Name: Veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu bir mouse (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-24T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 41 s
Description: Öğrenin, veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu (ECMO) yöntemini fare modelinde uygulayarak akut ve kronik akciğer hastalıklarının moleküler mekanizmalarını incelemeyi. Bu protokol, solunum yetmezliği tedavileri için değerli bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu proje KFO 311 hibe Deutsche Forschungsgemeinschaft tarafından desteklenmiştir.

12 hafta yaşlı erkek C57BL/6 fareler üzerinde deneyler yapıldı. Bu çalışma protokolü TSA 16/2250 altında Alman hayvan hukukun kuralları uygun olarak yapılmıştır.
1. malzeme hazırlama
Not: Tüm adımlar temiz, steril olmayan koşullar altında gerçekleştirilir. Hayvan postoperatively hayatta ise Steril koşullar gerekli olacaktır.
<ol><li>3 fenestrations 16 X büyütme ile mikroskop altında cerrahi bir bıçak kullanarak bir 2-Fr poliüretan tüp içine tanıtmak. Not: Tüm fenestrations en uygun kan drenaj sağlamak için kanül distal üçüncü bulunması gerekir.</li>
	<li>Astar çözüm (Malzemeler tablo) hazırlayın. 30 IU/mL heparin ve % 2.5 v/v NaHCO%38.4 çözümünün içerir. Bu çözüm 4 ° C'de kullanıma hazır olduğu kadar buzdolabında bekletin. Astar çözeltinin 500 uL ile devre Başbakan.</li>
	<li>Çıkış kanül astar çözüm içine koyun ve peristaltik pompa geçiş yaparak ECMO makine doldurun. Sonraki 30 dk 1 mL/dk akış hızında için makine aracılığıyla astar çözüm dolaşmaya devam ediyor.</li>
	<li>0,5 L/dk % 100 oksijen için oxygenator ver.</li>
</ol>2. anestezi
<ol><li>Yer bir indüksiyon odasında hayvan % 2.5 v/v isoflurane/oksijen karışımı ile dolu. 0,5 L/dak Buharlaştırıcı % 100 oksijen sağlar. Ameliyattan önce o tam anestezi pedal para çekme ve ağrı refleksleri test ederek elde denetleyin. Kurutma zarar önlemek için göz jeli uygulayın.</li>
	<li>37 ° C'de vücut ısısını korumak için bir ısınma panelini kullanma</li>
	<li>Solunum maskesi anestezi isoflurane Buharlaştırıcı kullanarak gerçekleştirmek ve subkutan 5 mg/kg carprofen enjekte.</li>
	<li>Düzenli olarak spontan solunum gözlemlemek ve 1.3 ile % 2.5 arasında isoflurane konsantrasyonu ayarlayın.</li>
</ol>3. cerrahi
<ol><li>Sol juguler ven boynun sol tarafında iyi makas yardımıyla bir yanal cilt kesi 4 mm kullanarak açarsınız. Mikro-forseps ve pamuk temizleme bezi kullanarak künt ve keskin hazırlık ile birlikte küçük gemilerin bipolar koagülasyon kullanın.</li>
	<li>Sol juguler ven maruz sonra bir 8-0 ipek sütür mikro-forseps yardımıyla kullanarak distal bölümü ligate.</li>
	<li>Bir SLIP düğüm ven proksimal sonuna yerleştirin. Mikro-makas kullanarak ven ön duvarına deşmek.</li>
	<li>Tam heparinization elde etmek için bir 26 G braunula üzerinden juguler ven içine 2.5 IU/g heparin enjekte.</li>
	<li>Kanül yerleştirilmesi sırasında fazla kan kaybına damardan önlemek için 30 ° tarafından hayvan pad baş tarafı kaldır.</li>
