September 11th, 2018
Sempatik ve kardiyovasküler Yanıt Merkezi sinir sistemi (MSS) manipülasyonlar ölçme yöntemleri ilerleyen nörolojik için önemlidir. Bu iletişim kuralı ile ölçme ve böbrek sempatik sinir etkinliği (RSNA) (hayatta kalma olmayan) imzalat sıçanlarda akut değişiklikler miktarının bilim adamları yardımcı olmak için geliştirilmiştir.
Bu yöntem, otonom sinir sistemi hakkında, özellikle de böbreğe sempatik çıkışı düzenleyen merkezi sinir sistemi mekanizmaları hakkında önemli soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, merkezi sinir sistemi manipülasyonlarının böbreğe böbrek sempatik çıkışı üzerindeki etkisinin ölçülmesine izin vermesidir. Arteriyel kanülasyondan önce, kateterin kabarcık ve kalıntı içermediğini ve sıvı ile jel dolu bileşenler arasında sağlam bir menisküs olduğunu doğrulamak için basınç algılama kateterini yüksek büyütme altında inceleyin.
Her implantasyondan önce, kateterin distal ucundaki jeli yeniden doldurun ve vericiyi açmak için bir mıknatıs kullanın. Femoral arteri kısa bir süre tıkamak için proksimal sütüre gevşek bir el üstü yarım düğüm yerleştirin. Ve kateter tanıtıcısını baskın olmayan elinde tutarak, jelin uçtan çıkmasını önlemek için telemetri ünitesinin kanülünün ucunu kavramak için damar kanülasyon forsepslerini kullanın.
Arterde bir delik açmak için bükülmüş 22 gauge iğne ucu kullanın ve kanülü mümkün olduğunca artere yerleştirin. Daha sonra basınç kateterini proksimal ve distal sütür bağları ile sabitleyin. Ve telemetri implantının gövdesini insizyonun bitişiğindeki yan tarafın içine sokun.
Beyin erişimi için, baş kulak çubukları arasında olacak şekilde stereotaksik bir cerrahi çerçevesinde fareyi nazikçe yüzüstü pozisyona getirin ve lambda ve bregma yüksekliğini eşitlemek için kesici çubuğu ayarlayın. Daha sonra, kafa derisinin orta hattından iki santimetrelik rostral kaudal bir kesi yapın ve kafatası yüzeyinden herhangi bir bağ dokusunu sıkıca çıkarmak için pamuk uçlu aplikatörler kullanın. Bregma, lambda ve orta hat dikişlerini görselleştirmeye yardımcı olmak için açıkta kalan kafatasına hidrojen peroksit uygulayın.
Hedeflemeyi yönlendirmek için sıçan beyninin bir atlasını kullanarak, kafatasından elektrot erişimi için boyutlandırılmış bir çapak deliği osteotomisi açın. Renal sempatik sinirleri izole etmek için, bir tel renal sempatik sinir aktivitesi veya RSNA elektrodunu bir 10X ön amplifikatöre ve bir mikroelektrot amplifikatörüne bağlayın ve kaburgaların dört ila beş santimetre altına uzanan bir neşter kesisi yapın. Paraspinal kasları görselleştirmek için künt diseksiyon yapın ve yağın kasla buluştuğu yerde çok yüzeysel bir ila iki santimetrelik rostral kaudal insizyon yapın.
Pamuk uçlu aplikatörler kullanarak, periton boşluğuna girmeden böbreği görselleştirmek için yağı kastan uzağa yayın. Renal arteri ve abdominal aortu görselleştirmek için böbreği paraspinal kaslardan nazikçe ayırmak için ekartörler kullanın. Ve insizyon cebindeki böbrek sinirlerini tanımlamak için yüksek büyütme kullanın.
Aorttan böbreklere giden renal arteri yakından takip eden aort ve renal arterin oluşturduğu dik açıda sinir demetleri en kolay şekilde görülebilir. Ardından, kayıt elektroduna yerleştirilecek sinir demetinin bir segmentini çevreleyen dokudan nazikçe incelemek için mikrodiseksiyon cımbızı kullanın. Tel RSNA elektrodunu bir tutucuya sabitleyin ve elektrodu sinir segmenti seviyesine indirin.
Siniri germeden renal sinirin bir segmentini elektrot üzerine nazikçe kaldırmak için bir sinir kancası kullanın. Ve açıkta kalan böbrek sempatik siniri nemli tutmak için insizyonu mineral yağ ile doldurun. Hayvana ve diğer ucunu Faraday kafesine bir topraklama klipsi takın ve sinyali amplifikatörlere yönlendirmek için yüksek ve alçak geçiren filtrelemeyi kullanın.
Ardından, RSNA'nın patlama modelini değerlendirmek için bir ses monitörü de dahil olmak üzere kazancı 10 kilohertz'e kadar ayarlayın. RSNA kaydının kalitesini değerlendirmek için, kan basıncını artırmak ve renal sempatik sinir aktivitesini inhibe etmek için mililitre fenilefrin başına 10 mikrogram 100 mikrolitre bolus intravenöz enjeksiyonu ile barorefleksi uyandırın, sinyali gerektiği gibi iyileştirmek için elektrotların konumunu ayarlayın. Net bir sinyal elde edildiğinde, mineral yağı aspire edin ve elektrodu silika jel ile yerine sabitleyin.
Bu temsili deneyde, ortalama arteriyel basınçta bir artışı indüklemek ve barorefleks ve geçici sempatoinhibisyonu uyandırmak için intravenöz fenilefrin enjeksiyonu kullanıldı. RSNA'yı ölçmek için, ham RSNA düzeltildi ve örtüşmeyen 10 saniyelik segmentler için ortalaması alındı ve gürültü tahmini her segmentten çıkarıldı. Bu prosedürü gerçekleştirirken, farenin yeterince anestezi aldığından, stereotaksik çerçeveye uygun şekilde yerleştirildiğinden ve sistemin elektriksel gürültüyü azaltmak için yeterince topraklandığından emin olmayı unutmamak önemlidir.
Bu prosedürü ve beyin dokusunun toplanmasını takiben, sempatoeksitatuar yanıtı kontrol eden merkezi sistem çekirdeği tiplerini karakterize etmek için histoloji yöntemleri uygulanabilir. Bu teknik, sinirbilimcilerin anestezi uygulanmış sıçanlarda otonomik düzenleme mekanizmalarını keşfetmelerine izin verir, bu da hayvanlarda kan basıncının ve böbrek fonksiyonunun kontrolünü anlamak için gelecekteki çalışmaları bilgilendirir. Anestezi düzlemini en az 15 dakikada bir değerlendirmenin kritik olduğunu unutmayın.
Ve gerektiğinde ek anestezi sağlamak.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Bu çalışma, otonom sinir sistemini araştırmak için anestezi altındaki sıçanlarda renal sempatik sinir aktivitesi (RSNA) ölçme yöntemi sunar. Merkezi sinir sistemi manipülasyonlarına bağlı sempatik çıkıştaki değişiklikleri inceleyerek, protokol böbrek fonksiyonunu etkileyen otonom tepkileri düzenleyen mekanizmalar hakkında bilgiler sağlar.