Name: Ayıklama ve Tayvanlı yeşil Propolis Analizi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: Keşfedin, Tayvan yeşil propolisinin etanol ile ekstraksiyonunu ve antibakteriyel aktivite karakterizasyonunu. Bu güvenilir yöntem, doğal ürünler araştırmalarında kalite değerlendirmesi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu el yazması Wallace akademik düzenleyerek düzenlendi.

1. hazırlık bileşiklerin etanol elde
<ol><li>Arı kovanı Temmuz Mayıs Tayvan dan toplanmıştır, donmuş Tayvanlı yeşil propolis 10 g tartmak ve baharat değirmeni kullanarak eziyet. Bütün Tayvanlı yeşil propolis parçaları olmadan herhangi bir büyük parçacıklar ince bir toz zemine olduğundan emin olun.</li>
	<li>100 mL etanol (% 60, % 70, %80, % 95 ve % 99.5) ve su şişe ayırmak ve her yere propolis konsantrasyonu 10 g ile karıştırmak için çeşitli konsantrasyonları ekleyin.</li>
	<li>25 ° C'de kuluçkaya ve 48 h için 250 rpm'de şişeye sallamak.</li>
	<li>Filtre kağıdı ile 25 mikron gözenek boyutu ile etanol özleri filtre.</li>
	<li>Filtrates kendi özgün birime (100 mL) ile % 95 etanol volumetric flask kullanarak yeniden oluşturmak.</li>
	<li>Etanol özler-20 ° C'de depolayın Not: Protokol burada duraklatılmış.</li>
</ol>2. HPLC için etanol özleri hazırlanması
<ol><li>10 mL etanol özler tarafından 15 dakika 40 ° C'de vakum buharlaşma konsantre ol.</li>
	<li>Kuru madde 24 h 45 ° C'de pişirin.</li>
	<li>Kuru madde 10 mL % 95 etanol ile yeniden oluşturma.</li>
	<li>0,45 µm gözenek boyutu ile steril enjektör filtre kullanarak filtre 1 mL etanol ayıklar.</li>
	<li>Steril enjektör filtre ile bir 0,22 µm gözenek boyutu kullanarak etanol özler refilter. Filtrate toplanır ve doğrudan HPLC kullanılarak analiz edilebilir.</li>
</ol>3. Propolin HPLC kullanarak içerik analizi
<ol><li>
Propolins standart eğrileri kurulması
	<ol>
<li>88.8:11.2 (v/v) metanol: su solüsyonu mobil faz 1 L hazırlayın.</li>
		<li>Propolin seri dilutions standart (C, D, F ve G) konsantrasyonları hazırlamak (15,625 mg/mL, 31.25 mg/mL, 62,5 mg/mL ve 125 mg/mL, sırasıyla) mobil faz çözüm bir çözücü kullanarak.</li>
		<li>Propolin standart konsantrasyonları yüksek konsantrasyonu düşük konsantrasyon başlayarak sırayla ters fazlı sütuna 20 µL enjekte.</li>
		<li>30 ° C ve 1 mL/dk akış hızı, HPLC sütun ayarlayın.</li>
		<li>Dalga boyu UV dedektörü için 280 ayarla nm ve kaydedici saat 20 dk.</li>
		<li>Analiz standartları en az 3 x.</li>
		<li>Ölçüm yanıt (y ekseni) konsantrasyonu (x ekseni) karşı komplo hesaplama kullanarak levha yazılım ve denklemi ve R-kare değeri ile standart bir eğri oluşturmak.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Analizi etanol ayıklamak s
	<ol>
<li>Ters fazlı sütun içine adım 2.5 elde edilen etanol özler 20 µL enjekte.</li>
		<li>30 ° C ve 1 mL/dk akış hızı, HPLC sütun ayarlayın.</li>
		<li>Dalga boyu UV dedektörü için 280 ayarla nm ve kaydedici saat 20 dk.</li>
		<li>Analiz standartları en az 3 x.</li>
		<li>Propolin her propolin için en yüksek alan kullanan adıma 3.1.7 elde edilen standart eğri için denklemi kullanarak etanol özü konsantrasyonu hesaplayın.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. minimum inhibitör konsantrasyonu ve en az bakteri yok edici konsantrasyon Analizi
Not: Microdilution yöntemi etanol elde propolins Tayvanlı yeşil propolis üzerinden antibakteriyel etkinlik değerlendirmek için kullanılır.
<ol><li>
Test organizmalar hazırlanması
	<ol>
<li>Bakteri suşları, Staphylococcus aureus ve Escherichia coli, çözülme ve sonra onları tryptic soya suyu ve besin et suyu, sırasıyla, 24 h 37 ° C'de kültür.</li>
		<li>S. aureus tryptic soya suyu ve E. coli için iki kuşak besin suyu kullanarak kullanarak geçiş ve sonra bir agar plaka üzerinde tek tek kolonileri sayarak koloni oluşturan birimleri hesaplamak.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Etanol hazırlanması için ayıklar antibakteriyel etkinliği testi
	<ol>