	<li>2-Fr Poliüretan (PU) kanül 4 cm derinliğe kadar iterek süre biraz döner juguler ven proksimal parçası takın; Bunu yaparken de, inferior vena kava (IVC) iliyak çatallanma ulaşmak mümkün.</li>
	<li>Kanül ile 8-0 ipek knot microforceps kullanarak güvenli.</li>
	<li>3.1, 3.2 ve 3,3 içinde açıklanan adımları kullanarak sağ juguler ven maruz.</li>
	<li>1-Fr PU kanül ile sağ juguler ven cannulate ve yavaşça 5 mm sağ atrium yönünü doğru taşıyın.</li>
	<li>3.7 arasındaki adımları yineleyin.</li>
	<li>Başka bir 1-Fr PU kanül ile sol femoral arter catheterize ve invaziv basınç kan örnekleme için kan Gaz Analizi (BGA) yanı sıra izleme için kullanabilirsiniz.</li>
	<li>Elektrokardiyogram (EKG) iğneler bağlı bir veri alma aygıtına subkutan her iki ön ayakları ve sol torasik duvarın içine yerleştirin.</li>
	<li>Bir veri alma aygıtına bağlı bir rektal termometre yerleştirin.</li>
</ol>4. Veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu ve kan Gaz Analizi
Not: tam ECMO devre şeması için bkz. Şekil 1.
<ol><li>ECMO hayvan pompa 0.1 mL/dak ayarlama sonraki 2 dakika 3-5 mL/dk içinde pompa debisi bir başlangıç debisi ile açarak başlayın.</li>
	<li>Hava emme cannulation sitesi üzerinden çıkış kanül içinde durumunda akışını azaltmak ve bir hava-bindirme rezervuar aracılığıyla devre 0.1 mL astar çözeltisi ekleyin.</li>
	<li>Kararlı akış altında tüm hayati parametreleri veri alım cihazı üzerinden gerçek zamanlı modda izlemeye devam edin.</li>
	<li>Sürekli geri tepme Venöz drenaj dan gözlemlemek ve hava-Tuzakçı Reservoir kan düzeyini izlemeniz.</li>
	<li>Yarasından 24 G branula andreturn ucu ile 1 cc enjektör içine hava-bindirme rezervuar aracılığıyla ECMO iskelesinden sızıntı herhangi bir kan toplamak.</li>
	<li>BGA için kan örnekleme kartuşu yaklaşık 75 µL arteryel kan aşağıdaki zaman noktalarda ve aşağıdaki konumlardan toplamak için kullanın:<ol>
<li>ECMO, ödemeli kan yolu ile oxygenator (kontrol), sonra benzer ilave tüp oxygenator önce inşa ilave bir tüp yoluyla IVC ve femoral arter doğrudan başlanmasından sonra 10 dk.</li>
		<li>ECMO, femoral arter toplamak kan başlanmasından sonra 30 dk.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bir ilave 0.1 mL intravasal sıvı kaybı her 45 dk veya kan boşaltma kanül aracılığıyla hava kabarcıkları emme hava avcı veya femoral arter kateter aracılığıyla telafi etmek için astar çözeltisi ver.</li>
	<li>BGA için kan örnekleme kartuşu yaklaşık 75 µL arteryel kan toplamak için kullanın:<ol>
<li>1 h ECMO başlanmasından femoral arter dan sonra.</li>
		<li>ECMO, ödemeli kan yolu ile oxygenator (kontrol), sonra benzer ilave tüp oxygenator önce inşa ilave bir tüp yoluyla IVC ve femoral arter doğrudan başlanmasından sonra 2 h.</li>
	</ol>
</li>
	<li>2 h sonra yavaş yavaş (boyunca 5 dk), böylece durdurma ECMO pompa üzerinde akış oranını azaltmak.</li>
	<li>Başka bir 10 min için hayati parametreleri kaydetmeye devam edin.</li>
	<li>Deney hayvanı exsanguinating ve kan ve organ hasat bitirmek.</li>
</ol>

