Name: Tedavi Vankomisin ile kalsiyum sülfat ve otojen kemik kemik enfeksiyonu, geliştirilmiş tavşan modeli yüklü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-14T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: Keşfedin kemik enfeksiyonu araştırmaları için geliştirilmiş tavşan modelini; vankomisin yüklü kalsiyum sülfat ve otojen kemik tedavisiyle tutarlı bakteri yükü sağlar. Bu yöntem kemik rejenerasyonu ve enfeksiyon patogenezi çalışmalarına katkı sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı Çin (81803808, 81873062), Zhejiang İl Sağlık ve sağlık bilim ve Teknoloji Fonu (2017KY271) ve bilim ve teknoloji proje Zhejiang eyaleti (2017C 37181) tarafından desteklenmiştir.

Mevcut çalışmada kullanılan tavşanlar Rehberi uygun olarak bakım ve laboratuvar hayvanlarının kullanımı için tedavi edildi. Deneysel prosedürler kuralları, Biyoetik Komitesi, Zhejiang Akademi, geleneksel Çin tıbbı tarafından takip edildi.
1. bakteriyel süspansiyon hazırlanması
<ol><li>0.5 mg tozu (ATCC 6538) ile 0.3 mL Luria-Bertani kültür ortamının dağılması S. aureus geçiyoruz. Süspansiyon tamamen karıştırın.</li>
	<li>Bakteri süspansiyon tryptic soya Ağar kaplamalar üzerine çizgi ve bakteri kolonileri için 16 h 37 ° C'de kuluçkaya.</li>
	<li>Birim (CFU) ve tryptic soya suyu tüpler için 24 h gerçekleştirmek için yaklaşık 24 h 37 ° C'de bir alt Kültür Kültür oluşturan bir bakteriyel koloni seçin ve faz bakteri 16-18 h, optik yoğunluk (OD) değeri 0,6 600 olduğunda sonra orta-Logaritmik büyüme elde nm 14.</li>
	<li>1 mL bakteri süspansiyon, bir santrifüj tüpüne aktarın. 825 x g ve 4 ° C, 5 min için santrifüj kapasitesi ve süpernatant atın. Resuspend ve bakteri fosfat tamponlu tuz (PBS); 100 µL ile yıkayın Bu işlemi 3 kez tekrarlayın. Son olarak, 3 mL PBS ile bakteri resuspend.</li>
	<li>
McFarland'ın turbidimetry15kullanarak bakteri konsantrasyonu tahmin ediyoruz.
	<ol>
<li>Bulanıklık bir 0.5 McFarland standart eşdeğer olana 100-500 µL bakteri süspansiyon kolorimetrik bir tüp aktarın.</li>
		<li>Bakteri içeriği yaklaşık 10 ulaştığında bulanıklık görsel karşılaştırma için 0.5 McFarland tarafından değerlendirmek8 CFU/mL. Not: Bakteri süspansiyon bölümün aşağıdaki iletişim kuralları için yeterli olduğundan emin olun. Her tavşan için daha az 1 mL bakteri süspansiyon birimdir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bakteriyel süspansiyon, 0.2 mL bir agar plakasına aktarmak ve eşit olarak uygulayın. Plaka 16 h. sayısı için 37 ° C'de CFU bakteri süspansiyon doğrulamak için bakteri kolonileri kuluçkaya.</li>
</ol>2. kemik enfeksiyonu modelleri hazırlanması
<ol><li>Erkek Yeni Zelanda hava kontrollü koşullar (20 ± 1 ° C) ve 12 h/12 h koyu aydınlatma döngüleri altında bireysel kafeslerde 3 ay yaşlı beyaz tavşan tutmak. Ve musluk suyu günlük rutin diyet sunuyoruz.</li>
	<li>Cerrahi anda tavşan fazla 3 kg ağırlığında olun.</li>
	<li>Tavşan Fentobarbital sodyum (vücut ağırlığı 100 gram başına 3 mg) ile mayi enjeksiyonla uyuşturan. Tavşan tam bir pençe çimdik için yanıt vermek için bir hata anestezi emin olun. Tavşan ameliyat masasında işlemi işlem sırasında düzeltmek. Not: Emin olun modelleme prosedürü süresi az 1 h..</li>
	<li>Saç büyüme yönünde karşı bir Elektrikli tıraş makinesi kullanarak proksimal tibia Bölgenin tıraş. Cilt povidone-iyot çözüm uygulayarak dezenfekte.</li>
	<li>Tibia ve S. aureus (tibia üst sonu 1,5 cm uzaklıkta) ile enjeksiyon kalemi ve cetvel için Delme delik pozisyon üst sonuna işaret. Delme delik konumlarını yatay tibial Plato ortasında olduğundan emin olun (şekil 1A).</li>
	<li>No 11 neşter kullanarak tibia deriyi kesme ve 1 cm kesi kapaklarini (şekil 1B, C) olun. Bir 2 mm çapında bir elektrikli kemik matkap birimi (şekil 1D) kullanarak Tibia delik.</li>
	<li>2 mm çapında ve 2 mm yükseklik (şekil 1E) kemik balmumundan bir silindir ile tibial plato 2 mm çapında delik tuşuna basın. Yatay düzlemde tibial Plato (şekil 1F) boyunca yedek kemik balmumu kaldırmak. 2 mm delik (şekil 1G) kemik balmumundan tam olduğundan emin olun. Not: Delik ile ya da kan taşma olmadan kontrol ederek delikleri kemik balmumundan tam olduğundan emin olun.</li>
	<li>Kapaklarini dikmek ve hayvan (şekil 1H) dikiş yememi önlemek için dikey yatak dikiş içinde absorbe cerrahi sütür ile cilt.</li>
	<li>1 x 108 CFU/mL S. aureus Çözümleri (vücut ağırlığı 100 gram başına 30 µL) bir 1 mL asepsis enjektör ile (şekil 1ben) enjekte. İğneler kemik balmumu nüfuz ve S. aureus çözüm yavaş yavaş kemik iliği enjekte emin olun.</li>
	<li>Sıcak ve temiz koşullarda modelleme sonra ısı kaybını önlemek için hayvan tutmak. Solunum ve kalp hızı izlemek. Uyanma sonra yiyecek ve su için ücretsiz erişim ile bireysel kafeslerde tavşan ev.</li>
</ol>3. kemik enfeksiyonu modeli değerlendirilmesi
<ol><li>7, 14, 21 ve 28 enfeksiyon sonra gün tavşan tavşan fixer fixer dışında kulak ve kafa ile içine koyun.</li>
	<li>
