May 14th, 2018
Tek tek tekerlekliyse çalışan sınırlı erişim iken verilen gıda muhafaza fare gıda tüketim indirimleri geliştirmek ve çalışan direksiyonda aktivite artışı. Bu deneysel olguya etkinlik tabanlı anoreksiya denir. Bu paradigma Nörobiyoloji ve Anoreksiya Nervoza yönlerini temel davranışları eğitim için deneysel bir araçtır.
Bu deneyin genel amacı, anoreksiya nervozanın altında yatan nörobiyolojiyi ve davranışı incelemektir. Bu yöntem, anoreksiya nervozanın nöral temellerinin neler olduğu ve hangi beyin devrelerinin dahil olduğu gibi yeme bozuklukları ile ilgili psikiyatri alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, insanlarda değerlendirilemeyen bazı altta yatan anoreksiya mekanizmalarını incelemek için kullanılabilmesidir.
Dizüstü bilgisayara ve tekerlek göbeklerine yakın bir kafes rafı seçerek deneysel bir alan oluşturun. Bu, veri iletimiyle ilgili sorunları sınırlayacaktır. Şimdi tekerlek poyraları ile yazılım arasındaki bağlantıyı etkinleştirin.
Her iki kablosuz hub'ın da etkin olduğundan emin olmak için önce tekerlek yönetim yazılımını açın. Yazılımdan varsayılan tekerlek bağlantılarını sıfırlayın. Araçları açın ve tekerlekleri sil'i seçin.
Bu adımı beş kez tekrarlayın, ardından yazılımı kapatın ve yeniden açın. Ardından, tekerleklere güç sağlayın. Pil takımı kablolarını tekerlek donanımına bağlayın ve pilleri tekerlek tabanına yerleştirin.
O zaman yazılıma bir göz atın. Dingil mesafesi, uygun kablosuz hub'ın altında birinin kimliğiyle birlikte listelenmelidir. Değilse, pil takımını çıkarın, yazılımdaki tekerleği silin ve tekrar deneyin.
Tekerlek tanınırsa, kimliği uygun hayvanın kimliğiyle değiştirin.Ardından, dengeyi sağlamak için koşu tekerleğinin tabanını koli bandı ile kafesin altına yapıştırın. Fareler açıkta kalan bandı çiğneyeceği için herhangi bir bandın dışarı çıkmasına izin vermeyin. Ardından, tabana aşınmış manyetik olmayan bir çalışan tekerlek diski yerleştirin ve kafes duvarlarından ve ızgaradan boşluğu doğrulamak için tekerleği döndürün.
Diski döndürün ve her devrimin yazılımla düzgün bir şekilde kaydedilip kaydedilmediğini kontrol edin. Ardından, yiyecek kavanozunu kafese sabitlemek için koli bandı kullanın. Çalışan tekerlekten ve su şişesinden uzağa yerleştirin.
Daha sonra kavanoza iki parça yemek koyun, dolu su şişesini kafese takın ve kafesin tabanına yatak takımı ekleyin. Tüm kafesler bu şekilde hazırlandıktan sonra, fareleri tek tek uygun kafeslerine yerleştirin. Tüm fareler kafeslerine girdikten sonra, yazılıma gidin ve dosyaya tıklayın ve ardından edinmeye başlayın.
Deney boyunca, deneme aşamalarını bölmek için yeni satın almalar başlatın. Şimdi farelerin iki tam gün boyunca barınma koşullarına alışmasına izin verin. Bu aşamada, her farenin ABA deneyini işleyecek kadar sağlıklı olup olmadığına karar verin.
Deneyin üçüncü gününde, yaklaşık dokuz gram yemek ölçün ve ağırlığı bir gramın 1 / 1000'ine kaydedin. Daha sonra, fareyi kafesten dikkatlice çıkarın ve bir gramın onda birine kadar büyük bir plastik beherde tartın. Bunu fareye minimum baskı uygulayarak yapın.
Fare kafesin dışındayken, kafesteki tüm yiyecekleri arayın ve çıkarın. Kavanozdaki yiyecekleri çıkarmanın yanı sıra, dağınık yiyecekler için yatak takımlarına bakın. Ardından, gerekirse koşu tekerleğini %70 izopropanol ve kağıt havluyla temizleyin.
Fareyi kafesine geri koymadan önce, izopropanolün kuruduğundan emin olun. Ardından fareyi ve dokuz gram yemeği kafese yükleyin. Ertesi gün, son ziyaretten sonraki 10 dakika içinde hayvan tesisine geri dönün.
Yine küçük bir plastik behere dokuz gram yemek yükleyin ve tam ağırlığı kaydedin. Yine, fareyi nazikçe çıkarın ve fareye minimum baskı uygulayarak tartın. Şimdi yiyecek kavanozunu kafesten çıkarın ve araştırın.
