Ölçeklenebilir, Hızlı montaj ve biyoaktif proteinler ve Immunostimulants yükleme yolu ile birden parlamak Nanoprecipitation çeşitli sentetik Nanocarriers içine

Karmaşık nanoyapıları bir araya getirmek için flaş nanoçökeltinin kullanılmasının, kimya, mühendislik veya nanomalzeme biliminde geniş deneyime sahip olmayan araştırmacıların kendi özel uygulamaları ve ihtiyaçları için bağımsız olarak gelişmiş ilaç dağıtım sistemleri üretmelerine izin vereceğine inanıyoruz. Bu tekniğin temel avantajı, yüksek konsantrasyonda, düşük polidispersiteye sahip ve tümü steril koşullar altında oluşturulan küçük moleküllü ilaçlar ve proteinler dahil olmak üzere biyoaktif moleküllerle yüklü büyük hacimlerde çeşitli nanoyapıların üretilmesidir. Genel olarak, polimer sentezine yeni başlayan bireyler, polipropilen sülfür bileşeninin havaya maruz kalmasıyla oksidasyona karşı oldukça hassas olması nedeniyle mücadele edebilir.

Bu yöntemin görsel gösterimi kritiktir, çünkü art arda çok hızlı bir şekilde gerçekleştirilmeleri gerektiğinden, çoklu çarpma adımlarının öğrenilmesi zordur. Kapalı çarpma jetlerini veya CIJ karıştırıcısını sterilize etmek için, karıştırıcıyı tüm parçalar demonte edilmiş olarak gece boyunca sıfır noktası bir molar sodyum hidroksite daldırmak için biyolojik bir güvenlik kabini içinde çalışın. CIJ karıştırıcıyı yeniden monte edin ve luerlock şırıngaları kullanarak karıştırıcıdan endotoksin içermeyen su akıtın, suyun pH'ını test edin ve pH nötr olarak kaydedilene kadar su akıtmaya devam edin.

Çarpma çözeltisi bir'i hazırlamak için, önce sentezlenen polimerin 20 miligramını bir nokta beş mililitrelik bir tüpe tartın. Ardından hidrofobik boyalar, ilaçlar veya diğer kargoları ekleyin. Son olarak, polimere ve kargoya 500 mikrolitre% 100 tetrahidrofuran ekleyin, çözünmesi için kuvvetlice girdaplayın.

Çarpma çözeltisi ikinci hazırlamak için, polimer veziküller içine yüklenecek hidrofilik kargoyu 500 mikrolitre sulu bir tamponda çözün. Uygun büyüklükte bir rezervuara 2,5 mililitre sulu bir tampon ekleyin. Şimdi, rezervuarı, mikserden çıkan çıkış doğrudan rezervuara girecek şekilde CIJ mikserin altına yerleştirin.

Çarpma solüsyonlarını ayrı bir mililitrelik plastik tek kullanımlık şırıngalara yükleyin, şırıngaları CIJ karıştırıcının üst kısmındaki luerlock adaptörlerine yerleştirerek aynı anda nanoyapılar oluşturmak için solüsyonları birbirine çarpın. Tek, pürüzsüz ve hızlı bir hareketle, her iki şırıngayı aynı anda ve eşit kuvvetle bastırın. Birden fazla çarpma gerçekleştirilecekse, valtower organik çözücü kaybını azaltmak için bunların mümkün olduğunca çabuk yapılması çok önemlidir.

Birden fazla çarpma gerçekleştirmek için, yeni ortaya çıkan nanoyapı çözeltisini iki şırınga arasında bölün ve bu adımı dört kez daha tekrarlayın. Dışarı akışı sulu tampon dolu rezervuarda toplayın ve karıştırmayı sağlamak için hafifçe karıştırın. Boşaltılan kargoyu ve organik çözücüyü çıkarmak için birkaç seçenek vardır.

Nanotaşıyıcı formülasyonu, tüketim vergisi dışlama veya tuzdan arındırma kolonu yoluyla, teğetsel akış filtrasyon sistemi yoluyla, vakumla kurutma yoluyla veya burada gösterildiği gibi diyaliz yoluyla çıkarılabilir. Nanotaşıyıcı formülasyonunu, çarpma için kullanılan aynı sulu tampon ve rezervuarda diyalize edin. En az iki tampon değişikliği ile en az 24 saat boyunca uygun bir moleküler ağırlık kesme borusu kullanın.

Boşaltılan kargo organik çözücüden çıkarıldıktan sonra, üreticinin talimatlarını izleyerek bir spin yoğunlaştırıcı sistemi kullanarak nano taşıyıcı formülasyonunu konsantre edin. Nanotaşıyıcılar haftalarca veya aylarca dört santigrat derecede saklanabilir. Depolamadan sonra kullanımdan önce, nanotaşıyıcı formülasyonlar kısaca girdaplanmalıdır.

Metin protokolünde açıklandığı gibi yüksek hızlı bir şırınga pompasının imalatını gerçekleştirin. Otomatik çalıştırma modunu kullanmak için ana menüden otomatik çalıştırmayı seçin. Sistem, kullanıcılardan motorun şırınga çıkarma platformunu hassas sürgünün başlangıcına otomatik olarak konumlandırmasına izin vermelerini isteyecektir.

Devam etmeden önce metal plakanın önündeki ve arkasındaki yolun boş olduğundan emin olun. CIJ mikserini arka tahliye taşıyıcısının dikdörtgen açıklığına yerleştirin. Ardından, daha önce olduğu gibi bir mililitrelik plastik şırınga yükleyin ve şırıngaları CIJ mikserinin dişi yem konektörlerine monte edin.

Cihazı çalıştırmadan önce, istenen motor hızını ayarlayın ve metin protokolünde açıklandığı gibi sistemin net olduğunu kontrol edin. Reaktanları şırıngalardan CIJ miksere atmak için yazılım arayüzündeki çalıştır düğmesine basın. Temsili kriyojenik iletim elektron mikrografları, tekrarlanan çarpmalardan sonra daha küçük ve daha mono dağılmış polimeromları gösterir.

Dinamik ışık saçılımı analizi, tekrarlanan çarpmalardan sonra polimeromların boyut dağılımının sola doğru kaymasını doğruladı. Tekrarlanan beş çarpmadan sonra, polimeromların ortalama çapı ve polidispersitesi, ince film rehidrasyonu ile oluşturulan ekstrüde edilmiş numunelerinkiyle eşleşir. Flaş nanoçökeltme, polimeromlara çeşitli hidrofobik ve hidrofilik küçük molekülleri ve makromolekülleri yüklemek için kullanılabilir.

Bu yöntem, immünoterapilerin ve aşıların nasıl çalıştığına dair fikir verebilse de, polimerlerin karmaşık nanoyapılara nasıl kendi kendine bir araya geldiğinin incelenmesine de uygulanabilir. Bu prosedürü takiben, hangi hücre alt kümelerinin nanopartikülleri içselleştirdiğini veya farklı nanoyapılar için temizleme yolunun ne olduğunu belirlemek için hayvan modellerine intravenöz veya subkutan uygulama gibi diğer yöntemler gerçekleştirilebilir. Bu tekniğin etkileri, kalp hastalıkları ve kanserin tedavisinin yanı sıra bulaşıcı hastalıklar için aşıların geliştirilmesine kadar uzanır, çünkü bu nanotaşıyıcılar çok spesifik bağışıklık hücrelerine birden fazla ilacı hedefleyebilir.