Name: Orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 59 s
Description: Keşfedin orta serebral arter tıkanıklığında ortak karotid arter onarım tekniğini farelerde reperfüzyon sağlamak için. Bu yöntem, kan akışını artırarak deneysel inme modellerinde tutarlılığı ve tekrarlanabilirliği iyileştirir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser değiştirme, arıtma ve azaltma hayvanlar araştırma (NC3Rs; için Ulusal Merkezi tarafından finanse edildi CG için NC/M000117/1). Yazarlar bölümü, biyomedikal hizmetler, University of Leicester, personel deneysel hayvan ve Maria Viskaduraki onların bakımı için istatistiksel onu tavsiye için teşekkür ederiz. Temsilcisi sonuçları izniyle hastalık modelleri & mekanizmaları11adapte olmuşlardır.

Bu protokol ve rapor verileri aşağıdaki kurumsal etik onay ve İngiltere'de hayvanlar (bilimsel yordamlar) Yasası, 1986 (proje lisans 60/4315) uygun olarak yapılmıştır. Tüm deneylerin hayvan araştırma uygun olarak raporlanır: In Vivo deneyler (varış) yönergeleri16tane raporlama.
1. hazırlık
<ol><li>Yetişkin erkek C57BL/6 fareler için ameliyat sonrası bakım (Örneğin, çevre, yatak takımları, kurtarma gıdalar) hakkında bilgi edinin ameliyattan önce en az 48 saat. Not: Post-MCAO hayvanlar kez ameliyat içme ve yemek yeme ile zorluk.<ol>
<li>Ameliyatı takiben aşırı kilo kaybını önlemek için hayvanlar tarafından herhangi bir post-MCAO diyet için örneğin, rehidrasyon jel, jel gıda ve batırılmış/ıslak normal diyet peletler doğrudan kafes yere yerleştirerek parkenizin.</li>
		<li>Beyaz kağıt çip gibi ameliyat sonrası yatak için kafes yatak takımları değiştirmek.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Tüm cerrahi alet cerrahi ayarı veya yordamlar başlamadan önce sterilize.<ol>
<li>Isıyla tarafından araçlarla (121 ° C, 15 PSI, 15dk için en az) bunu veya etilen oksit (8-10 h için doğru üretici talimatları izleyerek).</li>
		<li>Kadar prosedürü ayarlama önce tüm yüzeyler dezenfekte. Steril Cerrahi perdeler veya ameliyat sırasında işleme gerektiren öğeler için autoclaved folyo ile tüm yüzeyler kapsar. Aseptik teknik işlem süresi için kullanın. Not: Autoclaved folyo aletleri veya ameliyat sırasında tutulmaları gerekir ekipman karşılamak için kullanılabilir. Steril eldiven ve teknikleri kullanarak, folyo ve uygulanabilir, daha sonra öğeyi steril alana yerleştirilebilir. Bunu steril eldiven değişiklik gerekli olacaktır.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Orta serebral arter tıkanıklığı cerrahisi
<ol><li>Ameliyat anda 24-31 g ağırlığında yetişkin erkek C57BL/6 fare kullanın. 2 L/min O2, kırmızı plastik anestezi odasında %5 isoflurane kullanarak anestezi neden.</li>
	<li>İndüksiyon, takip azaltmak cerrahın düşürmek için bir hazine sistemiyle birlikte yüz maskesi tarafından sunulan bir yeterli anestezi derinliği (Örneğin, 1.5-%2 %70 N2O2/30% O2), ameliyat için korumak için isoflurane isoflurane maruz. Not: nitrojen (N2O2) oksijen (O2) ile birlikte isoflurane yeterli anestezi derinliği için gerekli azaltmak için kullanılabilir.</li>
	<li>Pre-operatively sistemik analjezi yönetmek [carprofen, 10 mg/kg subkutan (SC)] ve belgili tanımlık kesme için lokal anestezi site (bupivacaine, 2 mg/kg SC, % 0,9 serum seyreltilmiş 1:10) peri-çimentosu.</li>
	<li>Sıvı pre-operatively mayi (IP.) tarafından steril prewarmed % 0,9 NaCl çözüm 200 µL enjeksiyonlari yönetmek.</li>
	<li>Sağdaki kürk tıraş temporal bölge ve ventral boyun bölgesi deri ortaya çıkarmak için küçük saç kesme makineleri kullanarak. Ameliyat sırasında kurumasını önlemek için 3 dk. Uygula oküler yağ üzerine her iki gözde, %5 klorheksidin çözüm kullanıp cerrahi Cilt alanını dezenfekte. Not: Nabız oksimetri okuma monitör kan oksijen doygunluğu, nabız ve solunum hızı için gerekirse, arka bacak saç temizlemek için saç dökücü krem kullanın. Temiz pamuk kullanarak krem uygulamak tomurcukları ve, epilasyon sonra alan seyreltik klorheksidin çözüm ile yıkayın. Pre-operative bir alanda steril cerrahi alan bulaşıcı gevşek kürk riskini en aza indirmek için bu adımı gerçekleştirin. Araştırmacılar diğer cerrahi sitesi hazırlıklar yerel uygulama göre kullanmayı tercih edebilirsiniz.</li>
	<li>Fare için cerrahi alan transfer ve yüzükoyun steril bir örtüsü ile kaplı bir homeothermic ısı mat yerleştirin. Anestezi ile burun konisi korumak. Fare vücut sıcaklığını izlemek ve 37,0 ± sürdürmek bir rektal sonda eklemek 0,6 ° C.<ol>
<li>Herhangi bir cerrahi kesik önce arka pençe çekilme refleks denetleyin ve refleks anestezi derinliği onaylamak için yanıp.</li>
	</ol>
</li>
	<li>MCA bölge kan akışını kaydetmek için bir lazer Doppler flowmetry (LDF) sonda takmak.<ol>
<li>Diseksiyon stereoscope kullanarak, bir kesi < 1 cm sağ göz ve kulak No 15 neşter kullanarak maruz kalan geçici deri arasındaki orta nokta yaptırın. Açık açık kafatası kapsayan, yavaşça bu kemik uzak kazıma ve steril pamuk temizleme bezi ile yüzey kurutma temel dokusu incelemek. Not: Temporalis kas zarar vermemeye özen göstermelidir.</li>
		<li>0.7 mm, düz bir kenar elde, bu çörek şeklinde sonda sahibi ile itmek ve optik eşleşen jel az miktarda lif sonuna yerleştirin keskin bir neşter kullanarak sona cut LDF monitör bağlı esnek tek fiber optik sonda tut.</li>
		<li>Su geçirmez süper yapıştırıcı tutkal sonda tutucu alt kenarında küçük bir miktar yerleştirin; Bu kısmen kuru ve yapışkan hale izin.</li>
		<li>Kafatası temporal kemik üzerinde kuru ve kemik bir daireye topikal doku yapıştırıcı az miktarda yer prob sahibi için yetecek kadar.</li>
		<li>Sonda tutucu, fiber optik sonda zaten yerde, bu alanındaki (6 mm lateral ve 2 mm bregma distal) yerleştirin.</li>
		<li>Yapıştırıcının kuruması zaman tanıyın; bir kez kuru ve ekli, LDF veri kaydetmeye başlayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Yavaşça hayvan lazer Doppler sonda destek ve onun dekolmanı önlemek için dikkat çekici bir sırtüstü konumuna çevirin. Yavaşça iki forepaws gözenekli tıbbi bant alan Asansör ve gerginlik yaratmak için pamuk tomurcukları (veya benzeri gibi kapalı forseps,) boyun altında bir çift sürgülü ile aşağı bant. Fare aseptik kapsama korumak için steril bir örtü ile kapak.</li>
	<li>Diseksiyon ve maruz kalma CCA başlar.<ol>
<li>1,5 cm ensizyon maruz ventral boyunda bir No 15 neşter bıçak kullanarak olun.</li>
		<li>Nazik künt diseksiyon teknikleri kullanarak, yavaşça tükürük bezleri trakea açığa yanlara, geri çek.</li>
		<li>Künt diseksiyon kullanarak, CCA çevreleyen doku ve Vagus sinir ücretsiz incelemek. Not: herhangi bir hasar Vagus sinir besleme ve nefes hareketlilik, zarar verebilir gibi doğrudan, Vagus sinir dokunmaktan kaçının.</li>
	</ol>
</li>
	<li>İki küçük (2 cm) bölümlerini bir sigara-eriyen 6-0 dikiş CCA, gemi ve ventral Vagus sinir dorsal aşağıda geçmek. Cerrah için bir ipek kravat daha yakın çizmek ve CCA (proksimal kravat) sıkıca bağla. Gevşek ICA/ECA bifurkasyon doğru ikinci ipek kravat (distal kravat) bağla.</li>
	<li>CCA bir bölümünü yalıtmak başlamak için mikrovasküler klipi distal kravat ama bifurkasyon tıkayan değil hemen üzerinde uygulayın. Mikro kenasen makas kullanırken, CCA küçük bir delik açmak. Not: Her zaman ECA patent kalması gerekir. CCA kesi gemi ve kolayca erişilebilir bir ventral konumda genişliği en fazla % 40 olması gerekir; Bu gemi onarım sahne post-MCAO içinde önemli bir rol oynayacaktır.</li>
	<li>Mikrovasküler klip doğru ilerleyen CCA, silikon kaplı bir 7-0 monofilament takın. Not: Fare ağırlık ameliyat öncesi temel filaman boyutu oluşturulmalıdır; üreticinin yönergeleri için başvurun.<ol>
<li>Distal kravat, yeterince zarar vermeden yerine filaman tutturmak için sıkın. Mikrovasküler klip Clip sahipleri kullanarak kaldırın. Not: Bu noktada hiçbir kan kaybı etmeliydim. Bir geri tepme kan ise, filaman tutan kravat yeterince sıkı değil.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Filaman ICA ilerlemek.<ol>
<li>Filament ICA içinde kalır ve pterygopalatine arter (PPA) geçmek değil emin olun. Bunu biraz kaldırma ve hayvanın vücut, dış tarafına ipek kravat birini kullanarak CCA çekerek ve filament PPA dahili olarak karşılıklı açılması geçmiş viraj yönlendirmek. Not: Bir kez MCA şube kaynağı için gelişmiş, bir damla göreli kan akışı sağlanan bölge LDF değerleri görünür hale gelir; Bu filaman yerleşim onaylar.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Filaman güvenli Bu ipe distal ipek kravat ile daha sıkı yerleştirin. Tıkanıklığı zaman dilimi süresince yerinde bırakmak. Not: Bağımlı bireysel protokol, hayvan kurtarma kafese hareket edebilir, aşağıdaki kurtarmak için dikiş yarası ya da anestezi altında tıkanıklığı dönemi süresince kalır. İkinci durumda, yara steril prewarmed % 0,9 NaCl salin kullanarak kurutma üzerinden engellenir sağlamak.</li>
</ol>3. sonrası tıkanıklığı
<ol><li>Beyaz filaman baş açıkça görünene kadar MCAO dönemin sonunda filaman hemen geri çekin.</li>
	<li>O zaman, gevşetin distal CCA filaman damar yolundan baş çoğunu kaldırmak için sadece yeterli bağla. Not: cerrah kan kaybını önlemek için distal kravat kravat hızıyla emindir filaman tam bu noktada kaldırılabilir.</li>
	<li>CCA çatallanma distal kravat yanındaki doğru yatay bir konumda bir mikrovasküler küçük resim yerleştirin. Distal kravat gevşetin ve filament tamamen kaldırın. Başka bir mikrovasküler kırpmak aşağı doğru Cerrah proksimal CCA kravat ekleyin. Not: gemi yeteri kadar herhangi bir kaymayı önlemek için kelepçe dişleri olduğundan emin olun. Küçük resimleri clip sökücüler sırasında sonraki adımlarında kolay erişim sağlamak için gerekli bir yerleşimdir. Küçük resimleri daha iyi bir temizlik ve küçük resimleri yatay çevreleyen kasların yerleştirerek doku düzeltme eki yerleşimini izin vermek için gemi kaldırmak yardımcı olmak için kullanılabilir.</li>
	<li>Dikkatle Dumont #5 forseps veya mikro kenasen makas kullanılarak her iki ipek kravat kaldırmak ve steril pamuk tomurcukları kullanarak alan kuru. Not: Damar / içine kesmemeye özen göstermelidir.</li>