2 mL kan kulak çevresi damarlardan bir dipotassium ethylenediaminetetraacetic asit (EDTA-K2) antikoagülan kan kap içine çizin. 1 mL kan damar kan kap içine çizin. Serum 651 x g oda sıcaklığında bir hız ile 10 dk santrifüj kapasitesi.
	<ol>
<li>Beyaz küre sayısı (WBC) tam bir kan biyokimyasal Çözümleyicisi'ni kullanarak kan içinde belirlemek ve C - reaktif protein (CRP) tarafından bir enzim bağlı immunosorbent assay (ELISA) yöntem16.</li>
	</ol>
</li>
	<li>7, 14, 21 ve 28 enfeksiyon sonra gün Fentobarbital sodyum, 100 g vücut ağırlığı başına 3 mg doz ile bir modeli tavşan uyuşturan. No 11 neşter kullanarak tibia deriyi kesme ve 2 cm kesi kapaklarini (Şekil 2A) olun.</li>
	<li>Temiz kemik balmumu. Nekrotik kemik bir elektrikli kemik matkap birimi (Şekil 2B) kullanarak iki bitişik 4.8 mm çapında delik delme tarafından yarayı. Nekrotik kemik iliği ve granülasyon dokusu bir kemik kaşık (Şekil 2C) kullanarak yarayı. Not: Kemik iliğinde kalan kemik dokusu önlemek için debridman sırasında kemik dokusu temiz.</li>
	<li>Scrape ve iki delik (Şekil 2D) arasındaki kemik doku temiz.</li>
	<li>1 mL kemik iliği koyun kan agar levha üzerine yayıldı. Tabak gecede 37 ° C'de kuluçkaya 30-300 kolonileri tabak seçin ve koloniler sayısını hesaplayın.</li>
	<li>Enfeksiyon sonra 28 günün sonunda, diz ve ayak bileği eklem kenarlarında tibia numuneler ayıklayın. %4 paraformaldehyde 24 h Decalcify için tibia numuneler tibia numuneler 8 hafta boyunca % 10 EDTA içinde düzeltmek.</li>
	<li>Tibia numuneler etanol dilutions kademeli bir dizi kurutmak ve parafin balmumu embed. 4 üst üste 5 µm bölüm koronal uçak kesti. Bölümleri bir Hematoksilen ve Eozin (H & E) Boyama seti ile leke.</li>
	<li>Mikroskop lekeli bölümleri görüntülemek ve standart yazılım ile iletilen ışık görüntüleri kaydetmek için kullanabilirsiniz.</li>
</ol>4. VCS boncuk hazırlanması
<ol><li>1 g Vankomisin hidroklorür tozu medikal sınıf kalsiyum sülfat 9.5 g ekleyin ve sonra karma gücüne 3 mL normal tuz ekleyin. Onları iyice 30-45 için bir spatula ile karıştırın s.</li>
	<li>Karışık ürün esnek silikon jel kalıp (silindir 4.8 mm çap ve 4.8 mm yükseklik) yerleştirin ve kalıp esneme tarafından VCS boncuk 15 dk. kaldırmak için oda sıcaklığında kuru.</li>
</ol>5. antibiyotik tedavisi ve otojen kemik implantasyonu
<ol><li>Fentobarbital sodyum, 100 g vücut ağırlığı başına 3 mg doz tavşanlarla modeli enfeksiyon sonra 28inci gününde uyuşturan. Bir Elektrikli tıraş makinesi kullanarak proksimal tibia Bölgenin tıraş. Cilt povidone-iyot çözüm uygulayarak dezenfekte. Not: Modelleme prosedürü az 1 h olduğundan emin olun.</li>
	<li>Bir Elektrikli tıraş makinesi kullanarak kuyruk bölgesi tıraş ve kuyruk povidone-iyot çözüm uygulayarak dezenfekte.</li>
	<li>Cerrahi makas kullanarak kuyruk kesilmiş. No 11 neşter kullanarak kuyruk deriyi kesme ve kuyruk kemik ortaya koyuyor. Kuyruk bölgesi ile absorbe cerrahi sütür dikiş yememi hayvan önlemek için dikey yatak dikiş odasına tene dikmek.</li>
	<li>Herhangi bir kas, yumuşak doku ve kapaklarini kaldırın. Her ortak, kuyruk kemik ayırmak ve kemik parçası bir 100 mm plastik tabak steril serum fizyolojik içeren transfer.</li>
	<li>VCS boncuk (silindir 4.8 mm çap ve 4.8 mm yükseklik, boncuk parça başına 1.25 mg Vankomisin) 4 adet eğri cımbız (Şekil 2E) kullanarak iliği boşluğuna implant.</li>
	<li>Kemik defekti doldurmak otojen kemik 8 adet ile (silindir 2 mm çapında ve 4 mm yüksekliği her parça başına) kullanarak eğri cımbız (Şekil 2E).</li>
	<li>Kapaklarini dikmek ve bir yatak dikiş şekilde (Şekil 2F) absorbe cerrahi sütür ile cilt. Not: Sıcaklık 25 ° C'de ameliyat sırasında tutmak.</li>
	<li>Hayvan ameliyattan sonra ısı kaybını önlemek için sıcak ve temiz koşulları unutmayın. Solunum ve kalp hızı izlemek. Uyanma sonra yiyecek ve su için ücretsiz erişim ile bireysel kafeslerde tavşan ev.</li>
</ol>6. değerlendirme antibiyotik faaliyet
<ol><li>Tavşan tavşan fixer koymak ve 2, 4, 6 ve 8 haftalık tedaviden sonra baş ve iş bitirici dışında kulak yer.</li>
	<li>Kan EDTA-K2 antikoagülan kan damarı ile kulak çevresi damarlar çizmek. 1 mL kan damar kan kap içine çizin. Serum 651 x g oda sıcaklığında bir hız ile 10 dk santrifüj kapasitesi.</li>
	<li>Beyaz küre sayısı (WBC) tam kan kan biyokimyasal analiz ve C - reaktif protein (CRP) tarafından bir ELISA yöntemi16kullanarak belirleyin.</li>
</ol>7. kemik rejenerasyon ilişkin Değerlendirmeler
<ol><li>Tavşan ile bir yere enjekte edilerek ötenazi dozlarda tedavi sonrasında 8 veya 12 hafta sonunda Fentobarbital sodyum.</li>
	<li>Tibia numuneler, diz ve ayak bileği eklem kenarlarında ayıklayın. Kas ve Fasial katmanları yarayı.</li>
	<li>Tibia yapısını mikro Bilgisayarlı Tomografi (mikro-CT) kullanarak analiz. Bir oval alan 4.8 mm çap ve 9,6 mm uzun vade farkı (ROI) bölge olarak seçin. Bitmap verileri kullanarak 3D modeli görüntüleri yeniden.</li>
	<li>Kemik birim/doku hacmi (BV/TV), Trabeküler kalınlığı (Tb.Th), oranını puanları seçin trabecula numarası (Tb.N) ve Trabeküler ayırma (kemik rejenerasyon değerlendirmek için Tb.Sp)from the3D modelleri.</li>
</ol>

