Name: Tek Sensillum kayıtları Locust Palp Sensilla Basiconica için (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-23T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 16 s
Description: Öğrenin, çekirge palp sensilla basiconica'dan tek sensillum kayıtları yapma yöntemini. Bu teknik, böcek koku alma mekanizmalarını ve duyusal nöron yanıtlarını incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser bir hibe Ulusal Doğal Bilim Vakfı, Çin'den (No.31472037) tarafından desteklenmektedir. Ticari adlar veya ticari ürünler bu makalenin herhangi bir söz sadece bilgi sağlanması amacına olduğunu ve bir tavsiye anlamına gelmez.

1. Araçlar ve böcek hazırlanması
<ol><li>
Tungsten elektrotlar ve uyaranlara çözümleri hazırlanıyor
	<ol>
<li>Bir yeni tungsten tel (0,125 mm çap, 75 mm uzunluğu) bir micromanipulator içine düzeltmek ve 10 V stereomicroscope (40 X büyütme) altında yaklaşık 1 dakika için bir güç kaynağı tarafından sağlanan % 10 (w/v) Sodyum nitrit (NaNO2) çözümde bir şırınga keskinleştirmek.</li>
		<li>Bilenmiş tungsten tel art arda % 10 NaNO2 çözüm, 4 mm 5 V < 1 dk (Şekil 1A)'inde içine daldırma.</li>
		<li>Locust palp koku sensillum (Şekil 1B) kütikül nüfuz için iyi olana stereomicroscope altında sık bilenmiş tungsten ipucu çapını inceleyin.</li>
		<li>Uyarıcı çözümleri hazırlayın. Her kimyasal uyarıcı madde madeni yağ içinde biri oranında seyreltin. 1-nonal ve nonanoic asit, %10 dilutions oranında seyreltin. E-2-hexenal ve diehydroabietinal 10-2, 10-3, 10-4ve 10-5oranında seyreltin.</li>
		<li>Pasteur uyaranlara taşıma tüpleri hazırlayın: filtre kağıt şeritler (2 cm uzunluğunda, 0,5 cm genişlik) Pasteur tüpler içine yerleştirin, seyreltilmiş uyarıcı çözümleri (her 10 µl) filtre kağıt şeritler eklemek ve pipet ipuçları (1 ml) Pasteur tüplerini takın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Böcek hazırlamak
	<ol>
<li>Bağıl nem oranı % 60, 28-30 ° C sıcaklık ve photoperiod 18:6 h (ışık: karanlık) kalabalık koşullarda taze buğday fidan ile arka çekirge (Locusta migratoria). 1 - için 3-bayat 5 seçinlocust perileri biçim ve iyi makas ile kayıt yaparken herhangi bir girişimi engellemek için antenleri kaldırın .</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Locust üst palp tutucu hazırlanıyor
	<ol>
<li>Bir cam slayt (25 mm x 75 mm) üst palp tutucu (mil) temel olarak kullanın. Çift taraflı yapışkan bant ile cam slayt köşesinde bir plastik parça (1 mm içinde yükseklik, genişlik, 35 mm uzunluğu 10 mm) ekleyin ve nihayet bir cam (18 x 18 mm) plastik parça üzerine çift taraflı yapışkan bant ile düzeltmek. Kırmızı lastik bant cam üzerine küçük bir parçası bir kaymaz katman yer. Plastik parça ve kapak cam locust palp için platform oluşturmaktadır. Platform yüksekliği yaklaşık 1.5 mm olduğunu.</li>
		<li>1.5 mm iç paralel olarak bir tungsten tel (0,125 mm çap, 36 mm uzunluğu) yüklemek kenar-in belgili tanımlık peron. Tel platformu üzerine iki ucu çift taraflı yapışkan bant ile düzeltmek.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Locust üst dokunacı hazırlanması
<ol><li>Bir santrifüj tüpü (1,5 ml) dikey olarak yarıya ve alt kesti. Locust hazırlanan tüpün içine yerleştirin. Ventral bölge ve maruz locust Başkanı bırakın. Montaj cam kaymak için çift taraflı yapışkan bant ile (Şekil 2A) düzeltmek.</li>
	<li>Sağ üst palp platformu üzerine çek.</li>
	<li>Tungsten kabloyu palp dördüncü kesim sok. Tungsten tel, 2 mm üst palp (Şekil 2A ve 2B) üzerinden her tarafında yapışkan macun koyun.</li>
</ol>3. tek Sensillum kayıtları
<ol><li>Locust üst palp hazırlık düşük büyütmede (100 X) mikroskop altında bir yer. Palp kayıt elektrodu (Şekil 3A) dikey olana hazırlık konumunu ayarlamak.</li>
	<li>Referans elektrot (tungsten elektrot) bir micromanipulator kullanarak locust göz içine yerleştirin. Micromanipulator (Şekil 3B ve 3 C) ile üst palp yakın kayıt elektrodu (tungsten elektrot) taşıyın.</li>
	<li>Koku teslim aygıt üst palp (Şekil 3B) yaklaşık 1 cm için ayarlayın.</li>
	<li>Kayıt yazılımı otomatik Spike 32 açın. Kayıt parametrelerini aşağıdaki gibi ayarlayın: 500 µV; kayıt ölçekte 300 Hz, 200 Hz üzerinde düşük kesme filtresinde yüksek kesim; ve 10 pretrigger s.</li>
	<li>Kayıt elektrot 10 x evrensel AC/DC amplifikatör bağlayın.</li>
	<li>Mikroskop yüksek bir büyütme (500 X) geçin. Basiconic sensillum üzerinde üst palp Bankası kayıt elektrot yerleştirin ve kibar bir şekilde iyi spontan sivri (şekil 3D) elde etmek için kayıt elektrot ayarlayın.</li>
	<li>20 ml, sürekli hava akımı sağlamak için uyarıcı denetleyicisi açmak/s. 10 için 1 s. kaydı sinyalleri stimülasyon zaman Set 10 başlangıç s, s uyarıcı darbe başlangıcından önce.</li>
	<li>10 x evrensel AC/DC amplifikatör sinyalleri yükseltmek için kullanın. Sinyalleri IDAC 4 içine beslenir. Sinyalleri otomatik Spike 32 yazılımı ile analiz. AC sinyaller bant geçiren filtre 200-300 Hz. arasında en yüksek yalak genlikleri gelen sesler ayırt etmek için kullanın otomatik Spike 32. Nöronlar yanıt Aksiyon potansiyeli Frekanslar (sivri saniyede) artış olarak spontan Frekanslar hesaplamak. İstimal GraphPad prizma 7 istatistiksel çözümleme gerçekleştirme.</li>
</ol>

