Name: Sıçanda Otoskop Görselleştirme ve Davranışsal Clap Startle Yanıtı Kullanılarak Doğrulama ile İletken İşitme Kaybının Basit Cerrahi İndüksiyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-26T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 s
Description: Öğrenin, sıçanlarda iletken işitme kaybını cerrahi timpanik membran delme ve otoskop görselleştirme ile davranışsal clap startle yanıtı kullanarak doğrulama yöntemini. Bu protokol, insan işitme bozuklukları için güvenilir bir hayvan modeli sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma kısmen Hong Kong Araştırma Hibeler Konseyi, Erken Kariyer Programı, Proje #21201217 C. L. tarafından desteklenmiştir, proje beyin haritalama güdümlü elektrofizyoloji ile işitme ve gürültü kirliliği araştırma uygulamalarıiçin . Biz Posgrado en Ciencias Biomédicas, Universidad Nacional Autónoma de México Instituto de Neurobiología (UNAM), Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT) México FaM Manno için Lisansüstü Bursu 578458 için teşekkür ederiz.

Bu çalışma ve prosedürler, Hong Kong City Üniversitesi, Hong Kong Üniversitesi ve Hong Kong Özel İdari Bölgesi Sağlık Bölümü hayvan araştırma etik komiteleri tarafından onaylanmıştır.
1. Hayvanlar
<ol><li>İki aylık Sprague-Dawley (SD) sıçanları kullanın (N = 90, 200-250 g). NOT: Kemirgenler Hong Kong Üniversitesi akredite Laboratuvar Hayvan Birimi tarafından sağlanmıştır.</li>
	<li>Laboratuvar Hayvan Araştırma Birimi'nde sıçanları sabit 25 °C sıcaklık ve %60-70 nem altında muhafaza edin.</li>
	<li>Ev kemirgenler 12/12-h ışık / karanlık döngüleri yiyecek ve içme suyu erişimi ile, reklam libitum.</li>
	<li>CHL ameliyatından en az bir gün önce barınma ortamına acclimate kemirgenler.</li>
	<li>Ketamin ve ksilazin bir kokteyl ile kemirgen almak ve anestezik (80-100 mg /kg: 5-10 mg /kg, sırasıyla) intraperitoneal enjeksiyon yoluyla (ketamin 1.0 mL ile ketamin 0.5 mL ksylazine son konsantrasyon olarak). NOT: 23-25G iğneli 1 mL şırınga kullanın. 30 dk anestezi için sıçanın vücut ağırlığını n yaklaşık 100 g'lık bir ağırlıkta yaklaşık 0,2 mL enjekte edin.</li>
	<li>Ağrı hissi doğrulamak ve uygun anestezi doğrulamak için parmak çimdik gerçekleştirin. Derin parmak sıkışmasına tepki (arka ekstremitenin çekilmesi ile) yetersiz anestezi olduğunu gösterir.</li>
</ol>2. Cerrahi kurulum
<ol><li>Ameliyata başlamadan önce tüm ekipmanları otoklav veya sıcak cam boncuk sterilizatörde sterilize edin. Cerrahi bölgeyi %70 etanol ile temizleyin.</li>
	<li>İşleme başlamadan önce lateks eldiven ve laboratuvar önlüğü kullanın.</li>
	<li>Temiz tezgahüzerine steril bir cerrahi örtü yerleştirin(Şekil 1A).</li>
	<li>Kulak iltihabını en aza indirmek için ameliyat öncesi mikro makas ve otoskopu sterilizeedin (Şekil 1B).</li>
	<li>Mikro makas ve otoskopu steril alana yerleştirin.</li>
	<li>Kemirgeni cerrahi alana ve cerrahla aynı hizaya yerleştirin.</li>
	<li>CHL'nin cerrahi indüksiyonuna devam edin.</li>
</ol>3. İletim işitme kaybının cerrahi indüksiyonu
<ol><li>Kuyruk ve kemirgen başını eğilimli bir pozisyonda hizalanmış yerleştirin, cerraha en yakın baş.</li>
	<li>Sağlıklı timpanik membran sağlamak için kemirgenin sol ve sağ kulağını otoskop altında görselleştirin (Şekil 2a). CHL indüksiyonundan önce sağlıklı durumu doğrulamak için her kemirgenin hem sağ hem de sol kulağını değerlendirin.</li>
