Name: Doksorubisin Retrobulbar enjeksiyon ve Önleme Birimi kalıcılık tarafından sürekli yayın Aprotinin farelerde Nefrotik sendromda indüksiyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 38 s
Description: Öğrenin farelerde doksorubisin retrobulbar enjeksiyonu ile nefrotik sendrom indüksiyonunu ve aprotinin sürekli salınım pelletleriyle sodyum retansiyonu önleme yöntemini. Bu model böbrek hastalığı mekanizmalarını in vivo çalışmak için değerlidir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışmada bir hibe (DFG, AR 1092/2-1) Alman Araştırma Vakfı tarafından desteklenmiştir.

Tüm yöntemleri için bakım ve kullanım laboratuvar hayvan ve hayvan refahı için Alman hukuk Ulusal Sağlık Rehberi Enstitüleri göre yapılmıştır ve yerel yönetimler (Regierungspräsidium Tübingen) tarafından kabul edildi.
1. indüksiyon Retrobulbar sinüs için doksorubisin enjeksiyonla deneysel Nefrotik sendromda
<ol><li>Takılı bir 30 G kanül 0.5 mL şırınga piston durağı konumunu işaretleyerek hazırlayın.</li>
	<li>Doksorubisin (7,25 µL/g vücut ağırlığı (bw) 14.5 µg/g bw doksorubisin için eşit) erkek ve dişi fareler (13,8 µg/g bw doksorubisin 6.9 µL/g bw eşit) sabah vücut ağırlığına bağlı enjeksiyon hacmi hesaplamak. Not: Verilen doz Nefrotik sendromda indüksiyon için uygundur. Küçük değişiklikler dozda glomerular filtrasyon (12.6 µg/g bw doksorubisin) sadece küçük değişiklikler ile hafif kronik böbrek hastalıktan Akut böbrek yetmezliği (15,4 µg/g bw doksorubisin)7' yeulaşan nefropati, çok önemli bir farklı kurs yol, 15.</li>
	<li>Doksorubisin çözüm (2 µg/µL) 37 ° C sıcak odasında hesaplanan miktarda sıcak. Dikkat: Doksorubisin yuttu ve kansere neden olabilir zararlıdır. Her zaman eldiven doksorubisin ile çalışıyorsanız ve herhangi bir cilt temasından kaçının.</li>
	<li>Şırınga doksorubisin çözüm ile işaretleme noktasına kadar prefill ve Bakiye sıfır olarak ayarlayın. Enjeksiyon birimle şırıngaya doldur ve birimin şırınga ağırlığında tarafından kontrol edin.</li>
	<li>Fareyi kullanarak bir Buharlaştırıcı ve oksijen akışı 2 L/dk 5 vol % isoflurane ile derinden narcotize.<ol>
<li>Enjeksiyon önce gözleri merhem kullanmayın. Işleç yörünge boşluğuna açık bir görünümünü güvenli ve başarılı retrobulbar enjeksiyon gerçekleştirmek için ihtiyacı var.</li>
		<li>Pedal refleks anestezi düzeyini değerlendirmek ve anestezik teslim enjeksiyon başlamadan önce ayarlayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Fareyi sağ yanal recumbency sırtını operatörün vücut ve kafasını operatörün enjeksiyon el için karşı karşıya bakacak şekilde yerleştirin. Not: Yordamı için sağ elini kullanan bir kişi, sol elli kişiler enjeksiyon sol el ile gerçekleştirme pozisyonu yapmak kolaydır ve doğru-e doğru ters enjeksiyon yaptı açıklanmıştır.</li>
	<li>Dikkatle göz çukuru üzerinden fare sol gözü dorsal ve ventral göz deri hafif basınç uygulayarak çıkıntı.</li>
	<li>İç göz açıdan (medial palpebral komissür) sol retrobulbar sinüs delik. Herhangi bir mouse´s göz temasından kaçının.</li>
	<li>Biraz şırınga eğilme ve tek seferde tüm birimi enjekte. Birim herhangi bir direnç ve exopthalmus veya enjeksiyon sitesinden kaçak gibi ekstravazasyonu belirtisi olmadan enjekte edilir emin olun.</li>
	<li>Doksorubisin çok zehirli bir madde olduğundan, su kuyusu-varlık en az günde bir kez bir puanı yapraklık göre Morton ve Griffiths vd. kullanarak iade etme 16 ve ödeme özel ilgi enjeksiyon yeri. Ekstravazasyonu belirtisi exopthalmus seviyorsanız, Engelli göz kapağının kapatılması ya da kangren belirtisi şişme veya dış görünüm lezyonlar occure sonra enjeksiyon gibi ya da takip eden günlerde, fare euthanized.</li>
</ol>2. sürekli yayın granül Aprotinin içeren implantasyonu
<ol><li>Granül gün ve yayın süresi önceden başına istenen dozla sipariş. Aprotinin durumunda, 10 gün içinde yayımlanması günde 1 mg doz seçin. Not: Bu çalışmada, bir doz 10 mg aprotinin granül içerir.<ol>
<li>Granül kuru koşullarda saklamak ve herhangi bir nem maruz kaçının.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Gerekli öğeler saç makas, Cilt hazırlık makas, neşter, cerrahi cımbız, doku cımbız iki çift, bir iğne bağı ve 15 cm monofile dikiş sigara tekrar Emilebilen gibi ameliyat için hazırlayın.<ol>
<li>240 ° C'de 5 min için bir ısı sterilizasyon kullanarak aletleri sterilize Oda sıcaklığına gelinceye aletleri kullanmadan önce için 5 dakika bekleyin.<ol>