<ol><li>Malizos, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+Forum%3A+The+Burden+of+Bone+and+Joint+Infection%3A+A+Growing+Demand+for+More+Resources%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Joint+Surgery-American+Volume%22%5BJournal%5D)">Global Forum: The Burden of Bone and Joint Infection: A Growing Demand for More Resources.</a> Journal of Bone and Joint Surgery-American Volume. 99, 20(2017).</li>
<li>Peeters, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Teicoplanin+-+based+antimicrobial+therapy+in+Staphylococcus+aureus+bone+and+joint+infection%3A+tolerance%2C+efficacy+and+experience+with+subcutaneous+administration%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Teicoplanin - based antimicrobial therapy in Staphylococcus aureus bone and joint infection: tolerance, efficacy and experience with subcutaneous administration.</a> BMC Infectious Diseases. 16, 622(2016).</li>
<li>Sugaya, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percutaneous+autologous+concentrated+bone+marrow+grafting+in+the+treatment+for+nonunion%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Orthopeadic+Surgery+and+Traumatology%22%5BJournal%5D)">Percutaneous autologous concentrated bone marrow grafting in the treatment for nonunion.</a> European Journal of Orthopeadic Surgery and Traumatology. 24, 671-678 (2014).</li>
<li>Birt, M. C., Anderson, D. W., Bruce, T. E., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteomyelitis%3A+Recent+advances+in+pathophysiology+and+therapeutic+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopeadics%22%5BJournal%5D)">Osteomyelitis: Recent advances in pathophysiology and therapeutic strategies.</a> Journal of Orthopeadics. 14, 45-52 (2017).</li>
<li>Walter, G., Kemmerer, M., Kappler, C., Hoffmann, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+algorithms+for+chronic+osteomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22Deutsches+Arzteblatt+International%22%5BJournal%5D)">Treatment algorithms for chronic osteomyelitis.</a> Deutsches Arzteblatt International. 109, 257-264 (2012).</li>
<li>Henriksen, K., Neutzsky-Wulff, A. V., Bonewald, L. F., Karsdal, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+communication+on+and+within+bone+controls+bone+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Local communication on and within bone controls bone remodeling.</a> Bone. 44, 1026-1033 (2009).</li>
<li>Mendoza, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+vancomycin+powder+on+bone+healing+in+a+rat+spinal+rhBMP-2+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery+Spine%22%5BJournal%5D)">The effect of vancomycin powder on bone healing in a rat spinal rhBMP-2 model.</a> Journal of Neurosurgery Spine. 25, 147-153 (2016).</li>
<li>Cohn Yakubovich, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computed+Tomography+and+Optical+Imaging+of+Osteogenesis-angiogenesis+Coupling+to+Assess+Integration+of+Cranial+Bone+Autografts+and+Allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Computed Tomography and Optical Imaging of Osteogenesis-angiogenesis Coupling to Assess Integration of Cranial Bone Autografts and Allografts.</a> Journal of Visualized Experiments. (106), e53459(2015).</li>
<li>Brecevich, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+Comparison+of+Accell+Evo3+and+Grafton+Demineralized+Bone+Matrix+Putties+against+Autologous+Bone+in+a+Rat+Posterolateral+Spine+Fusion+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Spine+Journal%22%5BJournal%5D)">Efficacy Comparison of Accell Evo3 and Grafton Demineralized Bone Matrix Putties against Autologous Bone in a Rat Posterolateral Spine Fusion Model.</a> Spine Journal. 17, 855-862 (2017).</li>
<li>Jensen, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+porcine+model+of+implant-associated+osteomyelitis%3A+A+comprehensive+analysis+of+local%2C+regional%2C+and+systemic+response%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopeadic+Research%22%5BJournal%5D)">Novel porcine model of implant-associated osteomyelitis: A comprehensive analysis of local, regional, and systemic response.</a> Journal of Orthopeadic Research. 35, 2211-2221 (2016).</li>
<li>de Mesy Bentley, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+Staphylococcus+Aureus+Deformation%2C+Proliferation%2C+and+Migration+in+Canaliculi+of+Live+Cortical+Bone+in+Murine+Models+of+Osteomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Evidence of Staphylococcus Aureus Deformation, Proliferation, and Migration in Canaliculi of Live Cortical Bone in Murine Models of Osteomyelitis.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 32, 985-990 (2017).</li>
<li>Norden, C. W., Kennedy, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+osteomyelitis.+I%3A+A+description+of+the+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Experimental osteomyelitis. I: A description of the model.</a> Journal of Infectious Diseases. 122, 410-418 (1970).</li>
<li>Mistry, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel%2C+multi-barrier%2C+drug+eluting+calcium+sulfate%2Fbiphasic+calcium+phosphate+biodegradable+composite+bone+cement+for+treatment+of+experimental+MRSA+osteomyelitis+in+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Controlled+Release%22%5BJournal%5D)">A novel, multi-barrier, drug eluting calcium sulfate/biphasic calcium phosphate biodegradable composite bone cement for treatment of experimental MRSA osteomyelitis in rabbit model.</a> Journal of Controlled Release. 239, 169-181 (2016).</li>