<li>Adım 1.5 vakum buharlaşma 40 ° C'de 15 dakika elde edilen etanol özleri konsantre.</li>
		<li>Dimetil sülfoksit (DMSO) ile Kuru madde sulandırmak ve özü 12,8 mg/ml konsantrasyonu ayarlayın.</li>
		<li>Bir seri seyreltme yapın (konsantrasyonları: 5, 10, 20, 40, 80, 160, 320 ve 640 µg/mL) etanol özleri suyu kullanarak.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Minimum inhibitör konsantrasyon testleri
	<ol>
<li>10 µL seyreltilmiş etanol özler 0.156 640.0 µg/mL arasında değişen bir 96-şey tabak ekleyin.</li>
		<li>Suyu kullanarak, 100 µL için ses seviyesini ve tüm dilutions % 5 DMSO korumak.</li>
		<li>Bakteri kültürü (1 x 106/mL) 100 µL 96-şey plaka aşılamak.</li>
		<li>48 h 37 ° C'de etanol çeşitli konsantrasyonları içeren kültür inoculum ayıklar.</li>
		<li>Bakteriyel büyüme bulanıklık ve optik yoğunluk (Mikroplaka Okuyucu) 590 kullanarak göre analiz nm minimum inhibitör konsantrasyonu (MIC) belirlemek için.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
En az bakteri konsantrasyonu Testleri
	<ol>
<li>Hiçbir büyüme bir agar plaka üzerine sergilenen mikrofon testi her kuyudan sıvı kültürünün 10 µL aşılamak.</li>
		<li>24 h 37 ° C'de kuluçkaya.</li>
		<li>Bakterisidal etkinlik görünür hiçbir bakteriyel büyüme ortaya en düşük konsantrasyon tanımlayarak belirlemek. Hücre büyümesini tamamen ortadan kaldırır konsantrasyonu minimum bakteri konsantrasyonu (MBC) olarak kabul edilir.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Zabaiou, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+properties+of+propolis+extracts%3A+Something+new+from+an+ancient+product%5BTitle%5D)+AND+%22Chemistry+and+Physics+of+Lipids%22%5BJournal%5D)">Biological properties of propolis extracts: Something new from an ancient product.</a> Chemistry and Physics of Lipids. 207 (Pt B), 214-222 (2017).</li>
<li>Bankova, V. B., De Castro, S. L., Marcucci, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propolis%3A+Recent+advances+in+chemistry+and+plant+origin%5BTitle%5D)+AND+%22Apidologie%22%5BJournal%5D)">Propolis: Recent advances in chemistry and plant origin.</a> Apidologie. 31 (1), 3-15 (2000).</li>
<li>Park, Y. K., Alencar, S. M., Aguiar, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Botanical+origin+and+chemical+composition+of+Brazilian+propolis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Agricultural+and+Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Botanical origin and chemical composition of Brazilian propolis.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 50 (9), 2502-2506 (2002).</li>
<li>Chen, C. N., Wu, C. L., Shy, H. S., Lin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytotoxic+prenylflavanones+from+Taiwanese+propolis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Natural+Products%22%5BJournal%5D)">Cytotoxic prenylflavanones from Taiwanese propolis.</a> Journal of Natural Products. 66 (4), 503-506 (2003).</li>
<li>Chen, C. N., Weng, M. S., Wu, C. L., Lin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+radical+scavenging+activity%2C+cytotoxic+effects+and+apoptosis+induction+in+human+melanoma+cells+by+Taiwanese+propolis+from+different+sources%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative%22%5BJournal%5D)">Comparison of radical scavenging activity, cytotoxic effects and apoptosis induction in human melanoma cells by Taiwanese propolis from different sources.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative. 1 (2), 175-185 (2004).</li>
<li>Chen, C. N., Wu, C. L., Lin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis+of+human+melanoma+cells+induced+by+the+novel+compounds+propolin+A+and+propolin+B+from+Taiwanese+propolis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Letters%22%5BJournal%5D)">Apoptosis of human melanoma cells induced by the novel compounds propolin A and propolin B from Taiwanese propolis.</a> Cancer Letters. 24 (1-2), 218-231 (2007).</li>
