Name: Glycyrrhizae Radix nöroprotektif etkilerinin değerlendirilmesi et Rhizoma ekstresi kullanarak bir geçici orta serebral arter tıkanıklığı fare modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-12-09T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 53 s
Description: Keşfedin, geçici orta serebral arter tıkanıklığı fare modelinde Glycyrrhizae Radix et Rhizoma ekstresinin nöroprotektif etkilerini. Bu yöntem, inme araştırmalarında doğal bileşiklerin taranması için güvenilir bir model sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Geçerli değildir.

Hayvanları içeren tüm yordamları Pusan Milli Üniversitesi (onay numarası, PNU-2016-1087) Etik Komitesi tarafından kabul edildi. Bir grafik genel bakış bu çalışmanın Şekil 1' de gösterilen.
1. hazırlık ve GRex İdaresi
Not: Bu çalışmada kullanılan GR ticari ilaç şirketinden satın alınmıştır.
<ol><li>200 gr. GR 2000 mL metanol yerleştirin ve oda sıcaklığında (25 ° C) için 5 gün kuluçkaya.</li>
	<li>0,26 mm kalınlık ve 5 µm gözenek boyutu ile filtre kağıdı kullanarak karışımı filtre ve süpernatant kaldır. 1000 mL metanol GR kalıntı ekleyin ve tekrar filtre.</li>
	<li>İki supernatants birleştirmek, filtre kağıdı ile filtre, vakum altında konsantre ve GRex üretmek için kalıntı şeytanibir.</li>
	<li>Dimetil sülfoksit (DMSO), % 0,9 fizyolojik serum seyreltik GRex dağıtılması ve 0,45 µm şırınga filtre ile filtre. Sonra DMSO son konsantrasyonu < %5 için ayarlayın.</li>
	<li>GRex (300 mg/kg vücut ağırlığı) 1 h MCAO oral gavaj yolu ile reperfüzyon sonra yönetmek. Fizyolojik serum (10 mL/kg vücut ağırlığı) sadece için normal grubu ve kontrol grubu, sırasıyla seyreltilmiş DMSO yönetmek. Not: Bu deneyde kullanılan GRex konsantrasyon bizim önceki çalışma8ile etkin konsantrasyon göre belirlendi.</li>
</ol>2. fare modeli MCAO
<ol><li>Kullanım erkek C57BL/6 fareler 6 hafta yaşlı ve 22-25 g ağırlığında standart chow ve su ile ev ücretsiz giriş imkanı ile tüm hayvanlar onları ısı kontrollü (22 ± 1 ° C) olan bir ortamda ve bir 12 h ışık/karanlık döngü sağlar.<ol>
<li>Sham işletilen normal, denetim ve GRex tedavi gruplarından oluşmalıdır fareler her, altı farelerin gruplara bölün.</li>
		<li>MCAO ameliyatı (modifikasyon yöntemi Koizumi vd. 9) denetim ve GRex tedavi gruplar stereo mikroskop kullanarak.</li>
	</ol>
</li>
	<li>İnhalasyon anestezi % 70 N2O %2 isoflurane ve % 30 O2kullanarak farelerde neden. Fare kuyruğunu için uygulanan mekanik uyarana yanıt vermemeye başlar zaman anestezi yeterli kabul edilir. 36,5 ± 0,5 ° C sıcaklık-holding battaniye bir termometre için bağlı bir vücut kullanarak, farelerin vücut ısısını korumak.</li>
	<li>Sandıklar tüm saç kaldırmak ve farelerin tıraş tarafından boyunları saç dökücü krem, kullanımı ile takip betadin fırçalayın için iki kez alkol ile alternatif ile cilt cerrahi sitenin dezenfekte, sonra bir kesi yaklaşık 2 cm uzun ile cerrahi bıçak boyun ortasına. Dikkatli bir şekilde sol ortak karotid arter (LCCA), dış karotid arter ve bağ dokuları çevreleyen gelen şahdamarını dalı izole et.</li>
	<li>Dış karotid arter ve ortak karotid arter ile cerrahi dikiş (4-0 ipek sütür, yarım aksaklık düğüm) geçici olarak kan akışını bloke etme işlemi sırasında iç karotis arter ligate.</li>
	<li>Sol MCA kökenine şahdamarını aracılığıyla silikon kaplı naylon dikiş (8-0 monofilament, 11 mm uzun) yerleştirin. Filaman 0.10-0.12 aralığına silikon kaplı parçası kalınlığını ayarla mm.</li>
	<li>Lazer Doppler akış ölçer kullanarak MCA içinde (rCBF) göreli beyin kan akımında azalma ölçmek. Ne zaman rCBF < % 20'si istirahat koşulu değerleri tüm iskemik döneminde yapılmaktadır MCAO teyit edilecektir.</li>