<li>Sterilize edilmiş araç ipuçları nonsteril yüzeyler için herhangi bir temastan kaçının.</li>
			<li>Cilt yanık sıcak araçlar tarafından kaçının.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>Fare ile isoflurane 5 vol % 1,5 vol % 2 L/min bir Buharlaştırıcı ve oksijen akışı kullanarak takip narcotize.</li>
	<li>Fare fare termal yaralanmaları önlemek için gazlı bez bir tabaka ile kaplı bir ısınma aygıtta yüzükoyun yerleştirin. Yüzey sıcaklığı yaklaşık 37 ° c.</li>
	<li>Merhem ile gözleri koruyun.</li>
	<li>Geri bir alanda makas veya saç makası kullanarak 0.5 cm2 hakkında orta saç kaldırmak ve tüysüz cilt cilt dezenfeksiyon için uygun bir dezenfektan ile dezenfekte. Olarak daha az saç bu fareyi yara ulaşmak daha zor kalır ve daha sonra konu biter böylece mümkün olduğunca ve vücut sıcaklığı tutmak için kaldırın.</li>
	<li>Bir neşter yaklaşık 1 cm derinlik künt bir hazırlık kullanarak deri altı bağ dokusu içinde Kraniyo-Kaudal yönde bir uzunluğunda, yaklaşık 5 mm. hazırlama sol yanal kese tüysüz kabuğuyla deşmek.<ol>
<li>Pedal refleks anestezi düzeyini değerlendirmek ve anestezik teslim ameliyat başlamadan önce ayarlayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bir 10 günlük yayın Pelet steril doku cımbız kullanarak hazırlanmış sol yanal kese yerleştirin. Belgili tanımlık kese dibinde Pelet düzlemsel bir konumda bırakın.<ol>
<li>Pelet sıvı ve nem kadar herhangi bir temas hazırlanan çantada yerleştirilen kaçının.</li>
	</ol>
</li>
	<li>2-3 dikiş ile cilt kapatın. Sadece dikiş kemiren tarafından açmak fare için anlaması için çok kısa iş parçacığı biter bırakın.</li>
	<li>Tek tek ameliyat sonrası sıkıntı azaltmak ve dikiş açılması kemiren tarafından önlemek için fareler yer. Narkoz sonra yeterli bilinci yerine geldi kadar fareyi görünümde tutma. Not: Gerek yoktur Postoperatif ağrı yönetimi için beri bu tür müdahale rahatsızlık veya ağrı belirtisi iyi tolere edilir. Alternatif olarak topikal ilaçlar, örneğin bupivacaine kesi en fazla 8 saat analjezi sağlayacak kapatma önce üzerinde bir damla öneririz.</li>
</ol>3. değerlendirme modeli indüksiyon, Nefrotik sendrom işaretleri ve iyi olmak için
<ol><li>Sabah idrar (08:00 am) mesane masaj enjeksiyon günden itibaren her gün tepki bardağa (1,5 mL) toplamak.<ol>
<li>Proteinüri Bradford protein tahlil kullanarak ölçün ve kreatinin için normalleştirmek. Not: için indüksiyon Nefrotik sendromda 120 mg/mg kreatinin doksorubisin enjeksiyon sonra 7 ve 10 gün arasında bir eşik Proteinüri ulaştırılması gerekmektedir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Asit gelişmesi için bak. Karın çevresi veya taşkın yanları artış için kontrol edin.</li>
	<li>Fare, gıda granül ve içki şişesi sabah (08:00 am) her gün tartın.</li>
	<li>Su kuyusu-varlık en az puanı yapraklık göre Morton ve Griffiths ve arkkullanarak günde bir kontrol edin. 16
</li>
</ol>4. idrar serin proteaz Chromogenic bir tahlil ile ölçülmesi
<ol><li>Bir şişe lyophilised chromogenic substrat konsantrasyonu 2 mM verimli S-2251, 25 mg 15 mL steril fosfat tamponlu tuz (PBS) ekleyerek substrat çalışma çözeltisi hazırlamak. Aprotinin 2 mg/mL bir konsantrasyon ile bir aprotinin çözümü elde etmek için PBS çözülür.<ol>
<li>-20 ° C'de hazır çözümler depolamak Bu S-2251 otomatik bozulması önemli ölçüde yavaşlatır. Eski çözümler sarı güçlü bir gölge ile kullanmayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Taze hazırlanmış veya çözdürülen substrat çalışma çözüm kullanın ve 37 ° C ısı odasında sıcak.</li>
	<li>İdrar numuneleri, oda sıcaklığında erimek.<ol>
<li>Tekrarlanan çözdürme ve dondurma kaçınarak proteaz yıkımı önlemek. İdrar numuneleri-20 ° C'de depolayın</li>
	</ol>
</li>
	<li>Fotometrik ölçüm için uygun bir 96 microwell tabak kullanın. Su katılmamış idrar 3 µL her iki kuyu içinde ekleyin ve substrat çalışma çözeltisi 50 µL PBS veya aprotinin çözüm 3 µL ile wells için ekleyin. Bir plaka mühürleyen ile plaka kapak.</li>
	<li>60 dk 37 ° C ısı odasında kapalı microwell plaka kuluçkaya.</li>
	<li>Her şey 450 de optik yoğunluğunu ölçmek Mikroplaka okuyucu kullanarak nm.</li>
	<li>OD aprotinin olmadan ve aprotinin idrar aprotinin duyarlı serin proteaz aktivitesi olarak arasındaki fark almak. Not: belgili tanımlık substrate Ayrıca patofizyolojik bir rol oynamak yok diğer proteaz tarafından i ciddi bu yana testin özgüllüğü ölçüm eşleştirilmiş örneği olan ve olmayan aprotinin artırır.</li>
</ol>

