Doku Microcolumns ürün toplama aparatı
25 Ekim 2018
Burada biz hasat üretmek için bir protokol tarif tam kalınlıkta deri dokusu donör neden olmadan toplamak için kullanılan iğneler site yara izi. İğneler yüksek hacimli hasat elde etmek için basit toplama sistemi ile kombine edilebilir.
Bu yöntem, doğal deride bulunan çeşitli hücre tipleri ve yapıları yerine nasıl deri dokusu rejenerasyon alanında temel sorulara cevap yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı otolog tam kalınlıkta cilt minimal donör site morbidite ile toplanabilir olmasıdır. Prosedürü gösteren Bill Farinelli, bizim laboratuvarda bir araştırma görevlisi olacaktır.
Bu yordamı metin protokolünde açıklandığı gibi üretim aşamasının kurulumuyla başlayın. Döner alete eşmerkezli olarak iki kesme tekerleği törleyin. Daha büyük bir ızgara taş kesme tekerleği üzerinde daha küçük bir alt ızgara elmas kesme tekerleği kullanın.
Kesme tekerleklerini hedefleyen ışıkla döner aletin üzerine ayarlanabilir bir kol la havai bir ışık kaynağı yerleştirin. Görselleştirmeyi geliştirmek için, bir diseksiyon mikroskobu üretim kurulumu üzerine yerleştirin, böylece mercek kesme disklerine odaklanın. İğne ucunu yeniden şekillendirirken, ince metal parçacıkların gözlere veya solunum yollarına girmesini önlemek için koruyucu gözlük ve cerrahi maske takın.
Deneysel gereksinimlere göre uygun ölçü boyutunda hipodermik iğneler seçin. Her hasat iğnesi üzerinde amaçlanan uzunluğu işaretleyin. İğneyi, işaretlenen noktada iğnenin fazla uzunluğunu kesmek için dış kesme diskinin kenarını kullanarak güçle döner alete dik olarak indirin.
Kısaltılmış künt iğneyi üretim aşamasındaki dişi Luer kilit konektörüne bağlayın. Yatay dönüş aşamasını, iğnenin döner aletteki kesme disklerine paralel olarak 12 derecelik açıda olması için ayarlayın. Havai ışığı açın ve büyütme altında iğneyi gözlemlerken konumunu ayarlayın, ta ki ışık iğnenin orta çizgisinden yansıyana kadar.
Döner aletin gücü. Daha sonra iğneyi iç kesme diskine doğru ilerletmek için çeviri aşamasını kullanın. Kesme diski iğnenin yaklaşık orta hattına ulaşana kadar iğneyi kesme diskine doğru yavaşça ilerletmeye devam edin.
Kesme iğne yüzeyini iç elmas tekerlekten dış taş tekerleğe doğru yavaşça hareket ettirin ve kesme iğne yüzeyini daha ince bir cilayla tamamla. İğneyi kesme diskinden uzaklaştırın. Dikey dönüş aşamasını kullanarak iğneyi 180 derece döndürün.
İğnenin diğer tarafını yeniden şekillendirmek için bu adımları tekrarlayın. Şimdi iğneyi üretim aşamasından çıkarın. İğnenin iç çapından biraz daha küçük metal bir tel ile iç deliği temizleyin.
Keskin bir tahta sopa kullanarak, hala yeni oluşturulan iğne kenarlarına bağlı olabilir herhangi bir çapak kaldırın. Yüksek hacimli mikrokoller gerektiğinde, 20 mililitrelik bir şırıngadan pistonu çıkarın. Sonra bir emme adaptörü için şırınga takın.
Şırıngaya hasat iğnesi takarak montajı tamamlayın. Emme adaptörünü steril bir emme tüpüne bağlamak için bir parça steril emme tüpü kullanın. Hasat cihazının, sıvının engellenmeden kutuya akmasını sağlayan bir kutu girişine bağlı olduğundan emin olun.
Şimdi cihazı negatif basınç kaynağına bağlayın. Hasat iğnesini cilde ekleyerek mikrokolleri hasat edin. Aralıklı olarak sistemi yıkamak için hasat işlemi sırasında steril salin bir kap içine hasat iğne daldırma.