	<li>Serebral arter tıkandı ise damar için 2 h için eklenen filaman düzeltin ve sonra dikkatle filaman reperfüzyon 22 h için kan akışı geri çekilme. Cilt tarafından 5 yerlerde (3-0 ipek sütür, iki yarım aksama düğüm) dikiş dikiş ve anesteziden uyandırmak her fare izin.</li>
	<li>Normal grubunda aşağıdaki yukarıda aynı yordamı (2.4 kadar), bir sahte işlemi aşağıdaki özel durum ile gerçekleştirin. Ortak karotid arter ligate ve kazıma kas ve deri dikiş.</li>
</ol>3. ölçü biriminin bozuk beyin dokusunun
<ol><li>Sonra ötenazi CO2 inhalasyon ile beyin hasarı ölçüm için farelerin, tüketim fare Iris cerrahi makas ve açılı forseps kullanarak MCAO başlangıçlı sonra 24 h beyin.<ol>
<li>Makas kullanırken başını kaldırdıktan sonra kafatası derisini üzerine çevirmek için baş orta hat derideki kesik olun.</li>
		<li>Çeper açılı forseps ile kır, dura soyulması aynı zamanda önemli ve kafatası dikkatle beyninden izole etmek.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Kesim bölümler (1 mm kalınlığında) eksize dokusuna bir fare beyin matrisi kullanarak ve bölümler için % 2 2,3,5-triphenyltetrazolium klorür (TTC) 17 dk bir çözümde leke.</li>
	<li>En az 2 h için % 10 formalin bölümlerde düzeltin ve sonra onları bir dijital kamera ile fotoğraf. TTC nekrotik alanlar beyaz olacak iken uygun doku kırmızı leke tespit edilecektir.</li>
	<li>Analiz ve beyin enfarktüsü alanının ImageJ kullanarak her bölümün ölçmek.</li>
</ol>4. Hematoksilen ve eozin (H & E) ve kresil menekşe histolojik bölümlerini boyama
<ol><li>CO2 inhalasyon tarafından fareler histolojik çalışma için ötenazi ve onları 10 mL % 4 paraformaldehyde (PFA) tarafından takip transcardially fosfat tamponlu tuz (PBS), 10 mL ile sıvı. Yukarıda (3.1) olarak aynı yordam kullanılarak beyin izole ve beyin 10 mL % 30 sukroz ve gece bırakın.</li>
	<li>Beyin dokusu en uygun kesme sıcaklığında (OCT) bileşik katıştırmak ve coronally bir cryostat kullanarak 15 µm kalınlığında bölümlere dilim. Hematoksilen ve eozin (H & E) veya kresil mor ile boyama tarafından takip cam slaytlardaki bölümler bağlayın.</li>
	<li>% 80 etanol 1dk hematoksilen solüsyona 5 min için boyama tarafından takip için cam slaytları bırakın.<ol>
<li>İki kez % 1 asit alkol slaytları batır, doymuş Lityum Karbonat çözüm için 30 bırakın s, 30 s ve sonra counterstain 30 eozin çözüm için musluk suyu ile yıkayın s.</li>
		<li>Slaytları dokunun suyla durulayın, % 95 ve mutlak etanol içinde arka arkaya emmek.</li>
		<li>Slaytları kuruması, ksilen en az 10 dk için temizleyin ve montaj orta kullanarak coverslips bağlayabilirsiniz.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Cam slaytları bir slayt üzerinde sıcak daldırma gecede kloroform ile seyreltilmiş % 50 Etanol ve ardından en az 1 h için yerleştirin.<ol>
<li>% 0.1 kresil violet 40 ° C kuru fırında 10 dakika ile slaytlar leke.</li>
		<li>% 95 etanol 30 dk için bırakın, sonra mutlak etanol için 2 kez kurutmak.</li>
		<li>Ksilen 5 min için 2 kez temizleyin, sonra hava kuruduktan sonra montaj orta ile monte.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bir mikroskop kullanarak, sonra MCAO kaynaklı beyin hasarı oluştu histolojik değişiklikler gözlemlemek.</li>
</ol>5. istatistiksel analiz
<ol><li>Deneysel sonuçlar anlamına gelir ± standart sapma hızlı ve bir tek yönlü veri analiz yazılımı kullanarak Tukey'nın post hoc Analizi-tarafından takip varyans analizi (ANOVA) kullanarak gruplar arasında istatistiksel anlamlılık belirlemek.</li>
	<li>İstatistiksel anlamlılık pbir ayarla-< 0,05 değer.</li>
</ol>

