Kök büyüme ve yerelleştirilmiş besin kavramaları görselleştirmek için en iyi duruma getirilmiş bir Rhizobox Protokolü

Bu yöntem Kök ve Rizosfer Bilimi alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir, örneğin köklerin yerelleştirilmiş besin düzeltme lerine nasıl yanıt vermesi gibi. Bu tekniğin ana avantajları toprakta tek bir kök sisteminin tekrarlanan, non-invaziv ölçümleri sağlar, ancak özel ekipman gerektirmez ve nispeten ucuz. Montaj için Rhizobox için parçaları toplayın.

Bu 61 santimetre yaklaşık 40 santimetre açık akrilik yapılmış ön ve arka paneller içerir. Bu noktada, arka panelin üstünde yan ve alt boşluklar vardır. Spacers panellerde daha önce delinmiş delikler ile hizalanır.

Rhizobox alt boyunca gitmek için polyester dolgu bir uzunluk kesin. Sızıntıyı önlemeye yardımcı olmak için dolguyu arka panele alt boşluk alanının hemen üzerine töşen. Dolguyu yerinde tutmak için üst paneli boşluk lara yerleştirin.

Şimdi Rhizobox'ı monte etmek için donanıma bin. Delinmiş deliklerin her biri için bir vida, iki yıkama ve hex somun kullanın. Ön panele bir yıkayıcın yerini ve vidayı arka panele kadar sıkın.

Başka bir yıkıntı ve hex somunu. Toprak kaybını önlemek için, tüm vidaların çok sıkı olduğundan emin olun. Ayrıca, tedavi ve kontrol yamaları oluşturmak için iki boşluk oluşturun.

Yüksek yoğunluklu polietilen levhalar ile yapın ve sadece kısmi ekleme izin vermek için üst kısmında bir vida güvenli. Işık yoksunluğu ve ısı azaltma için, kutuyu içine alabilirsiniz koruyucu bir kılıf hazırlamak. Son olarak, kökleri arka panele karşı büyümeye teşvik etmek için bir çerçeve oluşturun.

Bu PVC çerçeve yaklaşık 55 derecelik bir açıyla kutu tutar. Tarla toprak ve kum homojenize karışımı hazır var. Her Rhizobox için substrat karışımı içeren büyük bir çanta ile başlayın.

Etiket iki küçük ziptop çanta kutu başına tedavi ve kontrol yamalar için. Bir ölçek kullanın ve toprak kum substrat 30 gram tartın. Substratı kontrol çantasına aktarın.

Aynı şekilde, tedavi torbasına 30 gram substrat ekleyin. Daha sonra bir gram azot 15 etiketli azot kaynağı tartın ve tedavi torbasına ekleyin. Substrat ve azot kaynağını iyice karıştırın.

Bir Rhizobox ile çalışın ve yama spacers's. Vida daha fazla hareketi engelleyene kadar iki boşlukları Rhizobox'a takın. Rhizobox tarafındaki boşlukların alt kenarının derinliğini işaretleyin.

Ardından sonraki adımlar için boşlukları kaldırın. Bir huni kullanarak, rhizobox'ı büyük substrat torbasından işaretli derinliğe doldurun. Huniyi yavaşça ve eşit bir şekilde hareket ettirin ve Rhizobox'ı düzgün bir şekilde doldurun.

Substrat işaretli derinlikte olduğunda, boşluklarını kutuya koyun. Kutunun sol ve sağ taraflarından beş santimetre uzakta olmalılar. Alt tabaka kutunun üstünden yaklaşık beş santimetre olana kadar kutuyu doldurmaya devam edin.

Daha sonra, damla yayıcılar veya elle 150 mililitre su ile kutusunda substrat yavaş sulama için ayarlayın. Su yayılır ve her spacer etrafında alan iyice ıslak böylece birkaç saat veya gece dinlenme ye bırakın. Bu noktada, yamalar için boş bir boşluk bırakmak için boşluk kaldırın.

Şimdi, şeffaflığı kutunun dışına bantlayın. Bir yamayı tedavi, diğerini kontrol olarak etiketlemek için saydamlığı kullanın. Daha sonra huniyi ve hazırlanan kontrol alt tabakasını kullanarak kontrol yamasını doldurun.

Bu, dolduruldıktan sonra etiketlenmiş denetim yamadır. Aynı şekilde hazırlanan tedavi substrat ile tedavi yama doldurmak için taşıyın. Bittiğinde, saydamlık filmindeki her yamanın sınırını izlemek için kalıcı bir işaretçi kullanın.

Daha sonra, Rhizobox'ı büyük torbadan kalan substratla eşit olarak doldurun. Saydamlık üzerindeki alt tabakanın üst kısmını izleyerek bitirin. Kutu hazır olduğunda, çimlenmiş bir tohum nakledin.

İlk olarak, Rhizobox merkezinde bir delik kazmak için dar bir spatula kullanın. Delik 2.5 santimetre derinliğinde olmalı. Radikal doğrudan aşağı doğru yönlendirilir sağlanması içine çimlenmiş tohum yerleştirin.

Kutunun bağlı saydamlık üzerinde tohum konumunu izleyin. Tohum kapağı, sonra deiyonize su 50 mililitre kadar su. Daha sonra, ışığın büyüme sırasında köklerle etkileşime girmesini önlemek için kutuyu kasasına ekleyin.

Kutuyu bunun için hazırlanan çerçeveye götürün. Rhizobox'ı arka çerçeveye doğru büyümeyi teşvik etmek için çerçeveye yerleştirin. Bitki büyüme her üç ila dört gün sonra kutuyu alın.

Kılıf kaldırıldı, her seferinde farklı bir renk kalem kullanarak bitkilerin görünür kökleri iz. Bu örnekte olduğu gibi, bu adım için tutarlı ve sistematik olun. Kapalı kutuyu standına geri döndürün ve orijinal yönünü niçin olduğundan emin olun.

Burada, 24 Rhizoboxes'ın arka tarafında ki izlenmiş köklerin toplam kök uzunlukları tarayıcı ve bilgisayar yazılımı kullanılarak ölçülen kök uzunluklarına göre çizilir. Kutunun önünde izlenen kök desenleri için benzer bir arsa kökleri kutunun arkasına karşı tercihen büyüdü gösterir. Büyüme gün bir fonksiyonu olarak toplam kök uzunluğu logaritma bu arsa tutarlı yamaçlarında büyüme oranları farklı kutular arasında benzer olduğunu göstermektedir.

Burada bir mısır genotip için kök uzunluğu yoğunluğu için veriler. Kontrol bandının yoğunluğu azot tedavi edilen yamanın yoğunluğundan daha küçüktür. Deney, altı ayrı mısır genotipinin kök uzunluk yoğunluğunu karşılaştırdı.

Her durumda, kontrol yama karşı azot 15 etiketli tedavi yama kök uzunluğu yoğunluğu daha büyüktü. Bu protokol, enzim aktivitesi veya mikropların spacial dağılımını görselleştirmek için sphygmography veya floresans in situ hibridizasyon gibi diğer yöntemlerle kombine edilebilir.