Name: Sığır meme bezi biyopsisi teknikleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-12-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 53 s
Description: Öğrenin sığır meme bezi biyopsisi tekniklerini, doku örnekleme ve hücre kültürü için. Bu yöntem, meme fizyolojisi ve metabolizmasını inceleyen araştırmacılar için güvenilir bir araç sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu araştırma ulusal hayvan beslenme programı ve Virginia Tech tarafından desteklenmiştir. Bayan Tara Pilonero, Dr. Julie Settlage ve Dr. Izabelle Teixeira teknik yardımı minnetle kabul vardır.

Tüm yöntem tanımlamak Virginia Tech kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) tarafından kabul edildi.
1. personel
<ol><li>Cerrahi ve inek işleme tecrübesi ile en az iki görevlileri var.</li>
	<li>Tüm yardımcılar en az üç kez, mümkünse canlı hayvanlar üzerinde bu iletişim kuralı ile ilgili yordamları gerçekleştirmeden önce kadavra malzeme kullanarak yetiştirmek. Not: Eğitim olmuştur bir eğitmen tarafından yapılmalıdır daha önce eğitim almış ve tekniği uygulandı.</li>
	<li>Bir büyük hayvan veteriner eldeki ilaç idaresi için var ve olay bu acil tedavi sırasında yordamı gerekli olur. Bu işlem sırasında ortaya çıkabilecek acil durumlar dahil ancak bunlarla sınırlı değildir: kanama, α-2 agonist aşırı doz ve akciğer ödemi, regürjitasyon ve aspirasyon gıda malzemesi, ağrı ve hasta direnç daha fazla sedasyon gerektiren.</li>
</ol>2. cerrahi aletler, sarf malzemeleri ve tesis hazırlanması
<ol><li>Stok ve tüm malzeme ve ek malzemeler ( Tablo malzemelerigörmek) satın almak.</li>
	<li>Temiz ve basınçlı kap cerrahi perdeler, biyopsi aletleri, neşter sahipleri, cerrahi havlu ve forseps.</li>
	<li>Bir uygun ebatlarda sıkmak oluğu ve baş inek tutmaya kapısı var.</li>
	<li>Sıkmak oluğu yakınındaki bir tabloyla bir çalışma alanı oluşturun.</li>
	<li>Çalışma alanının temiz ve inek aracılığıyla trafik sınırlıdır emin olun.</li>
	<li>Malzeme ve ek malzemeler kolay erişim için çalışma alanı içinde düzenleyin.</li>
	<li>Doğru aydınlatma içinde çalışma alanı var.</li>
</ol>3. hayvanlar hazırlanması
<ol><li>Bir gün önce zamanlanmış biyopsi, yıkama ve hayvan, özellikle meme gübre ve kirli malzeme kaldırmak için fırçalayın.</li>
	<li>Güvenli ve insana ilişkin kısıtlama sığır yordamları izleyin.</li>
	<li>Biyopsi öncesinde ve tekrar biyopsi esnasında, sağlık, fiziksel durumu ve hayvan davranışını değerlendirmek. Not: Sıcaklık, nabız ve solunum oranları gibi sınav dermatit için önerilen cerrahi sitesi veya diğer alanlarda bakteriyel enfeksiyon üzerinde en az bir muayene içerir. Her üç aylık dönem--dan süt örnekler toplamak ve mastit için kontrol edin.</li>
	<li>Yalnızca sağlıklı inek kullanın.</li>
	<li>Tamamen ineği sağacağım.</li>
	<li>Hayvan süt bezleri huzurunda en aza indirmek için sağım 2 h içinde ideal sıkmak oluk içine taşıyın.</li>
	<li>Bir kafa kapı hayvanla dizginlemek.</li>
</ol>4. analjezi ve sedasyon
<ol><li>Bir ip askılı hareket ileri ve geriye doğru önlemek için inek başına yerleştirin.</li>
	<li>Bir yana hayvanın kafanı çıkar ve kafa tutmak için bir hızlı yayın düğüm kullanarak sıkmak oluğu ip bağlamak.</li>
	<li>Bir % 70 izopropil alkol bez ile enjeksiyon alanı temizleyin ve flunixin meglumin (1.1-2.2 mg/kg vücut ağırlığı) intravenöz yolu ile belgili tanımlık juguler ven 15-20 dk önce biyopsi yapmak yönetmek.. Not: anti-inflamatuar ilaçlar araştırma sonuçları etkilemez bazı protokoller, steroid olmayan anti-inflamatuar ilaçlar biyopsiyi sonra uygulanmaktadır.<ol>
<li>Juguler ven bulun.</li>
		<li>Şah groove temelini baskı uygulama tarafından juguler ven yükseltmek.</li>
		<li>Şırıngada hava kabarcığı yok olduğundan emin olmak için denetleyin.</li>
		<li>İğne yükseltilmiş juguler ven yerleştirin ve kan 0.5 mL şırınga iki kez çizmek ve içeriği ile karıştırın. Kan yok şırıngada gösteriyorsa, iğne konumlarını değiştirin. İğne damar içinde yerleşik ise, içeriği enjekte et.</li>
		<li>Yavaşça iğneyi çıkarın.</li>
		<li>Gazlı bez ile hafif basınç kanama önlemek için enjeksiyon siteye uygulanır.</li>
	</ol>
</li>
	<li>İntravenöz xylazine hidroklorür yönetmek (0.01-0.05 mg/kg vücut ağırlığı) Koksigeal gemi içinde yaklaşık 5-10 dk önce biyopsi sedasyon kurulması için yeterli zaman ayırmak. Dikkat: akciğer ödemi belirtileri için hayvan kontrol edin. Akciğer ödemi klinik belirtileri solunum güçlüğü, şiddetli dispne, solunum zorlukları, öksürük, köpüklü balgam ve mavi dil içerir. Akciğer ödemi belirtileri gözlenen, xylazine etkilerini tersine çevirmek için tolazine (2-4 mg/kg vücut ağırlığı) kullanmak için önerilir.
	<ol>
<li>Kuyruk yükseltmek ve % 70 izopropil alkol bez ile enjeksiyon alanı temizleyin.</li>
		<li>Şırıngada hava kabarcığı yok olduğundan emin olmak için denetleyin.</li>
		<li>İğne kuyruğu damar yerleştirin, 0.2 mL kan şırınga çizmek ve iğne gemi içinde yerleşik olduğundan emin olmak için içeriği ile karıştırın. İğne gemi içinde yerleşik ise, şırınga içeriği enjekte et.</li>
		<li>Yavaşça iğneyi çıkarın.</li>
		<li>Gazlı bez ile hafif basınç enjeksiyon siteye uygulanır.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. biyopsi sitesi hazırlanması
<ol><li>Kuyruk yordamlara bağlamak bir yardımcınız olabilir.</li>
	<li>(Genellikle bir alanda üst bağ dokusu topluluğu en aza indirmek için ve penetrasyon bezi sarnıca Şekil 1önlemek için) meme biyopsisi sitesinde seçin ve tüm kirli malzeme ve gübre seçili biyopsi sitesinden kaldırın.</li>
</ol><img alt="Olası mastiti gösteren, iltihaplanmayı gösteren işaretli alana sahip memesi." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig1v2.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> Resim 1 . Sığır meme biyopsisi sitesi gösteren görüntü. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a> 
<ol start="3"><li>Gözlemlemek ve bu gemiler biyopsi sırasında önlemek için herhangi bir büyük deri altı kan damarları tanımlamak için özel dikkat ile cildi muayene et.</li>
	<li>Biyopsi sitesi 15 cm x 15 cm çevresi saç kırpın.</li>
	<li>Povidone-iyot (% 0.75 kullanılabilir iyot) veya KLORHEKSİDİN GLUKONAT maki ile biyopsi alan hazırlamak. % 70 izopropil alkol ile en az üç kez tüm görünen ve görünmeyen enkaz kaldırmak için alternatif. Aseptik fırçalayın çözüm ve izopropil alkol Inside-out yaklaşımı kullanarak dairesel bir hareketle geçerlidir. Antiseptik fırçalayın çözüm en az 5 min için cilt ile temasında kalmasını sağlamak.</li>
	<li>%2 lidokain hidroklorür 6 mL subkutan bir satır bloğu oluşturmak için kesi sitesinde yatırmak için bir 18 G iğne ile ayarla bir kelebek infüzyon kullanın. Daha derin dokulara nüfuz değil. Not: Doz Lidocaine 3 ve 8 mL arasında değişir.</li>
	<li>3-5 dk. gerçekleştirmek için fırçalayın çözüm ve alkol kesi önce başka bir tekrarı diffüz lokal anestezi sağlar. Beklerken, biyopsi aletleri hazırlayın.</li>
</ol>6. biyopsi prosedürü
<ol><li>Aseptik teknikler biyopsi araçları işlerken ve belgili tanımlık kesme için kullanın.</li>