<li>Huang, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propolin+G%2C+a+prenylflavanone%2C+isolated+from+Taiwanese+propolis%2C+induces+caspase-dependent+apoptosis+in+brain+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Agricultural+and+Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Propolin G, a prenylflavanone, isolated from Taiwanese propolis, induces caspase-dependent apoptosis in brain cancer cells.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 55 (18), 7366-7376 (2007).</li>
<li>Chen, Y. W., Ye, S. R., Ting, C., Yu, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibacterial+activity+of+propolins+from+Taiwanese+green+propolis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Food+and+Drug+Analysis%22%5BJournal%5D)">Antibacterial activity of propolins from Taiwanese green propolis.</a> Journal of Food and Drug Analysis. 26 (2), 761-768 (2018).</li>
<li>Hegazi, A. G., Abd El Hady, F. K., Abd Allah, F. A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+composition+and+antimicrobial+activity+of+European+propolis%5BTitle%5D)+AND+%22Zeitschrift+f%C3%BCr+Naturforschung%22%5BJournal%5D)">Chemical composition and antimicrobial activity of European propolis.</a> Zeitschrift für Naturforschung. 55 (1-2), 70-75 (2000).</li>
<li>Sforcin, J. M., Fernandes, A., Lopes, C. A. M., Bankova, V., Funari, S. R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seasonal+effect+on+Brazilian+propolis+antibacterial+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Seasonal effect on Brazilian propolis antibacterial activity.</a> Journal of Ethnopharmacology. 73 (1-2), 243-249 (2000).</li>
<li>Chen, Y. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Taiwanese+propolis+collected+from+different+locations+and+seasons%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Science+of+Food+and+Agriculture%22%5BJournal%5D)">Characterization of Taiwanese propolis collected from different locations and seasons.</a> Journal of the Science of Food and Agriculture. 88 (3), 412-419 (2008).</li>
<li>Grange, J. M., Davey, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibacterial+properties+of+propolis+%28bee+glue%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Royal+Society+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Antibacterial properties of propolis (bee glue).</a> Journal of the Royal Society of Medicine. 83 (3), 159-160 (1990).</li>
<li>Kujumgiev, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibacterial%2C+antifungal+and+antiviral+activity+of+propolis+from+different+geographic+origins%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Antibacterial, antifungal and antiviral activity of propolis from different geographic origins.</a> Journal of Ethnopharmacology. 64 (3), 235-240 (1999).</li>
<li>Krol, W., Scheller, S., Shani, J., Pietsz, G., Czuba, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+effect+of+ethanol+extract+of+propolis+and+antibiotics+in+the+growth+of+Staphylococcus+aureus%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Research%22%5BJournal%5D)">Synergistic effect of ethanol extract of propolis and antibiotics in the growth of Staphylococcus aureus.</a> Drug Research. 43 (5), 607-609 (1993).</li>
<li>Lu, L. C., Chen, Y. W., Chou, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibacterial+and+DPPH+free+radical-scavenging+activities+of+the+ethanol+extract+of+propolis+collected+in+Taiwan%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Food+and+Drug+Analysis%22%5BJournal%5D)">Antibacterial and DPPH free radical-scavenging activities of the ethanol extract of propolis collected in Taiwan.</a> Journal of Food and Drug Analysis. 11 (4), 277-282 (2003).</li>
