecta%2C+Diptera%29%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Genes+Evol%22%5BJournal%5D)">Pupal development and pigmentation process of a polka-dotted fruit fly, Drosophila guttifera (Insecta, Diptera).</a> Dev Genes Evol. 227 (3), 171-180 (2017).</li>
<li>Koshikawa, S., Fukutomi, Y., Matsumoto, K. Drosophila guttifera as a model system for unraveling color pattern formation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKoshikawa%2C+S+%22Diversity+and+evolution+of+butterfly+wing+patterns%3A+an+integrative+approach%22">Diversity and evolution of butterfly wing patterns: an integrative approach</a>. Sekimura, T., Nijhout, H. F. , Springer. New York. in press (2017).</li>
<li>True, J. R., Edwards, K. A., Yamamoto, D., Carroll, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+wing+melanin+patterns+form+by+vein-dependent+elaboration+of+enzymatic+prepatterns%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Drosophila wing melanin patterns form by vein-dependent elaboration of enzymatic prepatterns.</a> Curr Biol. 9 (23), 1382-1391 (1999).</li>
<li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIH+Image+to+ImageJ%3A+25+years+of+image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li>
<li>Izumitani, H. F., Kusaka, Y., Koshikawa, S., Toda, M. J., Katoh, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogeography+of+the+Subgenus+Drosophila+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29%3A+evolutionary+history+of+faunal+divergence+between+the+Old+and+the+New+Worlds%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Phylogeography of the Subgenus Drosophila (Diptera: Drosophilidae): evolutionary history of faunal divergence between the Old and the New Worlds.</a> PLoS ONE. 11 (7), e0160051(2016).</li>
<li>Resh, V. H., Cardé, R. T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aResh%2C+VH+%22Encyclopedia+of+Insects%22">Encyclopedia of Insects</a>. , 2nd ed, Academic Press. Burlington. (2009).</li>
<li>DeLean, A., Munson, P. J., Rodbard, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+analysis+of+families+of+sigmoidal+curves%3A+application+to+bioassay%2C+radioligand+assay%2C+and+physiological+dose-response+curves%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Simultaneous analysis of families of sigmoidal curves: application to bioassay, radioligand assay, and physiological dose-response curves.</a> Am J Physiol. 235 (2), E97-E102 (1978).</li>
<li>Robertson, C. W. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/jmor.1050590207/abstract">The metamorphosis of Drosophila melanogaster, including an accurately timed account of the principal morphological changes.</a> J Morphol. 59 (2), 351-399 (1936).</li>
<li>McKinney, M. L., McNamara, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMcKinney%2C+ML+%22Heterochrony%3A+the+evolution+of+ontogeny%22">Heterochrony: the evolution of ontogeny</a>. , Plenum Press. New York. (1991).</li>
<li>Hardie, D. C., Gregory, T. R., Hebert, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+pixels+to+picograms%3A+a+beginners%27+guide+to+genome+quantification+by+Feulgen+image+analysis+densitometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Histochem+Cytochem%22%5BJournal%5D)">From pixels to picograms: a beginners' guide to genome quantification by Feulgen image analysis densitometry.</a> J Histochem Cytochem. 50 (6), 735-749 (2002).</li>
<li>Koshikawa, S., Miyazaki, S., Cornette, R., Matsumoto, T., Miura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+size+of+termites+%28Insecta%2C+Dictyoptera%2C+Isoptera%29+and+wood+roaches+%28Insecta%2C+Dictyoptera%2C+Cryptocercidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Naturwissenschaften%22%5BJournal%5D)">Genome size of termites (Insecta, Dictyoptera, Isoptera) and wood roaches (Insecta, Dictyoptera, Cryptocercidae).</a> Naturwissenschaften. 95 (9), 859-867 (2008).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir çıkar çatışması var.

