Name: Fetal fare bir yüksek frekans ultrason (30/45 MHZ) sistemi kullanarak Imaging kardiyovasküler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-05T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 34 s
Description: Öğrenin fetal farelerde yüksek frekanslı ultrason görüntüleme yöntemiyle kardiyovasküler gelişimi incelemeyi. Bu teknik, doğuştan kalp defektlerinin invaziv olmayan gerçek zamanlı değerlendirmesini sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz hayvan fizyolojisi çekirdek, Anabilim Dalı moleküler tıp UCLA teknik destek ve Vevo 2100 ultrason biomicroscopy (UBM) sistem açık erişim sağlamak için teşekkür ederiz. Bu çalışmada NIH/çocuk sağlığı Araştırma Merkezi (5K12HD034610/K12), UCLA çocuk Discovery Enstitüsü ve bugün ve yarın Çocuk Fonu tarafından desteklenen ve David Geffen School tıp araştırma yenilik ödülü için M. Touma.

University of California, Los Angeles, hayvan bakım ve kullanım Komitesi bu protokol için gösterilen tüm prosedürleri onayladı. Deneyler kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi, University of California, Los Angeles, Kaliforniya, ABD tarafından onaylanmış etkin hayvan iletişim kuralları altında devam eden bir çalışmanın parçası olarak yapılmıştır. Hayvan kullanım ve bakım standartları Kılavuzu bakım ve kullanım laboratuvar hayvanlarının için izledi.
1. hazırlanması görüntüleme sistemi yüksek frekans ultrason
<ol><li>Ultrason görüntüleme sistemi ve Fizyoloji izleme birimi açın.</li>
	<li>30/45 MHz transducer bağlayın.</li>
	<li>Onun sahibi görüntüleme platformu yakınındaki karşılık gelen tarama kafasına bir yer.</li>
	<li>Kardiyak ölçüm programı seçeneğini seçin.</li>
	<li>Ultrason jeli baş aşağı 37 ° C'ye ayarla öncesi ısınma kapsayıcı içinde yer</li>
	<li>Anestezi için uygun boru sistemi onaylamak ve isoflurane ve oksijen seviyesini doğrulayın.</li>
	<li>Dezenfekte görüntüleme platformu ve çalışma alanı.</li>
	<li>Kalp hızı baraj ve sabit vücut ısısını korumak için görüntüleme platformu ısı düzeyini ayarlayın.</li>
</ol>2. hamile fare hazırlık
<ol><li>Hamile fare (C57/BL6) Barajı anestezi indüksiyon odasına koyun.</li>
	<li>Anestezi kullanılarak sürekli olarak inhalational isoflurane (isoflurane % 2-%3) % 100 oksijen (%100 O2) 200 mL/dk indüksiyon odasında bir Debi ile karışık teslim ikna etmek.</li>
	<li>Uyuşturulan hayvanın sırtüstü pozisyonda görüntüleme platformu üzerine aktarın.</li>
	<li>Kararlı durum sedasyon anestezi boru sistemi teslim isoflurane için (% 1.0-%1.5) bağlı bir sağlamlılık kullanarak % 100 ile 200 mL/dk O2 karışık sağlar. Dikkat: anestezik gaz kaçağı teneke kutu kümesini içeren kömür filtre ile donatılmış bir havalandırma sistemi kullanarak denetleme.</li>
	<li>Bacaklarda hafifçe gömülü Elektrokardiyografik elektrotlar için anne kalp ve solunum oranları sürekli izlenmesi elde etmek için sonra uygulama elektrot jel teyp.</li>
	<li>+ /-50 atım/dk (bpm) (450) bir ortalama kalp hızı korumak için isoflurane düzeyini ayarlayın.</li>
	<li>37,0 ° C +/-0,5 ° c aralığında vücut ısısını korumak Vücut ısısı ve nabız Fizyoloji denetleyicisi biriminde görüntülenmesini izleyin.</li>
	<li>Hayati belirtileri uyuşturulan fare görüntüleme yordam boyunca her 15 dk belge.</li>
	<li>Fare duruş, kalp hızı ve yanıt Pinch tırnağa değerlendirerek anestezi düzeyini belirleyin.</li>
	<li>Oftalmik merhem (her gözün içine 1 damla) göz kuruluğu ve kornea hasarı önlemek için geçerli.</li>
