Name: Clostridium Perfringens virülans çalışmaya imzalat belirli patojen ücretsiz tavuk ve birleştirilmiş bağırsak döngü modelinde (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-11T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 21 s
Description: Keşfedin Clostridium perfringens virülansını tavuk bağırsak ligasyon döngüsü modelinde karşılaştırma yöntemini. Bu cerrahi teknik hayvan deneylerinde kullanılan tavuk sayısını önemli ölçüde azaltarak etik kaygıları giderir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu eser Veteriner Tıp Fakültesi üzerinden Université de Montréal Tavukçuluk araştırma (M. Boulianne) sandalyede tarafından desteklenmiştir. DRS. Boulianne ve üst modelini geliştirmiştir. DRS. Boulianne ve üst ameliyatlar yapılır. Doktor Burns'ü anestezi protokolünü geliştirmede yardımcı oldu. Dr. üst düzenlenmiş video ve el yazması yazdı. DRS Burns, el yazması Desrochers ve Boulianne düzenlenmiş.

Canlı hayvan kullanımı ile tüm yordamları Etik Komitesi, Veteriner Tıp Fakültesi, Université de Montréal tarafından yetkili (CÉUA, 'Comite d' éthique de l'utilisation des Animaux').
1. ameliyat öncesi hakkında önemli noktalar
<ol><li>10 haftalık özel patojen ücretsiz (SPF) Livorno tavuk ameliyatı için seçin. Not: Kendi ağırlığı 1.0 ve 1.2 kg arasında olması gerekir.</li>
	<li>Besleme bağırsak boşaltmak için yordamlar önce 12 h geri alıyorum.</li>
	<li>Ameliyat öncesi anestezi uzmanı tarafından doğrulanmış bir protokol sonrası genel anestezi altında tavuk yerleştirin. Her tavuk midazolam kas içi (IM) enjeksiyonu ile ameliyat öncesi 15 dk premedicate 1 mg/kg ve butorphanol 4 mg/kg. Tekrar ediyorum, her 4 h butorphanol enjeksiyon 4 mg/kg ım ya da ne zaman nefes desen değişiklikleri ve frekans anestezi sırasında artırır. Genel anestezi için tüm işlemler sırasında isoflurane 1,5 ve %2,5 bir boğaza tüp ile arasında bir konsantrasyon, yönetmek. Not: Onlar önemli ölçüde anestezi derinliği geliştirmek, anestezi sırasında tüm yordamları gerekli miktarını azaltmak, aynı zamanda gibi araştırmacılar ağrı düzeyleri kontrol için olanaklı kılmak sedasyon ve analjezi için premedication kullanılması tavsiye edilir.</li>
	<li>Anestezi vücut ısısı, kalp hızı ve elektrokardiyogram (EKG), solunum hızı ve ritim, oksijen doygunluğu, süresi dolan karbondioksit (CO2) ve nörolojik refleksleri kaydederek izlemek. Not: Bu parametreler boyunca tüm yordamları izlemek için bir kişi atanmış olması gerekir.</li>
	<li>Cerrahi işlemler boyunca kısırlık ilkelere uygun. Steril Önlük, eldiven, maske ile elbise cerrah ve asistan cerrah ve kurumsal preoperatif protokolleri göre koruyucu gözlükler emin olun. Cerrah KLORHEKSİDİN GLUKONAT emdirilmiş steril fırça tırnakları ve her parmak yüzey üzerinde durularak dirsek kadar elleriyle scrubs emin olun.</li>
	<li>Cerrahi aletler sterilizasyon ile sterilize.</li>
</ol>2. cerrahi sitesi hazırlama
<ol><li>İlk olarak, el ile tüyleri nazik bir çekiş ile karın kaldırın.</li>
	<li>Cerrahi sitesi bir KLORHEKSİDİN GLUKONAT deterjan emdirilmiş steril fırça ile fırçalayın. Nazikçe dış Merkezi'nden cilde geri merkezine gelmeden 5 dk toplam kişi zaman için fırçalayın.</li>
	<li>3 alternatif pasajlar KLORHEKSİDİN GLUKONAT çözüm ve steril gauzes kullanarak temizlik iÖin izopropil alkol ile cerrahi sitede gerçekleştirin. Not: Geçiş cerrahi siteye sigara dezenfekte alanlardan kirlenmesini önlemek için sınırları için cerrahi sitesi ortasından başlatmanız gerekir.</li>
	<li>Steril Cerrahi örtüsü tavuk yerleştirin.</li>
</ol>3. çıkarma, küçük bağırsak karın boşluğu
<ol><li>Cerrahi örtüsü sadece cilt cerrahi sitesinin açığa makasla deşmek.</li>
	<li>Deri bir neşter bıçakla #3 bir '' L'' şekil yüksek-ensizyon uygulayarak deşmek.<ol>
<li>Belgili tanımlık ilk kesme 1 cm için sternum kaudal başlatmak ve 1 cm için lağım kafatası biter.</li>
		<li>Belgili tanımlık ikinci kesme ilk kesi dik gerçekleştirin. Kaudal ilk kesi sonundan itibaren başlarlar ve karın sol tarafına 5 cm pelvis hattı takip ederek. Not: Bu açılış bağırsakların daha kolay bir çıkarımı sağlayacak bir flep oluşturur.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Cerrahi makas ile karın zarını ve aynı '' L'' şekil desenli karın boşluğu açmak için karın kasları kesmiş. Not: Bu hava keseleri geçirecek. Bağırsak bu yapıların altında yer alır. Hava kesesi kuruma ve prosedür boyunca mümkün rüptürü önlemek için steril serum fizyolojik %0.85 ile doymuş gauzes ile nemlendirilmelidir gerekir.</li>
	<li>INSERT bir Snook spay karın boşluğunda sol karın duvarı takip ederek kanca ve karın hava keseleri bir yol iş.</li>
