Name: Bir fare MPTP kaynaklı Parkinson hastalığı modelinde kendiliğinden hareket davranış değerlendirme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 38 s
Description: Öğrenin, farelerde MPTP ile Parkinson hastalığı modelinde silindir ve açık alan testleriyle motor fonksiyonu nasıl değerlendireceğinizi. Bu yöntem, eğitim gerektirmeden davranışsal analiz yapmanızı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

İnovasyon ve Girişimcilik (Grant No. 63183004) için çalışmalarımız Tianjin lisans eğitim programları tarafından finanse edilmektedir. Bu projenin devlet anahtar Tıbbi Kimya Biyoloji laboratuarında Nankai Üniversitesi'nde başlatıldı. Yazarlar hiçbir çakışma çıkarlarının bildirin.

Bu çalışmada hayvan deneyleri dikkate alınarak Uluslararası, ulusal ve kurumsal kurallarına göre gerçekleştirildi. Çalışma protokolü Nankai Üniversitesi hayvan Etik Komitesi tarafından kabul edildi.
1. MPTP ve L-DOPA yönetim
Not: On-hafta-yaşlı kadın BALB/c fare Enstitüsü zooloji tarafından Çin Bilimler Akademisi temin edilmiştir. Fareler vardı barındırılıyor altı başına 12 h açık/koyu döngüsü (ışıkları saat 08:00-20:00), altında 21-22 ° c sabit sıcaklık ve bağıl nem % 55 ± % 5'lik kafes. Autoclaved standart fare chow aynı formülasyonu ve su ad libitum , tüm hayvanlar için verildi.
<ol><li>İklimlendirme, bir hafta sonra hayvanlar altı fareler üç gruba ayırın.</li>
	<li>Grup 1 ' e (bkz. Adım 1.5) 250 µL/fare/gün tuz mayi enjeksiyonlari günden itibaren 1 gün 7 yönetmek ve intragastric yönetim gerçekleştirin (bkz. Adım 1.6) 250 µL/fare salin günde 8.</li>
	<li>Grup 2' ye, 20 mg/kg mayi enjeksiyonlari yönetmek/MPTP her gün gün 1 gün 7 gün ve günde 8 250 µL/fare serum intragastric yönetim gerçekleştirin.</li>
	<li>Grup 3, 20 mg/kg mayi enjeksiyonlari yönetmek/gün MPTP, 1 günden güne 7 ve 8 günde 5 mg/kg nın intragastric yönetim gerçekleştirin.</li>
	<li>Mayi enjeksiyon aşağıdaki gibi yapın.<ol>
<li>İlaç 26 G iğne ile steril 1 mL şırınga yükleyin. Soluduğumuz hava--dan belgili tanımlık tenkıye ortadan kaldırmak.</li>
		<li>Scruff fare yukarı dönük olacak şekilde karnı ile. Baş, boyun ve gövde fare düz bir çizgi halinde de sabit kafa ile tutmak.</li>
		<li>Karın zarını nüfuz iğneyi açı. Küçük direniş kadar uygun bir mesafe için iğne itin ve uyuşturucu enjekte. İğne sorunsuz çekin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>İntragastric yönetimi aşağıdaki gibi gerçekleştirin.<ol>
<li>Steril 1 mL şırınga ilaç oral gavaj iğne ile hazırlayın. Soluduğumuz hava--dan belgili tanımlık tenkıye ortadan kaldırmak.</li>
		<li>Fare karnı yukarı bakacak şekilde tutun. Baş, boyun ve gövde fare sabit kafa ile düz bir çizgide tutmak.</li>
		<li>İğne fare vücuda paralel tutun ve fareyi'nın ağız, dil tuşuna basıp karşı üst çene içe iterek köşesinden ekleyin.</li>
		<li>Küçük dirençle hangi iğne gösterir özofagus sorunsuz giriyor, iğne uygun bir mesafede dikkatle itin. İğne ucu göğüs alt kısmı ulaşmadan önce ilaç enjekte et.</li>
		<li>İğne sorunsuz çekin.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. silindir testi
Not: Gün 8 davranış testleri yapıldı. L-DOPA fareler 40dakika davranış testleri önce üçüncü gruba enjekte ettiler. Davranışsal test nerede hayvanlar yerleştirilmiştir aynı odada yapılmazsa, hayvanlar için 30-60 dk önce test yeni odasına iklime alıştırılacağı gerek.
<ol><li>Test 24 h MPTP son doz sonra gerçekleştirin.</li>
	<li>Şeffaf cam silindir yerleştirin (yükseklik = 19,5 cm, çapı 15 cm, ağırlığı ≥1 kg =) bir tablo ortasına. Silindir çevre aydınlatma etkisini azaltmak için siyah karton ile üç taraftan kuşatır. Kamera video kaydı için karşı karşıya silindirin bir yana bırakın. Not: Karton ve silindir arasındaki mesafe yaklaşık 4-8 cm olmalıdır.</li>
	<li>Bir kamera takmak (> 1 milyon piksel çözünürlük) ~ 40-60 cm uzakta tam silindir görünür olmasını sağlamak için silindir. Not: Bu ne çok yakın, ne de çok ileri hareketini video kaydederken fareyi rahatsız böylece olduğunu.</li>
	<li>Bir fare teker teker silindir içine yerleştirin ve bir kez filme başlamak. 3 dakika sonra filme durdurmak. Not: Bu işlem sırasında sesini önlemek ya da fare davranışı etkileyen sırasındaki ışık değişiklikleri önlemek.</li>
	<li>Fareyi test ettikten sonra geri ev kafesin içine yerleştirin.</li>
	<li>Silindir su ile temiz ve daha sonra bu sterilize ve fare kokuları çıkarmak için iç duvarın üzerinden % 70 v/v etanol sprey. Başka bir fare içine yerleştirilmeden önce silindir kuru silin.</li>
	<li>X normal hızı 0.5 oranında video oynatmak ve pençe asansörleri Her fare duvara saymak. Not: pençe fareyi onun hindlimbs rears asansörleri oluşur her iki ön ayakları omuz seviyesi ve toprakları yukarıda yükseltir. Bir forelimb Asansör sayılır değildir. Genellikle, bir fare silindir duvarları dokunmak onun forelimbs yükseltir. Fareyi onun forelimbs omuz seviyesinden birkaç kez sürekli iniş olmadan harekete geçiren, yalnızca bir kez sayılması.</li>
</ol>3. açık alan testi
<ol><li>24 saat açık alan testi MPTP dozaj sonra gerçekleştirin. Not: Bu silindir test aynı anda yürütülen olabilir.</li>
	<li>Şeffaf açık alan tepki kutusunu hazırlamak (45 cm L 45 cm W x 25 cm H x) siyah bir bez tarafından altındaki ahşap plaka kapaklı. Bir fotoğraf makinesi tamir (> 1 milyon piksel çözünürlük) 1 m yükseklikte alanın üzerinde. Not: Açık alan kutusu alt rengini renk karşıtlığını videodaki emin olmak için test edilmiş fare renginden farklı olmalıdır.</li>
	<li>Açık alan tepki kutusu tam video ortasında olduğundan emin olmak için fotoğraf makinesinin değiştirin.</li>
	<li>Bir test fare koymak belgili tanımlık kutu ve kendisini çevre için yaklaşık 1 dakika inceleyin: fare izin.</li>
	<li>Kayıt bir 5 dk video kamera kullanarak bilgisayara bağlı.</li>
	<li>Hareket izleme şekil, statik dağılımı almak için yazılım araçları (Örneğin, MATLAB) kullanarak video analiz (hız < 1 cm/s), yürüme (hız 1-20 cm/s) ve çalışan (hız > 20 cm/s) zaman, seyahat toplam mesafe ve ortalama sınanan her fare hızı. Not: video analiz ederken, biz tüm vücut fare takip ediyoruz. Bir vücut ortalama hızı, sürenin bölünmüş yolun toplam uzunluğu kaplı anlamına gelir. Bu nedenle, Eğer bir fare hareket etmiyor, onun anlık hız sıfır olarak düşünülebilir.</li>
	<li>Açık alan tepki kutusunda herhangi bir dışkı temizleme. % 70 etanol üstünde belgili tanımlık kutu sprey ve onu silin.</li>
</ol>