	<li>Tüm görünür kirlilik ve steril cerrahi eldiven uygulamak için ellerinizi yıkayın.</li>
	<li>Cerrahi aletler steril alanda kullanım sırasına göre düzenleyin. 10 numara neşter, steril gazlı bez, birleştirilmiş biyopsi enstrüman ve hemostaz için steril bir havlu var. Not: Yordam çekirdek biyopsi gerçekleştirmek için 1 veya yordam iğne biyopsi gerçekleştirmek için 2 uygulayın.
</li>
</ol><img alt="Bir kromatografi sisteminin montaj şeması; DNA ayırma işlemi için etiketlenmiş ve numaralandırılmış bileşenler." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig2.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> Resim 2 . Derleme ve kurulum, V. C. Farr, et al. tarafından açıklanan çekirdek biyopsi aracın şematik gösterimi 9 ölçek çubuğu 1 cm. olan <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<ol start="4"><li>Çekirdek biyopsi enstrümanı (Farr vd.9)<ol>
<li>Steril eldiven (Şekil 2) kullanarak çekirdek biyopsi enstrümanı bir araya getirin.<ol>
<li>7 steril adet steril bir örtüsü (Şekil 2A) yerleştirin.</li>
			<li>Blade (parça 1) içine belgili tanımlık rıhtım sistem parça 2 (Şekil 2B ) yerleştirin. Dikkat: parmak doğrudan blade satırında koymayın.
</li>
			<li>Yerleştirme istasyonundaki hizalar sağlanması parça 3 parça 2 (Şekil 2C) üzerine yerleştirin. Not: iç duvarında bir rıhtım sistem parça 4 (Şekil 2B) gözlemlemek.</li>
			<li>Blade (1 adet), nihai kenarına parça 4 (Şekil 2B) yerleştirme sistemi içine girerler.</li>
			<li>Parça 4 ileri itin ve parça 4 parça yanındaki 3 (Şekil 2E) olup olmadığını gözlemlemek.</li>
			<li>Parça üstünde belgili tanımlık aygıt (bıçak + parça 2) 5 (Şekil 2F) yerleştirin.</li>
			<li>Yerleştirme istasyonundaki hizalanır sağlamak (Şekil 2 g).</li>
			<li>Parça 6 parça 2 ekleyebilir (karşı tarafında bıçak) (Şekil 2 H)</li>
			<li>Yerleştirme istasyonundaki hizalanır sağlamak (Şekil 2 H).</li>
			<li>Kilitleme vidası (7 adet) belgili tanımlık rıhtım istasyon (Şekil 2I) yerleştirin.</li>
			<li>Parça kilitleme vidalı kapak-3 (siyah) ileri itin. Dikkat: parmak üzerinde bıçak çıkış yeri yok.
</li>
			<li>Parça 4 ileri iterek aracını etkinleştirmek ve bıçak aracın dışında gözlemlemek.</li>
			<li>Parça 4 bıçak (kullanmaya hazır) araca geri çekmek için geri çek. Not: yalnızca aracın biyopsi olmak doku içinde istenilen mesafe nüfuz zaman bıçak aktif.</li>
		</ol>
</li>
		<li>İnek yeterince sakin ve biyopsi site yeterince anestezi emin olun. Derinin herhangi bir tepki emin olmak için çimdik.</li>
		<li>2-3 cm dikey kesi deri ve subkutan doku proksimal için distal 10 numara neşter kullanarak üzerinden üzerinden yapmak.</li>
		<li>Biyopsi enstrümanı steril tekniği kullanarak bir Akülü matkap iliştirin.</li>
		<li>Biyopsi aracı karşı matkap yerleştirin ve araç için matkap sıkıca bağlı olmadığını kontrol edin.</li>
		<li>Yeterli kısıtlama kuyruk tüm işlem sırasında yükseltmek bir birey alarak olun.</li>
		<li>Saat yönünde döndür ve düşük hızlı kullanarak matkap açın. Not: Matkap steril değildir ve operatör matkap kullanırken steril kalmaz.</li>
		<li>Matkap ve ücretli dönen iken tüm biyopsi Aracı (yaklaşık 7.5 cm) içine belgili tanımlık kesme yoluyla meme ilerlemek.</li>
		<li>Sondayı devre dışı açın ve el ile parça 4 araç uzatma.</li>
		<li>Saat yönünde döndür ve düşük hızlı kullanarak matkap açın.</li>
		<li>Meme dokusu çekirdeğinden içeren araç kaldırın.</li>
		<li>Güçlü basınç en az 20 dk için steril bir havlu kullanarak yara hemen uygulamak. Not: Bu yeterli basınç uygulanır sağlamak için onların yumruk kullanarak gerçekleştirmek bir yardımcınız olabilir.</li>
		<li>Doku biyopsisi aracından Cımbız kullanarak kaldırın.</li>
		<li>Örnek 1 x fosfat tamponlu tuz tutmak ve doku miktarını değerlendirmek.</li>
		<li>Biyopsi için en az 30 dk sonra inek hayati belirtileri her 10 min al.</li>
		<li>Biyopsi site üzerinde baskı 20 dk sonra kanama için kontrol edin. Varsa ek bir 5-10 dk için basınç kan damlar sürdürür.</li>
		<li>Ne de olsa kanama durdu 5 mm aralıklarla Paslanmaz Çelik zımba kullanarak insizyon kapatın. Arasında 5 ve 8 zımba kullanmam.</li>
		<li>Bir sprey sargı bezi biyopsisi alanına uygulamak.</li>
		<li>50 dk için hayvan işlemden sonra gözlemlemek.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
İğne biyopsisi enstrüman
	<ol>
<li>Aygıt için üreticinin yönergelerini izleyin.</li>
		<li>Biyopsi iğnesini steril teknikleri kullanarak paketini kullanarak kaldırın.</li>
		<li>Herhangi bir hasar gözlem yapılırsa iğne atmak.</li>
		<li>İğne cihaza takın.</li>
		<li>Kapağı kapatın ve aygıtı horoz.</li>
		<li>İnek yeterince sakin ve biyopsi site yeterince anestezi emin olun. Derinin herhangi bir tepki emin olmak için çimdik.</li>
		<li>1-2 cm dikey kesi deri ve subkutan doku proksimal için distal 10 numara neşter kullanarak üzerinden üzerinden yapmak. Not: Bu çekirdek biyopsi araç için daha küçük (1-2 cm) biyopsisi iğne araç için belgili tanımlık kesme olabilir.</li>
		<li>Biyopsi iğnesini kesi sitesi (yaklaşık 10-13 cm cilt) takın.</li>
		<li>Doku toplamak için biyopsi iğnesi aygıtı etkinleştirin.</li>
		<li>İğne meme kaldırın.</li>
		<li>En az 20 dk için steril bir havlu kullanarak yara için anında, güçlü basınç uygulayın.</li>
		<li>Doku biyopsisi iğne Cımbız kullanarak kaldırın.</li>
		<li>Örnek 1 x fosfat tamponlu tuz tutmak ve doku miktarını değerlendirmek.</li>
		<li>Biyopsi için en az 30 dk sonra hayati belirtileri her 10 min al.</li>
		<li>Biyopsi site üzerinde baskı 20 dk sonra kanama için kontrol edin.</li>
		<li>Ne de olsa kanama durdu Paslanmaz Çelik zımba kullanarak insizyon kapatın.</li>
		<li>Bir sprey sargı bezi biyopsisi alanına uygulamak.</li>
		<li>50 dk için hayvan işlemden sonra gözlemlemek.</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. sonrası biyopsi hayvan bakımı
<ol><li>Tüm ilaçların hayvanlar için yönetilen belge. Not: Süt işlemden sonra 36 h bir dönemde atıldı; et çekme yapıldı. süt ve et için 4 ö. para çekme dönem ülke veya yargı ve kullanılan ilaçlar göre değişiklik gösterebilir. Yerel kuralları ve düzenlemeleri gözden geçirin.</li>
	<li>7-10 d biyopsi sonra süt kan varlığı için kontrol edin.</li>
	<li>Sonraki sağım, biyopsi çeyreğinden şerit kan pıhtıları el ve tam süt sağlamak kaldırma oluşur. Not: Aşağıdaki yordamı 1-3 sağım için biyopsi çeyreğinden kan pıhtıları varlığı bekleniyor. Kan süt 1-6 d için biyopsi sonra gözlenen.</li>
	<li>Süt verim gözlemlemek ve mümkünse, cerrahi zımba kaldırıncaya kadar bireysel günlük alımı yem.</li>
	<li>Cerrahi zımba kaldırıncaya kadar hayvan vücut ısısı, solunum ve kalp hızı ve tavır için günde iki kez izlemek.</li>
	<li>Cerrahi zımba kaldırıncaya kadar günde iki kez şişlik, hassasiyet için biyopsi site ve drenaj belirtileri kontrol edin. Bunlar gözlenir, veteriner danışın. Not: biyopsi sitesi temiz tutmak ve aerosol bandaj her bir ila üç gün gerektiği gibi yeniden uygulayın.</li>
	<li>Zımba kesi alanında 10-14 d bağlı olarak iyileşme oranı biyopsi sonra temizleyin.</li>
	<li>Lokal veya sistemik enfeksiyon belirtileri gözlenen bir veteriner danışın.</li>
</ol>