<ol><li>Bejot, Y., Delpont, B., Giroud, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rising+stroke+incidence+in+young+adults%3A+more+epidemiological+evidence%2C+more+questions+to+be+answered%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Rising stroke incidence in young adults: more epidemiological evidence, more questions to be answered.</a> Journal of the American Heart Association. 11 (5), (2016).</li>
<li>Hadadha, M., Vakili, A., Bandegi, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+the+inhibition+of+hydrogen+sulfide+synthesis+on+ischemic+injury+and+oxidative+stress+biomarkers+in+a+transient+model+of+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Stroke+and+Cerebrovascular+Diseases%22%5BJournal%5D)">Effect of the inhibition of hydrogen sulfide synthesis on ischemic injury and oxidative stress biomarkers in a transient model of focal cerebral ischemia in rats.</a> Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases. 24 (12), 2676-2684 (2015).</li>
<li>Durukan, A., Tatlisumak, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Article+in+Handbook+of+Clinical+Neurology%22%5BJournal%5D)">Animal models of ischemic stroke.</a> Article in Handbook of Clinical Neurology. 92, 43-66 (2009).</li>
<li>Kim, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+Stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+and+Neurorehabilitation%22%5BJournal%5D)">Animal Models of Stroke.</a> Brain and Neurorehabilitation. 4 (1), 1-11 (2011).</li>
<li>Rizzato, G., Scalabrin, E., Radaelli, M., Capodaglio, G., Piccolo, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+exploration+of+licorice+metabolome%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">A new exploration of licorice metabolome.</a> Food Chemistry. 221, 959-968 (2017).</li>
<li>Zhu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+determination+of+flavonoids+in+licorice+and+comparison+of+three+licorice+species%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Separation+Science%22%5BJournal%5D)">Rapid determination of flavonoids in licorice and comparison of three licorice species.</a> Journal of Separation Science. 39 (3), 473-482 (2016).</li>
<li>Ota, M., Mikage, M., Cai, S. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herbological+study+on+the+medicinal+effects+of+roasted+licorice+and+honey-roasted+licorice%5BTitle%5D)+AND+%22Yakushigaku+Zasshi%22%5BJournal%5D)">Herbological study on the medicinal effects of roasted licorice and honey-roasted licorice.</a> Yakushigaku Zasshi. 50 (1), 38-45 (2015).</li>
<li>Lim, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Licorice+pretreatment+protects+against+brain+damage+induced+by+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medicinal+Food%22%5BJournal%5D)">Licorice pretreatment protects against brain damage induced by middle cerebral artery occlusion in mice.</a> Journal of Medicinal Food. 21 (5), 474-480 (2018).</li>
<li>Koizumi, J. Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema%5BTitle%5D)+AND+%22Nosotchu%22%5BJournal%5D)">Experimental studies of ischemic brain edema.</a> Nosotchu. 8 (1), 1-8 (1986).</li>
<li>Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hematoxylin+and+eosin+staining+of+tissue+and+cell+sections%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Protocols%22%5BJournal%5D)">Hematoxylin and eosin staining of tissue and cell sections.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2008, (2008).</li>
<li>Zhu, Y., Liu, F., Zou, X., Torbey, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+unbiased+estimation+of+neuronal+number+in+the+rat+hippocampus+with+different+staining+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Comparison of unbiased estimation of neuronal number in the rat hippocampus with different staining methods.</a> Journal of Neuroscience Methods. 254, 73-79 (2005).</li>
<li>Alberts, M. J., Ovbiagele, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+strategies+for+ischemic+stroke+prevention%3A+role+of+multimodal+combination+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">Current strategies for ischemic stroke prevention: role of multimodal combination therapies.</a> Journal of Neurology. 254 (10), 1414-1426 (2007).</li>
<li>Pinto, A., Tuttolomondo, A., Di Raimondo, D., Fernandez, P., Licata, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebrovascular+risk+factors+and+clinical+classification+of+strokes%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Vascular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Cerebrovascular risk factors and clinical classification of strokes.</a> Seminars in Vascular Medicine. 4 (3), 287-303 (2004).</li>
<li>Barlow, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identifying+the+brain+regions+associated+with+acute+spasticity+in+patients+diagnosed+with+an+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Somatosensory+and+Motor+Research%22%5BJournal%5D)">Identifying the brain regions associated with acute spasticity in patients diagnosed with an ischemic stroke.</a> Somatosensory and Motor Research. 33 (2), 1-8 (2016).</li>
<li>Roth, S., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stroke+research+at+the+crossroads+-+where+are+we+heading%5BTitle%5D)+AND+%22Swiss+Medical+Weekly%22%5BJournal%5D)">Stroke research at the crossroads - where are we heading.</a> Swiss Medical Weekly. 146, 14329(2016).</li>
<li>Feuerstein, G. Z., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Medicine+Today%22%5BJournal%5D)">Animal models of stroke.</a> Molecular Medicine Today. 6 (3), 133-135 (2000).</li>
<li>Herson, P. S., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+stroke%3A+translational+potential+at+present+and+in+2050%5BTitle%5D)+AND+%22Future+Neurology%22%5BJournal%5D)">Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050.</a> Future Neurology. 9 (5), 541-551 (2014).</li>
<li>Kumar, A., Gupta Aakriti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+on+animal+models+of+stroke%3A+an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">A review on animal models of stroke: an update.</a> Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).</li>
<li>O'Collins, V. E., Donnan, G. A., Howells, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((History+of+animal+models+of+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Stroke%22%5BJournal%5D)">History of animal models of stroke.</a> International Journal of Stroke. 6 (1), 77-78 (2011).</li>
<li>Ji, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioactive+constituents+of+Glycyrrhiza+uralensis+%28licorice%29%3A+discovery+of+the+effective+components+of+a+traditional+herbal+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Natural+Products%22%5BJournal%5D)">Bioactive constituents of Glycyrrhiza uralensis (licorice): discovery of the effective components of a traditional herbal medicine.</a> Journal of Natural Products. 79 (2), 281-292 (2016).</li>
<li>Yang, R., Wang, L. Q., Yuan, B. C., Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pharmacological+activities+of+licorice%5BTitle%5D)+AND+%22Planta+Medica%22%5BJournal%5D)">The pharmacological activities of licorice.</a> Planta Medica. 81 (18), 1654-1669 (2015).</li>
<li>Yang, R., Yuan, B. C., Ma, Y. S., Zhou, S., Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+anti-inflammatory+activity+of+licorice%2C+a+widely+used+Chinese+herb%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutical+Biology%22%5BJournal%5D)">The anti-inflammatory activity of licorice, a widely used Chinese herb.</a> Pharmaceutical Biology. 55 (1), 5-18 (2017).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Metabolik hastalıklar gibi kronik hipertansiyon, şeker hastalığı ve hiperlipidemi, kontur için büyük risk faktörleri olan artan yaygınlığı ile inme önleme ve tedavi tıbbi araştırma12, önemli bir alan haline gelmiştir 13. dil ve hareketi kalp krizi sonrası açıkları şiddetle doku14 beyin kalmasına ve yoksul bir yaşam kalitesi hastalar ve onların aileleri15için hasar derecesi ile ilişkili. İlaç tedavileri etkinliğini i...