<ol><li>Carey, A. F., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insect+olfaction+from+model+systems+to+disease+control%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Insect olfaction from model systems to disease control.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 108 (32), 12987-12995 (2011).</li>
<li>Leal, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odorant+reception+in+insects%3A+roles+of+receptors%2C+binding+proteins%2C+and+degrading+enzymes%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Odorant reception in insects: roles of receptors, binding proteins, and degrading enzymes.</a> Annual Review of Entomology. 58, 373-391 (2013).</li>
<li>Zhang, J., Walker, W. B., Wang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pheromone+reception+in+moths%3A+from+molecules+to+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Molecular+Biology+and+Translational+Science%22%5BJournal%5D)">Pheromone reception in moths: from molecules to behaviors.</a> Progress in Molecular Biology and Translational Science. 130, 109-128 (2015).</li>
<li>Vosshall, L. B., Amrein, H., Morozov, P. S., Rzhetsky, A., Axel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+spatial+map+of+olfactory+receptor+expression+in+the+Drosophila+antenna%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A spatial map of olfactory receptor expression in the Drosophila antenna.</a> Cell. 96 (5), 725-736 (1999).</li>
<li>Benton, R., Vannice, K. S., Gomez-Diaz, C., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variant+ionotropic+glutamate+receptors+as+chemosensory+receptors+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Variant ionotropic glutamate receptors as chemosensory receptors in Drosophila.</a> Cell. 136 (1), 149-162 (2009).</li>
<li>Vosshall, L. B., Stocker, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+architecture+of+smell+and+taste+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Molecular architecture of smell and taste in Drosophila.</a> Annual Review of Neuroscience. 30, 505-533 (2007).</li>
<li>de Bruyne, M., Foster, K., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor+coding+in+the+Drosophila+antenna%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Odor coding in the Drosophila antenna.</a> Neuron. 30, 537-552 (2001).</li>
<li>Roelofs, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+pheromone+production+and+perception+in+European+corn+borer+moths+is+determined+by+both+autosomal+and+sex-linked+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Sex pheromone production and perception in European corn borer moths is determined by both autosomal and sex-linked genes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 84 (21), 7585-7589 (1987).</li>
<li>Larsson, M. C., Leal, W. S., Hansson, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+receptor+neurons+detecting+plant+odours+and+male+volatiles+in+Anomala+cuprea+beetles+%28Coleoptera%3A+Scarabaeidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Olfactory receptor neurons detecting plant odours and male volatiles in Anomala cuprea beetles (Coleoptera: Scarabaeidae).</a> Journal of Insect Physiology. 47 (9), 1065-1076 (2001).</li>
<li>Zhang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+basis+of+alarm+pheromone+detection+in+aphids%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Molecular basis of alarm pheromone detection in aphids.</a> Current Biology. 27 (1), 55-61 (2017).</li>
<li>Cui, X., Wu, C., Zhang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+response+patterns+of+16+olfactory+neurons+from+the+trichoid+sensilla+to+odorant+from+fecal+volatiles+in+the+locust%2C+Locusta+migratoria+manilensis%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Insect+Biochemistry+and+Physiology%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological response patterns of 16 olfactory neurons from the trichoid sensilla to odorant from fecal volatiles in the locust, Locusta migratoria manilensis.</a> Archives of Insect Biochemistry and Physiology. 77 (2), 45-57 (2011).</li>
<li>Sharma, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cuticular+hydrocarbon+pheromones+for+social+behavior+and+their+coding+in+the+ant+antenna%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Cuticular hydrocarbon pheromones for social behavior and their coding in the ant antenna.</a> Cell Reports. 12 (8), 1261-1271 (2015).</li>
<li>de Bruyne, M., Clyne, P. J., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor+coding+in+a+model+olfactory+organ%3A+the+Drosophila+maxillary+palp%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Odor coding in a model olfactory organ: the Drosophila maxillary palp.</a> Journal of Neuroscience. 19 (11), 4520-4532 (1999).</li>
<li>Syed, Z., Leal, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maxillary+palps+are+broad+spectrum+odorant+detectors+in+Culex+quinquefasciatus%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Senses%22%5BJournal%5D)">Maxillary palps are broad spectrum odorant detectors in Culex quinquefasciatus.</a> Chemical Senses. 32 (8), 727-738 (2007).</li>
<li>Lu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor+coding+in+the+maxillary+palp+of+the+malaria+vector+mosquito+Anopheles+gambiae%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Odor coding in the maxillary palp of the malaria vector mosquito Anopheles gambiae.</a> Current Biology. 17 (18), 1533-1544 (2007).</li>
<li>Pellegrino, M., Nakagawa, T., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+sensillum+recordings+in+the+insects+Drosophila+melanogaster+and+Anopheles+gambiae%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Single sensillum recordings in the insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae.</a> Journal of Visualized Experiments. 36, e1725(2010).</li>
<li>Grant, A. J., Wigton, B. E., Aghajanian, J. G., O'Connell, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+responses+of+receptor+neurons+in+mosquito+maxillary+palp+sensilla+to+carbon+dioxide%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology+A%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological responses of receptor neurons in mosquito maxillary palp sensilla to carbon dioxide.</a> Journal of Comparative Physiology A. 177 (4), 389-396 (1995).</li>