	<li>Bir steril Petri dish, iki madde sağlanması fibrinojen ve Trombin dolgu macunu çözümleri 1 ve 2, ( Tablo reçetesigörmek) hazır ayrı, daha sonra karıştırma için kal ekleyin. Not: Sadece çok küçük birimler ajanlar gerekli (< 0.25 mL her) vardır. Çözümler ayrı tutulması iki bileşenleri arasında erken bir tepki engeller. Çapraz bulaşma tepki ve şırınga içinde ayarla aracı neden iki şırıngaların önlemek için kaldırıldı olarak kapağı aynı şekilde değiştirilir emin olun. Kullanımdan önce çözümleri-20 ° C'de depolayın İlk ameliyat için gerektiğinde, dolgu macunu için oda sıcaklığında erimek. Dolgu macunu refreeze değil; Oda sıcaklığında kalması ve bu şekilde saklanabilir. Şırınga düşük maliyetli yapma birden çok ameliyat kullanılabilir; Ancak, aynı şişe 1 haftadan uzun kontaminasyonu önlemek için kullanmamayı öneririz.</li>
	<li>Kas boyunca künt diseksiyon Dumont yok 5 forseps ve mikro kenasen makas ile ince bir ventral dilim dilim en fazla 1 mm kalınlığında ve kas lifleri en iyi çalışır sağlanması doku yastık kullanmak için boyun kas elde etmek için kullanın. Not: Bu işlevi önemli ölçüde zarar gibi kas / genelinde kesmeyin. Doku CCA kesi rahat karşılamak için yeterli büyüklükte olması gerekir.</li>
	<li>Dumont #5 forseps kullanarak, doku pad alıp, dolgu macunu çözümleri, iki reaktifler arasında bir kanal oluşturan iki fibrinojen ve Trombin arasında eşit olarak doku karıştırın. Koagulasyon hızla ortaya çıkar; koagülasyon başlar başlamaz, doku pad CCA kesi için kaldırın. Bir orta firma basınç ve açık forseps ile düz aşağı doku yastık yerleştirin.<ol>
<li>Hızla distal mikrovasküler klip hala ederken yavaşça doku pad yerinde tutan çıkarmak. Not: Bu bazı geri tepme kan fibrinojen ve Trombin dolgu macunu reaktifler daha fazla harekete geçirmek sağlar. Sadece yeterince baskı belgili tanımlık yastık tutmak için ama tam olarak gemi değil engellemek için gereklidir.</li>
		<li>Yavaş yavaş kesi alanı altında akışını sağlayan doku pad baskısı hafifletmek. Şimdi, yavaşça ve nazikçe basınç proksimal mikrovasküler klipten ve tamamen kaldırmak.</li>
		<li>Not: gemi tam olarak patent olur emin olmak için doku pad yerleştirme ve kaldırma mikrovasküler klip hızlı bir şekilde doku pad üzerinden mühürleme CCA içeriye doğru önlemek için ortaya çıkması gereken. Ancak, bazı hafif basınç daha da pıhtı oluşumu ve sızdırmazlık yapılmasına izin vermek üzere doku yastık üzerine az miktarda kan sızıntısı varsa, yeniden yerleştirin. Kan sızıntısı önemli veya doku pad mühürleme gibi görünmüyor ise, kan kaybını önlemek ve belgili tanımlık kesme yalıtmak ve daha fazla kan dökülmesini önlemek için her iki CCA mikrovasküler klipleri değiştirmek için basınç korumak.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Doku pad gemi mühür değil durumunda, ikinci bir deneme, tabi merdiven 3.3 – 3.7.3 yapılabilir.</li>
	<li>Bir kez gemi kilitlendi, eriyen 6-0 dikişler kullanarak yaranın dikiş. LDF kayıt ameliyat devam edildi LDF kafatasından kaldırın ve dikiş eriyen kullanarak 6-0 dikiş yarası.</li>
</ol>4. ameliyat sonrası bakım
<ol><li>Hayvan (bir ısıtmalı raf/gıda 35 ° c veya ısıtmalı bir oda içinde yer alan) bir prewarmed kurtarma kafes içine koyun. Not: Araştırmacılar diğer sıcaklıklar ve süreler yerel uygulama göre kullanmayı tercih edebilirsiniz.</li>
	<li>Prewarmed % 0,9 NaCl tuzlu SC 4 h sonrası işlem ve 2 x hemen sonrası işlemi, 200 µL ile tüm hayvanlar, her gün için 72 h sağlar. Not: Prewarmed % 0,9 NaCl liderliğindeki hayvan bir ilçedir. Daha fazla gerekli ise, daha fazla sıvı bir iyi sağlamak için uygulanabilir.</li>
	<li>Kurtarma kafeste vıcık vıcık diyet granül, Kuru diyet granül, rehidrasyon jel ve yanında su ad libitum erişim jel gıda hayvanlar sınırsız erişim sağlar.</li>
	<li>SC carprofen enjeksiyon, 24 saat sonrası işlemi yineleyin (bkz. Adım 2.3). Not: Tüm hayvanlar carprofen aynı doz aldı; herhangi bir nöroprotektif etkisi önemsiz olması muhtemeldir.</li>
	<li>48 h için düzenli aralıklarla, ameliyat sonrası fare yüz buruşturma karar daha fazla analjezi yönetmek için yardımcı olmak için ağrı düzeyleri değerlendirmek için17 Puanlama gerçekleştirin.</li>
	<li>Hemen cerrahi ve ardından günlük yordamı uygulamadan önce hayvanlar tartın. Günlük gözlemler ve onların yiyecek ve su alımı ve klinik belirtiler izlemek için tam refah sayfaları gerçekleştirin.</li>
	<li>24 saat ve 48 saat sonrası işlemi fonksiyonel gözlemler taahhüt etmektedir. Fareler bir odak eksikliği ölçekte değerlendirmek. Değerlendirmek onların vücut simetrisi, zorunlu çember, yürüyüş, tırmanma, davranış, açık bacak asimetri ve bıyık dokunmatik yanıt18,19,20çember 45 ° kılavuz.</li>
</ol>5. manyetik rezonans görüntüleme ve görüntü işleme
<ol><li>Yapısal manyetik rezonans görüntüleme (MRG) kullanarak lezyon birimi (LV) ölçmek. Not: histolojik triphenyltetrazolium klorür (TTC), boyama gibi alternatif yöntemler, daha önce kullanılan ve yapısal MRG veri için aralarındaki ilişkileri belirlemektir. Ancak, bu yöntem yalnızca bir çalışma ve değil boyuna uç noktada kullanılabilir. Boyuna MRI tarama kullanarak bir çalışma için gerekli hayvan sayısını azaltır.<ol>
<li>MCAO, indüksiyon ardından 48 saat sonra fare ile isoflurane (%5 isoflurane 1 L/dak indüksiyon için O2 ), % 1,5-2 isoflurane bakım için anestezi.</li>
		<li>Fare için MRG beşik transfer nefes oranını izlemek için solunum sensör yerleştirin ve tarama sırasında sıcaklık izlemek için Rektal sıcaklık probu implant. Yer 2-kanal fare beyinli RF sinyal için beyin üzerinde rulo almak ve yer bir 9,4 T Yatay beşiğinde tarayıcı taşıyordu. Not: Burada, bir ses bobini 72 mm iç çapında RF iletimi için kullanıldı.</li>
		<li>T2 ağırlıklı taramaları hızlı spin-eko sırası kullanılarak elde etmek. Tekrarlama zamanı (TR) 3.000 ms ve (TE) yankı vakti 40 Bayan kullanım 18 mm x 18 mm görüş alanı (FOV) olarak ayarlayın ve dilim 18 x 0.8 mm ve yaklaşık 10 dakika içinde üç sinyal ortalamalar 256 x 256 edinme matrisiyle elde edilir.</li>
		<li>Hızlı spin-eko sırası kullanılarak difüzyon tensör görüntüleri (DTI) edinin. Ayarla TR 1.730 MS, TE 35 MS, FOV için 20 mm x 20 mm ve 16 mm x 1 mm, iki sinyal ortalamalar, 14 difüzyon kodlama yönergeleri ve en fazla bdilimleri 128 x 128 edinme matrisiyle elde-1.024 s/mm2değeri.</li>
		<li>LV T2 ağırlıklı görüntülerde bir görüntü görüntü'yü kullanarak ve yazılım paketi ölçme ölçmek. Tedbir birlikte toplam lezyon cilt (MRI tarama sırasında ayarla) MRG dilim kalınlığı dikkate alarak hesaplamak için değerler harmanlama lesioned alan.</li>
		<li>Herhangi bir şişlik ve alan lezyon birimleri yüzdesi tam kontralateral ve Ipsilateral hemisferlerin ölçme sırasında göz önünde. Herhangi bir beyin lezyon birim olarak ölçmek için dolaylı bir yöntem kullanarak ödem nedeniyle şişlik için doğru daha önce açıklanan21,22. Yalnızca korteks doku değil, frontal lob veya beyincik doku overcorrection önlemek için bir standart fare beyin atlas göre içeren dilimleri içerir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Lezyon difüzyon parametrelerini ölçmek ve faiz çekirdek ve penumbra bölgelerinde elde edilir.<ol>
<li>Belirgin difüzyon katsayısı (ADC) ve kesirli anizotropi (FA) haritalar difüzyon tensör görüntüleri uygun MRI analiz yazılımı kullanarak oluşturun.</li>
		<li>T2 ağırlıklı görüntüleri uygun görüntü analiz yazılımı görüntülerin doğrusal bir kayıt sahip kullanarak DTI görüntülerle hizalayın. Kayıt, difüzyon ağırlıklı lezyon maskeleri (iskemik çekirdek) T2 ağırlıklı lezyon maskeleri (iskemik çekirdek ve penumbra) penumbra bölge tahmin etmek için çıkarma. Sonuç maskeleri (çekirdek ve penumbra) çekirdek ve penumbra içinde difüzyon parametrelerini ölçmek için ADC ve SK haritalar için geçerlidir.</li>
		<li>Ipsilateral çekirdek ve penumbra maskeleri beyin orta hat hakkında karşılaştırma kontralateral ADC ve SK değerlerini elde etmek için çevirmek.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>O'Collins, V. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((1%2C026+Experimental+treatments+in+acute+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">1,026 Experimental treatments in acute stroke.</a> Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).</li>
<li>Sutherland, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotection+for+Ischaemic+Stroke%3A+Translation+from+the+Bench+to+the+Bedside%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Stroke%22%5BJournal%5D)">Neuroprotection for Ischaemic Stroke: Translation from the Bench to the Bedside.</a> International Journal of Stroke. 7 (5), 407-418 (2012).</li>
<li>Reeves, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+Stroke+Care+in+the+US%3A+Results+from+4+Pilot+Prototypes+of+the+Paul+Coverdell+National+Acute+Stroke+Registry%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Acute Stroke Care in the US: Results from 4 Pilot Prototypes of the Paul Coverdell National Acute Stroke Registry.</a> Stroke. 36 (6), 1232-1240 (2005).</li>
<li>Wardlaw, J. M., Murray, V., Berge, E., del Zoppo, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombolysis+for+acute+ischaemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Cochrane+Database+of+Systematic+Reviews%22%5BJournal%5D)">Thrombolysis for acute ischaemic stroke.</a> Cochrane Database of Systematic Reviews. (7), CD000213(2014).</li>
<li>Pangalos, M. N., Schechter, L. E., Hurko, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+development+for+CNS+disorders%3A+strategies+for+balancing+risk+and+reducing+attrition%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Drug+Discovery%22%5BJournal%5D)">Drug development for CNS disorders: strategies for balancing risk and reducing attrition.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 6 (7), 521-532 (2007).</li>
<li>Hossmann, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiological+basis+of+translational+stroke+research%5BTitle%5D)+AND+%22Folia+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Pathophysiological basis of translational stroke research.</a> Folia Neuropathologica. 47 (3), 213-227 (2009).</li>
<li>Ringelstein, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+and+extent+of+hemispheric+brain+infarctions+and+clinical+outcome+in+early+and+delayed+middle+cerebral+artery+recanalization%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Type and extent of hemispheric brain infarctions and clinical outcome in early and delayed middle cerebral artery recanalization.</a> Neurology. 42 (2), 289-289 (1992).</li>
<li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+focal+stroke%3A+Size%2C+mechanism%2C+and+purpose%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroRX%22%5BJournal%5D)">Rodent models of focal stroke: Size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRX. 2 (3), 396-409 (2005).</li>