	<li>Kulak sarkaç kapmak ve dış işitsel kanal uzatmak (yani, kulak kanalı, dış işitsel meatus, burada işitsel kanal) iç karanlık ve derinlik tarafından kararmış olmasına neden. Burada işitsel kanal TM yüzeyine dik olarak yapılır. NOT: İşitsel konservenin şimdi doğrudan paralel olduğundan ve TM'nin mikro makas takma ekseniyle dik açı oluşturduğundan emin olun. Işıksız siyah bir tüp olarak görselleştirilecektir. Bazen işitsel kanalın kafatasının düzlemsel yüzeyine yaklaşık 15° hafif bir açıyla eğilmesi gerekir. Bu, cerrah elinin TM yüzeyine dik olmasını sağlar.</li>
	<li>İşitsel kanalın ortasındaki mikro makasları, işitsel kanalın dokusunu kesmemeye veya çentiklememeye dikkat ederek tanıtın ve belirsizlik merkezinden yaklaşık olarak yaklaşık olarak 5 mm ilerleyin ve TM'nin merkezinden yavaşça ilerleyin. NOT: Mikro makas uçları TM'yi deldiğinde TM delinmesi bir pop sesi ile doğrulanabilir. Haşhaş sesi videoda yaklaşık 2 dk 52 s olarak duyulabilir. Bu bir makas sesi değil; Bu bir TM delinme sesi. Analiz sonrası ölçülen gibi, "pop" yaklaşık olarak 20 dB SPL yüksek frekanslı mikrofon tarafından kaydedilen arka plan ses daha büyüktür. Bu ölçüde "pop" ses doğrulamak için gerek yoktur, otoskop görselleştirme yeterlidir. Araştırmacının her CHL prosedürü sırasında bir 'pop' sesi duyulmasını sağlama pratiği ne zaman gerekebilir.</li>
	<li>Hemen yay yüklü mikro makası açın ve tm başkanının TM'den uzak bir şekilde yer değiştirmesini sağlamak için TM'yi deldikten sonra üç kez döndürün (sadece malleus deplasmanı isteniyorsa).</li>
	<li>Mikro makası çıkarın ve görselleştirme için kemirgeni otoskopun altına yerleştirin. NOT: Cerrahi işlem den sonra önemli bir kanama olmaması gerektiğini belirtmek gerekir. Kemirgeni ötenazi yapın ve kanama olursa davranışsal değerlendirmeye devam etmeyin.</li>
	<li>Karşı kulakta yukarıdaki gibi devam ederek bilateral CHL'yi indükler.</li>
</ol>4. Otoskop görselleştirme
<ol><li>Kemirgen orta kulak görselleştirmek için küçük çaplı bir spekulum kullanarak bir otoskop ile başarılı bir CHL cerrahisi onaylayın.</li>
	<li>Otoskop altında CHL cerrahi işlem öncesi ve sonrası her kemirgen leri değerlendirin. CHL indüksiyonu sonrası normal TM(Şekil 2a)ve hasarlı TM 'nin doğrulanması(Şekil 2b).</li>
	<li>
Kemirgen için ameliyat sonrası bakım
	<ol>
<li>Sıcak bir lamba altında ev kafesi kemirgen yerleştirin.</li>
		<li>Kemirgen sonrası CHL indüksiyonuna uyun, kemirgen hakları kendisine kadar.</li>
		<li>Bilinci kurtarmak ve iyileşme için ev kafesine kemirgen yerleştirmek için kemirgene glikoz (dekstroz/tuzlu) serum enjekte edin. NOT: CHL ameliyatından sonra 5 mL tuzlu su enjekte etmek için 10 mL şırıngalı 23G iğne kullanın.</li>
		<li>Kemirgeni 24 saatlik iyileşme süresi boyunca iki kez anti-bakteriyel Enrofloksasin 0.05 mg/kg ile kas içi enjekte edin.</li>
		<li>Ameliyat sonrası ağrı davranışı veya semptomları için kemirgeni düzenli olarak gözlemleyin.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. Davranışsal değerlendirme (CHL indüksiyonunun doğrulanması) - clap startle yanıtı
<ol><li>Korozyon CHL (otoskop onayından sonra) 24 saat ameliyat sonrası davranışsal değerlendirme clap-startle-test oluşan.</li>
	<li>CHL indüklenen sıçanı normal bir farenin yanına iki ayrı bitişik kafese yerleştirin.</li>
	<li>Kemirgenleri sessiz bir odaya yerleştirin.</li>
	<li>Kemirgenlerden yaklaşık 0,5 m uzakta durun ve birkaç kez eşit aralıklı sürelerde alkışlayın (5 alkış seçilmiş ve 1 saniye boyunca aralıklı). NOT: El çırpma tarafından üretilen alkış ürkme , yüksek frekanslı mikrofon tarafından kaydedilen arka plan sesinden 40 dB SPL daha büyük olarak ölçülür.</li>
</ol>