	<li>Yavaşça bağırsak exteriorize ve bunlar cerrahi sahada yayılmış. Not: sık steril serum fizyolojik %0,9 prosedürü boyunca püskürtülerek nemlendirilmelidir bağırsak tutun. Ayrıca, steril serum fizyolojik ile nemlendirilmelidir gauzes bağırsaklarında kuruma önlemek için yerleştirilebilir.</li>
	<li>Bir kuru steril gazlı bez kullanarak bağırsak al ve yavaşça küçük bağırsaklarını tarafından el ile çekiş değişir ortaya çıkarmak için çekin. Not: Mezenterik damarları kırılgan ve aşırı gerilim onları bağırsak iskemik lezyonları için yol ve büyük ölçüde işlem sonucunu uzlaşma rüptürü.</li>
</ol>4. bağırsak döngüler imalatı
<ol><li>Döngü No 1 oluşturulması.<ol>
<li>Yer polyglactin multifilament sentetik absorbe malzeme ile proksimal Jejunumdaki büyük mezenterik damarların bağ kaçınarak basit bir bağ.</li>
		<li>Distal bağ 2 cm uzakta proksimal bağ yerleştirin. Not: multifilament suture maddi ile yapılan basit bitişik harfler hermetik segmentleri oluşturmak için bağırsak yerleştirilir. Bir şema (Şekil 1) tüm bitişik harfler konumu açıklanır. Döngüler 2 cm tarafından ayrılmış bir proksimal ve distal bağ oluşur.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Interloop No 1 oluşturulması.<ol>
<li>Basit bağ 0.5 cm aborally döngü no.1 distal bağ için bir yer. Not: birbirini izleyen döngüler arasında interloops 1 cm, yani döngüler arasında fiziksel bir ayrım yapma kesimleri vardır. Büyük olasılıkla çapraz bulaşma bir döngü üzerinden başka bir olası tehlikesini azaltmak için basit bir bağ Interloop (2 bitişik döngüler distal ve proksimal bağ 0.5 cm) ortasında yer alıyor. Bu bir döngü bitişik bir döngü bağ ulaşmak için olası bir sızdırılmış kirletici riskini azaltır. Bu kesimler zorunlu değildir ancak çapraz bulaşma riski azalacak.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Sonraki döngüler ve interloops oluşturulması.<ol>
<li>4.1 ve 4.2 istenen döngü sayısını elde etmek için adımları yineleyin. Not: Bu deneyde, 9 döngüler ve 8 interloops oluşturulmuştur. Toplam uzunluğu için 26 cm olarak gerçekleşti. Döngü sayısını çalışma bağlı olarak ayarlanabilir.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. enjeksiyon Clostridium perfringens suşları içine döngüler
<ol><li>Steril şırınga ve iğne 26 G döngü no.1 patojen enjekte et. Yavaşça iğneyi bağırsak antimesenteric tarafında bir 45 ° açıyla yerleştirin. Not: Bu deneyde, her döngü içinde beyin kalp infüzyon (BHI) 1 x 106 CFU (koloni oluşturan birimler) C. perfringens orta günlük büyüme aşamasında içeren 0.2 mL enjekte ettiler. 5 farklı suşları 5 farklı döngüler enjekte edildi ve döngüler kalan 4 patojenler ve steril BHI döngüler alternatif hiçbir bakteri (steril BHI), içeren bir negatif kontrol ile enjekte edildi.</li>
	<li>Tüm döngüler enjekte etmek için 5.1 arasındaki adımları yineleyin.</li>
	<li>Yavaşça bağırsak karın boşluğuna hava keseleri altında dorsal alanında değiştirin.</li>
</ol>6. karın boşluğu kapatma
<ol><li>Karın zarını ve karın kasları dikiş.<ol>
<li>Karın zarını ve karın kasları (3.3 adımda yapılan) leğen kemiği boyunca polyglactin multifilament sentetik absorbe malzeme kullanarak basit sürekli dikiş desen dikiş.</li>
		<li>Karın zarını ve göğüs kemiği gelen karın kasları lağım için dikiş (adım 3.3 oldu. polyglactin multifilament sentetik absorbe malzeme kullanarak basit sürekli dikiş desen ile.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Deri dikiş.<ol>
<li>Polyglactin multifilament sentetik malzeme ve basit sürekli dikiş deseni kullanarak, 3.2 adımda yapılan leğen kemiği boyunca cilt kesi kapatın.</li>
		<li>Aynı multifilament bağ malzeme ve basit sürekli dikiş deseni kullanarak, göğüs kemiğinin cilde 3.2 adımda yapılan lağım kesi kapatın.</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. sonuç
<ol><li>Cerrahi işlemler sonra uygun hayvan ağrı sırasında enfeksiyon süresini en aza indirmek için ağrı kesici kullanımı ile genel anestezi altında tavuk tutmak. Anestezik bir yeterli anestezi düzeyi sağlamak için izleme devam edin.</li>
	<li>İstenen enfeksiyon süre sonra tavuk servikal çıkığı genel anestezi altında tarafından insanca ötenazi. Not: Bu yordamları için 7 h mikroskobik lezyonlar C. perfringens patojenik suşları ile ikna etmek için gerekli zamanı oldu.</li>
	<li>Bir neşter bıçak #3, 0,5 cm 1 cm uzun döngü bölüm için kesmek ve % 10 formalin fiksasyon gece ve daha fazla histopatolojik analizi için yere koyun.</li>
	<li>Aynı neşter bıçak ile kalan döngü bölüm kesmek ve onların genetik karakterizasyon için her döngü daha da bacteriologic analizde C. perfringens suşlarının yalıtım için steril microcentrifuge tüp yerleştirebilirsiniz.</li>
	<li>Adım 7.2 ve 7.3 neşter bıçak her döngü arasında değiştirerek tüm döngüler için yineleyin.</li>
</ol>