<li>Tosi, B., Donini, A., Romagnoli, C., Bruni, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+activity+of+some+commercial+extracts+of+propolis+prepared+with+different+solvents%5BTitle%5D)+AND+%22Phytotherapy+Research%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial activity of some commercial extracts of propolis prepared with different solvents.</a> Phytotherapy Research. 10 (4), 335-336 (1996).</li>
<li>Cunha, I. B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+that+influence+the+yield+and+composition+of+Brazilian+propolis+extracts%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Brazilian+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Factors that influence the yield and composition of Brazilian propolis extracts.</a> Journal of the Brazilian Chemical Society. 15 (6), 964-970 (2004).</li>
<li>Woo, S. O., Hong, I. P., Han, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extraction+properties+of+propolis+with+ethanol+concentration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Apicultural+Research%22%5BJournal%5D)">Extraction properties of propolis with ethanol concentration.</a> Journal of Apicultural Research. 30 (3), 211-216 (2015).</li>
<li>Park, Y. K., Ikegaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+water+and+ethanolic+extracts+of+propolis+and+evaluation+of+the+preparations%5BTitle%5D)+AND+%22Bioscience%2C+Biotechnology%2C+and+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Preparation of water and ethanolic extracts of propolis and evaluation of the preparations.</a> Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 62 (11), 2230-2232 (1998).</li>
<li>Ramanauskienė, K., Inkėnienė, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propolis+oil+extract%3A+quality+analysis+and+evaluation+of+its+antimicrobial+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Natural+Product+Research%22%5BJournal%5D)">Propolis oil extract: quality analysis and evaluation of its antimicrobial activity.</a> Natural Product Research. 25 (15), 1463-1468 (2011).</li>
<li>Machado, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+composition+and+biological+activity+of+extracts+obtained+by+supercritical+extraction+and+ethanolic+extraction+of+brown%2C+green+and+red+propolis+derived+from+different+geographic+regions+in+brazil%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Chemical composition and biological activity of extracts obtained by supercritical extraction and ethanolic extraction of brown, green and red propolis derived from different geographic regions in brazil.</a> PLoS One. 11 (1), e0145954(2016).</li>
<li>Monroy, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brazilian+green+propolis+extracts+obtained+by+conventional+processes+and+by+processes+at+high+pressure+with+supercritical+carbon+dioxide%2C+ethanol+and+water%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Supercritical+Fluids%22%5BJournal%5D)">Brazilian green propolis extracts obtained by conventional processes and by processes at high pressure with supercritical carbon dioxide, ethanol and water.</a> The Journal of Supercritical Fluids. 130, 189-197 (2017).</li>
<li>Popova, M., Chen, C. N., Chen, P. Y., Huang, C. Y., Bankova, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+validated+spectrophotometric+method+for+quantification+of+prenylated+flavanones+in+pacific+propolis+from+Taiwan%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemical+Analysis%22%5BJournal%5D)">A validated spectrophotometric method for quantification of prenylated flavanones in pacific propolis from Taiwan.</a> Phytochemical Analysis. 21 (2), 186-191 (2010).</li>
<li>Chen, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taiwanese+green+propolis+ethanol+extract+delays+the+progression+of+type+2+diabetes+mellitus+in+rats+treated+with+streptozotocin%2Fhigh-fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Taiwanese green propolis ethanol extract delays the progression of type 2 diabetes mellitus in rats treated with streptozotocin/high-fat diet.</a> Nutrients. 10 (4), e503(2018).</li>
</ol>

