Name: Derin Ven Trombozu Staz farelerde yüksek frekans Ultrasonografi tarafından izlenen tarafından indüklenen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 44 s
Description: Öğrenin, farelerde inferior vena kava staz modeli kullanarak derin ven trombozu indüksiyonunu ve yüksek frekans ultrasonografi ile trombüs oluşumunun invaziv olmayan izlenmesini. Bu yöntem trombüs dinamiklerini araştırmak için güvenilir bir yaklaşım sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser kalp ve inme Vakfı Kanada bir hibe ve Morris ve Bella Fainman Aile Vakfı tarafından desteklenmiştir. Yazarlar Veronique Michaud VEVO770 ultrason görüntüleme sistemi ile onun teknik yardım için teşekkür etmek istiyorum.

Tüm yordamları kurumsal hayvan bakımı Komitesi, McGill Üniversitesi Montréal, QC, Kanada tarafından kabul edildi. Gerekli tüm ekipman tabloda listelenen ben.
1. antikorundan (C57BL/6J) IVC Staz Protokolü
<ol><li>Ameliyat hazırlığı Not: Bu bir hayatta kalma ameliyat olduğunu ve bu nedenle, uygun aseptik tekniği her zaman takip edilmesi gerekiyor. Bu tüm malzemeler el altında olduğundan emin yapma, temizlik ve önce arasında kullanım aletleri sterilize ve tüm steril malzeme için çalışma yüzeyinde steril bölge belirleme içerir.<ol>
<li>Tüm cerrahi aletler ve malzemeler otoklav tarafından sterilize. Cam boncuk sterilizasyon araç ipuçları arasında birden fazla işlem aynı anda yapılır eğer hayvanlar, sterilize etmek yeterlidir.</li>
		<li>8-10 hafta eski C57Bl/6 erkek fareler % 100 oksijen ve % 2.5 isoflurane karışımı ile anestezi. Not: oksijen ve gerektiği gibi isoflurane akışını ayarlayın.</li>
		<li>Anesthetization hayvan Forseps ile ayak parmakları arasında arka pençe pinching tarafından onaylayın. Hayır yanıt--dan tutam hayvan anestezi gösterir.</li>
		<li>Yavaş salınımlı analjezik (buprenorfin) subkutan enjeksiyon yoluyla yönetmek. Fareler analjezik 1 kg vücut ağırlığı (1 mg/kg) başına 1 mg doz ver.</li>
		<li>Her iki gözün kornea hiçbir kuruma süresi boyunca yordamı sağlamak için hayvan göz merhem yerleştirin.</li>
		<li>0.2 - 0.5 mL izotonik sıvı vücut ağırlığının 10 g başına subkutan yönetmek.</li>
		<li>Cerrahi bant kullanarak ameliyat masasına yerde hayvan düzeltmek. Hayvanın karın ortaya çıkarmak için sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Hipotermi önlemek için bir Isıtma yastığı ameliyatı.</li>
		<li>Saç fare karından 1-2 dk. karın bölgesi gazlı bez ile temiz ve distile su, temizleme işlemi için krem epilasyon uygulaması gerekirse çıkarın.</li>
		<li>Alternatif olarak, saç küçük bir elektrikli ustura ile tıraş karından çıkarın.</li>
		<li>Karin Baxedin (klorheksidin glukonat BP çözüm) ile herhangi bir insizyon vermeden önce sterilize. Etanol ile hafifçe gazlı bez alkol buharlaşma tarafından neden olduğu aşırı ısı kaybını önlemek için geçerlidir.</li>
	</ol></li>
	<li>Maruz kalma Inferior Vena kava (IVC)
	<ol>
<li>Cerrahi makas kullanırken, karın boşluğu açmak için laparatomi gerçekleştirin.<ol>
<li>Alt karın, Forseps ile cilt kaldırın ve bir dikey kesi linea her iki tarafına paralel yapmak alba. Sola veya sağa linea ilk kesi yapmak alba, operatörün el kullanımı bağlı olarak. Belgili tanımlık kesme uzak orta hat ultrason daha sonra Imaging'de yardımcı olmak için yapılır.</li>
			<li>Karın üstündeki ikinci, yatay bir kesi yapmak. Not: karın içine nüfuz kas olmalı "tented" ve herhangi bir zarar için karın organları önlemek için Cerrahi makas ile nüfuz.</li>
			<li>Hayvanın karın kas tabakası üzerinde dikey ve Yatay kesikler yineleyin. Karın altında organlara zarar içine penetrasyon sırasında kas çadır emin olun. Dikkat: cilt ve kas bağırsaklar ve diğer iç organlara onları delmek değil insizyon yaparken kaldır.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Cilt ve kas karın boşluğu ortaya çıkarmak için belgili tanımlık kesme uzak katlayın.</li>
		<li>Yara açılış kenarlarına izotonik solüsyonu ile ıslatılmış gazlı bez uygulayın ve bağırsak yansıtmak. Karın bağırsak dışa yardımcı olmak için her iki taraf için basınç uygulayın. Nazik hareketleri bir pamuk uç aplikatör ile bağırsak taşımak için kullanın. Gazlı bez izotonik çözümde ıslatın ve externalized bağırsak yerleştirin.<ol>
<li>Gazlı bez doku yerleşimde önce önceden nemlendirilmiş.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Kenara çekilin Periton herhangi bir yağ ve böbrek ve İliak damarları arasında IVC bulaşmasına neden.</li>
		<li>Açık yan dalları ilk bir kimlik olun. Bir yan dal olarak daha küçük görünür, ancak böbrek ve iliyak arasında IVC uzak dalları önemli damar damarlar. Damarlara büyük fareler arasında değişiklik gösterebilir. Fareler yan dalları mevcut IVC bir veya her iki tarafta olabilir.</li>
	</ol></li>
	<li>Tüp ligasyonu yan dalı Not: yan dallar varsa, aşağıdaki yordamı her biri için gelir. Yok, adım 4'e devam edin: ilk dikiş yerleştirme IVC altında. IVC ligasyonu yer-ecek var olmak hemen yan dallar varlığı ne olursa olsun sol renal ven distal.<ol>
<li>Künt diseksiyon yan dal her tarafında gerçekleştirmek. Künt diseksiyon art arda ile çevresindeki damarları zarar vermeden fasya ile kırmak için hafif basınç, künt forseps açma işlemidir. Uyarı: Delme veya zarar ven kaçının.</li>
		<li>Şube kaldırın ve 6-0 ipek sütür ven altında bir bölümünü geçmek. Her zaman kaldırma veya gemiler taşırken dikkat. Gemilerin çevresinde yağ kapmak en iyisi, aksi takdirde gemi zarar riski.</li>
		<li>Dikiş forseps kullanarak, bir cerrahi ligasyonu standart cerrahi düğüm bağlama tekniği kullanarak yan dal çevresinde bulunurlar. Tam ligasyonu % 100 tıkanıklığı damarın sağlamak için yapılır. En az üç uygulamakla atar ligasyonu güvenli olduğundan emin olmak için kullanın.</li>