<ol><li>Vitale, A., Chiarotti, F., Alleva, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+animal+models+in+disease+research%5BTitle%5D)+AND+%22Rare+diseases+and+orphan+drugs%22%5BJournal%5D)">The use of animal models in disease research.</a> Rare diseases and orphan drugs. 2 (1), 1-4 (2015).</li>
<li>Uzal, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+to+study+the+pathogenesis+of+human+and+animal+Clostridium+perfringens+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Animal models to study the pathogenesis of human and animal Clostridium perfringens infections.</a> Veterinary Microbiology. , (2015).</li>
<li>Bernier, G., Phaneuf, J. B., Filion, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necrotic+enteritis+in+broiler+chickens.+III.+Study+of+the+factors+favoring+the+multiplication+of+Clostridium+perfringens+and+the+experimental+transmission+of+the+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Comparative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Necrotic enteritis in broiler chickens. III. Study of the factors favoring the multiplication of Clostridium perfringens and the experimental transmission of the disease.</a> Canadian Journal of Comparative Medicine. 41 (1), 112-116 (1977).</li>
<li>Al-Sheikhly, F., Truscott, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathology+of+necrotic+enteritis+of+chickens+following+infusion+of+broth+cultures+of+Clostridium+perfringens+into+the+duodenum%5BTitle%5D)+AND+%22Avian+Diseases%22%5BJournal%5D)">The pathology of necrotic enteritis of chickens following infusion of broth cultures of Clostridium perfringens into the duodenum.</a> Avian Diseases. 21 (2), 230-240 (1977).</li>
<li>Wicker, D. L., Iscrigg, W. N., Trammell, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+control+and+prevention+of+necrotic+enteritis+in+broilers+with+zinc+bacitracin%5BTitle%5D)+AND+%22Poultry+Science%22%5BJournal%5D)">The control and prevention of necrotic enteritis in broilers with zinc bacitracin.</a> Poultry Science. 56 (4), 1229-1231 (1977).</li>
<li>Keyburn, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NetB%2C+a+new+toxin+that+is+associated+with+avian+necrotic+enteritis+caused+by+Clostridium+perfringens%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">NetB, a new toxin that is associated with avian necrotic enteritis caused by Clostridium perfringens.</a> PLoS Pathog. 4 (2), e26(2008).</li>
<li>Timbermont, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origin+of+Clostridium+perfringens+isolates+determines+the+ability+to+induce+necrotic+enteritis+in+broilers%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Immunol+Microbiol+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Origin of Clostridium perfringens isolates determines the ability to induce necrotic enteritis in broilers.</a> Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 32 (6), 503-512 (2009).</li>
<li>Paradis, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+avilamycin+for+the+prevention+of+necrotic+enteritis+caused+by+a+pathogenic+strain+of+Clostridium+perfringens+in+broiler+chickens%5BTitle%5D)+AND+%22Avian+Pathol%22%5BJournal%5D)">Efficacy of avilamycin for the prevention of necrotic enteritis caused by a pathogenic strain of Clostridium perfringens in broiler chickens.</a> Avian Pathol. 45 (3), 365-369 (2016).</li>
<li>Valgaeren, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lesion+development+in+a+new+intestinal+loop+model+indicates+the+involvement+of+a+shared+Clostridium+perfringens+virulence+factor+in+haemorrhagic+enteritis+in+calves%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Pathology%22%5BJournal%5D)">Lesion development in a new intestinal loop model indicates the involvement of a shared Clostridium perfringens virulence factor in haemorrhagic enteritis in calves.</a> Journal of Comparative Pathology. 149 (1), 103-112 (2013).</li>
<li>Goossens, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+C-terminal+domain+of+Clostridium+perfringens+alpha+toxin+as+a+vaccine+candidate+against+bovine+necrohemorrhagic+enteritis%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Res%22%5BJournal%5D)">The C-terminal domain of Clostridium perfringens alpha toxin as a vaccine candidate against bovine necrohemorrhagic enteritis.</a> Vet Res. 47 (1), 52(2016).</li>
<li>Goossens, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxin-neutralizing+antibodies+protect+against+Clostridium+perfringens-induced+necrosis+in+an+intestinal+loop+model+for+bovine+necrohemorrhagic+enteritis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Toxin-neutralizing antibodies protect against Clostridium perfringens-induced necrosis in an intestinal loop model for bovine necrohemorrhagic enteritis.</a> BMC Vet Res. 12 (1), 101(2016).</li>
<li>Parent, E., Archambault, M., Charlebois, A., Bernier-Lachance, J., Boulianne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+chicken+intestinal+ligated+loop+model+to+study+the+virulence+of+Clostridium+perfringens+isolates+recovered+from+antibiotic-free+chicken+flocks%5BTitle%5D)+AND+%22Avian+Pathol%22%5BJournal%5D)">A chicken intestinal ligated loop model to study the virulence of Clostridium perfringens isolates recovered from antibiotic-free chicken flocks.</a> Avian Pathol. 46 (2), 138-149 (2017).</li>
<li>Janvilisri, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+differential+proteomes+of+Clostridium+difficile+in+the+pig+ileal-ligated+loop+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Temporal differential proteomes of Clostridium difficile in the pig ileal-ligated loop model.</a> PLoS One. 7 (9), e45608(2012).</li>
<li>Aabo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+in+vivo+model+for+study+of+intestinal+invasion+by+Salmonella+enterica+in+chickens%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Development of an in vivo model for study of intestinal invasion by Salmonella enterica in chickens.</a> Infection and Immunity. 68 (12), 7122-7125 (2000).</li>
<li>Meurens, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+immune+response+following+Salmonella+enterica+subspecies+enterica+serovar+Typhimurium+infection+in+porcine+jejunal+gut+loops%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Early immune response following Salmonella enterica subspecies enterica serovar Typhimurium infection in porcine jejunal gut loops.</a> Vet Res. 40 (1), 5(2009).</li>
<li>Gerdts, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+intestinal+%27loops%27+provide+an+in+vivo+model+to+analyse+multiple+mucosal+immune+responses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Multiple intestinal 'loops' provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses.</a> J Immunol Methods. 256 (1-2), 19-33 (2001).</li>
<li>Wade, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adherent+abilities+of+Clostridium+perfringens+strains+are+critical+for+the+pathogenesis+of+avian+necrotic+enteritis%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The adherent abilities of Clostridium perfringens strains are critical for the pathogenesis of avian necrotic enteritis.</a> Vet Microbiol. 197, 53-61 (2016).</li>
<li>Cooper, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Virulence+for+chickens+of+Clostridium+perfringens+isolated+from+poultry+and+other+sources%5BTitle%5D)+AND+%22Anaerobe%22%5BJournal%5D)">Virulence for chickens of Clostridium perfringens isolated from poultry and other sources.</a> Anaerobe. 16 (3), 289-292 (2010).</li>
<li>Cooper, K. K., Songer, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Virulence+of+Clostridium+perfringens+in+an+experimental+model+of+poultry+necrotic+enteritis%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Virulence of Clostridium perfringens in an experimental model of poultry necrotic enteritis.</a> Veterinary Microbiology. 142 (3-4), 323-328 (2010).</li>
<li>Chalmers, G., Bruce, H. L., Toole, D. L., Barnum, D. A., Boerlin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necrotic+enteritis+potential+in+a+model+system+using+Clostridium+perfringens+isolated+from+field+outbreaks%5BTitle%5D)+AND+%22Avian+Diseases%22%5BJournal%5D)">Necrotic enteritis potential in a model system using Clostridium perfringens isolated from field outbreaks.</a> Avian Diseases. 51 (4), 834-839 (2007).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Bağırsak döngüler modelleri ev sahibi-patojen etkileşim ve Clostridium perfringens, Clostridium difficile ve gibi çeşitli bağırsak patojenlerin neden olduğu hastalıkların patogenezinde çalışmaya çok sayıda tür tarif var Salmonella enterica7,9,13,14,15. Mukozal immün yanıt16, antikorlar intestinal patojenleri<s...

