Koklear Implant ameliyatı ve elektriksel olarak uyarılmış işitsel beyin sapı yanıt kayıtları C57BL/6 farelerde

Koklear implant hayvan modelleri elektrik stimülasyonu ile kalıcı sensorinöral işitme kaybı tedavisinde teknolojik üsler bilgisine ilerletebilirsiniz. Bu çalışmada akut sağır edici ve fareler hem de işlevsel değerlendirme İşitsel Beyin Sapı Davranım Odyometrisi ile bir elektrot dizinin koklear implantasyon için cerrahi bir Protokolü sunar.

Koklear implantların hayvan modelleri, kalıcı duyusal sinirsel işitme kaybını elektrik stimülasyonu ile tedavi etmenin teknolojik temeli hakkındaki bilgimizi ilerletebilir. Bu protokol farede akut sağır edici ve koklear implantasyon göstermektedir. Ve işitsel beyin sapı yanıtı ile koklear implant stimülasyonufonksiyonel değerlendirilmesi.

Farelerde koklear implant cerrahisi yapmanın bazı temel zorlukları koklea küçük boyutu ve yuvarlak pencere niş yakınında büyük stapedial arter varlığı vardır. Normal işitme durumunu ölçmek için, bir mililitreşli şırınga içine akustik köpük yükleyin ve bir anestezi sekiz ila on iki haftalık C57 siyah 6 fare nin kontralateral kulak kanalına köpük 100 ila 200 mikrolitre enjekte ipsilateral kulak gelen işitsel beyin kök yanıtı izole etmek için, şırınga kulak kanalı içine köpük teslim ivedi kulak için kulak yakın mühürler dikkat. Daha sonra, ipsilateral kulaktan 10 santimetre lik bir hoparlör yerleştirin ve aVR elektrotlarını %70 etanol ile temizleyin.

Referans elektrotu ipsilateral kulağın pinna sının altına ve aktif elektrotun vertex'in derisinin altına yerleştirin. Zemin elektrotunun arka bacağının derisinin altına konmuştur. Başlık ve preamplifikatör optik fiber bağlantı noktası üzerinden işitsel işlemciye bağlayın.

Ve aktif ve referans elektrotların empedansını kontrol edin. Elektrotlar aynı empedansı gösterdiğinde, ses geçirmez kabini kapatın ve tıklama stimülasyonunu sunun. Uygun karmaşık işitsel işlemci ve yazılım ile aVR'yi serbest alan koşulunda kaydetme.

10 milisaniyelik kayıt penceresinde 10 desibel basamakta ses basıncı seviyesinin 90 desibelden 10 desibel ses basıncı seviyesine düşüren tıklama seviyesiyle 21 hertz'de sunulan 0,1 milisaniye tek kanalmonophasik tıklamaları standartlaştırın. Daha sonra aVR eşiğini tanınabilir bir aVR dalga tepkisi ile en düşük desibel düzeyi olarak belirleyin. Sağır edici ikna etmek için, hava yolları açık kalması için vücut düz tutmak için dikkat ederek sağ tarafında fare yerleştirin.

Ipsilateral kulağın arkasındaki kürkü çıkarın ve maruz kalan cildi sıralı %70 etanol çözeltisi ve Povione-İyot Solüsyonu Scrubs ile dezenfekte edin. Bir diseksiyon mikroskop altında hayvan hareket ettirin ve 16 kez objektif ve bir neşter kullanarak bir buçuk santimetre lik postaüri kesisi yapın. 25-40x büyütme altında, maruz kalan deri altı yağ tabakası ile künt incelemek ve timpanik bulla periost ortaya çıkarmak için sternokleidomastoid kas geri çekmek için forceps kullanın.

Yüz sinirsternokleidomastoid kas ın arka sırt kenarı etrafında sarar ve pinna doğru kulak kanalı boyunca rostrally çalışır. İşitsel bulla belirlenmesi için bir dönüm noktası olarak yüz siniri kullanarak yavaşça bulla erişim için kesi içine kendini istinat retraktör aracı yerleştirin. Bulla ve mastoid süreci arasındaki sırtın net görselleştirme sağlamak ve nazik sırtın arka üst tarafında bir delik oluşturmak için bulla içine 30 guage iğne döndürmek için bulla mediodorsal alan üzerinde doku çıkarın.

Orta kulak boşluğu ortaya çıkana kadar bullastomi genişletmek için ince uçlu forceps ile çimdik küçük kemik parçaları. Ve yuvarlak pencere niş kemik örten açık olana kadar mastoid sürecine doğru delik dorsally uzatın. En kritik adım pencere nişinin hazırlanmasıdır.