		<li>1.3 için kalan herhangi bir yan dalları arasındaki adımları yineleyin.</li>
	</ol></li>
	<li>IVC üzerinden abdominal aort diseksiyon
	<ol>
<li>Hemen distal IVC çevresinde künt diseksiyon sol renal ven gerçekleştirin. Abdominal aort IVC fasya ile bağlı olduğu, bu nedenle ilk künt diseksiyon IVC ve abdominal aort gerçekleştirin. Dikkat: Delme veya zarar ven kaçının. Rüptürü veya her iki gemi delik değil. Bu yordam, gemi hasar için yüksek risk taşıyan en önemli parçasıdır.</li>
		<li>Açık bir pencere aort ile IVC arasında yapılana kadar künt diseksiyon ile hafif basınç uygulamaya devam.</li>
	</ol></li>
	<li>Dikiş yerleştirme ve IVC ligasyonu
	<ol>
<li>6-0 ipek sütür IVC ve abdominal aort altında bir bölümünü geçmek.</li>
		<li>IVC ve aort arasında oluşturulan pencereden dikişi bulun. Forseps dikişi çekin ve abdominal aort ile IVC arasında iş parçacığı için kullanın. Dikiş aracılığıyla dikkatle, çekme/abdominal aort ve IVC ponksiyon değil için iş parçacığı.</li>
		<li>Cerrahi ligasyonu IVC çevresinde toplam tıkanıklığı damarın sağlanması dikiş Forseps ile olun. Yine, tüp ligasyonu hemen sol renal ven üzerinden distal olun.</li>
		<li>Tüp ligasyonu güvenliğini sağlamak için üç dikiş atar olun. Not: İki alternatif bir seçenek olarak ayıran önce aort ve IVC altında dikiş geçmek mümkündür. Alternatif olarak, 7-0 Prolene sütür yan şube ve IVC ligasyonu için kullanılabilir.</li>
	</ol></li>
	<li>Yaranın kapanması ve ameliyat sonrası bakım
	<ol>
<li>Abdominal aort kesintisiz bırakıldı ve tüm yan dalları bakmaksızın doğrulayın. IVC dilate görünür distal ligasyonu siteden ve kan akışı görünür olacaktır.</li>
		<li>Tüm Periton yağ ve bağırsak karın boşluğunda yerleştirin.</li>
		<li>Yaranın dikiş forseps ve 6-0 ipek sütür kullanarak kapatın. Çalışan dikiş (basit sürekli) kullanın ve dikiş çok sıkı olmayacak. Ne zaman hayvan uyanır ve onun kafes taşır sıkı dikiş rüptürü.<ol>
<li>Alternatif olarak, PDS, Ethilon, Vicryl, Dexon veya paslanmaz çelik klipleri yara kapatma için kullanabilir.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Dikiş önce uygun dikiş tekniği bağlama kullanarak karın kas tabakası.</li>
		<li>Dikiş tekniği cilt için yineleyin ve yara kapatma yeterli olduğunu doğrulayın. Not: aynı dikiş iğne ve iplik birden çok hayvanlar için kullanılıyorsa, ikisinde % 70 etanol her kullanımdan önce sterilize.</li>
		<li>Hayvan anestezik gaz kaldırmak ve en az 30 dakika 34 ° C kuluçka makinesine koyun.</li>
		<li>Yine, 0.2 - 0.5 mL izotonik sıvı vücut ağırlığının 10 g başına subkutan yönetmek. Sıvı takip eden günlerde pre-operative vücut ağırlığı korumak için gerekirse verilebilir.</li>
		<li>Hayvan Kurtarma kadar başarılı ameliyat olun ve hayvan genel sağlık değerlendirmek için izleyin. Uyarı: Hafif Kambur duruş bu gibi invaziv bir işlem için bekliyoruz, ama hayvan 30 dakika sonrası işlemi normalde erken davranacaktır.</li>
		<li>Hayvan kendi kafesin içine yerleştirin ve tamamen iyileşti kadar diğer hayvanlarla koymayın.</li>
		<li>Analjezik günlük en çok 48 s postop için yeniden yönetmek.</li>
		<li>Gıda kafesin zemininde kurtarma hayvan süre yerleştirin. Diğer özel bakım genellikle gerekli değildir.</li>
		<li>Kızarıklık, şişlik, ya da basma ve herhangi bir diğer işaret-in hastalık yara sitesine inceleyin.</li>
		<li>Gerekirse, dikişler 7-10 gün sonra kaldırın.</li>
		<li>Ötenazi gerçekleştirdikten hemen ameliyat başarısız olursa (Örneğin, önemli gemi hasar ve/veya kan kaybı) veya hayvan ile ameliyat sonrası bakım geliştirmek değil. Ötenazi genellikle 48 h postop gerçekleştirilir. Daha uzun deneyler için 7-0 Prolene yan dallar ve IVC ve 5-0 Vicryl sütür karın boşluğu kapatmak için ligate kullanmak.<ol>
<li>Ötenazi anesthetization bir indüksiyon daha önce açıklandığı gibi dışında % 5 isoflurane hayvan yerine getirilir. Bu boğulma anestezi iken % 100 CO2 tarafından takip ediyor.</li>
			<li>Ötenazi boğulma (kalp atışı ve nefes kaybı) tarafından onay sonra tam ötenazi sağlamak için servikal çıkığı gerçekleştirin.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>2. yüksek frekans ultrason Protokolü
Not: Bu bayan Davis Enstitüsü kemirgen fenotipleme çekirdek SOP yüksek frekans ultrason görüntüleme için gelen adapte iletişim kuralıdır. Bu iletişim kuralı 24 h post operatif taşıdı ama hayvan de ameliyat için yanıt olarak daha önce yapılabilir. Protokol sağlıklı fareler üzerinde herhangi bir zamanda yapılabilir ve genellikle öncesi ve ameliyat sonrası karşılaştırmak için yapılır.
<ol><li>
Hayvan hazırlanması
	<ol>
<li>Hayvan bir indüksiyon odasında yerleştirin ve % 100 oksijen ve % 2.5 isoflurane karışımı ile hayvan anestezi.</li>
		<li>Kalp hızı ve sıcaklık monitörünüzü açınız. Hayvan işlem sırasında sıcak tutmak için tablonun üst pozisyon ısı lamba.</li>
		<li>Hayvan indüksiyon odasından kaldırın ve kornea kuruma önlemek için göz yağ uygulayın. Hayvan analiz platformu üzerinde konumlandırın ve hayvanın ağız/burun anestezik tüp yapıştırmayın.</li>
		<li>Sıcak ultrason 37 ° C-jel ve jel hayvanın karın bölgesinde yer. Ultrason jeli pompalar su jel şişe sarılı rulo ile sıcak su ısıtma sistemi kullanılarak ısıttı.</li>
		<li>Kalp hızı ölçümleri, (gerekirse) için elektrot jel üzerinde analiz platformun elektrotlar 4 koymak ve belgili tanımlık paws platformu/elektrotlar için hayvanın cerrahi bant ile düzeltmek. Hayvan sırtüstü pozisyonunda IVC görüntüleme için yerleştirin. Görüntüleme sistemi ultrason sıcak ve elektrotlar hayvan izleme içeren bir çözümleme platform içerir.</li>
		<li>Sıcaklık ölçüleri, elektrot jel termometre üzerinde koymak ve hayvan rektum yerleştirin.</li>