<ol><li>Dehay, B., Bourdenx, M., Gorry, P., Przedborski, S., Vila, M., Hunot, S., Singleton, A., Olanow, C. W., Merchant, K. M., Bezard, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+-synuclein+for+treatment+of+Parkinson%27s+disease%3A+mechanistic+and+therapeutic+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurology%22%5BJournal%5D)">Targeting -synuclein for treatment of Parkinson's disease: mechanistic and therapeutic considerations.</a> Lancet Neurology. 14, 855-866 (2015).</li>
<li>Weintraub, D., Comella, C., Horn, L., S, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parkinson%27s+disease+-+Part+1%3A+Pathophysiology%2C+symptoms%2C+burden%2C+diagnosis%2C+and+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Managed+Care%22%5BJournal%5D)">Parkinson's disease - Part 1: Pathophysiology, symptoms, burden, diagnosis, and assessment.</a> American Journal of Managed Care. 14, 40-48 (2008).</li>
<li>Ismaiel, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metformin%2C+besides+exhibiting+strong+in+vivo+anti-inflammatory+properties%2C+increases+mptp-induced+damage+to+the+nigrostriatal+dopaminergic+system%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+and+Applied+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Metformin, besides exhibiting strong in vivo anti-inflammatory properties, increases mptp-induced damage to the nigrostriatal dopaminergic system.</a> Toxicology and Applied Pharmacology. , 19-30 (2016).</li>
<li>Bayliss, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ghrelin-AMPK+signaling+mediates+the+neuroprotective+effects+of+calorie+restriction+in+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Ghrelin-AMPK signaling mediates the neuroprotective effects of calorie restriction in Parkinson's disease.</a> Journal of Neuroscience. 36, 3049-3063 (2016).</li>
<li>Olanow, C. W., Stern, M. B., Sethi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+scientific+and+clinical+basis+for+the+treatment+of+Parkinson+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">The scientific and clinical basis for the treatment of Parkinson disease.</a> Neurology. 72 (21 Supplement 4), (2009).</li>
<li>Chiba, K., Trevor, A., Castagnoli, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolism+of+the+neurotoxic+tertiary+amine%2C+MPTP%2C+by+brain+monoamine+oxidase%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+%26+Biophysical+Research+Communications%22%5BJournal%5D)">Metabolism of the neurotoxic tertiary amine, MPTP, by brain monoamine oxidase.</a> Biochemical & Biophysical Research Communications. 120 (2), 574-578 (1984).</li>
<li>Bakay, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biochemical+and+behavioral+correction+of+MPTP+parkinson-like+syndrome+by+fetal+cell+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+New+York+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Biochemical and behavioral correction of MPTP parkinson-like syndrome by fetal cell transplantation.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 495 (1), 623-638 (2010).</li>
<li>Kelly, P. H., Seviour, P. W., Iversen, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amphetamine+and+apomorphine+responses+in+the+rat+following+6-OHDA+lesions+of+the+nucleus+accumbenssepti+and+corpus+striatum%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Amphetamine and apomorphine responses in the rat following 6-OHDA lesions of the nucleus accumbenssepti and corpus striatum.</a> Brain Research. 94 (3), 507-522 (1975).</li>
<li>Langston, J. W., Irwin, I., Langston, E. B., Forno, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((1-methyl-4-phenylpyridinium+ion+%28MPP%2B%29%3A+identification+of+a+metabolite+of+MPTP%2C+a+toxin+selective+to+the+substantia+nigra%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">1-methyl-4-phenylpyridinium ion (MPP+): identification of a metabolite of MPTP, a toxin selective to the substantia nigra.</a> Neuroscience Letters. 48 (1), 87-92 (1984).</li>
<li>Katila, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metformin+lowers+%CE%B1-synuclein+phosphorylation+and+upregulates+neurotrophic+factor+in+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Metformin lowers α-synuclein phosphorylation and upregulates neurotrophic factor in the MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Neuropharmacology. 125, (2017).</li>
<li>Goldberg, N. R. S., Haack, A. K., Lim, N. S., Janson, O. K., Meshul, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopaminergic+and+behavioral+correlates+of+progressive+lesioning+of+the+nigrostriatal+pathway+with+MPTP%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Dopaminergic and behavioral correlates of progressive lesioning of the nigrostriatal pathway with MPTP.</a> Neuroscience. 180, 256-271 (2011).</li>