Beyin hasar iskemi ve reperfüzyon serebral kan akımı neden sinir hücrelerinin ölüm ve beyin doku kaybına yol açar. Bu tür bir beyin hasarı serebrovasküler hastalıklar obezite, hipertansiyon ve diyabet1,2gibi metabolik hastalıkların yayılması nedeniyle artan yaygınlığı ile artmaya devam ediyor. Yaşlı hastalarda inme ile kesin sayısı dünya çapında önemli ölçüde artmıştır ve uzun vadeli Engelli kez bırakan bu hastalar için tıbbi bakım maliyeti büyük bir toplumsal yüktür. Bu nedenle, ikincil Engelli ekonomik yük1,2azaltmak mümkün olduğu kadar hafifletilmiş.
En sık kullanılan kemirgen beyin enfarktüsü içinde iskemik inme3, neden olan kan akışını engellemek için bir silikon kaplı Cerrahi dikiş filaman ile MCA tıkandı orta serebral arter (MCA) tıkanıklığı (MCAO) modeli modeldir 4. tıkanıklığı malzeme içi luminal filaman ekleme süresi işleyerek tıkanıklığı zaman ve kalıcılığı kontrol sağlar gibi bir filament kullanarak.
Önceki çalışmalar, aynı kemirgen MCAO model kullanıldığında bile beyin enfarktüsü hacmi düşük tekrarlanabilirlik çalışmaların neden deneyler arasında değişir göstermiştir. Tekrarlanabilirlik artırmak için deneyde kullanılan filaman nane kalınlığı optimize. Serebral iskemik dönemi ve 60 dk uzun bir iskemik süre hacimsel bölgesinin izin gösterdi indüklenen infarktüsü ön bir çalışmanın sonuçlarını gözlenen ve sayısal beyin dokusuna zarar görmüş.
Glycyrrhizae Radix et Rhizoma (GR), olarak da bilinen meyan kökü kurutulmuş kök ve Glycyrrhiza uralensis köksaplar oluşur ve G. glabra. Bu Çin ve Kore geleneksel tıpta bir gıda katkı maddesi ve5,6,7olarak medicinally dahil olmak üzere çeşitli amaçlarla kullanılmıştır.
Bir önceki çalışmada8GR metanol özü (GRex) MCAO farelerde bir anti-apoptotik etki gösterdi ile ön arıtma önemli önlenmesi B hücreli lenfoma 2 protein ifadesi azalma (Bcl-2) ve Bcl ekstra büyük (Bcl-xL) dahil olmak üzere. Bu çalışma sonrası enfarktüsü tedavi GRex ile etkili bir şekilde MCAO bağlı serebral hasar enfarktüsü hacmindeki azaltılmış Eğer belirlemede verimlilik değerlendirerek tekrarlanabilirlik geleneksel MCAO fare modeli geliştirmek için yapılmıştır.