		<li>Isı lamba ve isoflurane o hayvanı rahat, 30-70 bpm arasında bir solunum vardır ve 37 ° C'de tutulur emin olmak gerektiği gibi ayarlayın</li>
		<li>Gerekirse, hayvanın karın tıraş veya saç dökücü krem saç kaldırma. 1-2 dakika boyunca uygulayın ve temiz gazlı bez ve distile su ile silin. Not: Çok fazla saç görüntü kalitesini etkileyebilir.</li>
		<li>Gazlı bez altında veya herhangi bir aşırı ultrason jeli yakalamak için hayvan tarafına yerleştirin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Düşsel IVC ve Trombus olgusu
	<ol>
<li>Görüntüleme yazılımını açın ve yeni bir çalışma başlar.</li>
		<li>Görüntüleme için uygun bir scanhead seçin. Burada kullanılan scanhead için karın organları olduğunu (frekans: 35 MHz, odak uzaklığı: 12.8 mm).</li>
		<li>Hayvan ilgili herhangi bir ilgili bilgileri kaydeder. Bu hayvan içerebilir kimliği, seks, ağırlık, Doğum tarihi, soy, vb.</li>
		<li>Ultrason jeli hayvan dokunuyor kadar scanhead indirin.</li>
		<li>2-B görüntüleme hayvan başlamak için scanhead sonda başlatın. Bu modda, görüntüleri iki boyutlu, değişen grinin olarak sunulmaktadır.</li>
		<li>IVC ve abdominal aort scanhead z uçağın üzerinden de hareket ederken fare platform x - ve y-uçak, boyunca taşıyarak bulun. Not: kan damarları onların duvarlar beyaz ve kan içinde neredeyse-ecek gözükmek ile siyah. Abdominal aort yoğun atmak ve daha kalın duvarlar var, süre IVC ince duvarlar ve sıkıştırma genişletin/kolayca üzerinde görüntü ekran scanhead hareket ettiğinde ve aşağı. Tüp ligasyonu sitesi damarı genişlemiş ve damar duvar bir noktasına gelecek kadar belirgin olacaktır. İçinde oluşan herhangi bir trombüsü ultrason görüntüleme altında katı olacak ve damar duvar gibi kolayca sıkıştırır değil. Damar-ecek basmak sadece ligasyonu nerede yok trombüsü oluşturulur.</li>
		<li>IVC ve ligasyonu site bulma üzerine, onları en doğru görüntü elde etmek için ultrason, odak noktası üzerinde ortalayın.<ol>
<li>Görüntü net görmek, jel ayarlamak ve herhangi bir hava kabarcıkları pamuk uç aplikatör ile kaldırmak için çok karanlık ise.</li>
			<li>Gerekirse, scanhead 45 ° sola veya sağa doğru eğin ve damar açıkça görmek için hayvan platformu yeniden ayarlayabilirsiniz. Scanhead ile girişim ise bu yapılır. Bu senaryoda, damar bir yan-dikişi önlemek için bir açıyla yansıması gerekir. Not: Görüntü paraziti en sık deri hayvan, zavallı yaranın dikiş yerleştirme veya ultrason jel kabarcıkları karanlık yamalar neden olur.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Yazılımı kullanarak, istenen herhangi bir yapı fotoğraf çekmek ve herhangi bir ölçüm araçları kullanarak ölçüleri yapın. Ortak ölçümler kesiti trombüsü veya ligasyonu sayfanın genişliğini içerir.</li>
		<li>Kan akışı ölçümleri yapmak için nabız dalga Doppler görüntüleme modunu değiştirmek. Bu mod, vasküler kan akımı görüntüleme ve diğer değişkenler arasındaki akış hızı ölçümü sağlar.</li>
		<li>Hayvan arka sonu düşürmek için analiz platformu eğ.</li>
		<li>Hayvan posterior ucundan yaklaşık 30 ° açılı jel başvuracağım scanhead açısı/konumunu değiştirin.</li>
		<li>Hayvan platformu ve scanhead yeniden konumlandırın. IVC ve ligasyonu gerekirse yerini değiştirin.</li>
		<li>Kan akışı ölçümleri Staz onaylamak ve istenen herhangi bir fotoğraf çekmek için ligasyonu site yapmak. Ortalama hız, en yüksek hız veya medyan hız kan akımı ortak ölçümler.</li>
		<li>Herhangi bir ölçüm veya çekilen görüntüleri kaydedin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Temizlik ve hayvan kurtarma
	<ol>
<li>Pozisyon ilk ve hayvan platformu ilk konumuna de yeniden konumlandırmak için scanhead kaldırın.</li>
		<li>Gazlı bez hayvanla kapalı aşırı jel kaldırın. Yaranın dikiş değil yırtıldı yavaşça yapmak bu.</li>
		<li>Termometre hayvanın rektum kaldır ve hayvan platform kapalı alır.</li>
		<li>Hayvan onun kafes ve 34 ° C kuluçka makinesi yerleştirin.</li>
		<li>Hayvan Kurtarma kadar izlemek. Çok küçük ve non-invaziv bir yöntemdir. Hayvan hızla uyanacaksın. Şu günlerde bölümü 1,6 Bu protokol uyarınca hayvan izleme devam edin.</li>
		<li>Gazlı bez ve dezenfektan hayvan platformuyla temiz.</li>
		<li>Silme temiz gazlı bez ve distile su ile scanhead. Uyarı: Çok yavaşça scanhead temiz ve sadece distile su ile.</li>
		<li>2 sonraki hayvan için yineleyin.<ol>
<li>Tüm konular ile yapılırsa, tüm resimler ve kayıtları kaydedildiğini doğrulayın. O zaman tüm ekipman ve yazılım kapatın.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Fowkes, F. J., Price, J. F., Fowkes, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+diagnosed+deep+vein+thrombosis+in+the+general+population%3A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Vasc+Endovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Incidence of diagnosed deep vein thrombosis in the general population: systematic review.</a> Eur J Vasc Endovasc Surg. 25 (1), 1-5 (2003).</li>
<li>McGuinness, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recruitment+of+labelled+monocytes+by+experimental+venous+thrombi%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Recruitment of labelled monocytes by experimental venous thrombi.</a> Thromb Haemost. 85 (6), 1018-1024 (2001).</li>
<li>Singh, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+thrombus+to+resolve+in+urokinase-type+plasminogen+activator+gene-knockout+mice%3A+rescue+by+normal+bone+marrow-derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Failure of thrombus to resolve in urokinase-type plasminogen activator gene-knockout mice: rescue by normal bone marrow-derived cells.</a> Circulation. 107 (6), 869-875 (2003).</li>
