Bağırsak kısmi tıkanıklık bir fare modeli

Bu cerrahi prosedürün genel amacı, farelerde tıkanıklıklara yanıt olarak meydana gelen gastrointestinal dokudaki moleküler ve fenotipik değişikliklerin incelenmesini kolaylaştıran bağırsak tıkanıklıklarını güvenilir ve tutarlı bir şekilde üretmektir. Bu yöntem, bağırsak tıkanıklığından kaynaklanan fenotipik değişikliklerin altında yatan hücresel mekanizmaları çevreleyen gastrointestinal alandaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajları, güvenilir, tekrarlanabilir ve uygun maliyetli olmasıdır.

Bu tekniğin anlamı, bağırsak tıkanıklığının neden olduğu insan patolojilerinde gözlenen fenotipik durumları taklit ettikleri için bağırsak tıkanıklığının tedavisine kadar uzanır. Bu prosedürü gösterenler, her ikisi de laboratuvarımızdan bir doktora sonrası olan Se Eun Ha ve bir yüksek lisans öğrencisi olan Lai Wei olacaktır. Ayak parmağını sıkıştırmaya yanıt verilmediğini onayladıktan sonra, hayvanın gözlerine merhem sürün ve fareyi bir ısıtma pedine yerleştirin.

Tüy dökücü krem ile karın bölgesindeki tüyleri alın ve açıkta kalan cildi %70 etanol ile temizleyin. Cerrahi bölgeyi povidon-iyot çözeltisi ile dezenfekte edin ve hayvanı cerrahi alan için 2,5 x 2,5 santimetre açıklığı olan 25 x 50 santimetre steril bir kağıtla örtün. Örtüyü açıklığın ve cildin sınırlarında steril şeritlerle sabitleyin ve üç santimetre uzunlamasına bir cilt kesisi yapmak için 15 numaralı bir neşter bıçağı kullanın.

Forseps ve cerrahi makas kullanarak, dokuyu kesmeden cildi kas-operoperitoneal tabakadan dikkatlice ayırın ve linea alba'yı bulun. Daha sonra, intraperitoneal boşluğu ortaya çıkarmak ve çekumu dikkatlice bulmak için linea alba boyunca iki santimetre kesmek için mikro forseps ve makas kullanın. Çekum, proksimal kolon ve ileumu intraperitoneal boşluğun içinden steril örtü üzerine yavaşça ve nazikçe hareket ettirmek için mikro forsepsleri kullanın ve bağırsak dokusunu hemen% 0.9 steril tuzlu suya batırılmış gazlı bezle nemlendirin.

İleum ve proksimal kolon arasındaki mezenteri bulun ve herhangi bir damar sistemini kesmemeye dikkat ederek ileuma paralel ve hemen altında mezenterde bir santimetrelik bir kesi yapın. Mezenterik damarı açmak için uzunlamasına kesin ve uygun boyutta otoklavlanmış sterilize silikon halkayı açmak için mikro forseps kullanın. Halkanın bir ucunu kesiden geçirin ve aleti orijinal şekline döndürmek için halkanın ucunu ilk uçla temas ettirin.

Halkanın ileumu tamamen çevrelediğini onaylayın ve halkayı bir dikişle kapatın. Mezenterdeki kesiler, halkanın sığması için yeterince büyük, ancak kan damarı kesilmeyecek kadar küçük olmalıdır. Ayrıca halkanın kolon üzerine değil ileum üzerine yerleştirildiğinden emin olun.

Bağırsakları dikkatlice orijinal anatomik konumlarına geri getirin ve linea alba boyunca kas küloperitoneal tabakasını kapatmak için basit bir sürekli dikişte emilebilir bir sütür kullanın. Kanamaları %0,9 steril tuzlu suya batırılmış gazlı bezle temizleyin ve cildi kapatmak için yeni bir naylon sütür ve basit bir sürekli dikiş kullanın. Daha sonra yara bölgesini povidon-iyot ile dezenfekte edin ve hayvanı tam yaslanana kadar izleme ile bir ısınma kapısına yerleştirmeden önce antibiyotik enjekte edin.

Bu deneyde, kontrol amaçlı hayvanlara kıyasla, parsiyel obstrüksiyon ameliyatından sekiz gün sonra ince bağırsak kısmen dolmuş ve şişirilmiş ve parsiyel obstrüksiyon ameliyatından 13 gün sonra tamamen doldurulmuş ve şişirilmiştir. Ayrıca, kısmi tıkanıklık ameliyatı sonrası sekizinci ve 13. gün farelerinin kolonunda dışkı pelet oluşumu, kontrol hayvanlarına kıyasla azalmıştır. Halkanın hemen yukarısındaki ileumun düz kas tabakası, kısmi obstrüksiyon ameliyatından sekiz gün sonra hipertrofik oldu ve 13. günde daha fazla hipertrofi gözlendi.

Düz kas hücreleri, immünokimyasal analizle değerlendirildiği gibi, kısmi obstrüksiyon ameliyatından sekiz ve 13 gün sonra her üç doku katmanında da giderek hızlı oranlarda büyürken, Cajal'ın interstisyel hücreleri kas içi ve kas arası katmanlar içinde dejenere oldu. PDGFR alfa hücreleri olarak da bilinen Trombosit Türetilmiş Büyüme Faktörü Reseptörü alfa pozitif hücre alt kümeleri, kısmi tıkanıklık farelerinin kaslar arası katmanları içinde dinamik olarak yeniden modellendi ve ameliyattan sekiz gün sonra gözlenen ve 13. güne kadar dejenere olan büyüme gözlendi. Ek olarak, ameliyattan sonraki sekiz ve 13. günlerde kısmi tıkanıklık farelerinin kaslar arası ve kas içi bölgelerinde nöronal hücreler de önemli ölçüde kaybedildi.

Bir kez ustalaştıktan sonra, farenin hayatta kalmasını sağlamak için bu teknik 30 dakika içinde tamamlanmalıdır. Bu prosedürü denerken, dokuyu hızlı ve hassas bir şekilde tedavi etmek önemlidir. Bu prosedürü takiben, tıkanıklıkların bağırsak peristaltizmini nasıl değiştirdiğine dair ek soruları yanıtlamak için gastrointestinal eğilim testi gibi diğer yöntemler de gerçekleştirilebilir.

Geliştirilmesinden sonra, bu teknik, gastrointestinal araştırma alanındaki araştırmacıların farelerde bağırsak tıkanıklığının sonuçlarını keşfetmelerinin yolunu açtı. Bu videoyu izledikten sonra, bağırsak kısmi tıkanıklığının oluşturulması için fare ileumunun etrafına bir halkanın nasıl hızlı ve düzgün bir şekilde yerleştirileceğini iyi anlamalısınız. Cerrahi aletler ve iğnelerle çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini unutmayın, bu nedenle uygun önlemleri alın.

Ayrıca, bu prosedürü gerçekleştirirken steril eldiven giydiğinizden ve aseptik teknikler uyguladığınızdan emin olun.