	<li>Kürk orta göğüs seviyeden alt ekstremite ultrason zayıflama en aza indirmek için depilatory bir krem kullanarak kaldırın. Cilde zarar önlemek için ıslak ve kuru gazlı bez alternatif tarafından uygulama mendil sonra krem 1-1,5 dk kaldırın.</li>
</ol>3. embriyo tanımlama
<ol><li>Yavaşça fetusa bulup bunları yaymak için karın duvarı muayene et.</li>
	<li>Her embriyo Barajı'nın karnı üzerinde açıklama ekleyin ve bir işaretleyici kullanarak onların ön-arka ve dorsal ventral yönler tanımlayın.</li>
	<li>Serviks uyuşturulan Barajı yer iþareti olarak kullanın. Sol ve sağ rahim boynuzları üzerinde fetusa etiket L1, L2, L 3, vb (sol taraf) ve R1, R2, R3, vb (sağ tarafta), sırasıyla (şekil 1A). Dikkat: fetusa zorla yayılmasını önlemek. 1-2 fetusa her çöp içinde başkaları ile onların konumlandırma ve görüntüleme güvenilmez hale çakışabilir. Bu fetusa çözümleme dışı bırakmak.</li>
</ol>4. fetal kalp görselleştirme ve ek açıklama
<ol><li>Önceden ısıtılmış ultrason jeli karnına uygulamak ve dikkatle kabarcık oluşumunu önlemek için yayıldı. Jel ek miktar tarama görüntüleme alanı ekleyin.</li>
	<li>Ultrason sonda yer onun mekanik tutucu üzerinde ve yavaş yavaş tarama B-Mode (şekil 1) kullanarak kalbi için bakarken kalın jel katmanıyla iletişim için cilt karşı seferber.</li>
	<li>2B görüntüleri elde etmek için tarama B modu düğmesini tıklatın. Mesane sağ veya sol rahim boynuz konumlandırılmış ilk cenin tanımlamak ve sırasıyla R1 veya L1, olarak işaretlemek için bir dönüm noktası kullanın.</li>
	<li>Gerçek zamanlı olarak bireysel fetusun sağ ve sol oryantasyon görüntüleme platformu yatay düzlemde hareket ettirerek onaylayın. Burnu, bacaklarda ve omurga simge (şekil 1B, Video 1) açıklama eklemek için kuyruk için baş tarama.</li>
	<li>Kalbi görselleştirmek ve sol ventrikül (LV) ve sağ ventrikül (RV) ek açıklama ekleyebilirsiniz. Kalp görselleştirme optimize etmek için Renkli Doppler modu kullan (şekil 1 C-G, Videolar 1 - 2).</li>
	<li>Bir parasternal kısa eksen-görünümü, elde etmek için tarama B modu düğmesini tıklatın var LV ve onların maksimum çapı veri edinme çerçeve merkezinde görüntülenen RV. Canlı görüntüleme (şekil 1B-C) başlatın.</li>
	<li>Uçakların uzunlamasına dört-odası görünüm (şekil 1 d) elde etmek için tarama ile ilgili olarak fare yönünü değiştirin. İlk olarak, kalan yapılar kalbin Kulakçık, interventricular septum ve sol ve sağ çıkış yolları gibi tanımlayın. Sonra onların en büyük çapı görüntülenen Atriyal ve Ventriküler odaları olması. Resim alma başlatın.</li>
	<li>Uygun olmayan, eğik görüntüler son çözümleme dışı bırakmak. En az 10 sürekli kayıt 'Cineloops' elde etmek için çini düğmesini tıklatın s, sonra kaydet kaydedilen görüntüler.</li>
</ol>5. Fetal kalp hızı ve ventrikül fonksiyonu değerlendirilmesi
<ol><li>Kardiyak görüntüleri dört odası uçaklar (Video 3) elde etmek için tarama M-modu düğmesini tıklatın.</li>
	<li>Görüntüleri tüm embriyoların tamamlandıktan sonra analiz için kayıtlar listesini görüntüleyin.</li>
	<li>Uygun olmayan, eğik görüntüler son çözümleme dışı bırakmak.</li>
	<li>Analiz düğmesini ölçü duvar kalınlığı ve sol/sağ ventrikül iç çapı, diastole (LVID, d; RVID, d) ve Sistol (LVID, s; RVID, s), Şekil 2' de gösterildiği gibi.</li>
	<li>Her oynayarak ortalama fetal kalp hızı M-modu izleme ve ölçüm bir akış döngüsü aşağıdaki akış için hesaplama (bitişik tepeler arasında boşluk) döngüsü kaydedilen belirlemek.</li>
	<li>Ortalama kalp hızı (Şekil 2) elde etmek için birden fazla ölçümleri (en az 5 izleme başına) gerçekleştirin.</li>