<li>Itoh, K., Ieko, M., Hiraguchi, E., Kitayama, H., Tsukamoto, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+kinetics+of+99mTc+labeled+recombinant+tissue+plasminogen+activator+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">In vivo kinetics of 99mTc labeled recombinant tissue plasminogen activator in rabbits.</a> Ann Nucl Med. 8 (3), 193-199 (1994).</li>
<li>Kang, C., Bonneau, M., Brouland, J. P., Bal dit Sollier, C., Drouet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+pig+models+of+venous+thrombosis+mimicking+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">In vivo pig models of venous thrombosis mimicking human disease.</a> Thromb Haemost. 89 (2), 256-263 (2003).</li>
<li>Knight, L. C., Baidoo, K. E., Romano, J. E., Gabriel, J. L., Maurer, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+pulmonary+emboli+and+deep+venous+thrombi+with+99mTc-bitistatin%2C+a+platelet-binding+polypeptide+from+viper+venom%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Imaging pulmonary emboli and deep venous thrombi with 99mTc-bitistatin, a platelet-binding polypeptide from viper venom.</a> J Nucl Med. 41 (6), 1056-1064 (2000).</li>
<li>Wakefield, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Venous+thrombosis+prophylaxis+by+inflammatory+inhibition+without+anticoagulation+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Venous thrombosis prophylaxis by inflammatory inhibition without anticoagulation therapy.</a> J Vasc Surg. 31 (2), 309-324 (2000).</li>
<li>Robins, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+Gas6+contributes+to+thrombogenesis+and+promotes+tissue+factor+up-regulation+after+vessel+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Vascular Gas6 contributes to thrombogenesis and promotes tissue factor up-regulation after vessel injury in mice.</a> Blood. 121 (4), 692-699 (2013).</li>
<li>Aghourian, M. N., Lemarie, C. A., Bertin, F. R., Blostein, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prostaglandin+E+synthase+is+upregulated+by+Gas6+during+cancer-induced+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Prostaglandin E synthase is upregulated by Gas6 during cancer-induced venous thrombosis.</a> Blood. 127 (6), 769-777 (2016).</li>
<li>Laurance, S., et al. <a target="_blank" href="http://atvb.ahajournals.org/content/early/2017/04/27/ATVBAHA.116.308925">Gas6 (Growth Arrest-Specific 6) Promotes Inflammatory (CCR2hiCX3CR1lo) Monocyte Recruitment in Venous Thrombosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. , (2017).</li>
<li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+review+of+mouse+models+of+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Critical review of mouse models of venous thrombosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 32 (3), 556-562 (2012).</li>
<li>Aghourian, M. N., Lemarie, C. A., Blostein, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+monitoring+of+venous+thrombosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">In vivo monitoring of venous thrombosis in mice.</a> J Thromb Haemost. 10 (3), 447-452 (2012).</li>
<li>Brandt, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+vein+thrombus+formation+induced+by+flow+reduction+in+mice+is+determined+by+venous+side+branches%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Hemorheol+Microcirc%22%5BJournal%5D)">Deep vein thrombus formation induced by flow reduction in mice is determined by venous side branches.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 56 (2), 145-152 (2014).</li>
<li>Diaz, J. A., Farris, D. M., Wrobleski, S. K., Myers, D. D., Wakefield, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inferior+vena+cava+branch+variations+in+C57BL%2F6+mice+have+an+impact+on+thrombus+size+in+an+IVC+ligation+%28stasis%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Inferior vena cava branch variations in C57BL/6 mice have an impact on thrombus size in an IVC ligation (stasis) model.</a> J Thromb Haemost. 13 (4), 660-664 (2015).</li>
<li>Luther, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+Effector-Memory+T+Cell+Activation+Regulates+Post-Thrombotic+Vein+Wall+Inflammation+and+Thrombus+Resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Innate Effector-Memory T Cell Activation Regulates Post-Thrombotic Vein Wall Inflammation and Thrombus Resolution.</a> Circ Res. , (2016).</li>
<li>Subramaniam, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+contributions+of+complement+factors+to+platelet+activation+and+fibrin+formation+in+venous+thrombus+development%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Distinct contributions of complement factors to platelet activation and fibrin formation in venous thrombus development.</a> Blood. 129 (16), 2291-2302 (2017).</li>
<li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombogenesis+with+continuous+blood+flow+in+the+inferior+vena+cava.+A+novel+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Thrombogenesis with continuous blood flow in the inferior vena cava. A novel mouse model.</a> Thromb Haemost. 104 (2), 366-375 (2010).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Staz modelini kullanarak başarılı Venöz trombüsü oluşumu için birkaç önemli adım vardır. Ven Trombozu indüksiyon daha inferior vena kava ve aort damarı çevreleyen yağ birikimi nedeniyle eski farelerde zordur. İdeal olarak, bu yordamı geçiren fareler 8 - 10 hafta çocuk olmalıdır. Büyük değil ikna etmek IVC endotel hasarı künt diseksiyon ve bağ sırasında için özen gösterilmelidir. Buna ek olarak, bu ameliyattan sonra en az 30 dakika 34 ° C kuluçka makinesine hayvan tutmak için ve yalnızca tam kurtarma sonra diğer hayvan şi...