<ol><li>Hill, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+Extracorporeal+Oxygenation+for+Acute+Post-Traumatic+Respiratory+Failure+%28Shock-Lung+Syndrome%29%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Prolonged Extracorporeal Oxygenation for Acute Post-Traumatic Respiratory Failure (Shock-Lung Syndrome).</a> New England Journal of Medicine. 286 (12), 629-634 (1972).</li>
<li>Noah, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Referral+to+an+Extracorporeal+Membrane+Oxygenation+Center+and+Mortality+Among+Patients+With+Severe+2009+Influenza+A%28H1N1%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">Referral to an Extracorporeal Membrane Oxygenation Center and Mortality Among Patients With Severe 2009 Influenza A(H1N1).</a> Journal of the American Medical Association. 306 (15), 1659(2011).</li>
<li>Maslach-Hubbard, A., Bratton, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+membrane+oxygenation+for+pediatric+respiratory+failure%3A+History%2C+development+and+current+status%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Critical.+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal membrane oxygenation for pediatric respiratory failure: History, development and current status.</a> World Journal of Critical. Care Medicine. 2 (4), 29-39 (2013).</li>
<li>Langer, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22Awake%22+extracorporeal+membrane+oxygenation+%28ECMO%29%3A+pathophysiology%2C+technical+considerations%2C+and+clinical+pioneering%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care%22%5BJournal%5D)">"Awake" extracorporeal membrane oxygenation (ECMO): pathophysiology, technical considerations, and clinical pioneering.</a> Critical Care. 20 (1), 150(2016).</li>
<li>Esper, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+Membrane+Oxygenation%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Anesthesia%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal Membrane Oxygenation.</a> Advances in Anesthesia. 35 (1), 119-143 (2017).</li>
<li>Millar, J. E., Fanning, J. P., McDonald, C. I., McAuley, D. F., Fraser, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+inflammatory+response+to+extracorporeal+membrane+oxygenation+%28ECMO%29%3A+a+review+of+the+pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care%22%5BJournal%5D)">The inflammatory response to extracorporeal membrane oxygenation (ECMO): a review of the pathophysiology.</a> Critical Care. 20 (1), 387(2016).</li>
<li>Lubnow, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technical+complications+during+veno-venous+extracorporeal+membrane+oxygenation+and+their+relevance+predicting+a+system-exchange--retrospective+analysis+of+265+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Public+Library+of+Science+One%22%5BJournal%5D)">Technical complications during veno-venous extracorporeal membrane oxygenation and their relevance predicting a system-exchange--retrospective analysis of 265 cases.</a> Public Library of Science One. 9 (12), e112316(2014).</li>
<li>Passmore, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+and+lung+injury+in+an+ovine+model+of+extracorporeal+membrane+oxygenation+support%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Inflammation and lung injury in an ovine model of extracorporeal membrane oxygenation support.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 311 (6), L1202-L1212 (2016).</li>
<li>Vaquer, S., de Haro, C., Peruga, P., Oliva, J. C., Artigas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+review+and+meta-analysis+of+complications+and+mortality+of+veno-venous+extracorporeal+membrane+oxygenation+for+refractory+acute+respiratory+distress+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Intensive+Care%22%5BJournal%5D)">Systematic review and meta-analysis of complications and mortality of veno-venous extracorporeal membrane oxygenation for refractory acute respiratory distress syndrome.</a> Annals of Intensive Care. 7 (1), 51(2017).</li>
<li>Houser, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+Heart+Failure+A+Scientific+Statement+From+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Animal Models of Heart Failure A Scientific Statement From the American Heart Association.</a> Circulation Research. 111 (1), 131-150 (2012).</li>
<li>Russell, J. C., Proctor, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+cardiovascular+disease%3A+tools+for+the+study+of+the+roles+of+metabolic+syndrome%2C+dyslipidemia%2C+and+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Pathology%22%5BJournal%5D)">Small animal models of cardiovascular disease: tools for the study of the roles of metabolic syndrome, dyslipidemia, and atherosclerosis.</a> Cardiovascular Pathology. 15 (6), 318-330 (2006).</li>
<li>Madrahimov, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+mouse+model+of+cardiopulmonary+bypass%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardio-thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Novel mouse model of cardiopulmonary bypass.</a> European Journal of Cardio-thoracic Surgery. 53 (1), 186-193 (2017).</li>
<li>Madrahimov, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiopulmonary+Bypass+in+a+Mouse+Model%3A+A+Novel+Approach%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Cardiopulmonary Bypass in a Mouse Model: A Novel Approach.</a> J. Journal of Visualized Experiments. (127), (2017).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Daha önce biz KPB başarılı bir model bir fare12,13' te açıklanan. Böyle bir model için uygulamak için akut veya bir kolay kullanımlı veno-venöz ECMO devre fareler için geliştirdiğimiz son aşama akciğer hastalıkları. CPB modeline veno-venöz farklı ECMO, karmaşık cerrahi yöntemdir ve aort sıkma gibi böylece yara tamamen heparinized bir hayvan kanama riskini azaltarak gerektirmez. Embolizasyon oxygenator ile kan pıhtıları önlemek için heparin/kg 2.5 IU her hayvan iç...