	<li>Sol ventrikül iç diyastolik çap (LVID, d) ve sol ventrikül iç çapı, kalp döngüsü boyunca son Sistol (LVID, s) arasındaki zamansal değişiklikleri ölçmek. Kesirli kısalma yüzdesini (FS %) aşağıdaki gibi hesaplar: FS % [(LVID,d-LVID,s)/LVID, d =] x100.</li>
	<li>Birden çok ölçümleri (en az 5 izleme başına) Gönderilerin FS % değerler elde etmek için gerçekleştirin.</li>
</ol>6. Kardiyopulmoner akış parametrelerinin değerlendirilmesi
<ol><li>Sektör Alım açılı az 60oayarlayın. 2-B dört odası görüntüleme uçaktan 45-MHz transducer kullanarak pulsed wave Doppler ölçümleri gerçekleştirmek için Doppler düğmesini tıklatın.<ol>
<li>İlk olarak, doğru çıkış yolu tanımlamak için pulmoner arter bifurkasyon gözünde canlandır. Ardından, pulmoner ve aortik valf (şekil 3A, Video 4) aracılığıyla akış deseni elde etmek için pulsed wave Doppler düğmesini tıklatın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Pulmoner akım ölçümleri pulsed wave Doppler izleme, pik sistolik hız (PVK), zaman (AT) ivme ve ejeksiyon zamanı (ET) gibi elde edilir.</li>
	<li>Ortalama ölçüleri (sağda) şekil 3A içinde gösterildiği gibi elde etmek için birden fazla ölçümleri (en az 5 izleme başına) gerçekleştirin.</li>
	<li>AT hesaplamak / ET oranı her çıkış Vana çıkış yolları açıklık bir göstergesi olarak ve kan akışı.</li>
	<li>Mitral ve aort akışı desen kullanarak pulsed wave Doppler 2B apikal dört odası görünümlerinden elde etmek için devam edin. İlk olarak, sol atriyal ve sol ventrikül odaları tanımlayın. Ardından, mitral giriş akımı Doppler desenleri ve ölçüm erken diyastolik hız (E) ve Atriyal kasılma hızı (A) (şekil 3B)24,25kaydetmek için pulsed wave Doppler numune hacmi yerleştirin.</li>
	<li>Aort Doppler jet desen elde etmek için Doppler örnek ses düzeyini ayarlayın. Şekil 3B ' (sağ) gösterildiği gibi ivme (AT) ve ejeksiyon zamanı (ET) ölçmek için izleme aort Doppler (Video 5) kullanmak</li>
</ol>7. Feto plasental eksen değerlendirilmesi
<ol><li>Renkli Doppler tarama uterin arter ve feto plasental vasküler ağaç 45 MHz transducer (şekil 4A) kullanarak görselleştirmek için kullanın.</li>
	<li>Sadece göbek bağını fetal karından çıkar sonra göbek kordonu, içi amniyotik segmentinde göbek gemiler (iki arter ve bir damar) tanımlayın.</li>
	<li>Yer pulsed wave Doppler numune hacmi Umbilikal arter akım paterni (şekil 4A) elde etmek için.</li>
	<li>Ölçmek vasküler en yüksek akış parametrelerinin hızlanma süresi (AT), ejeksiyon zamanı (ET) dahil olmak üzere ve zirve akım hızı son Sistol (PVK, s) adlı pulsed wave Doppler tarama kayıt (şekil 4B) kullanarak.</li>
	<li>5 ardışık dalga biçimleri her gemi, cenin hareketleri ve her araç için ortalama en yüksek hız ölçmek için anne solunum hareketleri, yokluğunda elde edilir.</li>
	<li>Sonraki embriyo için devam edin.</li>
</ol>8. sonrası görüntüleme hayvan izleme
<ol><li>Görüntüleme işleminin tamamlanmasının ardından isoflurane konteyner dön.</li>
	<li>Vücut ısısı, solunum ve kalp hızı kurtarma aşamasında izleme devam edin.</li>
	<li>Baraj spontan hareketleri başladığında sağlamlılık ve bağlı boru sistemi kaldırın.</li>
	<li>Baraj için uygun konut dönmek ve gözlem standart kurumsal sonrası yordamı protokolleri göre devam etmek.</li>
	<li>Belgeyi normal aktiviteye tam yeniden başlamasını vakti.</li>
</ol>9. performans gereksinimleri ve Teknik hususlar
<ol><li>~ 8 fetusa uzun süreli anestezi hayati ve fizyolojik parametreler üzerinde olumsuz etkileri önlemek için yaklaşık 1 h için işlem süresi sınırı.</li>
	<li>Eğitim teknikleri görüntü edinme ve akış desenleri bir kısa zaman dilimi içinde izleme için en iyi duruma getirmek için 8-10 hamile fareler ile tamamlayın.</li>
</ol>

