Kemik iliği türevi fare dendritik hücreleri ve makrofajlar floresan Fusion proteinlerin ifade

Bu yöntem, bu hücre tiplerinde çeşitli proteinlerin alt hücresel lokalizasyonu ve dinamiği hakkında makrofaj ve dendritik hücre biyolojisi alanlarındaki anahtar soruların yanıtlatılmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin başlıca avantajları nispeten basit, ucuz ve diğer mevcut yöntemlerin çoğunluğu daha iyi bir verimlilik ve ifade istikrarı göstermektedir. Prosedürü gösteren Jarmila Kralova, benim laboratuvarımdan yüksek lisans öğrencisi olacak.

Retrovirüs üretmek için, 10 santimetre petri kabında Platin Eko-ambalaj hücrelerinin tek hücreli süspansiyon plaka ve DMEM 15 mililitre hücreleri yetiştirmek, ile takviye 10%fetal sığır serum, veya FBS, kültür kadar 50-60%fluent. Ertesi gün, 20 mikrogram lık retroviral ilgi yapısı ve 10 mikrogram PCL eko-ambalaj vektörü 1 mililitre DMEM'e serumsuz, yumuşak karıştırma ile ekleyin. Oda sıcaklığında beş dakikalık kuluçka için serum ve antibiyotik olmadan DMEM 1 mililitre PEI 75 mikrolitre ekleyin ve oda sıcaklığında ek bir 10 dakikalık kuluçka için birlikte her iki tüpün içeriğini karıştırın.