<li>Schwarting, R. K., Sedelis, M., Hofele, K., Auburger, G. W., Huston, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain-dependent+recovery+of+open-field+behavior+and+striatal+dopamine+deficiency+in+the+mouse+MPTP+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicity+Research%22%5BJournal%5D)">Strain-dependent recovery of open-field behavior and striatal dopamine deficiency in the mouse MPTP model of Parkinson's disease.</a> Neurotoxicity Research. 1 (1), 41(1999).</li>
<li>Shiguang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+open+field+test+as+a+method+for+ethology+in+Kunming+mice%3A+test-retest+reliability%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Behavioral+Medicine+and+Brain+Science%22%5BJournal%5D)">The open field test as a method for ethology in Kunming mice: test-retest reliability.</a> Chinese Journal of Behavioral Medicine and Brain Science. 19 (12), 1093-1095 (2010).</li>
<li>Roome, R. B., Vanderluit, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paw-Dragging%3A+a+Novel%2C+Sensitive+Analysis+of+the+Mouse+Cylinder+Test%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Paw-Dragging: a Novel, Sensitive Analysis of the Mouse Cylinder Test.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52701(2015).</li>
<li>Cotzias, G. C., Van Woert, M. H., Schiffer, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aromatic+amino+acids+and+modification+of+Parkinsonism%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Aromatic amino acids and modification of Parkinsonism.</a> New England Journal of Medicine. 282, 31-33 (1967).</li>
<li>Cassady, J. C., Johnson, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+test+anxiety+and+academic+performance%5BTitle%5D)+AND+%22Contemporary+Educational+Psychology%22%5BJournal%5D)">Cognitive test anxiety and academic performance.</a> Contemporary Educational Psychology. 27 (2), 270-295 (2002).</li>
<li>Rogalewski, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Semaphorin+6A+improves+functional+recovery+in+conjunction+with+motor+training+after+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">Semaphorin 6A improves functional recovery in conjunction with motor training after cerebral ischemia.</a> Plos One. 5 (5), 0010737(2010).</li>
<li>Chen, W., Qiao, D., Liu, X., Shi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treadmill+exercise+improves+motor+dysfunction+and+hyperactivity+of+the+corticostriatal+glutamatergic+pathway+in+rats+with+6-ohda-induced+parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plasticity%22%5BJournal%5D)">Treadmill exercise improves motor dysfunction and hyperactivity of the corticostriatal glutamatergic pathway in rats with 6-ohda-induced parkinson's disease.</a> Neural Plasticity. 2017, 2583910(2018).</li>
<li>Colas-Zelin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+imposition+of%2C+but+not+the+propensity+for%2C+social+subordination+impairs+exploratory+behaviors+and+general+cognitive+abilities%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">The imposition of, but not the propensity for, social subordination impairs exploratory behaviors and general cognitive abilities.</a> Behavioural Brain Research. 232 (1), 294-305 (2012).</li>
<li>Spurney, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+drug+trials+in+the+mdx+mouse%3A+Assessment+of+reliable+and+sensitive+outcome+measures%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Preclinical drug trials in the mdx mouse: Assessment of reliable and sensitive outcome measures.</a> Muscle Nerve. 39, 591-602 (2009).</li>
<li>Valle, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+strain%2C+sex%2C+and+illumination+on+open-field+behavior+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Psychology%22%5BJournal%5D)">Effects of strain, sex, and illumination on open-field behavior of rats.</a> American Journal of Psychology. 83, 103-111 (1970).</li>
<li>Tatem, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+Locomotor+Measurements+Using+an+Open+Field+Activity+Monitoring+System+for+Skeletal+Muscle+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Behavioral and Locomotor Measurements Using an Open Field Activity Monitoring System for Skeletal Muscle Diseases.</a> Journal of Visualized Experiments. (91), e51785(2014).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Beyin gözlemliyorum nigra dopaminerjik nöronlarda imha nedeniyle MPTP fareler7' Parkinson benzeri belirtilere neden olmaktadır. PD, hastalarda motor anormallikler akinezi ve sertlik15de dahil olmak üzere etkili bastırılması ile normal günlük aktiviteler korumada yardımcı olur çünkü L-DOPA PD için en çok tercih edilen ilaç hiç klinik kullanımı beri bu olan. Fareler silindir test ve MPTP modeli eğitim için kullanılan olabilir açık alan test gibi davranışsal testlerinde bozukl...