<ol><li>Touma, M., Reemtsen, B., Halnon, N., Alejos, J., Finn, J. P., Nelson, S. F., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Path+to+Implement+Precision+Child+Health+Cardiovascular+Medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">A Path to Implement Precision Child Health Cardiovascular Medicine.</a> Front Cardiovasc Med. 4, 36(2017).</li>
<li>Triedman, J. K., Newburger, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+in+Congenital+Heart+Disease.+The+Next+Decade%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Trends in Congenital Heart Disease. The Next Decade.</a> Circulation. 133, 2716-2733 (2016).</li>
<li>Gilboa, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Congenital+Heart+Defects+in+the+United+States+Estimating+the+Magnitude+of+the+Affected+Population+in+2010%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Congenital Heart Defects in the United States Estimating the Magnitude of the Affected Population in 2010.</a> Circulation. 134, 101-109 (2016).</li>
<li>Pruetz, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcomes+of+critical+congenital+heart+disease+requiring+emergent+neonatal+cardiac+intervention%5BTitle%5D)+AND+%22Prenat+Diagn%22%5BJournal%5D)">Outcomes of critical congenital heart disease requiring emergent neonatal cardiac intervention.</a> Prenat Diagn. 34, 1127-1132 (2014).</li>
<li>Peterson, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mortality+among+Infants+with+Critical+Congenital+Heart+Disease%3A+How+Important+Is+Timely+Detection%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Birth+Defects+Res+A+Clin+Mol+Teratol%22%5BJournal%5D)">Mortality among Infants with Critical Congenital Heart Disease: How Important Is Timely Detection?</a> Birth Defects Res A Clin Mol Teratol. 97 (10), 664-672 (2013).</li>
<li>Atz, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prenatal+Diagnosis+and+Risk+Factors+for+Preoperative+Death+in+Neonates+with+Single+Right+Ventricle+and+Systemic+Outflow+Obstruction%3A+Screening+Data+from+the+Pediatric+Heart+Network+Single+Ventricle+Reconstruction+Trial%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Prenatal Diagnosis and Risk Factors for Preoperative Death in Neonates with Single Right Ventricle and Systemic Outflow Obstruction: Screening Data from the Pediatric Heart Network Single Ventricle Reconstruction Trial.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 140 (6), For the Pediatric Heart Network Investigators 1245-1250 (2010).</li>
<li>Lalani, S. R., Belmont, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+Basis+of+Congenital+Cardiovascular+Malformations%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Med+Genet%22%5BJournal%5D)">Genetic Basis of Congenital Cardiovascular Malformations.</a> Eur J Med Genet. 57 (8), 402-413 (2014).</li>
<li>Hanchard, N. A., Swaminathan, S., Bucasas, K., Furthner, D., Fernbach, S., Azamian, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+genome-wide+association+study+of+congenital+cardiovascular+left-sided+lesions+shows+association+with+a+locus+on+chromosome+20%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol%22%5BJournal%5D)">A genome-wide association study of congenital cardiovascular left-sided lesions shows association with a locus on chromosome 20.</a> Hum Mol. 11, 2331-2341 (2016).</li>
<li>Arsenijevic, V., Davis-Dusenbery, B. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducible%2C+Scalable+Fusion+Gene+Detection+from+RNA-Seq%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Reproducible, Scalable Fusion Gene Detection from RNA-Seq.</a> Methods Mol Biol. 1381, 223-237 (2016).</li>
<li>LaHaye, S., Corsmeier, D., Basu, M., Bowman, J. L., Fitzgerald-Butt, S., Zender, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utilization+of+Whole+Exome+Sequencing+to+Identify+Causative+Mutations+in+Familial+Congenital+Heart+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Cardiovasc+Genet%22%5BJournal%5D)">Utilization of Whole Exome Sequencing to Identify Causative Mutations in Familial Congenital Heart Disease.</a> Circ Cardiovasc Genet. 9 (4), 320-329 (2016).</li>
<li>Zaidi, S., Choi, M., Wakimoto, H., Ma, L., Jiang, J., Overton, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De+novo+mutations+in+histone+modifying+genes+in+congenital+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">De novo mutations in histone modifying genes in congenital heart disease.</a> Nature. 498 (7453), 220-223 (2016).</li>
<li>Leirgul, E., Brodwall, K., Greve, G., Vollset, S. E., Holmstrom, H., Tell, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+Diabetes%2C+Birth+Weight%2C+and+Neonatal+Risk+of+Congenital+Heart+Defects+in+Norway%2C+1994-2009%5BTitle%5D)+AND+%22Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Maternal Diabetes, Birth Weight, and Neonatal Risk of Congenital Heart Defects in Norway, 1994-2009.</a> Obstet Gynecol. 128 (5), 1116-1125 (2016).</li>