<ol><li>Lee, V. W., Harris, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adriamycin+nephropathy%3A+a+model+of+focal+segmental+glomerulosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology+%28Carlton%29%22%5BJournal%5D)">Adriamycin nephropathy: a model of focal segmental glomerulosclerosis.</a> Nephrology (Carlton). 16 (1), 30-38 (2011).</li>
<li>Frenk, S., Antonowicz, I., Craig, J. M., Metcoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+nephrotic+syndrome+induced+in+rats+by+aminonucleoside%3B+renal+lesions+and+body+electrolyte+composition%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Soc+Exp+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Experimental nephrotic syndrome induced in rats by aminonucleoside; renal lesions and body electrolyte composition.</a> Proc Soc Exp Biol Med. 89 (3), 424-427 (1955).</li>
<li>Ichikawa, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+for+intrarenal+mechanisms+in+the+impaired+salt+excretion+of+experimental+nephrotic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Role for intrarenal mechanisms in the impaired salt excretion of experimental nephrotic syndrome.</a> J Clin Invest. 71, (1983).</li>
<li>Deschenes, G., Wittner, M., Stefano, A., Jounier, S., Doucet, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collecting+duct+is+a+site+of+sodium+retention+in+PAN+nephrosis%3A+a+rationale+for+amiloride+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Collecting duct is a site of sodium retention in PAN nephrosis: a rationale for amiloride therapy.</a> J Am Soc Nephrol. 12 (3), 598-601 (2001).</li>
<li>Lourdel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperaldosteronemia+and+activation+of+the+epithelial+sodium+channel+are+not+required+for+sodium+retention+in+puromycin-induced+nephrosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Hyperaldosteronemia and activation of the epithelial sodium channel are not required for sodium retention in puromycin-induced nephrosis.</a> J Am Soc Nephrol. 16 (12), 3642-3650 (2005).</li>
<li>Seigneux, S., Kim, S. W., Hemmingsen, S. C., Frokiaer, J., Nielsen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+expression+but+not+targeting+of+ENaC+in+adrenalectomized+rats+with+PAN-induced+nephrotic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Increased expression but not targeting of ENaC in adrenalectomized rats with PAN-induced nephrotic syndrome.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 291 (1), F208-F217 (2006).</li>
<li>Artunc, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum-+and+glucocorticoid-inducible+kinase+1+in+doxorubicin-induced+nephrotic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Serum- and glucocorticoid-inducible kinase 1 in doxorubicin-induced nephrotic syndrome.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 295 (6), F1624-F1634 (2008).</li>
<li>Zheng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Mendelian+locus+on+chromosome+16+determines+susceptibility+to+doxorubicin+nephropathy+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">A Mendelian locus on chromosome 16 determines susceptibility to doxorubicin nephropathy in the mouse.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (7), 2502-2507 (2005).</li>
<li>Kimura, M., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8450912">Interstrain differences in murine daunomycin-induced nephrosis.</a> Nephron. 63 (2), 193-198 (1993).</li>
<li>Wang, Y., Wang, Y. P., Tay, Y. C., Harris, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+adriamycin+nephropathy+in+mice%3A+sequence+of+histologic+and+immunohistochemical+events%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Progressive adriamycin nephropathy in mice: sequence of histologic and immunohistochemical events.</a> Kidney Int. 58 (4), 1797-1804 (2000).</li>
<li>Svenningsen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasmin+in+nephrotic+urine+activates+the+epithelial+sodium+channel%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology+%3A+JASN%22%5BJournal%5D)">Plasmin in nephrotic urine activates the epithelial sodium channel.</a> Journal of the American Society of Nephrology : JASN. 20 (2), 299-310 (2009).</li>
<li>Passero, C. J., Hughey, R. P., Kleyman, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+role+for+plasmin+in+sodium+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Nephrol+Hypertens%22%5BJournal%5D)">New role for plasmin in sodium homeostasis.</a> Curr Opin Nephrol Hypertens. 19 (1), 13-19 (2010).</li>
<li>Bohnert, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aprotinin+prevents+proteolytic+epithelial+sodium+channel+%28ENaC%29+activation+and+volume+retention+in+nephrotic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Aprotinin prevents proteolytic epithelial sodium channel (ENaC) activation and volume retention in nephrotic syndrome.</a> Kidney Int. 93 (1), 159-172 (2018).</li>
<li>Pippin, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducible+rodent+models+of+acquired+podocyte+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Inducible rodent models of acquired podocyte diseases.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 296 (2), F213-F229 (2009).</li>
<li>Bohnert, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+phosphorus+restriction+and+vitamin+D-substitution+on+secondary+hyperparathyroidism+in+a+proteinuric+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Blood+Press+Res%22%5BJournal%5D)">Impact of phosphorus restriction and vitamin D-substitution on secondary hyperparathyroidism in a proteinuric mouse model.</a> Kidney Blood Press Res. 40 (2), 153-165 (2015).</li>
<li>Morton, D. B., Griffiths, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+on+the+recognition+of+pain%2C+distress+and+discomfort+in+experimental+animals+and+an+hypothesis+for+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Rec%22%5BJournal%5D)">Guidelines on the recognition of pain, distress and discomfort in experimental animals and an hypothesis for assessment.</a> Vet Rec. 116 (16), 431-436 (1985).</li>
<li>Beath, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+aprotinin+concentrations+during+cardiac+surgery%3A+full-+versus+half-dose+regimens%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">Plasma aprotinin concentrations during cardiac surgery: full- versus half-dose regimens.</a> Anesth Analg. 91 (2), 257-264 (2000).</li>
<li>Kanter, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+toxicology+study+of+liposome+encapsulated+doxorubicin+%28TLC+D-99%29%3A+comparison+with+doxorubicin+and+empty+liposomes+in+mice+and+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vivo%22%5BJournal%5D)">Preclinical toxicology study of liposome encapsulated doxorubicin (TLC D-99): comparison with doxorubicin and empty liposomes in mice and dogs.</a> In Vivo. 7 (1), 85-95 (1993).</li>
<li>Ma, L. J., Fogo, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Model+of+robust+induction+of+glomerulosclerosis+in+mice%3A+importance+of+genetic+background%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Model of robust induction of glomerulosclerosis in mice: importance of genetic background.</a> Kidney Int. 64 (1), 350-355 (2003).</li>
<li>Kren, S., Hostetter, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+course+of+the+remnant+kidney+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">The course of the remnant kidney model in mice.</a> Kidney Int. 56 (1), 333-337 (1999).</li>
<li>Mizuno-Horikawa, Y., Mizuno, S., Tamura, S., Kurosawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+glomerulosclerosis+is+reversible+in+nephrotic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Advanced glomerulosclerosis is reversible in nephrotic mice.</a> Biochem Biophys Res Commun. 284 (3), 707-713 (2001).</li>
<li>Friberger, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromogenic+peptide+substrates.+Their+use+for+the+assay+of+factors+in+the+fibrinolytic+and+the+plasma+kallikrein-kinin+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Scand+J+Clin+Lab+Invest+Suppl%22%5BJournal%5D)">Chromogenic peptide substrates. Their use for the assay of factors in the fibrinolytic and the plasma kallikrein-kinin systems.</a> Scand J Clin Lab Invest Suppl. 162, 1-298 (1982).</li>
<li>Haerteis, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+kallikrein+activates+the+epithelial+sodium+channel+in+vitro+but+is+not+essential+for+volume+retention+in+nephrotic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiologica%22%5BJournal%5D)">Plasma kallikrein activates the epithelial sodium channel in vitro but is not essential for volume retention in nephrotic mice.</a> Acta Physiologica. , (2018).</li>
<li>Schork, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+Plasminuria+with+Overhydration+in+Patients+with+CKD%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Association of Plasminuria with Overhydration in Patients with CKD.</a> Clin J Am Soc Nephrol. 11 (5), 761-769 (2016).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Burada, doksorubisin enjeksiyon retrobulbar sinüs enjeksiyon yolu ile Proteinüri, sodyum retansiyonu, hypoalbumenia ve hiperlipidemi ile 129S1/SvImJ farelerde deneysel Nefrotik sendrom indükler göstermektedir. Ancak, bu model kullanırken dikkate alınması gereken iki önemli sorun vardır. İlk olarak, model indüksiyon kesinlikle doz bağımlı ve sapmalar doksorubisin doz 0.3 µg/g küçük fareler15yanıt etkiler. İle 14 µg/g gibi daha düşük bir dozda enjekte edildiğinde bw veya aşağıda, doksorubisin aleni ...