<ol><li>Khatun, M., Sorensen, P., Ingvartsen, K. L., Bjerring, M., Rontved, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+combined+liver+and+udder+biopsying+on+the+acute+phase+response+of+dairy+cows+with+experimentally+induced+E.+coli+mastitis%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">Effects of combined liver and udder biopsying on the acute phase response of dairy cows with experimentally induced E. coli mastitis.</a> Animal. 7 (10), 1721-1730 (2013).</li>
<li>Buitenhuis, B., Rontved, C. M., Edwards, S. M., Ingvartsen, K. L., Sorensen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+depth+analysis+of+genes+and+pathways+of+the+mammary+gland+involved+in+the+pathogenesis+of+bovine+Escherichia+coli-mastitis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">In depth analysis of genes and pathways of the mammary gland involved in the pathogenesis of bovine Escherichia coli-mastitis.</a> BMC Genomics. 12, 130(2011).</li>
<li>Nickerson, S. C., Akers, R. M. Mammary Gland | Anatomy. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNickerson%2C+SC+%22Fuquay+JW%2C+Fox+PF+and+McSweeney+PLH+%28eds.%29%2C+Encyclopedia+of+Dairy+Sciences%2C+Second+Edition%22">Fuquay JW, Fox PF and McSweeney PLH (eds.), Encyclopedia of Dairy Sciences, Second Edition</a>. 3, Academic Press. San Diego. 328-337 (2011).</li>
<li>Akers, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+100-Year+Review%3A+Mammary+development+and+lactation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dairy+Science%22%5BJournal%5D)">A 100-Year Review: Mammary development and lactation.</a> Journal of Dairy Science. 100 (12), 10332-10352 (2017).</li>
<li>Ruegg, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+100-Year+Review%3A+Mastitis+detection%2C+management%2C+and+prevention1%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dairy+Science%22%5BJournal%5D)">A 100-Year Review: Mastitis detection, management, and prevention1.</a> Journal of Dairy Science. 100 (12), 10381-10397 (2017).</li>
<li>Zhao, X., Lacasse, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammary+tissue+damage+during+bovine+mastitis%3A+Causes+and+control%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Mammary tissue damage during bovine mastitis: Causes and control.</a> Journal of Animal Science. 86 (13), 57-65 (2008).</li>
<li>Knight, C. H., Hillerton, J. E., Teverson, R. M., Winter, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biopsy+of+the+bovine+mammary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22British+Veterinary+Journal%22%5BJournal%5D)">Biopsy of the bovine mammary gland.</a> British Veterinary Journal. 148 (2), 129-132 (1992).</li>
<li>Lima, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+bovine+mammary+gland+biopsy+and+increased+milking+frequency+on+post-procedure+udder+health%2C+histology%2C+and+milk+yield%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">Effects of bovine mammary gland biopsy and increased milking frequency on post-procedure udder health, histology, and milk yield.</a> Animal. 10 (5), 838-846 (2016).</li>
<li>Farr, V. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+method+for+the+routine+biopsy+of+bovine+mammary+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dairy+Science%22%5BJournal%5D)">An improved method for the routine biopsy of bovine mammary tissue.</a> Journal of Dairy Science. 79 (4), 543-549 (1996).</li>
<li>Weng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+communication%3A+Repeated+mammary+tissue+collections+during+lactation+do+not+alter+subsequent+milk+yield+or+composition%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dairy+Science%22%5BJournal%5D)">Short communication: Repeated mammary tissue collections during lactation do not alter subsequent milk yield or composition.</a> Journal of Dairy Science. 100 (10), 8422-8425 (2017).</li>
<li>Peterson, D. G., Matitashvili, E. A., Bauman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diet-induced+milk+fat+depression+in+dairy+cows+results+in+increased+trans-10%2C+cis-12+CLA+in+milk+fat+and+coordinate+suppression+of+mRNA+abundance+for+mammary+enzymes+involved+in+milk+fat+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nutrition%22%5BJournal%5D)">Diet-induced milk fat depression in dairy cows results in increased trans-10, cis-12 CLA in milk fat and coordinate suppression of mRNA abundance for mammary enzymes involved in milk fat synthesis.</a> Journal of Nutrition. 133 (10), 3098-3102 (2003).</li>
<li>Baumgard, L. H., Matitashvili, E., Corl, B. A., Dwyer, D. A., Bauman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((trans-10%2C+cis-12+conjugated+linoleic+acid+decreases+lipogenic+rates+and+expression+of+genes+involved+in+milk+lipid+synthesis+in+dairy+cows%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dairy+Science%22%5BJournal%5D)">trans-10, cis-12 conjugated linoleic acid decreases lipogenic rates and expression of genes involved in milk lipid synthesis in dairy cows.</a> Journal of Dairy Science. 85 (9), 2155-2163 (2002).</li>
<li>Kasraeian, S., Allison, D. C., Ahlmann, E. R., Fedenko, A. N., Menendez, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+fine-needle+aspiration%2C+core+biopsy%2C+and+surgical+biopsy+in+the+diagnosis+of+extremity+soft+tissue+masses%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Orthopaedics+and+Related+Research%22%5BJournal%5D)">A comparison of fine-needle aspiration, core biopsy, and surgical biopsy in the diagnosis of extremity soft tissue masses.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 468 (11), 2992-3002 (2010).</li>
<li>de Lima, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+technique+for+repeated+biopsies+of+the+mammary+gland+in+dairy+cows+allotted+to+Latin-square+design+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Veterinary+Research-Revue+Canadienne+De+Recherche+Veterinaire%22%5BJournal%5D)">A new technique for repeated biopsies of the mammary gland in dairy cows allotted to Latin-square design studies.</a> Canadian Journal of Veterinary Research-Revue Canadienne De Recherche Veterinaire. 80 (3), 225-229 (2016).</li>
<li>Ollier, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+intact+rapeseeds+or+sunflower+oil+in+high-forage+or+high-concentrate+diets+affects+milk+yield%2C+milk+composition%2C+and+mammary+gene+expression+profile+in+goats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dairy+Science%22%5BJournal%5D)">Whole intact rapeseeds or sunflower oil in high-forage or high-concentrate diets affects milk yield, milk composition, and mammary gene expression profile in goats.</a> Journal of Dairy Science. 92 (11), 5544-5560 (2009).</li>
<li>Soberon, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+increased+milking+frequency+on+metabolism+and+mammary+cell+proliferation+in+Holstein+dairy+cows%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dairy+Science%22%5BJournal%5D)">Effects of increased milking frequency on metabolism and mammary cell proliferation in Holstein dairy cows.</a> Journal of Dairy Science. 93 (2), 565-573 (2010).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Çekirdek ve iğne biyopsi yöntemleri bu protokolü9,16' tarif edildi. Hayvan sağlığı ve mastit14 önce biyopsi insidansı ayrıntılı bir değerlendirme her iki yordamlar için gereklidir. Araştırma amaçlı izi iltihap veya enfeksiyon hastalıkları ile hayvanlarda teknik gerçekleştirme kaçınılmalıdır. Bu ve biyopsi sonrası komplikasyon riski azaltır. Tüm biyopsi ve aygıtlar temiz, dezenfekte ve sterilize biyopsi sitesinin kirlenmesini önlemek için olmalıdır. Önce prosedür, cerrahi sitesi enfeksiyonlar (SSI) en aza indirmek gereklidir. Genel olarak, SSI hayvan morbidite, kayıp performans ve yüksek üretim maliyetleri içinde süt inekleri ile ilişkilidir. Çalışmalar daha önce yöntemleri nedeniyle saç kirlenme9,14kaldırmak için biyopsi alan yıkama ve antiseptik ajanlar (% 70 alkol, iyot cerrahi kullanarak kesi site kırpma da dahil olmak üzere biyopsi SSI önlemek için rapor ameliyata9, %2 KLORHEKSİDİN asetat çözüm14, % 10 povidone-iyot8) cilt hazırlık için. Bazı çalışmalarda, yönetim antibiyotik7 sırasında veya hemen sonra biyopsi9kabul edilmiştir; Ancak, antibiyotik profilaksi mevcut çalışmalarında kullanılan değildi ve hiçbir enfeksiyonlar biyopsi sitesinin gözlendi. Yara biyopsi kontaminasyonu önlemek için kuyruk aerosol bandaj uygulanan kadar biyopsi sitesi ile temas önlemek için güvenliği sağlanmalıdır. Bu protokol için zımba yaklaşık 10-14 d biyopsiyi sonra kaldırılır.
Çekirdek biyopsi öncesinde, düzgün kadar araç seti ve detaya gitmeyi eklemek önemlidir; yavaş dönme hızı seçin, ileri döndürme seçin ve matkap ters modunu kullanmayın. İşlem sırasında cilt kenarları ayrı tutmak ve deri ya da bağ dokusu ile bağlantı kurmadan aracı giriş izin vermek için yeterince uzun bir kesi belgili tanımlık kesme her iki tarafında dijital baskı kullanmak önemlidir. Bu yordamı yapılmazsa bir sürükle kesi kenarları çekirdek biyopsi enstrümanı dönüşü sırasında oluşur ve enfeksiyon riski artacak ve yara iyilesmesinde gecikme olabilir ek cilt doku travması neden. Bu protokol için açıklanan mevcut biyopsi işlemler onay belgeli yapay organ büyük hayvan cerrah tarafından gerçekleştirilmiştir. Yordamları başarılı bir şekilde gerçekleştirilmiştir (Şekil 5). Her iki tekniğin de nispeten kolay ve hızlı olarak karşılaştırıldığında cerrahi eksizyon yordamı gerçekleştirmek için.
Biyopsi sitesinden kanama ortak süt inekleri8,9,10,14MG biyopsi sonra. Mevcut protokolünde gözlenen kanama oldu en az (Şekil 4), hangi-ebilmek var olmak yeterli (güçlü) yaraya uygulama hemen sonra prosedür nedeniyle. En az 20 dk için yoğun baskı gerekir ve bazı durumlarda daha--dan 30 dk için gerekli olabilir. Orta şiddetli kanama için biyopsi sitesine baskı uygulamadan sonra gözlem yapılırsa, bu baskı devam etmek ve hemen bir veteriner iletişim için tavsiye edilir.
Hemostazın inek morbidite azaltmak için önemli bir faktör olduğu gibi bir çalışmada9kanama kontrolü biyopsi siteye kan durdurucu sargı yastıkları paketlenmiş. Ancak, böyle bir şekilde kan durdurucu sargı yastıkları kullanımı süt grubu ortamında Mikrobiyolojik kontaminasyon için yüksek potansiyel risk vardır. Başka bir çalışmada14 arasında yinelenen biyopsi ve biyopsi ve cilt kapatma sonra biyopsi sitesine el ile basınç uygulanır ve en az 2 h biyopsiyi izleyen sitesine buz uygulanır. Mevcut iletişim kuralında, 20-25 dk için biyopsi sitesine uygulanan güçlü basınç kanamayı kontrol edecek kadar yeterli.
Başarılı biyopsi tekniği en az kan prosedürü sonra kısa bir süre için devam ederse süt sonuçlanmalıdır. Süt salgı süt hayal kırıklığı ve mastit enfeksiyonları sırasında bir kesinti önlemek için İçmamari kan pıhtıları biyopsi çeyrek10,14sıyırma el tarafından kaldırılması gerekir. Mevcut protokolünde kan 48 s kadar süt biyopsiyi sonra gözlendi. Ancak, hayvanlar daha çok sayıda kullanılan bir çalışmada, kan süt inekleri çoğunda 6 günden az gözlendi. Az hayvan kan içinde süt 6 gün8' den sonra gösterdi. Bu nedenle, günlük süt görünüm gözlenmesi işlemden sonra 6 d için gereklidir. Hayvanlar büyük doku örneği14elde edildi zaman mastit enfeksiyon belirtisi sergi değil. Ancak, tekrarlanan biyopsisi iğne kullanarak aynı hayvan üzerinde gerçekleştirilen önceki araştırma o mastit enfeksiyon görülme oranı yaklaşık % 128yordamı takip bulundu. Mevcut iletişim kuralında, ne hayvan klinik mastit enfeksiyon sonra yordam görsel işaretler vardı. Ayrıca hafif bir şey kesi sitesi biyopsiyi sonra enfekte olma şansı.
Tolazoline hidroklorid, sedasyon, etkilerini tersine çevirir bir uyuşturucu aşırı dozdan xylazine durumunda bulunması gerekir. Xylazine aşırı doz akciğer ödemi neden olabilir. Akciğer ödemi klinik belirtileri solunum güçlüğü, şiddetli dispne, solunum zorlukları, öksürük ve köpüklü balgam içerir. Akciğer ödemi belirtileri gözlenen, xylazine etkilerini tersine çevirmek için tolazine (2-4 mg/kg vücut ağırlığı) kullanmak için önerilir.
Mevcut iletişim kuralı bir iğne biyopsisi ve çekirdek biyopsi gerçekleştirmek için teknik anlatılmaktadır. Genel olarak, çekirdek biyopsi iğne biyopsisi ile karşılaştırıldığında daha büyük doku örneği (0.75-1 g)9 meme sağlığı üzerinde en az olumsuz etkisi ile avantajdır. İğne biyopsisi çekirdek biyopsi enstrümanı daha az invaziv bir yöntemdir. Ancak, birden çok biyopsisi iğne biyopsisi yordamı yordam yanı sıra kan pıhtıları sütteki sonra büyük kanama riskini artırabilir doku kullanarak daha büyük bir miktar almak çalışır. Her iki teknikleri ve en az inek morbidite neden kolayca cerrahi personel en az eğitim ile elde edildi. Günlük süt verimi (% 8-10 azalış) ve kompozisyon9 ve yem alımını azaltma14 kısa vadeli bir değişiklik çekirdek ve iğne biyopsileri sonra sırasıyla bekleniyor. İğne biyopsisi yordamı iğneyle kaldırıldı doku küçük hacimli sınırlamalardır. Araç sadece iğne biyopsi olmak doku içinde ve birden çok deneme kez işlemden sonra süt ve mastit kan riskini artırır doku yeterli miktarda elde etmek gerekli olduğunda etkinleştirilmesi gerekir. Çekirdek biyopsi sınırlamaları dahil işlem sonrası kanama doku büyük miktarda varsa, daha yüksek bir risk (> 200 mg) elde edilir. Buna ek olarak, biyopsi aracı kullanmadan önce yeterli eğitim gerektiren bir araya daha zordur.