<li>Garry, D. J., Olson, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Common+Progenitor+at+the+Heart+of+Development%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A Common Progenitor at the Heart of Development.</a> Cell. 127 (6), 1101-1104 (2006).</li>
<li>Postma, A. V., Bezzina, C. R., Christoffels, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+congenital+heart+disease%3A+the+contribution+of+the+noncoding+regulatory+genome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hum+Genet%22%5BJournal%5D)">Genetics of congenital heart disease: the contribution of the noncoding regulatory genome.</a> J Hum Genet. 61, 13-19 (2016).</li>
<li>Ganguly, A., Touma, M., Thamotharan, S., De Vivo, D. C., Devaskar, S. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+Calorie+Restriction+Causing+Uteroplacental+Insufficiency+Differentially+Affects+Mammalian+Placental+Glucose+and+Leucine+Transport+Molecular+Mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology.+Oct%22%5BJournal%5D)">Maternal Calorie Restriction Causing Uteroplacental Insufficiency Differentially Affects Mammalian Placental Glucose and Leucine Transport Molecular Mechanisms.</a> Endocrinology. Oct. 157 (10), 4041-4054 (2016).</li>
<li>Lluri, G., Huang, V., Touma, M., Liu, X., Harmon, A. W., Nakano, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hematopoietic+progenitors+are+required+for+proper+development+of+coronary+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Hematopoietic progenitors are required for proper development of coronary vasculature.</a> J Mol Cell Cardiol. 86, 199-207 (2015).</li>
<li>Bishop, K. C., Kuller, J. A., Boyd, B. K., Rhee, E. H., Miller, S., Barker, P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28134395">Ultrasound Examination of the Fetal Heart.</a> Obstet Gynecol Surv. 72 (1), 54-61 (2017).</li>
<li>He, H., Gan, J., Qi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+extensive+cardiac+echography+examination+for+detecting+foetal+congenital+heart+defects+during+early+and+late+gestation%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Assessing extensive cardiac echography examination for detecting foetal congenital heart defects during early and late gestation: a systematic review and meta-analysis.</a> Acta Cardiol. 71 (6), 699-708 (2016).</li>
<li>Hobbs, C. A., Cleves, M. A., Karim, M. A., Zhao, W., MacLeod, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+Folate-Related+Gene+Environment+Interactions+and+Congenital+Heart+Defects%5BTitle%5D)+AND+%22Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Maternal Folate-Related Gene Environment Interactions and Congenital Heart Defects.</a> Obstet Gynecol. 116 (2 Pt 1), 316-322 (2016).</li>
<li>Gabbay-Benziv, R., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27569369">A step-wise approach for analysis of the mouse embryonic heart using 17.6 Tesla MRI.</a> Magn Reson Imaging. 35, 46-53 (2017).</li>
<li>Kim, G. H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3601205/">Murine fetal echocardiography.</a> J Vis Exp. (72), e4416(2013).</li>
<li>Zhou, Y. Q., Cahill, L. S., Wong, M. D., Seed, M., Macgowan, C. K., Sled, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+flow+distribution+in+the+mouse+fetal+circulation+at+late+gestation+by+high-frequency+Doppler+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Assessment of flow distribution in the mouse fetal circulation at late gestation by high-frequency Doppler ultrasound.</a> Physiol Genomics. 46 (16), 602-614 (2014).</li>
<li>Greco, A., Coda, A. R., Albanese, S., Ragucci, M., Liuzzi, R., Auletta, L., Gargiulo, S., Lamagna, F., Salvatore, M., Mancini, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-Frequency+Ultrasound+for+the+Study+of+Early+Mouse+Embryonic+Cardiovascular+System%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">High-Frequency Ultrasound for the Study of Early Mouse Embryonic Cardiovascular System.</a> Reprod Sci. 22 (12), 1649-1655 (2015).</li>
<li>Deneke, T., Lawo, T., von Dryander, S., Grewe, P. H., Germing, A., Gorr, E., Hubben, P., Mugge, A., Shin, D. I., Lemke, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+determination+of+the+optimized+atrioventricular+delay+in+patients+with+implanted+biventricular+pacing+devices%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+Pacing+Electrophysiol+J%22%5BJournal%5D)">Non-invasive determination of the optimized atrioventricular delay in patients with implanted biventricular pacing devices.</a> Indian Pacing Electrophysiol J. 10 (2), 73-85 (2010).</li>
<li>Kono, M., Kisanuki, A., Ueya, N., Kubota, K., Kuwahara, E., Takasaki, K., Yuasa, T., Mizukami, N., Miyata, M., Tei, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+ventricular+global+systolic+dysfunction+has+a+significant+role+in+the+development+of+diastolic+heart+failure+in+patients+with+systemic+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertens+Res%22%5BJournal%5D)">Left ventricular global systolic dysfunction has a significant role in the development of diastolic heart failure in patients with systemic hypertension.</a> Hypertens Res. 33 (11), 1167-1173 (2010).</li>
</ol>