Nefrotik sendrom ağır Proteinüri, hipoalbüminemi, ödem ve hiperlipidemi ile karakterizedir ve proteinuric böbrek hastalığı en uç tezahürü kabul edilebilir. Kemirgen, deneysel Nefrotik sendrom tarafından anthracyclines veya podocyte hasara yol açar ve insan minimal değişiklik hastalığı ve Fokal segmental glomerulosclerosis (FSGS)1benzer puromisindir tek enjeksiyon bağlı olmak. Frenk ve arktarafından 1955 yılında ilk açıklamasını sonra. 2, Sıçanlarda puromisindir nükleozit nefroz (PAN) çok sayıda çalışmalar3,4,5,6Nefrotik sendromda patofizyolojisi araştırmak için standart bir model haline gelmiştir. Farelerde, karşılık gelen modeli Antrasiklin doksorubisin7tarafından indüklenen. Ancak, genetik olarak en az iki genetik loci8tarafından belirlenir güçlü bir zorlanma-bağımlılık vardır. Buna ek olarak, proteinuric yanıt ve nefrotik sendrom9,10tabii farklılıklar vardır. 129S1/SvImJ fare ve doksorubisin hızlı intravenöz enjeksiyon yolu ile retrobulbar sinüs kullanılarak, Proteinüri yanıt Nefrotik sendromu, özellikle cilt saklama ile karakterize tipik özelliklerini ikna etmek yeterli olan değerleri ulaşmak asit ve idrar neredeyse sodyum ücretsiz7. Deneysel Nefrotik sendrom sodyum saklama etkinleştirme distal tübül epitel sodyum kanalının (ENaC) sonucu aberrantly süzülmüş serin proteaz proteolizis bir onun γ-alt birimi4 neden plasmin gibi tarafından olduğu tahmin ,11,12. Son zamanlarda, bu kavram proteolitik ENaC harekete geçirmek ve sodyum saklama ENaC engelleyici amiloride13eşit derecede etkili serin proteaz inhibitörü aprotinin tedaviyle tarafından korunan Nefrotik farelerde kanıtlanmış oldu. Distal tübül için sürekli teslim edilmesini sağlamak için aprotinin subkutan implante sürekli yayın topakları yönetiliyordu. Gelecekteki çalışmaları insan durum paralel düşünülmektedir Nefrotik Sendromu proteolitik ENaC harekete geçirmek için sorumludur serin proteaz tanımlamak için gereklidir. Bu amaçla, Nefrotik sendrom doksorubisin kaynaklı vahşi tipi fareler kullanılan veya genetik fareler için genişletilmiş değerli bir modeldir. Avantajları ilacın düşük maliyet, düşük karmaşıklık yönetimi ve iyi tekrarlanabilirlik14içerir.
Bu makalede, biz doksorubisin retrobulbar sinüs için hızlı intravenöz enjeksiyon ve implantasyon sürekli yayın pellet aprotinin idrar serin proteaz inhibe içeren tarafından deneysel Nefrotik sendromda indüksiyon göstermek chromogenic bir tahlil ile ölçülen aktivite.