Ekstrakorporeal membran oksijenasyonu (ECMO) yeterli gaz değişimi ve perfüzyon akciğer ve kalp fonksiyonları üzerinde alır bir geçici yaşam destek sistemi var. Hill ve ark1 ECMO 1972 yılında ilk kullanımda hastalarda tarif; Ancak, bu sadece yaygın olarak onun başarılı uygulama sırasında 20092' Pandemik H1N1 grip sonrası kullanılır oldu. Bugün, ECMO rutin bir hayat kurtarıcı yordam son aşama kalp ve akciğer hastalıkları3olarak kullanılır. Veno-venöz ECMO giderek invaziv mekanik vantilasyon alternatif olarak uyanık, Sigara Tüp, kendiliğinden ateşe dayanıklı solunum yetmezliği4olan hastalar nefes istihdam edilmektedir.
Onun yaygınlaşmasının rağmen ECMO5,6,7için çeşitli komplikasyonlar bildirilmiştir. ECMO hastaların yaşadığı komplikasyonlar kanama, tromboz, sepsis, trombositopeni, aygıtla ilgili arıza ve hava embolisi içerir. Ayrıca, klinik ve deneysel çalışmalar8,9iyi tarif çoklu organ hasarı sonucu bir sistemik inflamatuar yanıt Sendromu (SIRS) olduğunu. Beyin enfarktüsü gibi nörolojik komplikasyonlar da sık sık uzun ECMO tedavisi gören hastalarda raporlanır. Konularda şaşırtmak için genellikle komplikasyon ECMO tarafından neden olduğu veya temel bozuklukları akut eşlik eden ve son aşama hastalıkları kaynaklanan olup olmadığını ayırt etmek zordur.
Özellikle ECMO etkileri sağlıklı bir organizma üzerinde çalışmaya, güvenilir bir deneysel hayvan modeli oluşturulmuş olmalıdır. Küçük hayvanlar ve tüm fareler için sınırlıdır ECMO performansına çok az raporlar vardır. Bugüne kadar literatürde ECMO hiçbir fare modeli tarif edilmiştir. Genetiği değiştirilmiş fare suşları, çok sayıda durumu nedeniyle, bir fare ECMO modeli kurulması daha fazla araştırma moleküler mekanizmaları ECMO ile ilgili komplikasyonlar10,11katılan sağlayacak.
Kardiyopulmoner bypass (KPB)12bizim yukarıda açıklanan fare modeline bağlı olarak, biz veno-venöz ECMO istikrarlı bir yöntem geliştirdik Sigara-Tüp, kendiliğinden fareler nefes. Çıkış ve giriş akımı kanüller, peristaltik pompa, oxygenator ve hava-bindirme depo, içeren ECMO devre (Şekil 1), daha önce açıklanan modelimiz daha küçük priming sahip dışında fare KPB12 benzer hacmi (0.5 mL). Bu iletişim kuralı detaylı teknikleri, fizyolojik izleme ve kan gazı analizi başarılı ECMO yordamda yer alan gösterir.