İnsan ve hayvanların etkileyen bulaşıcı hastalıklar çalışmaya hayvan modelleri kullanımını önlemek veya hastalıkları1tedavi stratejileri ayrıntılı olarak belirli bir koşulu de patogenezinde düzenleyen virülans faktörleri değerlendirirken merkezi bir araçtır. Çeşitli hastalıklar çalışmaya hayvan modelleri kullanmanın birçok yararları rağmen bu uygulama ile ilgili Etik kaygılar kaynaklanan. Araştırmacılar önemli ve geçerli sonuçlar elde etmek süre hayvan kullanımı en aza indirmek gerekir. 3 Rs ilkeleri (değiştir, azaltmak ve İyileştir) kavramı refah sorunları bu tür çalışmalarda ele alındı sağlamak için özenli. Tavuk nekrotik enterit çalışmalarda vivo içinde tavuk modelleri etyoloji, önleme ve tedavi bu koşul2,3,4,5araştırmak için kullanılır. C. perfringens NetB toksini6gibi belirli virülans faktörleri taşıyan patojen suşları nekrotik enterit tavuk7' neden için uygulanmaktadır. Yedek ilke, bu nedenle, bu virülans faktörleri-ebilmek değil var olmak içinde hayvan diğer türler gibi kritik olarak böyle durumda elde etmek zordur. Çoğu modeller tavuklarda nekrotik enterit için risk faktörleri, coccidiosis gibi bir arada kullanmak ve nekrotik enterit sonda ile besleme suyu kültür C. perfringens2. çok sayıda içeren tarafından takip ikna etmek için diyet değişmiş Bu modeller çok sayıda tavuk hastalığında teşvik ve mortalite böylece hayvan araştırma azaltma ve arıtma ilkeleri hakkında kaygıları gündeme getirme böyle denemeler8, önemli olabilir.
Bağırsak ve birleştirilmiş döngüler modelleri çalışma prensibi azaltma ve arıtma ile ilgili bağırsak patojenler tarafından indüklenen hastalıklar için arzu edilen bir alternatiftir. Bu modellerin nerede patojenler yalnız9 enjekte edilebilir bağımsız ve hermetik bölmeleri oluşturmak için bağırsak boyunca veya başka moleküllerin, aşı adaylar ile bitişik harfler yerleştirerek 'döngüler' olarak adlandırılan bağırsak kesimlerinde oluşturulur 10 , 11. faiz patojenler bağırsak hücreleri ile yakın temas içinde yerleştirilir ve enfeksiyon zaman birkaç saat sonra daha fazla çözümleme için bağırsak örnekleri elde edilebilir. Bu aynı hayvan birden fazla tedavi ve kontrol grubu kullanımına izin verir. İstatistiksel analiz grupları arasında ayrımcılık gücünü artırdığı ve gerekli tavuk oral gavaj denemeler için karşılaştırıldığında sayısını azaltır tekrarlanan ölçüler modelleri ile gerçekleştirilebilir. Ayrıca, cerrahi işlemler ve sonraki enfeksiyon kez sürekli genel anestezi ve analjezi, dolayısıyla hayvan ağrı en aza indirme altında gerçekleştirilir. Kapalı devre d ana bilgisayar numaraları azaltmak ve hayvan araştırma daha insancıl bir sistem oluşturmak için ideal bir şablonu vardır.
Bağırsak ve birleştirilmiş döngüler modelleri de çeşitli türlerden buzağılar, tavşan ve fareler2,9, açıklanan ama kötü tavuk7' de açıklanan. Cerrahi bu model en iyi bir kullanımı için uygun tekniği ve yürütme bağırsak bütünlüğü zarar önlemek için ve birleştirilmiş bağırsak döngü oluşturulması için gerekli olan. Bu el yazması bir tavuk modeli birden çok bağırsak döngü oluşturulması adım adım yöntemi açıklamak için hedeftir. Doğru yordamları projenin başarısı için gerekli olduğu gibi bu teknik cerrahın beceri ve deneyim, sınırlıdır.

