Name: Yüksek işlem hacmi SiRNA tarama için polis ve hidrojen florür kaynaklı kornea epitel hücre hasarı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-16T13:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 20 s
Description: Keşfedin yüksek işlem hacmi siRNA tarama yöntemini, kornea epitel hücrelerinde hidrojen florür ve kloropikrin kaynaklı toksik hasarı incelemek için. Bu teknik, hücresel yanıt mekanizmalarını hızla belirleyerek toksikoloji araştırmalarına katkı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu araştırma ulusal kurumları, sağlık karşı koymak Program kurumlararası anlaşma # AOD13015-001 tarafından desteklenmiştir. Stephanie Froberg ve Peter Hurst çabaları ve video üretimi uzmanlık için teşekkür etmek istiyorum.

<ol><li>Randleman, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRandleman%2C+B+%22Drugs%2C+Diseases+and+Procedures%22">Drugs, Diseases and Procedures</a>. Hampton, R. , Medscape. (2011).</li>
<li>Fish, R., Davidson, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+ocular+thermal+and+chemical+injuries%2C+including+amniotic+membrane+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Management of ocular thermal and chemical injuries, including amniotic membrane therapy.</a> Current Opinion in Ophthalmology. 21 (4), 317-321 (2010).</li>
<li>Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+treatment+strategies+for+hydrofluoric+acid+burns%3A+current+status+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Burns%22%5BJournal%5D)">A review of treatment strategies for hydrofluoric acid burns: current status and future prospects.</a> Burns. 40 (8), 1447-1457 (2014).</li>
<li>Gaytan, B. D., Vulpe, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+toxicology%3A+tools+to+advance+the+future+of+toxicity+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Genetics%22%5BJournal%5D)">Functional toxicology: tools to advance the future of toxicity testing.</a> Frontiers in Genetics. 5, 110(2014).</li>
<li>North, M., Vulpe, C. D. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3100848/">Functional toxicogenomics: mechanism-centered toxicology.</a> International Journal of Molecular Sciences. 11 (12), 4796-4813 (2010).</li>
<li>McManus, M. T., Sharp, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+silencing+in+mammals+by+small+interfering+RNAs%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Genetics%22%5BJournal%5D)">Gene silencing in mammals by small interfering RNAs.</a> Nature Reviews Genetics. 3 (10), 737-747 (2002).</li>
<li>Bassik, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+mammalian+genetic+interaction+map+reveals+pathways+underlying+ricin+susceptibility%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A systematic mammalian genetic interaction map reveals pathways underlying ricin susceptibility.</a> Cell. 152 (4), 909-922 (2013).</li>
<li>Solaimani, P., Damoiseaux, R., Hankinson, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+RNAi+high-throughput+screen+identifies+proteins+necessary+for+the+AHR-dependent+induction+of+CYP1A1+by+2%2C3%2C7%2C8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Genome-wide RNAi high-throughput screen identifies proteins necessary for the AHR-dependent induction of CYP1A1 by 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin.</a> Toxicological Sciences. 136 (1), 107-119 (2013).</li>
<li>Cox, J. A., Gooding, R., Kolakowski, J. E., Whitmire, M. T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCox%2C+JA+%22Chemical+Terrorism+Risk+Assessment%3B+CSAC+12-006%22">Chemical Terrorism Risk Assessment; CSAC 12-006</a>. , U.S. Department of Homeland Security, Science and Technology Directorate, Chemical Security Analysis Center. Aberdeen Proving Ground, MD. (2012).</li>
<li>Zang, R., Li, D., Tang, I., Wang, J., Yang, S. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/267200748_Cell-Based_Assays_in_High-Throughput_Screening_for_Drug_Discovery">Cell-Based Assays in High-Throughput Screening for Drug Discovery.</a> International Journal of Biotechnology for Wellness Industries. 1, 31-51 (2012).</li>
<li>Ray, R., Hauck, S., Kramer, R., Benton, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+convenient+fluorometric+method+to+study+sulfur+mustard-induced+apoptosis+in+human+epidermal+keratinocytes+monolayer+microplate+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+and+Chemical+Toxicology%22%5BJournal%5D)">A convenient fluorometric method to study sulfur mustard-induced apoptosis in human epidermal keratinocytes monolayer microplate culture.</a> Drug and Chemical Toxicology. 28 (1), 105-116 (2005).</li>
<li>Ruff, A. L., Dillman, J. F. 3rd <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sulfur+mustard+induced+cytokine+production+and+cell+death%3A+investigating+the+potential+roles+of+the+p38%2C+p53%2C+and+NF-kappaB+signaling+pathways+with+RNA+interference%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biochemical+and+Molecular+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Sulfur mustard induced cytokine production and cell death: investigating the potential roles of the p38, p53, and NF-kappaB signaling pathways with RNA interference.</a> Journal of Biochemical and Molecular Toxicology. 24 (3), 155-164 (2010).</li>
<li>Smith, W. J., Gross, C. L., Chan, P., Meier, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+human+epidermal+keratinocytes+in+culture+as+a+model+for+studying+the+biochemical+mechanisms+of+sulfur+mustard+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biology+and+Toxicology%22%5BJournal%5D)">The use of human epidermal keratinocytes in culture as a model for studying the biochemical mechanisms of sulfur mustard toxicity.</a> Cell Biology and Toxicology. 6 (3), 285-291 (1990).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Toxnet%22">Toxnet</a>. , 
 <a target="_blank" href="https://toxnet.nlm.nih.gov/">https://toxnet.nlm.nih.gov/</a> (2016).</li>
<li>Bancroft, W. D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBancroft%2C+WD+%22The+Medical+Department+of+the+United+States+Army+in+the+World+War%22">The Medical Department of the United States Army in the World War</a>. 14, Otis Historical Archives, National Museum of Health and Medicine. (1926).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Chloropicrin+Risk+Characterization+Document%22">Chloropicrin Risk Characterization Document</a>. , California Environmental Protection Agency. (2012).</li>
<li>Aigueperse, J., et al. <a target="_blank" href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/14356007.a11_307">Fluorine Compounds, Inorganic. Ullmann's Encyclopedia of Industrial Chemistry</a>. , Wiley-VCH. (2000).</li>
<li>Sotozono, C. <a target="_blank" href="https://journals.lww.com/corneajrnl/Abstract/2000/11003/Second_Injury_in_the_Cornea__The_Role_of.4.aspx">Second Injury in the Cornea: The Role of Inflammatory Cytokines in Corneal Damage and Repair.</a> Cornea. 19 (6), S155-S159 (2000).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guidelines+and+Recommendations+for+Dharmacon+siRNA+Libraries%22">Guidelines and Recommendations for Dharmacon siRNA Libraries</a>. , 
 <a target="_blank" href="http://dharmacon.gelifesciences.com/uploadedFiles/Resources/sirna-libraries-guidelines.pdf">http://dharmacon.gelifesciences.com/uploadedFiles/Resources/sirna-libraries-guidelines.pdf</a> (2015).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Lipofectamine+RNAiMAX+Reagent%22">Lipofectamine RNAiMAX Reagent</a>. , 
 <a target="_blank" href="https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/migration/files/cell-culture/pdfs.par.72509.file.dat/Lipofectamine%20rnaimax%20protocol%20v2.0.pdf
">https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/migration/files/cell-culture/pdfs.par.72509.file.dat/Lipofectamine%20rnaimax%20protocol%20v2.0.pdf
</a> (2017).</li>
<li>Denizot, F., Lang, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+colorimetric+assay+for+cell+growth+and+survival.+Modifications+to+the+tetrazolium+dye+procedure+giving+improved+sensitivity+and+reliability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Rapid colorimetric assay for cell growth and survival. Modifications to the tetrazolium dye procedure giving improved sensitivity and reliability.</a> Journal of Immunological Methods. 89 (2), 271-277 (1986).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22IL-8+%28human%29+AlphaLISA+Detection+Kit%2C+5%2C000+Assay+Points%22">IL-8 (human) AlphaLISA Detection Kit, 5,000 Assay Points</a>. , 
 