<ol><li>Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Change+in+prevalence+of+hearing+loss+in+US+adolescents%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+American+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">Change in prevalence of hearing loss in US adolescents.</a> The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).</li>
<li>Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Summary+health+statistics+for+U.S.+adults%3A+National+health+interview+survey%2C+2001%5BTitle%5D)+AND+%22National+Center+for+Health+Statistics.+Vital+and+health+statistics%22%5BJournal%5D)">Summary health statistics for U.S. adults: National health interview survey, 2001.</a> National Center for Health Statistics. Vital and health statistics. 10 (218), 1-134 (2004).</li>
<li>Gaffney, M., Green, D. R., Gaffney, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Newborn+hearing+screening+and+follow-up%3A+Aare+children+receiving+recommended+services%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Public+Health+Reports%22%5BJournal%5D)">Newborn hearing screening and follow-up: Aare children receiving recommended services?</a> Public Health Reports. 125 (2), 199-207 (2010).</li>
<li>Xu, H., Kotak, V. C., Sanes, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conductive+hearing+loss+disrupts+synaptic+and+spike+adaptation+in+developing+auditory+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Conductive hearing loss disrupts synaptic and spike adaptation in developing auditory cortex.</a> The Journal of Neuroscience. 27 (35), 9417-9426 (2007).</li>
<li>Buran, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sensitive+period+for+the+impact+of+hearing+loss+on+auditory+perception%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A sensitive period for the impact of hearing loss on auditory perception.</a> The Journal of Neuroscience. 34 (6), 2276-2284 (2014).</li>
<li>Finck, A., Sofouglu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Auditory+Research%22%5BJournal%5D)">Auditory sensitivity of the Mongolian gerbil.</a> The Journal of Auditory Research. 6, 313-319 (1966).</li>
<li>Finck, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auditory+sensitivity+of+the+Mongolian+Gerbil+%28Merionesunguiculatus%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Auditory sensitivity of the Mongolian Gerbil (Merionesunguiculatus).</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 41 (60), 1579(1967).</li>
<li>Finck, A., Schneck, C. D., Hartman, A. F. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+auditory+function+in+the+Mongolian+gerbil%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Development of auditory function in the Mongolian gerbil.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 46 (1A), 107(1969).</li>
<li>Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+sensitivity+of+the+Mongolian+gerbil%2C+Meriones+Unguiculatis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Hearing sensitivity of the Mongolian gerbil, Meriones Unguiculatis.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 59, 1222-1226 (1976).</li>
<li>Dallos, P., Harris, D., Ozdamar, O., Ryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral%2C+compound+action+potential%2C+and+single+unit+thresholds%3A+relationship+in+normal+and+abnormal+ears%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Behavioral, compound action potential, and single unit thresholds: relationship in normal and abnormal ears.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 64 (1), 151-157 (1978).</li>
<li>Kelly, J. B., Potash, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directional+responses+to+sounds+in+young+gerbils+%28Meriones+unguiculatus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Psychology%22%5BJournal%5D)">Directional responses to sounds in young gerbils (Meriones unguiculatus.</a> Journal of Comparative Psychology. 100 (1), 37-45 (1986).</li>
<li>Heffner, H. E., Koay, G., Heffner, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+assessment+of+hearing+in+mice--conditioned+suppression%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Behavioral assessment of hearing in mice--conditioned suppression.</a> Current Protocols in Neuroscience. , Chapter 8, Unit 8.21D (2006).</li>
<li>Heffner, R. S., Koay, G., Heffner, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Audiograms+of+five+species+of+rodents%3A+implications+for+the+evolution+of+hearing+and+the+perception+of+pitch%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+Research%22%5BJournal%5D)">Audiograms of five species of rodents: implications for the evolution of hearing and the perception of pitch.</a> Hearing Research. 157 (1-2), 138-152 (2001).</li>
<li>Lupo, E. J., Koka, K., Thornton, J. L., Tollin, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+experimentally+induced+conductive+hearing+loss+on+spectral+and+temporal+aspects+of+sound+transmission+through+the+ear%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+Research%22%5BJournal%5D)">The effects of experimentally induced conductive hearing loss on spectral and temporal aspects of sound transmission through the ear.</a> Hearing Research. 272 (1-2), 30-41 (2011).</li>
<li>Liberman, M. C., Liberman, L. D., Maison, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+conductive+hearing+loss+leads+to+cochlear+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Chronic conductive hearing loss leads to cochlear degeneration.</a> PLoS One. 10 (11), e0142341(2015).</li>
<li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conductive+hearing+loss+results+in+a+decrease+in+central+auditory+system+activity+in+the+young+gerbil%5BTitle%5D)+AND+%22Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">Conductive hearing loss results in a decrease in central auditory system activity in the young gerbil.</a> Laryngoscope. 109, 1359-1371 (1999).</li>