Derin Venöz trombozu (DVT) ve pulmoner emboli oluşur, Venöz tromboemboli (VTE), miyokard enfarktüsü ve inme sonra kardiyovasküler ölüm üçüncü önde gelen nedenidir. Nüfusun % 1-2 1 5001yıllık insidansı ile etkileyen yaygın bir durumdur. Download VTE için yol açabilir: 1) ölümün ötesine pulmoner emboli; 2) sonrası trombotik sendromu, kronik bacak ağrı, şişlik ve ülserasyon ile karakterize; ya da 3) önemli Kronik solunum uzlaşma içinde kaynaklanan Kronik Pulmoner Hipertansiyon. Download VTE çok faktöriyel bir hastalıktır ve yüz yıl önce açıklandığı Staz kan akımı, gemi duvarları ve/veya pıhtılaşma Birleşik koagülasyon ve fibrinolitik sistem arasındaki dengeyi bir bozulma nedeniyle zarar neden olabilir Virchow tarafından ve Virchow'ın Üçlü bilinir.
Çoğu zaman insan DVT örnekleri elde edebilmek mümkün değildir çünkü, araştırmacılar DVT deneysel hayvan modelleri geliştirdi. Sıçan2, fare3, tavşan4, domuz5, köpek6ve insan dışı primat7 de dahil olmak üzere çeşitli hayvanlar kullanılmıştır. Fare genetiği değiştirilmiş ve DVT eğitim için en sık kullanılan hayvan vardır. Ancak, Bütün hayvanlar gibi farelerde spontan DVT gözlenen değil. Böylece, fiziksel veya kimyasal değişiklikler damar duvarının trombozu farelerde oluşturmak için kullanılır. Biz daha önce biatriyal Trombus fareler8,9,10inferior vena kava (IVC) ikna etmek için ferrik klorid modeli kullandık. Bu model güvenilir birkaç dakika içinde tıkayıcı olu_umu üreten avantajı ve anti-koagulant ve anti-trombosit uyuşturucu rol sırasında akut DVT araştırmak için kullanılır. Ancak, bu terminal bir işlemdir. Böylece, akut ve kronik DVT çalışmaya, staz modeli daha uygundur. Bu modelde, trombüsü oluşumu IVC Virchow'ın Üçlü DVT gelişimi için faktörlerin kan akımı tam kesintiye indüklenen. Bu model DVT oluşumu ve FeCl3 model11' e göre bir avantajdır çözünürlük çalışma için kullanılabilir.
Trombüsü oluşumu ve çözünürlük bir mikro-görüntüleme yüksek frekanslı ultrason sistemi12kullanarak zaman içinde takip etmek non-invaziv bir yöntem geliştirdik. Biz daha önce ultrason tarafından Venöz tromboz ölçümü olumlu patolojik olarak elde edilen olu_umu ile ilişkili olan göstermiştir. Biz iki sonraki çalışmalarda ölçümleri ultrason ilişkili trombüsü ağırlık ve histochemistry9,10tarafından sayısal trombüsü alanı ile elde edilen doğruladı. Daha da önemlisi, yüksek frekans ultrason fareler12derin Venöz tromboz oluşumunu izlemek için kullanılan göstermiştir. Trombüsü çözünürlük non-invaziv bir şekilde ölçmek için de kullanılabilir.
Burada, staz kaynaklı trombozu fare modeli ve nasıl trombüsü formasyonu olmayan invaziv yüksek frekans ultrason kullanarak zaman içinde izlenebilir kullanarak trombüsü oluşumu izin iletişim kuralı anlatacağım.

