Mouse ovarium olayları görselleştirmek için yumurtalık doku kültürü

Bu yöntem, yumurtalık araştırma alanındaki folikül gelişimi, folikül atrezisi ve operasyonu ile ilgili temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, gerçek zamanlı gözlem için yumurtalık olaylarını kontrollü kültür koşulları altında yeniden üretebilmemizdir. Dört haftalık bir Kanser Araştırma Enstitüsü faresinden yumurtalıkları kültüre hazırlamak için: Stereo mikroskop altında yumurtalıklardan çevreleyen dokuyu kesmek için makas ve cımbız kullanın ve temizlenmiş yumurtalıkları taze kültür ortamından oluşan bir tabağa yerleştirin.

Tüm yumurtalıklar kesildiğinde, tek tek yumurtalıkları 37 santigrat derece PBS ile nemlendirilmiş bir filtre kağıdına aktarın ve her bir yumurtalığı dört parçaya bölmek için bir mikrotom bıçağı kullanın. Dilimleri 37 santigrat derece kültür ortamından oluşan 3,5 santimetrelik bir tabağa aktarın ve yumurtalık dokusu bölümü başına bir hücre kültürü ekine yaklaşık 0,5 mikrometrelik bir kültür ortamı damlası eklemek için bir mikropipet kullanın. Bir milimetre ortam içeren ikinci bir 3,5 santimetre cam tabanlı hücre kültürü kabında: Cımbız kullanarak, her damlacığa bir doku örneği aktarın ve plakayı bir hücre kültürü inkübatörüne yerleştirin.