<li>Blaney, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ultrastructure+of+an+olfactory+sensillum+on+the+maxillary+palps+of+Locusta+migratoria+%28L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+and+Tissue+Research%22%5BJournal%5D)">The ultrastructure of an olfactory sensillum on the maxillary palps of Locusta migratoria (L.).</a> Cell and Tissue Research. 184 (3), 397-409 (1977).</li>
<li>Hassanali, A., Njagi, P. G. N., Bashir, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+ecology+of+locusts+and+related+acridids%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Chemical ecology of locusts and related acridids.</a> Annual Review of Entomology. 50, 223-245 (2005).</li>
<li>Chapman, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contact+chemoreception+in+feeding+by+phytophagous+insects%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Contact chemoreception in feeding by phytophagous insects.</a> Annual Review of Entomology. 48, 455-484 (2003).</li>
<li>Chapman, R. F., Sword, G. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF01049149">The importance of palpation in food selection by a polyphagous grasshopper (Orthoptera: Acrididae).</a> Journal of Insect Behavior. 6, 79-91 (1993).</li>
<li>Winstanley, C., Blaney, W. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1570-7458.1978.tb02839.x/abstract">Chemosensory mechanisms of locusts in relation to feeding.</a> Entomologia Experimentalis et Applicata. 24, 750-758 (1978).</li>
<li>Blaney, W., Duckett, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+significance+of+palpation+by+the+maxillary+palps+of+Locusta+migratoria+%28L.%29%3A+an+electrophysiological+and+behavioural+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The significance of palpation by the maxillary palps of Locusta migratoria (L.): an electrophysiological and behavioural study.</a> Journal of Experimental Biology. 63, 701-712 (1975).</li>
<li>Blaney, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+responses+of+the+terminal+sensilla+on+the+maxillary+palps+of+Locusta+migratoria+%28L.%29+to+some+electrolytes+and+non-electrolytes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological responses of the terminal sensilla on the maxillary palps of Locusta migratoria (L.) to some electrolytes and non-electrolytes.</a> Journal of Experimental Biology. 60, 275-293 (1974).</li>
<li>Jin, X., Zhang, S., Zhang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+odorant-binding+and+chemosensory+proteins+and+spatial+map+of+chemosensilla+on+labial+palps+of+Locusta+migratoria+%28Orthoptera%3A+Acrididae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Anthropod+Structure+%26+Development%22%5BJournal%5D)">Expression of odorant-binding and chemosensory proteins and spatial map of chemosensilla on labial palps of Locusta migratoria (Orthoptera: Acrididae).</a> Anthropod Structure & Development. 35 (1), 47-56 (2006).</li>
<li>Zhang, L., Li, H., Zhang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+olfactory+pathways+to+detect+aldehydes+on+locust+mouthpart%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Two olfactory pathways to detect aldehydes on locust mouthpart.</a> International Journal of Biological Sciences. 13 (6), 759-771 (2017).</li>
<li>Dweck, H. K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+channels+associated+with+the+Drosophila+maxillary+palp+mediate+short-+and+long-range+attraction%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Olfactory channels associated with the Drosophila maxillary palp mediate short- and long-range attraction.</a> eLife. 5, e14925(2016).</li>
<li>Bohbot, J. D., Sparks, J. T., Dickens, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+maxillary+palp+of+Aedes+aegypti%2C+a+model+of+multisensory+Integration%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Biochemistry+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">The maxillary palp of Aedes aegypti, a model of multisensory Integration.</a> Insect Biochemistry and Molecular Biology. 48, 29-39 (2014).</li>
<li>Delventhal, R., Kiely, A., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+recording+from+Drosophila+labellar+taste+sensilla%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological recording from Drosophila labellar taste sensilla.</a> Journal of Visualized Experiments. 84, e51355(2014).</li>
<li>Ng, R., Lin, H. H., Wang, J. W., Su, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+recording+from+Drosophila+trichoid+sensilla+in+response+to+odorants+of+low+volatility%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological recording from Drosophila trichoid sensilla in response to odorants of low volatility.</a> Journal of Visualized Experiments. 125, e56147(2017).</li>
<li>Syed, Z., Leal, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+measurements+from+a+moth+olfactory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological measurements from a moth olfactory system.</a> Journal of Visualized Experiments. 49, e2489(2011).</li>
<li>Saha, D., Leong, K., Katta, N., Raman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-unit+recording+methods+to+characterize+neural+activity+in+the+locust+%28Schistocerca+Americana%29+olfactory+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Multi-unit recording methods to characterize neural activity in the locust (Schistocerca Americana) olfactory circuits.</a> Journal of Visualized Experiments. 71, e50139(2013).</li>
<li>Liu, F., Liu, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+single+sensillum+recording+to+detect+olfactory+neuron+responses+of+bed+bugs+to+semiochemicals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Using single sensillum recording to detect olfactory neuron responses of bed bugs to semiochemicals.</a> Journal of Visualized Experiments. 107, e53337(2016).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Böcekler yiyecek kokular algılamaya dokunacı üzerinde itimat ve onların dokunacı türleşme13,27içinde önemli bir rol oynadığı düşünülmektedir. Dokunacı basit koku organları ve temel chemosensation28neuromolecular keşfi için çekici bir model iletişim gibi artan dikkat alıyorsanız.
Böcek labellar ve palp SSRs başarıyla Drosophila melanogaster, anofel gambiaeve Culex quinquefasciatus<sup c...