<table><tbody><tr><td>6-0 perma-el ipek sütür</td><td>Ethicon</td><td>706G</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi Makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>20830-00</td><td></td></tr><tr><td>Sütür bağlama forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>20830-00</td><td></td></tr><tr><td>künt forseps (düz ve kavisli)</td><td>Fine Science Tools</td><td>20830-00</td><td></td></tr><tr><td>İğne Sürücüsü</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>Moria Bahar Makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>15396-00</td><td></td></tr><tr><td>1ml şırıngalar</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>26G iğneler</td><td>Becton Dickinson & Co.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>VEVO 770 Yüksek Çözünürlüklü Görüntüleme Sistemi</td><td>Visualsonics</td><td>Artık satılmıyor</td><td></td></tr><tr><td>SR Buprenorfin</td><td>ZooPharm</td><td></td><td>Veteriner</td></tr><tr><td>Cerrahisi Mikroskobu</td><td>Leica Leica</td><td>M651</td><td></td></tr><tr><td>Systan göz oinmenti</td><td>Alcon</td><td>288/28062-0</td><td></td></tr><tr><td>2x2 steril Gazlı Bez</td><td>CDMV</td> <td># 104148</td><td></td></tr><tr><td>Pamuk Ucu </td><td>JGH</td>Transpore hipoalerjenik cerrahi bant CDMV # 7411 Ultrason jeli (Aquasonic-100) aplikatörleriDufort <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td> &<td></td></tr><tr><td></td><td> Lavigne</td><td>#AKEN4061</td> JGH Isoflurane'den <td></td></tr><tr><td>İnkübatör</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Dispomed</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anestezik odası, hortumlar ve yönetim ekipmanları</td><td>Dispomed</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Saç çıkarıcı</td><td>Nair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Su ısıtmalı sert ped</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>#HHP-2</td><td></td></tr><tr><td>Gaymar ısıtıcı su pompası TP500</td><td>MATVET A.Ş.</td><td>#R-500305</td><td></td></tr><tr><td>Kızılötesi ısıtma lambası</td><td>elektrimat a.ş.</td><td>#1R175R-PAR</td><td></td></tr><tr><td>Fare rektal sıcaklık prope</td><td>emkaTECHNOLOGIES</td><td></td><td></td></tr><tr><td>JGH'den steril</td> <td>su</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