<table><tbody><tr><td>EZ-Scrub 747</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td></td><td>%4 klorheksidin glukonat deterjan emdirilmiş steril fırça. Katalog numarası mevcut değil. İnternet adresi: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/infection-prevention/surgical-hand-scrubs/ez-scrub-preoperative-surgical-scrub-brushes&nbsp;</td></tr><tr><td>İzopropil alkol %70 USP 4 L</td><td>Ticari izopropil alkol</td><td>P016IP70</td><td>Web adresi: http://www.comalc.com/products/</td></tr> <tr><td>Kloreksidin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>282227-1G</td><td>Klorheksidin glukonat çözeltisi, %4'e kadar seyreltilmelidir. Web adresi: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/282227?lang=fr&region=CA&gclid=EAIaIQ obChMI8vHr4_OY1wIV3rrACh2Z WQKuEAAYAiAAEgLKx_D_BwE</td></tr><tr><td>Cerrahi Örtü Küçük (27 inç x 24 inç) 3 x 6 inç Fenestrasyon</td><td>Veteriner Özel Ürünleri</td><td>32724</td><td>Web adresi: http://www.vetspecialtyproducts.com/index.cfm?fuseaction=ecommercecatalog. detail&productgroup_id=15</td></tr><tr><td>Neşter bıçakları #3</td><td>Swann-Morton</td><td>301</td><td>Web adresi: https://www.swann-morton.com/product/16.php</td></tr><tr><td>Steril salin NaCl %0.9</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>S8776-100ML</td><td>Web adresi: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s8776?lang=fr&region=CA</td></tr><tr><td>Vicryl 3-0</td><td>Ethicon</td><td>D9003</td><td>Poliglaktin multifilament emilebilir sütür materyali. Web adresi: http://www.ethicon.com/healthcare-professionals/products/wound-closure/absorbable-sutures/coated-vicryl-polyglactin-910-suture</td></tr><tr><td>Şırınga 1 ml 26G iğne ile</td><td>Becton Dickinson ve Şirket</td><td>329652</td><td>Web adresi: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/diabetes-care/insulin-syringes/bd-1-ml-conventional-insulin-syringes</td></tr><tr><td>Beyin Kalp İnfüzyonu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1104930500</td><td>Web adresi: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/mm/110493?lang=fr&region=CA&cm_sp=Insite-_-prodRecCold_xorders-_-prodRecCold2-1</td></tr><tr><td>Eppendorf tüpü</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T9661-500EA</td><td>Mikrosantrifüj tüpü. Web adresi: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/t9661?lang=fr&region=CA&gclid=EAIaIQ obChMI-YizzfiY1wIVRkCGCh 30SQjuEAAYAiAAEgLK5fD_BwE</td></tr><tr><td>Formalin çözeltisi, tamponlu nötr,% 10</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>HT501128-4L</td><td>Oranlı doku: yeterli fiksasyon için 1: 10 formalin. Web adresi: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/ht501128?lang=fr&region=CA</td></tr><tr><td>Clostridium perfringens suşları</td><td>Universit&eacute; de Montr&eacute; al, Chaire en recherche avicole</td><td>N/A</td><td>Her laboratuvara özel, talep üzerine muhabir yazara sunulur</td></tr></tbody></table>