Burada pupa aşamaları, tanımını protokollerde pupa aşamaları sürelerini ve siyah noktalar üzerinde D. guttiferakanadında yoğunluğu ölçümü ölçme detaylı gözlem için puparium kaldırma açıklar. Bu protokoller için birçok Drosophila uygulanabilir ve sinek türleri, özellikle türler kanat pigmentasyon ile ilgili.
Daha da derinlemesine gözlem ve gelişimsel olaylarını daha ayrıntılı açıklamasını alt aşamaları sağlayacak. Birçok durumda, diseksiyon gerektiren veya bir pupa kesit geliş...

Drosophila morfolojik özelliklerin bazıları tür1,2,3,4,5arasında çeşitlendirilmiş. Soru yaklaşım olabilir bu türleri Morfoloji nesil mekanizmaları karşılaştırarak nasıl morfolojik çeşitlilik ortaya çıkar. Böyle türleri Morfoloji larva trichomes, yetişkin sex taraklar, dış genital aparatı, karın pigmentasyon ve kanat pigmentasyon6,7,8,9, örnekler 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15. yetişkinler arasında morfolojik farklılıklar çalışmaya, gözlem ve analiz pupa etap yetişkin özellikleri kaderi geç larva aşamalı olarak belirlenir ve sonraki morfogenez pupa döneminde gelirleri için önemlidir.
Drosophila melanogaster, gelişim biyolojisi çalışmalarında "saat APF" (pupa kuruluşundan sonra saat) bir pupa sahne16belirtmek için yaygın bir yöntemdir. Bu sistem ve pupa kuruluşundan sonra mutlak zaman istihdam rutin deneyler için çok uygundur. Ancak, gelişimsel hız pupa arasında farklı olabilir ve küçük genetik, epigenetik veya microenvironmental farkları tarafından etkilenebilir ve bu nedenle aynı sahip mutlak zaman pupa kuruluşundan sonra pupa aynı anda olduğunu garanti etmez gelişimsel sahne. Birçok durumda, Morfolojik özellikleri tarafından tanımlanan aşamaları birden çok kişiye karşılaştırmak için tercih edilir. Özellikle, türler arasında bir karşılaştırma kesin evreleme ve karşılık gelen (homolog) aşamaları arasında karşılaştırma gerektirir.
Bainbridge ve Bownes17 tanınan 20 pupa etap (P1 P15(ii)) için Drosophila melanogaster pupa morfolojik özelliklerini temel alarak. Bu evreleme morfolojik gelişim hazırlama18en çok kullanılan sistemdir. Bir önceki çalışmada, Pupa Drosophila guttifera kanat pigmentasyon çalışmalar19için bir temel oluşturmak üzere evreleme yapılır. D. guttifera kanat üzerinde siyah puanlı desene sahip ve kanat pigmentasyon oluşumu20modeli türlerinden biridir. Her ne kadar biz açıklanan morfolojik ölçütlere anılacaktır Bainbridge ve Bownes'17araştırma, doğrudan seri gözlemler19sahne süreleri Bainbridge ve Bownes tahmini kullanmak yerine tarafından sahne süreleri ölçülen gözlenen frekansı. Burada pupa hazırlama yöntemi ve Fukutomi ve ark19' kullanılan Drosophila pupa aşaması süreleri ölçümü açıklayın.
Kanat pigmentasyon gelişimsel mekanizması çalışmaya, Pupa veya yetişkin aşamasında pigmentasyon ortaya çıktığında bilmemiz gereken. Fukutomi ve ark. 19 kanat görüntüleri görüntü analizi tarafından pigmentasyon pupa ve yetişkin aşamaları sırasında optik yoğunlukları (ODs) sayılabilir. Drosophila kanatları pigmentasyon siyah melanin21birikimi tarafından neden olduğu düşünülmektedir. ODs miktar için gri tonlama görüntüler ve ImageJ yazılım (https://imagej.nih.gov/ij/)22 kullanılmıştır. Tanımak ve nokta özel pigmentasyon (ΔOD) ölçmek için biz bir noktadan OD içinde bir nokta dışında OD çıkarın. Tekrarlanabilir ve objektif bu yöntemi kullanabilmek için aşırı doz ölçüm yerlerin kanat damarlar yerler kullanarak tespit edilmelidir. Bu makalede, biz bu yöntemi miktar Drosophila guttiferakanat pigmentasyon, ayrıntılı olarak tarif.