<table><tbody><tr><td><güçlü>malzemeler</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>BD Micro FINE + U-40 (0,30 mm x 8 mm)</td><td>BD Deutschland GmbH, Heidelberg, Almanya</td><td>PZN: 07468060</td><td>şırınga</td></tr><tr><td>ETHILON*II (5/0, 16 mm, 3/8c, 45 cm)</td><td>Johnson& Johnson Medical GmbH, Ethicon Deutschland, Norderstedt, Almanya)</td><td>EH7823H</td><td>sütür</td></tr><tr><td>İsim</td><td>Şirket</td><td>Katalog Numarası</td><td>Yorumlar</td></tr><tr><td>reagents</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>aprotinin (6000 KIU/mg)</td><td>LOXO, Heidelberg, Almanya</td><td>CAS 9087-70-1</td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen, Augen- und Nasensalbe</td><td>Bayer Vital GmbH, Leverkusen, Almanya</td><td>PZN: 1578681</td><td>merhem</td></tr><tr><td>Chromogenix S-2251</td><td>HAEMOCHROM DIAGNOSTICA GmbH, Essen, Almanya</td><td>82 0332 39</td><td>kromojenik substrat</td></tr><tr><td>doksorubisin (2.0 & mikro; g/&mikro; L)</td> <td>Hücre Eczanesi, Bad Vilbel, Almanya</td><td>CAS 25316-40-9</td><td>doksorubisin</td></tr><tr><td>izofluran CP (1 mL / mL)</td> <td>CP-Pharma, Burgdorf, Almanya</td><td>CAS 26675-46-7</td> matris <td></td></tr><tr><td>güdümlü sürekli salımlı izofluran peletleri (ısmarlama)</td> <td>Amerika'nın Yenilikçi Araştırması, Sarasota, FL</td><td>X-999</td><td>pelet</td></tr><tr><td>Name</td><td>Şirket</td><td>Katalog Numarası</td><td>Comments</td></tr><tr><td>equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ELx808 Absorbans Mikroplaka Okuyucu</td><td>BioTek, Bad Friedrichshall, Almanya</td><td>ELx808</td><td>mikroplaka okuyucu</td></tr><tr><td>MICROSTERIL - 436</td><td>B.M.S., Trescore Balneario, İtalya</td><td>GAL / 436</td><td>sterilizatör</td></tr><tr><td>Hibridizasyon fırını / çalkalayıcı</td><td>GE Healthcare UK Limited, Amersham LIFE SCIENCE, Little Chalfont, Birleşik Krallık</td><td>RPN 2511</td><td>ısı odası</td></tr><tr><td>Thermo MAT Pro 10 W, 15x25 cm, Lucky Reptile</td><td>Import Export Peter Hoch GmbH, Waldkirch, Almanya</td><td>61201</td><td>fare ısıtma cihazı</td></tr></tbody></table>