<li>Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bench+to+Bedside%3A+The+Quest+for+Quality+in+Experimental+Stroke+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Bench to Bedside: The Quest for Quality in Experimental Stroke Research.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 26 (12), 1465-1478 (2006).</li>
<li>Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+parameters%27+impact+on+mortality+and+variability+in+mouse+stroke+experiments%3A+a+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Method parameters' impact on mortality and variability in mouse stroke experiments: a meta-analysis.</a> Scientific Reports. 6, 21086(2016).</li>
<li>Trotman-Lucas, M., Kelly, M. E., Janus, J., Fern, R., Gibson, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+alternative+surgical+approach+reduces+variability+following+filament+induction+of+experimental+stroke+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">An alternative surgical approach reduces variability following filament induction of experimental stroke in mice.</a> Disease Models & Mechanisms. 10 (7), 931-938 (2017).</li>
<li>Macrae, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+stroke+research+-+advantages+and+disadvantages+of+the+most+common+rodent+models+of+focal+ischaemia%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Preclinical stroke research - advantages and disadvantages of the most common rodent models of focal ischaemia.</a> British Journal of Pharmacology. 164 (4), 1062-1078 (2011).</li>
<li>McColl, B. W., Carswell, H. V., McCulloch, J., Horsburgh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extension+of+cerebral+hypoperfusion+and+ischaemic+pathology+beyond+MCA+territory+after+intraluminal+filament+occlusion+in+C57Bl%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Extension of cerebral hypoperfusion and ischaemic pathology beyond MCA territory after intraluminal filament occlusion in C57Bl/6J mice.</a> Brain Research. 997 (1), 15-23 (2004).</li>
<li>Trueman, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Critical+Re-Examination+of+the+Intraluminal+Filament+MCAO+Model%3A+Impact+of+External+Carotid+Artery+Transection%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Stroke+Research%22%5BJournal%5D)">A Critical Re-Examination of the Intraluminal Filament MCAO Model: Impact of External Carotid Artery Transection.</a> Translational Stroke Research. 2 (4), 651-661 (2011).</li>
<li>Dittmar, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ECA+transection+in+the+development+of+masticatory+lesions+in+the+MCAO+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">The role of ECA transection in the development of masticatory lesions in the MCAO filament model.</a> Experimental Neurology. 195 (2), 372-378 (2005).</li>
<li>Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+Bioscience+Research+Reporting%3A+The+ARRIVE+Guidelines+for+Reporting+Animal+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+Biology%22%5BJournal%5D)">Improving Bioscience Research Reporting: The ARRIVE Guidelines for Reporting Animal Research.</a> Plos Biology. 8 (6), e1000412(2010).</li>
<li>Langford, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coding+of+facial+expressions+of+pain+in+the+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse.</a> Nature Methods. 7 (6), 447-479 (2010).</li>
<li>Orsini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+Mannose-Binding+Lectin+Confers+Long-Lasting+Protection+With+a+Surprisingly+Wide+Therapeutic+Window+in+Cerebral+Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Targeting Mannose-Binding Lectin Confers Long-Lasting Protection With a Surprisingly Wide Therapeutic Window in Cerebral Ischemia.</a> Circulation. 126 (12), 1484-1494 (2012).</li>
<li>Simoni, M. G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotection+by+Complement+%28C1%29+Inhibitor+in+Mouse+Transient+Brain+Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Neuroprotection by Complement (C1) Inhibitor in Mouse Transient Brain Ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 23 (2), 232-239 (2003).</li>
<li>Clark, W., Gunion-Rinker, L., Lessov, N., Hazel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Citicoline+Treatment+for+Experimental+Intracerebral+Hemorrhage+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Citicoline Treatment for Experimental Intracerebral Hemorrhage in Mice.</a> Stroke. 29 (10), 2136-2140 (1998).</li>
<li>Lin, T. N., He, Y. Y., Wu, G., Khan, M., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Brain+Edema+on+Infarct+Volume+in+a+Focal+Cerebral-Ischemia+Model+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Effect of Brain Edema on Infarct Volume in a Focal Cerebral-Ischemia Model in Rats.</a> Stroke. 24 (1), 117-121 (1993).</li>
<li>Loihl, A. K., Asensio, V., Campbell, I. L., Murphy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+nitric+oxide+synthase+%28NOS%29-2+following+permanent+focal+ischemia+and+the+role+of+nitric+oxide+in+infarct+generation+in+male%2C+female+and+NOS-2+gene-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Expression of nitric oxide synthase (NOS)-2 following permanent focal ischemia and the role of nitric oxide in infarct generation in male, female and NOS-2 gene-deficient mice.</a> Brain Research. 830 (1), 155-164 (1999).</li>
<li>Connolly, E. S., Winfree, C. J., Stern, D. M., Solomon, R. A., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Procedural+and+strain-related+variables+significantly+affect+outcome+in+a+murine+model+of+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Procedural and strain-related variables significantly affect outcome in a murine model of focal cerebral ischemia.</a> Neurosurgery. 38 (3), 523-531 (1996).</li>
<li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Strain+Differences+in+Susceptibility+to+Cerebral+Ischemia+are+Related+to+Cerebral+Vascular+Anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Mouse Strain Differences in Susceptibility to Cerebral Ischemia are Related to Cerebral Vascular Anatomy.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).</li>
<li>Kitagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+Ischemia+after+Bilateral+Carotid+Artery+Occlusion+and+Intraluminal+Suture+Occlusion+in+Mice%3A+Evaluation+of+the+Patency+of+the+Posterior+Communicating+Artery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Cerebral Ischemia after Bilateral Carotid Artery Occlusion and Intraluminal Suture Occlusion in Mice: Evaluation of the Patency of the Posterior Communicating Artery.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Bu, klinik iskemik inme7takip olayların taklit etkilenen bölge için reperfüzyon Rodents geçici MCAO filaman indüksiyon en sık kullanılan deneysel kontur modeli, önemlidir. Rapor burada filaman kaynaklı geçici MCAO farelerde geleneksel yöntem için alternatif bir cerrahi yaklaşımdır. Alternatif bir yaklaşım, analjezi tedavi, ECA ligasyonu kaçınma ve CCA kesi onarım, MRI ve histolojik boyama yöntemleri11kullanarak değerlendirirken bir azaltılmış LV değişkenlik sonuçlanır.
MCAO büyük ölçüde ikna etmek için geleneksel yaklaşımlar itimat transeksiyon, ya da en azından ligasyonu, fareler, içme davranışı ve vücut kilo kaybı MCAO14takip bir artış etkiler gösterilmiştir ECA nın. Burada, farelerde, ECA ligasyonu ve analjezi Ayrıca, kaçınma ile tanımlanan protokolü bir azalma vücut kilo kaybı MCAO lezyon cilt üzerinde hiçbir etkisi ile takip önerdi. Analjezi kullanımı önlenebilir veya en azından, deneysel sonuç olası karıştırıcı etkileri nedeniyle deneysel kontur çalışmaların çoğunda rapor değil. Ancak, analjezi tamamen kaçınarak değil her zaman haklı ve hayvan refah gereksinimlerini bilimsel hedefleri başarı ile dengelemek için bir ihtiyaç.
Hayvan boyutu, zorlanma ve filament varyasyonları, boyutu ve türü ek olarak serebrovasküler anatomi farklılıkları tüm kontur sonuçları23,24etkilemek için önerilmektedir. Burada açıklanan alternatif yaklaşım inek üzerinde güven böylece, en azından kısmen, lezyon cilt hayvanlarda arasında görülen değişkenlik azaltarak reperfüzyon sırasında önler. İnek anatomi farelerde, son derece değişken özellikle içinde C57BL / deneysel kontur çalışmalarda sık sık kullanılan6 zorlanma. C57BL/6 farelerin yüzde 90'ını iskemik hasar nedeniyle MCA bölge13, dışında yapıların yetersiz perfüzyon hacmi üzerinde bir etkisi olabilir bir çeşitli posterior iletişim arter (PcomA) açıklık, nedeniyle eksik bir inek var. 25. CCA farelerde, burada gösterildiği gibi tamir, üzerinden CCA iskemik alanına daha önce fareler15' te açıklandığı gibi kan yeniden kurulması sonuçlarında akışı. CCA kan akışında değil doğrudan ölçüldü rağmen temsilcisi veriler burada CCA tamiri reperfüzyon, arttığını göstermektedir. Ancak, proksimal ve distal onarım konuma bir nabız gibi atan ve tam duruma gövde boyunca döner CCA sağlanması gemi onarım takip kanla görselleştirmek cerrah mümkündür. Lazer Doppler flowmetry okumalar iskemik çevrenin birlikte bu görsel doğrulama başarılı onarım geminin onaylamak için kullanılabilir. Doku pad uygulamasını ve CCA gemi klipten kaldırılması arasındaki süreyi azaltmak belgili tanımlık zaman doku pad uygulamasını arasında olarak CCA, elde edilen açıklık üzerinde etkisi olabilir ve klip kaldırma-ecek önlemek belgili tanımlık doku yastık o kalarak CCA tarafında pposite. Her ne kadar teknik olarak zor, burada açıklandığı alternatif MCAO yordam bu farelerde MCAO cerrahi indüksiyon gerçekleştirmek için gereken ek herhangi bir beceri gerektirmez.
Geleneksel olarak yüksek değişkenlik sonucu önlemler ile ilişkili, deneysel kontur çalışmalar yeterince güçlü olmak bir eğilim olabilir. Ekonomik ve pratik endişeleri ile birlikte etik ve sosyal yardım gereksinimleri yeterince güçlü olmak çalışmalara katkıda bulunabilir. Sonuç değişkenliği azaltmak ve bu nedenle, bir deney grubu arasında daha tutarlı bir lezyon sonuçlar üreten, daha etkili güç hesaplamaları uygun şekilde desteklenmektedir varlık çalışmalar nihai amacı ile gerçekleştirilebilir.
Sonuç olarak, deneysel kontur takip lezyon cilt daha az değişkenlik farelerde, bu alternatif CCA onarım yordamı sonuçlanır ve ne zaman uygun bir tedavi etkisi test etmek için gerekli sağlar daha küçük deneysel grupları hesaplamalar güç kullanılır.