<table><tbody><tr><td>Drosophila guttifera</td><td>U.C. San Diego'daki Drosophila Tür Stok Merkezi</td><td>15130-1971.10</td><td>Drosophila guttifera, bu makalede kullanılan bir meyve sineği türü</td></tr><tr><td>Plastik şişe</td><td>Hightech</td><td>MKC-30</td><td>Sinek stoğu bakımı için plastik şişe</td></tr><tr><td>Cam şişeler için vızıltı bujileri şişesi ve şişe kapakları</td><td>Fisher Scientific</td><td>AS-271</td><td>Sinek stoğu bakımı için selüloz tapa</td></tr><tr><td>Beyaz yumuşak şeker</td><td>Mitsui Sugar</td><td>J-500g</td><td>Beyaz yumuşak şeker, standart mısır unu/şeker/maya/agar yemi için</td></tr><tr><td>Mısır unu</td><td>Nippon Un Değirmenleri</td><td>F</td><td>Mısır unu, standart mısır unu/şeker/maya/agar yemi için</td></tr><tr><td>Mısır ezmesi - C</td><td>Nippon Un Değirmenleri</td><td>GC</td><td>Mısır ezmesi - C, standart mısır unu/şeker/maya/agar yemi için</td></tr><tr><td>Agar tozu</td><td>Matsuki Kanten Sangyo</td><td>No.602</td><td>Agar tozu, standart mısır unu/şeker/maya/agar gıdaları için</td></tr><tr><td>Kuru bira mayası</td><td>Asahi Food & Sağlık</td><td>Hizmetleri Y2A</td><td>Kuru bira mayası, standart mısır unu/şeker/maya/agar gıdaları için</td></tr><tr><td>Bütil p-hidroksibenzoat</td><td>Nacalai Tesque</td><td>06327-02</td><td>Bütil p-hidroksibenzoat, standart mısır unu/şeker/maya/agar gıdaları için</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Wako</td><td>057-00456</td><td>Etanol, standart mısır unu / şeker / maya / agar gıdaları için</td></tr><tr><td>Düz tabanlı mikrotüp</td><td>Ina Optica</td><td>CF-0150</td><td>1.5 mL mikrotüp, için pupa toplama</td></tr><tr><td>CAPSULEFUGE</td><td>Tomy</td><td>PMC-060</td><td>Mini mikrosantrifüj, pupa toplamak için</td></tr><tr><td>Sterilize Edilmiş Schale NB</td><td>Sansei Medical</td><td>01-013</td><td>Plastik Petri kabı (çap 90 mm x yükseklik 15 mm)</td></tr><tr><td>Serum tüp rafı</td><td>Iwaki</td><td>9796-050</td><td>Pupa'nın gözlemlenmesi için nemli bir oda olarak kullanılır</td></tr><tr><td>Corning Falcon Easy-Grip doku kültürü kabı</td><td>Corning</td><td>353001</td><td>Plastik Petri kabı (çap 35 mm x yükseklik 10 mm)</td></tr><tr><td>Falcon standart doku kültürü kabı</td><td>Corning</td><td>353002</td><td>Plastik Petri kabı (çap 60 mm x yükseklik 15 mm)</td></tr><tr><td>Push-pin</td><td>Kokuyo</td><td>51233709</td><td>Mikrotüp kapağında iğne delikleri açmak için Stereomikroskop</td></tr><tr><td></td><td>Olympus</td><td>SZX16</td><td>Stereomikroskop, morfolojik gözlem için</td></tr><tr><td>Dijital fotoğraf makinesi</td><td>Olympus</td><td>DSE-330-A</td><td>Dijital kamera, görüntüleme için</td></tr><tr><td>NICETACK çift taraflı bant</td><td>Nichiban</td><td>NW-15SF</td><td>Çift taraflı bant, puparium</td></tr><tr><td>Dumont #5 forsepslerini</td> çıkarmak için <td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11252-20</td><td>Forseps, puparium çıkarmak için</td></tr><tr><td>Van Gogh VISUAL Boya fırçası</td><td>Talens Japonya</td><td>GWVR-#5/0</td><td>Puparium Greiner'ı çıkarmak için boya fırçası</td></tr><tr><td>CELLSTAR 12 kuyulu hücre kültürü plakası</td><td>Merck</td><td>665-180</td><td>12 oyuklu hücre kültürü plakası, pupa dönemlerinin sürelerini ölçmek için</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Wako</td><td>191-01665</td><td>NaCl, PBS</td></tr><tr><td>KCl</td> için <td>Nacalai Tesque</td><td>285-14</td><td>KCl, PBS</td></tr><tr><td>Na2HPO4&middot için; 12H2O</td><td>Wako</td><td>196-02835</td><td>Na2HPO4&middot; 12H2O,</td></tr><tr><td>PBS için KH2PO4</td><td>Nacalai Tesque</td><td>28721-55</td><td>KH2PO4, PBS</td></tr><tr><td>Kademeli Nötr Yoğunluk (ND) Filtresi 0.04 - 3.0</td><td>için Edmund Optics</td><td>64-384</td><td>Kademeli yoğunluk filtresi, pigmentasyon ölçümünün kalibrasyonu için</td></tr><tr><td>ImageJ yazılımı</td><td>NIH</td><td>1.8.0-101</td><td>ImageJ yazılımı, bir kanattaki siyah noktaların yoğunluğunun ölçümü için (https://imagej.nih.gov)</td></tr><tr><td>FINE FROST cam slayt</td><td>Matsunami Glass Ind</td><td>FF-001</td><td>Kanattaki siyah noktaların yoğunluğunun ölçümü için cam slayt</td></tr><tr><td>Kare mikroskop kapak camı 18 x 18</td><td>Matsunami Glass Ind</td><td>C018181</td><td>Bir kanat üzerindeki siyah noktaların yoğunluğunun ölçümü için kapak kayması,</td></tr></tbody></table>