doksorubisin retrobulbar enjeksiyon ve Önleme birimi kalıcılık tarafından sürekli yayın aprotinin farelerde nefrotik sendromda indüksiyon

Induction of Nephrotic Syndrome in Mice by Retrobulbar Injection of Doxorubicin and Prevention of Volume Retention by Sustained Release Aprotinin

Nefrotik sendrom proteinuric böbrek hastalığı en uç tezahürü ve ödem sodyum retansiyonu ve hiperlipidemi nedeniyle ağır Proteinüri ve hipoalbüminemi ile karakterize. Bu sendrom Patofizyoloji çalışmaya, podocyte zarar doksorubisin gibi toksik maddelerin enjeksiyonu modelleri geliştirilmiştir kemirgen dayalı. Farelerde, sadece birkaç suş bu model için açıktır. Wildtype 129S1/SvImJ fareler, doksorubisin retrobulbar sinüs için hızlı intravenöz enjeksiyonla yönetim özellikleri insan hastalık sodyum retansiyonu ve ödem de dahil olmak üzere tüm belirtiler deneysel Nefrotik Sendromu neden olmaktadır. Proteinüri başlangıcı sonra fareler sergi epitel sodyum kanalı (ENaC) ve sodyum saklama harekete geçirmek yol açar idrar serin proteaz aktivitesi arttı. Farmakolojik idrar serin proteaz sürekli yayın aprotinin tedaviyle tarafından inhibisyonu ENaC harekete geçirmek abrogates ve sodyum saklama engeller. Bu model proteasuria, YaniPatofizyoloji çalışmaya idealdir., onun γ alt birim proteolizis tarafından ENaC harekete geçirmek neden aktif serin proteaz atılımı. Bu ENaC harekete geçirmek ve sodyum saklama proteinuric böbrek hastalığında birincil mekanizması olarak kabul edilebilir.