<li>Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+conductive+hearing+loss+on+gerbil+central+auditory+system+activity+in+silence%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of conductive hearing loss on gerbil central auditory system activity in silence.</a> Hearing Research. 155, 124-132 (2001).</li>
<li>Cook, R. D., Hung, T. Y., Miller, R. L., Smith, D. W., Tucci, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+conductive+hearing+loss+on+auditory+nerve+activity+in+gerbil%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of conductive hearing loss on auditory nerve activity in gerbil.</a> Hearing Research. 164, 127-137 (2002).</li>
<li>Albuquerque, A. A., Rossato, M., Oliveira, J. A., Hyppolito, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+the+anatomy+of+ears+from+guinea+pigs+and+rats+and+its+use+in+basic+otologic+research%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Otorhinolaryngology%22%5BJournal%5D)">Understanding the anatomy of ears from guinea pigs and rats and its use in basic otologic research.</a> Brazilian Journal of Otorhinolaryngology. 75, 43-49 (2009).</li>
<li>Li, P., Gao, K., Ding, D., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristic+anatomical+structures+of+rat+temporal+bone%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Otology%22%5BJournal%5D)">Characteristic anatomical structures of rat temporal bone.</a> Journal of Otology. 10, 118-124 (2015).</li>
<li>Judkins, R. F., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+anatomy+of+the+rat+middle+ear%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngology-Head+and+Neck+Surgery%22%5BJournal%5D)">Surgical anatomy of the rat middle ear.</a> Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 117, 438-447 (1997).</li>
<li>Hellström, S., Salén, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy+of+the+rat+middle+ear.+A+study+under+the+dissection+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Anatomica+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Anatomy of the rat middle ear. A study under the dissection microscope.</a> Acta Anatomica (Basel). 112, 346-352 (1982).</li>
<li>Albiin, N., Hellström, S., Salén, B., Stenfors, L. E., Wirell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vascular+supply+of+the+rat+tympanic+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22The+Anatomical+Record%22%5BJournal%5D)">The vascular supply of the rat tympanic membrane.</a> The Anatomical Record. 212, 17-22 (1985).</li>
<li>Li, P., Ding, D., Gao, K., Salvi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+surgical+approaches+to+ear+surgery+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Otology%22%5BJournal%5D)">Standardized surgical approaches to ear surgery in rats.</a> Journal of Otology. 10, 72-77 (2015).</li>
<li>Johansson, U., Hellström, S., Anniko, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Round+window+membrane+in+serous+and+purulent+otitis+media.+Structural+study+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">Round window membrane in serous and purulent otitis media. Structural study in the rat.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 102, 227-235 (1993).</li>
<li>Magnuson, K., Hellström, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+structural+changes+in+the+rat+tympanic+membrane+during+pneumococcal+otitis+media%5BTitle%5D)+AND+%22European+Archives+of+Oto-Rhino-Laryngology%22%5BJournal%5D)">Early structural changes in the rat tympanic membrane during pneumococcal otitis media.</a> European Archives of Oto-Rhino-Laryngology. 251, 393-398 (1994).</li>
<li>Hellström, S., Salén, B., Stenfors, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+site+of+initial+production+and+transport+of+effusion+materials+in+otitis+media+serosa.+A+study+on+rat+middle+ear+cavity%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Oto-Laryngologica%22%5BJournal%5D)">The site of initial production and transport of effusion materials in otitis media serosa. A study on rat middle ear cavity.</a> Acta Oto-Laryngologica. 93, 435-440 (1982).</li>
<li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffolds+for+tympanic+membrane+regeneration+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+A%22%5BJournal%5D)">Scaffolds for tympanic membrane regeneration in rats.</a> Tissue Engineering Part A. 19, 657-668 (2013).</li>
<li>Wang, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+of+chronic+tympanic+membrane+perforation%3A+Ventilation+tube+with+mitomycin+C+and+dexamethasone%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+PediatricOtorhinolaryngology%22%5BJournal%5D)">Rat model of chronic tympanic membrane perforation: Ventilation tube with mitomycin C and dexamethasone.</a> International Journal of PediatricOtorhinolaryngology. 80, 61-68 (2016).</li>
<li>Stenfeldt, K., Johansson, C., Hellström, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+collagen+structure+of+the+tympanic+membrane%3A+collagen+types+I%2C+II%2C+and+III+in+the+healthy+tympanic+membrane%2C+during+healing+of+a+perforation%2C+and+during+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Otolaryngology--Head+%26+Neck+Surgery%22%5BJournal%5D)">The collagen structure of the tympanic membrane: collagen types I, II, and III in the healthy tympanic membrane, during healing of a perforation, and during infection.</a> Archives of Otolaryngology--Head & Neck Surgery. 132, 293-298 (2006).</li>
<li>Zhao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporary+conductive+hearing+loss+in+early+life+impairs+spatial+memory+of+rats+in+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Temporary conductive hearing loss in early life impairs spatial memory of rats in adulthood.</a> Brain and Behavior. 8, e01004(2018).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir mali veya olmayan çıkar çatışması beyan.