 <a target="_blank" href="http://www.perkinelmer.com/searchresult?searchName=AL224F&_csrf=dd35c533-8dc4-4005-a87f-c5ab3a519bf3">http://www.perkinelmer.com/searchresult?searchName=AL224F&_csrf=dd35c533-8dc4-4005-a87f-c5ab3a519bf3</a> (2016).</li>
<li>Araki-Sasaki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+SV40-immortalized+human+corneal+epithelial+cell+line+and+its+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">An SV40-immortalized human corneal epithelial cell line and its characterization.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 36 (3), 614-621 (1995).</li>
<li>Zhang, J. H., Chung, T. D., Oldenburg, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Simple+Statistical+Parameter+for+Use+in+Evaluation+and+Validation+of+High+Throughput+Screening+Assays%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomolecular+Screening%22%5BJournal%5D)">A Simple Statistical Parameter for Use in Evaluation and Validation of High Throughput Screening Assays.</a> Journal of Biomolecular Screening. 4 (2), 67-73 (1999).</li>
<li>Ruff, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+mouse+model+for+sulfur+mustard-induced+ocular+injury+and+long-term+clinical+analysis+of+injury+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Cutaneous+and+Ocular+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Development of a mouse model for sulfur mustard-induced ocular injury and long-term clinical analysis of injury progression.</a> Cutaneous and Ocular Toxicology. 32 (2), 140-149 (2013).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22GeneTitan+MC+Instrument+North+America%2FJapan+%28110V%29%22">GeneTitan MC Instrument North America/Japan (110V)</a>. , 
 <a target="_blank" href="https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/00-0372?SID=srch-srp-00-0372">https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/00-0372?SID=srch-srp-00-0372</a> (2018).</li>
<li>Zhang, X. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pair+of+new+statistical+parameters+for+quality+control+in+RNA+interference+high-throughput+screening+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Genomics%22%5BJournal%5D)">A pair of new statistical parameters for quality control in RNA interference high-throughput screening assays.</a> Genomics. 89 (4), 552-561 (2007).</li>
<li>He, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Sodium+Fluoride+on+the+Proliferation+and+Gene+Differential+Expression+in+Human+RPMI8226+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Trace+Element+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of Sodium Fluoride on the Proliferation and Gene Differential Expression in Human RPMI8226 Cells.</a> Biological Trace Element Research. 167 (1), 11-17 (2015).</li>
<li>Tabuchi, Y., Yunoki, T., Hoshi, N., Suzuki, N., Kondo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genes+and+gene+networks+involved+in+sodium+fluoride-elicited+cell+death+accompanying+endoplasmic+reticulum+stress+in+oral+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Genes and gene networks involved in sodium fluoride-elicited cell death accompanying endoplasmic reticulum stress in oral epithelial cells.</a> International Journal of Molecular Sciences. 15 (5), 8959-8978 (2014).</li>
<li>Pesonen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloropicrin-induced+toxic+responses+in+human+lung+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+Letters%22%5BJournal%5D)">Chloropicrin-induced toxic responses in human lung epithelial cells.</a> Toxicology Letters. 226 (2), 236-244 (2014).</li>
<li>Wilhelm, S. N., Shepler, K., Lawrence, L. J., Lee, H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWilhelm%2C+SN+%22Fumigants%3A+Environmental+Fate%2C+Exposure%2C+and+Analysis%22">Fumigants: Environmental Fate, Exposure, and Analysis</a>. Seiber, J. N., et al. 652, American Chemical Society. Ch. 8 (1997).</li>
<li>Adamek, E., Pawlowska-Goral, K., Bober, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+and+in+vivo+effects+of+fluoride+ions+on+enzyme+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Annales+Academiae+Medicae+Stetinensis%22%5BJournal%5D)">In vitro and in vivo effects of fluoride ions on enzyme activity.</a> Annales Academiae Medicae Stetinensis. 51 (2), 69-85 (2005).</li>
<li>Heard, K., Hill, R. E., Cairns, C. B., Dart, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+neutralizes+fluoride+bioavailability+in+a+lethal+model+of+fluoride+poisoning%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Toxicology%3A+Clinical+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Calcium neutralizes fluoride bioavailability in a lethal model of fluoride poisoning.</a> Journal of Toxicology: Clinical Toxicology. 39 (4), 349-353 (2001).</li>
<li>Sparks, S. E., Quistad, G. B., Casida, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloropicrin%3A+reactions+with+biological+thiols+and+metabolism+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Research+in+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Chloropicrin: reactions with biological thiols and metabolism in mice.</a> Chemical Research in Toxicology. 10 (9), 1001-1007 (1997).</li>
<li>Sparks, S. E., Quistad, G. B., Li, W., Casida, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chloropicrin+dechlorination+in+relation+to+toxic+action%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biochemical+and+Molecular+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Chloropicrin dechlorination in relation to toxic action.</a> Journal of Biochemical and Molecular Toxicology. 14 (1), 26-32 (2000).</li>
<li>Byron, K. A., Varigos, G., Wootton, A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1421657/">Hydrocortisone inhibition of human interleukin-4.</a> Immunology. 77 (4), 624-626 (1992).</li>
<li>van der Poll, T., Lowry, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipopolysaccharide-induced+interleukin+8+production+by+human+whole+blood+is+enhanced+by+epinephrine+and+inhibited+by+hydrocortisone%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Lipopolysaccharide-induced interleukin 8 production by human whole blood is enhanced by epinephrine and inhibited by hydrocortisone.</a> Infection and Immunity. 65 (6), 2378-2381 (1997).</li>
<li>Solomon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doxycycline+inhibition+of+interleukin-1+in+the+corneal+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Doxycycline inhibition of interleukin-1 in the corneal epithelium.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41 (9), 2544-2557 (2000).</li>
<li>Mishra, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+oxidative+stress-induced+epigenetic+modifications+in+pancreatic+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial oxidative stress-induced epigenetic modifications in pancreatic epithelial cells.</a> International Journal of Toxicology. 33 (2), 116-129 (2014).</li>
<li>Stockholm, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+of+phenotypic+heterogeneity+in+a+clonal+cell+population+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The origin of phenotypic heterogeneity in a clonal cell population in vitro.</a> PLoS One. 2 (4), e394(2007).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22ATCC+Animal+Cell+Culture+Guide%22">ATCC Animal Cell Culture Guide</a>. , American Type Culture Collection. Manassas, VA. (2014).</li>
<li>Lundholt, B. K., Scudder, K. M., Pagliaro, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+technique+for+reducing+edge+effect+in+cell-based+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomolecular+Screening%22%5BJournal%5D)">A simple technique for reducing edge effect in cell-based assays.</a> Journal of Biomolecular Screening. 8 (5), 566-570 (2003).</li>
<li>Mpindi, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+normalization+methods+on+high-throughput+screening+data+with+high+hit+rates+and+drug+testing+with+dose-response+data%5BTitle%5D)+AND+%22Bioinformatics%22%5BJournal%5D)">Impact of normalization methods on high-throughput screening data with high hit rates and drug testing with dose-response data.</a> Bioinformatics. 31 (23), 3815-3821 (2015).</li>
<li>Zhang, X. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Illustration+of+SSMD%2C+z+score%2C+SSMD%2A%2C+z%2A+score%2C+and+t+statistic+for+hit+selection+in+RNAi+high-throughput+screens%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomolecular+Screening%22%5BJournal%5D)">Illustration of SSMD, z score, SSMD*, z* score, and t statistic for hit selection in RNAi high-throughput screens.</a> Journal of Biomolecular Screening. 16 (7), 775-785 (2011).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.
Yasal uyarı: Bu makalede görüşler yazar(lar) aittir ve ordu bölümü, Savunma Bakanlığı veya ABD hükümeti resmi politikasının yansıtmamaktadır. Bu araştırma NIH/NIAID ve USAMRICD arasında bir kurumlararası anlaşma tarafından desteklenen ve kısmen meşe tarafından randevu lisansüstü araştırma katılım programı, ABD Ordusu Tıbbi Araştırma Enstitüsü kimyasal savunma için tarafından yönetilen Ridge Enstitüsü bilim ve eğitim ABD Enerji Bakanlığı ve USAMRMC arasında bir kurumlararası anlaşma yoluyla.