evreleme pupa dönemi ve ölçüm kanat pigmentasyon drosophila guttifera yöntemleri

Methods for Staging Pupal Periods and Measurement of Wing Pigmentation of Drosophila guttifera

Drosophila (meyve sineği) çeşitli türlerin gelişim ve genetik değişiklikler için evrimsel değişiklikler sorumlu mekanizmaları incelemek için fırsatlar sağlar. Özellikle, Yetişkin sahne Morfolojik özellikleri kanat pigmentasyon karşılaştırma da dahil olmak üzere interspecific karşılaştırma için zengin bir kaynağıdır. Türler arasında gelişimsel farklılıkları eğitim için detaylı gözlem ve uygun evreleme kesin karşılaştırma için gereklidir. Burada evreleme pupa dönemi ve bir polka noktalı meyve sineği Drosophila guttiferakanat pigmentasyon miktar için iletişim kuralları açıklar. İlk olarak, ayrıntılı morfolojik gözlem ve pupa aşamaları türleri üzerinde Morfoloji temel tanımını için yöntemi açıklanmaktadır. Bu yöntem pupa türleri Morfoloji detaylı gözlem etkinleştirmek için pupa, dış chitinous durumda puparium kaldırmak için bir yöntem içerir. İkinci olarak, tanımlanmış pupa aşamaları süresi ölçme yöntemi açıklanmaktadır. Son olarak, dijital görüntü ve ImageJ yazılım kullanarak görüntü analizi dayalı kanat pigmentasyon miktar için yöntemi açıklanmaktadır. Bu yöntemler ile yetişkin özellikleri ile gelişimsel süreçleri pupa evrelerinde karşılaştırmak için sağlam bir temel oluşturabilir.