Hayvanlar bir dizi eksojen kimyasal ipuçları anlamda chemosensory organları gelişmiştir. Böcekler, anten ve dokunacı en önemli chemosensory organları vardır. Bu organların chemosensory saç chemosensory sensilla olarak adlandırılan, çeşitli kıllar içinde chemosensory nöronlar (CSNs) tarafından innervated. CSNs chemosensory sensilla içinde kimyasal uyaranlara üzerinden sinyal iletimi için daha sonra merkezi sinir sistemleri1,2kadar,3 transfer edilen elektrik potansiyelleri ile belirli kimyasal ipuçlarını tanımak .
CSNs hızlı çeşitli chemosensory reseptörleri [Örneğin, propil reseptörleri (ORs)], ionotropic reseptörleri (IRS) ve chemosensation farklı türleri ile ilişkili eksojen kimyasal cues kodlamak onların membranlar üzerinde tat reseptörleri (gr) 4,5,6. CSNs karakterizasyonu hücresel ve moleküler mekanizmaları böcek chemoreception için aydınlatma anahtarıdır. Şimdi böcek CSNs dahil olmak üzere birçok böcek antennal sensilla karakterizasyonu7sinekler için tek sensillum kaydı (SSR) yaygın olarak kullanılan bir teknik, pervane8, böcekleri9, yaprak bitleri10, çekirgeler11, ve karıncalar12. Çünkü onların sensilla belirli yapıları yapmak ancak, birkaç çalışmalar bir SSR böcek dokunacı13,14,15,16,17' ye, uyguladığınız bir elektrofizyolojik kayıt zor18.
Çekirge (düz kanatlılar) sürüleri kez ciddi ürün hasar ve ekonomik kayıp19neden. Dokunacı çekirge20,21,22,23,24gıda seçiminde önemli bir rol oynadığı düşünülmektedir. Chemosensory sensilla iki tür bir taramalı elektron mikroskobu (SEM) tarafından incelenmiştir. Genellikle, 350 sensilla chaetica ve 7-8 sensilla basiconica her kubbe locust dokunacı18gözlenir. Sensilla chaetica sensilla basiconica var ise uçucu kimyasal cues algılama bir koku alma işlevi, geçici olmayan kimyasal yardımlar anlamda tat sensilla vardır.
Locust dokunacı üzerinde sensilla basiconica (ca. 12 µm), saç yuva çapları bu sensilla chaetica daha çok daha büyük (ca. 8 µm)18,25. Dokunacı üzerinde sensilla basiconica cuticular duvar antennal sensilla18çok kalın. Buna ek olarak, palp kubbesi sıvı içeriği son derece esnek bir manikür içinde vardır. Bu özellikleri bir elektrot ve iyi elektrofizyolojik sinyalleri bir edinimi bir nüfuz için antennal sensilla daha zor olduğu anlamına gelir. Bu yazıda, detaylı ve son derece etkili SSR Protokolü locust palp sensilla basiconica için bir video ile sunulur.