Sıçanda otoskop görselleştirme ve davranışsal clap startle yanıtı kullanılarak doğrulama ile CHL'nin basit bir cerrahi indüksiyonunu tanımlıyoruz. Burada fare yöntemini göstermekteyiz ve daha önce bu yöntem gerbillere ve farelere uygulanmıştır. Yöntem kolayca diğer kemirgenler için kabul edilebilir. CHL indüksiyon uyupasyon işitsel kortikal değişikliklerve psikofizik davranış bulguları4,5,16,17...

Çocuklarda ve yetişkinlerde işitme kaybı prevalansı sırasıyla %19,51 ve %15,22'dir. Ancak, anormal işitme taraması olan tüm yenidoğanların yaklaşık %39.3'ü Hastalık Kontrol Merkezleritarafındanrapor edildiği gibi iyileştirici tedavi almazlar 3 . İşitme kaybı yaygın olarak çalışılan bir durumdur ve kemirgen normal işitme ve işitme ile ilgili bozukluklar4,5,6,7,8,9 çalışmak için sağlam bir modeldir ,10,11,12,13,14,15. İletken işitme kaybı (CHL) gibi işitme bozuklukları işitsel korteks te kısa süreli sinaptik depresyonda artışa yol açar4, hangi frekans modülasyon algılama eşikleri ile ilişkili sığ psikometrik eğimler ile sonuçlanır 5. Malleus, timpanik membran (TM) delinmesi veya kulak tıkacının cerrahi olarak çıkarılması/yer değiştirmesi ile iletken işitme kaybı modelleri kolayca kullanılır ve işitme kaybı modeli5,14 hızlı indüksiyon sağlar ,15,16,17,18. Bu protokol ve yöntemin amacı kemirgenlerde basit ve tekrarlanabilir bir CHL modeli göstermektir.
Mevcut protokol ucuzdur (tüm araçlarla birlikte 300 USD) ve farklı araştırma arayışları için kolayca değiştirilebilir. Sıçan orta kulak anatomisi ayrıntılı değerlendirmeler olmuştur19,20,21,22,23, cerrahi yaklaşımlar24, otitis medya modelleri25, 26,27 ve TM delinme rejenerasyon16,17,18,28,29,30, çalışma için ideal bir model yapma işitme kaybı. Burada, basit bir CHL indüksiyon prosedürü sıçanda alkış ürktü yanıtı ile otoskop ve davranışsal değerlendirme ile doğrulama ile açıklanmıştır, daha sonra işitme kaybı ek sekel keşfetmek için kullanılabilir. CHL işlemi TM'nin cerrahi delinmesi ile indüklenir. CHL prosedürünün doğrulanması, TM'nin yokluğunu belirlemek için otoskop görselleştirme ile gerçekleştirilir. Davranışsal değerlendirme yüksek desibel (dB) ses basıncı seviyesi (SPL) el çırpma ile gerçekleştirilir. Bu yöntem daha önce çeşitli kemirgenlerde uygulanmıştır. Bu çoğaltmak kolaydır, sağlam psikometrik farklılıklar ve nöral fizyolojik tepkiler değişiklikler üretir4,5,16,17,18.

<table><tbody><tr><td>Lateks, polivinil veya nitril eldivenler</td><td>AMMEX</td><td></td><td>Pudrasız eldiven kullanın 8 mil</td></tr><tr><td>Mikro yaylı makas (bkz. Şekil 1b)</td><td>RWD Life Science</td><td>S11035-08</td><td>8,0 cm toplam uzunluk, 3,5 mm kesici kenarlı veya benzer mikro forsepsli. Yay hareketli standart cımbız yeterli olacaktır</td></tr><tr><td>Otoskop mini 3000</td><td>HEINE&nbsp;</td><td>D-008.70.120M</td><td>Standart LED otoskop yeterli olacaktır</td></tr><tr><td>Sıçan veya fare</td><td>JAX laboratuvarları</td><td></td><td>Herhangi bir küçük kemirgen&nbsp;</td></tr><tr><td>Küçük kemirgen kafesi</td><td>Tecniplast</td><td>1284L</td><td>CHL kemirgenini işitme kemirgeninden ayırmak için iki kafese ihtiyaç vardır. Kemirgenler birbirleriyle doğrudan temas halindeyse, birbirlerini ürkütürler. Kafes boyutları 365 x 207 x 140 mm, taban alanı: 530 cm2/82.15 in2</td></tr></tbody></table>

sıçanda otoskop görselleştirme ve davranışsal clap startle yanıtı kullanılarak doğrulama ile İletken İşitme kaybının basit cerrahi İndüksiyonu

Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat

İletim seli (CHL) insanlarda yaygın bir işitme bozukluğudur. Protokolün amacı kemirgenlerde CHL indüklemek için basit bir cerrahi işlem tanımlamaktır. Protokol, timpanik membran delinme ile CHL'yi göstermektedir. CHL cerrahisinin doğrulanması otoskop muayenesi ve davranışsal değerlendirme ile clap startle yanıtı ile yapıldı, hem çoğaltılabiliyor hem de güvenilir, ve işitme kaybı nın meydana geldiğini gösteren basit yöntemlerdir. Basit CHL prosedürü, işitme kaybı araştırmalarında farklı takipçiliklere karşı tekrarlanabilirliği ve esnekliği nedeniyle avantajlıdır. Cerrahi bir yaklaşımla CHL'yi indüklemenin sınırlamaları, cerrahi prosedürü gerçekleştirmek için öğrenme eğrisi ve odyolojik muayenede güven ile ilişkilidir. CHL ile işitme bozukluğu nun saptanması, işitme kaybının nöral bulgularını ve davranışsal sonuçlarını kolayca incelemenizi sağlar.

Basit CHL işlemi 90 sıçanüzerinde uygulandı ve bu gruptan 2'sinde önemli kanama lar vardı ve 2'sinde davranışsal alkış ürktültüði gibi ertesi gün işitme kaybı yoktu. Bu dört fare atıldı. Fareler komplikasyonlar nedeniyle tartışmada nedenlerle açıklandığı gibi atılmalıdır. TM delinmesi ve/veya malleus deplasmanı/çıkarılması(Şekil 2B)indükleyen chl ortaya çıkar, bu da davranışsal belirtilere neden olur (örneğin CHL - yüksek sesle dB SPL ürgesine yanıt yoktur). ...

Burada cerrahi timpanik membran delinmesi ve otoskop görselleştirme ve davranışsal değerlendirme ile doğrulama yoluyla çoğaltılabilir iletim kaybı indüksiyonu oluşturmak için bir protokol sayılmaktadır.

Sıçanda Otoskop Görselleştirme ve Davranışsal Clap Startle Yanıtı Kullanılarak Doğrulama ile İletken İşitme Kaybının Basit Cerrahi İndüksiyonu

Conductive hearing loss (CHL) is a prevalent hearing impairment in humans. The goal of the protocol is to describe a simple surgical procedure for ...