Burada biz bizim yöntemleri ve sonuçları bir yüksek işlem hacmi kornea epitel hücre modeli HF ve CP yaralanmaları incelenmesi için eleme gelişimi tanımlamak. HF yaralanma için birincil siRNA ekran sonuçlarından da mevcut. HTS modelleri TIC yaralanmaları incelenmesi için geliştirilmesi için pek çok sorun vardı. HF, HFA veya CP çalışmada hücre kültür modelleri ile ilgili literatürde bulabileceğimizi yöntemleri küçük yardımcı oldun. Florür Ion çoğu vitro çalışmalar sözlü hücreleri içerir ve sodyum florür değil, HF ...

Kimyasallar hızla önemli doku hasar potansiyeline sahip çünkü oküler yaralanma toxicant kaynaklı bir gerçek oküler acil durum. Belirli hiçbir tedavi var yaraların tedavisi için ne yazık ki, kornea yaralanma toxicant kaynaklı tedavisi sadece genellikle destekleyici şunlardır. Geçerli tedavi stratejisi belirsiz ve öncelikle yağlama maddeleri, antibiyotik, gibi topikal tedavi tedaviler içerir ve cycloplegics takip antiinflamatuar (Örneğin, steroid) tarafından bir kez kornea1 yeniden epithelialized ,2. En iyi mevcut tedavi seçenekleri rağmen uzun vadeli prognoz genellikle ilerici kornea clouding ile neovaskülarizasyon2,3nedeniyle kötüdür.
Hayvan modelleri geleneksel kimyasal toksisitesi araştırmak ve yaralanma mekanizmaları anlamak için kullanılmaktadır. Ancak, zaman alıcı ve pahalı hayvan çalışmaları vardır. Ayrıca çabaları hayvan test azaltmak için vardır. Örneğin, REACH mevzuatı (EC 1907/2006) Avrupa Birliği'nde hayvan test azaltmak amacıyla hükümler vardır. Hükümler şirketler hayvan test ve Önerilen testleri hayvanlar üzerinde gerçekleştirmeden önce Avrupa Kimyasallar Ajansı onayı önlemek için veri paylaşmak bir gereklilik içerir. REACH hükümleri altında hayvan testleri son çare olmalı. Avrupa kozmetik kozmetik hayvanlarda test dışarı aşamalı yönetmelik (EC 1223/2009) da vardır. Hayvan çalışmaları yürütülen zaman 3Rs ilkeleri tarafından yönlendirilir (arıtma, azaltma ve değiştirme) hangi daha insancıl hayvan araştırma, kullanılan hayvan sayısını azaltarak ve hayvan-alternatifleri kullanma için bir çerçeve sağlamak Mümkünse. Bu nedenlerden dolayı toksikoloji alan toksisite moleküler mekanizmaları içgörü sağlayabilir ve daha yüksek üretilen iş4' te yapılabilir vitro deneyleri benimsemeye araştırmıştır. Bu toxicants onların işlevini yerine yalnızca onların Kimya tarafından tanımlandığı bir işlevsel toksikoloji yaklaşımdır. Bir adım daha ileri, fonksiyonel alınan toxicogenomics aramak toxicants5etkileri belirli genler oynamak rolleri anlamak. SiRNA teknoloji uygulaması ile moleküler ve hücresel yanıt-e doğru toxicants işlevinde gen araştırmak üzere filtreleri yüksek üretilen iş yapılabilir. siRNA 19-25 nükleotit bu yazı transkripsiyon gen silencing yolu tüm memeli hücreleri6' mevcut yararlanmak uzun olan çift iplikçikli RNA molekülleri vardır. Bunlar sentetik yapılır ve belirli bir gen hedeflemek için tasarlanmış. Bir hücreye tanıttığında, siRNA işlenir ve bir iplikçik, Kılavuzu strand, RNA-induced silencing tesisin (RISC) yüklenir. Bir mRNA molekülü tamamlayıcı bir bölgesine RISC siRNA yönlendirir ve RISC mRNA düşer. Bu belirli bir gen ifadesi azalma olur. Bu gen toxicant hücresel yanıt olarak işlev görmeye yaydıkları maruz kalan hücrelerdeki belirli bir gen ifadesi elde edilen azalma daha sonra çalıştı. Böyle bir yaklaşım daha "risin" duyarlılık mekanizmaları ve CYP1A17,8AHR bağımlı indüksiyon anlamak için kullanılmıştır.