<table><tbody><tr><td>Glycyrrhizae Radix et Rhizoma</td><td>Gwangmyoung Pharmaceuticals Co., Kore</td><td></td><td>Glycyrrhizae Radix et Rhizoma</td></tr><tr><td>Kalitatif filtre kağıdı</td><td>Advantec</td><td>Filtre kağıdı No. 2</td><td>Kalitatif filtre kağıdı</td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit (DMSO)</td> <td>Sigma</td><td>D8418-250ML</td><td>Dimetil sülfoksit (DMSO)</td></tr> <tr><td>Şırınga filtresi (0.45 ve mikro; m)</td> <td>Sigma</td><td>CLS431220</td><td>Şırınga filtresi (0.45 & mikro; m)</td></tr> <tr><td>Stereo Mikroskop</td><td>Leica</td><td>M50</td><td>Stereo Mikroskop</td></tr><tr><td>Stereo Mikroskop</td><td>Nikon</td><td>SMZ745</td><td>Stereo Mikroskop</td></tr><tr><td>Lazer Doppler</td><td>Moor Enstrüman</td><td>moorVMS-LDF</td><td>Lazer Doppler</td></tr><tr><td>Anestezi Masa Üstü Braketi, N2O & O2 Akış Ölçer Sistemi</td><td>Harvard Appratus</td><td>34-1352</td><td>N2O & ile Anestezi Masa Üstü Braketi O2 Akış Ölçer Sistemi</td></tr><tr><td>Homeotermik İzleme Sistemi</td><td>Harvard Appratus</td><td>55-7020</td><td>Homeotermik İzleme Sistemi</td></tr><tr><td>Dijital Fotoğraf</td> Makinesi <td>Canon</td><td>Eos-M2</td><td>Dijital Fotoğraf</td></tr><tr><td>Makinesi Kriyostat</td><td>Leica</td><td>CM3050S</td><td>Kriyostat</td></tr><tr><td>Mikroskobu</td><td>Carl Zeiss</td><td>Zeiss Axio</td><td>Mikroskop</td></tr><tr><td>Veri</td><td>Analizi Systat Yazılım A.Ş.</td><td>SigmaPlot sürüm 12</td><td>Veri Analizi</td></tr><tr><td>Veri Analizi</td><td>NIH Image</td><td>ImageJ</td><td>Veri Analizi</td></tr><tr><td>Fare diyeti</td><td>Doo Yeol Biotech</td><td>Standart kemirgen yemeği</td><td>Fare diyeti</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>JOONGWAE</td><td>A02104781</td><td>İzofluran</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>TROIKAA</td><td>ISOTROY 100</td><td>İzofluran</td></tr><tr><td>İpek sütür (4-0 Siyah ipek)&nbsp;</td><td>AILEE</td><td>SK47510</td><td>İpek sütür (4-0 Siyah ipek)&nbsp;</td></tr><tr><td>İpek sütür (3-0 Beyaz ipek)&nbsp;</td><td>Baekjae</td><td>57</td><td>İpek sütür (3-0 Beyaz ipek)&nbsp;</td></tr><tr><td>Naylon sütür (8-0 monofilament)&nbsp;</td><td>AILEE</td><td>NB825</td><td>Naylon sütür (8-0 monofilament)&nbsp;</td></tr><tr><td>2,3,5-trifeniltetrazolyum klorür (TTC)</td><td>Sigma</td><td>T8877-25G</td><td>2,3,5-trifeniltetrazolyum klorür (TTC)</td></tr><tr><td>Formalin (Formaldehit çözeltisi)</td><td>JUNSEI</td><td>69360-1263 20KG</td><td>Formalin (Formaldehit çözeltisi)</td></tr><tr><td>Hematoksilen (Harris Hematoksilen)</td><td>YD Teşhis:</td><td>EasyStain</td><td>Hematoksilen (Harris Hematoksilin)</td></tr><tr><td>Eozin (%1 Eozin Y Çözeltisi)</td><td>MUTO SAF KİMYASALLAR</td><td>3200-2</td><td>Eozin (% 1 Eozin Y Çözeltisi)</td></tr> <tr><td>Kresil menekşe (asetat)</td> <td>Sigma</td><td>C5042-10G</td><td>Cresil menekşe (asetat)</td></tr> <tr><td>Paraformaldehit ve nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6148-1KG</td><td>Paraformaldehit&nbsp;</td></tr><tr><td>Sükroz</td><td>JUNSEI</td><td>31365-0350 1KG</td><td>Sükroz</td></tr><tr><td>Optimum kesme sıcaklığı (OCT) bileşiği</td><td>Scigen</td><td>4583</td><td>Optimum kesme sıcaklığı (OCT) bileşiği</td></tr><tr><td>Dağıtma Bıçağı</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>10055-12</td><td>Dağıtma Bıçağı</td></tr> <tr><td># 4 Forcep</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11241-30</td> <td># 4</td></tr> <tr><td>Forcep</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11254-20</td><td>#5 Forcep</td></tr><tr><td>#6 Forcep</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11260-20</td><td>#6 Forcep</td></tr><tr><td>#7 İnce Forcep</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11274-20</td><td>#7 İnce Forcep</td></tr><tr><td>Cerrahi Makas</td><td>Güzel Bilim Aletleri</td><td>14001-12</td><td>Cerrahi Makas</td></tr><tr><td>Ekstra İnce Bonn</td><td>Makas Güzel Bilim Aletleri</td><td>14084-08</td><td>Ekstra İnce Bonn Makas</td></tr><tr><td>Moria Pascheff-Wolff Bahar Makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>15371-92</td><td>Moria Pascheff-Wolff Bahar</td></tr><tr><td>Makas Damar Genişletme Forcep</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>18153-11</td><td>Damar Genişletme Forcep</td></tr></tbody></table>