Elde bir metal tel veya hasat iğnesinin iç çapından biraz daha küçük bir iğne tutun. İğne tıkanırsa, metal telin iğne deliklerine takılması ile temizlenebilir. İstenilen miktarda mikrokol kutuda biriktiğinde, aygıtın emmeile bağlantısını kesin.
Daha sonra mikrosütunları toplamak için emme kutusunun içindekileri bir filtreden dışarı dökün. Burada gösterilen bir bitmiş hasat iğnesi önden ve yandan görülüyor. Ucundaki iki kesme noktasını not edin.
Hasat iğneleri yaklaşık % 80-90 başarı oranı ile tam kalınlıkta cilt dokusundan mikrokoller toplamak gerekir. Bu şekilde, onay işaretleri bir milimetreyi temsil ediyor. Her mikrokolon epidermis, dermis ve bazı deri altı yağ içermelidir.
Mikrokoller doğrudan yara iyileşmesiiçin uygulanabilir veya kombinasyon yapıları üretmek için farklı matris malzemelerle kombine edilebilir. Mikrokolonlar in vitro çalışmalar için kültür de muhafaza edilebilir. Yüksek hacimli hasat yaparken, aralıklı bir tuzlu floş dahil etmeyi unutmamak önemlidir.
Bu yöntem deri yara onarımı için tasarlanmış olsa da, benzer bir ilke otolog doku greftleme gerekli olduğu kaslar gibi diğer organ sistemleri için uygulanabilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu makale, donör bölgedeki skar oluşumunu minimize eden özel iğneler kullanılarak tam kat deri dokusunun hasat edilmesine yönelik bir protokolü açıklamaktadır. Teknik, deri bütünlüğünü korurken yüksek hacimli doku toplamasını kolaylaştırmayı amaçlamaktadır.
Temel Çalışma Bileşenleri
Bilim Alanı
- Cilt dokusu rejenerasyonu
- Otolog doku toplama
- Minimal invaziv teknikler
Arka Plan
- Doğal cilt, çeşitli hücre tipleri ve yapılar içerir.
- Bu bileşenlerin ikame edilmesi, etkili cilt rejenerasyonu için kritik öneme sahiptir.
- Donör bölge morbiditesinin minimize edilmesi, doku hasadında önemli bir zorluktur.
- Bu protokol, yeni bir hasat yöntemi ile bu zorlukları ele almaktadır.
Çalışmanın Amacı
- Minimum skar oluşumuyla tam kat deri toplama yöntemi geliştirmek.
- Araştırma amaçlı deri dokusu toplamanın verimliliğini artırmak.
- Alandaki araştırmacılar için güvenilir bir protokol sağlamak.
Kullanılan Yöntemler
- İğnelerin hasat edilmesi için üretim aşamasının kurulumu.
- Döner bir alet üzerinde eş merkezli kesme disklerinin kullanımı.
- Farklı ızgaralı elmas ve taş kesme disklerinin kombinasyonu.
- Prosedürün bir araştırma görevlisi tarafından gösterimi.
Temel Sonuçlar
- Otolog tam kat deri örneğinin başarıyla toplanması.
- Donör bölgesinde gözlemlenen morbiditenin minimum düzeyde olması.
- Tanımlanan sistemle yüksek hacimli örnekleme gerçekleştirilmesi.
- Prosedürün araştırma ekibi tarafından etkili bir şekilde gösterilmesi.
Sonuçlar
- Protokol, deri dokusu toplama işlemi için uygulanabilir bir çözüm sunmaktadır.
- Deri rejenerasyonu araştırmalarındaki temel zorlukları ele almaktadır.
- Gelecekteki uygulamalar, doku mühendisliği çalışmalarını geliştirebilir.
Sıkça Sorulan Sorular
Sektörle İlgili Yönetici Özeti
Bu yöntem, deri rejenerasyonu araştırmalarındaki temel bir darboğazı gidererek, donör bölge morbiditesini minimumda tutan otolog tam kat deri dokusu hasadına olanak tanır. Epidermal, dermal ve subkutan bileşenleri koruyarak, preklinik modeller ve terapötik geliştirmeler için biyolojik olarak ilgili doku sağlar. Ölçeklenebilir, vakum destekli sistem, büyük hayvan çalışmaları için yüksek hacimli toplama işlemine destek olarak deri onarım stratejilerindeki translasyonel güveni artırır.