İsoflurane narkoz indüksiyon sonra doksorubisin hızla sol retrobulbar sinüs enjekte ettiler. Birimin tümü herhangi bir direnç ve ispat ekstravazasyonu kanül intravenöz konumunu doğru olmadan 7,25 µL/g bw enjekte ettiler. Fare narkoz hızla iyileşti ve o gün ve bundan sonra hiçbir bozukluk vardı. Özellikle, sol göz zarar belirtisi yok oldu. Doksorubisin genel bir toksik etkisi nedeniyle ilk 3 gün içinde düştü ve bundan sonra kurtarılan doksorubisin enjeksiyon, gıda ve sıvı alımı sonra (<str...

Burada, 129S1/SvImJ farelerde deneysel Nefrotik sendromda indüksiyon doksorubisin hızlı retrobulbar enjeksiyonu ile açıklayın. Ayrıca Nefrotik fareler sürekli yayın granül içeren aprotinin idrar serin proteaz aktivitesi inhibe ve sodyum saklama önlemek için tedavi ediyoruz.

Doksorubisin Retrobulbar enjeksiyon ve Önleme Birimi kalıcılık tarafından sürekli yayın Aprotinin farelerde Nefrotik sendromda indüksiyon

Nephrotic syndrome is the most extreme manifestation of proteinuric kidney disease and characterized by heavy proteinuria, hypoalbuminemia, and edema due ...

Bu deneysel nefrotik sendrom fare modelinin genel amacı, insan hastalardan bilinen sendromun tüm yönlerini, en önemlisi sodyum retansiyonu ve ödem oluşumunu öne çıkarmaktır. Bu model, nefrotik sendromda sodyum tutma mekanizmalarının aydınlatılmasına yardımcı olabilir. Bu makalede gösterileceği gibi, sodyum retansiyonu, proteasüri olarak adlandırdığımız idrarda aktif serum proteazlarının atılımından kaynaklanır.Bu modelin temel avantajları, indüklenmesinin kolay olması ve insan nefrotik sendromu ve kronik böbrek hastalığının tüm yönlerini içermesidir. Protokolün implantasyon bölümü sırasında, bir araştırma görevlisi olan Dr.Bohnert bu tekniği gösterecektir. Başlamak için, doksorubisin'i 37 santigrat derecelik bir odada ısıtın.Sonra, enjeksiyon şırıngasını hazırlayın. Mikrolitre çözelti başına iki mikrogram kullanarak gerekli doksorubisin dozunu vermek için şırınga üzerindeki pistonun durma konumunu işaretleyin. Daha sonra, hazırlanan bir şırınganın kütlesini sıfırlayın ve şırınganın içine işaretli noktaya kadar yükleyin.Hacmin onaylanması için şırıngayı tekrar tartın. Bu enjeksiyon narkozdan yaklaşık 30 saniye sonra yapılmalıdır. Fareyi uyuşturduktan sonra, başı operatörün enjeksiyo

induction-nephrotic-syndrome-mice-retrobulbar-injection-doxorubicin

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu video, anjiyotensin II ile indüklenen hipertansif bir fare modelinde, sempatik sinir fonksiyonunu bozmak ve kan basıncını azaltmak için fenol kullanan renal arter sempatik denervasyonu için bir prosedürü göstermektedir.

Anjiyotensin II ile İndüklenen Hipertansiyon Fare Modelinde Renal Arterlerin Sempatik Denervasyonu

Biz fareler tabi olan orta ve ağır iskemi-reperfüzyon bağlı böbrek hasarı modelleri tanımlamak tek taraflı renal pedikül sırasıyla, eş zamanlı veya gecikmeli taraf nefrektomi takip sıkma. Bu modeller sürekli böbrek fonksiyon bozukluğu ve post-yaralanma fibrozis yol, ancak yaralanma şiddeti ve yaşam fare arka plan, yaş ve cerrahi ekipman bağlıdır.

Farelerde Akut Böbrek Hasarı ve Post Yaralanma Fibrozis iskemi-reperfüzyon Model

Bu el yazması fare 5/6inci kısmi nefrektomi (PNx) kutup ligasyonu ile gerçekleştirmek için detaylı iki aşamalı cerrahi işlem sağlar. Dört hafta sonra ameliyat, fareler, sham işletilen ile karşılaştırıldığında PNx fareler geliştirilen bozulmuş böbrek fonksiyonu, anemi, kalp hipertrofisi, kardiyak fibrozis ve kalp sistolik ve diyastolik fonksiyonu azalmıştır.