<table><tbody><tr><td>Sterofundin</td><td>B.Braun Petzold GmbH</td><td>PZN: Tetraspan</td> ile <td>1: 1'de</td>8609189</tr><tr><td>Tetraspan% 6 Çözelti</td><td>B. Braun Melsungen AG</td><td>PZN:</td><td>Sterofundin</td></tr><tr><td>Heparin Natrium 25.000</td> ile 1: 1'de 05565416 <td>Ratiopharm GmbH</td><td>PZN: 3029843</td> ml hazırlama NaHCO3 başına <td>2,5 IU</td></tr><tr><td>%8,4 Çözelti</td><td>B. Braun Melsungen AG</td><td>PZN:</td><td>Hazırlama çözeltisinde %1579775 3</td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Zoetis Inc., ABD</td><td>PZN:00289615</td><td>5mg/kg/BW</td></tr><tr><td>1 Fr PU Kateter</td><td>Instechlabs INC., ABD</td><td>C10PU-MCA1301</td><td>karotid arter</td></tr><tr><td>2 Fr PU Kateter</td><td>Instechlabs INC., ABD</td><td>C20PU-MJV1302</td><td>juguler ven</td></tr><tr><td>8-0 İpek sütür örgülü</td><td>Ashaway Line & Twine Co., ABD</td><td>75290</td><td>ligatür</td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Piramal Critical Care GmbH</td><td>PZN:9714675</td><td>narkoz</td></tr><tr><td>Yaylı Makas - 6mm Bıçaklar</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>15020-15</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Yaylı Makas - 2mm Bıçaklar</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>15000-03</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Halsted-Sivrisinek Hemostat</td><td>Güzel Bilim Araçları GmbH</td><td>13009-12</td><td>Alet -leri</td></tr><tr><td>Dumont #55 Forceps</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>11295-51</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Castroviejo Mikro İğne Tutucu - 9cm</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>12060-02</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Micro Serrefines</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>18555-01</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Bulldog Serrefine</td><td>Fine Science Tools GmbH</td><td>18050-28</td><td>aletleri</td></tr><tr><td>Isofluran Buharlaştırıcı Dräger 19.1</td><td>Dr&auml; gerwerk AG & Co. KGaA</td><td></td><td>anestezi 1,3 -2,5%</td></tr> <tr><td>ISOHEART Yazılımı ile Çok Kanallı Veri Toplama Cihazı</td><td>Hugo Sachs Elektronik GmbH, Almanya</td><td></td><td>invaziv basınç, EKG, t & deg; C</td></tr><tr><td>i-STAT taşınabilir cihaz</td><td>Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, ABD</td><td></td><td>kan gazı analizi</td></tr><tr><td>i-STAT CG4+ ve CG8+ kartuşları</td><td>Abbott Laboratuvarları, Lake Bluff, Illinois, ABD</td><td></td><td>kan gazı analizi</td></tr><tr><td>C57Bl/6 fareler, erkek, 30 g, 14 haftalık</td><td>Charles River Laboratuvarları</td><td></td><td>1 hafta önce barındırılıyor</td></tr></tbody></table>

veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu bir mouse

Veno-Venous Extracorporeal Membrane Oxygenation in a Mouse

Ekstrakorporeal membran oksijenasyonu (ECMO) kullanımı son yıllarda önemli ölçüde artmıştır. ECMO bir güvenilir ve etkili tedavi haline gelmiştir akut yanı sıra son aşama akciğer hastalıkları. ECMO uzun süreli kullanımı ve klinik talep artışı ile yordam en iyi duruma getirme ve çoklu organ hasarı önlenmesinde kritik önemi var. Bu iletişim kuralının amacı veno-venöz ECMO ayrıntılı bir teknik bir sigara-tüp içinde kendiliğinden fare nefes sunmaktır. Bu iletişim kuralı teknik tasarımı ECMO ve cerrahi adımları gösterir. Bu fare ECMO model patofizyolojisi ECMO (Örneğin, iltihap, kanama ve tromboembolik olaylar) ile ilgili çalışma kolaylaştırmak. Genetiği değiştirilmiş fare bolluğu nedeniyle, moleküler mekanizmaları ECMO ile ilgili komplikasyonlar içinde yer aynı zamanda disseke.