<table><tbody><tr><td>Tungsten tel</td><td>ADVENT</td><td>W559504</td><td>Elektrot yapmak ve palp</td></tr><tr><td>NaNO2</td><td>Sigma-aldrich</td><td>563218-25G'yi</td><td>sabitlemek için kullanılır Tungsten teli keskinleştirmek için kullanılır</td></tr><tr><td>AC Güç</td><td>Kaynağı Syntech</td><td>A2-70</td><td>Tungsten telin keskinleştirilmesinde voltajın sağlanması</td></tr><tr><td>Stereoskop</td><td>Motic</td><td>SMZ-163</td><td>Gözlemlemek için kullanılır tungsten telin bilenmesi</td></tr><tr><td>Mikroskop</td><td>Olympus</td><td>W-51</td><td>Çekirge maksiller palp'ta sensilla'yı gözlemlemek için kullanılır</td></tr><tr><td>Akıllı Veri Toplama Denetleyicisi</td><td>Syntech</td><td>IDAC-4</td><td>Kayıt öncesi ve sırasında tüm sinyallerin gerçek zamanlı ekran görüntüsü</td></tr><tr><td>Uyaran kontrolörü</td><td>Syntech</td><td>CS-55</td><td>Uyaran uygulamasını kontrol etmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Elektronik mikromanipülatör</td><td>C.M.D.T</td><td>CFT-8301D</td><td>Kayıt elektrodunun küçük hareketi için kullanılır</td></tr><tr><td>Mikromanipülatör</td><td>Narishige</td><td>MN-151</td><td>Referans elektrodunun küçük hareketi için kullanılır</td></tr><tr><td>Hoparlör</td><td>EDIFIER</td><td>R101T06</td><td>IDAC-4 ile bağlantılı ve sinyal için ses sağlar</td></tr><tr><td>Manyetik taban</td><td>PDOK</td><td>PD-101</td><td>Elektrodu ve uyaran dağıtım tüpünü tutmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Titreşim İzolasyon Tablosu</td><td>TianHe</td><td>HAP-100-1208</td><td>Ekipmandan gelen titreşimi izole etmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Cam slayt</td><td>CITOGLAS</td><td>ZBP-407</td> MPH Blu-tack <td>Bostik</td></tr><tr><td></td><td></td><td>Blu-tack-45g</td> için taban yapmak için kullanılır <td>Tungsten telin sabitlenmesi</td></tr><tr><td>Pasteur tüpü</td><td>YARE</td><td>WITEG</td><td>Uyaran uyaran çözeltileri içeren filtre kağıdının yerleştirilmesi</td></tr></tbody></table>