Bu çalışmanın genel amacı cerrahi timpanik membran delinmesi ve otoskop görselleştirme ve davranışsal değerlendirme ile güvenilir bir işitme kaybı indüksiyonu oluşturmaktır. Bizim pratik amacı insan işitme iletken bozukluklar için bir model geliştirmektir. Malleus çıkarılmasında basitleştirme olan pratik, iletken işitme kaybı cerrahi prosedürü, otoskop görselleştirme ile iletken işitme kaybını doğrulamak için kullanılan yöntemi ve iletken işitme kaybının meydana geldiğini doğrulayan basit bir davranışsal alkış ürktültelinde gösterilmiştir.Tarif ettiğimiz prosedürün en büyük avantajı non-invaziv prosedürler, otoskop ile iletim liişitme kaybının doğrulanması ve clap startle ile doğrulamadır. Bu çalışma ve prosedürler hayvan araştırma etik komitesi ve Hong Kong City Üniversitesi, Hong Kong Üniversitesi ve Hong Kong Özel İdari Bölgesi Sağlık Bölümü tarafından onaylanmıştır. Mevcut protokol için fareleri seçiyoruz ama herhangi bir kemirgeni seçebilirsiniz.IP enjeksiyonu için uygun anestezi sağlamak için hayvanları tartın. Anestezi için hayvanların uygun doza sahip olması önemlidir. Fareni scruff'dan al.IP enjeksiyonu için ketamin ve ksilazin doğru dozda emin olun ve enjekte. Hiçbir ağrı hissi doğrulamak için parmak çimdik gerçekleştirmek için emin olun. Cerrahi kurulum için anestezili sıçan oluşur, mikrosksors, ve otoskop.Lütfen cerrahi bölgeyi etanol ile iyice temizleyin. Ameliyat perdesini temizlenmiş tezgaha yerleştirin. Daha sonra makas, otoskop ve sıçan tanıtmak.Makasınızın boyutu kemirgenizin boyutuna bağlı olacaktır. Otoskop altında, sağlıklı bir timpanik membran sağlamak için sıçan ın sol ve sağ kulak görselleştirin. Sarkaç kapmak ve gizlenmiş ve kararmış olmak için dış işitsel kanal uzatmak.Burada mikrosksors tanıtacak. Mikrosksorları işitsel kanalın ortasına tanıtım, dokuyu çentiklememeye dikkat edin. Pop ses dinleyin, sonra malleus yerinden sağlamak için büküm.Başarılı bir iletim işitme kaybı ameliyatının teyidi, otoskop ile yapılmalıdır. Ameliyat öncesi ve sonrası her fare kulağını küçük çaplı spekulumlu bir otoskopla değerlendirin. Otoskop ile görüntülendiğinde normal timpanik membran ile delinmiş timpanik membran arasındaki farklar incelenmelidir.Burada, soldaki normal timpanik membran yerinde malleus başı vardır ve büyük ölçüde sağdaki delinmiş timpanik membran farklıdır. Delinmiş timpanik membran, iletim işitme kaybı ameliyatından sonra, malleus yerinden ve pars tensa malleus umbo ve baş tamamen eksik ile yırtılmış vardır. Kemirgenler için ameliyat sonrası bakım.Sıcak bir lamba altında ev kafesinde kemirgen yerleştirin ve antibakteriyel ajanlar ve glikoz ile enjekte. Davranışsal alkış ürktüsü ile doğrulayın bağ işitme kaybı. CHL sıçan iki bitişik kafeslerde normal bir sıçan yanında yerleştirilir.Bunlar sessiz bir odaya yerleştirilir. Yarım metre uzakta durun ve belirli sayıda eşit aralıklı sürelerde alkışlayın. Burada beş tane seçiyoruz.Burada, temsili davranışsal sonuçlarımız. Alttaki farenin yüksek sesle alkış sesine atlamadığını unutmayın. Ekranın üst kısmındaki sıçan bu yüksek alkış sesleri ile ürküttü.Lütfen bu iki sıçan için alkış farkını inceleyin. İletim işitme kaybına neden olmak için başarısızlık. İletim işitme kaybına neden olunmaması bir veya her iki kulakta kanamadan kaynaklanabilir.Ve bu durumda, kemirgen ötenazi yapılmalı. Bu makas timpanik membran ile temas olmadığını gösterir. İşlem sırasında haşhaş sesi yok.Bir hayır haşhaş ses iletken işitme kaybı prosedürü kötü ve temiz olmadığını gösterir. Bir haşhaş sesi mikrosksör timpanik membran ile doğrudan temas olmadığı anlamına gelir. Otoskop görselleştirmesi.Otoskopla görselleştirildiğinde timpanik membran normal görünüyorsa, bu hiçbir CHL oluştuğunu gösterir. Yüksek sesle alkış ses testine bir yanıt. Bu, hiçbir CHL oluştu ve kemirgen iletken işitme kaybı yok gösterir.Bu, bir fare atlar veya yüksek bir alkış sesi ile ürküttü oluşur. Tarif ettiğimiz prosedürün en büyük avantajı non-invaziv prosedürler, otoskop ile iletim liişitme kaybının doğrulanması ve clap startle ile doğrulamadır. Pratik yaptıktan sonra, bir kemirgen modelinde iletim işitme kaybı neden olabilir ve bu işitme bozukluğu davranışsal ve psikofiziksel belirtileri keşfetmek.

simple-surgical-induction-conductive-hearing-loss-with-verification

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Sıçanlarda işitsel protez araştırma için klasik bir korku klima davranışsal paradigmanın uygulaması açıklanmıştır. Bu paradigma, her iki algılama belirlenmesi için mekanizması, ve bir sonuç ölçütü olarak kalp hızı kullanılarak farklı akustik ve elektrik uyaranlar arasında ayrımcılık sağlar.

Bir Klasik Koşullanma ve Kalp hızı Yaklaşımı ile İşitsel Akustik ve Elektrik uyarıcı Stimulus Çifti Ayrımcılığın Davranış Belirlenmesi

Bozukluklar veya phantom algıları (subjektif tinnitus) işitme, işitme eşik gibi parametreleri işitme davranışsal belirlenmesi için hızlı ve ucuz bir yöntem tarif edilmiştir. Bu akustik irkilme tepkisi öncesi nabız inhibisyonu kullanır ve kolay programlanabilir bir AD / DA çevirici ve bir piezo sensör kullanarak bir kişisel bilgisayara uygulanabilir.

Kemirgenler Davranış Odyometri için Düşük Maliyetli Kurulum

Bu video, sıçan yavrularından işitsel beyin sapı tepkilerini (ABR'ler) kaydetmek için bir yöntem göstermektedir. Nöral tepkileri değerlendirmek için beyin sapında elektrot yerleştirme, ses uyaran uygulaması ve sinyal işleme analizi adımlarını ana hatlarıyla belirtir.