Biyopsi ana bölümü için tıbbi konular veya araştırma amaçlı doku hasat için bir işlemdir. Doku analizi tedaviye doku tepkilerin veya diğer faktörler ilgi izin vermek için ötenazi1 alternatif olarak toplamak için minimal invaziv ve yaygın olarak kullanılan bir tekniktir. Sığır meme bezi (MG) doku örnekleri gen ve protein ifade, histoloji, hücre organelleri, sinyal yolları ve metabolik süreçleri değişiklikler yönetim organizasyonu çalışmaya süt araştırma için gerekli olan veya çevre. Ayrıca, MG doku sığır mastit bakteriyel enfeksiyonlar2tarafından neden olduğu gibi bazı bulaşıcı hastalıklar araştırma ve teşhis için gereklidir.
Sığır meme dört ayrı bezleri ve her bezi birlikte parankimi olarak adlandırılan bir bağımsız süt salgı sistemi içerir. Alveoller, oluklar ve bağ dokusu meme parankimi mevcuttur. Alveoller (luminal) iç yüzey epitel hücrelerinde oluşan mikroskobik küresel içi boş yapılar ve özel myoepithelial (bazal) dış yüzeyinde hücreleri. Alveoller sentezi ve süt salgılanmasını sorumludur. Fibröz bağ doku parankimi içinde mevcut bir grup alveoller alveoller diğer gruplardan ayırabilirsiniz ve her grup bir kulak3denir. Çeşitli faktörler geliştirme ve hayvan fizyolojisi, beslenme, yönetim, genetik ve çevre4MG işlevini etkiler. Meme iltihabı da MG işlevi ve süt kalitesi5olumsuz etkileyen önemli bir faktördür. Mastitic patojenler tarafından yayımlanan toksinlerin alveoller zarar ve biyokimyasal ve histolojik değişiklikler MG doku6sonuçlanan nekroz neden. Böylece, Histoloji ve metabolik süreçleri her alveoller veya lobül mg diğerlerinden önemli ölçüde farklı olabilir. Bu nedenle, tüm meme bezi temsilcisi örneklerdir biyopsi arzu edilir. Küçük biyopsi yalnızca bir tek kulak veya bireysel yabancılığımız, elde edilen bilimsel veya tanılama bilgileri sınırlama yakalamak. Araştırma amaçlı doku bir 'görüntüsünü' meme biyopsisi sağlar ancak biyopsi yeterince tahminleri toplam Meme bezinin yokluğunda toplam meme işlevi karakterize olamaz unutmayın gereklidir kitle.
İnsan kullanmak için son 30 yılda birkaç biyopsi araçları geliştirilmiştir. Şu anda, bu aletleri adaptasyonu hayvanlar ile kullanılabilir. Süt sığır için MG doku örnekleri cerrahi eksizyon (künt diseksiyon)7, biyopsi iğneleri1,8ve çekirdek biyopsi aletleri9,10da dahil olmak üzere farklı yöntemlerle elde edilmiştir. Böylece, MG biyopsi teknikleri laktasyondaki Süt ineklerin yaslanmış sedasyon cerrahi disseksiyon elektrokoter hemostaz 19927 çekirdek biyopsi ayakta sedasyon9altında toplanması için kullanma ile kullanarak yordamlar gelen geçiş, 10,11,12. Cerrahi biyopsi sorunları hematom gibi komplikasyonlar daha yüksek insidansı olması ve pahalı olması, invaziv bir yöntem, yara ve tümör13yaymak olduğunu. Şu anda, çekirdek biyopsi ve iğne biyopsisi (olarak da bilinen tru-cut biyopsi) yaygın olarak cerrahi biyopsi alternatif olarak benimsenmiştir. Çekirdek ve iğne biyopsileri cerrahi biyopsi yapmak karşılaştırıldığında avantajları şunlardır: yordamı minimal invaziv; büyük komplikasyonlar nadirdir; Genel anestezi gerekli değildir; relativley hızlı bir yöntemdir; Kurtarma süresi kısadır; meme sağlığı üzerinde en az olumsuz etkileri ve sadece kısa vadeli etkileri süt verim ve kompozisyon8,9,10olduğunu; ve maliyeti daha az cerrahi biyopsi13.
1996 yılında açıklanan bir çekirdek biyopsi yordam steril, paslanmaz çelik kanül çıkarılabilir bir geri çekilebilir bıçak ile genel anestezi9,10,11 olmadan sığır MG temsilcisi bir miktar doku kaldırmak için kullanılan ,12. İşlem sırasında araç düşük hız, aracın dokusu içine ilerledikçe hangi temiz bir doku çekirdek kesmek dönme hareketi oluşturmak için Akülü matkap bağlıydı. Büyük bir doku yararı oldu örnek (70 mm x 4 mm çapında, yaklaşık 0,75-1 g) 9. Bir son çalışmada10 gösterdi ki V. C. Farrvd tarafından açıklanan biyopsi prosedürü 9 laktasyondaki süt inekleri performans ve meme sağlığı üzerinde olumsuz etkisi olmadan tekrarlanan MG doku koleksiyonları gerçekleştirmek için kullanılabilir. Son olarak, bir çalışma14 süt inekleri tekrarlanan biyopsileri biyopsi toplamak için bir iç paslanmaz çelik kanül uygulanan vakum ile daha büyük bir trokar (31 cm uzun, dış çapı 9,5 mm, 8 mm iç çap) kullanarak mg değerlendirmek için yapılmıştır . Sedasyon (xylazine) ve lokal anestezi (%2 lidokain hidroklorür) kullanılan bu yöntem.
İğne biyopsisi meme dokusu toplamak için başka bir tekniktir. Çeşitli çalışmalarda bu tekniği benimsemiştir. Bir çalışmada1 sedasyon (detomidine) ve lokal anestezik (%1 lidokain) yordamda kullanılan. Biyopsiyi sonra inekler profilaktik antibiyotik tedavisi aldı. Meme bezi el ile önce ve sağım sonra masaj. Kan sütteki kadar 84 h için biyopsi sonra gözlendi. Miktarı ve süt kompozisyonu kısa bir süre için etkilendi. Son zamanlarda, bir çalışma bir Biyopsi iğnesini tekrarlanan MG biyopsi süt inekleri8' gerçekleştirmek için kullanılır. Sedasyon (%1 acepromazine, kas içi) ve lokal anestezi (%2 lidokain hidroklorür, subkutan) hayvanlar için idare. Hayvanlar İçmamari uyuşturucu veya antibiyotik önce veya sonra yordamı almadı ve ameliyat sonrası dönemde biyopsi yerinde enfeksiyon belirtisi yok edildi. Bu çalışmada, bir iğne kullanarak yinelenen sığır MG biyopsi süt üretim ve meme sağlığı süt inekleri üzerinde küçük bir negatif etkisi olmuştur. Genel olarak, iğne biyopsisi çekirdek biyopsi enstrümanı daha az invaziv bir yöntem gibi görünüyor. Ancak, daha önce belirtildiği gibi bu MG doku temsil edici bir örnek hasat biyopsi tekniği için önemlidir. Sığır MG doku az miktarda (yaklaşık 20-25 mg) elde edilen bir iğne biyopsisi kısıtlamasıdır8,15.
Biyopsi bir iğne veya daha büyük bir çekirdek olup olmadığı hemen hemen tüm çalışmalar α-2 agonist sedasyon ve lokal anestezik8,9,10, bir arada kullanılmış. Sığır MG, en sinir uçlarının cilt ile ilişkilidir. İnnervasyon parenkima dokusu için büyük ölçüde seyrek türüyle streç reseptörleri üzerinden keskin cerrahi ağrı algılamak için bir sinir lifleri gerçekleştirilir. Sonuç olarak, fizyolojik ağrı nedeniyle mg cerrahi işleme mekanizmalarının olduğunu yolu ile deri ve subkutan doku3 ve parenkima dokusu gibi değil derin doku. Lokal anestezik infiltrasyonu içine daha derin dokulara önemli ölçüde cerrahi ağrı azaltmak değildir bu nedenle, biyopsi yordamları için yalnızca yerel olarak deri ve subkutan doku, anestezi için gerekli gibi. Sonra uygun bir hazırlık biyopsi çevrenin hayvan rahatsızlık, öncelikle, kısıtlama ile ilişkili olan.
Koleksiyon daha büyük çekirdek örnekleri hematom oluşumu artırmak ve MG parankimi içinde enfeksiyon riskini artırır. Bu nedenle, bu evrenselleri8olmamasına rağmen peri-operatif iletişim kuralları kez parenteral antibiyotik7, yönetim içerir. Hemostazın ulaşmak da inek morbidite azaltmak için önemli bir faktördür. Söz konusu çalışmada kullanarak büyük çekirdek biyopsi enstrümanı14, el ile basınç biyopsi siteye uygulandı ve inek sütyen buz yaralar için en az 2 h aşağıdaki yordamı uygulamak için kullanıldı. Rağmen hasat doku büyük miktarda, yem alımı ve süt verim sadece hafif düşüşler gözlendi ve yordamı üç haftada inek sağlık üzerinde olumsuz etkileri olmadan tekrarlandı.
Süt inekleri MG biyopsi performans araştırmacılar elde edilen biyopsi tanılama veya analitik kalite, teknik ve inek morbidite kolaylığı dikkate almak gerekir. Doğru ve önceden planlanmış cerrahi teknikleri bu hedeflere ulaşmak için zorunludur. Bugüne kadar MG biyopsi çalışmalar biyopsi tekniği kendisi, açıklayan karşı biyopsi sonuçları açıklayan üzerinde odaklanmıştır ve laktasyondaki süt inekleri için açıklamalar çoğaltmasına izin vermek için yeterli detay eksikliği. Böylece, bu çalışmanın amacı iğne biyopsisi ve daha büyük çekirdek biyopsi teknikleri MG biyopsi sığır güvenli ve insanca çoğaltılması izin vermek için yeterli ayrıntılı olarak açıklamak için oldu.