Serebral felç bir büyük orta serebral arter ülkesinde odak iskemi nedeni. Doku plazminojen aktivatör (ton) çok sayıda klinik ilaç denemeleri için iskemik inme1,2hedeflenen rağmen kanıtlanmış etkinliği ile kullanılabilir sadece farmakolojik tedavi yöntemidir. Ancak, güvenlik endişeleri ve dar terapötik pencere (< 4.5 h), nedeniyle tüm inme hastalarında sadece % ~ 15 ton almak uygundur ve recanalization gore < %503,4olabilir.
Kontur tekrarlanabilir ve klinik hayvan modelleri yeni ve potansiyel felç tedavi tedaviler gelişimi bilgilendirmek için temel olarak kabul edilir. Ancak, tutarlılık ve değişkenlik hayvan modelleri ile sonuçları ile ilgili endişeleri nedeniyle klinik preklinik çalışmalar çeviri geliştirmek için varolan vivo içinde modelleri geliştirmek önemli kalır. Preklinik deneysel etkinlik klinik kullanım için çeviri potansiyel tedaviler eksikliği kontur araştırma5için devam eden bir konusudur. Çeviri başarısızlık nedenlerini birden fazla olması muhtemeldir ve ilgili olabilir Örneğin, deneme tasarım, tedavi gecikmeler, klinik kontur heterojenite, için ve hayvan modellerin sınırlarını6kullanılır. Kontur araştırma için anahtar bir meydan okuma güvenli ve etkili tedaviler gelişimi kalır.
Orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) intraluminal filaman ekleme tarafından deneysel darbesinin en sık kullanılan vivo içinde kemirgen modelidir. Bu model kan akımı restorasyon sonra insan kontur7' de meydana gelen olayları taklit eden bir iskemi indüksiyon sağlar. Ancak, özellikle farelerde, türdeş olmayan lezyon birimleri çeşitli standart sapmalar ile tanımlanan olsa bile uygulanan8,9,10cerrahi kurallarıdır oluşur. Biomodel dağılımı küçük striatal ve büyük striato-kortikal lezyon birimleri11görmek için normaldir. İskemi ikna etmek için filaman genellikle CCA veya kalıcı olarak ve birleştirilmiş12kalması ECA bir kesi eklenir. CCA kalıcı ligasyonu iç karotis arter (ICA) ve daha sonra MCA bölge kan akışına yeniden kurulması engeller. Bu reperfüzyon Willis daire (inek) içinde ikincil arz güvenen olmak neden olur. İnek yapısı bireysel hayvanlarda genellikle vivo içinde kontur araştırma13' te kullanılan özellikle C57BL/6 fareler bir zorlanma arasındaki anatomik değişkenlik vardır. Alternatif bir yöntem, ECA, aracılığıyla filaman ekleme CCA, ancak bu yöntem uzlaşma yoluyla devam eden perfüzyon arteryel kaynağı, fareler, hayvanın üzerinde zararlı bir etkisi olduğu gösterilmiştir ECA bölge izin vermez su kuyusu-varlık14.
İnek ikincil arz ve reperfüzyon kurulan MCAO modeli için güvenilmesi kısmen tıkanıklığı takip lezyon cilt değişkenliği için sorumlu olabilir. Biz burada ECA ligasyonu kaçınılması ve CCA kesi onarıldıktan, bir alternatif fare cerrahi böylece reperfüzyon CCA, inek bağımsız aracılığıyla izin açıklayınız. CCA kesi tamiri daha önce de, fareler ile CCA15başarılı bir reperfüzyon neden olduğu gösterilmiştir. Biz bu yaklaşımda fareler11 başarıyla uygulamış olan ve lezyon cilt, deneysel kontur çalışmalarda kullanılan ana sonuç ölçü azaltılmış bir değişkenlik sonuçlanır Protokolü rapor burada.
Bu protokol için reperfüzyon izin vermek için bir doku pad ve dolgu macunu uygulama içerir CCA gemi onarım tarafından takip CCA gemi filaman ekleme ile MCAO taahhüt nasıl gerçekleştirileceğini gösterir.