clostridium perfringens virülans çalışmaya imzalat belirli patojen ücretsiz tavuk ve birleştirilmiş bağırsak döngü modelinde

A Ligated Intestinal Loop Model in Anesthetized Specific Pathogen Free Chickens to Study Clostridium Perfringens Virulence

Nekrotik enterit çeşitli vivo içinde enfeksiyon modelleri kullanarak tavuklarda incelenmiştir. En-in bunlar sonda ile besleme veya Clostridium perfringenskullanarak yem üzerinden yönetim ile coccidiosis ve diyet, gibi yatkinlastirici faktörlerin birleşimi kullanın. Bu modellerinde, birden çok C. perfringens suşları virülans etütler karşılaştırılması çok sayıda önemli sonuçlar elde etmek için ana bilgisayarlar gerektirir. Çalışma süresince ölüm dolayısıyla araştırma hayvan refahı ile ilgili etik kaygıları gündeme getirme deneysel modeline bağlı olarak yüksek olabilir. Patogenez, henüz istatistiksel olarak önemli ve geçerli sonuçlar sağlayan eğitim için daha az sayıda hayvan gerektiren yeni enfeksiyon modelleri araştırma hayvan kullanımda azaltmada önemli bir gelişmedir. Bağırsak ve birleştirilmiş döngü modelleri fare, tavşan ve buzağı gibi çeşitli tür clostridial enfeksiyonları eğitim için kullanılmaktadır. Ve birleştirilmiş döngü segmentleri oluşturmak için cerrahi işlemler C. perfringens suşları doğrudan döngüler bakteri ve bağırsak mukoza arasında yakın bir temas kurmak için içine enjekte edilir. İnce bağırsak ve luminal İçindekiler örnekleri yordamları fesih bir kaç saat sonra alınır. Birden çok bakteri suşları dolayısıyla gerekli deneyler bireylerde sayısını azaltarak her hayvan aşılamak. Ayrıca, yordamlar hayvan ağrı azaltmak için genel anestezi altında gerçekleştirilir. Tavuklarda, bu model çok daha az sayıda hayvan ihtiyaç vardır, hiçbir yatkinlastirici faktörler hastalığın ikna etmek için gerekli olan ve ağrı ağrı kesici tarafından kontrol edilir çünkü C. perfringens zorlanma patojenitesi karşılaştırmak için sözlü yönetim daha uygun olur . Bağırsak ve birleştirilmiş döngü modeli tavuklarda kötü anlatılan ve standardizasyon optimal kullanımı için gereklidir. Bu el yazması çok sayıda bağırsak ve birleştirilmiş döngüler tavuklarda oluşturmak için gerekli tüm adımları sağlar ve geçerli sonuçlar elde etmek için kritik noktaları hakkında bilgi getiriyor.