<table><tbody><tr><td>% 70 İzopropil alkol&nbsp;</td><td>Walmart ve nbsp;</td><td>565106257</td><td>1 L</td></tr><tr><td>Sinekleri öldürmek ve uzaklaştırmak için aerosol sprey</td><td>MWI</td><td>14339</td><td>1 şişe (gerekirse)</td></tr><tr><td>Biyopsi iğneleri, 12 G ve kez; 16 cm</td><td>C. R. Bard</td><td>MN1216</td><td>2</td></tr><tr><td>Kelebek infüzyon seti (18 G iğne)</td><td>Fisher</td><td>22-258087</td><td>1</td></tr><tr><td>Hücre kültürü kapları</td><td>Fisher</td><td>08-772E</td><td>4</td></tr><tr><td>Akülü matkap (düşük hız)</td><td>Hitachi& nbsp;</td><td>&nbsp; DS10DFL&nbsp;</td><td>1</td></tr><tr><td>Çekirdek biyopsi aleti, Farr ve ark. (1996)</td><td></td><td></td><td>2, özel metal imalatı. Aracı talep etmek için yazarlarla iletişime geçin.</td></tr><tr><td>İnekler</td><td></td><td></td><td>sığır sağlıklı</td></tr><tr><td>Flunixin meglumine</td><td>MWI / VetOne</td><td>501018</td><td>1.1 ila 2.2 mg / kg vücut ağırlığı</td></tr><tr><td>Katlanır masa&nbsp; &nbsp;</td><td>Amazon</td><td></td><td>1</td></tr><tr><td>Forseps</td><td>Fisher</td><td>09-753-50</td><td>1</td></tr><tr><td>Eldiven steril olmayan&nbsp;</td><td>Fisher</td><td>17-200-845</td><td>9, boyuta bağlı</td></tr><tr><td>Sert fırça&nbsp;</td><td>Sullivan Supply</td><td>18270</td><td>1, yıkamak için</td></tr><tr><td>Baş kapısı&nbsp;</td><td></td><td></td><td>1, süt için özelleştirilmiş</td></tr><tr><td>Lidokain hidroklorür% 2 enjekte edilebilir&nbsp;</td><td>MWI/VetOne</td><td>510212</td><td>6 mL kullanıldı,&nbsp; 3 ila 8 mL</td></tr><tr><td>Hayvancılık vücut yıkama</td><td>eZall Technologies</td><td>39384</td><td>1, yıkamak için</td></tr><tr><td>İğne 18 G&nbsp; (1 ila 1/5 inç)</td><td>Fisher</td><td>14-821-15A</td><td>6</td></tr><tr><td>İğne 20 g (1 ila 1/5")</td><td>Fisher</td><td>14-815-526</td><td>6</td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu salin (%0,9)</td><td>Fisher</td><td>20-012-043</td><td>1 L</td></tr><tr><td>Povidone İyot merhem</td><td>Jeffers</td><td>#VED1A</td><td>500 g (gerekirse)</td></tr><tr><td>Povidone iyot ovma solüsyonu (%0,75 iyot)</td><td>MWI/VetOne</td><td>510094</td><td>1 L</td></tr><tr><td>Yeniden kullanılabilir biyopsi aleti&nbsp;</td><td>CR Bard</td><td>MG1522</td><td>1</td></tr><tr><td>Halat yular</td><td>Nasco çiftliği ve çiftliği</td><td>C10852</td><td>2, boyutu</td></tr><tr><td>Neşter bıçakları (#10)</td><td>MWI</td><td>033870</td><td>2</td></tr><tr><td>Neşter tutucular</td> <td>0MWI</td><td>602008</td><td>1</td></tr><tr><td>Kendinden sızdırmaz otoklav torbası 10 x 5,5 inç.</td><td>Fisher</td><td>19-130-0038</td><td>1 kutu 800</td></tr><tr><td>Steril pamuklu gazlı bez sünger</td><td>Fisher</td><td>22-037-986</td><td>4</td></tr><tr><td>Steril gazlı bez pedleri</td><td>Fisher</td><td>19-090-735</td><td>4</td></tr><tr><td>Steril cerrahi eldiven ve nbsp;</td><td>Cerrahi eldivenler</td><td>19-166-679</td><td>3,&nbsp; boyuta bağlı</td></tr><tr><td>Steril cerrahi havlular</td><td>Fisher</td><td>50-118-0339</td><td>6</td></tr><tr><td>Stetoskop</td><td>Littmann Master Classic II</td><td>1392</td><td>1</td></tr><tr><td>Cerrahi kesme</td><td>makinesi Oster A5</td><td>078005-010-003</td><td>1, hayvanın biyopsi için hazırlanması</td></tr><tr><td>Cerrahi kesme bıçakları (# 40 )</td> <td>Oster&nbsp;</td><td>78919-016</td><td>1, hayvanın biyopsi için hazırlanması</td></tr><tr><td>Cerrahi zımba sökücü</td><td>MWI</td><td>541</td><td>1</td></tr><tr><td>Cerrahi zımba önceden yüklenmiş</td><td>MWI</td><td>17713</td><td>5</td></tr><tr><td>10 mL'lik şırınga</td><td>Fisher</td><td>14-823-224</td><td>3</td></tr><tr><td>mL'lik 2 şırınga</td><td></td><td>Fisher 22-028854</td><td>3</td></tr><tr><td>20 mL'lik Şırınga</td><td>Fisher</td><td>22-034507</td><td>3</td></tr><tr><td>5 mL Şırıngalar</td><td>Fisher</td><td>22-028855</td><td>3</td></tr><tr><td>Termometre</td><td>Agri-Pro Enterprises Inc</td><td>72000</td><td>1</td></tr><tr><td>Tolazin hidroklorür</td><td>Akorn Hayvan Sağlığı</td><td>61311-486-10</td><td>2 ila 4 mg / kg vücut ağırlığı (gerekirse)</td></tr> <tr><td>Cımbız;</td><td>Fisher</td><td>14-955-025</td><td>1, doku örneğini işlemek için</td></tr><tr><td>Su hortumu</td><td>Miracle-Gro, Walmart</td><td>554990501</td><td>1, yıkamak için</td></tr><tr><td>Suya dayanıklı aerosol bandaj (alüminyum tozu 40 mg)</td><td>MWI</td><td></td><td>010728 1 şişe&nbsp;</td></tr><tr><td>Ksilazin hidroklorür</td><td>MWI/VetOne</td><td>510650</td><td>0,01 ila 0,05 mg/kg vücut ağırlığı</td></tr></tbody></table>