<li>Bernthal, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+In+vivo+Optical+and+%C2%B5CT+Imaging+to+Monitor+Infection%2C+Inflammation%2C+and+Bone+Anatomy+in+an+Orthopaedic+Implant+Infection+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Combined In vivo Optical and µCT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e51612(2014).</li>
<li>Koeth, L. M., DiFranco-Fisher, J. M., McCurdy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Reference+Broth+Microdilution+Method+for+Dalbavancin+In+Vitro+Susceptibility+Testing+of+Bacteria+that+Grow+Aerobically%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A Reference Broth Microdilution Method for Dalbavancin In Vitro Susceptibility Testing of Bacteria that Grow Aerobically.</a> Journal of Visualized Experiments. (103), e53028(2015).</li>
<li>Uttra, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ephedra+gerardiana+aqueous+ethanolic+extract+and+fractions+attenuate+Freund+Complete+Adjuvant+induced+arthritis+in+Sprague+Dawley+rats+by+downregulating+PGE2%2C+COX2%2C+IL-1%CE%B2%2C+IL-6%2C+TNF-%CE%B1%2C+NF-kB+and+upregulating+IL-4+and+IL-10%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Ephedra gerardiana aqueous ethanolic extract and fractions attenuate Freund Complete Adjuvant induced arthritis in Sprague Dawley rats by downregulating PGE2, COX2, IL-1β, IL-6, TNF-α, NF-kB and upregulating IL-4 and IL-10.</a> Journal of Ethnopharmacology. 224, 482-496 (2018).</li>
<li>Harrasser, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+implant-related+osteomyelitis+in+the+metaphysis+of+rat+tibiae%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Musculoskeletal+Disorders%22%5BJournal%5D)">A new model of implant-related osteomyelitis in the metaphysis of rat tibiae.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 17, 152(2016).</li>
<li>Abedon, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Commentary%3A+Phage+Therapy+of+Staphylococcal+Chronic+Osteomyelitis+in+Experimental+Animal+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Commentary: Phage Therapy of Staphylococcal Chronic Osteomyelitis in Experimental Animal Model.</a> Frontiers in Microbiology. 7, 1251(2016).</li>
<li>Tan, H. L., Ao, H. Y., Ma, R., Lin, W. T., Tang, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+effect+of+quaternized+chitosan-loaded+polymethylmethacrylate+bone+cement+on+methicillin-resistant+Staphylococcus+epidermidis+infection+of+the+tibial+metaphysis+in+a+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrobial+Agents+and+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">In vivo effect of quaternized chitosan-loaded polymethylmethacrylate bone cement on methicillin-resistant Staphylococcus epidermidis infection of the tibial metaphysis in a rabbit model.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 58, 6016-6023 (2014).</li>
<li>Chiara, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+Osteomyelitis+in+the+Diabetic+Foot+by+Imaging+Techniques%3A+A+Systematic+Review+and+Meta-analysis+Comparing+MRI%2C+White+Blood+Cell+Scintigraphy%2C+and+FDG-PET%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Detection of Osteomyelitis in the Diabetic Foot by Imaging Techniques: A Systematic Review and Meta-analysis Comparing MRI, White Blood Cell Scintigraphy, and FDG-PET.</a> Diabetes Care. 40, 1111-1120 (2017).</li>
<li>Khalid, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+Spectroscopy+detects+changes+in+Bone+Mineral+Quality+and+Collagen+Cross-linkage+in+Staphylococcus+Infected+Human+Bone%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Raman Spectroscopy detects changes in Bone Mineral Quality and Collagen Cross-linkage in Staphylococcus Infected Human Bone.</a> Scientific Reports. 8, 9417(2018).</li>
<li>Putters, T. F., Schortinghuis, J., Vissink, A., Raghoebar, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+prospective+study+on+the+morbidity+resulting+from+calvarial+bone+harvesting+for+intraoral+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Oral+and+Maxillofacial+Surgery%22%5BJournal%5D)">A prospective study on the morbidity resulting from calvarial bone harvesting for intraoral reconstruction.</a> International Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 44, 513-517 (2015).</li>
<li>Yin, J., Jiang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Completely+resorption+of+autologous+skull+flap+after+orthotopic+transplantation%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Clinical+and+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Completely resorption of autologous skull flap after orthotopic transplantation: a case report.</a> International Journal of Clinical and Experimental Medicine. 7, 1169-1171 (2014).</li>
<li>Takehiko, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preliminary+results+of+managing+large+medial+tibial+defects+in+primary+total+arthroplasty%3A+autogenous+morcellised+bone+graft%5BTitle%5D)+AND+%22International+Orthopaedics%22%5BJournal%5D)">Preliminary results of managing large medial tibial defects in primary total arthroplasty: autogenous morcellised bone graft.</a> International Orthopaedics. 41, 931-937 (2017).</li>
</ol>

