Kekik esans uygulama etkisi et kurutma sırasında mikrobiyal yükü

Bu deneyin genel amacı, buhar fazında uygulanan kekik esansiyel yağının et kurutma işlemi sırasında etkili bir koruyucu olarak hizmet edip edemeyeceğini değerlendirmektir. Bu yöntem, sentetik koruyucular yerine doğal koruyucuların nasıl etkili bir şekilde uygulanacağı gibi gıda işleme ve güvenliği alanındaki soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin en önemli avantajları, et kururken kekik esansiyel yağının hızlı ve eşit dağılımını sağlaması ve tüm buharın sıvı yağ uygulamasına göre daha düşük hacimlerde kullanılabilmesidir.

Bu yöntemin kullanılması, kurutulmuş etin güvenliğinin ve kalitesinin iyileştirilmesi konusunda fikir verebilir ve ayrıca diğer gıda ürünlerinin diğer olumsuz mikroorganizmalara karşı tedavisi için de uygulanabilir. Genel olarak, bu yönteme yeni olan bireyler mücadele edecektir çünkü bakteri sayısını saymak için kullanılan damla plaka yöntemleri, uygun şekilde hazırlanmış plakalar ve pratik gerektirir. Yerel bir kasaptan kısa bir fileto sığır eti alın ve satın alma tarihinden itibaren 20 dakika içinde ortam sıcaklıklarında kapalı bir torba içinde laboratuvara aktarın.

Laminer bir güvenlik kabininde, bir sıkma şişesinden püskürtülen 10 saniyelik %70 etanol uygulaması kullanarak sığır kasının dış yüzeyini sterilize edin. Daha sonra, steril teknik kullanarak, kasın dış yüzeyini kesin, böylece preparat üzerinde etanol kalmaz. Daha sonra kası kapalı bir torbaya koyun ve eksi 18 santigrat derecede bir gün boyunca dondurun.

Ertesi gün, donmuş kasları altı saat boyunca dört santigrat derecede çözün. Ardından, bir Laminer güvenlik kabininde, 0,5 santimetre kalınlığında dilimler yapmak için bir et kesici kullanın. Ve dilimlerin boyutunu 5x2,5 santimetre kare dikdörtgen numunelere daha da küçültün.

Saklama için numuneleri plastik torbalara koyun ve dondurucuda saklayın. Laminer güvenlik kabininde, et örneklerini aşılamak için standartlaştırılmış bir E.coli ATCC 25922 aşısı hazırlayın. Aşılama için, bir alüminyum folyo levha üzerine en az dört numune yerleştirin.

Ardından, aşılanmamış kontroller olarak hizmet etmek için ikinci bir folyo kağıda aynı sayıda numune yükleyin. Daha sonra, her bir numuneyi bir tarafa 400 mikrolitre aşı uygulayarak ve steril bir hücre yayıcı kullanarak yüzeye nazikçe yayarak aşılayın. Ardından numuneleri 10 dakika kurumaya bırakın.

Ardından, numuneleri cımbızla ters çevirin ve numune başına toplam 800 mikrolitre aşılama için prosedürü tekrarlayın. Bundan sonra, aşılanmış ham numunelerden ikisinin ve aşılanmamış iki kontrolün aşılama etkinliğini kontrol edin. Ve örneklerin geri kalanı, onları folyoya sarın.

Ham numuneleri pepton suyunda oda sıcaklığında 140 rpm çalkalanarak 10 dakika yıkayın. Yıkamadan sonra, bir Mikrotitre plakası üzerinde, şimdi bakteri içeren banyo suyunun 10 kat seri beş seyreltmesini yapın. Daha sonra, 6x6 damla yöntemini kullanarak MacConkey agar ve plaka sayım agar ile plakalara çok kanallı bir pipet kullanarak her seyreltmeden beş mikrolitre damla uygulayın.