Kimyasal terörizm Risk değerlendirmesi (CTRA) listesi ve toksik endüstriyel kimyasalları (TIC) listeleri seçme kimyasal toksisitesi ve potansiyel bir terörist, savaş veya endüstriyel kaza olay9sırasında yayımlanması için bağlı maddeler halinde. Bir siRNA yüksek işlem hacmi (HTS) toxicogenomic yaklaşım terör olayı kullanım yüksek riskli olarak tespit edilmiştir CTRA listesi toxicants incelenmesi için eleme uygulamaktayız. Geleneksel toksikoloji kimyasalları canlı organizmalar üzerinde var olumsuz etkileri anlamak istiyor; Ancak, tedavi ve tedavi yaklaşımları ve büyük olasılıkla, kalkınma bilgilendirmek amacıyla yaralanma mekanizmaları anlamak için daha fazla bir arzusu var terapötik geliştirme için hedeflenen molekülleri keşfedin. Bu çaba bazı yönlerden benzer şekilde yüksek işlem hacmi siRNA tarama ve temel hücre deneyleri ilaç bulma işlemi10kullanımı daha kabul edilebilir. Büyük bir fark bizim yaklaşım bu yaydıkları pozlama tedavisi için yüksek terapötik değeri ile tekil bir hedef olurdu biraz düşüktür, ancak bu ilaç keşif genellikle tekil bir hedef tedavi bulma istiyor olurdu. Biz herhangi bir etkili tedavi paradigma yaydıkları pozlama için yüksek terapötik değeri elde etmek için çok yönlü bir yaklaşım gerektirir ve toxicogenomic veri hayati bir etkili tedavi paradigma bilgilendirebilir tahmin.
Benchtop Otomasyon laboratuvarları dışında ilaç ya da biyoteknoloji sanayi yüksek işlem hacmi metodoloji getiriyor. Vitro çalışmalar bizim Enstitüsü'nde tarihsel iş hızı düşük11,12,13olan geleneksel deneyleri edilmiştir. Son birkaç yıl içinde bizim laboratuvar yüksek işlem hacmi siRNA tarama gerçekleştirmek için benchtop robot kullanımına geçiş. Burada, biz oküler hücre modelleri zerafet ve vitro gelişimi hidrojen florür (HF) ve polis (CP) yüksek işlem hacmi siRNA tarama için uygun pozlama yöntemleri mevcut. Amacımız bu toxicants karşılık olarak hücresel yaralanma düzenleyen molekülleri belirlemektir. Bizim seçtiğimiz siRNA Kütüphane hedefleri G protein birleştiğinde reseptörleri, protein kinaz, proteaz, fosfatazlar, iyon kanalları ve diğer potansiyel olarak druggable hedefleri içerir. HF ve CP için çalışma CTRA liste ajanlar endüstriyel kazaların ToxNet raporlarla çapraz gönderme yapmak en büyük risk buharı pozlama9,14ile oküler yaralanma mevcut bulmak için seçildi. CP (kimyasal formülü Cl3Kao2, CAS numarası 76-06-2) WWI15dakika sonra bir göz yaşartıcı gaz olarak kullanılan özgün. Şu anda tarım bir tütsü ve işlevler bir nematicide, fungisit ve böcek ilacı16kullanılır. Hidrojen florür (HF) petrol rafinerileri ve organik bileşikler17elektrokimyasal fluorination alkillenme dahil süreçlerinde kullanılır. HF (kimyasal formülü HF, CAS numarası 62778-11-4) bir gaz ama sulu haliyle hidroflorik asit (HFA, CAS sayı 7664-39-3). Bu yüzden, HFA içinde bizim hücresini kullanın seçildi pozlama modelleri. SV40 büyük T antijen SV40-HCEC çalışması için seçilen insan kornea epitel hücre satırı ölümsüzleştirdi. Hücresel yaralanma söz konusu hedef hücre ölümü ve inflamatuar yanıt yansıtılması gerekir çünkü hücre canlılığı ve inflamatuar marker Il-8 bitiş noktaları seçildi. Bir hedef olarak yaydıkları pozlama koruyucu bir rol oynamaya olsaydı, ne zaman hedef ifadesi siRNA tarafından inhibe özellikle, hücre ölümü ve/veya inflamatuar sitokin üretim artacaktır. Tam tersi olumsuz rol oynayan hedefler için doğru olurdu. Ayrıca, kronik inflamasyon pozlama ve hücre ölüm yolları müdahale klinik sonuç2,18artırabilir sonra kornea patolojisi bir rol oynamaya görünür.