<table><tbody><tr><td>0,7 mm esnek tek fiber optik prob</td><td>Moor Instruments, İngiltere</td><td>P10d</td><td>Ana prob koduyla kullanın: VP10M200ST</td></tr><tr><td>7-0 silikon kaplı monofilament</td><td>Doccol, ABD</td><td>701956PKRe</td><td>Hayvan boyutuna ve ağırlığına bağlı ürün - üretici yönergelerini kullanın. Buradaki ürün kodu, makalede gösterilen temsili sonuçlar için kullanılmıştır.</td></tr><tr><td>9.4T Klinik Öncesi MRI sistemi</td><td>Agilent Technologies, Santa Clara, California, ABD</td><td>MY11520101</td><td>Fare beyni görüntülemeye uygun gradyan ve RF bobinleri ile donatılmıştır</td></tr><tr><td>Hayvan izleme ve geçit ekipmanları</td><td>SA Instruments, Stony Brook, New York, ABD</td><td>22124005</td><td>MRG uyumlu sıcaklık ve solunum izleme</td></tr><tr><td>Bupivakain</td><td>Ulusal Veterinerlik Hizmetleri, Stoke-on-Trent, Birleşik Krallık</td><td>512345</td><td>Marcaine</td></tr><tr><td>C57BL/6 Fareler</td><td>Charles River, Oxford, Birleşik Krallık</td><td>B6JSIMA49D</td><td></td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Norbrook Laboratuvarları</td><td>143658</td><td>Carprieve %5 w/v Enjeksiyon için küçük hayvan çözeltisi</td></tr><tr><td>Klorheksidin% 4 el temizleyici solüsyonu</td><td>VWR International Ltd, Lutterworth, Birleşik Krallık</td><td>MOLN10008780</td><td>HibiScrub Antimikrobiyal el temizleyici, Molnlycke Sağlık</td></tr><tr><td>Hizmetleri Pamuk tomurcukları</td><td>Ulusal Veterinerlik Hizmetleri, Stoke-on-trent, Birleşik Krallık</td><td>213512</td><td>Herhangi bir plastik gövde, pamuklu çubuk ucu, otoklavlama ile steril hale getirildikten sonra uygundur.</td></tr><tr><td>Diseksiyon stereoskopu</td><td>Carl Zeiss</td><td>OPMI99</td><td>Yerleşik ekipman parçası. x1-x5 büyütme yeteneğine sahip herhangi bir binoküler diseksiyon stereoskopu uygun olacaktır.</td></tr><tr><td>çözünebilir 6-0 sütürler</td><td>Ulusal Veterinerlik Hizmetleri, Stoke-on-trent, İngiltere</td><td>9544</td><td>Emilebilir Sütürler Ethicon Coated Vicryl 6/0 (Ethicon kodu: W9981)</td></tr><tr><td>Donut prob tutucu</td><td>Moor Instruments, UK</td><td>Fare için PHDO</td><td>Prob tutucu, lazer doppler akış ölçer makinesi ile kullanıldığında tek fiber optik prob ile kullanılması gerekir.</td></tr><tr><td>Dumont #5 forseps</td><td>World Precision Instruments, Hertfordshire, Birleşik Krallık</td><td>500342</td><td></td></tr><tr><td>Fibrinojen ve trombin örtücü</td><td>Baxter, Berkshire, Birleşik Krallık</td><td>1502243</td><td>TISSEEL Mastik için kullanıma hazır çözümler 2 mL</td></tr><tr><td>Jel gıda</td><td>Hurma grubu, Manchester, İngiltere</td><td>72065022</td><td>Diyet Jeli Kurtarma</td></tr><tr><td>Görüntü ekranı ve ölçüm yazılım paketi</td><td>3D Dilimleyici</td><td>https://www.slicer.org/</td><td>Sürüm 4.0</td></tr><tr><td>Görüntü görüntüleme ve ölçüm yazılım paketi</td><td>NIH, Maryland, ABD</td><td>https://imagej.nih.gov/ij/index.html</td><td>NIH/ImageJ</td></tr><tr><td>LDF monitör</td><td>Moor Instruments, İngiltere</td><td>moorVMS-LDF</td><td></td></tr><tr><td>mikro vannas makası</td><td>InterFocus Ltd, Linton, UK</td><td>15000-08</td><td>İnce uçlar gerekli olmasına rağmen, diğer mikrovannas yaylı makaslar alternatif olarak kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Mikrovasküler klips</td><td>World Precision Instruments, Hertfordshire, UK</td><td>15911</td><td>10 G Damar Klipsi</td></tr><tr><td>mikrovasküler klips tutucular</td><td>World Precision Instruments, Hertfordshire, İngiltere</td><td>14189</td><td></td></tr><tr><td>MRI edinme ve analiz yazılımı</td><td>Agilent Technologies, Santa Clara, California, ABD</td><td>VnmrJ Sürüm 4.2</td><td>Revizyon A</td></tr><tr><td>no. 15 neşter</td><td>Bilimsel Laboratuvar Malzemeleri, Nottingham, İngiltere</td><td>INS4678</td><td>Steril No15 Neşter - üretici numarası P305. Diğer tedarikçiler de mevcuttur.</td></tr><tr><td>Çözünmeyen 6-0 sütür</td><td>Ulusal Veterinerlik Hizmetleri, Stoke-on-trent, İngiltere</td><td>W529</td><td>Ethicon Mersilk Sütürler</td></tr><tr><td>Oküler kayganlaştırıcı</td><td>Ulusal Veterinerlik Hizmetleri, Stoke-on-trent, Birleşik Krallık</td><td>847288</td><td>Lacrilube (5100G13)</td></tr><tr><td>Optik eşleşen jel</td><td>Moor Instruments, İngiltere</td><td>PMG</td><td></td></tr><tr><td>Nabız Oksimetre Okuyucu</td><td>Starr Life Sciences Corp., Oakmont, PA, ABD</td><td>MouseOx</td><td>MouseOx - sıçan & Fare Nabız Oksimetresi & fizyolojik monitör Fare uyluk sensörü ile kullanın.</td></tr><tr><td>Rehidrasyon jeli</td><td>Datesand grubu, Manchester, Birleşik Krallık</td><td>70015022</td><td></td></tr><tr><td>HydroGel Küçük saç kesme makineleri</td><td>vetproductsuk.com</td><td>HS61</td><td>Contura Akülü düzeltici/kesme makineleri</td></tr><tr><td>Steril %0,9 NaCl Solüsyonu</td><td>VWR International Ltd, Lutterworth, Birleşik Krallık</td><td>LOCA3528286</td><td>SODYUM KLORÜR %0,9 W/V INTRAVENÖZ İNFÜZYON BP 500 ML ECOFLAC & frac12'DE; PLUS</td></tr><tr><td>steril Petri kabı</td><td>VWR International Ltd, Lutterworth, İngiltere</td><td>5168021</td><td>50 mm steril Petri kabı. Herhangi bir marka uygundur. Minimum 50 mm çap gereklidir.</td></tr><tr><td>Topikal doku yapıştırıcısı</td><td>World Precision Instruments, Hertfordshire, İngiltere</td><td>503763</td><td>GLUture topikal Doku Yapıştırıcısı</td></tr><tr><td>Su geçirmez süper yapıştırıcı</td><td>Loctite</td><td>Loctite Superglue Precision Max</td><td>Çoğu hırdavatçıda bulunur.</td></tr><tr><td>Beyaz kağıt çip</td><td>Datesand grubu, Manchester, İngiltere</td><td>CS1BPB</td><td>Pure-O'Cel</td></tr></tbody></table>

orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin

Middle Cerebral Artery Occlusion Allowing Reperfusion via Common Carotid Artery Repair in Mice

İskemik inme yetişkin uzun vadeli sakatlık ve ölüm dünya çapında önemli bir nedenidir. Mevcut tedaviler mevcut, sadece doku plazminojen aktivatör (ton) iskemik inme hedeflemek için bir onaylı uyuşturucu tedavi olarak ile sınırlıdır. İskemik inme alanında mevcut araştırma daha iyi geliştirmek ve yeni ilaç hedefleri araştırmak için kontur, patofizyoloji anlamayla ilgili odaklanır. Güvenilir deneysel kontur modelleri potansiyel tedaviler ilerleme için büyük önem taşımaktadır. Orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) model klinik ve en sık kullanılan cerrahi modeli iskemik inme kemirgen. Ancak, lezyon cilt gibi bu modeli sonucunu değişkenliği, özellikle farelerde yüksek düzeyleri ile ilişkilidir. Burada açıklanan alternatif MCAO model reperfüzyon ortak karotid arter (CCA) ve fibrinojen-esaslı dolgu macunu ile gemi ve geliştirilmiş onarmak için bir doku panelini kullanma orta serebral arter (MCA) topraklarının artan perfüzyon sağlar refah farelerin dış karotid arter (ECA) ligasyonu kaçınarak. Bu da son derece anatomik olarak değişken farelerde olduğu bilinmektedir Willis daire üzerine güven azaltır. Bu alternatif cerrahi yaklaşım kullanarak geleneksel MCAO yaklaşım ve burada açıklanan alternatif yaklaşım arasında lezyon cilt değişkenliği azaltır temsilcisi verileri görüntüleyin.