tek sensillum kayıtları locust palp sensilla basiconica için

Single Sensillum Recordings for Locust Palp Sensilla Basiconica

Locust ağız dokunacı bir çekirge'nın gıda seçimi, geçici olmayan kimyasal ipuçları aracılığıyla (daha önce terminal sensilla adlı sensilla chaetica tespiti için özellikle önemli bir rol oynamaktadır geleneksel tat organ olarak kabul edilir veya tepeli sensilla) Şimdi bu dokunacı de koku bir işlevi var kanıt artan vardır. Bir propil reseptör (LmigOR2) ve propil-bağlayıcı protein (LmigOBP1) sinir hücreleri ve aksesuar hücreler, sırasıyla, dokunacı sensilla basiconica yerelleştirilmiş. Tek sensillum (SSR) kayıt belirli propil reseptörleri üzerinde etkin ligandlar süzmek için etkili bir yöntem olduğu propil reseptör nöronlar, yanıt kaydetmek için kullanılır. SSR palp sensilla propil reseptörlerinin fonksiyonel çalışmalarda kullanılır. Dokunacı kubbe üzerinde bulunan sensilla basiconica yapısını biraz bu anten üzerinde yapıdan farklıdır. Bu nedenle, bir SSR odorants tarafından elde edildi işlemi sırasında belirli bir tavsiye en iyi sonuçları elde etmek için yararlı olabilir. Bu yazıda, böcek palp sensilla basiconica gelen bir SSR için detaylı ve son derece etkili bir protokol tanıttı.