sığır meme bezi biyopsisi teknikleri

Bovine Mammary Gland Biopsy Techniques

Sığır meme bezi biyopsi araştırmacılar hücre biyolojisi gen ekspresyonu, yollar ve protein çeviri sinyal histolojik analizi de dahil olmak üzere çalışmaya doku örnekleri toplamak için izin verir. Bu makalede iki Teknik sığır Meme bezinin (MG) biyopsisi için. Üç sağlıklı Holstein süt ineği Konu bulunmuştur. Biyopsi daha önce inek milked ve daha sonra sığır paraşüt içinde kendine hakim olsun. Bir ağrı kesici (flunixin meglumin, 1.1-2.2 mg/kg vücut ağırlığı) yolu ile şah damardan [IV] enjeksiyon 15-20 dk önceden biyopsi yapmak yönetiliyordu. Ayakta sedasyon, xylazine hidroklorür için (0,01-0,05 mg/kg vücut ağırlığı) Koksigeal damarları enjekte 5-10 dk önce yordamı. Bir kez yeterince sakin, biyopsi sitesi aseptik hazırlanan ve yerel olarak %2 lidokain hidroklorür subkutan enjeksiyon yolu ile 6 mL ile anaesthetized. Aseptik teknik kullanılarak, 2-3 cm dikey kesi 10 numara neşter kullanılarak yapıldı. Çekirdek ve iğne biyopsisi araçlar kullanıldı. Çekirdek biyopsi aracı için Akülü matkap bağlı ve MG doku bir saat matkap eylemini kullanarak kesi ile eklenen. İğne biyopsisi Aracı el ile kesi siteye eklenmiştir. İşlemden hemen sonra bir asistan için 20-25 dk hemostaz ulaşmak için steril bir havlu kullanarak kesi sitesinde basınç uygulanır. Paslanmaz çelik cerrahi zımba cilt kesi karşı çıkmak için kullanılmıştır. Zımba kaldırıldı 10 gün sonrası yordamı vardı. Çekirdek ve iğne biyopsileri başlıca avantajları olduğunu her iki yaklaşım sağlıklı inekler güvenli bir şekilde gerçekleştirilebilir minimal invaziv yordamlar vardır. Biyopsiyi izleyen süt verim etkilenmedi. Bu yordamları kısa iyileşme süresi gerektirir ve komplikasyonlar daha az risk neden. Belirli sınırlamalar biyopsi ve biyopsi sitede enfeksiyon sonra kanama içerebilir. Uygulamalar bu tekniklerin klinik tanı ve araştırma amaçlı, birincil hücre kültürü gibi doku koleksiyonu içerir.

10-30 mg-de biyopsi örnekleri iğne biyopsisi üretilen mevcut protokolünde, çekirdek biyopsi tekniği doku örneği 200-600 mg üretti. Hayvanlar günde 10 d için işlemden sonra tespit edildi. İşlemi sırasında veya ameliyat sonrası dönemde, normal sınırlar içinde kalan ineklerin hayati parametreleri ile herhangi bir komplikasyon oluştu (ortalama solunum hızı = 31,4 ± 7.04 (SD) min, ortalama kalp hızı başına nefes 75.9 ± 8.9 dövmek-de dakika ve ortalama = Rektal sıcaklık = 38,2 ± 0,68 ° C, Şekil 3).
Hemostaz (yaklaşık 25 dk) elde etmek için biyopsi alan üzerinde el ile basınç en az (Şekil 4) kanama açık yara gösterdi. İnekler ad libitum aynı diyet beslenen edildi ve hayvanlar ameliyat sonrası dönemde aynı konut tesiste tutuldu. Hayvanlar biyopsi yerinde enfeksiyon belirtileri yoktu; hiçbir ağrı, kanama, şişme, drenaj veya yüksek sıcaklık (Şekil 5) yapıldı. Biyopsi (Şekil 5C) içinde 8-10 d yara iyileşti.
Bir hayvan üzerinde gün 8 prosedür sonra sürtünme yaralamaya küçük deri tahrişi nedeniyle geliştirdi. Bu inek povidone-iyot çözüm ve % 70 izopropil alkol kullanarak biyopsi sitesi temizlik tarafından tedavi edildi. Paslanmaz Çelik zımba drenaj izin vermek için kaldırılmıştır ve povidone iyot merhem (% 1) günde 2-3 d için biyopsi sitesinde uygulandı. Cildi tahriş 2 d povidone-iyot merhem uygulandıktan sonra ortadan kayboldu ve başka komplikasyon ile yara iyileşti.
Kan pıhtıları Süt Sağım Makinesi önce biyopsi çeyreğinde sıyırma el tarafından çıkarıldı. Mevcut iletişim kuralında, kan pıhtıları sütteki varlığı en çok üç sağım (yaklaşık 36 h) biyopsi sonra gözlendi. Kan kirlenme süt en fazla 48 saat için biyopsi sonra gözlendi. Çekirdek ve iğne biyopsileri kan sütteki miktarına göre arasında gözlenen hiçbir görsel farklılıklar vardı. Hayvanlar süt verimi önemli bir azalma (Şekil 6) işlemden sonra belli etmedi. Ortalama süt kompozisyon %4.37 yağ, %3,34 protein ve %4,64 laktoz oldu. Ortalama süt somatik hücre sayısı (SCC) mL başına daha az 200.000 hücre yapıldı.
Elde edilen MG doku birincil hücre kültürleri (Şekil 7) gibi farklı araştırma amacıyla kullanılabilir.
<img alt="Solunum, kalp atış hızı, sıcaklık ve biyopsiden sonraki günler; dağılım grafiği; Çekirdek ve iğne aleti." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig3.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> Şekil 3 . Hayvan sağlık göstergelerinin değerlendirilmesi sığır meme bezi biyopsisi sonra. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a> 
<img alt="Sığır anatomisi, meme sağlığı muayenesi, şişlik gözlemi, veteriner değerlendirme, süt hayvancılığı." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig4v2.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 4"> Şekil 4 . Biyopsi site görünümü sonra . el ile basınç hemostaz elde etmek için biyopsi bölgesine uygulanır <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="İğne ve çekirdek biyopsi zamanla iyileşme; İşlemden 3, 6 ve 10 gün sonraki dikişleri gösteren diyagram." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig5.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 5"> Şekil 5 . Biyopsi sitesi fotoğraf. (A)biyopsi prosedürü. sonra 3 d site (B) biyopsi prosedürü. sonra 6 d site (C) biyopsi yara yeterince iyileşmiş olarak gösteren işlemden sonra 10 d site. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Biyopsi zamanına karşı süt verimi; araç değişkenliğini gösteren regresyonlu dağılım grafiği, P=0.99." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig6.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 6"> Şekil 6 . Günlük süt üretim öncesi ve sonrası sığır meme bezi biyopsisi (n = 3 inek). Bir doğrusal model 10 gün önce biyopsi hayvanlar 23.35 kg süt günlük üretilen tahmin. Süt verimi önemli ölçüde değişmedi (P &gt; 0,05) biyopsi sonra 10 gün önce 10 gün hafif bir artış olmasına rağmen süt verim gözlenmiştir (0.0005 kg/d süt her gün 10 gün önce biyopsi için artış). Üç hayvan bu protokol için kullanılmıştır; bir hayvan biyopsi iki kez (hayvan 1: biyopsi meme sol tarafındaki çekirdek ve iğne biyopsisi meme sağ tarafında) ve iki hayvan biyopsi bir kez (hayvan 2 ve 3: yalnızca çekirdek veya iğne yordamı kullanarak meme sağ tarafta). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Hücre kültürü tek tabakası, mikroskop görüntüsü, hücresel morfoloji çalışması, biyolojik araştırma aracı." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig7.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 7"> Şekil 7 . Birincil sığır meme epitel hücre kültürünün temsilcisi görüntüler. Ölçek çubuğu var. 100 µm <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig7large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Bu makale sığır meme bezi biyopsi çekirdek ve iğne biyopsisi araçlarını kullanarak sunar. Hasat doku hücre kültürü için veya meme fizyolojisi ve metabolizma gen ekspresyonu, protein ifade, protein değişiklikler, immünhistokimya ve metaboliti konsantrasyonları gibi değerlendirmek için kullanılabilir.

Sığır meme bezi biyopsisi teknikleri

Bovine mammary gland biopsies allow researchers to collect tissue samples to study cell biology including gene expression, histological analysis, ...