24-31 g cerrahi, zaman arasında ağırlığında erkek 24 yetişkin C57BL/6 fareler toplam çalışmada kullanılmıştır. Orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) takip bir hayvan öldü ve bir cerrahi komplikasyonlar nedeniyle bırakıldı. Burada sunulan veri daha önce yayımlanmış bir işten yazarlar tarafından alınır. Bunlar MCAO sonuçlar11gemi onarım etkisini göstermek için kullanılmıştır. Tüm verileri thr ortalama ± standart sapma ifade edilir. Verileri kullanarak D'Agostino-Pearson otobüs normallik test normallik için istatistiksel olarak değerlendirildi. Parametrik veri karşılaştırıldığında öğrencinin tkullanımı-(için iki anlamına gelir) testi ve tek yönlü ANOVA ile Sidak test (birden çok anlamına gelir). Non-parametrik veri Mann-Whitney U testi kullanılarak karşılaştırıldı. Parametrik veri değişkenliği Fkullanarak değerlendirildi-test, ve parametrik olmayan veri değişkenlik değerlendirildi Levene'nın testi kullanma.
Genellikle, MCAO yordamlar, occluding filaman CCA eklenir ve ECA ICA yerine ECA içine geçen bu filaman önlemek için bakmaksızın. ECA ligasyonu bir kaçınma ve analjezi eklenmesi gösterdi azaltılmış kilo kaybı doğru bir eğilim 48 h post-MCAO, veri için ise ECA ligasyonu yok analjezi ile kullanarak aynı MCAO kez aynı cerrah tarafından üstlenilen önceki çalışmalardan karşılaştırıldığında LV etkilenmemiş ortaya çıktı, Şekil 1bakınız.
Fareler reperfüzyon CCA gemi onarım veya CCA yaklaşım tipik ligasyonu ile ardından bir 60 dk MCAO kaynaklı iskemi uygulandı. Ve birleştirilmiş ve unligated tamir CCA şeması Şekil 2' de gösterilmiştir.
Lazer Doppler flowmetry kan akışı perfüzyon topraklarında MCA, MCAO, öncesi ve sonrası CCA gemi onarım onaylamak için kullanıldı. Şekil 3 o 5 dk filaman kaldırma, MCA beyin bölgesi önemli ölçüde arttı bölgesel beyin kan akımı (rCBF) takip gösterir. Perfüzyon perfüzyon CCA onarım için güven göre iskemik bölge bir artmış kan perfüzyon izin düşündüren CCA gemi onarım aşağıdaki gösterilen MCA bölge bir artış ile gemi onarım kadar devam edildi Daire, Willis yalnız.
T2 ağırlıklı MRG toplam LV belirlemek için kullanılan ve DTI taramaları çekirdek LV, 48 h MCAO sonra belirlemek için kullanılmıştır. Şekil 4A onarım ve ve birleştirilmiş yordam grupları arasında anlamlı bir fark toplam veya çekirdek LV gösterir. Ancak, her ikisi için de veri değişkenlik toplam ve LV, kullanarak Lavene'nın test için değerlendirildi gibi çekirdek parametrik olmayan veya F-test için parametrik veri, CCA onarım grup içinde önemli ölçüde azaldı. Toplam LV kortikal ve subcortical LV Şekil 4B' gösterildiği gibi ayrılmış. Kortikal bölümünü CCA onarım grubunda daha az değişken iken lezyon alt kortikal bölümünü iki yordam grupları arasında etkilenmedi.
Güç analizi tedavi grubu başına daha az sayıda hayvan CCA onarım karşı tipik CCA bakmaksızın yordamı kullanarak MCAO takip LV % 30 azalma göstermektedir, bkz. Tablo 1için gerekli olacağını belirtti. Bir güç 1-β 0.8 ve önem düzeyi α = 0,05 ve bir tahmin = LV varsayımsal kontrol ve test arasında % 30 azalma, gruplar güç analizi için kullanıldı. Ayrıca, bir eşit varyans gruplar arasında kabul edildi. Tablo 1 test için gerekli hayvan sayısını gösterir ve her iki tipik CCA bakmaksızın yöntemi kullanıldığında denetim grupları veya Güncellenme Zamanı CCA onarım yöntemi, burada açıklandığı gibi kullanılır. Test grup hayvanların varsayımsal bir tedavi grubu ve kontrol grubu gösterir Not bir varsayımsal Denetim Grup gösterir; Her iki grupta MCAO tabi.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig1v2.jpg"> Şekil 1: kombine analjezi tedavi ve ECA ligasyonu MCAO aşağıdaki sonuçlar üzerine ihmal. (A)vücut ağırlığı, pre-MCAO ağırlığının yüzde olarak gösterilen ilk 2 d MCAO her iki grup için takip azalmıştır. (Analjezi MCAO, hiçbir ECA ligasyonu ile tedavi edilen) ECA unligated grup MCAO ardından ikinci gün azaltılmış kilo kaybı doğru bir eğilim gösterdi. (B) Bu panel 48 saat sonra MCAO boyama standart triphenyltetrazolium klorür (TTC) tarafından ölçülen lezyon cilt (mm3) gösterir. Gösterilen veriler ortalama ± standart sapma vardır. ECA bakmaksızın: n = 17, ECA unligated: n = 10. Bu rakam Trotman-Lucas ve ark. değiştirildi 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig1v2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig2.jpg"> Şekil 2: Standart CCA yöntemi ve alternatif CCA gösterilen şematik tamir MCAO aşağıdaki yöntemi. (A)bu şema doğru CCA kalıcı ligasyonu içinde kaynaklanan CCA kesi, her iki tarafına uygulanan sigara eriyen dikişler kullanarak kalıcı olarak ve birleştirilmiş bir CCA gösteriyor. (B) bu şematik alternatif CCA onarım yöntemi gösterilmektedir. Bir küçük doku yastık fibrinojen ile kaplı ve Trombin dolgu macunu CCA hakkının tam perfüzyon izin vermek için mühürleme CCA kesi karşılamak için kullanılır. Bu rakam Trotman-Lucas ve ark. değiştirildi 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig3.jpg"> Şekil 3: bölgesel beyin kan akımı (rCBF) parametreleri takip MCAO. MCAO sırasında MCAO filaman kaldırılması için her iki CCA bakmaksızın ve CCA tamir grupları (post-MCAO), rCBF göre ölçülen sonra rCBF 5 dk değişti. Bu panel rCBF veri hemen önce CCA gemi onarım (ön onarım) ve 5 min CCA onarım (sonrası onarım) takip gösterir. RCBF önemli artışlar 5 dk filaman kaldırıldıktan sonra (post-MCAO) her iki gruplar halinde gösterilir. RCBF ek bir artış CCA onarım grubunda CCA onarım (sonrası onarım) aşağıdaki gösterilir. RCBF hiçbir fark 5 dk post-MCAO ve ön onarım arasında gösterilir. Gösterilen veriler anahtar zaman puan, raporlama analiz zaman ders verilerinden ortalama ± standart sapma gibi burada konsantre. Bakmaksızın CCA: n = 10, CCA tamir: n = 10; P &lt; 0,01, ***P &lt; 0,001, ns: önemli olmayan. Bu rakam Trotman-Lucas ve ark. değiştirildi 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58191/58191fig4.jpg"> Şekil 4: lezyon cilt analizi elde MRI tekniklerle. (A)Bu panel, 48 h MCAO, T2 ağırlıklı MR görüntüleri (Toplam LV) alınan toplam LV ve DTI inceden inceye gözden geçirmek ve analiz (çekirdek LV) çekirdek LV lezyon cilt (LV; mm3) gösterir. Temsilcisi görüntüler bir T2 inceden inceye gözden geçirmek dilim görüntüsü toplam lezyon birimden uygulanan DTI çekirdek lezyon cilt maskesi ile göstermektedir. Değişkenlik içindeki grupları için toplam LV azaltılmış anlamlı (P 0,015, CCA onarım =: n = 10, CCA bakmaksızın: n = 10, F-test) ve çekirdek LV (P 0.043, CCA onarım =: n = 9, CCA bakmaksızın: n 6, Lavene'nın test =), bir Fkullanarak değerlendirildi-parametrik veri veya Levene'nın testi için parametrik olmayan veriler için testi. (B) Bu panel LV 48 h MCAO, T2 ağırlıklı MRG görüntülerden alınan ve kortikal ve subcortical lezyon alanlara bölünmüş takip gösterir. CCA onarım veri değişkenlik azaltılacağını (P 0.03, F=-test) lezyon, ancak verileri üzerinde hiçbir etkisi kortikal bölümünü değişkenlik lezyon subcortical bölümünde gösterildi. CCA onarım: n = 10, CCA bakmaksızın: n = 10. Gösterilen veriler ortalama ± standart sapma vardır. # P &lt; 0,05 (F-test), xP &lt; 0,05 (Lavene'nın testi). Bu rakam Trotman-Lucas ve ark. değiştirildi 11. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58191/58191fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>Yaklaşım</td>
			<td>Lezyon cilt (LV; mm3; ortalama ± SD)</td>
			<td>Güç</td>
			<td>Önem düzeyi</td>
			<td>Anticiapted fark</td>
			<td>Gerekli Grup boyutu</td>
		</tr>
<tr>
<td>CCA bakmaksızın (geleneksel yaklaşım)</td>
			<td>94.08 ± 53.79</td>
			<td>0.8</td>
			<td>0,05</td>
			<td>% 30</td>
			<td>
n = 58</td>
		</tr>
<tr>
<td>CCA tamir (yeni yaklaşım)</td>
			<td>51.73 ± 22.78</td>
			<td>0.8</td>
			<td>0,05</td>
			<td>% 30</td>
			<td>
n = 35</td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 1: geleneksel CCA ligasyonu alternatif ile karşılaştırarak temsilcisi güç analizi CCA onarım yöntemi burada açıkladı. Bu tablo LV bir kontrol grubu, geleneksel veya alternatif yaklaşım (yeni) ve (tahmin) bir test grubu arasında önemli bir fark tespit etmek için gerekli beklenen grup boyutunu hesaplamak için yapılan güç analizi gösteriyor. Grup boyutlandırır olarak tabloda gösterildiği gerekli bir güç 0,8 kabul edilir, 0,05 önem düzeyi uygulanır ve tahmin edilen test grubu bir % 30 fark gösteriyorsa LV karşılaştırıldığında kontrol grubu. Tablo (CCA bakmaksızın ve CCA tamir) hayvanların LV bir % 30 fark elde etmek için gerekli sayıda bir fark olup olmadığını belirlemek için her iki MCAO yaklaşım için sonuçlar gösterir Her iki yöntem için de bir eşit varyans testi ile kontrol grubu arasında kabul edilir. Bu rakam Trotman-Lucas ve ark. değiştirildi 11.

Intraluminal filaman tıkanıklığı orta serebral arter deneysel kontur rodents en sık kullanılan vivo içinde modeldir. Ortak karotid arter onarım izin vermek için başka bir cerrahi yaklaşım burada, reperfüzyon ortak karotid arter ve orta serebral arter bölge tam bir reperfüzyon veren gerçekleştirilir.

Orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue ...