glycyrrhizae radix nöroprotektif etkilerinin değerlendirilmesi et rhizoma ekstresi kullanarak bir geçici orta serebral arter tıkanıklığı fare modeli

Assessing Neuroprotective Effects of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Extract Using a Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Mouse Model

İskemi kalp krizi sonra serebral kan akımı reperfüzyon takip sinir hücrelerinin ölüm ve beyin doku kaybına yol açar. Kontur çalışmak için en sık kullanılan hayvan modeli orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modelidir. Hatta aynı deneysel hayvan türleri benzer MCAO koşullar altında kullanıldığında önceki araştırma çalışmaları farklı enfarktüsü boyutları bildirdi. Bu nedenle, bu tutarsızlık yönelik olarak geliştirilmiş bir deneysel yöntem geliştirdik. Fareler bir filament tıkanıklığı malzemesi olarak insan kontur koşulları taklit kullanarak MCAO tabi tutuldu ve filament kalınlığı daha tekrarlanabilir infarktüsü birim kurmak için optimize edildi. Metanol ile tedavi fareler ayıklamak Glycyrrhizae sayı tabanı et kontur indüksiyon takip köksap (GRex) önemli ölçüde azalan toplam infarktüsü birim gösterdi ve hayatta kalma artan sayı hücreleri tedavi edilmemiş kontrol grubuna göre. Bu Deneysel protokol başarıyla değiştirildi ve tekrarlanarak iskemik inme faydalı GRex etkisini gösterdi.