D. guttifera pupa dönemine 17 aşamaları (P1 - P15(ii); görüntüler üç temsilcisi aşamaları (P1, P5 - 6, P10) şekil 3ve tüm 17 aşamaları şekil 4' te gösterilmiştir gösterilir) ayrılmıştır. Bainbridge ve Bownes17 20 D. melanogasteraşamalarında kabul rağmen bu aşamaların bazıları D. guttiferaiçin uygulanamadı. İki gelişimsel olayların sırası, sarı vücudun (kitle içindeki midgut<sup c...

Pupa dönemi ve kanat pigmentasyon Drosophila guttifera ölçümü evreleme için protokol açıklanmıştır. Evreleme ve pigmentasyon miktar yetişkin özellikleri ile gelişimsel mekanizmaları eğitim için sağlam bir temel sağlamak ve özellik geliştirme interspecific karşılaştırma etkinleştirin.

Evreleme pupa dönemi ve ölçüm kanat pigmentasyon Drosophila guttifera yöntemleri

Diversified species of Drosophila (fruit fly) provide opportunities to study mechanisms of development and genetic changes responsible for evolutionary ...

Bu deneyin genel amacı, pupa dönemlerini evrelemek ve Drosophila guttifera'nın kanat pigmentasyonunu ölçmektir. Bu yöntem, Drosophila'da pigmentasyon modellerinin nasıl geliştirildiği gibi evrimsel gelişimsel biyoloji alanındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, morfolojik gelişim ve pigmentasyon süreci hakkında detaylı bilgi edinebilmemizdir.Bu yöntem, Drosophila guttifera'nın morfolojik gelişimi ve pigmentasyon süreci hakkında fikir verebilse de, diğer Drosophila türlerine de uygulanabilir. Puparium çıkarmaya başlamak için, kağıt havlu parçasına bir parça çift taraflı bant yapıştırın. Çift taraflı bandın üzerine ventral tarafı yukarı bakacak şekilde bir pupa yerleştirin.Pupariumun ön tarafı ile iç pupa arasındaki boşluğu bulun. Forseps kullanarak bu boşluğun etrafındaki pupariumu kavrayın ve çıkarın. Ve pupa başının ön tarafını ortaya çıkarın.Bir forsepsin ucunu ön-arka eksene paralel hareket ettirerek yerleştirin. Puparium'u yerel olarak kırmak için forsepsin ucunu kaldırın. Kırılma pupariumun arka kısmına ulaşana kadar bu işlemi tekrarlayın.Puparium ve pupa bacaklar arasında bir boşluk oluştuğundan emin olun. Ve iç pupaya verilen zarar

methods-for-staging-pupal-periods-measurement-wing-pigmentation

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Özellikler için Fenotipik varyasyon cis-düzenleyici element (CRE) dizileri kontrol eden gen ekspresyonu mutasyonlar sonucu. Drosophila melanogaster kullanmak için türetilmiş yöntemler kantitatif değişiklikte ya da doğal olarak meydana gelen CRE türevleri aracılı gen ekspresyonu mekansal ve zamansal kalıplarının seviyelerini karşılaştırmak.

Uygulamalarda Kantitatif Karşılaştırılması Cis</emTransgenik>-Regulatory Element (CRE) Etkinlikler Drosophila melanogaster</em

Larva ve pupa da chordotonal organları immunostain ve görselleştirmek için bir...

Içinde proprioseptörlere Görselleştirmesi<em&gt; Drosophila</em&gt; Larva ve Pupa

Bu makale, bir böceğin pupariumunu çıkarırken, iç pupayı sağlam tutarken ve bu nedenle daha fazla araştırma için uygun hale getirme tekniğini açıklar. Örnek protokol, Drosophila guttifera ile prosedürü gösterir; ancak bu teknik diğer Drosophila türleri için de geçerlidir.

Böcek Puparium Giderimi: Pupa Araştırması İçin Bir Yöntem

Bu kağıdı doğrudan puparium aracılığıyla görüntü hücre davranışı hızlı bir tarama konfokal mikroskop kullanımını gösterir. Sağlam pupa davayı bırakarak, bu yöntem doğrudan çalışma zordur Drosophila bir gelişme aşamasında gözlem ve dinamik hücre süreçlerinin ölçülmesini sağlar.