Dışkıyı cımbızla çıkarın ve yatak takımını çıkarmak için beherin üzerine bir süzgeç kullanın. Daha büyük yiyecek parçalarını filtreden geçecek şekilde ufalayın ve süzgeçte sadece yatak örtüsü bırakın. Daha sonra kafes yatağında yiyecek artıkları olup olmadığını araştırın ve bunları behere ekleyin.
Sonra kafeste kalan yiyeceğin kütlesini kaydedin. Ardından, kavanozu silerek temizleyin ve boş olarak kafese geri koyun. Gerekirse yeni bant uygulayın.
Daha sonra kavanozu hazırlanan dokuz gramlık yiyecek rasyonu ile doldurun. Daha önce olduğu gibi, kirlenmiş koşu tekerleklerini temizleyin ve kafeslere geri koyun. Tüm kafesleri her gün bu şekilde sıfırlayın.
Beşinci, yedinci ve dokuzuncu günlerde, tekerlek çalıştırma programında bilgisayar veri alımını yeniden başlatın. Temel verileri topladıktan sonra, 11. günde veri alımını yeniden başlatın ve kısıtlama aşamasına başlayın. Temel olarak, birkaç değişiklikle temel protokolü takip edin.
İlk olarak, yiyeceği değiştirirken çalışan tekerlekleri temizlemeyin. İkincisi, hayvanların dokuz gram yiyecek rasyonlarına erişimini sadece altı saatle sınırlayın. Beslenme periyodu günlük veya gece olabilir.
Her iki seçeneğin de değeri var. Altı saat sonra, kavanozda ve kafeste kalan yiyecekleri tartın. Bu noktada, gerekirse, tekerleği temizleyin, ancak bunu hızlı bir şekilde yapın, böylece bir sonraki kafese hızlı bir şekilde müdahale edilebilir.
Kısıtlama aşamasının her gününde bu prosedürü tekrarlayın. Şimdi hayvanların kilo kaybını izlemek çok önemli hale geliyor. Bir fare temel vücut ağırlığının %75'ine düşerse, onu deneyden çıkarın.
Bu farelere kafes tabanından sınırsız yiyecek sağlayın ve çalışan bir tekerleğe erişim yok. Tüm kafesler değerlendirildikten sonra, iyileşmeleri incelenmeyecekse bırakılan farelere ötenazi yapın. Açıklanan deney kullanılarak, bir grup aktiviteye dayalı anoreksiya faresi, üç kontrol grubu ile birlikte değerlendirildi.
Tarif edilen prosedürü takiben, yiyecek altı günlük saat ile sınırlandırıldı. Aşırı kilo kaybı nedeniyle bir fare çalışmadan çıkarıldığında, rastgele seçilen bir kontrol faresi de çıkarıldı. Planlı beslenmeye maruz kalan her iki grupta da vücut ağırlığı bir ila beş gün arasında azaldı ve bu, gıda alımının azalmasıyla mantıksal olarak ilişkilendirildi.
İlginçtir ki, kilo kaybının tekerlek çalıştırma aktivitesi üzerinde hiçbir etkisi olmadı. Davranış çalışmasından sonra, beyinler biyokimyasal analiz için toplandı ve donduruldu. Ventral tegmental alandan alınan bir doku analizi, tekerleğin çalışmasının BDNF ekspresyonunu önemli ölçüde artırdığını, gıda kısıtlamasının ise NCAM1 MRNA ekspresyonunu artırdığını, ancak BDNF MRNA ekspresyonunu değiştirmediğini gösterdi.
Bu prosedürü denerken, fareler üzerindeki stresi sınırlamayı, ölçümlerinizi zamanlamada tutarlı olmayı, doğru okumalar elde etmek için sabırlı olmayı ve herhangi bir teknik sorun için tekerlek çalıştırma yazılımını sürekli olarak kontrol etmeyi unutmamak önemlidir. Bu prosedürü takiben, anoreksiya paradigmasındaki virüs fonksiyonu ile ilgili ek soruları yanıtlamak için fare beyinleri üzerinde immünohistokimya ve radyoligand bağlama gibi diğer yöntemler uygulanabilir.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Bu çalışma, aktivite temelli anoreksiya kullanımı ile sinirbilim ve anoreksiya nervoza altındaki davranışı incelemektedir. Sınırlı yiyecek erişimi ve koşu çarkı bulunan fareler, azalmış yiyecek tüketimi ve artan aktivite sergileyerek, anoreksiya mekanizmaları hakkında bilgiler sunmaktadır.
The activity-based anorexia (ABA) model in mice provides a translational system to investigate neurobehavioral mechanisms underlying anorexia nervosa, a disorder with high unmet medical need. By enabling controlled study of feeding behavior and hyperactivity phenotypes, the model supports target validation and mechanistic de-risking in early discovery. This facilitates hypothesis-driven screening for novel therapeutic candidates affecting appetite regulation and reward pathways.
The ABA model fits within the discovery continuum from target hypothesis testing to lead identification, particularly for CNS-active compounds affecting homeostatic and reward circuits.