Derin Ven Trombozu Staz farelerde yüksek frekans Ultrasonografi tarafından izlenen tarafından indüklenen

Bu prosedürün genel amacı, inferior vena kava staz modelini kullanarak farelerde derin ven trombozunu indüklemek ve yüksek frekanslı ultrason kullanarak trombüsleri izlemektir. Bu yöntem, venöz tromboz alanındaki bir farmakolojik ajanın, genin veya ilgilenilen hücre tipinin trombüs oluşumunu veya çözünürlüğünü nasıl etkileyebileceği hakkındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin ana avantajı, farelerde hem trombüs oluşumunun hem de çözünürlüğünün non-invaziv olarak ölçülebilmesidir.

Bu yöntem hakkında ilk olarak, farelerin inferior vena kavasında trombüs oluşumunu nasıl denamikate tabi tutacağımızı ve non-invaziv olarak izleyeceğimizi araştırırken aklımıza geldi. Başlamak için, sekiz ila 10 haftalık bir C57 siyah altı farenin alt karın derisini kaldırmak için forseps kullanın. Ve orta hattan linea alba'nın her iki tarafına paralel dikey bir kesi yapmak için cerrahi makas kullanın.

Karnın üst kısmında yatay bir kesi yapın. Ardından karın kas tabakası boyunca tekrarlanan kesiler. Karın boşluğunu ortaya çıkarmak için cildi ve kası kesiden uzağa katlayın.

Ve nemli gazlı bezi yaranın her iki tarafına yerleştirin. Bağırsakları gazlı bez üzerine dışsallaştırmak için karnın her iki tarafına hafif bir baskı uygulayın. Ve dışsallaştırılmış dokunun üzerine ikinci bir nemli gazlı bez tabakası yerleştirin.

Diseksiyon mikroskobu altında, böbrek ve iliak damarlar arasındaki iç vena kava veya IVC'yi ortaya çıkarmak için herhangi bir periton yağını bir kenara koyun. Ve IVC yan dallarını bulun. Forseps kullanarak, çevredeki damarlara zarar vermeden fasyayı kırmak için her bir yan dalın etrafını nazikçe köreltin.

Ardından, damarı kaldırmak için bir dalın etrafındaki yağı dikkatlice kavrayın. Ve geminin altına altı çizgi sıfır ipek sütür bir parça geçirin. Daha sonra damarı tamamen tıkamak için yan dal etrafında en az üç atışla cerrahi bir ligasyon yapmak için dikiş forsepsleri ve standart bir cerrahi düğüm atma tekniği kullanın.

Alternatif olarak, Hemoclips kullanın. Aortu IVC'den ayırmak için, her iki damara da zarar vermeden sol renal venin hemen distalinde her iki damarın etrafında ve arasında künt diseksiyon yapın. Damarlar arasında açık bir pencere oluşturulduğunda, IVC ve abdominal aort altından altı çizgi sıfır ipek sütür bölümünden geçirin.

Ve dikişi pencereden çekmek için forseps kullanın. Sütür forsepsleri kullanarak, damarın tam tıkanması için IVC'yi sol renal venin hemen distaline üç atışla bağlayın. Abdominal aortun kesintisiz bırakıldığını onaylayın.

Ve tüm yan dalların bağlandığını. IVC, ligasyon bölgesinden distal olarak genişlemiş görünecektir. Ve hiçbir kan akışı görünmeyecek.

Periton yağını ve bağırsakları karın boşluğuna geri koyun. Kas ve cilt katmanlarını akan dikişlerle ayrı ayrı kapatmak için sütür forsepsleri ve altı çizgi sıfır ipek sütür kullanın. Daha sonra hayvanı en az 30 dakika boyunca 34 derecelik bir kuluçka makinesine yerleştirin ve tam iyileşmeye kadar izleyin.

Jeli 37 santigrat dereceye kadar ısıtmak için ultrason jel şişesini bir su ısıtma sisteminin bobinlerinden geçirin. Ligasyondan 24 saat sonra hayvanı analiz platformuna yerleştirin. Ve elektrot jelini platformun dört elektrotuna uygulayın.

Hayvan sırtüstü pozisyondayken, pençeleri elektrotlara sabitleyin. Ve rektuma yağlanmış bir termometre yerleştirin. Fazla ultrason jelini yakalamak için hayvanın yanına gazlı bez yerleştirin.

Ardından jeli açıkta kalan cilde uygulayın. Ve IVC'yi standart ultrason görüntüleme protokollerine göre görüntüleyin. Yüksek frekanslı bir mikrogörüntüleme sistemi kullanılarak, IVC, ligasyondan önce uzunlamasına görünümde tanımlanabilir.

Ve akış hızı, Darbeli dalga Doppler görüntüleme ile belirlenebilir. Ligasyondan hemen sonra kan akışında bir azalma belirgindir. Ligasyondan 24 saat sonra ultrasonografi ile İVK içinde yoğun trombüs görülebilir.

Ultrasonografi ayrıca damarlardaki kan akış hızının ölçülmesine de izin verir. Ligasyondan önce, hemen sonra ve ligasyondan 24 saat sonra renkli Doppler kullanılması. Bir kez ustalaştıktan sonra, teknik uygun şekilde uygulanırsa, yan dalların varlığına ve sayısına bağlı olarak trombüs 30 ila 45 dakika içinde indüklenebilir.

Bu prosedürü denerken, zaman ayırmayı ve hareketlerinizde kesin ancak nazik olmayı unutmamak önemlidir, çünkü damarları yırtmak nispeten kolaydır. Bu prosedürü takiben, trombüsün hücresel içeriği hakkında ek soruları yanıtlamak veya ilgilenilen spesifik proteinleri ölçmek için immünofloresan, histolojik veya akış sitometrik analizi gibi diğer yöntemler gerçekleştirilebilir.