Yazarlar bu çalışmalarında hiçbir çıkar çatışmaları rapor.

Önceki çalışmalarda, hem de akut ve kronik kemik enfeksiyonu çalışmaya çeşitli hayvan modelleri inşa edildi; Ancak, ideal modeli için arama devam hala17,18. Buna ek olarak, ideal kemik enfeksiyonu modeli modelleme dönemleri sırasında klinik ortamda kemik enfeksiyonu patolojik özelliklerini taklit, kalır düşük maliyetli ve kolay yapmak bekleniyor. Adatavşanı are elde edilebilir, uygun ve ucuz olarak şimdiye kadar tavşan kemik enfeksiyonu inflamatuar kemik hastalığ...

Kemik enfeksiyonu genellikle bakteri ya da diğer mikroorganizma işgalden sonra travma, kemik kırığı veya diğer kemik hastalıkları1kaynaklanır. Kemik enfeksiyonu yüksek düzeyde inflamasyon ve kemik doku imha neden olabilir. Klinikte, kemik enfeksiyonu2,3baskın etken Staphylococcus aureus (S. aureus) olduğunu. Kemik enfeksiyonu zayıflatıcı, acı verici ve genellikle4tedavi son derece zordur kronik bir ders alır. Şu anda, nekrotik doku debridman ve Vankomisin yüklü kalsiyum (VCS) boncuk yerleştirerek doğruladı yerel enfeksiyon5,6kontrol etmek için etkili bir strateji olarak. Ancak, hastaların % %10 15 Anti-enfeksiyon tedavi7' den sonra uzun süreli kemik onarım işlemi, gecikmeli Birliği veya sendikasız karşılaşmış. Büyük bir Kemik defekti Ortopedik Cerrahlar için en zor bir konu kesimdir. Otolog kemik grefti en uygun kemik yerine kemik sendikasız tedavi8,9olarak kabul edilir.
Bugüne kadar kemik üzerindeki çalışmaların en enfeksiyon ve Otolog kemik implantasyon çeşitli hayvan modelleri, sıçan, tavşan, köpek, domuz ve koyun10,11gibi yapılmıştır. Tavşan modelleri en sık olarak kemik enfeksiyonu çalışmaları için kullanılan ilk Norden ve Kennedy tarafından 197012,13' te yapılacak. Önceki çalışma, tavşan modelleri tabi Norden'ın yöntem kullandık ve bulduğumuz kan kemik iliğini sızıntı bakteri çözüm taşmaya yol olarak kemik iliği enjekte S. aureus miktarı doğru bir şekilde sayısal değil ki.
Bu makalede kemik enfeksiyonu tavşan inducing için geliştirilmiş bir cerrahi yöntem sunuyor. Yordamın bitiminde, kan Biyokimya testi, bakteriyolojik muayene ve histopatolojik muayene kemik enfeksiyonu modeli doğrulamak için yapıldı. Daha sonra VCS enfeksiyon etkisizleştirmek için implante ve otojen kemik kemik rejenerasyon teşvik için implante.