İki sensilla alt türlerinden (pb1 ve pb2) keçiboynuzu üst palp üzerinde farklı yanıt dinamikleri kimyasal odorants (% 10 1-nonal ve % 10 nonanoic asit) göre tanımlanır. Pb1 nöronlarda için 1-nonal nonanoic aside pb2 nöronlarda süre önemli ölçüde daha az 1-nonal nonanoic asit (Şekil 4) ile karşılaştırıldığında tarafından aktive daha önemli ölçüde daha fazla sivri üretmek. Diehydroabietinal ve E-2-Hexenal yanıtı (POR)26açılış locust palp...

Bu kağıt sensilla basiconica tek sensillum kayıtları için detaylı ve son derece etkili iletişim kuralı böcek ağız dokunacı üzerinde açıklar.

Tek Sensillum kayıtları Locust Palp Sensilla Basiconica için

The palps of locust mouthparts are considered to be conventional gustatory organs that play an important role in a locust&#39;s food selection, especially ...

Bu prosedürün genel amacı, böcek palpiyesi Sensilla Basiconica'dan tek sensillum kayıtları yapmak için ayrıntılı ve oldukça etkili bir protokol sunmaktır. Mastered olduğundan, diseksiyon kemoresepsiyon alanındaki önemli soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Palp sensilla'da spesifik koku reseptörüne izin vererek.Bunun ana avantajı, bir kayıt cihazı kullanın Sensilla Basiconia palpların çekirgesi. Tungsten elektrotları hazırlamak için önce bir mikro manipülatöre yeni bir tungsten teli takın ve 40 kat büyütme altında gözlemleyin. Şimdi% 10 sodyum nitrit uygulamak için bir şırınga kullanırken 10 volt vererek teli keskinleştirin.Daha sonra gücü beş volta düşürün ve bir dakikadan fazla bir süre boyunca keskinleştirilmiş telin dört milimetresini tekrar tekrar sodyum nitrit çözeltisine batırın. Kullanım sırasında, uç bir çekirge kütikülüne nüfuz edecek kadar ince olmalıdır: avuç içi, koku alma duyusu. Daha sonra uyarıcı çözeltileri hazırlayın.Mineral yağdaki kimyasal uyarıcı maddelerin her birini seyreltin. Mineral yağda% 10 1-Nonanol ve Nonanoik asit dilüsyonları yapın. Daha sonra mineral yağda bir dizi on kat seri E-2-Heksenal ve Heksanal seyreltme yapın.Daha sonra uyaranlarla yüklü P

single-sensillum-recordings-for-locust-palp-sensilla-basiconica

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Koku için koku alma duyu nöronlarının elektrofizyolojik yanıtlar tek sensillum kayıtları kullanarak böcekleri ölçülebilir. Bu video makalede, sirke sineği antenler tek sensillum kayıtları nasıl gerçekleştirileceği gösterecektir...

Böcekler Tek Sensillum Kayıtlar Drosophila melanogaster Ve Anofel gambiae</em

Böcek koku alma sistemleri electroantennograms (EAG) ve anteni bulunan tüm odorant reseptör nöronları (ORNs) ve bireysel ev sahipliği bu yanıtları toplanır tek sensillum kayıtları (SSR), formları kayıt odorant indüklenen yanıtları için eşsiz fırsatlar sunmaya sırasıyla sensilla.

Güve Koku Sistemi Elektrofizyolojik Ölçümler

Bu makale, mineral yağ altında ekstrasellüler, ucu kayıtları üzerinden bireysel sensilla kimyasal stimülasyon izole bir elektrofizyolojik yöntem açıklanır.