Kontrol grubunda nispeten geniş hasarlı bölgeleri görülmektedir, ancak sahte işletilen normal grubunda hiçbir beyin enfarktüsü görülmektedir. Fareler (Şekil 2) yönetilen 300 mg/kg GRex MCAO model grubunda, hasarlı bölgeyi istatistiksel olarak anlamlı bir azalma görülmektedir.
Histolojik değişiklikler iskemik beyin bölümleri H &amp; E veya kresil mor ile boyama tarafından incelenmiştir. Kresil menekş...

Bu çalışmada, bir orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) fare modeli kurarak daha tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için varolan deneysel yöntemini değiştirmek. Glycyrrhizae Radix, sözlü yönetimi et köksap (GR) metanol özü (GRex), kontur indüksiyon, takip toplam infarktüsü cilt tedavi edilmemiş kontrol grubuna göre önemli ölçüde azalmıştır.

Glycyrrhizae Radix nöroprotektif etkilerinin değerlendirilmesi et Rhizoma ekstresi kullanarak bir geçici orta serebral arter tıkanıklığı fare modeli

Ischemia followed by reperfusion of cerebral blood flow after a stroke leads to the death of nerve cells and loss of brain tissue. The most commonly used ...

Bu yöntem, nöroprotektif doğal bileşikler Modeli ile ilgili tarama hakkında nörolojik ve geleneksel ağız hekimliği araştırma alanlarında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı enfeksiyon hacminin daha yüksek prodüksebilitesi iskemik zamanlama dozuna uygun olmasıdır. Bu yöntemin görsel gösterimi, steril bir mikroskop kullanarak orta serebellar arterorijinal, orta serebellar arter içine çok ince bir uygulama eklemek için tipik olduğu gibi önemlidir.Prosedürü gösteren Se-Eun Lee, benim laboratuvarımda okuyan bir okul öğrencisi olacak. Glycyrrhizae Radix et Rhizome ekstresi veya GRex hazırlamak için, ilk oda sıcaklığında beş günlük kuluçka için metanol iki litre glycyrrhizae Radix et Rhizome veya GR, 200 gram ekleyin. Kuluçka sonunda, çözeltiyi 5 mikrometre gözenek boyutuna sahip 0,26 milimetre kalınlığındafiltre kağıdıyla süzün.Taze metanol bir litre GR kalıntısı ekleyin ve tekrar çözüm filtre. İki filtrates birleştirin ve filtre kağıt yeni bir parça ile süzün. Daha sonra GRex üretmek için dondurularak kurutmadan önce ekstresi vakum altında yoğunlaştırın.GRex'i yönetime hazırlamak için dondurulmuş kurutulmuş ürünü dimetilsülfoksitle eritin ve karışımı

assessing-neuroprotective-effects-glycyrrhizae-radix-et-rhizoma

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Orta serebral arter (MCA) ligasyonu, hayvan modellerinde fokal serebral iskemi çalışma bir tekniktir. Bu yöntemde, orta serebral arter kraniotomi maruz kalmaktadır ve koterizasyon tarafından bağlandı. Bu yöntem son derece tekrarlanabilir infarkt hacimleri ve mevcut diğer yöntemlere göre artış post-operatif sağkalım oranları verir.

Fare Daimi Orta Serebral Arter ligasyon Of Uygulama

Kaynak: Zheng, Y., et al. Serebral iskemiye karşı asidik son koşullandırmanın nöroproteksiyonunu incelemek için deneysel modeller. J. Vis. Uzm. (2017)Bu video, orta serebral arter tıkanıklığının (MCAO) bir fare modelinde iskemik hasara karşı nöroprotektif etkilerini değerlendirmek için asidik son koşullandırma (APC) uygulamasını göstermektedir. MCAO modelinde reperfüzyonda yer alan adımları ve eksitotoksisite, oksidatif stres ve nöronal ölümü azaltmak için reperfüzyon sırasında APC uygulamasını...

 Serebral İskeminin Bir Fare Modelinde Asidik Postkoşullandırmanın Nöroprotektif Etkilerinin Değerlendirilmesi

Kaynak: Lee, S. E., et al. Geçici Orta Serebral Arter Oklüzyonu Fare Modeli Kullanılarak Glycyrrhizae Radix ve Rhizoma Ekstraktının Nöroprotektif Etkilerinin Değerlendirilmesi. J. Vis. Uzm. (2018)Bu video, bir orta serebral arter oklüzyonu fare modelinde bir test bileşiğinin nöroprotektif etkisini değerlendirme prosedürünü göstermektedir. Bileşik beyne girer, nöronal ölümü önler ve enfarktüs hacmini azaltır, tedavi edilmemiş bir fareye kıyasla nöroprotektif etkisini doğrular.