Bu iletişim kuralı bir mouse veno-venöz ECMO yöntemini açıklar. Bu model güvenilir ve tekrarlanabilir ve yukarıda açıklanan modelimiz KPB ile solunum ve dolaşım tutuklama12,13ile karşılaştırıldığında, bu daha az teknik olarak kurmak istiyor.
Venöz sistem akışında ECMO 1.5 ve 5 mL/dk arasında devam edildi. Ortalama arter basıncı ilave astar çözüm ECMO devre ekleyerek 70 i...

Burada bir protokolü açıklayan veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu (ECMO) entübe sigara içinde tekniği, kendiliğinden nefes fare mevcut. Bu fare modeli ECMO, etkili akut deneysel çalışmalar ve son aşama akciğer hastalıkları uygulanabilir.

Veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu bir mouse

The use of extracorporeal membrane oxygenation (ECMO) has increased substantially in recent years. ECMO has become a reliable and effective therapy for ...

Bu yöntem, akut ve kronik son dönem akciğer hastalığının tedavisi ile ilgili olanlar gibi pulmoner araştırma alanında anahtar soruların cevaplarına yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, uzun süreli ekstrakorporeal membran oksijenasyonu sırasında çoklu organ hasarının moleküler ve patolojik mekanizmalarının başlamasını kolaylaştırmasıdır. Temiz, steril olmayan koşullar altında, 16x büyütme altında iki Fransız poliüretan kateter distal üçüncü içine üç fenestrations tanıtmak için bir cerrahi bıçak ve bir diseksiyon mikroskop kullanın.Daha sonra, çıkış kanülini astar çözeltisine yerleştirin, peristaltik pompayı açarak ekstrakorporeal membran oksijenasyonunu veya ECMO makinesini dakikada bir milimetre lik akış hızında devreye sokun. 30 dakika sonra, oksijenatörüne dakikada 0,5 litre oksijen ekleyin ve anestezili yetişkin farede parmak ucuna tepki eksikliğini onaylayın. Hayvanın gözlerine merhem uyguladıktan sonra, boyun sol tarafında juguler ven görselleştirmek için dört milimetre lateral deri kesi yapmak, ve daha fazla damar ortaya çıkarmak için mikro-forceps ve pamuk lu bezler kullanın.8-0 kullanın maruz kalan ven distal ucunu ligate için ipek dikiş, ve proksimal sonunda bir kayma düğüm yerleştirin. Mikrosaçıkarıcı larla damarın ön duvarını yerleştirin ve 26-gauge branula ile juguler vene gram başına 2,5 uluslararası birim enjekte edin, ekleme sırasında aşırı kan kaybını önlemek için cerrahi pedin baş ucunu 30 derece yükseltin. Dikkatle juguler ven proksimal sonuna fenestrated iki Fransız poliüretan kanül eklemek, biraz kanül dönen, inferior vena kava illiac bifurcation ulaşmak için dört santimetre derinliğe kanül iterek.Kanülleri çok nazikçe itmek önemlidir, ama sürekli olarak ekstra güç kullanmadan. Dirençle karşılaşılırsa, kanülleri geri çekin ve tekrar takın. 8-0 ile kanül güvenli ipek düğümleri, ve sadece gösterildiği gibi sağ juguler ven ortaya.Bir Fransız poliüretan kanül ile sağ juguler ven kanül, yavaşça sağ atriyum doğru kanül beş milimetre hareket ve 8-0 ile kanül güvenli ipek düğümler. İnvaziv basınç izleme ve kan gazı analizi için başka bir Fransız poliüretan kanül ile sol femoral arter kateterize, ve elektrokardiyogram iğneler deri altı her iki forelimbs içine bir veri toplama cihazına bağlı eklemek, ve sol torasik duvara. Ardından bir veri