Hiçbir çıkar çatışması ilan etti.

Hastalıkları ve kardiyovasküler malformasyonlar önemli ölçüde genetik faktörlerin ve çevre öğeleri19tarafından etkilenmiştir. Biz daha önce İkinci trimesterde, feto plasental kan dolaşımı akışı ve fetal kardiyak fonksiyon9tarihinde başlatılan anne kalori kısıtlaması önemli bir etkisi gösterdi.
Prenatal hipoksi muazzam feto plasental fizyolojisi ve dolaşım sistemi etkileyebilir fetal gelişim sırasında başka bir ortak stres faktörü var. Prenatal hi...

Kalp Konjenital malformasyonlar erken kalp geliştirme sırasında oluşan heterojen yapısal kusurları vardır. İşlem yordamlarını geçerli teknik gelişmeler, bebeklerin CHDs1,2ile sağkalım oranları önemli artışlar açmıştır. Ancak, yaşam kalitesi genellikle uzamış yatış ve ihtiyaçları için güvenliği aşılan ikincil cerrahi onarım prosedürleri1,2,3,4,5sahnelenen içindir. CHDs temel moleküler mekanizmaları doğum öncesi algılama erken müdahaleler, yeni önleme stratejileri taşımak ve ömür boyu sonuçları6,7artırmak için planı için çok önemli olduğunu.
Birden çok genetik ve çevresel faktörler CHDs patogenezinde karıştığı olmuştur rağmen nedensellik kurulması bir karşılanmamış ihtiyaç geliştirmek için tanı, tedavi ve Önleme stratejileri1,8,9 kalır ,10,11,12. Ayrıca, rolleri epigenetik değiştiriciler ve rahim içinde stres faktörlerinin incelenmesi için gelecekteki araştırmalar11,12yeni yerleri açılır. Son on yılda gerçekten tek nükleotit polimorfizmi (SNP) Mikroarray, Bütün exome sıralama ve genom çapında metilasyonu çalışmaları, dahil olmak üzere yeni nesil sıralama teknolojisi genetik eğitim onların kullanımı hızlı gelişmeler tanıklık etmiş CHDs1,8,9,10,11 yeni mutasyonlar ve henüz henüz genetik varyantların tanımlamak için önünü de dahil olmak üzere karmaşık insan hastalıkları neden olur onların patojenitesi uygun hayvan modellerinde test.
Farklı hastalık modeli sistemleri arasında sadece CHDs mekanizmaları sırasında erken cardiogenesis13,14,15,16, aynı zamanda aydınlatmak için soruşturma için tercih, hayvan modeli faredir Kardiyak odası olgunlaşma ve fonksiyon için geç gebelik prenatal ve perinatal stres faktörleri üzerindeki etkilerini. Bu nedenle, bir mutant fetal fare kalp içinde vivo fenotipik karakterizasyonu geliştirme, erken ve geç aşamalarında gerçekleştirmek bu genetik varyasyonları ve kalp geliştirme, çevresel faktörlerin rolü anlamak çok önemlidir ve olası gelecekteki etkisi odası belirli olgunlaşma süreçleri farelerde.
Erken teşhis ve kalp kusurları geliştirme sırasında doğru tanı Girişimsel planlama17,18için kritik. Güvenli, basit, taşınabilir ve tekrarlanabilir olmak, cenin ultrason gerçekten tekniği klinikte Kardiyak değerlendirme için Imaging standart haline gelmiştir. Fetal dolaşım değerlendirme Doppler ultrason kullanarak yaygın klinik pratikte sadece kalp hataları algılama için ama aynı zamanda vasküler anormallikler, plasenta yetmezliği ve intrauterin büyüme kısıtlama algılamak ve değerlendirmek için kullanılmıştır fetal iyilik yanıt olarak rahim içinde hakaret hipoksemi, maternal hastalık ve ilaç toksisitesi17,18de dahil olmak üzere. İnsan hataları ve hastalıkların değerlendirilmesinde değerine paralel olarak artan yardımcı programında deneysel ayarları19,20,21,22ultrason değerlendirmesi fetal farelerin kazanmıştır, 23. Özellikle, fetal kalp ultrason (Ekokardiyografi) gelişmekte olan kalp sıralı vivo içinde görselleştirme sağlar. Birçok deneysel çalışma fetal transgenik farelerde fetal kalp-damar gelişim gözlemlemek için ultrason görüntüleme teknoloji kullanılmıştır. Doppler ultrason gibi fizyolojik sorunları veya hastalık koşulları10,19altında fetal dolaşımda akışı desenleri patofizyolojik parametreleri aydınlatmak özellikle yararlı olmuştur. Hem insan ve hayvanlarda, anormal kan akışı veya oksijen kaynağına fetus fetal çevre rahim içinde bozabilir ve fetoplacental eksen, anne hipoksi plasental anormallikler, dahil olmak üzere etkileyen çeşitli şartlarından neden olabilir, Gestasyonel diyabet ve pharmaceutically indüklenen vasküler daralma15,22. Bu nedenle, Doppler ultrasonlardan fetal fareler üzerinde gerçekleştirmek için standart yöntem oluşturma muazzam CHDs gelecekteki çalışmaların izleme akış desen ve sırasında kardiyovasküler devrelerin anahtar hemodinamik endeksleri kolaylaştırarak güçlendirmek farklı gelişimin kardiyak genetik fare modelleri.
Yüksek frekans ultrason fare modelleri ve insan hastalıkları18Kardiyovasküler sistemde gelişimsel ve fizyolojik parametrelerini ölçmek için güçlü bir araç olarak ortaya çıkmıştır. Bu teknoloji son yıllarda daha da rafine. Biz ve diğer araştırmacılar ultra yüksek frekans ultrason çalışmalar fetal fare kalp15,19,20,21,22 yürütmek için bu sistemin fizibilite göstermiştir ,23. Sistem Doppler renk akışı haritalama ve yüksek frekans (30-50 MHz) kare hızları, iki boyutlu, dinamik görüntüler oluşturmak doğrusal dizi dönüştürücüleri bulunuyor. Düşük frekans ultrason sistemleri ve yüksek frekans ultrason21,22, önceki nesil ile karşılaştırıldığında bu avantajları, gerekli duyarlılık ve kararlılık derinlemesine değerlendirme cenin için dolaşım sağlar Sistem, kalp yapıları, odası fonksiyon ve akışı endeksi fetal farelerin kapsamlı karakterizasyonu deneysel ayarları dahil olmak üzere. Burada, bir yüksek frekans sistemi kullanılarak hızlı değerlendirme Kardiyopulmoner dolaşım ve embriyonik gün E18.5 vivo içinde feto plasental kan dolaşımı gerçekleştirmek için yöntemleri anahat. Yaklaşık 60 µm Aksiyel bir çözünürlüğe ve 150 µm yanal çözünürlük sağlar bir 30/45 MHz transducer seçtik. Ancak, daha yüksek bir frekans çevirici (40/50 MHz) benzer bir metodolojik yaklaşım takip ederek daha önce gelişim aşamalarında çözümlemek için seçilebilir. Seçili M-modu hareketli yüksek zamansal çözünürlük seviyeleri (1000 kare/sn), dokuların görselleştirme sağlar. Son olarak, biz yüksek ultrason detaylı kapsamlı fenotipik karakterizasyonu fetal kalp kapaklarının hemodinamik durum ve işlevi satır taban çizgisi, farelerde ve prenatal hipoksi stres yanıt için fizibilite göstermek.