derin ven trombozu staz farelerde yüksek frekans ultrasonografi tarafından izlenen tarafından indüklenen

Deep Vein Thrombosis Induced by Stasis in Mice Monitored by High Frequency Ultrasonography

Venöz tromboz nüfusun % 1-2 1 500 yıllık insidansı ile etkileyen yaygın bir durumdur. Venöz tromboz, pulmoner emboli veya sonuçlar sonrası trombotik sendromu, kronik bacak ağrı, şişlik ve ülserasyon ile karakterize veya önemli kronik kaynaklanan Kronik Pulmoner Hipertansiyon ölüme açabilir solunum uzlaşma. Bu en yaygın kardiyovasküler hastalık akut miyokard infarktüsü ve iskemik inme sonrası ve kanser, sistemik hastalığı, cerrahi ve büyük travma gibi diğer bozuklukları seyri karmaşık hale getirebilir gibi tüm tıp disiplinleri için klinik bir mücadeledir.
Deneysel modeller bu mekanizmaların çalışması gereklidir. Staz modeli tutarlı trombüsü boyutu ve trombüsü ölçülebilir miktarda neden olmaktadır. Ancak, sistematik olarak ligate yan dalları inferior vena kava trombüsü boyutları değişkenlik ve herhangi bir hatalı veri yorum önlemek için gereklidir. Ultrasonografi kullanarak trombüsü boyutunu ölçmek için non-invaziv bir yöntem geliştirdik. Bu tekniği kullanarak, biz trombüsü geliştirme ve çözünürlük zaman içinde aynı hayvan değerlendirebilir. Bu yaklaşım Venöz tromboz değiştirme, azaltma ve araştırma hayvanlarda arıtma prensibi ile tutarlı miktar için gerekli fare sayısını sınırlar. Ultrasonografi ile elde trombüsü ağırlık ve histolojik trombüsü boyut ilişkili ile ölçüm analizi göstermiştir. Bu nedenle, çalışmada Derin Ven Trombozu inferior vena kava Staz modelini kullanarak farelerde ikna etmek ve yüksek frekans ultrason kullanarak izlemek anlatılmaktadır.

Staz Venöz tromboz modeli
Staz modelindeki fareler anestezi ve inferior vena kava (IVC) ortaya çıkarmak için bir kesi yapılır. Sol veya sağ tarafına fare orta hat laparatomi ultrason sonda ile müdahale olmaz bir şekilde yerine belgili tanımlık kesme yapılır. Karın kasları ve cilt kat vardır geri IVC (şekil 1) ortaya çıkarmak için. İlk olarak, yan dallar bir 6-0 ipek sütür ile (<stro...

Mevcut Protokolü Venöz tromboz Staz modelini kullanarak elde etmek için gereken adımları açıklar. Buna ek olarak, biz trombüsü oluşumu ve çözünürlük zamanla ölçmek için non-invaziv bir yöntem kullanarak.

Derin Ven Trombozu Staz farelerde yüksek frekans Ultrasonografi tarafından izlenen tarafından indüklenen

Venous thrombosis is a common condition affecting 1 - 2% of the population, with an annual incidence of 1 in 500. Venous thrombosis can lead to death ...

Bu prosedürün genel amacı, inferior vena kava staz modelini kullanarak farelerde derin ven trombozunu indüklemek ve yüksek frekanslı ultrason kullanarak trombüsleri izlemektir. Bu yöntem, venöz tromboz alanındaki bir farmakolojik ajanın, genin veya ilgilenilen hücre tipinin trombüs oluşumunu veya çözünürlüğünü nasıl etkileyebileceği hakkındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin ana avantajı, farelerde hem trombüs oluşumunun hem de çözünürlüğünün non-invaziv olarak ölçülebilmesidir.Bu yöntem hakkında ilk olarak, farelerin inferior vena kavasında trombüs oluşumunu nasıl denamikate tabi tutacağımızı ve non-invaziv olarak izleyeceğimizi araştırırken aklımıza geldi. Başlamak için, sekiz ila 10 haftalık bir C57 siyah altı farenin alt karın derisini kaldırmak için forseps kullanın. Ve orta hattan linea alba'nın her iki tarafına paralel dikey bir kesi yapmak için cerrahi makas kullanın.Karnın üst kısmında yatay bir kesi yapın. Ardından karın kas tabakası boyunca tekrarlanan kesiler. Karın boşluğunu ortaya çıkarmak için cildi ve kası kesiden uzağa katlayın.Ve nemli gazlı bezi yaranın her iki tarafına yerleştirin. Bağırsakları gazlı bez üzerine dışsallaştırmak için kar

deep-vein-thrombosis-induced-stasis-mice-monitored-high-frequency

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Venöz endotel aktivasyonu ve kısmi kan staz, Virchow triadı iki bileşeni nedeniyle tipi trombüs oluşumu inferior vena kava sonuçlarının iç yüzeyi endotel aktivasyon elektrolitik indüksiyon.

Ven Trombozu Elektrolitik inferior vena kava Modeli (EIM)

Inferior vena kava trombozu fare tam durağanlık modeli ven duvar dokusu ve trombüs ölçülebilir miktarda verir. Bu damar duvar ve oklüzif trombüs arasındaki etkileşimleri ve akut ve kronik inflamasyon ilerlemesini değerlendirmek değerlendirmek için yararlı olduğu kanıtlanmıştır.