Akrep Peg Sensilla elektrofizyolojisi

Bu videoda, canlı bir Drosophila sineği elektrofizyolojik çalışmalar için bir tüpe monte edilmiştir. Elektrotlar, sineğin koku alma reseptör nöronları ile feromonlara spesifik nöronal tepkileri kaydetmek için sensillumun tabanına yerleştirilir.

Drosophila Sensilla'dan Uçucu Koku Maddelerine Yanıt Olarak Elektrofizyolojik Kayıtlar

Biz omurgasız koku yolunun ilk üç aşamada koku-uyarılmış yanıtlar karakterize etmek ekstraselüler çoklu ünite kayıt tekniği varyasyonları göstermektedir. Bu teknikler kolayca başka sinir sistemlerinin topluluk etkinliği incelemek için adapte edilebilir.

Locust Sinir Aktivitesi Karakterize Multi-ünite Kayıt Yöntemleri (<em&gt; Schistocerca Americana</em&gt;) Olfaktör Devreler

Bu protokol Drosophila labellar tat nöronlar tarafından ateş aksiyon potansiyel yanıtları hücre dışı kayıt açıklar.

Elektrofizyolojik Kayıt<em&gt; Drosophila</em&gt; Labellar Sensilla Taste

Tahtakuruları, ortamdaki semiyokimyasalları tespit etmek için anten koku alma duyularında bulunan koku alma reseptörü nöronlarına güvenir. Tek sensillum kaydını kullanarak, tahtakurusunun semiokimyasallara tepkisini değerlendirmek ve ilgili kodlama sürecini keşfetmek için bir yöntem gösteriyoruz.

Semiokimyasallar için yatak hataların Koku Nöron Cevapları Algılama Tek Sensillum Kaydı Kullanma

Bu yazıda, özellikle digoxigenin (DIG) etiketli veya biotin etiketli problar kullanılarak böcek antenlerinde, düşük seviyeli Odorant Reseptör (OR) genleri ve diğer genler için yerinde hibridizasyon protokolünde ayrıntılı ve etkili bir RNA açıklanmaktadır.

Locust Antenlerinde Odorant Reseptör Genlerinin RNA ile Lokalizasyonu<em&gt; Yerinde</em&gt; Hibridizasyon

Bu protokolün genel amacı, uzun zincirli kütiküler feromonlara tepki gösteren Drosophila olfaktör reseptör nöronlarından tek duyarlılık kaydı için düşük uçuculukta odorantları nasıl göstereceğini göstermektir.

Elektrofizyolojik Kayıt<em&gt; Drosophila</em&gt; Düşük Volatilite Kokularına Karşı Trikoid Sensilla

Çalışmada böcek sensillasının ultrayapısını gözlemlemek amacıyla tarama ve iletim elektron mikroskobu (sırasıyla SEM ve TEM) örnek hazırlama protokolü sunulmuştur. SEM.Floresan mikroskopide örnek deformasyonu önlemek için fiksatife ara 20 eklenmiştir.

Woodboring Böceği uzantıları için Tarama ve İletim Elektron Mikroskobu Örnek Hazırlama Yöntemi

Nadiren kullanılan bir elektrofizyolojik kayıt yöntemi olan temel kayıt, geleneksel kayıt yöntemleriyle incelenemeyen tat kodlama özelliklerinin analizine olanak tanır. Temel kayıt, geleneksel elektrofizyolojik yöntemler kullanılarak incelenemeyen hidrofobik uyaranlara verilen tat tepkilerinin analizine de izin verir.

Temel Kayıt: Drosophila'da Tat Nöronlarının Tepkilerini Analiz Etmek İçin Bir Teknik

Öğrenin, çekirge palp sensilla basiconica'dan tek sensillum kayıtları yapma yöntemini. Bu teknik, böcek koku alma mekanizmalarını ve duyusal nöron yanıtlarını incelemek için kullanılır.

Tek Sensillum kayıtları Locust Palp Sensilla Basiconica için

Daha fazla video keşfet