<table><tbody><tr><td>Vevo 2100</td><td>VisualSonics, Toronto, Ontario, Kanada</td><td>N/A</td><td>Yüksek Freequency Ultrason Biyomikroskopisi. Kurulum, hayvan fizyolojisi çekirdek tesisinde, moleküler tıp bölümü, UCLA'da mevcuttur. ABD</td></tr><tr><td>kendi içinde yetiştirilmiş fareler (c57/BL6)</td><td>Charles River Laboratories</td><td>N/A</td><td>Inbread vahşi tip fare türü</td></tr></tbody></table>

fetal fare bir yüksek frekans ultrason (30/45 mhz) sistemi kullanarak imaging kardiyovasküler

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound (30/45MHZ) System

Konjenital kalp kusurları (CHDs) en yaygın çocukluk morbidite ve erken mortalite nedenidir. Doğum öncesi CHDs temel moleküler mekanizmaları tespiti yeni önleyici ve tedavi edici stratejiler icat için önemlidir. Mutant fare modelleri yeni mekanizmaları ve kalp geliştirme ve onların potansiyel tadilat CHDs içinde sürücü çevresel stres değiştiriciler keşfetmek için güçlü araçlardır. Ancak, bu sözde katkıda bulunan nedensellik kurmak için çaba olmuştur hayatta olmayan hayvan deneyleri, histolojik ve moleküler çalışmalar sınırlı hangi anahtar fizyolojik ve hemodinamik parametreler izleme kez yoktur. Canlı görüntüleme teknolojisi CHDs etyolojisinde kurmak için gerekli bir araç haline gelmiştir. Özellikle, ultrason görüntüleme prenatally cerrahi olarak fetüsler maruz kalmadan kullanılabilir süre kardiyak odası, hemodinamik ve yapısal özellikleriyle ilgili çevresel stres etkisi izleme onların temel fizyolojisi Bakımı sağlayan geliştirme. Burada, yüksek frekanslı ultrason (30/45) sistem kardiyovasküler sistem E18.5 rahim içinde temel yönü, fetal farelerde ve prenatal hipoksi pozlama karşılık olarak incelemek için kullanın. Biz kalp Oda boyutu, Morfoloji, ventrikül fonksiyonları, fetal kalp hızı ve Umbilikal arter akışı endeksleri ve sistemik kronik hipoksi rahim içinde gerçek maruz fetal farelerde onların değişiklikleri ölçmek için sistem fizibilite göstermek zaman.

Kardiyak ve hemodinamik endeksi İstatistiksel analizler çevrimdışı yapıldı. 3 en iyi resim 5 ardışık ölçüm araçlarının hesaplanır. Verileri ± SEM öğrencinin tdemek gibi ifade edildi-test çalışma karşılaştırmalar anlaması için kullanıldı. ≤0.05 P değeri istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.
Yukarıdaki protokolü, biz kronik kardiyovasküler durum fetal farelerin prenatal hipoksi maruz etkisini geç gebelik de ...

Yüksek frekanslı ultrason görüntüleme fetal fare görüntüleme çözümü geliştirdi ve hassas bir non-invaziv kalp geliştirme ve yapısal kusur karakterizasyonu sağlar. Burada özetlenen Protokolü gerçek zamanlı fetal fareler Ekokardiyografi vivo içindegerçekleştirmek için tasarlanmıştır.

Fetal fare bir yüksek frekans ultrason (30/45 MHZ) sistemi kullanarak Imaging kardiyovasküler

Congenital heart defects (CHDs) are the most common cause of childhood morbidity and early mortality. Prenatal detection&#160;of the underlying molecular ...

Aşağıdaki deneyin genel amacı, yüksek frekanslı bir ultrason sistemi kullanarak fetal dolaşımın yapısını ve hemodinamik parametrelerini incelemektir. Bu yöntem, gelişim sırasında gerçek zamanlı olarak kardiyak morfoloji ve akış indekslerinin kapsamlı fenotiplemesini sağlar ve deneysel ortamlarda konjenital kalp kusurlarının incelenmesine olanak tanır. Düşük frekanslı ultrason sistemleriyle karşılaştırıldığında, bu teknik, yüksek frekanslı kare hızlarında iki boyutlu dinamik görüntüler üreterek daha yüksek hassasiyet ve çözünürlük sağlar.Başlamak için ultrason görüntüleme sistemini ve fizyoloji izleme ünitesini açın. Ardından 30-45 megahertz dönüştürücüyü bağlayın ve ilgili tarama kafasını görüntüleme platformunun yanındaki tutucusuna yerleştirin. Ardından, kardiyak ölçüm programı seçeneğini seçin.Ultrason jelini 37 santigrat dereceye ayarlanmış ön ısıtma kabına baş aşağı yerleştirin. Ardından anestezi için uygun boru sistemini onaylayın ve oksijen ve izofluran seviyelerini doğrulayın. Görüntüleme platformunu ve çalışma alanını dezenfekte edin.Son olarak, baraj için 37 santigrat derece sabit vücut sıcaklığını korumak için görüntüleme platformunun ısı seviyesini ayarlayın. Sedasyonlu

fetal-mouse-cardiovascular-imaging-using-high-frequency-ultrasound

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Gelişim Biyolojisi

Bu video, bir anestezi fare ekokardiyografi yapmak için bir demiryolu monte edilmiş yüksek frekanslı ultrason probu kullanımını gösterir. Yöntemleri, Renkli Doppler, gerilme analizi, yanı sıra genel ve hedefli kontrast görüntüleme gibi daha yeni, daha güçlü araçlar için ek olarak iki geleneksel iki boyutlu ve M-mod ölçümleri kalp fonksiyonu açıklar.

