Chromatin Immunoprecipitation of Murine Brown Adipose Tissue

Maria Dafne Cardamone; Joseph Orofino; Adam Labadorf; Valentina Perissi

doi:10.3791/58682

Kromatin Immunoprecipitation fare kahverengi yağ dokusunun

JoVE Journal
Genetics

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Genetics

Chromatin Immunoprecipitation of Murine Brown Adipose Tissue

Kromatin Immunoprecipitation fare kahverengi yağ dokusunun

Full Text

8,623 Views

07:50 min

November 21, 2018

DOI: 10.3791/58682-v

Maria Dafne Cardamone¹, Joseph Orofino¹, Adam Labadorf², Valentina Perissi¹

¹Biochemistry Department,Boston University School of Medicine, ²Bioinformatic Hub,Boston University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Burada verimli kromatin immunoprecipitation (ChIP) için bir protokol yüksek üretilen iş DNA sıralama (ChIP-seq) kahverengi yağ dokusundan izole bir fare (BAT), ardından açıklayın. Bu iletişim kuralı, hem histon değişiklikler eşleme ve genom çapında yerelleştirme sigara histon proteinleri ilgi içinde vivo, soruşturma için uygundur.

Fareden izole kahverengi lipid dokusunda hem ester hem de ester dışı proteinlerin etkili ChIP dizilimi yapmak için kullanılan ölçülü. Tekniğin en büyük avantajı, protokolün lipid dokusundan kromatin ilişkili kompleksin etkin immünopresipitasyonu için optimize edilmiş olmasıdır. Kesiden önce, ötenazili fareyi %70 etanol ile püskürtün.

Fareyi sırtı yukarı bakacak şekilde yerleştirin, ardından boyun boyunca bir kesik yapın. Daha sonra, omuzlar arasında doğrudan deri altında bat bulunan ve dikkatle beyaz yağ ince tabaka kaldırın. Oda sıcaklığında 150 RPM'de 15 dakika boyunca %1 formaldehit içeren 10 mililitre PBS'deki her BAT pedini çapraz bağlantı.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Explore More Videos

Genetik sayı: 141 kromatin immunoprecipitation kahverengi yağ dokusu yeni nesil sekanslama fare şişman