Bu yöntem, bu modeller ile ilişkili azaltmak için nasıl ve nasıl tekrarlanabilirlik geliştirmek gibi deneysel inme alanında anahtar soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, ortak karotis arter yoluyla yeniden perfüzyon sağlar, ve bu nedenle Willis daire üzerinde bağımlı değildir, hangi hayvanlar arasında anatomik olarak değişebilir, ve bu nedenle deneysel sonuç ölçülerinde görülen değişkenlik katkıda bulunabilir. CCA gemi onarım adımları cca tam patent olduğundan emin olmak için dolgu kullanırken ilgili teknik zorluk nedeniyle öğrenmek zor olduğundan, bu yöntemin görsel gösteri, onarım sonrasında önemlidir.Başlamak için, test protokolüne göre fareyi hazırlayın ve anestezi yapın. Sonra maruz ventral boyun üzerinde 1.5cm orta hat kesi yapmak için bir numara 15 neşter bıçak kullanın. Künt diseksiyon teknikleri kullanarak, yavaşça yan tükürük bezleri geri, trakea ortaya çıkarmak için.Sonra ortak karotis arter incelemek, veya CCA, çevre doku ve vagal sinir ücretsiz. Bundan sonra, CCA altında çözülemeyen 6-0 dikiş iki küçük bölümden geçmek, CCA dorsal, ve vagal sinir ventral. Cerraha bir ipek kravat daha yakın çizin ve CCA etrafında gevşek kravat.Sonra gevşek iç ve dış karotis arterlerin çatallanma doğru ikinci bir ipek kravat kravat. Daha sonra, bifurkasyonun tıkanmamasını sağlayarak distal kravatın hemen üzerine bir mikrovasküler klip uygulayın. CCA küçük bir delik yapmak için mikro venöz makas kullanın.CCA içine 7-0 silikon kaplı mikro filaman yerleştirin ve mikrovasküler klips doğru ilerletin. Sonra yerine filament bağlamak için distal kravat sıkın. Ve mikrovasküler klips kaldırmak için klips tutucuları kullanın.Sonra, filaman iç karotis arter içine ilerlemek, veya ICA. Filament kafa distal kravat geçtikten sonra, sıkı kravat çekin, kan kaybını önlemek için. Distal ipek kravat kullanarak, kaldırın ve farenin vücudunun dış tarafına CCA çekin ve viraj filament yönlendirmek, pterygopalatine arter açılış geçmiş, veya PPA.Filament yerleştirildikten sonra, distal ipek kravatı daha da sıkarak sabitle. MCAO döneminin sonunda, beyaz filament kafası açıkça görülene kadar filamenti geri çekin. Sonra distal CCA kravat sadece yeterli filament baş yol, damar dışında kaldırmak için gevşetin.Daha sonra, iplik başlığını damardan tamamen çıkarın. Bundan sonra, yatay pozisyonda bir mikrovasküler klip söktü, CCA bifurkasyon doğru, ve distal kravat yanında. Sonra cerrah doğru proksimal CCA kravat altında başka bir klip söyit.Dikkatle ipek bağları her ikisi de kaldırmak için Dumont 5 forseps kullanın. Ve steril pamuk tomurcukları kullanarak alanı kuru. Sonra steril petri kabına Fibrinojen ve Trombin dolgu solüsyonu bir ve iki ekleyin.Mikro venöz makas ve künt diseksiyon tekniği kullanarak, sternokleidomastoid kas ince bir ventral dilim elde. Daha sonra, Dumont 5 forceps kullanarak, doku pedi almak ve Fibrinojen ve Trombin dolgu solüsyonları arasında eşit karıştırın. Burada doku yastığı CCA kesi kapsayacak kadar büyük olduğundan emin olmak önemlidir.Ve bir kez iki çözelti arasında karıştırılır, hemen kesi üzerine yerleştirilmelidir, aşırı pıhtılaşma ve kötü yapışmaönlemek için. Bir kez iki çözelti arasında karışık, CCA kesi doku yastığı çıkarın. Doku yastığını orta basınçve açık forceps ile kesi üzerine düz bir şekilde yerleştirin.Doku yastığını yerinde tutarken distal mikrovasküler klipsi hızla çıkarın. Daha sonra, yavaş yavaş doku yastığı gelen basıncı hafifletmek, kan kesi alanı altında akmasını sağlayan. Şimdi, yavaş yavaş ve yavaşça proksimal mikrovasküler klip basınç bırakın, sonra tamamen kaldırın.Üst klips çıkarılması dolgu aktive etmek için kan küçük bir miktar sağlar. Distal klipsin sürekli salınımı, kesi yerinde kademeli bir basınç artışı sağlar, daha fazla etkinleştirme ve başarısız bir onarımı önlemeye yardımcı olur. Son olarak, bir kez damar mühürlü, çözülebilir 6-0 dikişler ile yara dikiş.Bu protokolde 24 erişkin erkek fareye orta serebral arter oklüzyonu veya MCAO uygulandı. ECA ligasyonu bir kaçınma ve analjezi eklenmesi MCAO sonrası 48 saat azaltılmış kilo kaybı doğru bir eğilim gösterdi. Filament çıkarılmasından beş dakika sonra, bölgesel serebral kan akımı MCA beyin bölgesinde önemli ölçüde arttı.Perfüzyon, CCA gemi onarımı sonrası MCA bölgesine perfüzyon artışı ile damar onarımına kadar sürdürüldü. Bu CCA onarım iskemik bölgeye artan kan perfüzyonu izin düşündürmektedir, Willis daire tek başına güven ile karşılaştırıldığında. McAO'dan 48 saat sonra çekirdek LV'yi belirlemek için total LV ve DTI taramaları belirlemek için T2 ağırlıklı MRG kullanıldı.Bu iki grup arasında anlamlı bir fark yoktu. İlginçtir, toplam ve çekirdek LV için bir değişkenlik önemli ölçüde CCA onarım grubunda azaltıldı. Analizlerimiz, tipik CCA ligated prosedürüne karşı CCA onarımı kullanarak MCAO'dan sonra LV'de %30 azalma göstermek için tedavi grubu başına daha az hayvanın gerekli olacağını göstermiştir.Bu prosedürü çalışırken, doku paketi CCA kesi kapsayacak şekilde yeterli boyutta olduğundan emin olmak için hatırlamak önemlidir. Ayrıca, hız önemlidir, dolgu aşırı pıhtılaşma önlemek için, CCA üzerine yastık yerleştirmeden önce.

middle-cerebral-artery-occlusion-allowing-reperfusion-via-common

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

İpliksi Orta serebral arter oklüzyonu farelerde iskemik inme eğitimi için ortak bir model.

Fare Modelleme İnme - Filament Model Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Intraluminal orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modeli deneysel iskemik inme modelleri arasında en sık kullanılan model. Burada Lazer Doppler flowmetre kılavuzu ile ayrıntılı olarak tüm model ve onun temsilcisi sonuçları gösterecektir.

Fare lazer Doppler flowmetre Rehberlik İskemik İnme intraluminal Orta Serebral Arter Tıkanıklığı (MCAO) Model

Farelerde intraluminal orta serebral oklüzyon modeli sunuldu. Serebral infarkt ölçüde bir nörolojik skoru ve cresyl violet boyama, TTC alternatif boyama, paralel birçok ilgi belirteçleri test etmek büyük avantajı sunarak değerlendirilir.

Intraluminar MCAO Mouse Model: kresil Violet Boyama tarafından Serebral İnfarktı Değerlendirilmesi

Bu video, iskemik inmeyi modellemek için yaşlı sıçanlarda ortak karotis arter veya CCA ligasyonu ile kalıcı distal orta serebral arter oklüzyonu veya MCAO gerçekleştirme prosedürünü göstermektedir. Bu, beyne giden kan akışını engelleyerek nöronal ölüme yol açar ve inme mekanizmalarını ve potansiyel tedavileri incelemek için bir model oluşturur.

Bir sıçan modelinde orta serebral ve ortak karotis arter tıkanıklığı yoluyla iskemiyi indüklemek

inme patofizyolojisini anlamak için, güvenilir modeller kullanmak önemlidir. Farelerde en sık kullanılan inme modellerinden birini anlatacağız Bu yazıda, orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modeli olarak adlandırılan reperfüzyon ile (ayrıca lümen içi filament veya sütür modeli olarak adlandırılır).

Farelerde Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Reperfüzyon Kaynaklı İnme Cerrahi Yaklaşım

Silikon kaplı bir sütür kullanılarak orta serebral arterin tıkanmasıyla inen bir fare inme modelini tarif ediyoruz. Protokol, kalıcı oklüzyon veya geçici bir iskemiyi indüklemek için uygulanabilir ve ardından reperfüzyon uygulanabilir.

Enfarktüs Bölgesi Orta Arter Tıkanıklığı Tekniği ve Görselleştirme kullanma Fare İskemik İnme ve İskemi-reperfüzyon indüksiyon

Serebral iskemi-reperfüzyon bir fare modeli kontur Patofizyoloji araştırmak için kuruldu. Klemple sağ orta serebral arter ve şu ortak Karotid arter ligate ve kan akımı iskemi 10-40 dakika sonra geri yükleme.

Serebral iskemi-reperfüzyon iki damar tıkanıklığı fare modeli

Protokol, moyamoya dışı akut iskemik inmenin tedavisi için ensefalomiyosinanjiyozis-iskemik beyin dokusunun pial yüzeyine vasküler temporalis kas flebinin greftlenmesi için yöntemler sağlamayı amaçlamaktadır. Yaklaşımın anjiyogenezi arttırmadaki etkinliği, farelerde geçici bir orta serebral arter tıkanıklığı modeli kullanılarak değerlendirilir.

Farelerde Orta Serebral Arter Oklüzyonu Kaynaklı İnme Sonrası Ensefalomiyosinanjiyoz Tedavisi İçin Bir Model

Bu protokol, orta serebral arterin intraluminal oklüzyonu yoluyla farelerde geçici fokal serebral iskemi modelini açıklar. Ek olarak, manyetik rezonans görüntüleme ve davranış testleri kullanılarak sonuç değerlendirme örnekleri gösterilmiştir.

İnmenin Geçici Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Bu protokol, araştırmacıların modifiye Longa eksternal karotis arter yöntemini kullanarak fareler üzerinde orta serebral arter oklüzyon prosedürünü gerçekleştirmeleri için adım adım bir kılavuz sunar. Bu makalede sunulan modifikasyonlar orta serebral arter oklüzyonunun doğruluğunu arttırmayı ve tam reperfüzyonu sağlamayı amaçlamaktadır.

Longa Orta Serebral Arter Oklüzyon Yönteminin Tam Reperfüzyon için Optimizasyonu

Bu protokol, ortak karotis arter yoluyla orta serebral arter oklüzyonu reperfüzyonu için hazırlık sürecini tanımlar.

Orta Serebral Arter Oklüzyonu Reperfüzyonu için Modifiye Bir Model Hazırlığı

Keşfedin orta serebral arter tıkanıklığında ortak karotid arter onarım tekniğini farelerde reperfüzyon sağlamak için. Bu yöntem, kan akışını artırarak deneysel inme modellerinde tutarlılığı ve tekrarlanabilirliği iyileştirir.

Orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin

Daha fazla video keşfet