Parkinson hastalığı (PD), büyük bireyler arasında en yaygın hastalıklardan biri uzun vadeli nörodejeneratif bozukluğu1. olur Hastalar her zaman sallayarak, sertlik, hareket ve zaman2daha da kötüye demans yavaşlık olgusu göster. Duyusal gibi diğer belirtiler uyku ve duygusal sorunlar da yaygın2gözlenir. PD hala belirsiz nedeni, ama genel olarak gözlemliyorum nigra3dopaminerjik nöronlarda kaybı ve geliştirme Lewy organları ve Lewy neurites'ın çeşitli bölgelerinde neden genetik ve çevresel faktörler içeren inanılıyor beyin4.
PD çalışmaları arasında 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)5 yaygın deneysel modellerinde bazı PD belirtiler eğlence içinde uyarlanmıştır. 1984 yılında MPTP enjeksiyonu Sincap maymunlar içinde parkinsonizm6' sonuçlandı Langston vd. önce buldum. MPTP kemirgen modeli PD biyomarker olduğunu, Lewy organları, varlığını göstermez rağmen MPTP beyin7gözlemliyorum nigra dopaminerjik nöronlarda yok ederek Parkinson benzeri belirtilere neden olmaktadır. Diğer uyuşturucu model olanlar 6-hydroxydopamine (6-OHDA)8 ve 1-metil-4-phenylpyridinium (MPP +)9tarafından indüklenen gibi PD için karşılaştırıldığında, MPTP enjeksiyon yürütmek kolay ve MPTP modeli daha kısa sürer. Fareler alma MPTP enjeksiyon (20-30 mg/kg/gün) için yedi gün ve davranış testleri sekizinci gün10üzerinde gerçekleştirilir.
Açık alan test11 ilk Calvin S. Hall, bir Amerikan12tarafından geliştirilmiştir. Çeşitli çalışmalarda davranışları farklı türde test edilir. Araştırmada, Parkinson hastalıkları üzerinde odaklanan davranışları gezisidir faaliyetleri gibi ve hareket hızını hayvanın hareket etme yeteneği etkilenir görmek için test edilmiştir. PD hayvanlar kurulması sınamak için kullanılan diğer yöntemlere göre açık alan testinin gerekli ekipman basit ve prototip oluşturma ve veri analiz yazılımı (Örneğin, MATLAB, Excel) kolayca toplar ve grafiğini çizer için kullanılabilir çünkü yapmak kolaydır veri. Varyasyon katsayısı olan açık alan test sonucu güvenilir anlamına gelir nispeten küçük13, da. Diğer yöntemler üzerinde başka bir avantajı bu deneyde dahil davranışları ayırt etmek kolay olmasıdır; fare-ebilmek var olmak koşma, yürüme ya da hala ayakta. Araştırmacı ilgilinin hareketlilik değerlendirmek gerektiğinde genellikle açık alan testinin kemirgenler üzerinde kullanılabilir.
Silindir test forelimbs asimetrik kullanım testi olarak da adlandırılır. Bu testi önce tasarlarken, sıçan ön ayakları14asimetrik kullanımı test etmek için kullanılmıştır. Burada, hayvanın yat ve yeni çevreyi keşfetmek için kullanma her ikisi onun forelimbs yeteneği analiz etmek için bu test kullanırız. Zaman gözlemliyorum nigra ve corpus striatum MPTP beyin tarafından zarar hayvan sırtını kemer eğilimindedir ve daha az yat ve bilinmeyen çevre keşfetmek olasılığı olur. Bu test için kolaydır yürütmek ve ön bir sonuç verebilir. Bu genellikle ile birlikte diğer davranış deneyler bu nedenle kullanılan ancak, bu test yüksek iç değişkenliği, vardır.
L-DOPA, olarak da bilinen levodopa veya L-3,4-dihydroxyphenylalanine olan, sürüyor bir PD dopamin içinde azalma nedeni bu yana Parkinson hastalığı tedavi etmek için ortak bir yol. L-DOPA dopamin habercisi. Ama dopamin farklı olarak, beyin bölgede dopamin konsantrasyonu artan daha verimli olacağı anlamına gelir kan - beyin bariyerini geçemez. Bu kan - beyin bariyerini geçer sonra L-DOPA dopamin L-amino asit dekarboksilaz15tarafından dönüştürülür.
Burada ölçüm ve analiz bir silindir testi14 ve değiştirilmiş açık alan testi kullanarak MPTP indüklenen PD modeli farelerde motor işlevleri açıklanmaktadır. L-DOPA PD ilaçların çalışmada bu modeli uygulamak nasıl göstermek için bir örnek olarak yönetmek. Bizim sonuçları MPTP L-DOPA tarafından azaltılabilir motor açığı indükler gösterir.