<table><tbody><tr><td>emilebilir cerrahi sütür</td><td>Jinghuan</td><td>18S0604A</td><td></td></tr><tr><td>asepsi enjektörü</td><td>Jinglong</td><td>20170501</td><td></td></tr><tr><td>kemik balmumu</td><td>ETHICON</td><td>JH5CQLM</td><td></td></tr><tr><td>CCD kamera</td><td>Olympus</td><td>DP72</td><td></td></tr><tr><td>EDTA-K2 antikoagülan kan damarı</td><td>XINGE</td><td>20170802</td><td></td></tr><tr><td>Elektrikli kemik matkap ünitesi</td><td>Bao Kang</td><td>BKZ-1</td><td></td></tr><tr><td>Elektrikli tıraş makinesi</td><td>Codos</td><td>3800</td><td></td></tr><tr><td>esnek silika jel kalıbı&nbsp;</td><td>WRIGHT</td><td>1527745</td><td></td></tr><tr><td>Hematoksilen ve Eozin Boyama Kiti</td><td>Beyotime</td><td>20170523</td><td></td></tr><tr><td>Luria-Bertani kültür ortamı</td><td>Baisi Biyotoloji</td><td>20170306</td><td></td></tr><tr><td>Tıbbi sınıf kalsiyum sülfat</td><td>WRIGHT</td><td>1527745</td><td></td></tr><tr><td>mikrobilgisayarlı tomografi (mikro-BT)</td><td>Bruker</td><td>SkyScan 1172&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop</td><td>Olympus</td><td>CX41</td><td></td></tr><tr><td>Yeni Zelanda beyaz tavşanları</td><td>Zhejiang Deney Hayvanları Merkezi&nbsp;</td><td>SCXK 2014-0047</td><td></td></tr><tr><td>No. 11 neşter&nbsp;</td><td>Yuanlikang</td><td>20170604</td><td></td></tr><tr><td>normal tuzlu</td><td>su Mingsheng</td><td>20170903</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>TBD (Jingyi)</td> <td>20170703-0592</td><td></td></tr><tr><td>pentobarbital sodyum</td><td>Merk</td><td>2070124</td><td></td></tr><tr><td>povidon-iyot çözeltisi</td><td>Lierkang</td><td>20170114</td><td></td></tr><tr><td>S. aureus dondurarak kurutma tozu</td><td>Çin Genel Mikrobiyoloji Kültür Toplama Merkezi</td><td>ATCC 6538</td><td></td></tr><tr><td>koyun kanı agar</td><td>HuanKai Mikrobiyal</td><td>3103210</td><td></td></tr><tr><td>triptik soya agar plakaları</td><td>HuanKai Mikrobiyal</td><td>3105697</td> triptik soya suyu tüpleri HuanKai Mikrobiyal 3104260 <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vankomisin</td><td>Lilly</td><td>C599180</td><td></td></tr></tbody></table>

tedavi vankomisin ile kalsiyum sülfat ve otojen kemik kemik enfeksiyonu, geliştirilmiş tavşan modeli yüklü

Treatment with Vancomycin Loaded Calcium Sulphate and Autogenous Bone in an Improved Rabbit Model of Bone Infection