<table><tbody><tr><td>Bravo sıvı taşıma platformu</td><td>Agilent veya eşdeğeri</td><td>G5409A</td><td></td></tr><tr><td>Bravo plaka çalkalayıcı</td><td>Agilent veya eşdeğeri</td><td>Seçenek 159</td><td></td></tr><tr><td>Bravo 96LT tek kullanımlık uç başlığı</td><td>Agilent veya eşdeğeri</td><td>Seçenek 178</td><td>96 kanallı büyük uçlu pipetleme başlığı ünitesi</td></tr><tr><td>Bravo 96ST tek kullanımlık uç başlığı</td><td>Agilent veya eşdeğeri</td><td>Seçenek 177</td><td>96 kanallı küçük uçlu pipetleme kafa ünitesi</td></tr><tr><td>Bravo 384ST tek kullanımlık uç başlığı</td><td>Agilent veya eşdeğeri</td><td>Seçenek 179</td><td>384 kanallı küçük uçlu pipetleme kafası ünitesi</td></tr><tr><td>Bravo 96 250 &mu; L steril bariyer uçları</td><td>Agilent veya eşdeğeri</td><td>19477-022</td><td></td></tr><tr><td>Bravo 384 30 &mu; L steril bariyer uçları</td><td>Agilent veya eşdeğeri</td><td>19133-212</td><td></td></tr><tr><td>Bravo 384 70 & mu; L steril bariyer uçları</td><td>Agilent veya eşdeğeri</td><td>19133-212</td><td></td></tr><tr><td>EnSpire çok modlu plaka okuyucu</td><td>Perkin Elmer veya eşdeğeri</td><td>2300-0000</td><td>AlphaLISA tahlil dedektörü, yüksek güçlü lazer uyarımlı</td></tr><tr><td>IL-8 (insan) AlphaLISA Algılama Kiti (insan);</td><td>Perkin Elmer veya eşdeğeri</td><td>AL224F</td><td>yıkamasız boncuk bazlı test</td></tr><tr><td>ProxiPlate-384 Plus beyaz 384 sığ kuyu mikroplakaları</td><td>Perkin Elmer veya eşdeğeri</td><td>6008359</td><td></td></tr><tr><td>Lipofektamin RNAiMAX</td><td>Invitrogen veya eşdeğeri</td><td>13778500</td><td>Transfeksiyon reaktifi</td></tr><tr><td>Opti-MEM 1 Azaltılmış Serum Ortamı</td><td>İnvitrojen veya eşdeğeri</td><td>31985070</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE Express</td><td>Gibco veya eşdeğeri</td><td>12605010</td><td>Hücre ayırma çözümü</td></tr><tr><td>IncuCyte Zoom</td><td>Essen Instruments veya eşdeğeri</td><td>ESSEN BIOSCI 4473</td><td>İnkübatörde barındırılan otomatik mikroskop</td></tr><tr><td>Chloropicrin</td><td>Trinity Manufacturing veya eşdeğeri</td><td>N/A</td><td>Akut toksisite ve tahriş edici</td></tr><tr><td>DMEM-F12 hücre kültürü ortamı</td><td>Invitrogen veya eşdeğeri</td><td>11330-057</td><td>HEPES içerir</td></tr><tr><td>Fetal sığır serumu</td><td>İnvitrojen veya eşdeğeri</td><td>1891471</td><td></td></tr><tr><td>İnsan epidermal büyüme faktörü (hücre kültürü derecesi)</td> <td>İnvitrojen veya eşdeğeri</td><td>E9644-.2MG</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinant insan insülini (hücre kültürü derecesi)</td> <td>İnvitrojen veya eşdeğeri</td><td>12585-014</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin çözeltisi (hücre kültürü derecesi)</td> <td>İnvitrojen veya eşdeğeri</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Hidrokortizon (hücre kültürü sınıfı)</td> <td>Sigma veya eşdeğeri</td><td>H0888-10G</td><td></td></tr><tr><td>Glikoz ve nbsp; (hücre kültürü derecesi)</td><td>Sigma veya eşdeğeri</td><td>G7021</td><td></td></tr><tr><td>PBS&nbsp; (hücre kültürü derecesi)</td><td>Sigma veya eşdeğeri</td><td>P5493</td><td></td></tr><tr><td>siRNA</td><td>, Dharmacon veya eşdeğeri</td><td>çeşitli</td><td></td></tr><tr><td>Tiazolil mavisi tetrazolyum bromür</td><td>Sigma veya eşdeğeri</td><td>M5655</td><td>MTT tahlili substrat</td></tr><tr><td>siRNA tamponu</td><td>Termo veya eşdeğeri</td><td>B002000</td><td></td></tr><tr><td>96 oyuklu hücre kültürü plakaları</td><td>Corning veya eşdeğeri</td><td>CLS3595</td><td></td></tr><tr><td>T150 hücre kültürü şişeler</td><td>Corning veya eşdeğeri</td><td>CLS430825</td><td></td></tr><tr><td>BSL-2 hücre kültürü başlığı</td><td>Nuaire veya eşdeğeri</td><td>NU-540</td><td></td></tr><tr><td>300 mL robotik rezervuarlar</td><td>Termo veya eşdeğeri</td><td>12-565-572&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>96 şaşkın otomasyon