<table><tbody><tr><td>% 70 Etanol</td><td>Ruiboxing Company</td><td>RBX-64175</td><td></td></tr><tr><td>Kamera</td><td>BASLER</td><td>acA645-100gm</td><td></td></tr><tr><td>Silindir testi</td><td>Nankai Üniversitesi'nde kurum içinde üretilmiştir</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Excel</td><td>Microsoft</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Levodopa</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>72816</td><td></td></tr><tr><td>Matalb 2017a</td><td>Mathworks</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Fareler</td><td>Zooloji Enstitüsü, Çin Bilimler Akademisi</td><td>Balb / c</td><td>Yetişkin dişi fareler (10 hafta)</td></tr> <tr><td>MPTP</td><td>Yuanye Biyolojik Teknoloji Şirketi Ltd., Şangay</td><td>S31504-500mg</td><td></td></tr><tr><td>Açık alan testi</td><td>Nankai Üniversitesi'nde kurum içinde üretilmiştir</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga</td><td>Solelybio</td><td>S-xsgwz-w</td><td>Sulama</td></tr><tr><td>Şırıngası</td><td>Jiangxi Fenglin Medical Uygulama A.Ş.</td><td>hc3824</td><td>İntraperitoneal enjeksiyon</td></tr></tbody></table>