Yazarlar bildirmek için bir şey yok.

Bir çalışmada maserasyon, etanol, çeşitli konsantrasyonları kullanarak Brezilyalı propolis ayıklama17için kullanılabilir rapor; Ancak, süreç zaman alan17oldu. Fenol içeriği gibi biyoaktif bileşikler Brezilyalı propolis17ayıklamak için en az 10 gün sürdü. Alternatif olarak, etanol ayıklama 37 ° C, 50 ° C veya 70 ° C 30 dk için Isıtma ile birlikte Brezilya propolis19,21,<sup class="x...

Propolis, arı türleri Apis melliferatarafından üretilen doğal bir reçine karışımdır. Propolis yaygın halk ilaçları içinde eski çağlardan beri kullanılmaktadır. Bir çalışmada son zamanlarda o propolis mikrobiyal enfeksiyonlar ve iltihap1önlemek için yararlı olduğunu bildirdi. Çok sayıda çalışma propolis ana biyoaktif bileşikler flavonoidler, fenolik asit esterleri, prenylated polduğunu göstermiştir-kumarik asit ve diterpenic asit2,3. Bugüne kadar yüksek performanslı sıvı kromatografi (HPLC)4,5,6,7ile 10 prenylated flavanone türevleri Tayvanlı yeşil propolis üzerinden tespit edilmiştir. Bunlar arasında en bol propolins C, D, F ve G5,7vardır. Tayvanlı yeşil propolis önemli biyolojik etkileri propolins8yüksek içeriği ile ilişkili.
Konsantrasyonlarda propolis biyoaktif bileşiklerin büyük sezon ve propolis alındığı coğrafi konuma bağlı olarak çeşitlilik gösterir. Avrupa propolis esas olarak flavonoid aglycone ve fenolik asitleri9içerir. Propolis Brezilya büyük biyoaktif bileşikler vardır prenylated p-kumarik asit, artepillin C10gibi. Bir çalışma sezonun Tayvanlı yeşil propolis11toplam propolin içeriğinde belirlenmesi için kritik bir faktör olduğunu gösterdi. Tayvanlı yeşil propolis propolin içeriğinde yaz (Mayıs - Temmuz) ve en düşük kış11' en yüksek. Propolis antibakteriyel özelliği yaygın olarak biyolojik aktivitesi bir göstergesi olarak kabul edilmiştir. Genel olarak, çeşitli bölgelerden toplanan propolis örnekleri benzer bir antibakteriyel özelliği sergiledik; Örneğin, genel olarak hemen hemen tüm gram pozitif bakterilere karşı etkilidir ve gram-negatif bakteri10,12,13karşı sınırlı bir antibakteriyel etkisi sergiler. Propolis flavonoidler arasındaki sinerjik etkileşim bir antibakteriyel etkisi14için gösterdi. Benzer şekilde, Tayvanlı yeşil propolis gram-pozitif bakteri15karşı antimikrobiyal etkisi olduğu bildirildi. Ayrıca, bir çalışma da propolins Tayvanlı yeşil propolis8etkileşimlerin bir antimikrobiyal etkisi tespit edilmiştir.
Propolis biyoaktif bileşikler karakterizasyonu zor çünkü onun kimyasal bileşimi özgün kaynak göre değişebilir. Bu nedenle, Tayvanlı yeşil propolis kalitesini belirlemek için mümkün ve yinelenebilir bir yöntem kurmak gereklidir. Ancak, standart bir prosedür Tayvanlı yeşil propolis çıkarma ve sonraki fonksiyonel analiz için kurulmuştur. Çeşitli organik ve inorganik maddeleri uygulamak birkaç yöntem için propolis ayıklama16,17,18,19,20önerilmiştir. Propolis lipofilik bir karışımı olduğu için çalışmalar organik ayıklama inorganik ayıklama8,18,19iyi olduğunu gösterdi. Tayvanlı yeşil propolis ve antibakteriyel özellikleri toplam propolin konsantrasyon Tayvanlı yeşil propolis kalitesini anahtar göstergeleri. Böylece, bu çalışmada etanol elde etmek ve Tayvanlı yeşil propolis antibakteriyel özellikleri karakterize bir çözücü kullanmak için bir protokol sunmaktır.

<table><tbody><tr><td>etanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E7023</td><td></td></tr><tr><td>Whatman no. 4 filtre kağıdı</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>WHA1004125</td><td></td></tr><tr><td>metanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>34860</td><td></td></tr><tr><td>ters faz RP-18 sütunu</td><td>Phenomenex Inc.</td><td>00G-0234-E0</td><td></td></tr><tr><td>Staphylococcus aureus</td><td>ATCC</td><td>BCRC 10780</td><td></td></tr><tr><td>Escherichia coli</td><td>ATCC</td><td>BCRC 10675</td><td></td></tr><tr><td>triptik soya suyu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>22092</td><td></td></tr><tr><td>besin suyu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>70122</td><td></td></tr><tr><td>dimetil sülfoksit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>baharat öğütücü</td><td>Waring</td><td>WSG60K</td><td></td></tr><tr><td>mikroplaka Okuyucu</td><td>Moleküler Cihazlar</td><td>EMAX PLUS</td><td></td></tr><tr><td>HPLC sistemi</td><td>Agilent</td><td>1200 Serisi</td><td></td></tr><tr><td>vakumlu buharlaştırma</td><td>B&Uuml; CHI</td><td>Rotavapor R-215</td><td></td></tr></tbody></table>