Kemik enfeksiyonu klinik, ortopedik ve travmatik cerrahi olarak tedavi etmek son derece zor bakteriyel istila kaynaklanır. Kemik enfeksiyonu sürekli iltihap, osteomiyelit ve nihai kemik sendikasız sonuçlanabilir. Uygulanabilir ve tekrarlanabilir bir hayvan modelini kurulması kemik enfeksiyonu araştırma ve antibiyotik tedavisi önemlidir. İçinde vivo bir model olarak tavşan modeli kemik enfeksiyonu araştırmalarda yaygın olarak kullanılır. Ancak, önceki çalışmalarda tavşan bakteri miktarı değişken olduğu gibi enfeksiyon durumu tutarsız, gösterdi enfeksiyon modelleri kemik. Bu çalışmada kemik enfeksiyonu bir tavşan, kemik iliği bakterilerde engelleyerek inducing için geliştirilmiş bir cerrahi yöntem sunuyor. O zaman, çok düzeyli değerlendirme modelleme yöntemi doğrulamak için yürütülen olabilir.
Genel olarak, nekrotik doku Debridmanı ve implantasyon Vankomisin yüklü kalsiyum sülfat (VCS) antibiyotik tedavisi baskın. Kalsiyum sülfat VCS içinde sürünerek osteocyte ve yeni Kemik büyümesi faydaları rağmen büyük kemik defektleri Debridmanı sonra oluşur. Otojen kemik (AB) kemik defektleri nekrotik kemik Debridmanı sonra büyük kemik defektleri tedavisi için üstesinden gelmek için çekici bir stratejidir.
Bu çalışmada, bir otojen kemik kemik üründe implante olarak kuyruk kemik kullanılır. Kemik onarım mikro-Bilgisayarlı-Tomografi (mikro-CT) ve histolojik analiz sonra hayvan kurban kullanılarak ölçüldü. Sonuç olarak, VCS grubunda, kemik sendikasız sürekli olarak elde edildi. Buna ek olarak, VCS-AB grubu Kemik defekti alanlarında önemli ölçüde azalma. Mevcut modelleme yöntemi kemik enfeksiyonu manken hazırlamak için tekrarlanabilir, uygulanabilir, istikrarlı bir yöntemi açıklanmıştır. VCS-AB tedavi daha düşük kemik sendikasız fiyatlarına sonra antibiyotik tedavisi sonuçlandı. Gelişmiş kemik enfeksiyonu modeli ve kombinasyon tedavisi VCS ve otojen kemik kemik enfeksiyonu ve kemik rejenerasyon Travmatoloji ortopedik uygulamalar için ilgili temel mekanizmaları okumak yardımcı olabilir.

Kemik enfeksiyonu modeli değerlendirilmesi S. aureusile enfeksiyon sonra tavşan patolojik bulguları klinikte kronik osteomiyelit temsilcisi belirtisi benzerdi. Çalışma, 30 tavşan enfekte ve bir model grubu tabi ve 10 tavşan denetim hayvanlar tabi tutuldu. Tüm modeli tavşan sinüsler ile beyaz ve sarı irin akışı sinüsler (şekil 3A) üzerinde tibia yerel site bulaşmış. H &amp; E boyama sonuçları bakteriyel toplamları ...

Bu çalışmada geliştirilmiş bir tavşan sunar kemik iliği bakterilerde aynı miktarda engelleyerek Staphylococcus aureus ile enfekte modeli. Vankomisin yüklü kalsiyum sülfat ve otojen kemik antibiyotik ve kemik onarım tedavisi için kullanılır. Protokol kemik enfeksiyonu ve yenilenme eğitim için yararlı olabilir.

Tedavi Vankomisin ile kalsiyum sülfat ve otojen kemik kemik enfeksiyonu, geliştirilmiş tavşan modeli yüklü

Bone infection results from bacterial invasion, which is extremely difficult to treat in clinical, orthopedic, and traumatic surgery. The bone infection ...

Kemik enfeksiyonu araştırmaları için bir hayvan modeli çok önemlidir. Ancak, şu anda hangi enfeksiyonlar durumu ve bakteri sayısı tutarlı olduğu için hiçbir tavşan modeli yoktur. Kemik enfeksiyonu tavşan modeli tutarlı bir bakteri kullanır ve vankomisin yüklü kalsiyum sülfat ve otojen parçaları ile tedavi edilir.Bu teknik kemik enfeksiyonu ve kemik nonunion tedavisinin tanısı ve kemik enfeksiyonunun patogenezinin anlaşılması için genişletilebilir. Bu yöntem sıçanlar, fareler ve domuzlar diğer kemik enfeksiyonu modelleri içine fikir sağlayabilir. Aynı miktarda bakteriyel süspansiyonu kemik iliği içine yüklemek zordur.Görsel gösteri, araştırmacıların kritik adımları kolay ve doğru bir şekilde gerçekleştirmelerine yardımcı olabilir. Bakteriyel süspansiyon hazırlamak için, ilk LB kültür orta 0,3 mililitre S.aureus dondurulmuş kurutulmuş toz 0.5 miligram çözünür. Süspansiyonu iyice karıştırın ve bakterileri 37 santigrat derecede 16 saat boyunca kuluçkaları için triptotik soya agar plakalarına yerleştirin.Ertesi sabah, 37 santigrat derecede 24 saat boyunca triptik soya suyu tüplerinde kültür için tek bir bakteri kolonisi oluşturma ünitesi seçin. Bakteriler orta logaritmik büyüme aşamasın

treatment-with-vancomycin-loaded-calcium-sulphate-autogenous-bone-an

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Tavşan diz ekleminde kıkırdak defektlerinin tedavisi için bir deney tekniği tarif edilmektedir. Bir matris üzerinde numaralı seribaşı otolog kondrosit implantasyonu tatmin edici uzun vadeli sonuçlar sağlayan eklem kıkırdağı lezyonların yeniden ve onarım için bir iyi kabul edilen bir yöntemdir. Matrix destekli otolog kondrosit transplantasyonu (MACT) bir standart ve klinik olarak kurulan implantasyon yöntem sunmaktadır.

Bir Tavşan Modelinde Kondral Kusurların Tadilat ve Onarım için matris destekli Otolog Kondrosit Nakli

Tavşan diz eklemi osteokondral defektlerinin tedavisi için bir deney tekniği tarif edilmektedir. Osteokondral kusurları içine allojenik mezenkimal kök hücrelerin implantasyon doku mühendisliği alanında umut verici bir gelişme sağlar. Fibrin pıhtısı hücre...