9 bağırsak döngüler ve 8 interloops bir şematik resim 1' de gösterilen. Bu modelde, toplam 9 döngüler ve 8 interloops ile basit bağ oluşturulur. Proksimal bağ ölçülür 2 cm aralıklı proksimal ve distal bitişik harfler, bir döngü oluşur. İki bitişik döngü 1 cm bir Interloop tarafından ayrılır. Kaçak bir bağ üzerinden tarafından döngüler arasında çapraz bulaşma olası riski azaltmak için interloop bir bağ orta yolda distal bağ ve proksimal bağ 2 bitişik döngüler ...

Burada cerrahi olarak tavuk küçük bağırsaklarında 'bağırsak ve birleştirilmiş döngüler' oluşturmak için bir iletişim kuralı mevcut. Bu yordam, birden çok Clostridium perfringens suşları virülans in situ tek bir ana bilgisayar karşılaştırılması için verir. Bu yöntem belirgin tavuk genellikle benzer in vivo deneyler için gerekli sayısını azaltır.

Clostridium Perfringens virülans çalışmaya imzalat belirli patojen ücretsiz tavuk ve birleştirilmiş bağırsak döngü modelinde

Necrotic enteritis was studied in chickens using various in vivo infection models. Most of these use a combination of predisposing factors, such as ...

Bu yöntem Tavuk Nekrotik Enterit araştırma alanında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir. Bu hastalığa neden olan belirli Clostridium perfringens suşlarının virülansını karşılaştırmak gibi. Bu tekniğin en büyük avantajı, genellikle benzer ambivot deneyleri için gerekli olan tavuk sayısını önemli ölçüde azaltmasIdır.Bu yöntem Clostridium perfringens suşlarının virülans potansiyeline dair içgörü sağlarken, Clostridium difficile veya Salmonella enterica gibi diğer bağırsak patojenlerine de uygulanabilir. Genel olarak, cerrahi prosedürlerin özel eğitime ihtiyacı olduğu ve sadece denemeden önce bir teknik olan dikiş gibi beceriler edinmiş kişiler tarafından gerçekleştirileceği için bu yönteme yeni başlayan bireyler mücadele edecektir. 10 haftalık özel patojensiz leghorn tavuk anestezi sonra, hayati ölçümler için monitörler kurmak ve hafif çekiş ile karın tüyleri elle çıkarmadan başlar.Daha sonra, yumuşak bir kıl fırçası ile Klorheksidin glukonat kullanarak cerrahi alanı temizleyin. Yavaşça ders ters olmadan beş dakika boyunca merkezinden çevreye deri ovmak. Daha sonra, steril gazlı bezler kullanarak Klorheksidin glukonat çözeltisi ve isopropil alkol ile cerrahi sitede üç alternatif

a-ligated-intestinal-loop-model-anesthetized-specific-pathogen-free

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Biz koyun ileum içinde 'bağırsak döngüler' catheterizing için yeni bir cerrahi yöntem açıklanmaktadır. Hayvanlar cerrahiden sonra iyileşti ve antibiyotik ve analjezikler temizlendiğini, çoklu tedaviler kateterler yoluyla döngüler doğrudan yatırılır.

Ruminantlarda Bağırsak Döngüler kateterizasyonu

Çekal ligasyon ve ponksiyon insan sepsis çalışma için değerli bir araç olarak fare modeli.

Çekal ligasyon Delinme Prosedürü

Sepsis bir mikrobik enfeksiyon sonucu ortaya çıkan bir sistemik inflamatuvar yanıt sendromu ifade eder ve çekal ligasyon ve delme (CLP) diye adlandırdıkları bir cerrahi teknik ile simüle edilebilir. Burada tedavi ajanları için şifalı otlar taranması amacıyla CLP bağlı hayvan modelinde kullanılacak bir yöntem açıklanmaktadır.