ayıklama ve tayvanlı yeşil propolis analizi

Extraction and Analysis of Taiwanese Green Propolis

Tayvanlı yeşil propolis prenylated Flavonoidler zengin ve geniş bir antioksidan, antibakteriyel, gibi biyolojik etkinlikler ve antikanser olanlar sergiler. Propolins, yani C, D, F ve g Tayvanlı yeşil propolis, biyoaktif bileşiklerdir Tayvanlı yeşil propolis propolins konsantrasyonu sezon ve coğrafi konuma bağlı olarak değişir. Böylece, Tayvanlı yeşil propolis kalitesini belirlemek için bir standart ve tekrarlanabilir yordamı oluşturmak için önemlidir. Burada, etanol bazlı çıkarma, yüksek performanslı sıvı kromatografi ve antibakteriyel etkinliği analiz Tayvanlı yeşil propolis kalite karakterize etmek için kullanan bir iletişim kuralı mevcut. Bu yöntem % 95 ve % 99.5 etanol çekimi Tayvanlı yeşil propolis, böylece antibakteriyel özelliklere sahip propolins yüksek konsantrasyonları verimli üzerinden en fazla kuru madde verimi elde gösterir. Bu bulgularına göre mevcut Protokolü güvenilir ve Tayvanlı yeşil propolis kalitesini belirlemek için yinelenebilir sayılır.

Etanol çıkarılması için olumlu temsilcisi veri Tablo 1<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58743/58743fig1.jpg"> <...

Biz etanol elde etmek ve antibakteriyel etkinliği sergileyen Tayvanlı yeşil propolis karakterize bir çözücü kullanmak için bir iletişim kuralı mevcut.

Ayıklama ve Tayvanlı yeşil Propolis Analizi

Taiwanese green propolis is rich in prenylated flavonoids and exhibits a broad range of biological activities, such as antioxidant, antibacterial, and ...