Biyopsi, sanırım çoğu niçin bildiğiniz, bir parça mendilin ilgilendiği organdan alınmasıdır ve bu durumda, meme bezidir. Biyopsi örneği çok faydalıdır, eğer gen ekspresyonu analizi gibi şeyler yapacaksanız, bazı dokuları alıp histolojik analiz yapmak, meme bezinin mikroskobik seviyesindeki yapıya bakmak gibi şeyler yapacaksanız, örneğin hormon eylemiyle ilgili sinyal yolları gibi şeyleri belirlemek çok yararlıdır, örneğin. Herhangi bir meme dokusu örneği alırken dikkat etmeniz gereken uyarılardan biri de gerçekten temsili bir örnek almış olmanızdır. Çünkü, bir lobule yakalayabilirsiniz, üzüm kümesi gibi, ya da normali temsil etmeyen bazı bireysel alveolleri yakalayabilirsiniz, yani, meme biyopsisini yaparken sahip olduğunuz umut, parankimal doku toplamanızdır, ki bu sadece süt üretiminden sorumlu fonksiyonel doku yutacak süslü bir kelimedir. , temsileden bir örnek.Meme bezindeki duyusal sinir uçlarının çoğu deri ile ilişkilidir, ve bu yüzden bunu fark etmek ve takdir etmek önemlidir, ilk kesiyi yapacağınız alanın doğru hazırlanmasını yaptıktan sonra, cildi anesteziye, parenkimal dokunun kendisiyle ilişkili herhangi bir duyusal sonun yolunda çok az şey vardır. , ve böylece hayvan hissedeceksiniz rahatsızlık çoğunlukla deri ile ilişkilidir. Yani, bu dokuyla yapılabilecek çeşitli şeyler var, ve aslında bu hayvanın nasıl çalıştığı hakkında daha fazla bilgi toplamasına olanak sağlıyor, sadece hayvana ne yedirdiğini gözlemlemekten elde edilebilenlerle karşılaştırıldığında ve süt proteini çıktısı veya süt bileşeni çıkışındaki tepkilerle karşılaştırıldığında. Açıklanan tüm yöntemler Virginia Tech Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır.Planlanan biyopsiden bir gün önce, gübre ve kirli malzemeyi temizlemek için hayvanı, özellikle memeleri yıkayın ve ovalayın. Hayvanın sağlığını, fiziksel durumunu ve davranışını değerlendirin. Sadece sağlıklı inekler kullanın.İneği tamamen sağ. Bezleri süt varlığını en aza indirmek için ideal sağım iki saat içinde, sıkmak oluk içine hayvan taşıyın. Bir baş kapısı ile hayvan dizginlemek.Geriye ve ileriye doğru hareketi önlemek için kafasına bir ip halter yerleştirin. Hayvanın başını bir tarafa çekin ve başı yerinde tutmak için hızlı bir serbest bırakma düğümü kullanarak ipi sıkma kanalına bağlayın. Enjeksiyon alanını %70 oranında İzopropil alkol bezi ile temizleyin ve biyopsiden 15 ila 20 dakika önce juguler ven yoluyla vücut ağırlığının kilogramı başına 1,1 ila 2,2 miligram flunixin meglumine verin.Şah damarını bul. Juguler oluğun tabanında basınç uygulayarak juguler ven yükseltin. Şırıngada kabarcık olmadığından emin olun.İğneyi yükseltilmiş şah damarına yerleştirin ve şırıngaya 0,5 mililitre kan çekin ve içindekilerle karıştırın. Şırıngada kan gözü kdeğilse, iğneyi değiştirin. İğne damarda ikamet ederse, içindekileri enjekte edin.İğneyi hafifçe çıkarın, kanamayı önlemek için enjeksiyon bölgesine hafif basınçla gazlı bez uygulayın. Sedasyon un kurulması için yeterli zaman tanımak için biyopsiden yaklaşık 5 ila 10 dakika önce koksikeal damardaki vücut ağırlığının kilogramı başına 0,01 ila 0,05 miligram xylazine hidroklorür intravenöz olarak uygulayın. Kuyruk kaldırın ve% 70 izopropil alkol bezi ile enjeksiyon alanı temizleyin.Şırıngada kabarcık olmadığından emin olun. İğneyi kuyruk kabına yerleştirin, şırıngaya 0,2 mililitre kan çekin ve iğnenin damarda yerleşik olduğundan emin olmak için içindekilerle karıştırın. İğne yerleşikse, şırınga içeriğini enjekte edin.İğneyi yavaşça çıkarın. Enjeksiyon bölgesine hafif basınçla gazlı bez uygulayın. Bu gerçekten önemli bir alfa iki ters elde, tolazoline gibi, süt ksilazin etkilerine duyarlı olmasıdır, ve ksilazin aşırı doz da pulmoner ödem neden olabilir, hangi potansiyel süt için ölümcül olabilir, bu yüzden aşırı sedasyon belirtileri için izlemek ve bu oluşursa, o zaman tolazoline uygun miktarda verilebilir.İneklerimizin bir ameliyat sırasında ayakta durmasını istiyoruz. Çok fazla xylazine onları oturup neden olabilir. Prosedür için kuyruk kadar bir asistan kravat var, meme biyopsi sitesi seçin, genellikle bir üst alanda bağ dokusu toplama en aza indirmek ve bezi sarnıcı içine nüfuz önlemek için.Biyopsi sırasında bu damarları önlemek için herhangi bir büyük deri altı kan damarlarını belirlemek için özel bir dikkat ile cilt gözlemlemek ve palpe. Biyopsi bölgesinin etrafındaki 15 x 15 santimetre karelik bir alandan saç çekin, biyopsi alanını povino-iyot, yüzde 0,75 mevcut iyot veya klorheksidin glukonat scrub ile hazırlayın. Tüm görünür ve görünmez enkaz kaldırmak için en az üç kez% 70 izopropil alkol alternatif.Aseptik scrub solüsyonu ve isopropil alkolü ters yönlü bir yaklaşım la dairesel bir hareketle uygulayın. Antiseptik scrub çözeltisinin ciltle en az beş dakika temas halinde kaldığından emin olun. Bir çizgi bloğu oluşturmak için kesi yerinde deri altı mililitre lidokain hidroklorür altı mililitre yatırmak için bir 18 G iğne ile bir kelebek infüzyon seti kullanın.Derin dokulara girmeyin. Lokal anestezinin üç ila beş dakika boyunca dağlanmasına izin verin, kesiden önce fırçalama solüsyonu ve alkolün tekrarını daha yapın. Beklerken biyopsi aletlerini hazırlayın.Analjezi sağlama açısından yapmak istediğiniz şey cildi duyarsızlaştırmaktır. Çünkü deride ve deri altı dokularda daha fazla sinirsel innervasyon var, ve parankimde, biz gerçekten sadece streç reseptörlerinden bahsediyoruz, ve bunlar cerrahi acıyı deri ve deri altı dokularla aynı şekilde hissetmiyorlar. Aslında, eğer parenkim içine lokal anestezi koyarak sonunda, işlem sırasında kanama riskini artırabilir.Biyopsi araçlarını kullanırken ve kesi için aseptik teknikler kullanın. Görünür deki tüm kontaminasyonu gidermek ve steril cerrahi eldivenleri uygulamak için ellerinizi yıkayın. Cerrahi aletleri steril bir alanda kullanım sırasına göre düzenleyin.10 numara neşter, steril gazlı bez ve biyopsi aleti ve homeostaz için steril bir havlu monte edin. Birinci işlem, çekirdek biyopsi aleti. Çekirdek biyopsi aletini cerrahi eldivenler kullanarak monte edin.Yedi steril parçayı steril bir perdeye yerleştirin. Bıçağı ikinci parçaya yerleştirme sistemine yerleştirin. İkinci parçanın üzerine üç parça yerleştirin ve yerleştirme istasyonunun hizalanmasını sağlar.Bıçağın son kenarını dördüncü parçanın yerleştirme sistemine titretin. Dördüncü parçayı öne doğru itin ve dördüncü parçanın üçüncü parçanın yanında olup olmadığını gözlemleyin. Parça beş'i cihaza takın.Yerleştirme istasyonunun hizalandığından emin olun. Parça altıyı ikinci parçanın üstüne yerleştirin. Yerleştirme istasyonunun hizalandığından emin olun.Kilitleme vidasını yerleştirme istasyonuna takın. Kilitleme vidasını örtmek için üçüncü parçayı öne doğru itin. Aleti etkinleştirin, ileri parça dört itin ve bıçağı aletin dışına gözlemleyin.Bıçağı aletin içine çekmek için parça dört geri çekin. İnek yeterince yatıştırıcı ve biyopsi sitesi yeterince anestezi olduğundan emin olun, hiçbir reaksiyon sağlamak için cilt çimdik. Proksimaldan distal bir sayı 10 neşter kullanarak deri ve deri altı dokular aracılığıyla 2-3 santimetre dikey kesi olun.Biyopsi aletini steril teknikler kullanarak kablosuz bir matkapla takın. Matkabı biyopsi aletine karşı yerleştirin ve aletin matkabına sıkıca bağlanıp bağlanmadınkontrol edin. Tüm işlemler sırasında bir bireyin kuyruğu nu yükseltmesini sağlayarak yeterli kısıtlamayı sağlayın.Saat yönünde dönüş ve düşük hız kullanarak matkabı açın. Tüm biyopsi aletini, araç dönerken kesi den meme içine yaklaşık 7,5 santimetre ilerletin. Matkabı kapatın ve aletin dördüncü parçasını manuel olarak uzatın, saat yönünde dönüş ve düşük hız kullanarak matkabı açın, meni çekirdeğini içeren aleti memeden çıkarın.En az 20 dakika steril bir havlu kullanarak yaraya hemen güçlü bir basınç uygulayın. Kanülleri dokuya yerleştirin. Aracı etkinleştirmek için parçayı ileri doğru itin.Saat yönünde yavaş bir dönüşle döndürün. Doku örneği artık kanülün içinde. Cımbız kullanarak biyopsi aracından dokuyu çıkarın.Bir X fosfat tamponlu tuzlu örnek tutun ve doku miktarını değerlendirmek. En az 30 dakika boyunca biyopsi den sonra her 10 dakikada bir hayati belirtilerini alın. Biyopsi bölgesinde 20 dakikalık basınçtan sonra kanama olup yok.Kan damlaları varsa, ek bir beş ila 10 dakika için basınç uygulamaya devam edin. Tüm kanamalar durduktan sonra beş milimetre aralıklarla paslanmaz çelik zımba kullanarak kesileri kapatın. Biyopsi bölgesine aerosol bandaj uygulayın.İşlemden sonra hayvanı 50 dakika gözlemleyin. İkinci işlem, iğne biyopsisi aleti. Cihaz için üreticinin yönergelerini izleyin.Steril teknikler kullanarak biyopsi iğnesini paketten çıkarın. Herhangi bir hasar görülürse iğneyi atın. İğneyi cihaza takın.Kapağı kapatın ve cihazı horoz. İnek yeterince yatıştırıcı ve biyopsi sitesi yeterince anestezi olduğundan emin olun, hiçbir reaksiyon sağlamak için cilt çimdik. Proksimaldan distal bir sayı 10 neşter kullanarak deri ve deri altı dokular aracılığıyla bir ila iki santimetre dikey kesi olun.Biyopsi iğnesini deriden yaklaşık 10 ila 13 santimetre uzaklıktaki kesi bölgesine yerleştirin. Doku toplamak için biyopsi iğne cihazı etkinleştirin. İğneyi memeden çıkarın.En az 20 dakika steril bir havlu kullanarak yaraya hemen güçlü basınç uygulayın. İğneden doku çıkardıktan sonra, kesi kapatmak için daha önce açıklanan prosedürü izleyin. Tüm prosedürün tamamlanması yaklaşık 45 dakika sürer, hayvan başına.Kan pıhtılaşmasının çeyrek biyopsiden çıkarılması gerekiyor. Ayrıca, mümkünse süt verimi ve gıda alımını gözlemlemek gerekir. İşlem öncesi, sırasında ve sonrasında her zaman hayvanın sağlığını ve sağlığını sağlayın.Hayvanlara verilen tüm ilaçları belgele. Biyopsiden sonra 7-10 gün boyunca sütte kan olup yok. Sonraki sağımlarda biyopsi yapılan çeyrekten elde şeritli kan pıhtıları ve tam süt çıkarma işleminin gerçekleşmesini sağlar.Süt verimini gözlemleyin ve mümkünse cerrahi zımbalar çıkarılana kadar günlük yem alımını gözlemleyin. Cerrahi zımba lar çıkarılana kadar hayvanı günde iki kez vücut ısısı, solunum ve kalp atışları ve tavırları için izleyin. Biyopsi bölgesini günde iki kez şişlik, hassasiyet ve cerrahi zımbalar çıkarılana kadar herhangi bir drenaj belirtisi için kontrol edin.Bunlar gözlenirse, bir veterinere danışın. Biyopsiden 10 ila 14 gün sonra, iyileşme hızına bağlı olarak zımbaları kesi bölgesinden çıkarın. Lokal veya sistemik enfeksiyon belirtileri görülürse bir veterinere danışın.Biyopsi yapılır alınmaz, kanı ve dolayısıyla o dokuya besin ve oksijen kaynağını böldüniz, ve eğer doku çekirdeğini çıkarmakta ve bir şekilde doku aktivitesini durdurmakta çok hızlı değilseniz, laboratuvarda daha geç bir zamanda ölçebildiğiniz konsantrasyonlar biyopsi sırasında o hayvanda neler olup bittiğini tam olarak yansıtmayabilir. Tipik olarak, biz hızla doku kaldırmak istiyorsunuz, ve flaş sıvı nitrojen içinde bu aktiviteyi korumak için denemek için dondurmak. Bu dokuyla yapabileceğimiz bir diğer şey, ve bu aslında topladığımız dokuyla yaptığımız bir şey, bir kültür sisteminde ki dokuda bulunan hücreleri izole edip büyütebiliyor olmamızdı.Bizim durumumuzda, bu dokunun içindeki epitel hücreleriyle ilgileniyoruz, çünkü bunlar süt bileşenlerini sentezleyen ve salgılayan hücreler, ve böylece, bu doku parçalarından elde edilen hücreler kültüre yerleştirildi, ve aslında, bugün hala büyüyorlar. Hayvanlar işlemden sonra 10 gün boyunca günde iki kez gözlemlendi. İşlem sırasında veya ameliyat sonrası dönemde herhangi bir komplikasyon meydana gelmemiş ve hayati parametreleri normal sınırlar içinde kalırken.Lineer modeller, biyopsiden 10 gün önce hayvanların günde 23,35 kilogram süt ürettiğini gösteriyor. Hayvanlar biyopsiden 10 gün öncesine kadar süt veriminde önemli değişiklikler göstermedi. Sığır meme bezi biyopsisi minimal invaziv bir işlemdir, hayvan kısa bir iyileşme süresi için izin.Bu nedenle, bu biyopsi prosedürü birçok beslenme denemelerinde ve hayvanlar üzerinde tekrarlanan önlemler alabileceğimiz diğer denemelerde kullanılabilir, bu nedenle, örneğin, dört farklı beslenme tedavisi ile dört adet yaparsak, bu her dönemin sonunda dört farklı kez kolayca biyopsi yapabiliriz, bu da belki her dönem arasında bir haftalık dinlenme süresi ne kadar izin verir. , hayvanların normal üretimlerine geri dönmelerini sağlamak.