Roman Bitkisel Tedaviler Değerlendirmek için Sepsis Hayvan Modeli kullanımı

Kaynak: Winston, J. A. ve diğerleri. Klâlis olarak Önemli Clostridium difficile Strain R20291 için sefoperazonla tedavi edilmiş fare modeli.  J. Vis. Exp. (2016)Bu video, antibiyotikle önceden tedavi edilmiş farelerin Clostridium difficile sporlarıyla aşılanması prosedürünü göstererek patogenezi ve konak yanıtlarını incelemek için enfeksiyon modeli oluşturulmuştur.

Clostridium difficile enfeksiyonunun fare modeli oluşturulması

Bu video, bir fare modelinde bağırsak geçirgenliğini incelemek için bir ileal döngü modelinin oluşturulmasını göstermektedir. Bu yöntem, epitelyal bariyer fonksiyonunu ve buna bağlı immün yanıtı anlamak için canlı bir model sağlar.

Fare ileal döngü modeli: farede bağırsak geçirgenliğini incelemek için cerrahi bir model

Bu videoda, fare proksimal kolon halkası veya pcLoop segmenti oluşturmak için cerrahi bir prosedürü ve ardından bağırsak epitel geçirgenliğini incelemek için segmente intraluminal floresan belirteçleri enjeksiyonunu açıklıyoruz.

Fare Proksimal Kolon Döngü Modelinin Oluşturulması: İntraluminal Enjeksiyonu Takiben Serumda Floresan İşaretleyicilerin Saptanmasıyla Proksimal Kolon Halkası Oluşturmak ve Bağırsak Geçirgenliğini Ölçmek İçin Cerrahi Bir Prosedür

Citrobacter rodentium enfeksiyonu enterik bakteriyel enfeksiyonlar çalışma yanı sıra farelerde bağışıklık yanıtları ve kolit barındırmak için değerli bir model sunar. Bu protokol bariyer bütünlüğünü, patojen yük ve murin infeksiyöz kolit patojen ve konak katkıların tam karakterizasyonu izin histolojik hasar ölçümü özetliyor.

<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Mouse Model: Bulaşıcı Kolit için çalışılması Patojen ve Host Katılımlar

Deneysel sepsis çekal ligasyon ve delme (CLP) yöntemini kullanarak farelerde neden olabilir. CLP kaynaklı sepsis bağlamında in vivo Otofaji değerlendirmek için mevcut protokoller burada sunulmuştur: (GFP)-LC3 fareler kullanılarak Otofaji ölçülmesi için bir protokol ve elektron mikroskobu ile autophagosome oluşumunu ölçmek için bir protokolü.

Çekal ligasyon ve Farelerde Autophagy incelemek için bir model olarak Sepsis Patamaya kaynaklı

Düzensiz bağırsak epitel bariyer fonksiyonu ve immün yanıtlar, fizyolojik modellerin eksikliği nedeniyle kötü araştırılmaya devam eden enflamatuar bağırsak hastalığının ayırt edici özellikleridir. Burada, mukozal geçirgenliği ve lökosit işe alımını vivo olarak incelemek için iyi vaskülerleştirilmiş ve dışlanmış bir bağırsak segmenti kullanan bir fare bağırsak döngüsü modelini tarif ediyoruz.

Standartlaştırılmış Bağırsak Döngüsü Modeli Kullanılarak Farelerde Bağırsak Geçirgenliği ve Nötrofil Transepithelial Göçün Fonksiyonel Değerlendirmesi

Bu protokol, bir fare sepsis modelinde çekal ligasyon ve ponksiyonun (CLP) operatif ayrıntılarını sunar. CLP, sepsisin hayvan modelini oluşturmak için en yaygın kullanılan tekniklerden biridir. Bu nedenle, güvenilir araştırma sonuçlarının elde edilmesi için standartlaştırılmış bir CLP protokolü gereklidir.

Sepsisin Çekal Ligasyonu ve Delinmeye Bağlı Fare Modelinde Güvenilir Bir Biyobelirtecin Değerlendirilmesi

Bu çalışmada, intestinal manipülasyon ile oluşturulan postoperatif ileusun bir murin modeli tanımlanmıştır. Gastrointestinal geçiş fonksiyonu, patolojik değişiklikler ve immün hücre aktivasyonu ameliyattan 24 saat sonra değerlendirildi.

Ameliyat Sonrası İleus Murin Modeli

Keşfedin Clostridium perfringens virülansını tavuk bağırsak ligasyon döngüsü modelinde karşılaştırma yöntemini. Bu cerrahi teknik hayvan deneylerinde kullanılan tavuk sayısını önemli ölçüde azaltarak etik kaygıları giderir.

Clostridium Perfringens virülans çalışmaya imzalat belirli patojen ücretsiz tavuk ve birleştirilmiş bağırsak döngü modelinde

Daha fazla video keşfet