Ve Pupa Durumunda sayesinde görüntüleme<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Doğru bir şekilde transkript veya proteinler Drosophila dokularda algılama yeteneğini kendi bereket ve yerelleştirme için geliştirme süreci ile ilgili eğitim için önemlidir. Pupa kanatları incelemek için basit bir yordam açıklaması burada. Bu kanatlar örnekleri çeşitli teknikler (immünhistokimya, PCR tahlil, vb) olarak kullanılabilir.

Drosophila Immunodetections veya PCR deneyleri için uygun pupa Wings incelemek için hızlı ve etkili bir yöntem

Drosophila yumurtalık kök hücre niş geliştirme eğitim için mükemmel model bir sistemdir. Larva ve yetişkin yumurtalık dissekan için yöntemleri yayımlanmış olsa, Pupa yumurtalık diseksiyonlarının ayrıntılı olarak yayınlanmamıştır farklı teknikler gerektirir. Burada diseksiyon, boyama ve pupa yumurtalık montaj için bir protokol anahat.

Diseksiyon ve Drosophila pupa yumurtalık boyama

Burada, canlı genel ve kas-tendon morfogenez gelişim süreçlerinin özellikle yaşam görüntüleme gerçekleştirmek için kullanımı kolay ve çok yönlü bir yöntem mevcut Drosophila pupa.

Vivo Kas-tendon morfogenez Drosophila pupa içinde görüntüleme

Bu protokol, Drosophila'nın embriyodan yetişkine kadar her gelişim aşamasındaki canlılığını değerlendirmek için tasarlanmıştır. Yöntem, farklı genotiplerin veya büyüme koşullarının canlılığını belirlemek ve karşılaştırmak için kullanılabilir.

Drosophila Melanogaster'In Embriyodan Yetişkine Canlılığını Değerlendirmek Için Doğrudan ve Basit Bir Yöntem

Bu protokol, meyve sineği metamorfoza uğrarken Drosophila abdominal epitelde hücre oryantasyonu ve doku büyüme dinamiklerinin görüntülenmesi ve analizi için tasarlanmıştır. Burada açıklanan metodoloji Drosophila veya diğer model organizmalarda farklı gelişimsel aşamaların, dokuların ve hücre altı yapıların incelenmesine uygulanabilir.

Pupal Evrelerinde Gelişen Drosophila Epitelinde Doku Oryantasyonu ve Büyüme Dinamiğinin Görüntülenmesi ve Analizi

Burada, pupa evresinde Drosophila bacağının uzun süreli canlı görüntülenmesi için pupariumun tamamen çıkarılmasını içeren bir protokol sunulmaktadır. Bu protokol diğer dokulara da uygulanabilir.

Puparium çıkarıldıktan sonra Drosophila pupa bacak gelişiminin uzun süreli canlı görüntülenmesi

Drosophila , miyogenezin temel mekanizmalarını anlamak için güçlü bir modeldir. Toraks hemi-sezaritlerinin diseksiyonu ve hazırlanması için bu protokol, hem pupa hem de yetişkin aşamalarından dolaylı uçuş kasının mikroskopi analizini sağlar. Bu protokol, hücresel morfolojinin, protein lokalizasyonunun, kas yapısının ve miyogenezin diğer birçok yönünün konfokal görüntülenmesini sağlar.

Mikroskopi Yaklaşımları için Drosophila melanogaster Dolaylı Uçuş Kaslarının Diseksiyonu

Öğrenin Drosophila guttifera pupa evreleme ve kanat pigmentasyonu ölçme yöntemlerini. Bu teknik evrimsel gelişim biyolojisinde yetişkin özelliklerin gelişim mekanizmalarını incelemek için kullanılır.

Evreleme pupa dönemi ve ölçüm kanat pigmentasyon Drosophila guttifera yöntemleri

Daha fazla video keşfet