Deneysel üremik kardiyomiyopati indükler bir fare 5/6inci nefrektomi modeli

Bu iletişim kuralı bir tam böbrek iş-up glomerular hastalığı fare modellerinde yürütülmesi gereken açıklar. Yöntemler glomerular hastalığı tüm fare modelleri uygulanabilir glomerular işlevinin ayrıntılı işlevsel, yapısal ve mekanik analiz için olanak sağlar.

Fare modelleri Glomerular hastalığı böbrek fonksiyonlarının değerlendirilmesi

Burada, Anjiyotensin II infüzyonu ile indüklenen hipertansiyonu olan farelerde renal sempatik denervasyon (RDN) için bir protokol sunuyoruz. Prosedür tekrarlanabilir, kullanışlıdır ve RDN'nin hipertansiyon ve kardiyak hipertrofi üzerindeki düzenleyici mekanizmalarını incelemeye izin verir.

Anjiyotensin II İnfüzyonu ile İndüklenen Geliştirilmiş Renal Denervasyon Azaltılmış Hipertansiyon

Bu protokol, apolipoprotein E (ApoE) eksikliği olan farelerde anjiyotensin II salınımı ile abdominal aort anevrizmasını indüklemek için ozmotik bir pompanın ve tekrarlanan ilaç tedavisi için juguler ven kateterli bir vasküler erişim portunun ardışık implantasyonunu tanımlar. Anevrizma gelişiminin 3D ultrason ile izlenmesi, dorsal implantlara rağmen etkili bir şekilde gerçekleştirilir.

Anjiyotensin II İndüklü Abdominal Aort Anevrizmasının Bir Fare Modelinde Santral Venöz Kateter ile İlaç Tedavisi ve 3D Ultrason ile İzleme

Bu makale, doğum sonrası, juvenil ve koşmuş yetişkin fareler için toplam hacmi 150 μL'ye kadar retrobulbar sinüs enjeksiyonu için bir protokol ve eşlik eden bir video sağlar. Bu prosedür, kuyruk damarı enjeksiyonunun mümkün olmadığı durumlarda küçük farelerin (15 g) enjeksiyonu için özellikle uygundur.

Retrobulbar Sinüs Enjeksiyonu ile Doğum Sonrası, Juvenil ve Runted Yetişkin Fareler için Sistemik Tedavi

Bu rapor, fare böbreğine etkili ve güvenli gen transferi için renal pelvis yoluyla AAV vektörlerinin lokalize enjeksiyon yöntemini detaylandırmaktadır.

Adeno ilişkili virüs vektörlerinin yavaş retrograd renal pelvis enjeksiyonu yoluyla fare böbreğine etkili ve güvenli gen iletimi

Biz dobutamin ile tetiklenen ve normal farelerde kalp kateterizasyonu tarafından izlenen bir kardiyak stres testi gerçekleştirmek için protokol açıklar. Ayrıca yüksek yağlı diyet bağlı obez farelerde subklinik kardiyak hastalık meydana çıkarmak için uygulama göstermektedir.

Kardiyak Stres Testi Dobutamin İndüklemiş ve Farelerde Kalp Kateterizasyonu tarafından İzlenen

, Dekolmanı bir tekrarlanabilir ve sürekli yüksekliği ile deneysel retina dekolmanı oluşturma ve subretinal kanama olmadan retina hastalığında fotoreseptör hücre kaybı patofizyolojisi okuyan ve potansiyel terapötik müdahalelerin değerlendirilmesi için önemlidir. Burada ayrıntılı olarak, böyle bir yöntem sunulmaktadır.

Sodyum Hyaluronat subretinal Enjeksiyon Kemirgenler Retina Dekolmanı Modeli

Öğrenin farelerde doksorubisin retrobulbar enjeksiyonu ile nefrotik sendrom indüksiyonunu ve aprotinin sürekli salınım pelletleriyle sodyum retansiyonu önleme yöntemini. Bu model böbrek hastalığı mekanizmalarını in vivo çalışmak için değerlidir.

Doksorubisin Retrobulbar enjeksiyon ve Önleme Birimi kalıcılık tarafından sürekli yayın Aprotinin farelerde Nefrotik sendromda indüksiyon (Video) | JoVE Journal

Doksorubisin Retrobulbar enjeksiyon ve Önleme Birimi kalıcılık tarafından sürekli yayın Aprotinin farelerde Nefrotik sendromda indüksiyon

Daha fazla video keşfet