Tek adım arıtma RNA bağlı Biotin ve fotoğraf yarilabilir bir bağlayıcı kullanarak makromoleküllerin kompleksleri

Bu yöntem, RNA protein komplekslerini izole etmeye ve kütle spektrometresi ile bileşimlerini belirlemeye çalışan araştırmacıların ilgisini çekebilir. Protokolümüzün, hücrelerde sınırlı miktarda bulunan ve uzun çok aşamalı arınma prosedürleri sırasında ayrışma eğiliminde olan kompleksleri arındırmak için özellikle yararlı olacağına inanıyoruz. Bu yöntemin en büyük avantajı, yalnızca tek bir arıtma adımı içermesi ve herhangi bir uzunluk ve diziriyi oluşturan RNA bağlama siteleri ile kullanılabilmesidir.

Bazı adımları gösteren Xiao-cui Yang, bizim grupta kıdemli araştırma teknisyeni olacaktır. 65 nükleotitten önemli ölçüde daha uzun olan ciltleme siteleri için, metin protokolünde belirtildiği gibi T7 oluşturulan RNA ve bir adaptör PCB oligonükleotid elde edin. Bağlayıcı tampon 100 mikrolitre içeren 1.5 mililitrelik bir tüp adaptör oligonükleotid 100 picomoles ile RNA 20 picomoles karıştırın.