Clostridium Perfringens virülans çalışmaya imzalat belirli patojen ücretsiz tavuk ve birleştirilmiş bağırsak döngü modelinde

Burada cerrahi olarak tavuk küçük bağırsaklarında 'bağırsak ve birleştirilmiş döngüler' oluşturmak için bir iletişim kuralı mevcut. Bu yordam, birden çok Clostridium perfringens suşları virülans in situ tek bir ana bilgisayar karşılaştırılması için verir. Bu yöntem belirgin tavuk genellikle benzer in vivo deneyler için gerekli sayısını azaltır.

Bu yöntem Tavuk Nekrotik Enterit araştırma alanında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir. Bu hastalığa neden olan belirli Clostridium perfringens suşlarının virülansını karşılaştırmak gibi. Bu tekniğin en büyük avantajı, genellikle benzer ambivot deneyleri için gerekli olan tavuk sayısını önemli ölçüde azaltmasIdır.

Bu yöntem Clostridium perfringens suşlarının virülans potansiyeline dair içgörü sağlarken, Clostridium difficile veya Salmonella enterica gibi diğer bağırsak patojenlerine de uygulanabilir. Genel olarak, cerrahi prosedürlerin özel eğitime ihtiyacı olduğu ve sadece denemeden önce bir teknik olan dikiş gibi beceriler edinmiş kişiler tarafından gerçekleştirileceği için bu yönteme yeni başlayan bireyler mücadele edecektir. 10 haftalık özel patojensiz leghorn tavuk anestezi sonra, hayati ölçümler için monitörler kurmak ve hafif çekiş ile karın tüyleri elle çıkarmadan başlar.

Daha sonra, yumuşak bir kıl fırçası ile Klorheksidin glukonat kullanarak cerrahi alanı temizleyin. Yavaşça ders ters olmadan beş dakika boyunca merkezinden çevreye deri ovmak. Daha sonra, steril gazlı bezler kullanarak Klorheksidin glukonat çözeltisi ve isopropil alkol ile cerrahi sitede üç alternatif pasajlar gerçekleştirin.

Yine, merkezinden çevreye gidin, sonra, tavuk perde. Cerrahi sitenin üzerinde perde açarak başlayın, sonra bir numara üç neşter ile L şeklinde düşük orta deri kesi yapmak, sternum bir santimetre sarılmak başlayan, ve kloicha bir santimetre kranial biten. Daha sonra, ilk kesi sarılma sonundabaşlayan ikinci bir kesi yaparak ilk dik L şeklinde kesi devam ve pelvis hattı takip ederek karın sol tarafına beş santimetre devam edin.

Bu açıklık bağırsakların kolay çıkarılmasını sağlayacaktır. Daha sonra, karın boşluğuna erişmek için aynı L şeklindeki deseni kullanarak periton ve karın kaslarını açın. Hava keseleri şimdi maruz kalacak ve tuzlu gazlı bez kullanılarak nemli tutulmalıdır.

Daha sonra, sol karın duvarı aşağıdaki ve bağırsak ayıklamak için karın hava keseleri etrafında kanca çalışarak karın boşluğuna bir Snook spay kanca takın. Sonra, kuru gazlı bez kullanarak, jejunum ortaya çıkarmak için yavaşça bağırsakdışlaştırma devam edin. Bağırsakları dışarı yayın ve Tuzlu su ile sık sık püskürtme ile nemli tutmak ve Tuzlu gazlı bez ile kaplayarak.

Aşırı gerginlik bağırsak iskemik lezyonlara yol açabilir ve büyük ölçüde işlemin sonucunu tehlikeye mezenterik damarları yırtmak çünkü bağırsak çıkarırken çok nazik olmak önemlidir. Bağırsakları dışa doğru dışa doğru yaptıktan sonra, Jejunum'dan başlayarak bağırsaklarda bir dizi döngü yapın. Her döngü farklı tedavi için kullanılabilir.

Proksimal Jejunum olarak, büyük mezenterik damarların ligature kaçınarak bir Polyglutamine Multifilament sentetik emilebilir malzeme ile basit bir ligatür yerleştirin. Daha sonra, ilk döngüyü tamamlamak için proksimal ligatürden iki santimetre uzakta distal bir ligatür yerleştirin. Tüm proksimal ve distal ligatürler yaklaşık iki santimetre aralıklı olmalıdır.

Ligatürler her çifti bir döngü yapar, hangi bir hermetik segmenttir. Sonra, döngüler arasında bir interloop veya bağırsak bir segment oluşturun. Basit bir ligature yarım santimetre aborely ilk döngü distal ligature yerleştirin.

Bu bağ interloop ortasında ve döngüler arasında olası çapraz kontaminasyon azaltacaktır. Şimdi, interloop ligature başka bir döngü yarım santimetre aborely oluşturma desenine devam edin. Burada, dokuz döngüler ve sekiz interloops bağırsak 26 santimetre kapsayan oluşturulur.