rezervuarı</td><td>Thermo veya eşdeğeri</td><td>1064-15-8</td><td></td></tr><tr><td>500 mL steril tek kullanımlık saklama şişeleri</td><td>Corning veya eşdeğeri</td><td>CLS430282</td><td></td></tr><tr><td>Mikroplaka ısı yalıtım malzemesi</td><td>Termo veya eşdeğeri</td><td>AB-1443A Mikroplaka</td><td></td></tr><tr><td>ısı yalıtım folyosu</td><td>Termo veya eşdeğeri</td><td>AB-0475</td><td></td></tr><tr><td>Kakulenin</td><td>Tocris veya eşdeğer</td><td>2509</td><td>Anti-enflamatuar, pozitif kontrol olarak kullanılır</td></tr><tr><td>SKF 86002&nbsp;</td><td>Tocris veya eşdeğeri</td><td>2008</td><td>Anti-enflamatuar, pozitif kontrol olarak kullanılır</td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma veya eşdeğeri</td><td>D8418</td><td></td></tr><tr><td>%48 hidroflorik asit</td><td>Sigma veya eşdeğeri</td><td>339261</td><td>Aşındırıcı ve akut toksisite</td></tr><tr><td>1000 &mu; L Tek kanallı pipetleyiciler</td><td>Rainin veya eşdeğeri</td><td>17014382</td><td></td></tr><tr><td>200 &mu; L Tek kanallı pipetleyiciler</td><td>Rainin veya eşdeğeri</td><td>17014391</td><td></td></tr><tr><td>20 &mu; L Tek kanallı pipetleyiciler</td><td>Rainin veya eşdeğeri</td><td>17014392</td><td></td></tr><tr><td>1000 &mu; L 12 kanallı pipetleyiciler</td><td>Rainin veya eşdeğeri</td><td>17014497</td><td></td></tr><tr><td>200 &mu; L 12 kanallı pipetleyiciler</td><td>Rainin veya eşdeğeri</td><td>17013810</td><td></td></tr><tr><td>20 &mu; L 12 kanallı pipetleyiciler</td><td>Rainin veya eşdeğeri</td><td>17013808</td><td></td></tr><tr><td>Pipet uçları 1000 &mu; L</td><td>Rainin veya eşdeğeri</td><td>17002920</td><td></td></tr><tr><td>Pipet uçları 200 &mu; L</td><td>Rainin veya eşdeğeri</td><td>17014294</td><td></td></tr><tr><td>Pipetleyici uçları 20 &mu; L</td><td>Rainin veya eşdeğeri</td><td>17002928</td><td></td></tr><tr><td>Kimyasal davlumbaz</td><td>Jamestown Metal Ürünleri</td><td>MHCO_229</td><td></td></tr><tr><td>384 kuyulu numune saklama plakaları</td><td>Termo veya eşdeğeri</td><td>262261</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum klorür</td><td>Sigma veya eşdeğeri</td><td>S6191</td><td></td></tr><tr><td>50 mL konik tüpler</td><td>Termo veya eşdeğeri</td><td>14-959-49A</td><td></td></tr><tr><td>Serolojik pipetler 50 mL</td><td>Corning veya eşdeğeri</td><td>07-200-576</td><td></td></tr><tr><td>Serolojik pipetler 25 mL</td><td>Corning veya eşdeğeri</td><td>07-200-575</td><td></td></tr><tr><td>Serolojik pipetler 10 mL</td><td>Corning veya eşdeğeri</td><td>07-200-574</td><td></td></tr><tr><td>Serolojik pipetler 5 mL</td><td>Corning veya eşdeğeri</td><td>07-200-573</td><td></td></tr><tr><td>SV40-HCEC ölümsüzleştirilmiş insan kornea epitel hücreleri</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Bu hücreler ticari olarak mevcut değildir, ancak</td></tr><tr><td>Sceptor Handheld Automated Cell Counter</td><td>Millipore veya eşdeğeri</td><td>PHCC20060</td><td></td></tr><tr><td>GeneTitan Çok Kanallı (MC) Enstrüman</td><td>Affymetrix veya eşdeğeri</td><td>00-0372</td><td></td></tr><tr><td>Affymetrix 24 ve 96 dizi plakaları</td><td>Affymetrix veya eşdeğeri</td><td>901257; 901434</td><td></td></tr><tr><td>Draegger makalesinde belirtilen araştırmacılardan elde edilebilir. tüp HF</td><td>Draeger veya eşdeğeri</td><td>8103251</td><td></td></tr><tr><td>Draegger tüp CP</td><td>Draeger veya eşdeğeri</td><td>8103421</td><td></td></tr><tr><td>Draegger pompası</td><td>Draeger veya eşdeğeri</td><td>6400000</td><td></td></tr><tr><td>Şeffaf Plaka contaları</td><td>Resesarch Products International veya eşdeğeri</td><td>202502</td><td></td></tr><tr><td>Reaktif rezervuarları</td><td>VistaLab Technologies veya eşdeğeri</td><td>3054-1000</td><td></td></tr><tr><td>Otomatik eğri uydurma için kullanılan</td><td></td> <td>Xlfit IDBS veya eşdeğeri</td><td>N/A</td> Excel eklentisi</tr></tbody></table>

