Örnekleme stratejileri ve Biobank doku örnekleri domuz Biyomedikal modellerinden işlenmesi

Bu videoda, biyobanka domuz dokusu örneklerinden numune almak ve işlemek için iki temel teknik gösterilmektedir. Daldırma tekniği, toplam organ ve doku hacmini güvenilir bir şekilde tahmin eder ve oryantasyon tekniği, kantitatif morfolojik parametrelerin tarafsız tahmini için rastgele izotropik doku kesitleri oluşturur. Doku yoğunluğu tayini için daldırma tekniğinin temel avantajı, her türlü dokuya uygulanabilmesi ve hem küçük hem de büyük numuneler için güvenilir sonuçlar vermesidir.

Oryantasyon tekniğinin avantajları, yüksek verimli olması ve aynı zamanda büyük doku örnekleriyle de çalışmasıdır. Büyük bir organ için hacim ölçümünü başlatmak için, organdan uygun büyüklükte bir doku parçası çıkarın. Fazla kan ve doku sıvısını çıkarmak için numuneyi bir kağıt havluyla dikkatlice temizleyin.

Ardından numuneyi hassas bir terazide tartın ve numunenin ağırlığını kaydedin. Uygun boyutta bir behere %0,9 salin ekleyin. Doku çıkması sırasında taşmayı önlemek için kabı tamamen doldurmayın.

Beheri teraziye yerleştirin, ardından forseps veya numune tutucu üzerindeki işaret sıvıya ulaşana kadar bir forseps veya kendi kendine yapılmış bir numune tutucuyu tuzlu suya batırın. Ardından, ölçeğin ekranını sıfıra sıfırlayın. Doku örneğini dikkatlice forsepslere veya örnek tutucuya takın ve işaretli konuma ulaşılana kadar örneği tamamen salinin içine daldırın.

Güvenilir yoğunluk ölçümlerini kaydetmek için, numunenin tamamen suya batırıldığından emin olmak ve batırılmış numunenin iç duvarlara veya beherin tabanına herhangi bir temasını önlemek önemlidir. Numuneyi yerinde tutarken, tartıda görüntülenen ağırlığı kaydedin. Numunenin hacmini hesaplamak için bu ölçümü ve oda sıcaklığındaki tuzlu su yoğunluğunu kullanın.

Daha sonra doku örneğinin yoğunluğunu, örneğin ağırlığından ve hacminden hesaplayın. Bu böbrek gibi büyük organlar ve dokular için, birden fazla örnekle tekrarlanan ölçümler yapın ve tek ölçümlerden ortalama yoğunluğu hesaplayın. Hipofiz bezi gibi toplamda ölçülen küçük numuneler ve küçük organlar için, tek ölçüm değerlerinden ortalama organ yoğunluğunu hesaplamadan önce ölçümü üç kez tekrarlayın.

Son olarak, organ, doku veya organ bölmesinin toplam hacmini ağırlığından ve yoğunluğundan hesaplayın. Sabit bir doku örneğini, bir kenarı sıfır ila 180 derece yönüne paralel olan eşkenar şeklinde bir dairenin baskısına yerleştirin. Ardından rastgele bir açı belirlemek için rastgele bir sayı tablosu kullanın.

Eşkenar dairenin ölçeğinde karşılık gelen işaretleri bulun. Bu işaretleri kullanarak, kesit düzlemi eşkenar dairenin ölçeğinde gösterilen rastgele açının yönüne paralel ve numunenin dinlenme yüzeyine dikey olarak yönlendirilmiş olarak numune boyunca bir kesit kesin. Doku bloğunu, kesit yüzeyi aşağı bakacak şekilde kosinüs ağırlıklı bir daireye yerleştirin.

Dinlenme yüzeyinin kenarı bire bir yöne paralel olarak yerleştirilmiştir. Şimdi rastgele sayı tablosu kullanılarak belirlenen rastgele bir açıyla örnek boyunca yeni bir bölüm kesin. Elde edilen kesit düzlemi, izotropik tekdüze rastgele bir bölümdür.

Bu tablo, daldırma tekniği kullanılarak belirlenen çeşitli domuz doku ve organlarının temsili yoğunluklarını göstermektedir. Çoğu domuz dokusu, suyun yoğunluğuna atıfta bulunan birden biraz daha yüksek yoğunluk değerleri gösterir. Oysa tuzlu suda yüzen dokular, örneğin yağ dokusu gibi, birden daha düşük yoğunluklar gösterir.

Bu şekil, oryantatör tekniği ile hazırlanmış domuz sol ventrikül miyokardının dört temsili IUR bölümünü göstermektedir. Farklı IUR bölümlerindeki değişen kesme açılarına dikkat edin. Bir kez ustalaştıktan sonra, doku yoğunluğu belirleme için daldırma tekniği birkaç dakika içinde yapılabilir.

Düzgün yapılırsa. Oryantatör tekniği ile oluşturulan izotropik üniform rastgele doku kesitleri, uygun stereolojik analiz yöntemleri kullanılarak herhangi bir kantitatif morfolojik parametrenin tahmini için uygundur. dijital müzik.