Murin Ekokardiyografi ve Ultrasonik Görüntüleme

Kalp gelişimini etkileyen genetik değişiklikler incelenirken Fetal ve perinatal ölüm ortak bir özelliktir. Yüksek frekanslı ultrason görüntüleme 2-D çözünürlüğü artmıştır ve erken kardiyak gelişimi mükemmel bilgi sağlayabilir ve önceden ölüm kalp yapısı ve fonksiyonu üzerine etkisini tespit etmek için ideal bir yöntemdir.

Mürin Fetal Ekokardiyografi

Biz çağdaş fonksiyonel fetal ekokardiyografi ve bir tavşan intrauterin fetal gelişme geriliği bir cerrahiye bağlı modelinde VisualSonics VEVO 2.100 microultrasound kullanarak fetoplasental Doppler ultrasonografi ile fetal kalp fonksiyonunun incelenmesi açıklar.

Rahim içi Büyüme Kısıtlama bir Tavşan Modelinde Fetal Ekokardiyografi ve Pulsed-wave Doppler Ultrason

Ultra yüksek frekans ultrason küçük hayvanlarda kalp anormallikleri incelemek için güçlü bir canlı görüntüleme aracıdır. Bu girişimsel embriyoların fizyolojik durumunu korumak sağlar. Burada, rahimde embriyo E18.5 kalp oranlarını ölçmek için M-modu ultrason kullanımını gösterir.

Noninvaziv M-mod ekokardiyografi ile Fare Kalp Puan utero Ölçümünde

Burada, biz yaşam içine ultrason mikrokabarcık kontrast maddeler, izole geç gebelik sahne kemirgen embriyolar enjekte etmek için bir protokol mevcut. Bu yöntem perfüzyon parametrelerinin ve kontrastlı yüksek frekanslı ultrason görüntüleme kullanılarak embriyo içinde vasküler moleküler belirteçlerin çalışma sağlar.

Yüksek frekanslı Ultrason Kullanımı Fare Embriyolar Kontrast Görüntüleme

Fareler yaygın olarak Gestasyonel Biyoloji incelemek için kullanılır. Ancak, gebelik sonlandırma Boylamsal araştırmalar önler ve hayvanlar çok sayıda kullanımı gerektiren bu tür çalışmaları için gereklidir. Bu nedenle, yüksek frekanslı Ultrasonografi erken teşhis için non-invaziv tekniği ve hamile fare sonrası implantasyon olayları izleme açıklar.

Üç boyutlu yüksek frekanslı Ultrasonografi romanı kullanımı için fare erken gebelik karakterizasyonu

Burada biz fetusa farelerde vivo çözümlenmesi için yüksek frekans ultrason tekniği tarif. Bu yöntem, fetusa takibi ve plasental parametreleri hem de gebelik boyunca maternal ve fetal kan akışı analizi sağlar.

Yüksek frekans ultrason Fetal ve plasental geliştirme Vivo içinde analizi için

Yüksek çözünürlüklü ultrason, hamilelik durumunu, gebelik yaşını ve gebelik kayıplarını belirleyerek zamanlanmış hamile fareler gerektiren deneyleri kolaylaştırmaya yardımcı olabilir. Burada sunulan, fare gebeliklerini ve hamileliği taklit edebilecek potansiyel tuzakları (görüntü yapıtları) değerlendirme yöntemlerini gösteren bir protokoldür.

Farem Hamile mi? Yüksek Frekanslı Ultrason Değerlendirmesi

Bu protokol, 7 günlük yenidoğan farelerde sol ventrikül morfolojisinin, fonksiyonunun ve koroner kan akımının ekokardiyografik değerlendirmesini açıklamaktadır.

Yenidoğan Farelerde Sol Ventrikül Yapısının, Fonksiyonunun ve Koroner Akımın Ekokardiyografik Karakterizasyonu

Yüksek uzamsal çözünürlüğe (100 μm) ve duyarlılığa sahip ultra hızlı Doppler ultrason (UFUS), hepatik vaskülatür hakkında kapsamlı bir kalitatif genel bakış elde etmek için uygun bir noninvaziv görüntüleme modalitesini temsil eder. UFUS ayrıca vasküler hastalık mekanizmaları hakkındaki anlayışımızı geliştirmeyi amaçlayan mikrovasküler sistemin kantitatif ölçümlerini de kolaylaştırır.

Ultrafast Doppler Ultrason Kullanılarak Farelerin Hepatik Vaskülatürünün Görüntülenmesi ve Miktarının Belirlenmesi

Öğrenin fetal farelerde yüksek frekanslı ultrason görüntüleme yöntemiyle kardiyovasküler gelişimi incelemeyi. Bu teknik, doğuştan kalp defektlerinin invaziv olmayan gerçek zamanlı değerlendirmesini sağlar.

Fetal fare bir yüksek frekans ultrason (30/45 MHZ) sistemi kullanarak Imaging kardiyovasküler

Daha fazla video keşfet