bir fare mptp kaynaklı parkinson hastalığı modelinde kendiliğinden hareket davranış değerlendirme

Behavioral Assessments of Spontaneous Locomotion in a Murine MPTP-induced Parkinson's Disease Model

Parkinson hastalığı (PD) sallayarak, sertlik, hareket ve demans yavaşlık olgusu neden sık görülen nörodejeneratif bozukluğu hastalığı var. 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) bazı Parkinson benzeri semptomlar beynin gözlemliyorum nigra dopaminerjik nöronlarda yok ederek yol açabilir. Böylece çeşitli hayvan çalışmalarda PD modelleri oluşturmak için kullanılmıştır. Burada, fareler MPTP enjeksiyonları almak (20 mg/kg/gün) yedi gün ve davranış testleri için sekizinci gününde yapılmaktadır. Bu model PD çalışmada verimli bir şekilde uyarlanmıştır. Davranış testleri silindir test ve açık alan testi içerir. Silindir deney ne zaman farklı bir ortam koymak açık onların paws kaldırmak için hayvanların yeteneği tespit etmek için kullanılır. PD model fare göstermek arching — fare sırtını arches — pençe liftings azalma sayısı. Bu test çalıştırmak kolaydır. Açık alan testinin koşma, yürüme ve hareketsiz kalan fareler harcama miktarını tespit etmek için kullanılır. Biz yazılım kullanarak açık alanı hayvanların hareketleri analiz ve verileri elde etmek. Son olarak, biz L-DOPA kullanımı, en yaygın olarak kullanılan PD ilaç, PD uyuşturucu çalışma için bu modeli uygulamak nasıl göstermek için bir örnek olarak. Bizim sonuçları MPTP nörotoksisite L-DOPA tarafından azaltılabilir motor açığı indükler gösterir.

Silindir testinde farelerde (Grup 2) farelerde (Grup 3) MP ile tedavi rears bir artış gözlenmiştir iken MPTP ile günden itibaren 1 gün 7 ve günde 8 ile karşılaştırıldığında salin tedavi fareler (Grup 1), serum fizyolojik tedavi rears duvara azalma gözlenmiştir TP günden 1'e 7 gün ve günde 8 fareler (Grup 2) ile karşılaştırıldığında L-DOPA MPTP ile günden itibaren 1 gün 8 (Şekil 1) gün 7 ve serum fizyolojik tedavi.
<p class="jove_content" fo:keep-together....

Biz bir fare modeli için Parkinson hastaligi MPTP ve davranışsal değerlendirme motor işlevleri ölçmek için silindir ve açık alan testleri kullanarak kullanarak kurulması tanımlamak. O zaman bir örnek olarak PD ilaçların çalışmada bu modeli uygulamak nasıl göstermek için L-DOPA kullanın.

Bir fare MPTP kaynaklı Parkinson hastalığı modelinde kendiliğinden hareket davranış değerlendirme

Parkinson&#8217;s disease (PD) is a common neurodegenerative disorder disease, causing the phenomenon of shaking, rigidity, slowness of movement and ...