Damlalar agarın içine hızla emilmelidir. Seyreltmelerin 6x6 damla yöntemiyle yetiştirilmesi için, damlaların agar içine hızlı bir şekilde emilmesi için plaka sayım agar ve MacConkey agar plakalarının uygun şekilde kurutulduğundan emin olun. Daha sonra, aşılanmış plakaları 24 saat boyunca 37 santigrat derecede kültürleyin.

Kekik esansiyel yağının buharla uygulanması için bir et kurutma fırını hazırlayın. 12x20 santimetrelik bir filtre kağıdını% 79 timol içeren istenen hacimde TEO ile ıslatın. Şimdi folyoda kalan numuneleri alın ve filtre kağıdı ile birlikte altı saat kuruması için TEO ile hazırlanan kurutma fırınına aktarın.

Paralel olarak, bir kontrol numune setini TEO'suz bir et kurutma fırınında işlemden geçirin. Kurutmadan sonra, E.coli'nin bakteri ile muamele edilen numuneler üzerinde hayatta kalmasını değerlendirmek için, numuneleri pepton suyunda tek bir münakaşa ile yıkamak için aynı prosedürü tekrarlayın. Bu durumda, 10 dakikalık çalkalamadan sonra, altı saatlik bir ön zenginleştirme inkübasyonu için banyodaki numuneleri 37 santigrat derecede bir inkübatöre aktarın.

Ön zenginleştirmeden sonra, banyo suyunu daha önce olduğu gibi 10 kat seyreltin. Ardından, seyreltmeleri algılama plakalarına yerleştirmek için 6x6 damla yöntemini kullanın ve plakaları 24 saat inkübe edin. Ertesi gün, bir gram et başına koloni oluşturan birimleri belirleyin.

Plaka sayımı agarında beyaz lekeler olarak görünen mezofilik aerobik bakterilerin varlığı için plakaları inceleyin ve MacConkey agarındaki kırmızı ila koyu pembe arasında görünen tipik E.coli kolonilerini sayın. Mikrobiyolojik verileri analiz etmek için, sayımları gram başına CFU günlüğüne dönüştürün ve tedavinin ana etkilerini belirlemek için varyantların bir analizini kullanın. Kurutma işlemi sırasında, tüm E.coli elimine edilmez.

Bazı bakteriler yaşayabilir ancak kültürlenemez bir duruma girer. Bu nedenle, et yüksek sıcaklık ve/veya nem altında uygun olmayan şekilde saklandığında, bu bakteriler tekrar yaşayabilir hale gelebilir ve potansiyel olarak tüketicilere zarar verebilir. Kurutma sırasında etin farklı dozlarda TEO ile muamele edilmesi, E.coli'yi tamamen veya kısmen ortadan kaldırabilir.

Et örneklerinde mezofilik aerobik bakteri ve enterik basil sayıları PCA ve MCA plakalarında belirlendi. 1.5 mililitre TEO uygulandığında, altı saatlik bir ön zenginleştirme aşamasından sonra bile bakteri üremesi gözlenmedi. Bu doz, litre hava başına 0.028 mililitre TEO buharına karşılık gelir.

Bu videoyu izledikten sonra, kurutma sırasında etin uçucu yağların buhar fazı ile nasıl işleneceğini iyi anlamalı ve nihai üründeki canlı bakteri sayısını değerlendirmelisiniz. Bu prosedüre ek olarak, nihai ürünün tüketici tarafından kabul edilebilirliği ve kekik esansiyel yağı kalıntısı miktarı ile ilgili ek soruları yanıtlamak için duyusal değerlendirme ve GC analizi gibi diğer yöntemler de gerçekleştirilebilir. Et kesici ve patojenik bakterilerle çalışmanın tehlikeli olabileceğini ve uygun koruyucu ekipman giymek ve Laminer güvenlik kabini kullanmak gibi önlemlerin her zaman alınması gerektiğini unutmayın.