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bizim protokol sıçan karın meme bezi nasıl incelemek ve meme bezi bütün bağlar hazırlamak için nasıl açıklamaktadır. Aynı zamanda üç uç noktaları (terminal sonuna tomurcukları sayısı, epitel uzama ve farklılaşma) kullanılarak meme bezi morfolojisi analiz etmek ve bu sonuçlar, diyet değişiklikleri maruz kalan farelerde meme kanseri riskini tahmin etmek için kullanmak nasıl...

Sıçanlarda Meme Bezi Morfolojisi ve Meme Kanseri Riski değişiklikler

Time-lapse görüntüleme özgü davranışsal parametreler ve farklı genetik lezyonlar arasında bir korelasyon olup olmadığını belirlemek için meme kanseri riskinin genetik fare modelleri türetilmiştir birincil preneoplastic meme epitel hücrelerinin davranışlarını değerlendirmek için kullanılır.

Birincil Preneoplastic Meme Epitel Hücrelerinin Time-lapse görüntüleme Meme Kanseri Genetik Fare Modelleri türetilen

Bu makalede deneysel koşullar altında sığır bronkoskopik teknikler, yani bronkoskopik güdümlü aşılama, bronkoalveoler lavaj, bronş fırçalama ve transbronşiyal akciğer biyopsisi açıklanır.

Biyomedikal Araştırma Sığır Akciğer: Görme Kılavuzlu Bronkoskopi, intrabronşiyal Aşılama ve<em&gt; In Vivo</em&gt; Örnekleme Teknikleri

Burada, reaktiflerin intraduktal enjeksiyon yoluyla tavşan meme bezine lokalize olarak verilmesi için bir teknik açıklıyoruz. Ek olarak, kontrast maddelerin yüksek çözünürlüklü ultrason görüntülemesi ile görselleştirme ve teslimatın onaylanması için bir protokol açıklıyoruz.

Rabbit Meme Bezi için İntraduktal Teslimat

Bu protokol, adherent / mezenkimal meme epitel hücrelerinden ekstraselüler veziküller (EV) / ekzozomların arıtılması, nicelendirilmesi ve karakterize edilmesine yönelik yöntemleri ve meme bezi oluşturma yeteneğini luminal meme epitel hücrelerine aktarmak için kullanmayı açıklamaktadır. Gövde benzeri meme epitel hücrelerinden türetilmiş EVs / eksozomlar, bu hücre özelliğini EV'leri / eksosomları emen hücrelere aktarabilir.

Membran Bazal Epitelyal Hücreler ile Membran Luminal Hücreler Arasındaki Meme Bezi Oluşturma Yeteneğinin Ekstraselüler Vesiküller / Ekzozomlar Yoluyla Transferi

Kemirgen içindeki meme bezi gelişimi tipik olarak tanımlayıcı değerlendirmeler kullanılarak veya temel fiziksel özellikleri ölçerek değerlendirilmiştir. Dallanma yoğunluğu, meme gelişiminin objektif olarak ölçülmesi güç bir göstergesidir. Bu protokol, meme bezi dallanma özelliklerinin niceliksel değerlendirmesi için güvenilir bir yöntem tanımlamaktadır.

Sıçan Memesi Bezinde Dallanma Yoğunluğunun Nicelleştirilmesi Sholl Analiz Yöntemini Kullanarak Bütünüyle Tutturulur

Başlangıçta slaytlar üzerinde sabitlenmiş olan meme dokusunu histopatolojik değerlendirme için başarıyla çıkarmak, işlemek, kesmek ve lekelenmek için bir yöntem geliştirdik. Bu yöntem, üreme ve gelişimsel test kılavuz çalışmalarında meme bezlerinin tümünün monte edilmesini ve değerlendirilmesini teşvik edebilir.

Lezyon Tanımlaması için Meme Bandı Bütün Dağılımları

Burada, hücre dışı Matriks (ECM) ifade ve duktal Morfoloji araştırmak için meme dokuları bütün, olduğu gibi fare yalıtım için bir iletişim kuralı mevcut. Fare #4 karın bezleri tarafsız tampon formalin içinde sabit kesitli ve ECM proteinler için immünhistokimya kullanarak lekeli 8-10 hafta eski kadın nulliparous fareler, elde.

Sağlam, Bütün fare meme dokuları yalıtım hücre dışı matriks ifade ve bezi Morfoloji analizi için

Burada, mitokondrial oksijen tüketimi, beslenme enerji bilimi ve proton sızıntı, verimsizlik birincil nedeni mitokondriyal ATP nesil belirleyici bir kavram ölçme yöntemleri paylaşmak. Bu sonuçlar besin kullanımı mitokondriyal işlev değerlendirmek yardımcı olmak için kayıp enerjinin % 30 için hesap.

Karaciğer mitokondrial oksijen tüketimi ve Proton sızıntı kinetik Holstein süt sığır mitokondrial solunum tahmin etmek için ölçme

Bu protokol, değiştirilebilir kapaklı (R.MIW) yeni bir meme görüntüleme penceresini tanımlar. R.MIW'nin implantasyonundan sonra intravital mikroskopi, farklı gelişim aşamalarında sağlıklı ve hastalıklı meme bezinin hücresel çözünürlükle uzunlamasına ve çok günlük görüntülenmesini sağlar.

Değiştirilebilir Kapaklı Meme Görüntüleme Penceresi Kullanarak Boyuna İntravital Mikroskopi

Mevcut protokol, lazer taramalı konfokal ve multifoton mikroskobu ile emziren fare meme bezinin intravital görüntülenmesi için kolay bir tekniği tanımlamaktadır.

Meme bezinin intravital hücre altı mikroskobu

Öğrenin sığır meme bezi biyopsisi tekniklerini, doku örnekleme ve hücre kültürü için. Bu yöntem, meme fizyolojisi ve metabolizmasını inceleyen araştırmacılar için güvenilir bir araç sunar.

Sığır meme bezi biyopsisi teknikleri

Daha fazla video keşfet