Burada, antibakteriyel aktiviteyi inhibe Tayvanlı yeşil propolis ayıklamak ve karakterize etmek için bir çözücü olarak etanol kullanarak için protokol sıyoruz. Bu protokol Tayvanlı yeşil propolisin kalitesini belirlemek için güvenilir ve tekrarlanabilir bir yöntemdir. Gösteri prosedürü Chun'Ting Chen ve Yi'Hsuan Chien, benim laboratuvar doktora öğrencileri olacaktır.Başlamak için, Tayvan yeşil propolis 100 gram tartmak. Bir baharat öğütücü kullanarak, parçaları herhangi bir büyük parçacıklar olmadan ince bir toz içine öğütülür emin olmak için propolis eziyet. Beş şişe leri ayarlayın ve her biri için suda etanol çeşitli konsantrasyonlarda 100 mililitre ekleyin.Her şişedeki etanol çözeltisine 10 gram öğütülmüş propolis karıştırın ve 25 santigrat derecede 48 saat boyunca 250 RPM'de sallayarak kuluçkaya yatırın. Bundan sonra, etanol özlerini filtrelemek için 25 mikrometre gözenek boyutuna sahip filtre kağıdı kullanın. Hacimsel bir şişe kullanarak, filtratları %95 etanol ile 100 mililitrelik orijinal hacmine göre yeniden oluşturur.Yeniden oluşturulmuş özleri kullanıma hazır olana kadar eksi 20 derecede saklayın. HPLC için özleri hazırlamak için hazır olduğunuzda, 10 dakika boyunca 40 santigrat derece her ekstre 10 mililitre konsantre vakum buharlaşma kullanın. Kuru maddeyi 45 derecede 24 saat pişirin.Daha sonra, kuru madde her örnek 10 mililitre ile yeniden oluşturmak 95% etanol. 0,22 mikrometre gözenek boyutuna sahip bir şırınga filtresi kullanarak, her özü yeniden filtreleyin ve HPLC ile doğrudan analiz için filtrat toplayın. Standart bir eğri oluşturmaya başlamak için, 88,8 ila 11,2 oranında su çözeltisi için mobil faz metanol bir litre hazırlamak.Mobil faz çözeltisini çözücü olarak kullanarak, metin protokolünde belirtildiği gibi propolin standart konsantrasyonlarının seri seyreltmelerini hazırlayın. Her standart konsantrasyondan 20 mikrolitreyi en düşük konsantrasyondan en yükseğe sırayla ters faz sütunlarına enjekte edin. Daha sonra, HPLC sütununa 30 santigrat derece ayarlayın, UV dedektörünün feragat uzunluğunu 280 nanometreye, akış hızını dakikada bir mililitreye, kayıt süresini ise 20 dakikaya ayarlayın.Standartları en az üç kez analiz edin. Bundan sonra, ölçüm yanıtını konsantrasyona takmak için hesaplama sayfası yazılımını kullanın ve bu da belirlenen bir denklem ve R kare değerine sahip standart bir eğriyle sonuçlanır. Özleri analiz etmeye başlamak için, ters faz sütununa her ekstrenin 20 mikrolitresini enjekte edin.HPLC sütunu 30 santigrat derecelik bir sıcaklığa ve dakikada bir mililitre akış hızına ayarlayın. UV dedektörünün feragat süresini 280 nanometreye, kaydedici süresini ise 20 dakikaya ayarlayın. Özleri en az üç kez analiz edin.Daha sonra, her etanol ekstresinde propolin konsantrasyonu belirlemek için standart eğriyi kullanın. Test organizmaları ve etanol ekstreleri hazırlandıktan sonra, 96 kuyu plaka kuyularına mililitre başına 0,156 ila 640 mikrogram arasında değişen seyreltilmiş etanol ekstresi 10 mikrolitre ekleyin. Her kuyudaki hacmi 100 mikrolitreye ayarlamak için et suyu kullanın ve tüm seyreltmelerde %5 DMSO'yu koruduğundan emin olun.Daha sonra, 96 kuyu plakasının her kuyunun içine 100 mikrolitre bakteri kültürü aşılamak. Kültür 48 saat boyunca 37 derecede. Bulanıklığa göre bakteri büyümesini analiz etmek ve minimum inhibitör konsantrasyonu belirlemek için 590 nanometre bir mikroplaka okuyucu kullanın.Bundan sonra, bir agar plaka üzerine büyüme sergilenen her kuyudan sıvı kültür 10 mikrolitre aşılamak. 24 saat boyunca 37 derecede kuluçkaya yat. Bakteriyel aktiviteyi belirlemek için görünür bakteriyel büyüme ortaya en düşük konsantrasyonu belirleyin.Hücre büyümesini tamamen ortadan kaldıran konsantrasyon minimum bakteri konsantrasyonu olarak kabul edilir. Bu çalışmada, Tayvanlı yeşil propolis etanol ile ayıklanır. Kuru madde verimi yüksek konsantrasyonda etanol kullanıldığında en yüksek, su kullanıldığında ise en düşük gibi görünün.Bu sonuçlar, organik bir çözücünün bu ekstraksiyon sırasında en iyi performansı gösterdiğini ve verimin etanol konsantrasyonu ile olumlu ilişkili olduğunu göstermektedir. Aynı şekilde, propolin konsantrasyonu olumlu ekstraksiyon sırasında etanol konsantrasyonu ile ilişkili gibi görünüyordu, propolinlerin en yüksek verim ile elde edilen 95%ve 99.5%etanol özleri. Daha sonra Etanol ekstrelerinin S aureus ve E coli'ye karşı antibakteriyel etkileri araştırılır.S aureus için ortalama minimum inhibitör konsantrasyonu mililitre başına 10 ila 20 mikrogram arasında, ortalama bakteri konsantrasyonu ise mililitrede 20 mikrogram olarak görünmaktadır. Su ekstreleri, ancak, S aureus karşı herhangi bir antibakteriyel etkisi yoktu. Su veya etanol özleri kullanırken E coli için antibakteriyel etki gözlenmez.Önemli deneysel prosedürbiri taşlama sırasında Tayvanlı yeşil propolis tekdüzelik kaçınarak olduğunu.

extraction-and-analysis-of-taiwanese-green-propolis

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biyokimya

Bitki biyokütle yakıt, yem, gıda ve malzemelerin çeşitli dahil olmak üzere birden fazla ürün için bir yenilenebilir kaynak sunuyor. Bu yazıda tütün ağacı (Nicotiana glauca) ve bir Biorefinery boru hattı için kavak olarak uygun kaynaklarının özelliklerini incelemek.

Bio-tabanlı Sanayi Feedstock olarak Tütün Ağacı ve Kavak Değerlendirme transkript ve metabolit profil

Bumble arı kovanlarını içinde mikrobiyal konsorsiyumlar zenginleştirmek ve polen arı larvaları için korumak. Laboratuvar ve deneyler, alan bazlı ile birlikte sonraki nesil sıralama kullanarak bu el yazması mantar ilacı artıkları polen microbiome ve koloni demografi, sonuçta koloni için önde gelen alter varsayımını sınamak için kullanılan iletişim kurallarını açıklar kaybı.