toplama cihazına bağlı bir rektal termometre takın.Veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonunu başlatmak için pompayı dakikada 0,1 mililitrelik başlangıç akış hızına çevirin. İki dakika sonra, akış hızını dakikada üç ila beş mililitreye ayarlayın. Kararlı akış altında, gerçek zamanlı modda veri toplama cihazı üzerinden hayati parametreleri izlemek, sürekli venöz drenaj geri akışını kontrol, ve hava trapper rezervuar kan düzeyini izleme.Herhangi bir kan sızıntısı toplamak için 24-gauge branula ile donatılmış bir mililitreşşük şırınga kullanın ve hava yakalama rezervuarı üzerinden ECMO devresine kan dönmek. Kan gazı analizi için, ECMO inisiyasyonundan 10 dakika sonra, inferior vena kavadan oksijenatordan önce, oksijenatörün hemen ardından ve femoral arterden yaklaşık 75 mikrolitre arteriyel kan toplamak için bir kan örnekleme kartuşunu kullanın. ECMO inisiyasyonundan 30 ve 60 dakika sonra, sadece femoral arterden kan toplayın.Başlama işleminden 45 ve 90 dakika sonra, hava trapper'ı aracılığıyla intravasal sıvı kaybını telafi etmek için 0,1 mililitre astar çözeltisi uygulayın. Başladıktan iki saat sonra, oksijenatörü, inferior vena kava ve femoral arterkan toplamak. Son kan toplama sonra, beş dakika boyunca pompa akış hızını azaltmak, bu nedenle ECMO durdurma, başka bir 10 dakika için hayati parametreleri kaydetmeye devam ederken.Tipik bir deneyde, hayvanın fizyolojik parametreleri her 10 dakikada bir kaydedilir. Bu temsili deneyde, hematolojik parametreler ECMO sırasında ilgili bir hemodilüsyon gösterdi, ancak orta derecede anemiyi telafi etmek için kan transfüzyonu gerekli değildi. Oksijenleme parametreleri, oksijen hava karışımında 1.0 oksijenin çok küçük bir kısmında uygun bir oksijenatörü performansı sergiledi.Ayrıca, ECMO sırasında metabolik değişiklikler başlangıçta ve deneyin sonunda solunum alkaloz dahil. Ekstra kan tamponlama yapılmadı. ECMO devresi üzerinden kan akışını absorbe etmek, kan gazı analizi yoluyla oksijenlenme parametrelerini izlemek ve kan örneklemesinin neden olduğu kan kaybını ekstra astar lama solüsyonu ile değiştirmek için uygun kanülasyon tekniğini kullanmak önemlidir.Bu teknik, akciğer hastalığı alanında araştırmacılar ın 80'den fazla kullanılabilir knock-in, knock-out fare modeli kullanarak hayat kurtaran tedaviler için protokolleri önemli ölçüde iyileştirmelerinin önünü açıyor.

veno-venous-extracorporeal-membrane-oxygenation-in-a-mouse

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu video, sağ ortak karotis arteri bloke ederek ve fareyi düşük oksijenli bir ortama maruz bırakarak bir fare modelinde trombotik bir inmeyi çoğaltma prosedürünü göstermektedir. Bu işlem beyne giden kan ve oksijen akışını azaltarak kan pıhtısı oluşumuna ve beyin hasarına neden olur.

Bir fare modelinde hipoksi ve iskemi yoluyla trombotik inme inmesinin indüklenmesi

Endotelyal endotel / glycocalyx yüzey tabakası ideal intravital mikroskobu kullanılarak incelenmiştir. Intravital mikroskop teknik gibi akciğer gibi hareketli bir organ zordur. Biz eş zamanlı aydınlık ve floresan mikroskop serbestçe-hareket eden endotel yüzey tabakasının kalınlığını belirlemede nasıl kullanılabileceğini...