Bir Sıçan Yavrusunda İşitsel Beyin Sapı Tepkilerinin Kaydedilmesi

Bu video, işitme engelli bir fareye koklear cihaz yerleştirme ve işitsel beyin sapı tepkilerini kaydetmek için elektriksel uyaranlar uygulama prosedürünü göstermektedir. Bu prosedür, elektriksel işitmenin temel mekanizmalarının anlaşılmasını sağlar ve koklear implant teknolojisi ve işitsel sinirbilimdeki ilerlemelere katkıda bulunabilir.

Sağır Olmuş Bir Farede Elektrikle Uyarılmış İşitsel Beyin Sapı Tepkilerinin Kaydedilmesi

Farklı elektrot kaplamalar elektrokimyasal, kimyasal ve mekanik özellikleri değişiklikler yoluyla sinir kayıt performansını etkileyebilir. In vitro elektrot karşılaştırması, ancak in vivo yanıt karşılaştırılması tipik olarak elektrot / nöron mesafede ve hayvanlar arasında farklılıklar ile komplike nispeten basittir. Bu makalede, nöral kayıt elektrotları karşılaştırmak için sağlam bir yöntem sağlar.

Sinir Kayıt Elekrtotların Sistematik Elektrokimyasal ve Elektrofizyolojik Değerlendirme için Bir Yöntem

Koklear implantlar (CI) işitme siniri doğrudan elektriksel stimülasyon ile işitme sağlarlar. Bununla birlikte, kötü sıklığı ve yoğunluğu çözünürlüğü CI ile işitme kalitesini sınırlar. Burada işitsel araştırma ve gelecekteki CI'ler geliştirmek için alternatif bir strateji olarak farelerde işitme sinirinin Optogenetic uyarılmasını açıklamaktadır.

İşitsel Sinir optogenetic uyarılması

Biz bir teknik trans-tympanic rota üzerinden uyuşturucu yerelleştirilmiş yönetim koklea içine için mevcut. Bu rota üzerinden ilaç dağıtım gibi sisplatin kemoterapi ilaçların anti-kanser etkinliği ile müdahale olmaz.

Trans-Tympanic ilaç dağıtım ototoksisite tedavisi için

Bu iletişim kuralı İşitsel Beyin Sapı Davranım Odyometrisi postnatal fare pups üzerinden kaydetmek için yöntemler açıklanır. Dış saç hücreleri fonksiyonel gelişimi incelemek için tüm hücreli yama kelepçe dış saç hücreleri izole kayıt deneysel işlemin adım adım açıklanmıştır.

İşitsel Beyin Sapı Davranım Odyometrisi ve dış saç hücre bütün hücreli yama kelepçe kayıt Doğum sonrası sıçanlarda

Bu iletişim kuralı cerrahi labyrinthectomy vestibüler sistem çalışmak için kullanışlı bir yöntemdir bir farenin açıklar.

Vestibüler sistem çalışmaya farenin cerrahi Labyrinthectomy

Koklear implant hayvan modelleri elektrik stimülasyonu ile kalıcı sensorinöral işitme kaybı tedavisinde teknolojik üsler bilgisine ilerletebilirsiniz. Bu çalışmada akut sağır edici ve fareler hem de işlevsel değerlendirme İşitsel Beyin Sapı Davranım Odyometrisi ile bir elektrot dizinin koklear implantasyon için cerrahi bir Protokolü sunar.

Koklear Implant ameliyatı ve elektriksel olarak uyarılmış işitsel beyin sapı yanıt kayıtları C57BL/6 farelerde

Burada, gürültüye bağlı işitme kaybının (NIHL) bir fare modeli için bir protokol sunuyoruz. NIHL'yi teşvik etmek için oluklu plastik, bir fare kapanı kafesi ve bir hoparlör kullanarak yeni ve basit bir cihaz geliştirdik. İşitme fonksiyonunu değerlendirmek için sırasıyla işitsel beyin sapı yanıtı ve immünofloresan görüntüleme ve dış tüylü hücre hasarı kullanıldı.

Farelerde Gürültüye Bağlı İşitme Kaybı için Değiştirilmiş Deneysel Koşullar ve İşitme Fonksiyonu ve Dış Tüylü Hücre Hasarının Değerlendirilmesi

Öğrenin, sıçanlarda iletken işitme kaybını cerrahi timpanik membran delme ve otoskop görselleştirme ile davranışsal clap startle yanıtı kullanarak doğrulama yöntemini. Bu protokol, insan işitme bozuklukları için güvenilir bir hayvan modeli sunar.

Sıçanda Otoskop Görselleştirme ve Davranışsal Clap Startle Yanıtı Kullanılarak Doğrulama ile İletken İşitme Kaybının Basit Cerrahi İndüksiyonu (Video) | JoVE Journal

Sıçanda Otoskop Görselleştirme ve Davranışsal Clap Startle Yanıtı Kullanılarak Doğrulama ile İletken İşitme Kaybının Basit Cerrahi İndüksiyonu

Daha fazla video keşfet