Bu videoda, Parkinson hastalığının MPTP modelinde motor fonksiyonunu daraltmak için silindir ve açık alan testinin nasıl kullanılacağını tanıtıyoruz. Birincil avantajı fareler davranış testi önce eğitilmiş olması gerekmez. Ayrıca, bu yöntem verimli ve ekipman maliyeti düşüktür.Davranışsal testlerde yeni olan bireyler çevresel müdahalenin etkisini hafife alabilir. Sessiz kalmak ve astar değişiklikleri önlemek yardımcı olacaktır. Burada, davranışsal testler MPTP veya tuzlu enjeksiyonyedi günlük rejimin son enjeksiyondan 24 saat sonra ve hayvanların bir alt kümesine L-DOPA intragastrik uygulamadan 40 dakika sonra yapılır.Hayvanların barındığı aynı odada davranışsal testler yapılmazsa, fareleri testten 30 ila 60 dakika önce yeni odaya alıştırın. Bir tablonun ortasına şeffaf bir cam silindir yerleştirerek başlayın. Siyah karton ile üç tarafta silindir surround, çevresel aydınlatma etkisini azaltmak için silindir den dört ila sekiz santimetre uzağa yerleştirilir.Video kaydı için silindirin bir tarafını kameraya bakacak şekilde bırakın. Silindirden 40 ila 60 santimetre uzağa en az bir milyon piksel çözünürlüğe sahip bir kamera takın ve tüm silindirin görüş alanında olduğundan emin olun. Bir seferde silindiriçine bir fare yerleştirin ve hemen filme başlar.Bu işlem sırasında farenin davranışını etkilememek için gürültü veya ışık değişikliklerinden kaçınmaya çalışın. Pati asansörleri, farearka ekstremitelerinin üzerine çıktığında, her iki ön uzuvları omuz seviyesinden yukarı kaldırdığında ve yere indiğinde meydana gelir. Üç dakika sonra çekimi durdurun ve fareyi ev kafesine geri yerleştirin.Silindiri suyla temizleyin ve sonra temizlemek ve fare kokularını kaldırmak için iç duvarın üzerine %70 etnol püskürtün. Bir sonraki fareyi test etmeden önce silindiri kurutun. Test tamamlandıktan sonra, videoyu normal hızın 0,5 katı hızda oynatın ve her farenin duvarına karşı pati asansörlerinin sayısını sayın.Fare iniş yapmadan iki kez omuz hizasının üzerine çıkarsa, yalnızca bir kez sayılmalıdır. Silindir testi ile aynı oturum sırasında açık alan testi gerçekleştirin. Farenin rengine bağlı olarak zıt siyah veya beyaz bir bezle kaplı ahşap bir plakalı şeffaf bir açık alan reaksiyon kutusu hazırlayın.Bir metre yükseklikte alan üzerinde bir kamera sabit. Açık alan reaksiyon kutusunun videonun tam ortasında olduğundan emin olmak için kamerayı ayarlayın. Kutunun içine bir test faresi koyun ve farenin çevreye yaklaşık bir dakika boyunca alışmasına izin verin.Bilgisayara bağlı kamerayı kullanarak beş dakikalık bir video kaydedin. Son olarak, açık alan reaksiyon kutusundaherhangi bir dışkı temizlemek, sprey% 70 etanol kutusuna, ve silin. Silindir testinde, mptp ile tedavi edilen farelerde, tuzlu tedavi edilen farelere göre duvara karşı arka sayısının azaldığı gözlenmiştir.Test günü L-Dopamin verilen MTPT tedavi edilen farelerde, tuzlu su alan MPTP tedavi edilen farelere göre artış gözlenmiştir. Bu resim, temsili hareket izleme ve statik zaman dağılımı, yürüme süresi ve mptp ile tedavi edilmeyen kontrol farelerde çalışma süresi gösterir. MTPT ile tedavi edilen fareler, daha düşük hareket hızı, daha kısa hareket mesafesi, daha uzun statik süre ve daha kısa çalışma süresi gösterdikten sonra tuzlu fareleri tedavi etti ve MTPT tarafından indüklenen bir motor açığı gösterdi.MpTP tedavi fareler L-Dopamin alan daha yüksek bir hareket hızı gösterdi, daha uzun bir hareket mesafesi, daha kısa bir statik süre, ve fareler sadece MPTP ile tedavi daha uzun bir çalışma süresi, L-Dopamin MPTP kaynaklı motor açığı nı azaltır belirten. Test edilen fareler değiştirirken alanı tamamen temizleyin ve eski farelerin kokusunun etkisini ortadan kaldırmak için etanol püskürtün. Bu işlemden sonra ışın yürüyüş testi, kutup testi gibi diğer önlemler de yapılabilir.Bu yöntemlerle denge kapasitesi ve motor yeteneği ile ilgili veriler elde edilebilir. MPTP hem fareler hem de insanlar için nörotoksiktir ve bu nedenle maruz kalmamak için sıkı önlemler alınmalıdır. Maske veya solunum cihazı gibi ekstra PPE takılmalıdır.

behavioral-assessments-spontaneous-locomotion-murine-mptp-induced

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Parkinson hastalığı, deneysel 6-OH-dopamin tarafından tetiklenen olabilir striatum, dopaminerjik innervasyon kaybına neden olur. Biz stereotaksik lezyon gerçekleştirmek ve farelerde apomorfin bağlı dönme davranışı nasıl izleneceğini açıklar. Bu model, Parkinson hastalığı için yeni tedavilerin test etmek için faydalı ve güvenilir.

Parkinson Hastalığı için murin Model: 6-OH Dopamin Lezyon Davranış Testi

Genel olarak Parkinson hastalığı, hareket bozuklukları, hassas ve güvenilir bir davranış testleri yeni potansiyel terapötikler test etmek için gereklidir. Burada, nigrostriatal sistemine zarar derecelerine ve klinik öncesi çalışmalar için yararlı duyarlı olan fareler için duyu testler yönetilebilir bir pil açıklanmaktadır.