Fibrin pıhtısı içinde allojenik Mezenkimal Kök Hücre implantasyonu ile Tavşan Diz Eklemi içinde Osteokondral Kusur tedavisi

Bu videoda, ilgilenilen kemik örneği ikame materyallerinin kemik rejenerasyon kapasitelerini değerlendirmek için bir tavşan kalvarial modeli oluşturmak için cerrahi prosedürü açıklıyoruz.

Bir Tavşan Kalvarial Defekt Modeli Oluşturma: Kemik Rejenerasyon Kapasiteleri için Kemik İkame Materyallerini Değerlendirmek için Tavşan Kafatasının Üst Kısmında Yuvarlak Defektler Oluşturmak İçin Cerrahi Bir Prosedür

Bu video, bakteri sızıntısını önlemek için kemik mumu kullanarak bir tavşanın kemik iliğinde cerrahi olarak bakteriyel enfeksiyonu indükleme tekniğini açıklamaktadır. Bu tavşan modeli, kemik enfeksiyonu tedavisini ve kemik rejenerasyonunu incelemek için kullanılabilir.

Kemik Enfeksiyonunun Tavşan Modelinin Oluşturulması: Bakterileri Doğrudan Kemik İliğine Enjekte Ederek Kronik Enfeksiyonu İndükleme Tekniği

Staphylococcus aureus bir biyolojik olarak ışık veren mühendislik suşu kullanılarak, ortopedik protez enfeksiyonun bir fare modelinde, optik ve uCT görüntüleme birlikte, invaziv olmayan uzunlamasına ve bakteriyel enfeksiyonun dinamikleri, hem de karşılık gelen enflamatuar yanıtı ve anatomik değişiklikleri izlemek için bir kapasite sağlamadığı Kemik.

Kombine<em&gt; In vivo</em&gt; Optik ve uCT Görüntüleme Farelerde bir Ortopedik İmplant Enfeksiyon Enfeksiyon, Enflamasyon ve Kemik Anatomisi Monitör

Şu anda bozukluklarına bileşik allotransplantation her türlü uzun-vadeli-immünosupresyon, hayat kritik olmayan endikasyonları desteklemek zor bağlıdır. Biz kemik VCA çalışma ve kemik canlılığı uzun süreli bağışıklık modülasyonu, gerek kalmadan korumak için cerrahi angiogenez kullanımını göstermek için kullanılan yeni bir domuz tibial VCA modeli mevcut.

Domuz Tibial Allotransplantation cerrahi angiogenez: bileşik Allotransplantation Model yeni bir büyük hayvan kemik skarların

Burada kemik değiştirme malzemelerini kemik rejenerasyon kapasiteleri açısından değerlendirmek amacıyla tavşanlarda cerrahi bir protokol sunacağız. Tavşan kafataslarına sabitlenmiş PEEK silindirleri kullanılarak, osteokondasyon, osteoindüksiyon, osteonezogenez ve vaskülogenez indüklenen malzemeler canlı veya ötenazi yapılan hayvanlarda değerlendirilebilir.

Kemik İkmal Malzemelerinde Kemik Büyümesi ve Neaskülarizasyonunun Değerlendirilmesi İçin Tavşanda Kemik Büyütmenin Kalvarial Modeli

Protokol, paslanmaz çelik bir k-tel implantının biyolüminesan Staphylococcus aureus Xen36 ile enfekte olduğu yeni bir in vivo spinal implant enfeksiyonu fare modelini açıklar. Bakteri yükü biyolüminesan görüntüleme ile uzunlamasına izlenir ve ötenazi sonrası koloni oluşturan birim sayıları ile doğrulanır.

Spinal İmplant Enfeksiyonunun İn Vivo Fare Modeli

Tavşanlarda açık medial femoral kondil etki modeli, travma sonrası osteoartrit (PTOA) ve PTOA ilerlemesini azaltmak için yeni terapötik stratejiler üzerinde çalışmak için güvenilirdir. Bu protokol, bir çarpma kafasına sahip taşıyıcı tabanlı bir düşme kulesi kullanılarak tavşanlarda posterior medial femoral kondilin izole bir kıkırdak defektini oluşturur.

Tavşanda travma sonrası osteoartrit oluşturmak için tekrarlanabilir bir kıkırdak etki modeli

Hayvan modelleri sık kemik kanseri metastazı araştırmak için kullanılmaktadır. Bu protokolü biz kemik metastazı çalışmaları için tümör inokülasyonu iki genel metot tanımlamak ve kısaca bu modeller izlemek ve ölçmek için kullanılan analizler bazı anlatacağız.

Kemik Metastaz Modelleri

Keşfedin kemik enfeksiyonu araştırmaları için geliştirilmiş tavşan modelini; vankomisin yüklü kalsiyum sülfat ve otojen kemik tedavisiyle tutarlı bakteri yükü sağlar. Bu yöntem kemik rejenerasyonu ve enfeksiyon patogenezi çalışmalarına katkı sunar.

Tedavi Vankomisin ile kalsiyum sülfat ve otojen kemik kemik enfeksiyonu, geliştirilmiş tavşan modeli yüklü

Daha fazla video keşfet