Böylece stapedial arter zarar vermemek için zaman ayırın emin olun. Stapedial arter zarar vermemeye dikkat, stapes görselleştirmek için ön üstün yönde bullastomi uzatmak, oval pencereye bağlı orta kulak kemiği. Sonra oval pencereyi ortaya çıkarmak için stapes kaldırın.

Ototoksik ajan uygulamak için, hafifçe yuvarlak ve oval pencere zarları delik için körpli 30 guage iğne kullanın, perilenf biterse doğrulayan. Ve oval pencereden PBS çözünmüş hacim neomisin tarafından% 5 ağırlık 0.2 mililitre perfuse yavaş yavaş 30 gauge iğne ile donatılmış bir mililitreşşük kullanın. Tüm madde hacmi teslim edildiğinde, çözeltiyi yuvarlak pencereye kadar kullanarak pencere kemik yapılarına zarar vermemeye özen gösterilmiştir.

Ve yuvarlak pencere ve oval pencere niş içinde neomisin batırılmış spongostan bir milimetre kare parçalar yerleştirin. Daha sonra retraktörü çıkarın ve 30 dakika sonra gösterildiği gibi sağır edici sonrası akustik aVR kaydederek kesiği kapatın. Koklear implant elektrot dizisini yerleştirmek için, retraktör aletini bulbaya yeniden erişmek için kesiye geri yerleştirin ve elektrot dizisini dizinin dördüncü platin halkasının yuvarlak pencerenin hemen içinde yer alacak şekilde scala timpanisine yerleştirin.

Elektrot dizisinin eklenmesi de zor olabilir. Bu yüzden tel kurşun ve başka bir dizi eklemek için bir forcep aracı kullanarak iyi bir ekleme açısı bulmak için zaman ayırın. Kurşun teli bullanın içine sarın ve teli bulonun üzerindeki dokuya yapıştırın.

Retraktörü dikkatlice çıkardıktan ve eklemeyi doku tutkalı ile kapattıktan sonra, aktif ve referans aVR elektrotlarının olacağı çizgiye dik olarak boyunda 0,5 milimetrelik bir kesi yapmak için bir scalepel kullanın. Yerleştirme de zemin topu yerleştirin ve hayvan uyarıcı platformuelektrot dizi kurulu bağlayın. Gerçekleştirmek ve elektrikli aVR için, elektrotlar daha önce gösterildiği gibi yerleştirin ve hayvan uyarıcı platform yazılımı açın.

Daha sonra elektrik darbestimülasyon paradigmasını tanımlayın ve TBT Headstage, preamplifikatör ve işitsel işlemci aracılığıyla uyarılmış elektrikli aVR yanıtlarını sürekli olarak kaydeden elektrikli darbe litrenleri sunun. Ameliyat öncesi ve sonrası işitme eşikleri sağır edici prosedürün fonksiyonel bir okuması olarak hizmet vermektedir. Oval ve yuvarlak pencerelere %5 neomisin topikal uygulama tıklanan uyarılan işitme eşiklerini önemli ölçüde artırır.

Bir intrakoklear elektrot sonrası sağır elektrik stimülasyonu güvenilir elektrik aVR aktivitesi oluşturabilir. Bazı durumlarda koklear implant stimülasyonu fasiyal siniri aktive eder ve dalga III'ün üç milisaniye civarında hızlı bir amplifikasyonu ve muhtemelen yüz sinirinin doğrudan yanıtı veya beş ila altı milisaniye civarında görünen ve işitsel olmayan miyojenik bir yanıt olması muhtemel uzun bir gecikme ile karakterize kısa bir gecikme li yüksek genlik dalgası üretir. , dolaylı olarak yüz sinir tarafından çağrıldı. Bu çalışmada koklear implant fare modelinin uygulanabilir olduğunu ve koklear implantın küçük ve cerrahi: zorlu olduğunu gösterdik.

Bu prosedürü denerken, aVR kayıtlarındaki elektrofonik yanıtları ortadan kaldırmak ve çoğu C.I. kullanıcısında bulunan saç hücresi kaybını taklit etmek için sağır edici bir protokol dikkate almak önemlidir. Özetle, insan sağırlık genetik modellerinin giderek artan sayıda ve farelerde mevcut biyomedikal araçlar bize koklear implantlar için de dahil olmak üzere araç araştırma için cazip bir hayvan modeli yapar.