Parkinson Hastalığı Fare Modeller Duyusal Motor Fonksiyon Değerlendirilmesi

Kinematik yürüyüş analizi sagittal düzlemde hareket nasıl yürütüleceğini konusunda son derece hassas bilgi verir. Biz yürüyüş açıkları otoimmün aracılı demiyelinizasyon tabi fareler için tanımlamak için bu tekniklerin uygulanması açıklanmaktadır. Bu yöntemler, yürüyüş açıkları Engelli hareket featuring diğer fare modelleri için karakterize etmek için de kullanılabilir.

Sagittal düzlem kinematik yürüyüş analizi MOG35-55 için tabi C57BL/6 farelerde deneysel otoimmun ensefalomiyelit indüklenen

Bu çalışmada, biz ventral uçak motor koordinasyon yanı sıra ateş fare modelleri (Örneğin, endophilin mutant çağda ilerleyen ile ilerleme ince değişiklikleri izlemek için Imaging temel kinematik yürüyüş analizi kullanımını göstermektedir fare hat).

Yaş bağımlı Motor bozuklukları ile ateş farelerde, yürüyüş analizi

Ayak izi analizi farelerde hareket anomalilerini ölçerek araştırmacılar için dijıtleştirilmiş yürüyüş analiz programlarına düşük maliyetli bir alternatiftir. Hız, basitlik ve uzunlamasına potansiyel nedeniyle, fare modellerinin davranışsal fenotiplemeyi için idealdir.

Nöromusküler hastalığın fare modellerinin davranışsal phenotyping için düşük maliyetli yürüyüş analizi

Burada, MouseWalker aparatının sıçanların artan boyutuna ve ağırlığına uyum sağlayacak şekilde yeniden tasarlanmasıyla inşa edilen RatWalker sistemini tanımlıyoruz. Bu sistem, yürüyüş parametrelerini izlemek ve ölçmek için hayal kırıklığına uğramış toplam dahili yansıma (FTIR), yüksek hızlı video yakalama ve açık erişimli analiz yazılımı kullanır.

Parkinson Hastalığının Genetik Sıçan Modelinde Yürüme Analizi için RatWalker Sisteminin Uygulanması

Bu el yazması, bir Angelman sendromlu fare modelini doğrulamak için bir dizi yüksek oranda tekrarlanabilir davranış testi sunmaktadır.

Angelman Sendromlu Bir Fare Modelinin Davranışsal Karakterizasyonu

MouseWalker (MW) araç kutusunu kullanarak serbestçe yürüyen farelerin lokomotor modelini nicel olarak tanımlamak için ilk video kayıtlarından ve izlemeden niceleme sonrası analize kadar uzanan deneysel bir boru hattı sağlanmıştır. MW sisteminin yararlılığını göstermek için farelerde omurilik kontüzyon yaralanması modeli kullanılmıştır.

Omurilik Yaralanmasının Bir Fare Modelinde Lokomotor Disfonksiyonu Ölçmek için MouseWalker'ı Kullanma

Bu protokol, MPTP ile tedavi edilen zebrafish larvalarında Parkinson hastalığına benzeyen motor ve motor dışı eksiklikleri değerlendirmek için davranışsal fenotipleme paradigması oluşturur.

Davranışsal Deneye Dayalı Zebrafish Larvalarında MPTP Kaynaklı Parkinson Benzeri Davranışsal Fenotiplerin Fenotipik Profillenmesi

Biz objektif bir ölçü yaygın olarak kullanılan lastik el yanılsama paradigma istihdam nasıl göstermektedir. Bu tedbir köklü crossmodal uyumu görev değiştirerek elde edilir. Bu görev, lastik el yanılsama olduğu gibi vücut temsilleri modülasyon için kritik olan multisensory süreçlerin incelenmesi sağlar.

Kauçuk El Illusion Paradigma bir Amaç Davranış Tedbir Alınması Aracı Olarak Crossmodal Congruency Görev

Öğrenin, farelerde MPTP ile Parkinson hastalığı modelinde silindir ve açık alan testleriyle motor fonksiyonu nasıl değerlendireceğinizi. Bu yöntem, eğitim gerektirmeden davranışsal analiz yapmanızı sağlar.

Bir fare MPTP kaynaklı Parkinson hastalığı modelinde kendiliğinden hareket davranış değerlendirme

Daha fazla video keşfet