yüksek işlem hacmi sirna tarama için polis ve hidrojen florür kaynaklı kornea epitel hücre hasarı

High Throughput SiRNA Screening for Chloropicrin and Hydrogen Fluoride-Induced Cornea Epithelial Cell Injury

Kimyasallar hızla önemli doku hasar potansiyeline sahip çünkü oküler yaralanma toxicant kaynaklı bir gerçek oküler acil durum. Belirli hiçbir tedavi var yaraların tedavisi için kornea yaralanma toxicant kaynaklı tedavisi genellikle destekleyici şunlardır. Tedaviler ve tedavi için poz bakım geliştirmek için çabalarında yaraların moleküler ve hücresel mekanizmaları anlamak önemli olabilir. Önerdiğimiz kullanımı yüksek işlem hacmi küçük inhibitör RNA (siRNA) tarama daha hızlı moleküler mekanizmalar kimyasal kornea epitel yaralanma aydınlatmak için yardımcı olabilir önemli bir araç olabilir. siRNA Homoloji siRNA için olan 19-25 nükleotit uzun ve mRNA düşmesine yol susturmak çoğu gen kullanmak çift telli RNA molekülleri vardır. Bu gen toxicant hücresel yanıt olarak işlev görmeye yaydıkları maruz kalan hücrelerdeki belirli bir gen ifadesi elde edilen azalma daha sonra çalıştı. Geliştirme ve vitro pozlama modelleri ve yöntemleri (HTS) hidrojen florür-(HF) ve polis indüklenen-(CP) oküler yaralanma eleme yüksek üretilen iş için doğrulama Bu makalede sunulmaktadır. Biz bu iki toxicants seçilmiş olsa da, bizim yöntemleri diğer toxicants çalışma odasına yaydıkları pozlama Protokolü küçük değişiklikler ile geçerlidir. SV40 büyük T antijen SV40-HCEC çalışması için seçilen insan kornea epitel hücre satırı ölümsüzleştirdi. Hücre canlılığı ve Il-8 üretim tarama protokol bitiş noktaları olarak seçildi. Birkaç zorluklar yaydıkları pozlama gelişimi ile ilişkili ve hücre kültür yöntemleri HTS çalışmaları için uygun sunulmaktadır. HTS modelleri için bu toxicants kurulması için potansiyel therapeutics kimyasal oküler yaralanma yaralanma ve ekran mekanizması daha iyi anlamak daha fazla çalışmaları sağlar.

Pozlama Yöntem geliştirme
Biz rafine ve HTS çalışmalarda kullanılmak insan kornea epitel hücre satırı SV40-HCEC uygunluğu değerlendirilir. SV40-HCEC SV-40 büyük T antijen kullanarak ölümsüzleştirdi ve Dhanajay Pal23hediyeydi. Çok fazla değişken kısaca burada sunmak için pozlama metodoloji geliştirme keşfedilmeyi vardı ve bu yüzden, biz inanıyoruz bulgular bazı örnekleri daha geniş olabili...

Yüksek işlem hacmi küçük inhibitör RNA tarama daha hızlı moleküler mekanizmalar kimyasal kornea epitel yaralanma aydınlatmak için yardımcı olabilecek önemli bir araçtır. Burada, biz geliştirme ve pozlama modelleri ve kornea epitel yaralanma hidrojen florür ve polis indüklenen yüksek aktarım tarama yöntemlerini doğrulama mevcut.

Yüksek işlem hacmi SiRNA tarama için polis ve hidrojen florür kaynaklı kornea epitel hücre hasarı

Toxicant-induced ocular injury is a true ocular emergency because chemicals have the potential to rapidly inflict significant tissue damage. Treatments ...

Bu video, toksik madde hasarının kornea epitel hücre modelinde yüksek verimli siRNA taraması yöntemlerimizi göstermektedir. Bu çalışma önemlidir, çünkü yüksek verimli siRNA taraması, toksik maddelere hücresel yanıtın yollarını ve düzenleyicilerini aydınlatmak için uygun maliyetli ve zaman açısından verimli bir yöntemdir. Bu çalışma, korneanın toksik hakaretlere nasıl tepki verdiğini daha iyi anlamamıza yardımcı olabilir.Tek kullanımlık bir orta boy şişede mililitre başına 0.5 mikrogram Hidrokortizon içeren önceden ısıtılmış ortamda kornea epitel hücrelerinin bir süspansiyonunu hazırlayın. Hücreleri eşit şekilde askıya almak için şişeyi döndürün ve otomatik bir sıvı işleyicinin orbital çalkalayıcı yuvasındaki bir rezervuara dökün. Hücre kaplama işlemi sırasında hücre süspansiyonunu 37 derecelik bir ısıtma plakası üzerinde tutun.96 oyuklu bir plaka üzerinde oyuk başına 70 mikrolitre ortamda oyuk başına bin hücre yoğunluğunda plakalara hücre eklemek için otomatik bir sıvı işleyici kullanın. İncelenecek her siRNA kütüphane plakası için hücrelerle en az 14 96 oyuklu plaka tohumlayın. Tohumlama işlemi sırasında orbital çalkalayıcıyı sürekli olarak dakikada 100 devirde çalıştırın ve tüm a

high-throughput-sirna-screening-for-chloropicrin-hydrogen-fluoride

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu videoda, resazurin bazlı Alamar mavisi solüsyonu kullanılarak yapay gözyaşı formülasyonlarının kornea epitel hücrelerinin hücresel metabolik aktivitesi üzerindeki etkilerini değerlendirmek için bir in vitro florometrik test açıklanmaktadır. Toksik olmayan bir formülasyon, hücreleri sağlıklı, metabolik olarak aktif bir durumda tutar ve resazurinin yüksek floresan bir resorufin'e indirgenmesini kolaylaştırır.

alamarBlue Testi: Yapay Gözyaşı Formülasyonlarının İnsan Kornea Epitel Hücrelerinin Metabolik Aktivitesi Üzerindeki Sitotoksik Etkilerini Taramak İçin Hassas Bir Florometrik Yöntem

Burada, hücre bazlı bir raportör gen tahlilini, 3' UTR aracılığıyla uygulanan transkripsiyon sonrası kontrol mekanizmalarını modüle eden bileşikler için kimyasal kitaplıkları taramak için değerli bir araç olarak tanımlıyoruz.