Fare Pulmoner Endotelyal Yüzey Katman in vivo ölçümü olarak

Bu kağıt, Kardiyopulmoner bypass farelerde gerçekleştirmek açıklar. Bu yeni modeli moleküler mekanizmaları organ hasarı dahil incelenmesi kolaylaştıracaktır.

Kardiyopulmoner baypas gerektirmeyen bir fare modeli: yeni bir yaklaşım

Bir aokaval fistül, her iki duvar üzerinden Vena Cava inferior içine murine infra-renal aort delip tarafından oluşturuldu ve inferior vena cava kısmi ligasyon yoluyla onun çıkış bir stenoz oluşturulması izledi. Bu tekrarlanabilir model, Merkezi venöz stenozu incelemek için kullanılabilir.

Bir outflow stenozu ile Aokaval fistül kullanarak Merkezi venöz stenozis murine modeli

Protokol, portal ven perfüzyonu yoluyla metabolik çalışmalar için sağlam bir fare karaciğerini rezeke etmenin basit bir yöntemini açıklar.

Eski Vivo Farede Portal Damarından Hepatik Perfüzyon

Bu protokol, farelerde çoklu intravenöz bolus dozu uygulaması ve invaziv hemodinamik izleme yürütmek için adım adım bir prosedür sağlar. Araştırmacılar bu protokolü pulmoner arter hipertansiyonu için gelecekteki terapötik bileşik taraması için kullanabilirler.

Hipoksi ile İndüklenen Fare Pulmoner Arter Hipertansiyon Modelinde Çoklu İntravenöz Bolus Dozu ve İnvaziv Hemodinamik Değerlendirme

Ventilasyonu korurken ve hipoksiden kaçınırken sol akciğer iskemisi reperfüzyonu (IR) hasarı oluşturmak için bir fare cerrahi modeli.

Orotrakeal Entübasyon ve Ventilasyonlu Akciğer İskemisi Reperfüzyon Cerrahisinin Bir Fare Modeli

Fare karaciğerleri için normotermik ex vivo karaciğer perfüzyonu (NEVLP) sistemi oluşturuldu. Bu sistem mikrocerrahide deneyim gerektirir ancak tekrarlanabilir perfüzyon sonuçlarına izin verir. Fare karaciğerlerini kullanma yeteneği, yeni perfüzyon katkı maddelerini tanımlamak için moleküler yolakların araştırılmasını kolaylaştırır ve organ onarımına odaklanan deneylerin yürütülmesini sağlar.

Normothermic Ex Vivo Karaciğer Makinesi Farede Perfüzyon

Dual-mode görüntüleme sistemi, temassız kutanöz oksijenlenme ve vasküler fonksiyon değerlendirilmesi için geliştirilmiştir.

Kutanöz Doku oksijenasyon ve Damar Fonksiyon dual-mode Görüntüleme

Etiketli hücreleri çok foton mikroskobu ile dil içinde ağız kanseri ve tümör invazyonu niceliksel olarak izlenmesi bir fare modeli üreten yer alan tekniklerin kapsamlı bir bakış sunulmaktadır. Bu sistem, anti-invaziv bileşiklerin moleküler değerlendirme ve ilaç etkinliği için faydalı bir platform olarak hizmet verebilir.

Oral Skuamöz Hücre Karsinomu Ortotopik Fare Modeli Tümör Hücre Invasion Multi-foton Görüntüleme

Öğrenin, veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu (ECMO) yöntemini fare modelinde uygulayarak akut ve kronik akciğer hastalıklarının moleküler mekanizmalarını incelemeyi. Bu protokol, solunum yetmezliği tedavileri için değerli bir araçtır.

Veno-venöz ekstrakorporeal membran oksijenasyonu bir mouse

Daha fazla video keşfet