Fareler içgüdüsel savunma sırasında kayma bellek rolünün araştırılması için davranışsal bir tahlil

Bu tahlil, hayvanların yakın zamanda öğrenilen bir hedef konumuna nasıl gittikleri gibi uzamsal hafıza alanındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu paradigmanın temel avantajı, iyi kontrol edilen duyusal uyaran tarafından tetiklenen etiyolojik olarak önemli hedefe yönelik navigasyon davranışını ortaya çıkarması ve farelerin önceden eğitilmesini gerektirmemesidir. Farelerin onlara ulaşmasını önlemek için kenardan en az iki santimetre uzakta olması gereken platformun çevresine görsel ipuçları ekleyerek başlayın.

Sığınağı platforma takın. Ardından, yerel bir görsel dönüm noktası işareti sağlamak için barınağın girişine ışık yayan bir diyot veya LED yerleştirin. Daha sonra, fareyi dış distal görsel ipuçlarından izole etmek için, platformun kenarından 10 santimetre uzağa yerleştirilmiş, arenanın etrafındaki platform yüzeyinin 40 santimetre yukarısına ve 15 santimetre altına uzanan sekizgen bir duvar monte edin.

Caydırıcı işitsel uyaranlar iletmek için bir ultrason hoparlörünü platformun merkezinin 50 santimetre yukarısına yerleştirin ve bir ses kartı ve amplifikatör bir hoparlöre bağlayın. Ardından, bir projektör kullanarak havai caydırıcı görsel uyaranları geri yansıtmak için arenanın 64 santimetre yukarısına yarı saydam bir ekran yerleştirin. Projektör ışığını, platform yüzeyinin ortasında beş ila 10 pabuç olacak şekilde kalibre edin.

Alınan videoda koruyucu titremesini önlemek için kızılötesi ışıkları ve kayıp geçiş filtreli bir kızılötesi kamerayı platformun üzerine yerleştirin. Ardından, dış ipuçlarının deneyi etkilemesini önlemek için davranışsal cihazı ses ve ışık geçirmez bir kutunun içine yerleştirin. Son olarak, farenin konumunu çevrimiçi olarak izlemek için piyasada bulunan yazılımı kullanın.

Görsel uyaranları arenanın üzerinde bulunan ekrana yansıtarak başlayın. Farenin konumunu çevrimiçi olarak takip edin ve görsel uyaranı hayvanın üzerinde ortalamak için önceden tanımlanmış görsel uyaranın konumuna karşılık gelen arenada bir ilgi bölgesini önceden tanımlayın. Daha sonra, toplamda dokuz saniye süren üç saniye boyunca 17 ila 20 kilohertz arasında üç frekans modülasyonlu yukarı taramadan oluşan bir diziden oluşan işitsel uyaranı test edin.

İstenmeyen koku ipuçlarını gidermek için platform yüzeyini %70 etanol ile titizlikle temizleyerek başlayın. Barınağı su ve% 70 etanol ile durulayın, ardından etanol kokusunu gidermek için bir kez daha suyla yıkayın. Hem platformu hem de sığınağı iyice kurulayın, çünkü fare ıslaksa sığınağa girmekten kaçınabilir.

Deneyden önce platformu döndürerek her deneme için sığınağın platformdaki konumunu değiştirin. Ardından, fareyi ev kafesindeki deney odasına getirin ve kafesi 10 dakikalık bir iklimlendirme süresi boyunca test platformunun yanına yerleştirin. Yerel bir koku alma ipucu olarak hizmet etmek için farenin ev kafesinden barınağın içine iki gram yatak takımı ekleyin.

Fareyi ev kafesinden çıkarın ve kuyruğundan tutmaktan kaçının. Ya kaplayın ya da kaldırılabilen bir zenginleştirme öğesinin üzerine tırmanmasına izin verin. Ardından, fareyi yavaşça arenanın ortasına yerleştirin ve video alımını başlatın.

Yedi dakikalık bir alışma dönemine izin verin, bu süre zarfında hiçbir caydırıcı uyaran sunulmaz. Farenin sığınağı en az bir kez bulmak ve sığınağa girmek için yeterli zamana sahip olduğundan emin olun, bu da dört uzvun da sığınağın içinde olduğu zamandır. Ardından, hayvan önceden tanımlanmış bir ilgi alanına ulaştığında, farenin üzerinde ortalanmış görsel uyaranın iletimini otomatik veya manuel olarak tetikleyin.

Aynı oturumda birden fazla kaçış tepkisi ortaya çıkarmak için, farenin sığınaktan gönüllü olarak ayrılmasına izin verin. Tahlil bittikten sonra hayvanı ev kafesine geri koyun. Son olarak, bir sonraki hayvanı test etmeden önce platformu ve barınağı temizleyin.

İşitsel veya görsel uyaranlara maruz kalan fareler, stimülasyonun başlangıcı ile uçuşun başlaması arasında kısa gecikmelerle hızlı kaçış tepkileri başlattı. Uyarandan kaçmak için ortalama gecikme, işitsel uyarım için görselden önemli ölçüde daha uzundu. Ayrıca, sığınağa navigasyon doğruydu ve uçuş yörüngeleri, uyaran türleri arasında düz bir çizgiye yakındı.

Sığınak olmadan labirente yedi dakikalık bir alışma döneminden sonra, uzun bir görsel uyaranın sunumu kaçış yerine donma davranışı üretti. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik düzgün bir şekilde uygulanırsa 90 dakika içinde yapılabilir. Bu prosedürü denerken, görsel uyaranı farenin kafasının üstünde veya üstünde sunmayı unutmamak önemlidir, çünkü fare platformun kenarını araştırırken değil, çünkü muhtemelen uyaranı kaçıracaktır.

Geliştirilmesinden sonra, bu teknik, içgüdüsel davranış alanındaki araştırmacıların, farelerde içgüdüsel savunma davranışı üzerindeki öğrenilmiş bilginin kontrolünü keşfetmelerinin yolunu açtı. Bu videoyu izledikten sonra, farelerde savunma davranışının nasıl ortaya çıkarılacağını ve kaçış tepkileri sırasında uzamsal navigasyonu incelemek için bunları nasıl kullanacağınızı iyi anlamış olmalısınız.