Orta Serebral Arter Oklüzyonu Fare Modelinde Bir Test Bileşiğinin Nöroprotektif Etkilerinin Değerlendirilmesi

Bu protokol, farelerde geçici orta serebral arter tıkanıklığını takiben enfarktüs hacimlerini ve kan-beyin bariyeri bozulmasını azaltan tekrarlayan hipoksik ön koşullandırmayı veya sistemik hipoksiye kısa süreli maruziyetleri tanımlar. Ayrıca, nörovasküler korumanın etkinliğini değerlendirmek için inme sonrası enfarktüs hacminin ve kan-beyin bariyeri bozulmasının ikili miktar tayinini detaylandırır.

Farelerde Tekrarlanan Hipoksik Önkoşullanma ve Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ardından Nörovasküler Koruma Kantitasyonu

inme patofizyolojisini anlamak için, güvenilir modeller kullanmak önemlidir. Farelerde en sık kullanılan inme modellerinden birini anlatacağız Bu yazıda, orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modeli olarak adlandırılan reperfüzyon ile (ayrıca lümen içi filament veya sütür modeli olarak adlandırılır).

Farelerde Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Reperfüzyon Kaynaklı İnme Cerrahi Yaklaşım

distal orta serebral arter dalı (MCAO) Cerrahi tıkanması, deneysel inme araştırmalarında sıkça kullanılan bir modeldir. Bu el yazması farelerde boyuna intravital mikroskopi için bir fırsat sunuyor yanal kafatası pencere takılması, birlikte kalıcı MCAO temel tekniğini açıklar.

Yanal Kronik Kranial Pencere Hazırlık sağlar İn Vivo Farelerde Distal Orta Serebral Arter Tıkanıklığı takiben Gözlem

Silikon kaplı bir sütür kullanılarak orta serebral arterin tıkanmasıyla inen bir fare inme modelini tarif ediyoruz. Protokol, kalıcı oklüzyon veya geçici bir iskemiyi indüklemek için uygulanabilir ve ardından reperfüzyon uygulanabilir.

Enfarktüs Bölgesi Orta Arter Tıkanıklığı Tekniği ve Görselleştirme kullanma Fare İskemik İnme ve İskemi-reperfüzyon indüksiyon

Burada, basit dikişler ve bir kelepçe kullanarak geçici bilateral ortak karotis arter tıkanma ile retina iskemisinin bir fare modelini tarif ediyoruz. Bu model, kardiyovasküler anormalliklerin neden olduğu retina iskemisinin patolojik mekanizmalarını anlamak için yararlı olabilir.

Geçici Bilateral Ortak Karotid Arter Tıkanması sonucu İndüklenen İskemik Retina Yaralanmasının Murine Modeli

Bu protokol, orta büyüklükte bir enfarktüse ve mükemmel bir hayatta kalma oranına sahip benzersiz bir fare vuruşu modeli gösterir. Bu model, klinik öncesi inme araştırmacılarının iskemi süresini uzatmasına, yaşlı fareleri kullanmasına ve uzun vadeli fonksiyonel sonuçları değerlendirmesine olanak tanır.

Yaşlı Farelerde İnme Sonuçlarını İncelemek için Modifiye Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Burada, C57BL/6J farelerde transkraniyal elektrokoagülasyon yoluyla distal orta serebral arter tıkanıklığı (dMCAO) modeli oluşturmak ve sonraki nörolojik davranışları ve histopatolojik özellikleri değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz.

Distal Orta Arter Oklüzyonu Tekniği Kullanılarak Farelerde Akut İskemik İnme İndüksiyonu

Keşfedin, geçici orta serebral arter tıkanıklığı fare modelinde Glycyrrhizae Radix et Rhizoma ekstresinin nöroprotektif etkilerini. Bu yöntem, inme araştırmalarında doğal bileşiklerin taranması için güvenilir bir model sunar.

Glycyrrhizae Radix nöroprotektif etkilerinin değerlendirilmesi et Rhizoma ekstresi kullanarak bir geçici orta serebral arter tıkanıklığı fare modeli (Video) | JoVE Journal

Glycyrrhizae Radix nöroprotektif etkilerinin değerlendirilmesi et Rhizoma ekstresi kullanarak bir geçici orta serebral arter tıkanıklığı fare modeli

Daha fazla video keşfet