Ampirik, Metagenomic ve bilgisayar teknikleri mekanizma hangi mantar ilaçları uzlaşma arı sağlık ile aydınlatmak

Geçici Contegra ifade Nicotiana benthamiana yaprakları biyosentetik enzimlerin 2,3-oxidosqualene yeni yüksek değerli triterpen ürünleri doğru endojen malzemeleri yönlendirebilirsiniz. Burada olduğunu hızlı (5 gün) hazırlık-ölçekli üretim triterpeneler ve bu güçlü bitki tabanlı platformu kullanan analogları için detaylı bir protokol açıklanan.

Partiye Hazırlık bir ölçekte triterpen üretim için geçici Nicotiana Benthamiana ifadede bırakır

Burada, biz doğal ürünler Kimya Laboratuvarı lisans tanıtmak bir değiştirilmemiş ev espresso makinesi kullanan bir basınçlı sıcak su ayıklama (PHWE) yöntemini kullanır. İki deney sunulmaktadır: PHWE eugenol ve karanfil ve PHWE seselin ve (+) acetyleugenol-epoxysuberosin--dan Avustralya bitki Correa reflexa.

Basınçlı sıcak su ayıklama (PHWE) doğal ürünler Kimya Lisans Laboratuvarı keşfetmek için istihdam

Bu protokol, çay bahçelerindeki PA üreten yabani otlardan alınan çay örneklerinde pirolizidin alkaloidlerinin (PA'lar) kontaminasyonunu açıklamaktadır.

Çay Numunelerinde Pirrolizidin Alkaloid Kontaminasyonunun Kaynağı ve Yolu

Mevcut protokol, bitki bazlı tıbbi materyallerin ve tıbbi bitki Angelica sinensis'in (Oliv.) Diels bir örnek olarak tanımlandı.

Tıbbi Bitkileri Tanımlamak için DNA Barkodlama Uygulaması

Bu çalışma, sıcak su ekstraksiyonu yoluyla elde edilen ve fenol-sülfürik asit kolorimetrisi ile miktar tayini edilen Hippophae rhamnoides subsp. sinensis Rousi ve Hippophae gyantsensis (Rousi) Y. S. Lian'ın polisakkarit içeriklerini karşılaştırdı. Ayrıca, bu iki su aygırı türünden polisakkaritlerin in vitro antioksidan aktivitelerini 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil serbest radikal süpürücü deneylerle araştırdık.

Hippophae rhamnoides subsp. sinensis ve Hippophae gyantsensis 'in Polisakkarit İçerikleri ve Antioksidan Aktiviteleri Üzerine Karşılaştırmalı Çalışma

Bu el yazması, mutasyonlar termo için ekran insan serotonin taşıyıcı arındırmak, yüksek afiniteli antikorların üretilmesi ve antidepresan ilaç S -citalopramın bağlı serotonin taşıyıcı-antikor kompleksi kristalize açıklamaktadır. Bu protokol için diğer zor membran ileticileri, reseptör ve kanal çalışması için adapte edilebilir.

Termo, İfade, saflaştırılması, ve İnsan serotonin Transporter Kristalizasyon Bound<em&gt; S</em&gt; -citalopram

Bir örnek kullanarak biyolojik dokulardan lipidlerin, metabolitlerin ve proteinlerin kapsamlı şekilde ekstraksiyonu için bir protokol sunulmuştur.

Tek Bir Numuneden Metabolitlerin, Lipidlerin ve Proteinlerin Kapsamlı Analizi için Basit Fraksiyonlu Ekstraksiyon Metodu

Bu iletişim kuralı çıkarma ve miktar hücre süspansiyonlar C. arabica L., kafein için verimli bir metodoloji ve kafein synthase enzimatik aktivite ile ifade düzeyini değerlendirmek için deneysel bir işlem açıklar Bu enzimi kodlayan gen.

Kafein ayıklama, enzimatik aktivite ve kafein Synthase bitki hücre kullanılamaz hale gelen gen ifadesi

Keşfedin, Tayvan yeşil propolisinin etanol ile ekstraksiyonunu ve antibakteriyel aktivite karakterizasyonunu. Bu güvenilir yöntem, doğal ürünler araştırmalarında kalite değerlendirmesi sağlar.

Ayıklama ve Tayvanlı yeşil Propolis Analizi

Daha fazla video keşfet