Döngü sayısı gerektiği gibi ayarlanabilir. Daha sonra, döngüler içine Clostridium perfringens enjekte suşu ile devam edin. Döngünün anti-mezenterik tarafına, orta log büyüme aşamasında bir milyon koloni oluşturan bakteri birimlerini içeren 0,2 mililitre BHI çözeltisi enjekte etmek için 45 derecelik açıyla 26 ölçü iğnesi kullanın.

Bu durumda, dokuz döngü ile, beş farklı suşları negatif kontroller olarak tek başına araç enjekte intervening döngüler ile alternatif döngüler enjekte edilir. Patojenler enjekte ettikten sonra, yavaşça hava keseleri altında karın boşluğunun dorsal alana bağırsak sistemi değiştirin. Sonra karın boşluğunu kapatın.

Bir Polyglutamin Multifilament sentetik emilebilir malzeme kullanarak basit bir sürekli dikiş deseni ile pelvis boyunca periton ve karın kasları dikiş. Basit sürekli dikişler kullanarak göğüs kafesinden kloze periton ve karın kaslarını dikerek devam edin. Daha sonra, poliglutamin Multifilament sentetik malzeme ve basit bir sürekli desen kullanarak cildi yakın dikiş.

Önce leğen kemiği boyunca dikiş, sonra göğüs kafesine dikiş. Kesileri kapattıktan sonra, enfeksiyon sırasında hayvan ağrılarını en aza indirmek için analjeziklerin uygun kullanımı ile genel anestezi altında tavuk tutun. Yeterli anestezi düzeyini sağlamak için anestezi takibine devam edin.

Bu deneyde yedi saat gibi enfeksiyon süresi istenilen miktarda sonra, kuş ötenazi ve bağırsak dokuları toplamak. Üç numaralı neşter kullanarak, yarım ila bir santimetrelik döngü bölümünü kesip atın. Daha sonra, gecefiksasyonu ve daha ileri histopatolojik analiz için%10 Formalin bölümü aktarın.

Daha sonra, aynı döngü üzerinde aynı neşter bıçak kullanın döngü geri kalanı kesip ve bakteri izolasyonu için mikrofüzyon tüp bu doku transferi. Her seferinde yeni bir neşter bıçağı kullanarak her döngü için bu yordamı tekrarlayın. Enjeksiyondan yedi saat sonra, kontrol steril bir ortam enjekte edilen bir bağırsak halkası nekroz olmadan sağlam bir mukozal fırça sınırına sahiptir.

Segmentlerin bağırsak tabakalarında hafif tıkanıklık nadir değildir. Patojen ile enjeksiyondan yedi saat sonra, Clostridium perfringens, villi ipuçları ipuçları çevreleyen nekrotik giriş siteleri ile aşınmış. Ve sonra villi çevreleyen nekrotik malzeme, büyük çubuk şeklinde bakteri kümeleri vardır.

Bazen nekroz kötü prosedür yürütme nedeniyle ve bakteriler tarafından üretilen lezyonlar olarak yanlış yorumlanabilir. Bir telltale işaretleri histolojik bölümünde bakteri yokluğudur. Ayrıca, kas tabakasında kan damarları ciddi vasküler tıkanıklık göstergesi birçok dejeneratif eritrosit birikimi ile genişlemiş.

Bu büyük olasılıkla bağırsaküzerinde aşırı fiziksel zorlanma yapmak için ligated olan ligated mezenterik kan damarları neden oldu. İskemik döngüler cerrahi işlemler sırasında mikroskobik olarak kolayca tespit edilebilir. Ligatür den birkaç dakika sonra şiddetli damar tıkanıklığı sonrasında, serosa normal pembe kırmızımsı renklendirme yerine koyu mavi olacak.

Bu videoyu izledikten sonra, bağırsaklara ligatürler yerleştirerek bir tavuk modelinde birden fazla bağırsak döngüleri oluşturmak için nasıl iyi bir anlayışa sahip olmalıdır. Enfeksiyon süresi hariç cerrahi işlemlerde ustalaştıktan sonra, doğru şekilde yapılırsa üç saatten daha kısa sürede yapılabilir. Bu işlemi denerken, ağrıyı kontrol etmek ve cerrahi parça ve enfeksiyon süresini takiben dahil olmak üzere tüm işlemler sırasında hayati belirtileri izlemek için derin anestezi altında tavuk tutmak için hatırlamak önemlidir.

Bu prosedürü veya bakteri izolasyonu gibi yöntemleri ni takip etmek ve pcr ile gen tespiti gibi düz tanımlama, ilk enjekte edilen patojenin iyileşmesi ve tanımlanması gibi dış soruları yanıtlamak için gerçekleştirilebilir. Bu gelişmeden sonra, bu teknik Clostridium perfringens patogenez alanında araştırmacılar için tavuknekrotik Enterit keşfetmek için bir yol açtı. Canlı hayvanlarla çalışmanın son derece değişken olabileceğini unutmayın.

Bu işlemi gerçekleştirirken tavuğun sürekli anestezi takibi gibi önlemler her zaman yapılmalıdır.