Biyofarma Ar-Ge'sinde Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- Bilimsel Değer: Doğal hücresel ve hücre dışı matris bileşenlerini koruyarak, tam kalınlıktaki deri biyolojisinin incelenmesine olanak tanır.
- Operasyonel Değer: Donör bölge travmasını azaltarak, boylamsal hedef doğrulama çalışmaları için aynı modelden tekrarlı örnekleme yapılmasına imkan sağlar.
Tarama ve Assay Geliştirme
- Bilimsel Değer: Bileşiklerin doku bütünlüğü üzerindeki etkilerini değerlendiren standartlaştırılmış ex vivo deri analizleri için otolog mikrokolonlar sağlar.
- Operasyonel Değer: Vakum tabanlı toplama sistemi, analiz tarama çalışmaları için tekrarlanabilir ve yüksek verimli doku toplama imkanı sunar.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Bilimsel Değer: Preklinik yara iyileşmesi modelleri için insan cilt yapısını yakından taklit eden tam kalınlıklı otolog greftler sağlar.
- Operasyonel Değer: Büyük hayvanlı preklinik çalışmalar için ölçeklenebilir doku temini sağlayarak veri sağlamlığını ve düzenleyici mevzuata uygunluk hazırlığını artırır.
İş Akışı ve Pipeline Entegrasyonu
Bu teknik, dermal rejenerasyon programlarında hedef doğrulaması, analiz geliştirme ve mekanistik risk azaltma işlemleri için fizyolojik olarak ilgili cilt dokusu sağlayarak, keşiften preklinik aşamaya kadar olan sürece katkıda bulunur.
- Keşif Biyolojisi: Tüm doğal deri katmanlarını içeren bütün mikro-doku kolonları sağlayarak deri rejenerasyon yolakları üzerindeki hipotez testlerini destekler.
- Tarama: Ex vivo deri modellerinde bileşik taraması için standartlaştırılmış otolog doku sağlayarak analiz uygunluğunu ve hit-to-lead güvenini artırır.
- Analitikler: Yapısal ve fonksiyonel korumayı değerlendirmek için toplanan mikro kolonların kantitatif histolojik ve moleküler analizine olanak tanır.
- Translasyonel Araştırma: Yara iyileşmesi çalışmaları için deri mimarisini koruyan otolog greftler sağlayarak keşif ve preklinik doğrulama arasında köprü kurar.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: Modüler iğne üretimi ve vakum sistemi, çok merkezli araştırma programlarında tutarlı doku temini için laboratuvarlar genelinde standartlaştırılabilir.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: Yerli hücresel çeşitliliği ve ekstrasellüler matrisi koruyan tam kalınlıkta deri sağlayarak öngörüsel güveni artırır.
- Operasyonel Değer: Tekrarlanabilir doku hasadı için hazır bileşenler kullanan, düşük maliyetli ve ölçeklenebilir bir platform sunar.
- Stratejik Değer: Donör bölge üzerindeki etkiyi minimize ederek otolog doku kullanımına olanak tanır ve dermal rejenerasyon programlarındaki biyolojik riski azaltır.
- Portföy Etkisi: Fizyolojik olarak ilgili preklinik dokulara güvenilir erişim sağlayarak, deri onarım programlarında riske göre ayarlanmış devam/durdur kararlarını destekler.
Uygulama Hususları
- Döner aletler kullanarak iğne imalatı ve kesme tekerleklerinin hassas hizalanması konusunda teknik beceri gerektirir.
- Montaj ve operasyon için döner aletlere, vakum sistemlerine ve steril laboratuvar malzemelerine erişime bağlıdır.
- Mikrosütun tutarlılığını sağlamak için kullanıcılar arasında iğne çapının ve hasat açısının standartlaştırılmasını gerektirir.
- Tıkanmayı önlemek ve doku canlılığını korumak amacıyla, yüksek hacimli hasat sırasında aralıklı salin yıkama işleminin eğitimi gereklidir.
- Cilt ve potansiyel olarak diğer yumuşak dokularla sınırlıdır; daha yoğun organlara adaptasyon, modifiye edilmiş iğne geometrisi veya kesme parametreleri gerektirebilir.