Post-transkripsiyonel ayarlı genlerin kimyasal Modülatörler için yüksek verimli tarama

Biz üç boyutlu yeniden insan kornea gibi epitel (RHCE) doku modelini kullanan bir göz tahrişi testi geliştirdi. Test göz irritan ve korozif malzemeler (GHS kategorileri 1 ve kombine 2) ve etiketleme (GHS yok Kategori) gerekmez olanlar arasında ayrım yapabiliyor.

Yeniden İnşa İnsan Kornea gibi Epitelyal (RHCE) Doku Modeli kullanılarak Göz tahriş Kimyasalların Tehlike Tanımlaması Göz tahrişi Testi (EIT)

Çalışmanın amacı, empedans tabanlı gerçek zamanlı hücre analizörü ve in vitro toksikolojik değerlendirme için yüksek içerikli tarama (HCS) tabanlı bir platformun bir kombinasyonunu kullanarak 15 sigara dumanı bileşeninin biyolojik etkisini değerlendirmekti. Bu çalışma, test edilen bileşiklerin etkili dozları, toksisitesi ve etki şekilleri hakkında bilgi sağlar.

Zararlı ve Potansiyel Zararlı Bileşenlerinin Toksikolojik etkilerinin değerlendirilmesi için yüksek İçerik Tarama Analizi (HPHC)

Burada, kornea epitel yara iyileşmesi sırasında HSP27'nin işlevini değerlendirmek için ısı şoku proteini 27'ye (HSP27) özgü küçük enterferans yapan RNA'yı kullanmak için bir protokol sunuyoruz. RNA interferansı, çeşitli hücre tiplerinde protein fonksiyonunu araştırmak için gen ekspresyonunu etkili bir şekilde yıkmak için en iyi yöntemdir.

Kornea Epitel Yara İyileşmesi sırasında Isı Şoku Protein 27 Fonksiyon RNA Girişim tabanlı İncelenmesi

Burada biz verimliliği Fluorometrik ve görüntüleme analizleri canlı hücreler aracılığıyla yeniden mühürlemeden plazma zarı ölçer yüksek üretilen iş floresans tabanlı bir tahlil tanımlamak. Bu tahlil uyuşturucu ya da plazma zarı memeli hücrelerinde yeniden mühürlemeden düzenleyen hedef genlerin eleme için kullanılabilir.

Plazma zarı verimliliği memeli hücrelerinde yeniden mühürlemeden yüksek üretilen iş ölçümü

Bu protokol, fare oküler yüzey hücrelerinden canlı birincil kültürlerde reaktif oksijen türlerinin (ROS), canlı hücrelerin ve ölü hücrelerin eşzamanlı olarak tespitini göstermektedir. 2',7'-Dichlorofluoresceindiacetate, propidium iyodür ve Hoechst boyama ros, ölü hücreleri ve canlı hücreleri değerlendirmek için kullanılır, sırasıyla, görüntüleme ve analiz izledi.

Ultraviyole-C (UV-C) Hasarına Yanıt Olarak Birincil Fare Oküler Yüzey Hücrelerinde/Kök Hücrelerinde Oksidatif Hasarın Değerlendirilmesi

Bu makalede, birincil ve ölümsüzleştirilmiş bir hücre hattında UV radyasyonunun ve kimyasal toksinlerin toksisitesini değerlendirmek için kullanılan prosedürler açıklanmaktadır.

UV Radyasyonu ve Kimyasallarının Primer ve Ölümsüzleştirilmiş İnsan Kornea Epitel Hücreleri Üzerindeki Toksisitesinin Belirlenmesi

Burada, kornea epitelinin mekanik ve kimyasal hasarı için fare ve tavşana dayalı hayvan modelleri, yeni terapötikleri ve altta yatan mekanizmayı taramak için geliştirilmiştir.

Kornea Epitelinin Mekanik ve Kimyasal Yaralanmaları için Ex Vivo ve In Vivo Hayvan Modelleri

Bu protokol, yüksek verimli bir tarama yaklaşımı kullanarak bir floresan boya probu olarak dihidroetidyum (DHE) kullanarak hücre içi reaktif oksijen türlerini (ROS) ölçmek için yeni bir yöntemi açıklar. Protokol, üç farklı hepatoselüler karsinom hücre hattında hücre içi reaktif oksijen türlerinin (ROS) kantitatif değerlendirme yöntemlerini açıklar.

Dihidroetidyum (DHE) Floresan Boya Kullanılarak Reaktif Oksijen Türleri (ROS) Üretiminin Yüksek Verimli Tarama Değerlendirmesi

Domuz korneasının ex vivo organ kültürü ve epitelyal yara iyileşmesi, kimyasalların oküler toksisitesini test etmek için ekonomik, etik, tekrarlanabilir ve kantitatif bir araç sağlar. Ayrıca, epitelizasyon ve doku onarımının düzenlenmesinin altında yatan mekanizmaların aydınlatılmasına ve diyabetik keratopati ve gecikmiş yara iyileşmesinin tedavisi için terapötiklerin değerlendirilmesine yardımcı olurlar.

Organ Kültürü Domuz Korneaları Kullanılarak Terapötik ve Kimyasal Toksisitenin Değerlendirilmesi ve Epitel Yara İyileşmesi

Keşfedin yüksek işlem hacmi siRNA tarama yöntemini, kornea epitel hücrelerinde hidrojen florür ve kloropikrin kaynaklı toksik hasarı incelemek için. Bu teknik, hücresel yanıt mekanizmalarını hızla belirleyerek toksikoloji araştırmalarına katkı sağlar.

Yüksek işlem hacmi SiRNA tarama için polis ve hidrojen florür kaynaklı kornea epitel hücre hasarı

Daha fazla video keşfet