İnferior Vena Kava Trombozu Fare Komple Durağanlık Model

Bu video, bir fare modelinde trombüs oluşumunu incelemek için intravital floresan mikroskobu tekniğini göstermektedir. Fareye, kan dolaşımını izlemek için florofor etiketli bir polisakkarit enjekte edilir. Yüksek yoğunluklu bir ışıkla aydınlatıldıktan sonra, kulağın mikro damar sistemindeki bir yaralanmanın fototoksik indüksiyonu, kan akışındaki tıkanıklığın görselleştirilmesiyle doğrulanan bir trombüs oluşumuna yol açar.

Mikrovasküler Trombüs oluşumunu incelemek için intravital floresan mikroskobu

Kaynak: Kim, D., et. al. Serebral Tromboemboliyi Doğrudan Görselleştirmek için Yakın Kızılötesi Floresan Görüntüleme ve Mikro Bilgisayarlı Tomografi. J. Vis. Uzm.  (2016)Bu video, mikro bilgisayarlı tomografi (mikro-BT) görüntüleme kullanılarak farelerde serebral trombüsün görselleştirilmesini göstermektedir. Bir serebral trombüs fare modeline, kontrast bir ajan olarak işlev gören fibrin hedefli altın nanopartiküller enjekte edilir. Fare, bir mikro-CT makinesinin yatağına yerleştirilir ve...

Mikro Bilgisayarlı Tomografi Görüntüleme Kullanılarak Bir Farede Serebral Trombüsün Görselleştirilmesi

Burada Derin Ven Trombozu fare modeli olarak stenoz inferior vena kava içinde açıklayın. Bu model kan akışını kısıtlama, bir Venöz tromboz insanlarda büyük tetikler beyannamedir.

Inferior Vena kava stenozu: Derin Ven Trombozu fare modeli

Bir aokaval fistül, her iki duvar üzerinden Vena Cava inferior içine murine infra-renal aort delip tarafından oluşturuldu ve inferior vena cava kısmi ligasyon yoluyla onun çıkış bir stenoz oluşturulması izledi. Bu tekrarlanabilir model, Merkezi venöz stenozu incelemek için kullanılabilir.

Bir outflow stenozu ile Aokaval fistül kullanarak Merkezi venöz stenozis murine modeli

Bu makalenin amacı, farelerde serebral arterlerde kan akışının in vivo görüntülenmesini sağlayan sonografi tabanlı bir yöntem sunmaktır. Subaraknoid kanamanın (SAH) murine modellerinde vazospazm ile ilişkili kan akışı hızlarındaki değişiklikleri belirlemek için uygulamasını gösteriyoruz.

Yüksek Frekanslı Transkraniyal Dubleks Ultrason ile Subaraknoid Kanamanın Murine Modelinde Serebral Vazospazm Analizi

Bu protokol, FVB farelerde arka bacak kangrenini indüklemek için femoral arter ve ven elektrokoagülasyonunu nitrik oksit sentaz inhibitörü uygulamasıyla birleştiren benzersiz, klinik olarak ilgili bir periferik arter hastalığı modelini tanımlamaktadır. İntrakardiyak DiI perfüzyonu daha sonra ayak yastığı vaskülatürünün yüksek çözünürlüklü, üç boyutlu görüntülenmesi için kullanılır.

Murin Arka Ekstremite Kangren Modelinde Footpad Vaskülatürünün Yüksek Çözünürlüklü Üç Boyutlu Görüntülenmesi

Bu protokol, endometriyal kanserin indüklenebilir bir fare modelinde, brüt ve histolojik değişikliklerle korelasyonlu ultrason görüntüleme kullanarak uterusta morfolojik değişikliklerin zaman içindeki ilerlemesini izlemek için bir yöntem açıklamaktadır.

Farelerde Tümör Baskılayıcıları Arid1a ve Pten'in Pax8'e Yönelik Delesyonunda Endometriyal Kanser Progresyonunun Non-İnvaziv Ultrason Değerlendirmesi

Bu makale, venöz ligasyon elde etmek için vasküler klipsler kullanarak bir fare kanseri modelinde venöz trombozu değerlendirmek için optimize edilmiş bir yöntem sunmayı amaçlamaktadır. Optimizasyon, trombozla ilişkili ölçümlerdeki değişkenliği en aza indirir ve insan kanseriyle ilişkili venöz trombozla alaka düzeyini artırır.

Bir Fare Kanser Modelinde Venöz Tromboz Testi

Yumurtlama öncesi dönemde yumurtalık kan akışındaki değişiklikler yumurtlama için gereklidir. Doppler ultrasonografi insanlarda ve büyük hayvanlarda over hemodinamiği ve perfüzyonunu değerlendirmek için kullanılmıştır. Farelerde yumurtlama öncesi ve periovulatuar fazlarda yumurtalık hemodinamisini değerlendirmek için Doppler ultrasonografi uygulamak için bir protokol sunulmuştur.

Farelerde Canlı Görüntüleme ve Ovaryan Vasküler Fonksiyonun Ölçülmesi için Doppler Ultrasonografi

Öğrenin, farelerde inferior vena kava staz modeli kullanarak derin ven trombozu indüksiyonunu ve yüksek frekans ultrasonografi ile trombüs oluşumunun invaziv olmayan izlenmesini. Bu yöntem trombüs dinamiklerini araştırmak için güvenilir bir yaklaşım sunar.

Derin Ven Trombozu Staz farelerde yüksek frekans Ultrasonografi tarafından izlenen tarafından indüklenen

Daha fazla video keşfet